中蒙药制剂指纹图谱的研究进展
中药指纹图谱按的研究进展
中药材指纹图谱的研究进展袁琴琴菏泽学院生命科学系,山东菏泽274000摘要:讨论了中药材指纹图谱的研究现状、概念、特点、建立和评价方法,为指纹图谱技术在中药材上的应用提供了一定参考。
Abstract:The research discuss the fingerprint of chinese medicinal materials of status,concept ,characteristics and establishment andevaluation method. It supplying references for the application of fingerprint technology in chinese medicinal.关键词:指纹图谱建立方法研究进展Key words : Fingerprint Establish method Research progress我国现有中药材品种众多,资源丰富,为了更好的控制中药材质量,确保用药安全,进一步实现中药的现代化和国际化,如何找到一个既符合中医临床传统用药习惯,又能很好的保证中药材内在特性,进而提高现行中药质量标准的技术含量,一直是人们研究的热点[1]。
随着现代分析测试技术的发展,质量控制方法已经从传统的手摸、眼观等感官检查发展到理化鉴别、显微鉴定、光谱和色谱等技术进行中药材质量控制[2-3]。
目前,中药指纹图谱技术作为中药材质量控制的方法已成为一种国际共识,在中成药生产、检验和研究过程中发挥着越来越重要的作用[4]。
1.中药指纹图谱的概念及特点1.1中药指纹图谱的概念中药指纹图谱是指某种中药材或者中成药经过适当的处理后,运用现代分析技术为手段对其化学成分的信息进行表征并加以描述,进而得到能够标志该中药材或者中成药特征的色谱图或者光谱图,是一种综合的、可量化的化学鉴定手段。
中药指纹图谱可以鉴别某种药材真伪或者产地的“共性”,并且可以评价这种药材或者中药材半成品的质量的稳定性、真实性以及优良性,它强调的是同一中药材的相似性,而不强调个体的唯一性[5-6]。
蒙药色谱指纹图谱研究进展
『 5 1 赵德 永. 4种 川贝母 的 总皂苷 、 总生物碱 及 西贝素的含量测 种新皂 苷九节 龙皂苷 I、 九节龙皂苷 Ⅱ进行含量测定 , 结果表 定f J 1 . 中国中药杂志 , 1 9 9 4 , 1 9 ( 2 ) : 7 1 — 7 2 . 明, 8月份含量最高 。陈滴㈣等采用薄层扫描法测定大豆皂苷 【 6 ] 严 华, 粟晓黎 , 马双成 , 等. 重量法测定桔梗 中总皂苷含 量的 I 的含量 , 结果表 明, 豆粕和残渣 中分别含大豆皂苷 1 0 . 2 5 4 % 不确定度评 定【 J 】 . 中国药事, 2 0 0 6 , 2 0 ( 9 ) : 5 4 6 — 5 4 8 . 和0 . 1 3 4 %, 平均 回收率分别 为 9 7 . 8 1 %和 9 7 . 1 0 %, 变异系数 分 『 7 降 林洲, 余伯阳. 比色法测定短葶山麦冬药材中总皂苷含量 别为 0 . 8 %和 1 . 5 0 %, 此方法适用 于大豆皂苷产品的质量控制 。 [ J 】 . 海峡 药学, 2 0 0 5 , 1 7 ( 3 ) : 4 4 — 4 7 . 2 . 5 气 相色谱 法 : 都 述虎I 等建立 了毛细 管气 相色谱法测 定穿 f 8 】 兰霞 , 王洪新. 比色法测 定甘 草中总皂苷的含量【 J ] . 时珍 国医 2 0 0 7 , 1 8 ( 4 ) : 8 8 6 ~ 8 8 7 . 龙 薯 蓣总 皂 苷 中薯 蓣皂 苷元 的含 量 ,薯 蓣皂 苷 元 在 3 5 2 ~ 国药, 1 7 5 8 n g范围内峰面积与其浓度线性关 系 良好 ( r = 0 . 9 9 9 6 ) , 样 品 【 9 ] 唐 军. 比色法测定黄 芪中黄芪总皂苷含 量[ J J . 安徽 中 医学院 2 0 0 4 , 2 3 ( 5 ) : 3 7 — 3 8 . 平均 回收率 为 9 5 . 6 5 %, 精密度 R S D为 1 . 0 %( n = 5 ) , 该法 能将 学报 , 薯蓣皂苷元及其 主要杂质进行分离 , 测定样品无需衍生化 , 分 [ 1 0 ] 解红 霞, 薛培凤 , 张宏桂, 等. 可见分光光度法测定玉簪花 中总 离效果好 , 分 析 陕速准确 。 皂苷的含量l J 1 . 北京中医药大学学报 , 2 0 0 9 , 3 2 ( 9 ) : 6 2 4 - - 6 2 5 , 6 4 5 . 2 . 6高效 液相色谱法 : 高效 液相色谱法具 有高压 、 高速 、 高效 、 『 1 1 1 3干明, 吴子超. 七叶神安 片中三七叶总皂苷含量 测定方法 高灵敏度 、 应用范 围广等特点 。 该 法可作为蓝玉簪颗粒中三七 比较 【 J ] . 中国药业药品检 测, 2 0 0 1 , 1 0 ( 8 ) : 1 6 . 皂苷 R 、人参苷 R g 、 R b 的含量测定方法 。色谱柱 为 A g i l e n t [ 1 2 】 王凤 飞, 吴二喜. 薄层 扫描 法测定保元肠 疡胶 囊 中人参 皂苷 C , ( 2 5 0 mmx 4 1 6 m m, 5 u m) , 以乙腈一 水 为流动相 , 梯度洗 脱 ; 检 R g l的含量l J 1 . 生命科 学研究 , 1 9 9 8 , 2 ( 9 ) : 1 7 7 — 1 8 1 . 测波长为 2 0 3 i r m; 流速为 1 . 0 m l ・ mi n ; 柱温为 3 5 ℃。本法 分离 [ 1 3 ] 王丽华 , 张清华 , 祝 小 园. 薄层 扫描 法测定川产九 节龙 中皂 效率高 , 专属性好 , 灵敏度高 , 是 目前最 为常用 的一种方法 l 】 6 1 。 苷的含量[ J ] . 中国药学杂志 , 1 9 9 6 , 3 1 ( 1 1 ) : 6 7 6 — 6 7 8 . 李惠 芬l ¨ I 等采用高效液相色谱法 测定重楼 中薯蓣皂苷元 的含 『 l 4 1 陈滴, 刘银 燕, 任葳蕤. 薄层扫描 法测定豆粕 中大豆皂苷 I 白求恩 医科大学学报 , 2 0 0 1 , 2 7 ( 2 ) : 1 4 0 — 1 4 1 . 量, 线性 范 围为 1 . 2 - 7 . 2  ̄ g ( r = 0 . 9 9 9 8 ) , 平均 回收率为 1 0 2 . 2 %, 的含量Ⅲ, R S D = 3 . 3 9 %( n = 6 ) 。此法可用于重楼 中薯蓣皂苷元的质量控制 。 【 1 5 ] 都述虎 , 王晓华 , 夏 重道 , 等. 穿龙薯蓣 总皂苷 中薯蓣皂苷元 2 . 7超高压液相法 : 采用超高压液相 的测定方法对人 参 中皂苷 含量 的毛 细管 气相 色谱 法研 究l J 1 . 药物分析 杂志 , 2 0 0 1 , 2 1 ( 2 ) : 6 — 1 1 9 . 的含量进行分析可 以缩短测定 时间,提高测定 效率 ,结果准 11 确、 可靠 , 同时也节 约了试剂 , 减少 了对环境 的污染 , 使人参皂 【 1 6 】 李旭 波 , 铁茹, 刘水冰 , 等. HP L C法测定蓝玉簪颗粒 中5 - - - l z 苷测定方法的经济效益 和社会效益得到了显 著提高 8 1 。 皂苷 R 】 、 人 参 皂苷 R 勘、 R b 的含 量[ J ] . 中国药师 , 2 0 0 9 , 1 2 ( 8 ) : 3结 果 与讨 论 1 0 58 —1 06 0. 通过分析 比较上述几类测定方法 ,高效 液相色谱法是准 【 1 7 ] 李 惠芬 , 平渊, 陈刚, 等. 高效液相 色谱 法和 薄层 色谱 法测定 确 度最为可靠 的分析方法 , 但 仪器 、 耗材 比较 昂贵 , 分离效率 重楼 中薯蓣皂苷元的含 量叭 中草药 , 2 0 0 3 , 3 4 ( 2 ) : 1 2 7 — 1 2 9 . 1 8 】 李净, 祁星星, 吕洁 , 等. 超 高压液相测定技 术在人 参皂苷含 低, 不 易在工业 中推广 ; 紫外分光 光度法准确 度 比较高 , 但测 [ 定误 差较大『 l 9 】 ; 溴 量法精确度 比较高且无 需昂贵仪器 , 但是稳 量测定 中的应 用『 J 1 . 河南科技 , 2 0 1 2 , 4 : 7 9 . 定性 略差 。各种方法各有优缺点 , 故现在采用多种方法联合使 [ 1 9 1  ̄ 4 、 耀 军, 邹建. 皂苷 不同测定方法的比较f J 1 . 食品科技 , 2 0 1 0 : 0 -33. 用更 受欢 迎 , 例如 , 在测 定人参皂苷时 , 高效液相色谱一 蒸发光 3 散射 ( H P L C — E L S D) 法, 高效 液相色谱 一 串联质谱 联用 法等g o ] 。 [ 2 0 ] 王伟. 人参皂苷 R e 含量 测定方法的研 究进展f J 】 . 中国药业 , 0 1 0 , 1 9 ( 1 6 ) : 8 7 — 8 9 . 随着科技的不断发展 , 将有更 多科学 、 方便 的方法应用 于皂苷 2 通 讯 作 者 含量测 定的领域 , 使得 我们可 以更加 准确 、 快速 、 方便地 测得
最新中药指纹图谱的研究进展
中药指纹图谱的研究进展药物分析学选论期末综述中药指纹图谱的研究进展姓名:学号:班级:中药指纹图谱的研究进展摘要:中药指纹图谱的质量控制是中药现代化的突破口和中药基础研究领域的热点,目前建立的方法主要有:①光谱法:紫外光谱法、红外光谱法、荧光光谱法等;②色谱法:薄层色谱法、液相色谱法、气相色谱法、毛细管电泳法等;③其他方法:x射线衍射法、核磁共振法、电化学法等。
关键词:中药指纹图谱、光谱法、色谱法Advances in the means research on fingerprint ofTraditional Chinese MedicineAbstract: Fingerprint of traditional Chinese medicine is a breakthrough in modern medicine and a hot area of basic research in traditional Chinese medicine field. the current established method: ①Spectroscopy: UV、IR、fluorescencespectrometry; ②Chromatography:TLC、LC、GC、CE;③Other means: XRD、NMR、Electrochemical.Key words: fingerprint of Traditional Chinese Medicine、Spectroscopy、Chromatography中药指纹图谱是指采用一定分析手段,对适当处理后中药材或中成药进行分析,得到标识该中药特性的共有峰的图谱。
它是建立在中药化学成分系统研究的基础上,能基本反映中药全貌的一种综合的,可量化的鉴定手段。
使其质控指标由原有的对单一成分含量的测定上升为对整个中药内在品质,包括杂质的检测。
实现了对中药内在质量的综合评价和整体物质的全面控制,使中药质量达到稳定可控。
中药指纹图谱质控方法研究进展
中药指纹图谱质控方法研究进展中药指纹图谱是指通过一定的分离和检测技术,将中药中的多个化学成分在一定的条件下分离出来,然后通过对这些成分的检测结果进行分析和比较,得到一个图谱,并根据图谱来判断和评估中药的质量和药效。
中药指纹图谱质控方法的研究一直是中药研究的热点之一,现将该领域的研究进展进行总结和介绍。
中药指纹图谱的建立是中药质量控制的重要手段之一。
传统的中药质量控制大多是通过对中药主要有效成分的测定来进行的,这种方法存在着测定范围窄、测定结果受到样品中其他成分的干扰等问题。
而中药指纹图谱的建立,可以同时检测中药中的多个组分,从而更全面地评估中药的质量和功效。
中药指纹图谱还可以对中药进行溯源和鉴别,保证中药的来源和品质。
中药指纹图谱的建立对于中药质量控制具有重要的意义。
中药指纹图谱的建立是一个复杂的过程,涉及到中药的提取、分离和检测等多个环节。
目前,常用的中药指纹图谱建立方法主要有色谱法、电泳法和光谱法等。
色谱法是最常用的方法之一,包括高效液相色谱法、气相色谱法和毛细管电泳等。
色谱法的优点是分离效果好,灵敏度高,可以同时检测多个成分,但也存在着分析时间长、操作复杂等问题。
电泳法主要有毛细管电泳和等电聚焦等,电泳法具有操作简单、分离效果好等优点,但对样品的要求较高。
光谱法主要有紫外-可见光谱和红外光谱等,光谱法具有操作简单、分析速度快的优点,但对成分结构的要求较高。
还有一些新的技术被应用于中药指纹图谱的建立,如质谱法、核磁共振等。
中药指纹图谱的建立还需要进行数据处理和分析。
数据处理主要包括数据校正、峰识别和定量等。
峰识别是指对色谱图谱中的峰进行识别和归属,一般通过对比样品的峰面积和保留时间来确定峰的归属。
定量是指对中药中的成分进行定量测定,可以通过内标法、外标法和线性回归法等进行。
数据分析是指对图谱结果进行综合和比较,可以通过相似度分析、聚类分析和主成分分析等方法进行。
数据处理和分析的结果可以用来评估中药的质量和功效,并进行中药的质量控制和药效评价。
(2021年整理)中药指纹图谱技术的研究现状及应用(一)
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中药指纹图谱技术的研究现状及应用(一)【关键词】中药;,,指纹图谱;,,分离分析技术;,,,评价方法;,,,质量控制摘要:综述了近几年国内外指纹图谱的研究现状,简要介绍指纹图谱的构建和解析方法,阐述了指纹图谱在中药研究和质量控制方面的应用及面临的问题。
关键词:中药;指纹图谱;分离分析技术;评价方法;质量控制中药作为我国的国粹,有着几千年的悠久历史,是中华民族的宝贵财富,它的疗效已为世人所瞩目.然而,众所周知在我国中药材的质量极不稳定,市场也较为混乱,中药的质量问题已成为中药现代化、国际化的一大障碍。
多年来我国中药材的质量控制基本上是以传统的性状鉴别和显微鉴别确定真伪,以理化鉴别评价优劣。
前者为定性鉴别,要求鉴定者具备丰富的实践经验,人为因素较大;后者只考虑众多复杂成分中的个别活性成分,而忽略了中药材诸多成分的协同作用。
中药是基于其所含多种化学成分发挥综合的医疗作用,因此单凭其中一种化学成分定性或定量的传统中药质量评价方法,其有效性和专属性逐渐受到质疑,多指标的质量标准必定是一种趋势。
本文以近几年国内外在中药指纹图谱方面的研究为材料,对中药指纹图谱技术的研究现状及应用综述如下。
1国内外研究现状随着现代分析技术的发展,指纹图谱技术是当今国际公认的控制中药质量的质控模式.它能从原药材的栽培、引种,中成药生产工艺的规范与优化,到产品质量标准的制定提供全方位的质量保证.近年来国外对草药产品的质量评价也在提倡指纹图谱〔1,2〕,随着各种分析技术的创新和提高以及计算机应用技术的不断发展,世界各国对天然药物的了解和研究在不断深入,中药指纹图谱技术在国内外已成为一种发展趋势,其研究的方法和技术更趋成熟完善,成为国际公认的控制中药和天然药质量最有效的方法和手段。
中药指纹图谱的定义及发展现状
中草药材和中草药复方制剂发挥治疗效果的物质基础是其化学成分。
无论是中草药材,还是中草药复方制剂,从现代科学角度来看,均是复杂体系。
对于复杂体系必须采用多种高新科技的手段来表征其不同的特性,现行的中药材质量标准中列入了显微鉴别、理化鉴别、含量测定等多种方法,但尚不足以解决其复杂性。
目前国际上较为通用的办法是采取“指纹图谱”的方法,指纹图谱可以通过对其体系化学成分的物理指标的表征,将物质体系的内涵表达出来,从而达到对体系的整体描述,这也正好符合中医药整体综合的特点,必将成为中草药现代化的一个突破点。
随着对中药药效的深入研究,人们越来越认识到中药的药效不是来自单一的活性化学成分,而是来自多种活性成分之间的协同作用,甚至是与某些非活性成分的协同效应或拮抗作用,单一的活性化学成分难以评价中药的真伪和优劣,利用现代先进的分析技术分析中药材的整体特性,更准确鉴别不同中药及识别中药本身的真伪和优劣,就形成了中药指纹图谱分析的基础原动力。
1、中药指纹图谱的定义及其特点中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后,采用一定的分析手段,得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。
谢培山对中药色谱指纹图谱给出了以下定义:中药色谱指纹图谱是一种综合的、可量化的色谱鉴定手段,借以鉴别真伪、评价原药材以及半成品和成品质量均一性和稳定性,其基本属性是整体性和模糊性。
这一定义说明中药色谱指纹图谱是一种综合的、整体的鉴定手段,其功用范围在于鉴别真伪,并可以评价药材的质量均一性和稳定性。
从其综合和整体性能看,它准确且又可量化地对药材进行真伪鉴别和质量评价。
从细节上看,对中药色谱指纹图谱,由于不可能获得所有化学成分的标样,并且还有很多化合物可能本身就是未知化合物,一时难以给出准确的定性定量说明,所以从这一角度来说,中药色谱指纹图谱又是很模糊的。
中药指纹图谱具有整体性和模糊性的特点。
整体性是指中药化学成份的整体组成及特性,即色谱的整体面貌。
中药指纹图谱的研究进展(2)
维普资讯
I S 6 1 2 3 p a m a e& R s 药 学 服 务 与 研 究 S N 1 7 —88 hr C r e
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2 0 g 6 4 0 6 Au ; ( )
2 2 4 ・
E— *iPh r Ial a mCR@ y o ue n t Ph / x 8 — l6 51 8 9 T a x . e n Fa 6 2 5 9 2
对 指纹 图谱 分析 技 术进 行 了大 量 研究 , 得 了 可喜 取 的成绩 。指纹 图谱分 析技 术在 中药 质量标 准评 价体
系 中的作用 和地 位 己达 成广 泛 共 识 , 否 应 用 指纹 能
的容 量 因子 即保 留时 间和流 动相 中强 溶剂 的体 积 比 例呈 一一 对应 的关 系 , 以通 过 二 次 实 验 的结 果 获 可 取该 保 留值方 程 的参 数 , 以此 预测 其 他 不 同 (值 条 p
现 代科 学技术 相 结 合 , 适 应 当代 社 会 的 发 展需 求 以
和医药 国际化 格 局 , 现 代科 学 技 术 的 高 度研 发 和 从 生产 中药 , 升 中药 的产业 化 和国 际化 。 提 大多数 中 药的有 效成 分及药 理作 用机 制 尚未 明
确 , 药效 一般 是 多种 化 学 成分 共 同作 用 产 生 的结 其 果 。然而 , 目前 中药 质 量 控 制 的方 法 只对 其 中少 数
件下 的保 留值 。根据 温 度和 溶 质 容 量 因 子 的 关 系 ,
图谱 技术 控制药 材 质量 已经 成为反 映一 个企 业 的技
术 水平 和管理 水平 的标 志 。中药指 纹 图谱 的研究 已
经从 早期 只对 单一 谱 图进行 简单 评 述 的阶 段 , 展 发
中药指纹图谱的建立方法及其应用进展
的有效方法 , 给中药指纹图谱研究提供了新方向和平 台。
为了对 中药质量进行有效控制及药效研究及推广 ,推行
现代化的中药指纹图谱十分必要。
3 . 气相 色谱 法
气相色谱由于其对挥发性成分的检测具有分离效率 高 、分析速度快、样品用量少 、检测灵敏度高和应用范 围广的特点 ,常用于有挥发性 的中药的成分检测分析 ,
能、低重现性 、低灵敏度等缺点 ,所 以如果 成分 复杂
现高效快速分离。毛细管 电泳法理论体系逐渐成熟后 ,
得到了迅速的发展 ,到 目前为止毛细管电泳法已有多种 分离模式 , 如处理尽量降低 电渗流的毛细管区带电泳法 、
一
的中药 ,是很难用指纹图谱来鉴别 ,并对中药和制 剂
提出有效的质量评价 。
高效液相色谱法还可以连同其他 的检测器来分析各种类
型的样品。H P L C与质谱分析以 ( MS ) 联用 ,在对 中药
分析时 ,不仅可快速得到中药图谱的指纹信息 ,还可同 时得到色谱峰的结构信息 ,因此 ,m ・ L c 与 MS联用 ,
成为得到中药指纹 图谱 的主导方法。采用 1 . 7 m 粒填料
毛细管 电泳法 因具有较少 的进样量 ,高灵敏度、高 柱效、满意的分析速度等优点而得到广泛 的应用 。毛细 管 电泳法是以毛细管为分离通道 ,依据进量样品中各组 分之间有着淌度和分配行为上的不同,以高压直流电场 为驱动力而实现分离析方法 ,对 中药 中复杂的成分可实
用之广泛 、实用性之大 。同其他鉴别方法一 样 ,虽然 指纹 图谱 同时能鉴别多个样品 ,但也有着 自己的低 效
2 0 1 5年 第 1 5期
出现 了很 多假 冒伪 劣 商 品 ,而 中药 的有 效 成分 是衡 量 中
中药指纹图谱技术的研究进展
中药指纹图谱技术的研究进展【摘要】本文分别从中药指纹图谱的形成发展、国内外研究进展等方面对中药指纹图谱的研究情况做一总结,旨在为各类中药指纹图谱技术今后的研究工作提供一个参考。
【关键词】中药指纹图谱;研究中药指纹图谱的定义分为广义和狭义两种,广义上是指具有相关指纹特性的中药的所有化学特征和生物学特征的图谱,同时可对其进行表征并加以描述。
而狭义的指纹图谱的概念则是指某种或者某个产地的中药及其制剂等经过适当的前处理后,运用一定的研究分析手段,得到的可以标示中药材及其制剂特征成分的共有峰图谱[1]。
1 指纹图谱技术的形成及发展在19世纪末20世纪初,出现了“指纹”鉴定这个概念,最初指纹鉴定运用于法医和犯罪领域里,是根据每个人的手纹的结构有着绝对唯一的差别,来区分个体身份的。
也因此“指纹”技术也成了当时一个标志性的词汇。
后来随着仪器和分子生物学的快速发展,在生命科学的研究领域里也开始使用指纹分析技术来进行研究,之后发展了蛋白组学指纹分析技术,即利用种群和种群间的共性以及种群内部个体间的差异,来进行物种的鉴定的。
随着技术的迅速发展,中药指纹图谱技术也应运而生。
早在上个世纪70年代,就开始有学者用薄层色谱法指纹图谱技术对中药的定性鉴定分析进行了研究。
发展到上世纪90年代的时候,《中华人民共和国药典》中很多中药品种都已经收录了用薄层色谱指纹图谱的方法用于其品种的鉴定,特别是薄层扫描仪、成像系统、自动点样器和数据处理系统的出现和发展更使得TLC指纹图谱的运用不在是幻想。
到了21世纪,指纹图谱可以运用在生物、食品、环境、石油、化学等很多领域的研究中,特别是在中药和食品质量的控制方面,有时还结合一定的分子生物学的知识。
有学者通过吸收面积和体积排阻色谱(高效液相色谱法)分离蛋白质组分面积的百分比值显示与品质性状显著相关性,说明质量特性与蛋白质的分子量分布的关联[2]。
伴随着更多更新的仪器的出现和发展,中药指纹图谱技术开始向纵向快速发展,技术种类越来越多,应用范围越来越广。
中药指纹图谱质控方法研究进展
中药指纹图谱质控方法研究进展中药指纹图谱质控方法是对中药材的质量进行评估、鉴别和比较的重要手段,它可以反映中药材的多种成分情况,包括有效成分、掺杂成分、毒性成分以及工艺热处理等因素带来的影响。
指纹图谱的建立和分析需要进行多种技术手段的结合,包括色谱、质谱、光谱、电化学等方法,目前已经成为中药质量控制的重要工具之一。
本文将对中药指纹图谱质控方法的研究进展进行综述。
一、色谱法色谱法是常用于中药指纹图谱质控的方法之一,包括高效液相色谱(HPLC)、气相色谱(GC)、超临界流体色谱(SFC)等。
其中HPLC最为常用,它具有高分辨率和分离效率,能够将中药中的多个成分分离出来并测定其含量。
近年来,HPLC技术逐渐与质谱联用(LC-MS)的方法相结合,这种方法称为HPLC-MS,它不仅具有HPLC高分辨率、高灵敏度的优势,还能够对分离出的化合物进行结构确认和质量分析,使得中药指纹图谱的质量控制更加精准。
二、质谱法质谱法是鉴定化合物的重要手段之一,也是中药指纹图谱建立的重要方法。
质谱法包括几种技术手段,如质谱联用色谱(LC-MS)、气相色谱质谱(GC-MS)、液质联用质谱(LC-QTOF-MS)等。
质谱法的优势在于它可以对中药中的多个成分进行鉴别和定量,不仅可以分析中药中的有效成分,还可以对其中的掺杂成分和有害成分进行检测。
此外,质谱法还可以对中药材进行成分鉴别和标准化建设。
三、光谱法光谱法是用于中药指纹图谱建立的一种方法,主要包括紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)和近红外光谱(NIR)等。
光谱法的优点在于它无需对样品进行分离,只需要对其液态和固态进行可视化测试,测得的光谱曲线可以用于中药指纹图谱的建立。
此外,近年来光谱法与化学计量学相结合,形成了新的技术手段,称为化学计量学光谱学(chemometrics spectroscopy),它通过统计学、模式识别等方法对光谱数据进行处理,可以实现对中药样品中不同组分的鉴别和定量。
中药指纹图谱研究进展
三,DNA指纹图谱
不同生物体均有各自相对稳定的序列, 利用聚合酶链反应从不同生物样品中人工合 成片断,而这种片断的大小、数目可因不同 的生物而异,因此称为指纹图谱法。该技术 具有重复性好、灵敏度高的优点。目前应用 于中药质量研究的分析技术主要有分子杂交 和PCR两种,前者有以低拷贝序列基因为对 象的RFLD,及以中度重复序列为对象的卫星 DNA指纹图;后者有RAPD,AFLP和测序等 。
GC指纹图谱
气相色谱技术具体应用时多与质谱(MS)联 用,以获得各色谱峰的分子结构信息。GC-MS 联用具有分离效能及灵敏度高的特点,适用于中 药易挥发性成分的分析,但对高沸点物质的分析 比较困难。
HPCE指纹色谱技术
是以高压电场为驱动、毛细管为分离通 道,依据样品中各组分的淌度和分配行为上 的差异而实现高效快速分离的新型电泳技术 。王刚力等采用该法对18个卷百柏属植物 样品的乙酸乙酯提取物进行测定,建立了 18个样品的指纹图谱。
二、MS指纹图谱
将中药提取液置质谱仪中进行电子轰击电 离,可获得提取液中化学成分的EI-MS图,不 同中药提取液所含成分不同,所得质谱显示的 分子离子峰及进一步的裂解碎片也不一致,可 资鉴别。天麻主要化学成分为对羟苯甲醇衍生 物,天麻甲醇提取物的EI-MS指纹图谱特征性 强,而作为商业用天麻伪品的植物却均不含对 羟基苯甲醇衍生物,故其EI-MS图与真品有显 著区别。
基本概念和起源指纹图谱的起源:在19世纪末20世纪初,出现了
“指纹”鉴定这个概念.最初指纹鉴定运用于法医和 犯罪领域里,是根据每个人的手纹的结构有着绝对唯 一的差别来区分个体身份的.也因此“指纹”技术也 成了当时一个标志性的词汇.后来随着仪器和分子生 物学的快速发展在生命科学的研究领域里也开始使用 指纹分析技术来进行研究,之后发展了蛋白组学指纹 分析技术,即利用种群和种群间的共性以及种群内部 个体间的差异来进行物种的鉴定的随着技术的迅速发 展中药指纹图谱技术也应运而生.
专题10中药指纹图谱的研究现状与进展
中药指纹图谱的研究现状与进展一、中药指纹图谱的含意中药指纹图谱借用了法医学中的指纹鉴定的概念,通常是指借助于现代分析及检测技术来表达中药(主要是次生代产物)化学信息特征的指纹图谱,包括含中药材(原料药材)指纹图谱;中药原料药(包括饮片、配伍颗粒)指纹图谱和中药制剂指纹图谱。
中药指纹图谱是组分群体的特征图谱,能全面反映中药所含化学成份的种类与数量,进而反映中药材及产品的质量。
它是一种十分可行的质量控制模式,运用整体性与模糊性的基本属性,即物种特征的唯一性和同种个体间的相似性,为中药材和中成药提供综合的、宏观的和可量化的质量评价,可使中药质量评价过程更加科学化、标准化。
二、中药指纹图谱的属性中药指纹图谱是以各种分析技术为依托的质量控制模式,通过特定条件下完整图谱的整体信息来鉴别真伪,同时,在定量操作的前提下,用所得到的量的信息来估量被测样品的量的差别。
中药指纹图谱有两个基木属性:整体性和模糊性。
所谓整体性,是指要把所得指纹图谱作为一个整体进行评价,而不是孤立地看其中单一峰的有无、高低来判断药材或成药质量;而模糊性是指个体样品本身就存在着差异,难以精确地进行测量,绝大多数的指纹图谱本身就存在模糊性,不能保证所得的指纹图谱中每个峰都没有重叠,而且也不能保证所得的图谱包含了样品的所有特征,只要能固定图谱中关键部分就可对样品进行质量控制。
三、中药指纹图谱的起源、发展与构建中药指纹图谱按测定手段可分为中药化学(成分)指纹图谱和中药生物指纹图谱。
最先发展起来的,目前最主要和常用的是中药化学指纹图谱。
中药化学指纹图谱首推色谱方法和联用技术。
光谱最常用的是红外光谱(IR),色谱最常用的是薄层色谱(TLC)、气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)和毛细管电泳(CE),近来又出现了X-射线粉末衍射指纹图谱。
现代指纹鉴定始于19世纪末的犯罪学和法医学。
每个人的指纹在微小的细节构造上各有不同,可以以此鉴别每个人的特征。
中药指纹图谱的发展现状及其在质量控制中的应用
中药指纹图谱的发展现状及其在质量控制中的应用标签:中药指纹图谱;质量控制;应用1引言中药指纹图谱全称为中药化学指纹图谱,是指中药材经过适当的处理后,采用一定的分析手段和仪器检测得到的能够标识其中各种组分群体特征的共有峰的图谱,是以系统的化学成分研究和药理学研究为基础,经化学测定或基因鉴定得到的某种或某产地中药及其制剂所共有的、具有特异性的组分群体(某类或数类成分)特征图谱或图像。
中药的质量控制涉及到从原料到成品的每一环节,有其自己的特殊性。
尽管在药品的质量标准中可建立多种检验方法,但由于中药尤其是中成药的成分十分复杂,现阶段不能做到对每种成分的逐一鉴定,而中药指纹图谱能比较全面反映中药中所含化学成分的种类与数量,尤其是在现阶段有效成分绝大多数没有明确的情况下,将能更好地表明中药的内在质量,大大提高中药质量控制和评价的技术水平和科技含量,成为建立现代中药质量标准体系的核心。
2指纹图谱分析技术的发展现状目前获得指纹图谱的主要手段有:①色谱法:包括传统的薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、高效毛细管电泳法(HPCE);②光谱法:包括紫外光谱法、红外光谱法、近红外光谱法;③其他方法:主要有x一射线衍射法、核磁共振法(NMR)、质谱法(Ms)、色谱联用技术和DNA指纹图谱。
日前,由中国科学院长春应化所和吉林大学、中国农科院特产所共同承担的“龙胆草等长白山道地中药材多维指纹图谱研究”取得突破。
经专家鉴定,该项目为中药的质量控制提供了新的技术和方法,其实验手段和技术达到国际先进水平。
3中药指纹图谱在质量控制中的应用国际社会对药品的要求是“安全、有效、可控”。
近年来,指纹图谱技术被认为是中药质量控制研究的有效手段。
指纹图谱是基于对中药物质群整体作用的认识,借助于波谱和色谱等技术获得中药化学成分的光谱或色谱图,是实现鉴别中药真实性、评价质量一致性和产品稳定性的可行模式,有着较为广泛的影响和应用。
蒙药森登HPCE法的指纹图谱研究
内蒙古赤峰市阿鲁科尔沁旗罕山林场 内蒙古赤峰市阿鲁科尔沁旗赛汗塔拉苏木
内蒙 古 通 辽 市科 尔 沁 区 辽 宁 省 阜新 市 内 蒙 古 通 辽 市 库 伦 旗 库 伦镇 内蒙 古 扎 鲁 特 旗 格 日朝鲁 苏木
1 仪 器 与 试药 Cpl 0 u x高 效 毛 细 管 电 泳 仪 ( 国 Lme he一15 Lme 俄 o x公
130 ) 200
摘
要: 目的 : 立 蒙 药材 森 登 的 高效 毛 细 管 电泳 (jc ) 纹 图谱 分 析 方 法 为 蒙 药材 森 登 质 量 评 价 提 供 依 据 。方 法 : 用 建 } E指 P 采
石英毛细管柱( 内径 7t 有 效 长度 5c H C 5 ma 0m) P E工作 条 件 : 离电 压 2 k , 温 2 % , 外检 测 器 ( V 检 测 波 长 为 24m, 分 0 v柱 5 紫 u ) 5 n 缓
司 )A Y 2 , U 10电 子 天 平 ( 日本 岛 津 ) 一20 P 紫 外 可 见 w 51C 分 光 光 度计 ( 日本 岛 津 ) 。 硼砂 、 酸 、 谱 纯 乙腈 ( 津 市 大 茂 化 学 试 剂 厂 ) 色 硼 色 天 ,
2 2 电泳 条 件 : 涂 石 英 毛 细 管 柱 ( 径 7t 有 效 长 度 . 未 内 5 m ̄ 5c ) 检 测 波 长 24 m; 力 进 样 3m a, s 分 离 电 压 0m ; 5n 压 0 br5 ; 2k ; 细 管 温 度 2 ℃ ; 行 缓 冲 溶 液 5m o・ 硼 砂 一 0v毛 5 运 0 m lL
表 1 蒙药材森登样 品产地
样 品 号 产 地 内蒙 古 赤 峰 市 阿 鲁 科 尔 沁 旗 坤 都 经 济林 场
中药指纹图谱质控方法研究进展
中药指纹图谱质控方法研究进展中药指纹图谱是一种通过对中草药的多组分分析,建立多维度、全方位表征性的分析图谱,实现中草药质量的快速鉴别和评价的方法。
该方法不仅可以发现植物中的多个有效成分,同时可以对不同的药材进行比较、区分,从而掌握药材的质量特征。
为了避免人为偏差的干扰,中药指纹图谱在中草药质量的评价和管理方面具有较高的重要性。
本文将综述中药指纹图谱的质控方法研究进展。
当前中药指纹图谱的质控方法主要包括样品采集、粉碎、提取、分离、检测等环节。
1. 样品采集样品采集是中药指纹图谱分析的首要工作,其取样部位需与药材属性相符。
对于不同部位的草药而言,应该选取具有代表性的部分进行采样,如果实、根茎、叶片等。
同时,在采集样品的过程中,应该严格按照规定条件进行,并采用符合要求的采样设备和方法,以避免人为干扰和采集样品质量不稳定。
2. 粉碎药材在分析前要进行粉碎处理,使药材中的有效成分可以被更好地释放和分离。
在粉碎时,应该避免热处理和超声处理。
3. 提取提取是中药指纹图谱制备的重要步骤之一,其目的是提取药材中的有效成分。
通常采用蒸馏提取、超声波提取、微波提取等方法进行,同时也可以根据实际需求选择不同的提取剂。
4. 分离分离是中药指纹图谱制备的关键步骤之一,它是将原料中的多种化学成分分离出来,以方便后续分析。
在分离中,通常利用色谱技术对不同的成分进行分离,其中包括高效液相色谱、气相色谱、毛细管电泳等。
5. 检测检测是中药指纹图谱进行化学分析和定量分析的重要环节之一。
目前主要采用质谱和核磁共振等方法进行。
此外,为了获得更加准确的检测结果,应该严格按照规定操作程序进行检测,并且根据样品特点选择适当的检测方法。
总之,中药指纹图谱是一种有效的中草药质量评价和管理的方法。
在指纹图谱制备的过程中,质控方法是非常关键的,可以有效排除干扰因素,提高其分析结果的准确度和可靠性。
因此,必须严格遵守相关规定和操作程序,注重操作技巧和经验,以提高中药指纹图谱检测质量和稳定性。
中药指纹图谱研究的某些进展与展望_韩晔华
2008年3月M arch 2008色谱Chi n ese Journal of Chro m atographyVo.l 26N o .2142~152收稿日期:2008-01-07第一作者:韩晔华,博士研究生.通讯联系人:刘虎威,教授,博士生导师.T e:l (010)62754976,E -m ai:l h w li u @pku .edu .cn .基金项目:国家自然科学基金面上项目(项目号:20575003,20675004,90709021).中药指纹图谱研究的某些进展与展望韩晔华, 霍飞凤, 杨悠悠, 廖一平, 刘虎威(北京大学化学与分子工程学院分析化学研究所,北京100871)摘要:在中药现代化的过程中,中药的质量控制标准直接影响到中药的国际化问题。
近年来,国内很多学者对中药指纹图谱用于质量控制的问题进行了深入的研究,取得了很多成果。
本文着重就近几年来中药指纹图谱的某些进展进行了综述,内容包括气相色谱指纹图谱、液相色谱指纹图谱以及其他指纹图谱。
最后就指纹图谱研究的发展提出了几点看法。
共引用文献161篇。
关键词:中药;指纹图谱;气相色谱;液相色谱;毛细管电泳;光谱;质量控制中图分类号:O 658 文献标识码:A 文章编号:1000-8713(2008)02-0142-11 栏目类别:中药质量控制专栏So m e advances and prospects in fingerpri ntings oftrad itional Ch inese m ed icinesHAN Yehua ,HUO Feif eng ,YANG Youyou ,LI AO Y ipi n g ,LI U Huwei(In stitu te of An a lytica l Ch e m istry,C ollege of Che m istry and M olecu l a r En g in eer in g,Pekin g Un iv er sity,Bei jin g 100871,Ch ina )A bstract :T he quality control standards are t he key points i n the m odernizati o n of traditi o nal Chinese m edici n es (TCM ),and in recent years ,t he fingerprinti n g techni q ues pl a y an i n creas -i n gly i m portant rol e ,i n cluding fi n gerprinti n gs based on gas chrom atography ,liquid chrom atog -raphy ,capillary electrophoresis ,spectroscopic m ethods ,and so on .So m e advances i n t his area i n t he past few years are rev i e w ed and so m e prospects are discussed i n t his articl e .K ey words :traditionalChi n ese m edici n es (TCM );fi n gerprinti n g ;gas chro m atography (GC);li q uid chro m atography (LC);capillary electrophores is (CE);spectroscopy ;quality control 中药指纹图谱的提出和研究已有多年的历史,不少学者都对指纹图谱的定义和具体指标进行过研究。
蒙药材缬草(珠勒根-呼吉)的气相色谱指纹图谱研究
法学考察表明 , 该方法 符合 《 中药 注射 剂指 纹 图谱 研究 的 技术 要求 ( 暂行 ) 》中对建立指纹图谱检测的要求 。
3 缬草的气相色谱指纹 图谱及其专属性考 察
3 . 1 缬草的气相色谱指纹 图谱及 共有峰 的标定 : 按照 2 . 1
气相 色谱条件 对 8份缬草 药材 的供 试品溶液进 行了测定 ,
记录指纹图谱 ( 见图 1 ) , 并使 用 中药色谱 指纹 图谱相似 度 评价 系统 软件进行 缬草气相 色谱指 纹 图谱 的合成 及标定 ,
生成对照图谱 , 见图2 。
4 讨 论
4 . 1 建立 了缬草二氯 甲烷提 取物 的气 相色谱测定方 法 , 该 方法能很好 的分离所提取 的缬草化学成分 , 各峰型较好 , 方 法具有很好 的稳定性 、 重复性和可行性 。
标 准 ・蒙药分册 [ S ] . 1 9 9 8 . 2 0 3 .
[ 2 ] 屠鹏 飞. 中药材指 纹 图谱 的建 立及技 术要 求 实例 解说 [ J ] . 中国药品标准 , 2 0 0 0, 1 ( 4 ) : 2 2 . [ 3 ] 谢培 山. 中药 色谱 指 纹 图谱 鉴别 的概 念、 属性 、 技术与 应 用[ J ] . 中国中药杂志 , 2 0 0 1 , 2 6 ( 1 0 ) : 6 5 3 .
2 、 6 、 1 2 、 2 4 、 4 8 、 7 2 h检测气 相 色谱 指纹 图。结果 表 明各 色
谱峰的保 留时间和峰面 积的值基本 没有 明显 的变化 , 说 明
样品在 7 2 h内稳定 。②精 密 度试 验 : 取 1号 缬 草样 品 , 按
2 . 2项下方法制 备供试 品溶 液 , 按2 . 1项下 测定条 件 连续 进样 5次 , 检测指纹 图。所得各共 有峰保 留时间的 R S D值 均小于 2 %, 共有峰峰 面积 的 R S D值均小于 2 %, 表明该方 法精密度 良好 。③ 重现 性试 验 : 取 1号缬 草样 品 6份 , 按 2 . 2项下方法制备供试 品溶 液 , 按2 . 1 项 下测定 条件测定 ,
蒙药蓝盆花HPLC_指纹图谱及主要成分的含量测定研究_HPLC_Fingerprint_and_De
Traditional Chinese Medicine 中医学, 2022, 11(2), 155-166 Published Online March 2022 in Hans. /journal/tcm https:///10.12677/tcm.2022.112027蒙药蓝盆花HPLC 指纹图谱及主要成分的 含量测定研究文 花1,青 虎1,刘 燕2,拉喜那木吉拉2,白玉霞2*1库伦旗蒙医医院,内蒙古 通辽2内蒙古民族大学蒙医药学院,内蒙古 通辽收稿日期:2022年1月4日;录用日期:2022年2月22日;发布日期:2022年3月3日摘 要目的:对不同产地蒙药材蓝盆花(含蒙古国)进行质量比较研究,为该药质量标准制定提供科学依据,确保临床疗效及复方制剂用药安全提供依据。
方法:采用HPLC 进行测定,色谱柱为Welchrom-C 18 (4.6 mm × 300, 5 µm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水,梯度洗脱,流速为1 mL/min ,检测波长为254 nm ,柱温40℃,进样量为10 µl ,运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统A 版色谱软件对指纹图谱进行相似度评价。
结果:建立了不同产地蓝盆花的HPLC 指纹图谱,确定了22个共有峰,指认了9个共有峰,计算了相似度,相似度在0.907~0.996。
结论:建立了蒙药蓝盆花药材的HPLC 特征指纹图谱,该指纹图谱测定方法精密度、稳定性和重复性良好。
关键词蒙药蓝盆花,HPLC ,指纹图谱,质量控制,獐芽菜苷,异槲皮苷,咖啡酸,绿原酸,木犀草苷,芹菜素,木犀草素,大波斯菊苷,异绿原酸AHPLC Fingerprint and Determinationof Main Components of Mongolian Medicine of the Flos of Scabiosa comosa FischHua Wen 1, Hu Qing 1, Yan Liu 2, Laxinamujila 2, Yuxia Bai 2*1Kulun Banner Mongolian Medicine Hospital, Tongliao Inner Mongolia2College of Mongolian Medicine, Inner Mongolia University for Nationalities, Tongliao Inner MongoliaReceived: Jan. 4th , 2022; accepted: Feb. 22nd , 2022; published: Mar. 3rd , 2022*通讯作者。
中蒙药制剂指纹图谱建立和辨认的方法和步骤
中蒙药制剂指纹图谱建立和辨认的方法和步骤杨永生 2009级研究生学号:2009110100摘要目的:介绍中蒙药制剂指纹图谱建立和辨认的方法和步骤,为祖国传统医药走向世界提供手段方法。
方法:归纳国内近年关于指纹图谱的大量文献,分析其研究的方法,在中蒙药制剂质量控制中起到了重要作用。
结果:中蒙药制剂指纹图谱技术进展很快完全可以利用其作为中蒙药质量控制的手段。
结论:中蒙药制剂指纹图谱的研究进展很快其科学的方法和步骤可以更好的提升中蒙药质量,中蒙药制剂指纹图谱技术一定可以加速祖国传统医药走向世界。
关键词中蒙药制剂指纹图谱;方法和步骤中蒙药是我国人民在数千年治疗疾病过程中积累起来的宝贵财富,中蒙药生产和质量的规范化和现代化是祖国传统医药走向世界的重要前提,目前中蒙药正处于迈向现代化的瓶颈阶段,中蒙药制剂指纹图谱的出现为解决这个问题提供了现代技术手段、中蒙药制剂指纹图谱近年来进展很快,本文综合了国内近年的有关文献对中蒙药制剂指纹图谱的建立和辨认的方法和步骤作一论述。
1、中蒙药指纹图谱的定义、特点、分类1.1 定义:中蒙药指纹图谱是指某种(或某产地)中蒙药材或中成药经适当处理后,采用一定的分析手段,得到的能够标志该中蒙药材或中成药特征的色谱或光谱的图谱。
利用色谱技术进行指纹图谱分析的中蒙药材因生长年限,生长环境的变化而可能产生个体间较为明显的差异,但个体间必然有群体共有的相似性[1]。
1.2 特点:①通过指纹图谱的特异性,能有效鉴别样品的真伪或产地;②通过指纹图谱主要特征峰的含量或比例的制定,能有效控制样品的质量,确保质量的相对稳定。
中蒙药指纹图谱有两个基本属性[2]:整体性和模糊性。
1.3 分类:按应用对象来分类,可分为中蒙药材(原料药材)指纹图谱、中蒙药原料药(包括饮片、配伍颗粒)指纹图谱、中蒙药中间体(工艺生产过程中间产物)指纹图谱和中蒙药制剂指纹图谱。
按测定手段可分为:中蒙药化学指纹图谱和中蒙药生物指纹图谱。
蒙药色谱指纹图谱研究进展
蒙药色谱指纹图谱研究进展
娜音珠日嘎;赛喜雅拉图
【期刊名称】《北方药学》
【年(卷),期】2014(000)003
【摘要】通过查阅文献,综述了近年来蒙药指纹图谱研究中的应用现状及研究进展,并展望了蒙药色谱指纹图谱在蒙药质量控制领域的应用,以期为其今后的研究领域提供参考依据。
【总页数】2页(P68-69)
【作者】娜音珠日嘎;赛喜雅拉图
【作者单位】内蒙古鄂托克前旗蒙医医院鄂尔多斯 016200;内蒙古鄂托克前旗蒙医医院鄂尔多斯 016200
【正文语种】中文
【中图分类】R29
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中蒙药制剂指纹图谱的研究进展摘要】本文主要阐述了中蒙药制剂的指纹图谱的建立和辨认方法和步骤,为中蒙药指纹图谱的进一步深入研究提供了线索和依据。
【关键词】指纹图谱建立和辨认研究进展THE RESEARCH PROGRESS OFmoNGOLIAN IN PREPARATION FINGERPRINT 【Abstract】This article mainly expounds themongolian fingerprint of the preparation of the establishment and identify the method and procedure,the fingerprint of themongolian for further study offers clues and basis.【Key words】fingerprint Establish and identify The research progress中药指纹图谱是指某种(或某产地)中药材或中成药经适当处理后,采用一定的分析手段,提取其化学信息并加以描述,得到的能够标志该中药材或中成药特性的共有峰的图谱[1]。
中蒙药是一个复杂体系,起疗效作用的物质基础不一定是一种化学成分,而是许多化学成分的总体作用。
中药依赖这些化学成分起到有主次轻重的多靶点,多环节的有机整体协同治疗效果[2]。
正是由于中药具有整体性和复杂性的特点,对中药的研究面临着巨大的挑战。
随着近年来新技术、新方法的运用,中药复方研究出现了许多新思路,用指纹图谱研究中药复方就为其中之一。
中蒙药指纹图谱的研究已成为中药现代化进程的一个重要环节。
由于中药材化学成分的复杂性,而且每一种药会有不同批次,不同产地,采摘季节和气候条件的制约,同时也存在着质量标准,定性和定量的分析,难以控制等问题。
这些都给中药的深入研究和质量控制带来很大的困难。
通过其化学成分的不同特性,建立指纹图谱可以解决上述亟待解决的问题。
1 中药指纹图谱的建立的方法及步骤1.1 中药指纹图谱有多种构建方法,每种方法都有各自的优缺点和一定的适用范围,在实际应用中,可以根据需要进行选择。
1.1.1 薄层色谱法薄层色谱法(TLC)是色谱法中应用最广泛的方法之一。
它是将样品与适宜的对照物质在同一薄层板上所得的色谱斑点作比较,用于进行定性鉴别或含量测定的方法。
TLC因简单、快速、经济而被广泛应用,具有流动相组成灵活、固定相可任意改变、检测不受时间限制、薄层板可储备、能同时检测多个样品并可对所有样品进行观测等一系列优点,尤其适合于日常分析和现场检验。
但由于其在一个相对开放的系统中展开,温度、湿度等外界条件影响较大,如采用自制薄层板,不确定性更大,所以TLC最好用于初步的中药材检测与鉴定[1]。
虽然从仪器自动化程度、分辨率、重现性方面不如后来发展来的气相色谱和高效液相色谱法,但是由于仪器简单,操作方便,用途广泛等特点,因此广泛的被人们应用。
1.1.2 高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)是在经典液相色谱法的基础上,引入了气相色谱法的理论和实验技术,以高压输送流动相,采用高效固定相及高灵敏度检测器,发展而成的现代液相色谱分析方法。
它具有分离效率高、选择性好、分析速度快、检测灵敏度高、操作自动化合应用范围广的特点。
HPLC不受样品挥发性和热稳定性的限制,整个分离过程在相对封闭的环境内,受外界影响较小,系统稳定性好。
随着HPLC设备的普及,其又能与MS、NMR等技术联用,成为中药指纹图谱研究的首要选择。
张玉杰等[3]采用反相高效液相色谱法对不同产地沙苑子进行了指纹图谱研究,结果发现不同来源的正品沙苑子指纹图谱十分相似,而与2种伪品则显示出完全不同的指纹图谱特征。
邹忠梅等[4]利用HPLC-DAD方法,采用梯度洗脱,测定了10批芍药总苷样品,建立了芍药总苷的高效液相色谱指纹图谱,为科学评价及有效控制芍药的质量提供了可靠方法。
瞿为民等[5]采用高效液相色谱法对人参、西洋参及三七药材指纹图谱进行了鉴别,结果表明,3种参的皂苷类成分均得到很好的分离,该方法可有效的鉴别人参、西洋参和三七参。
游松等[6]采用高效液相色谱法对银杏叶注射剂进行了指纹图谱研究,结果发现所有参数均符合国家食品药品监督管理局关于有关中药注射剂的技术要求。
周玉新等[7]以HPLC梯度洗脱法对三七原药材、三七总皂苷提取物及三七总皂苷注射液进行了指纹图谱的研究,证明了HPLC法可操作性强、重复性好。
1.1.3 气相色谱法气相色谱是一种柱色谱技术,它是封闭性色谱,受外界影响较少,主要用于中药中挥发油成分、极性较小的成分或衍生化后可挥发的成分的指纹图谱特征研究,它具有高效、高选择性、高灵敏度、用量少和分析速度快等优点,具体应用时多与质谱技术联用。
一般使用质量型检测器氢火焰离子化检测器(FID)。
1.1.4 高效毛细管电泳(HPCE)指纹图谱高效毛细管电泳法是以高压直流电场为驱动力,毛细管为分离通道,依据样品中各组分淌度和分配行为上的差异而实现分离的一种新型电泳技术。
本法具有分离模式多,分离效率高,速度快,使用范围广,进样体积小,易清洁,可直接分析水溶液等特点。
主要用于中药中带电荷的化合物(如蛋白质、氨基酸、黄酮、生物碱)、有机酸、单糖及一些中性分子的分离分析,得到的指纹图谱能反映出更多的特性,使中药成分的分析范围更广泛,但毛细管电泳的检测灵敏度与精密度不如高效液相色谱法,在指纹图谱研究中应用较少[3]。
采用毛细管电泳的方法,建立10种十大功劳属植物的毛细管电泳指纹图谱,计算电泳图中每一个标记峰的有效电泳淌度和校正峰面积百分比,以对该种进行表征,测定结果显示,该属植物的电泳图有一定相似性,它们均含有小檗碱、巴马汀、药根碱,且含量较高,可作为十大功劳属植物的特征之一,用于属的鉴定。
用这种方法可以进行不同种植物的鉴定以及真伪优劣的鉴别[8]。
1.1.5 高速逆流色谱(HSCCC)指纹图谱HSCCC法是目前中药分析分离中应用的一种新型液-液分配技术。
该技术利用相对移动的互不混溶的两相溶剂,在处于动态平衡的两相中将具有不同分配比的样品分离。
国内外已报道将高速逆流色谱技术应用于天然产物的分离和分析,该技术可适用于任何极性范围的样品,预处理要求低,一般粗提物即可满足要求,而且回收率高,能实现梯度操作,亦能重复进样,在中药质量分析控制研究中,尤其在指纹图谱研究中有较好的应用前景。
1.1.6 生物色谱指纹图:分子生物色谱是把生物体内活性物质如酶、受体、传输蛋白等固定于色谱填料中,利用中药中活性成分与它们的相互作用,将色谱分离与分子生物医学二者的新成果紧密结合起来,建立有效成分指纹分析质量控制方法,并为组合中药的研究提供有效分子的结构信息。
对于有效成分尚未清楚的中药,由于分子生物色谱以生物活性分子间广谱的相互作用为基础,也可利用其指纹分析法进行快速的质量监控。
1.1.7 红外(IR)指纹图谱[9]:红外光谱是利用分子对红外光的共振吸收,得出相应的谱线,从而提供分子结构带有不同基团的结构信息,具有指纹性。
红外光谱中所反映的是中药中混合成分的叠加,中药内各种化学成分只要质和量相对稳定,样品的处理方法按统一的要求进行,则其红外光谱应该是相对稳定的,种质、地域、加工方法、贮存等外界因素的影响,从红外光谱上能够反映出各自的差异性。
陈惠清等[10]采用红外指纹图谱法进行鉴别研究,证实可以通过FTIR光谱特征进行鉴别。
不同产地的丹参药材红外指纹特征基本相同,采用红外指纹图谱法可以对丹参进行有效的鉴别,FTIR是中药质量宏观控制的一个快速、科学的检测手段。
1.1.8 DNA指纹图谱:中药(不含矿物质)“种属”的多样性是由于其基因多态性产生的结果,而基因多态性可在分子水平上检测,它比在形态、组成和化学水平上检测更能代表中药变异类型的遗传标记。
在DNA分子水平,任意引物聚合酶链式反应(AP-PCR)的DNA指纹方法在中药材人参和西洋参、甘草、龟板和鳖甲、苦地胆、淫羊藿等中药鉴别方法获得成功。
对独活的DNA指纹鉴别研究中,采用AP-PCR方法,3种独活样品与同属植物大活与拐芹当归DNA指纹图谱清晰,同时,方法具有可重现性。
1.1.9 分子生物学方法[11]近年来人们认识到核苷酸序列含有生命有机物构建、维持和繁殖生命所必需的遗传信息,不同种生物体含有不同的DNA序列,同种生物体既有相同的DNA序列,保持同种生物体的遗传性状,又有其多态性.使同种生物体内各个体千差万别。
由于这种核苷酸序列是相对稳定的,因而可以利用现代分子生物学技术构建DNA指纹图,DNA指纹图具有高度的个体特异性。
限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)是最常用的构建DNA指纹图的方法,但该法费时费力,应用受到限制。
随机扩增多态DNA(RAPD)标记,可以在特异DNA序列尚不清楚的情况下,检测DNA的多态性,这是构建中药指纹图谱的新方法,具有极好的应用前景。
指纹图谱数据库的建立[1]:在建立复方指纹图谱前,要明确指纹图谱的性质(由哪些成分组成,这些成分是否为有效成分或与临床疗效具有相关性,或是否为有毒成分需要限量控制,成分间比例的变化是否影响成品疗效或作用方向等等)[12]。
中药指纹图谱研究不仅要对不同品种、产地、采收期、药用部位和炮制方法的中药材分别建立指纹图谱,还要对中药制剂(中成药)的原药材、中间体、有效部位、最终产品的全过程建立指纹图谱库,并对指纹图谱与药效的关系进行研究,建立谱效关系库。
1.2 指纹图谱研究的基本步骤[13]:药材鉴定,确定名称、来源→选取参照物→制备供试物,样本图谱测定→列出检测数据,各项技术参数分析→建立特征指纹图谱→提供标准指纹图谱检测标准。
在指纹图谱的研究过程中,要注意到以下几点[11]:(1)样本要有明确的纳入标准。
若构建的指纹图谱用于甄别某种中药材的真伪,所选的样本应包括不同产地、不同采收期的该种药材,确保所选样本能代表该品种的样本总体;若构建的指纹图谱用于判定产地和采收期已固定的某种中药材质量是否稳定,则应尽可能收集历年来同产地、同采收期的该药材样本;若构建中成药指纹图谱,应在确保该产品所用原料产地、品种、采收期和加工方法固定的前提下,收集该药足够多的不同批号的样本,方可判定该产品的真伪及质量是否稳定。
(2)样本量要适当,样本量的实质是代表性的问题,在纳入标准明确的前提下,样本量越大,越接近总体的真实情况.抽样误差和随机误差小,代表性好,结论更可靠。
但样本量大,花费的人力物力也多,有时样本来源也有困难。
样本量小,则易导致偏差。
因此,样本量要适当。
(3)尽可能设立对照,设立对照是构建中药指纹图谱的重要原则之一。
对于中药材,可将中国药品生物制品检定所提供的标准药材作为对照品,构建该品种的“标准指纹图谱”,即标准模式。