中药指纹图谱构建的研究进展

使用并不是很广泛。孙国祥等阱∞１分别建立了柏子养心丸 （ＢＺＹＸＷ）和补中益气丸（ＢＺＹＱＷ）的指纹图谱，为ＢＺＹＸＷ 和ＢＺＹＱＷ的质量控制提供了有效参考。 １．１．５高速逆流色谱法（ＨＳＣＣＣ） ＨＳＣＣＣ法是一种液一液
其在成分分析、代谢产物分析和药物动力学方面的应用。其 中５０％的文献是与中药成分分析相关．这说明了ＨＰＬＣ—ＭＳ 技术在现代中药色谱分析中作为最有效的分析手段正在得 到更广泛的应用。乔怀耀等ｍ］利用超高效液相色谱一质谱联
子因吸收能量而跃迁至高能态，并在这个过程中发射出具有 固定波长的荧光。该方法的优点是灵敏度高，可同时对多个
成分进行检测且应用范围广泛。王立屏㈣利用ＡＦＳ对中药
同时利用化学计量学进行分析，为柴胡药材的定量研究打下
了基础。 １．１．４高效毛细管电泳法（ＨＰＣＥ） 高效毛细电泳法的工作
牛蒡子的三维荧光指纹图谱进行了研究。最终提出了一种对 牛蒡子进行质量控制和鉴别的有效方法。其他文献也对三维 荧光光谱法在中药材质量控制中的应用进行了许多有意义
药中所含成分相对关系的鉴定方法．自２０００年０８月国家药
量控制提供了良好的理论依据。许重远等哺俐用薄层色谱法
对不同批次的复方蒲公英灌肠液的指纹图谱进行比较，共发
现６个含量差异较大的共有峰和２个非共有峰．为建立质量
标准打下了良好的基础。苏星等［７３采用薄层色谱法对北沙参 药材的指纹图谱进行了研究，发现不同来源的１３批北沙参 样品均含有法卡林、二醇东莨菪素、伞形花内酯、异欧前胡素 等４个成分。但其含量有较大差别。 高效薄层色谱法是指利用特殊材质的薄层板和展开技 术来提高薄层色谱的灵敏度和准确度．从而有效提高构建指 纹图谱的效率。丁阳平等喁３研究建立了茶黄素的高效薄层色
合物的中药鉴别效果较差。徐海星等∞１利用红外光谱法对药 材白英的不同部位建立了指纹图谱。经实验分析最终建立了 白英药材的ｎ１Ｒ的鉴定新方法。也有文献介绍了利用红外 光谱法对不同产地的花椒的指纹图谱进行了研究∞】，为以后
的研究提供了很有意义的理论参考。对延胡索和全夜延胡索 的鉴别也采用了这种方法…。 １．２．２紫外光谱法（ＵＶ）
药材或中药制剂内部活性成分的种类和数量．是目前公认用
于鉴别药材真伪和控制药材质量最为有效的方法。本文总结
了中药指纹图谱近几年的研究和发展现状．对常见的中药指 纹图谱构建方法进行了综述，并对指纹图谱的发展和需要进 一步研究问题提出了自己的一些看法。
１
１．１．２高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）高效液相色谱法是在经典 液相色谱的基础上发展而成的。ＨＰＬＣ利用了气相色谱的理 论和方法。其工作原理是依据中药中各成分在展开剂和固定 相之间分配系数的不同进行分离。ＨＰＬＣ受样品本身和外界
相一致，证明了方法可靠且可行。文献利用紫外光谱法对指
纹图谱的相似度进行比较实现了对苦荞粉的真假鉴定ｍ］。
厚朴饮片的气相指纹图谱进行了比较．最终确定恩施地区的 姜厚朴饮片气象图谱为最佳指纹图谱模式。王启帅等∞３运用
ＧＣ法对北柴胡中挥发性成分的指纹图谱进行了相关研究．
１．２．３荧光光谱法（ＡＦＳ）
ＡＦＳ的基本原理是蒸汽状态的原
Ｘ射线衍射法构建指纹图谱的原理是利用不同物质由
于分子结构不同。受到Ｘ射线照射时会产生不同衍射现象的
成分简单的单昧药材具有良好的鉴别效果，但由于其加和
性．对于较为复杂的中药制剂难以准确判断。 １．２．１红外光谱法（ＩＲ）红外光谱是由于分子振动、跃迁产 生的．反映化合物分子的整体结构．能用于整个化合物分子 的鉴定。当药材中化合物分子稳定时，利用该方法建立指纹
原理是利用高压直流电场推动中药样品在毛细管中运动．由 于样品中各组分的淌度和分配行为的不同．导致不同组分在 毛细管中产生运动上的差异，从而实现分离的一种技术。该
的研究［３４术，具有分离模式多、分
离效率高、普适性强、节省样品和试剂等优点，特别适用于成
色谱法具有良好的分离能力．波普法具有较
合稳定可靠。王素雅等ｒ１６３针对ＨＰＬＣ法高效准确的优点，对
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的ＩＲ是中药中各种成分ＩＲ的叠加。随着化合物种类的增 加，混合物的特征逐渐减小。所以红外光谱对于具有多种混
高效液相色谱法在乳品营养成分、食品添加剂、毒品和药物 残留等方面的应用进行了综述。基于ＨＰＬＣ法的各种优点，
目前该方法使用最为广泛．许多学者对其进行了深入研究， 并将该方法与其他方法联用，组成更有效的联用技术ｒ１７瑚ｊ。 １．１．３气相色谱法（ＧＣ） 气相色谱法是一种封闭性的色谱
性成分的研究．证明了高速逆流色谱法用作中药指纹图谱研 究的可靠性和有效性。沈平婊∞ｊ利用该方法对多种中药进行 了指纹图谱的研究，均取得了良好效果。
１．２光谱法
应用，涌现出许多构建中药指纹图谱的新方法。例如：Ｘ射线 衍射法、磁共振法和分子生物技术等。
光谱法主要包括红外光谱（ＩＲ）、紫外光谱
（ＵＶ）和荧光光谱（ＡＦｓ）等３种方法。其中ＩＲ和ＵＶ是目前 常用的２种用于中药指纹图谱建立的方法。这２种方法对于
医药技术的不断进步推动了中医药理论的进一步发展。 同时，也对中医药理论产生了很大的冲击，暴露出许多问题。 现代社会，人们对医药的使用提出越来越高的要求，含量确 切、结构清楚、药理明确等都是现代医药质量控制的主要特 征［１一。而中药中含有多种活性成分，单一的活性成分都无法 体现中药完整的疗效。所以，中药质量的控制及标准化是中 医药现代化发展过程中亟待解决的一个问题。中药指纹图谱 是受到法医学“指纹鉴定”的启发形成的一种有效的鉴定中
薄层色谱法（ＴＬＣ）ＴＬＣ是利用中药成分性质上的
差异经过薄层分离后相对位移值的不同进行鉴别的一种方 法口］。该方法具有操作简单，分析速度快，成本低等优点，适 用于不同种类药材指纹图谱的构建。使用该方法只需要选取 好薄层色谱展开剂，分离样品后即可获得直观的图谱图像。
但是由于薄层板质量的差异和色谱系统的开放性等外界因
干扰的影响较小，非常适合用于中药指纹图谱的构建。ＨＰＬＣ
中药指纹图谱的构建方法
中药指纹图谱的构建方法很多，主要有色谱法、光谱法、 联用技术、Ｘ射线衍射法、磁共振法等。其中，色谱法和光谱 法是目前用于构建中药指纹图谱最常用的方法心］。本文分别
对这几种方法进行了总结。
具有仪器化程度高、分析速度快、色谱柱可反复使用等优点． 目前已成为指纹图谱研究的主要方法，应用十分广泛。该方 法适用于成分相似的中药材和成分相对复杂的中药制剂的 指纹图谱的构建．但ＨＰＬＣ对仪器的依赖程度较高．且成本 相对比较昂贵。 林新华等【１０３利用ＨＰＬＣ对丁腈橡胶中２种防衰老剂的
化合物有时会具有相似的吸收光谱．造成了多种成分之间的
相互干扰。降低了该方法的可鉴别性．因此常用分光法或模
糊数学法使其达到理想效果。Ｊｕｎ等日“通过建立紫外光谱指
纹图谱评价了３种常用中药的退热功效．结果与药理学实验
行定量分析。最终将１０批样品归为３类，方法简便可靠，未
来可用于生物柴油的质量控制。翁德会等㈤对不同产地的姜
用技术建立了舒肝解郁胶囊的指纹图谱。结果表明该方法可 用于舒肝解郁胶囊的质量控制。也有文献利用气相色谱一质 谱（ＧＣ—ＭＳ）联用技术分别对青稞酒和鱼腥草的有效成分进 行了研究，取得了很好的效果ｍ瑚］。 １．４其他技术 随着医药技术的不断发展和跨学科知识的
分配技术。该方法利用互不相容的２种溶剂作为流动相，在 移动的过程中将样品中不同分配比的成分分离。该方法具有 操作简单、适用范围广、对样品的预处理要求低且可重复进 样的优点。顾铭等涵ｊ通过利用该方法对不同批次的丹参脂溶
好的结构鉴别能力。建立中药指纹图谱的方法有很多。这些 方法各有其优缺点和适用条件。目前，许多专家已经尝试将 不同方法联合使用共同建立中药的指纹图谱，取得了很大的
进展。Ｌｉ等㈨研究了２００７年一２０１１年的３５０篇关于ＨＰＬＣ— ＭＳ联用技术在中药分析中的应用的学术论文．重点总结了
分复杂的中药材和带电离子的分析．将其运用于中药的指纹 图谱的研究，已取得可观的成绩。但利用电泳机制在毛细管 中进行分离使得该方法的精确性和灵敏度较低，所以目前的
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综述讲座
中药指纹图谱构建的研究进展
王贞丽
［关键词］
中药；指纹图谱；概述
［中图分类号］Ｒ２８２．５
［文献标识码］Ａ 性，进而可用于丹参药材的评价和质量控制。崔淑芬等［５１利
用ＴＬＣ对甘草药材进行指纹图谱的研究．为甘草药材的质
（王贞丽）
研究结论。Ｙａｎｇ等［１５１通过ＨＰＬＣ指纹图谱和多种有效成分
定量分析结合的手段进行了双黄连口服液的质量评价。通过
ＨＰＬＣ指纹图谱得到４５个共有峰评测了来自不同生产商双
黄连口服液的成分组成的相似性，通过测定每种口服液中 １１种成分的含量评价了口服液质量。结果表明两种方法结
万方数据
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分特性，并可通过对比用于鉴别药材真伪和控制药材质量的
谱（Ｈ咄）分离方法，研究表明流动相为甲醇，丙酮，冰乙酸
佳。Ｒａｉｋｕｍａｒ等㈨采用高效薄层色谱法对合欢苦味药中的２ 种新的大环精胺生物碱药物进行了指纹图谱分析。揭示了合
欢属不同种的叶提取物中生物碱的含量差异很大．可用于不 同物种的鉴别。
色谱或光谱的图谱。中药指纹图谱可以全面且直观地反映中
１．１色谱法
目前用于构建中药指纹图谱的色谱法主要有
薄层色谱法（ＴＬＣ）、高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）、气相色谱法 （ＧＣ）、高效毛细管电泳法（ＨＰＣＥ）和高速逆流色谱指纹图谱
法（ＨＳＣＣＣ）等。
１．１．１
含量进行了测试。周欣等…俐用高效液相色谱法，以１９个主
要共有峰为评价指标建立了铜仁地区丹参药材的共有指纹 图谱。林海禄等［１２１利用改进的ＨＰＬＣ法对夏枯草中熊果酸的 含量进行了测试，结果表明了该方法的有效性。杨燕［１，］通过 高效液相法尝试对护肝片中绿原酸的含量进行测试．结果表
特点来构造特有的衍射图谱。该方法具有快速简单．节省样
品等优点，目前主要分为单晶衍射法和粉末衍射法。也有文献 利用Ｘ射线衍射法分别对不同中药的指纹图谱进行了研究。
取得了可观的成果［４㈣］。对于植物类药材，它们所含的特殊
活性成分都有其固定的指纹图谱，不同种类之间难以混淆。 而磁共振（ＮＭＲ）是利用不同中药样品中特征成分元素的原
按８：５：３体积比配制，预饱和时间为２０ ｍｉｎ时分离效果最
品监督管理局颁布［中药注射剂指纹图谱研究的技术要求 （暂行）］以来，中药指纹图谱技术受到很大重视，越来越多的 医药学者致力于中药指纹图谱的研究。 所谓中药指纹图谱．是指不同种类或者产地的中药材经 预处理后．通过一定的构建方法得到的能够体现该种药材成
技术．受到外界因素的干扰较小，稳定性强。该方法以气体作
为流动相，具有高效性、检测设备高选择性和灵敏度高等优 点，常用于构建含有易挥发成分的中药材的指纹图谱。近年 来，该方法常与ＭＳ联用，构成ＧＣ—ＭＳ联用技术，这样不但
可以知道不同中药成分中所含挥发性成分的不同。还可以得 到相同或相异成分的名称。
紫外光谱是电子光谱，反映的是
明该方法操作简单，可行性高。李颖“４俐用高效液相色谱法
建立了淫羊藿的指纹图谱，并通过ＳＡＳ统计软件对不同产地
和部位的淫羊藿的质量差异进行了聚类分析，取得了重要的
素的影响，导致薄层色谱法的精确性和重现性比较差．所以
现在薄层色谱法的应用较少。 蒋轶伦等…利用ＴＬＣ法对不同等级，不同产地和不同采 收期的丹参进行了指纹图谱分析，实现了对不同等级丹参的 归属，确立了丹参的最佳采收期。实验证明了该方法的有效 ［作者单位］２６６００ｌ山东青岛，济南军区青岛第一疗养院药剂科
图谱可用于药材的鉴定。纯化合物的ＩＲ具有特征峰，中药材
分子的电子结构特征．一般只有一个或几个形状变化不大的 宽大吸收带。该方法具有操作简单，快速性、重现性好的优 点，常用于对成分简单的中药材指纹图谱的建立。但是，不同
Ｗａｎｇ等［２１１采用气象指纹图谱技术评价并且控制麻风树
种子油的质量。通过对贵州不同产地的１０批样品进行分析。 有１０个共有峰，其中７个被挑选出来用于与标准品对照进