一株鸡白痢沙门氏菌的分离与鉴定

一株鸡白痢沙门氏菌的分离与鉴定畜牧兽医专接本0901：窦莉莎指导老师：陈素娟摘要：鸡白痢沙门氏菌病是危害雏鸡和成年鸡的一种接触感染性疾病。

2010年10月，扬州一养鸡户送来数只鸡至扬州大学动物医院就诊，根据流行病学的调查、临床症状、剖检的病例变化以及实验室诊断，确诊为鸡白痢沙门氏菌病；同时还对分离出的鸡白痢沙门氏菌菌株进行药敏试验，并根据药敏试验结果及时调整用药方案，从而使病情迅速得到控制。

关键词：鸡白痢沙门氏菌；分离；鉴定Isolation and identification of Salmonella pullorumUndergraduate: Lisha DouAdvisor: Sujuan ChenAbstract: Pullorum disease is an acute systemic disease in chicken. In October 2010, one chick-farmer sent a few chicken to Yangzhou University animal hospital for diagnosis from Yangzhou.According to the investigation of epidemiology, the symptom of clinic, the change of pathology and the diagnosis of laboratory, they were infected by Salmonella pullorum disease. Meanwhile, We also carried out the drug sensitive test about the Salmonella pullorum isolated. According to the result of the susceptibility test, We adjusted the drug regimen in time and the disease was controlled quickly.Key words:Salmonella pullorum; Isolation; Identification文献综述鸡白痢沙门氏菌(S. pullorum) 病(简称鸡白痢) 是危害雏鸡和成年鸡的一种接触感染性疾病。

该病呈急性或慢性败血症过程，在雏鸡和成年鸡中所表现的症状和病程有显著不同。

雏鸡主要表现为白色下痢、急性败血症、气喘、呼吸困难并带肝脏、心肌肺器官出现坏死、结节或坏死灶为主要的临床病理特征，发病率、死亡率较高，是严重危害雏鸡的一种常见疾病。

成年鸡多为慢性或隐形感染，成年鸡感染后呈纤维素性腹膜炎、肝肿大、肠道肿胀出血等特征[1 - 3 ]。

1.病原1.1细菌学检查鸡白痢的病原是鸡白痢沙门氏菌(S.Pullorum)。

其形态为两端稍圆的细长杆菌(0.3～0.5μm ×1～2.5μm)，革兰氏染色阴性，不运动，无荚膜，不形成芽孢，兼性厌氧。

外界环境中耐寒，不耐热，在沸水中立即死亡，但在蛋内需煮沸5min方可杀死，一般消毒剂在短时间内都能将其杀死。

该菌仅感染鸡与火鸡，在病鸡的肝、肺、肠、卵黄囊、心及血液中含菌量最高[1]。

1.2形态观察将纯培养物进行涂片染色镜检, 见有革兰氏阴性较短而细小的杆菌, 无芽胞及荚膜。

1.3培养特性将纯培养物分别接种在普通琼脂、鲜血琼脂、麦康凯琼脂平板及普通肉汤中经37℃培养24h后，在普通琼脂平板上长出圆形、边缘整齐、湿润、稍隆起的光滑菌落；在血琼脂平板上菌落特点与普通琼脂平板上相同，未见有溶血现象；在麦康凯琼脂上生长出透明而稍带黄色的菌落，其大小、形状与鲜血平板相同；在普通肉汤中肉汤轻度混浊，管底有絮状沉淀，无菌膜及菌环。

2.流行特点各品种的雏鸡对白痢都有易感性，在3日龄以前发病率和死亡率都很高，病程有时可延续到3日龄以后。

鸡白痢的主要传染源是病鸡和带菌鸡，传染途径主要是消化道，既可水平传播又可垂直传播。

带菌鸡的卵巢和肠道含有大量病菌，病鸡排出的粪便中含有大量的病菌，它容易污染饲料、垫料、饮水及饲养用具，当雏鸡接触到这些污染物之后则被感染。

感染鸡所产的蛋内含有多量的病菌，对有啄蛋或食蛋癖的鸡也可感染。

用病鸡所产的带菌种蛋，或使用被病菌污染的孵化机进行孵化，都可传染白痢。

因为刚出壳的雏鸡，抗病力很差，摄食到含有病菌的尘埃后，往往很快发病。

饲养管理不良，如雏鸡拥挤，饲养密度过大，环境卫生不好，温度过高过低，通风不良，饲料品质差或营养不全，以及有其他疫病感染时，都可成为诱发白痢的因素。

此外，通过断喙、性别鉴定及苍蝇、老鼠也能传播白痢[2]。

3.临床症状带菌种蛋孵出的雏鸡出壳后不久可见虚弱昏睡，进而陆续死亡。

常在3～7日龄发病量增加，10日龄达到死亡高峰。

出壳后感染的雏鸡，一般在5～10日龄开始发病，2～3周龄雏鸡白痢发病和死亡达到高峰。

病雏精神萎靡，不喜欢活动，闭目打瞌睡，缩颈低头，两翅下垂，后躯下坠，怕冷，靠近热源，多数病雏呼吸困难而急促，后腹部快速地一收一缩。

病雏排粪时常发出“叽叽”的痛苦尖叫声，排出白色、浆糊状粪便，肛门周围的绒毛常被粪便污染并与粪便粘在一起，干结后形成硬块，堵塞肛门。

3周龄以后，发病的雏鸡一般很少死亡。

成年鸡一般无明显症状，母鸡表现为产蛋量、受精率和孵化率下降，极少数的病鸡精神萎顿，食欲减少，产蛋停止，排白色粪便，有的可因卵黄囊炎引起腹膜炎，使腹膜增厚，腹部下垂[2]。

4.剖检病变4.1雏鸡早期死亡的急性病雏，剖检时无明显病变，可见肝轻度肿大充血，间有出血，胆囊扩张，充有多量胆汁，肺脏充血或出血。

病程稍长，病鸡卵黄吸收不全，其内容物呈油脂状或豆腐渣样。

病死雏消瘦，嗉囊扩张，脾肿大、充血，砖红色，有很特殊的条纹；肝、脾、心及肌胃上面有灰白色结节。

盲肠有白色的干酪样堵塞物。

泄殖腔有白色恶臭稀便。

4.2育成鸡病鸡一般营养中等或偏下。

突出的变化是肝脏肿大，有的肝脏较正常肝脏大数倍；脾脏肿大；心包增厚，心包扩张，心包膜呈黄色不透明，心肌可见有数量不一的黄色坏死灶，严重的心脏变形、变圆，整个心脏被坏死组织代替；相同的变化还经常在肌胃上见到；肠道呈卡他性炎症。

4.3成年鸡母鸡呈慢性经过。

最典型的病变是卵巢上卵泡变形、变色，晦暗无光。

卵内容物呈干酪样，有时卵泡破裂引起卵黄性腹膜炎，或有卵黄堵塞输卵管。

公鸡睾丸极度萎缩，睾丸炎，输精管增大，并充满稠密的渗出物，心囊积液。

5.诊断鸡白痢沙门氏菌病可根据流行病学特点，临床症状、剖检变化综合分析，做出初步诊断，但其他病原微生物感染也会出现类似的剖检变化，还要考虑有无混合感染的问题，所以确诊还要通过病原分离培养，染色镜检、生化试验、致病性试验等[6]。

6.防制要以预防为重点，从种鸡做起，种鸡场应定期进行检疫，淘汰阳性种鸡，取干净的种蛋入孵，从孵化到育雏的各个环节要严格消毒。

6.1预防本病传染源主要为病鸡和带菌鸡，传播途径有水平传播和垂直传播。

带菌公鸡可通过精液将病原传给母鸡，因此公鸡的白痢净化尤为重要。

对种鸡的鸡白痢净化和对种蛋彻底进行消毒是控制该病发生的重要措施，对预防初生雏鸡白痢尤其重要。

出壳雏鸡用敏感药物预防性加药有很好的控制作用；坚持自繁自养，如确需引进，而需对引进鸡场进行鸡白痢检测咨询，确定为无鸡白痢鸡群后，方可引进；对种蛋进行严格的熏蒸消毒。

加强育雏期卫生，定期对环境及各种育雏器械进行消毒，以便杀灭环境中的细菌。

各种应激因素：如饲养密度大，长途高温或低温运雏，通风不良，舍内温度过高或过低，卫生条件不良，饲养管理不善等，都可诱导鸡的发病。

应减少应激因素，改善饲养管理，提高育雏鸡营养水平，加强鸡的抵抗力。

雏鸡、产蛋鸡、种鸡不要乱投药，应根据药敏试验的结果选择敏感药物防治鸡白痢病，注意地区耐药菌株的出现，要定期给种鸡投药，加强鸡舍消毒，消除沙门氏菌的带菌污染。

若其中有一个种鸡场白痢净化后未进行鸡舍消毒，结果不出一个月必将导致鸡白痢的污染，重测时白痢阳性率增高。

在刚出壳时雏鸡进行敏感药物注射或饮水预防雏鸡白痢，有很好的预防效果，一般在1～5日龄和7～10日龄时各加药一个疗程。

6.2治疗6.2.1早用药在雏鸡首次开食和饮水时就添加防治鸡白痢病的药物，不要等到第二天或第三天，甚至出现临诊症状后再加药。

6.2.2药量足每千克饮水中加5%氟哌酸3g；每千克饲料中拌0.1%片痢特灵3～4片，但应注意将药物和饲料拌均匀。

6.2.3按疗程用药治疗鸡白痢药物在没有特别说明的情况下，一般都以连续用药3天为一个疗程。

不足3天，由于用药时间短，达不到预防和治疗鸡白痢的目的；超过3天，除容易产生抗药性外，又容易造成药物在体内蓄积而使鸡群中毒。

6.2.4交替用药为防止细菌对药物产生抗药性和鸡群因用药时间过长而中毒，抗鸡白痢药物应交替使用。

第一个疗程结束后，紧接着从8日龄开始，每10千克饮水中加入恩诺沙星5g，连饮7天；每千克饲料中加入土霉素3～4g，连喂7天。

以后再根据鸡群情况加喂其它抗鸡白痢药物，或重复第一个疗程。

6.2.5科学饲养根据上面的防治方案，能够有效地预防和治疗雏鸡白痢病，但要彻底杜绝该病的发生，必须建立一整套科学的饲养管理程序，并贯彻于育雏、育成、种鸡饲养、种蛋的收集、消毒、孵化等整个养鸡的全过程[7]。

正文部分鸡白痢沙门氏菌( S . pullorum) 病(简称鸡白痢) 是危害雏鸡和成年鸡的一种接触感染性疾病。

鸡白痢是由鸡白痢沙门菌引起的一种多发性传染病，雏鸡发病表现急性败血症经过，以发热、拉灰白色粥样或黏性液状粪便为特征；成年鸡发病以生殖系统损害为主的慢性或隐性感染为特征。

由于我国集约化养鸡业的快速发展，鸡病的种类逐渐的增多；另外由于各类抗生素药物的广泛应用、长期应用、不足量应用、反复应用，使某些菌株产生耐药性，使用药物治疗时疗效不明显。

2010年10月，扬州一养鸡户送来数只鸡至扬州大学动物医院就诊，根据病史和流行病学的特点，病理解剖变化，初步诊断为鸡白痢沙门氏菌病，并对其进行细菌进一步分离和鉴定。

1.材料1.1病例1.1.1病料来源病料来源于初步诊断为鸡白痢沙门氏菌病的12日龄草鸡3只。

1.1.2临床症状发病鸡症状表现为精神委靡，羽毛蓬松杂乱，两翅下垂，食欲不振或废绝，鸡冠苍白皱缩，排黄绿色和白色稀粪，沾污肛门周围羽毛。

1.1.3剖检变化病死鸡只剖检可见肝肿大变脆, 充血, 色淡发黄；肠壁变薄, 有出血点。

无菌采取肝脏典型病料放于无菌的平皿里，放入4℃冰箱里冷藏，以备用。

1.2培养基1. 2.1LB培养基：称取蛋白胨10g、酵母粉5g、氯化钠10g于蒸馏水中至950ml，溶解完全，用10N的NaOH调PH于7.0后定容至1000ml，分装，按1.5%（m/v）的琼脂粉加入，121℃ 15min高压灭菌，浇板。