天然产物活性成检测
天然产物的生物合成和分析
天然产物的生物合成和分析天然产物是指在自然界中存在的化合物,它们通常是由植物、昆虫、动物等生物合成而成的。
这些化合物具有丰富的结构和多种生物活性,因此受到了广泛的研究和应用。
本文将讨论天然产物的生物合成和分析。
一、天然产物的生物合成天然产物的生物合成是指在生物体内通过一系列化学反应,合成出具有生物活性的化合物。
这些反应通常由酶催化,具有高度的专一性和选择性。
天然产物的生物合成研究不仅有助于揭示生物体内的代谢机制和信号途径,还可以为合成类似化合物提供新的思路和方法。
1. 植物天然产物的生物合成植物天然产物是一类具有广泛应用价值的生物活性化合物。
它们通常由植物体内的次生代谢途径合成而成,具有丰富的结构和多种生物活性。
近年来,人们通过基因工程技术和代谢工程技术,成功地合成了许多重要的植物次生代谢产物。
以桃金娘素为例,这是一种具有抗癌活性的植物次生代谢产物。
其生物合成途径包括三个步骤:首先,酪氨酸经过芳香族羟化反应合成出芳香族氨基酸酪氨酰苯丙氨酸;然后,苯丙氨酸和酪氨酸通过CYP80G2催化的羟基化反应,生成3,4-二羟基苯基-2-甲基丙酮(DHP),这是产生桃金娘素的关键步骤;最后,DHP通过几步复杂的反应合成出桃金娘素。
2. 昆虫天然产物的生物合成昆虫天然产物是指由昆虫体内生物合成而成的具有生物活性的化合物。
这些化合物通常用于调节生殖行为、捕食行为和保护自身等。
昆虫天然产物的生物合成研究可以为新型昆虫药剂和农药的研发提供重要的信息和思路。
以昆虫性信息素为例,这是一种具有重要生物学意义的天然产物。
其生物合成途径较为简单,例如拟谷盗螟(Sitotroga cerealella)产生的性信息素雌性内酰胺,其合成途径可以概括为以下几个步骤:首先,赖氨酸和酸性共轭酮反应生成酮酸,然后,酮酸酰基转移生成酮酸酰胺,最后,酮酸酰胺通过酰肽合成反应生成雌性内酰胺。
二、天然产物的分析天然产物的分析是指对天然产物进行物理、化学和生物学等方面的分析和鉴别。
天然药物活性成分的研究
❖ 所谓高水平重复,即新药的研发水平很高, 如有效成分新药或有效部位新药,但每个新 药的申报单位有很多家,如丹参总酚酸及其 制剂、红花总黄色素及其制剂、羟基红花黄 色素A及其制剂等,每个新药都有多家申报, 有些甚至有十多家申报;人参中主要有效成 为皂苷类,人参皂苷Rg3是第一个开发成为 一类新药的皂苷,其他单位开发了Rh、Re 等皂苷,目前还有一些其他皂苷正在开发中。
23
目前国际上多数创新药物都是通过这一途径发 现的,从国际上申请的专利也可以看出,一 般一个活性化合物,其合成的衍生物都在数 十个,甚至上百个。而在我国,天然产物研 究与合成是基本脱节的,从事天然产物研究 的人员大多不懂合成,从事合成的人员对结 构改造也不感兴趣,这也是我国极少发现新 的化学实体药物的主要原因之一。另外,近 年来的大量研究表明,中药或天然药物的成 分在体内极易产生代谢,从其代谢产物中发 现活性成分,也是创新药物发现的一个重要 途径。
21
对分离后的各个部分进行进一步的活性筛选,发现 活性部位;采用色谱方法对活性部位进行化合物的 分离和结构鉴定;对分离的化合物进行活性筛选。 在此筛选过程中,有时会发现某一部位活性很强, 但进一步分离成单体化合物后活性没有提高,甚至 降低的现象,这可能是由于中药的各成分之间存在 着协同作用导致的。这时可以把相应的活性部位研 发成为新药,即有效部位新药。如果发现某一单体 化合物活性很强,具有临床应用前景,就可以把单 体化合物研发成为新药,即有效成分新药。但在活 性成分研究中,大部分情况是分离的化合物具有一 定活性,但活性不太强,或毒性很大,没有临床使 用价值,这类化合物被称为活性先导化合物,可进 人结构改造程序。对于没有活性的化合物,将其贮 存在样品库中,供其他活性筛选。
天然药物活性成分的研究
天然产物
天然产物活性成分的分离提取技术应用摘要:天然产物有效成分分离及结构鉴定是非常重要和活跃的研究领域, 从中可以发现和利用其重要的生物活性组分。
通过现在各种新技术的应用,可以更加精确地对各种天然产物进行分离提取,并对其中的多种有效成分进行鉴定,同时可以创新天然产物中生物碱、黄酮类、萜类、皂苷类、酚酸类、香豆素类有效成分的分离、纯化及结构鉴定新方法,这对生物制药,保健品开发有着极其重要的推动作用。
关键词:天然产物;分离提取;鉴定;新技术天然产物活性成分是指从再生资源中提取的具有独特功能和生物活性的化合物,其中许多有效成分是疾病防治、强身健体的物质基础。
通过体内外试验和临床验证证明了它们具有抗氧化、抗衰老、抗菌消炎、抗癌、提高免疫力、降血脂、降血糖等功效。
目前,国内外对天然产物活性物质进行了全方位和多领域的研究,研究其原料及原料的栽培和培养技术,以期获得高含量活性成分的原料,研究天然产物的提取分离制备技术、活性物质的构成与结构、功效和机理等,方兴未艾。
研究的主要目的和实际的应用在于开发生产功能保健食品、添加剂或药品。
我国目前生产的天然产物产品占国际市场的份量相对较低,这与我国提取、分离与鉴定技术落后、设备现代化程度低等研究条件不无关系。
因此,要充分挖掘天然产物独特优势,实现其产品应用现代化,其首要问题是解决天然产物中活性成分的提取与分离技术问题。
近年来,随着一些新技术不断涌出,极大地提高了有效成分的收率和纯度以及中药制剂的有效性、稳定性。
本文将就天然产物以及新兴的提取分离技术进行论述。
一提取分离天然产物过程中应用到的新技术天然产物的提取分离制备技术,传统方法主要是溶剂萃取,如热水浸提、碱液提取和醇类提取等。
其它溶剂的考察主要集中在如丙酮、乙酸乙酯、乙醚、苯、氯仿、正丁醇等有机溶剂对活性物质的提取上,但新技术的应用使天然产物活性成分的生产周期大大缩短,功耗大幅降低,极大地提高了活性成分的收率和纯度以及产品的有效性、稳定性。
第二章 天然产物的研究现状
全合成
Corey 等1975年报道了拆分法全合成喜树碱(camptothecin,CPT)的方 法。以21为原料经多步反应得到3,4-二取代呋喃-α-羟基酸(24),经拆 分非对映异构体喹啉盐、碳酸酯保护内酯环的α-羟基得到光学纯(25), 再经光照氧化、SOCl2氯化得到(26),最后与三环胺缩合、脱保护即 得到喜树碱(S)-CPT(27)。
在天然产物中,生物碱占有很大的比重,其生物活性 很强、种类繁多,分为:
吡咯类生物碱、 哌啶类生物碱、 喹唑啉类生物碱、 咪唑类生物碱、 异喹啉类生物碱、 吲哚类生物碱、 嘌呤及黄嘌呤类生物碱、 大环类生物碱、萜类生物碱、甾类生物碱、有机胺类
生物碱等十几大类。 在抗癌、抗菌、降血压、抗HIV等方面具有重要应用。
(a) MeO2C
[4+2] CO2Me
OH
(b)
H
H
KH, heat 18-crown-6
CO2Me (c)
MeO2C
[4+2]
CO2Me [4+2] CO2Me
O
O
hv
heat
H
TMSO
[4+2]
O
CO2Me
CO2Me CO2Me
串联仿生反应的出现反映了合成化学家希望能模仿自然界神奇的 力量,简单、方便的合成出天然产物。早期托品酮(tropinone) (28)的合成就采用了这种方法。
COOH
30%
O
O
4 steps
COOH
21
CH2OTHP 69%
COOH
O 4 steps
22
CH2OTHP t-BuSiMe2CN 85%
CCH2CH3
O
新药开发中天然产物化合物及其活性成分筛选方法研究
新药开发中天然产物化合物及其活性成分筛选方法研究引言:新药研发一直以来都是医学领域的热门话题。
天然产物一直被认为是潜在的药物发现源之一,因其丰富的化学结构和多样的生物活性,具有很高的研发潜力。
然而,天然产物的化合物复杂性和数目巨大,给新药开发带来了巨大的挑战。
因此,为了高效地筛选出潜在的候选药物,研究人员不断探索和改进天然产物化合物及其活性成分的筛选方法。
一、天然产物化合物的筛选方法1. 分离提纯法分离提纯法是天然产物化合物筛选中常用的方法之一。
它通过分离和提纯天然产物中的化合物,以获得纯度较高的样品。
其中,色谱技术是最常用的分离方法,如薄层色谱、柱层析、高效液相色谱等。
此外,也可以利用电泳、凝胶过滤等技术进行分离和提纯。
2. 特异性活性筛选法特异性活性筛选法是根据目标疾病的特异性,选择与该疾病相关的生物活性进行筛选。
例如,针对癌症的筛选,可以使用细胞毒性实验、增殖抑制实验、动物模型实验等方式进行筛选。
这种方法可以判断化合物对目标疾病的选择性和效力,有助于筛选出具有较高抗癌活性的化合物。
3. 靶向筛选法靶向筛选法是针对特定的靶标蛋白进行筛选,以寻找具有结合活性的化合物。
常用的方法包括酶活性抑制实验、配体结合实验和分子对接模拟等。
通过这些实验可以评估化合物与靶标蛋白的亲和力和结合能力,从而筛选出有潜力的药物候选物。
二、活性成分的筛选方法1. 生物活性指导筛选法生物活性指导筛选法是通过生物抗活性实验指导活性成分的筛选。
该方法首先筛选出活性提取物或化合物,然后利用各种生物试验体系,如细胞系、动物模型等,评估其活性。
通过比较不同样品的活性,可以确定具有较高活性的活性成分。
2. 代谢组学方法代谢组学方法通过研究生物体内组织和细胞的新陈代谢过程,分析化合物与生物体之间的相互作用。
通过这种方法,可以筛选出与药物代谢有关的活性成分,并评估其对目标疾病的潜在治疗作用。
3. 分子对接模拟方法分子对接模拟方法是通过计算机模拟化合物与靶标蛋白之间的结合,从而预测其活性和亲和力。
天然产物分析鉴定
一
脏 、肾脏、免疫系统、肿瘤 以及抗 氧化方 面的广泛
理 药活 性 进 行 了全 面 综 述 ,为 全 面 开 发 利 用 番 红 花
资源提供参考。
口 一D一葡萄糖 苷 ( 、棕榈 酸 一1 X) 一单 甘没 醇
维普资讯
・
2 ・ 6
天然产物分 离
20 0 6年第 4 卷第 3期
时珍 国医国药 ,2 0 1 3 :3 8 3 9 0 6 7( ) 8 - 8 优选大黄 中大黄素 的提取条件 。利用正交实验 对大 黄中 的大黄素进 行 乙 醇 回流 提取。以温 度 8 0 ℃ ,乙醇浓 度 9 %,乙醇用量 8 0 倍量提取大黄素 的
物 ,对 急性 非 淋 巴 细胞 性 白血病 和慢 性 粒 细胞 性 白
血病有较好疗效。综述 了三尖 杉属植 物的化 学成分 与药理活性研究进展 ,包括各类化合 物的结构 、药 理活性 、活 性 成 分 及 衍生 物 的构 效 关 系、H 和 T H T的药理机制研究等。 H
近年来有关红景天多糖的化学与药理研究进展 ,以 利红景天的深度研究 和开发利用。
红药化学成分的研究
维普资讯
20 06年 第 4卷 第 3期
天 然产 物分 离
・2 ・ 7
中国中药杂志 , 06 1( ) 0 -38 2 0 ,3 4 :37 0 分离鉴定 红药 干燥茎 的化 学成 分。甲醇提 取 , 硅胶、Sp ae H一 0 O S柱 色谱分离 ,采用 ehdxL 2 及 D N MR和 MS 等方法确定化合物 的结构 。结果 :分离 鉴定 了 7个化合物 ,分别为 2 y r y 一m ty 一hdo 一7 e l x h
天然产物中活性成分提取分离及分析技术
天然产物中活性成分提取分离及分析技术一、概述作为自然界赋予人类的宝贵财富,一直以来都是药物研发、医疗保健、食品工业等领域的重要原料来源。
活性成分是天然产物发挥生物活性的关键所在,具有广泛的应用前景和巨大的经济价值。
对天然产物中活性成分的提取、分离及分析技术的研究,不仅是推动相关领域技术进步的关键环节,也是实现天然产物高效利用和可持续发展的必然要求。
天然产物中活性成分的提取分离技术,涉及物理、化学、生物等多个学科领域,具有高度的复杂性和挑战性。
天然产物中的活性成分种类繁多、结构复杂,且含量往往较低,使得提取分离过程变得尤为困难。
不同的活性成分在性质、稳定性等方面存在显著差异,需要针对不同成分的特性制定相应的提取分离策略。
随着科学技术的不断进步,越来越多的新技术和新方法被应用于天然产物活性成分的提取分离领域。
这些技术不仅提高了提取分离的效率和质量,也拓展了天然产物活性成分的应用范围。
分析技术的发展也为活性成分的结构鉴定、生物活性评价等提供了有力的支持。
尽管天然产物活性成分提取分离及分析技术取得了显著的进展,但仍面临着诸多挑战和问题。
如何进一步提高提取分离的效率和纯度,如何实现对活性成分的全面深入了解,以及如何将这些技术更好地应用于实际生产中,都是未来需要重点研究和解决的问题。
1. 天然产物的定义与分类是指未经人为加工、改造,而由自然界直接产出的各种形式的生命体和具备一定结构的有机化合物。
这些化合物广泛存在于自然界的植物、动物和微生物中,具有多种多样的生物活性。
天然产物作为药物、食品添加剂、化妆品原料等,在人类生产生活中发挥着重要作用。
(1)植物源天然产物:包括各种中草药、植物提取物等,这些天然产物具有多种药理活性,是药物研发的重要来源。
许多中药材如人参、黄芪等,含有丰富的活性成分,具有调节人体代谢、增强免疫力等功效。
(2)动物源天然产物:包括海洋生物、昆虫、动物组织等中提取的活性物质。
这些天然产物具有独特的生物活性和结构特点,在抗肿瘤、抗病毒等领域具有潜在的应用价值。
天然产物的结构分析与合成
天然产物的结构分析与合成自然界中存在着大量的天然产物,它们来源于植物、动物、微生物等各种生物体,具有广泛的生物活性和丰富的化学结构。
研究天然产物的结构分析与合成,对于开发新药物、发现新功能材料等具有重要意义。
本文将探讨天然产物的结构分析方法与合成途径。
一、天然产物结构分析天然产物的结构分析是研究天然产物的基本环节之一。
通过分析天然产物的结构,可以揭示其化学成分、功能和作用机制。
目前,常用的天然产物结构分析方法主要包括核磁共振(NMR)、质谱(MS)和X射线衍射等。
核磁共振是一种非常重要的结构分析技术,可以用于确定天然产物的分子式、官能团和分子结构。
NMR常用的方法有氢谱(H-NMR)、碳谱(C-NMR)和二维核磁共振等,通过对产物在磁场中的响应进行分析,可以得到丰富的结构信息。
质谱是另一种常用的结构分析方法,主要用于确定天然产物的分子量、分子结构和功能基团。
质谱的原理是利用质谱仪将样品中的化合物离子化,并通过质量过滤器和质谱检测器对其进行分析,得到质谱图,进而推断出化合物的结构。
X射线衍射是一种基于X射线的结构分析方法,可以得到精确的结晶结构信息。
通过将天然产物制备成单晶并进行X射线衍射分析,可以确定其晶胞参数、原子位置和晶体结构,为合成提供重要依据。
二、天然产物的合成途径天然产物的合成是利用化学方法来合成复杂的天然分子的过程。
合成天然产物的目的是获得足够的化合物供应,从而研究其生物活性和开发相关应用。
根据合成途径的不同,可以将天然产物的合成分为全合成和半合成两种。
全合成是指从简单的原料出发,通过一系列化学反应逐步构建目标分子的合成方法。
全合成涉及多种有机合成策略和反应,常用的方法有经典的C-C键形成反应、官能团转化、立体控制等。
全合成可以提供目标分子的足够数量,并且可以对分子结构进行修饰。
半合成是指利用天然产物的一部分结构作为起始物质进行合成的方法。
通常,天然产物中具有复杂和特殊结构的部分可以通过合成得到,然后与其他化合物进行简单的连接和修饰得到目标产物。
精华资料天然产物活性成分检测
000陈羽迪2012332870002 12生物制药(1)茶叶中茶多酚的粗提取与含量测定实验报告000一、实验目的:001、了解并熟悉茶多酚的元素组成、结构构成、理化性质。
2、掌握溶剂萃取法粗提取茶多酚的原理与操作。
3、掌握酒石酸铁比色法测定茶多酚的含量的原理及操作。
004、了解分光光度计的使用方法和注意事项。
000二、实验原理和应用:000茶多酚(Tea Polyphenols)是茶叶中多酚类物质的总称,包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。
其中以黄烷醇类物质(儿茶素)最为重要。
茶多酚又称茶鞣或茶单宁,是形成茶叶色香味的主要成份之一,也是茶叶中有保健功能的主要成份之一。
研究表明,茶多酚等活性物质具解毒和抗辐射作用,能有效地阻止放射性物质侵入骨髓,并可使锶90和钴60迅速排出体外,被健康及医学界誉为“辐射克星”。
00目前国内外茶多酚粗品的提取的方法主要有:溶剂萃取法、离子沉淀法、树脂吸附分离法、超临界流体萃取法、超声波浸提方法、微波浸提法等等。
在这些提取茶多酚的方法中,每种方法都有它各自的针对性和使用范围,使用时要根据各自的情况而定。
根据实验室的条件及实验要求,本实验采用溶剂萃取法对干茶叶中的茶多酚进行粗提取,即利用茶多酚易溶于乙酸乙酯等有机溶剂的原理进行液-液萃取。
000茶多酚的测定方法有高锰酸钾直接滴定法和酒石酸铁比色法,由于高锰酸钾直接滴定法操作比较复杂,且靠肉眼观察颜色判断终点,如果样品溶液颜色较深时,可能影响测定结果。
本实验将应用酒石酸铁比色法测定茶多酚的含量。
酒石酸铁能与茶多酚生成紫褐色络合物,络合物溶液颜色的深浅与茶多酚的含量成正比。
因此可以用比色方法测定。
该法可避免高锰酸钾滴定法所产生的人为视觉误差。
000三、实验仪器、材料和试剂000实验仪器:000分光光度计、干燥箱、电子天平、pH计、真空泵、纱布、漏斗、旋转蒸发仪、250ml 容量瓶、50ml 容量瓶、分液漏斗000实验材料:000干茶叶(市售散装茶即可)000实验试剂:000硫酸亚铁(FeSO4·7H2O) ,酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O) ,磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O) ,磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O) ,乙酸乙酯。
天然产物的药理学和活性成分筛选
天然产物的药理学和活性成分筛选天然产物的药理学与活性成分筛选近年来,随着人们生活水平的提升,对健康的关注度也越来越高。
越来越多的人开始选择通过使用天然产物来维护身体健康。
天然产物,指的是从植物、动物、矿物等自然界中提取的化合物,其中大部分具有药理学活性。
然而,这些药物成分从天然产物中提取的过程非常困难,因为天然产物的化学组成非常复杂,通常包括许多杂质和未知的成分。
为了解决这个问题,科学家们提出了许多筛选和提取化合物的方法,以便从天然产物中提取活性成分。
本文主要讨论天然产物的药理学和活性成分筛选。
1. 天然产物的药理学天然产物是指从自然界中提取的化合物,被广泛用于医学和药物治疗。
因为天然产物是从真正的生命体中分离出来的,所以具有更高的药物活性。
但是,天然产物的药理学研究非常复杂,因为其中的化合物是由许多不同的化学物质组成的,常常涉及复杂的生化机制。
2. 活性成分的筛选化学成分的筛选从基于化合物的化学提取开始。
因为许多天然物质是固体或粘稠或有害的,所以通常需要先将样品处理成可溶液。
接下来,常用的方法是使用chromatography (常见的有TLC、HPLC、GC等),进行化合物分离和纯化。
在此基础上进一步的提取、分离、纯化会根据不同的要求进行不同策略的处理。
为了制备具有特定活性的药品,必须对活性成分进行筛选和测试。
活性成分的筛选是一项复杂的工作,可能需要长时间的实验室研究,使用不同的生化和细胞学技术来测试药物的活性和毒性。
3. 应用天然产物的应用非常广泛,常被用于化妆品、食品、医药等领域。
近年来,越来越多的人开始重视自然植物和动物中的生物活性物质,并将其应用于身体健康领域。
例如,一些草药、水果和蔬菜中蕴含着的天然化合物已被证明可用于治疗许多不同的疾病,如癌症、心血管疾病和神经退行性疾病等。
4. 结论总之,天然产物中富含具有药理学活性的化合物,是治疗多种疾病的一种重要资源。
然而,在天然产物中提取活性成分和现代药物设计中一样复杂。
天然产物的生物活性研究与合成
天然产物的生物活性研究与合成天然产物是指存在于自然界中的化学物质,包括植物、动物和微生物等生物所产生的分子。
这些天然产物具有多样性和复杂性,被广泛用于医药、农业和化学等领域。
天然产物的生物活性研究和合成是一项重要的科学研究工作,对于开发新药、改良农作物、推动化学合成有着重要的意义。
1. 天然产物的生物活性研究天然产物的生物活性研究是指对天然产物的生物学活性进行深入研究和评价。
这项工作通常包括以下几个方面:1.1 生物筛选通过生物筛选,可以初步评估天然产物的生物活性。
生物筛选主要通过将天然产物或其衍生物与特定的生物目标进行反应,如细菌、病毒、癌细胞等,观察其是否对目标生物产生生物学效应。
筛选出具有潜在生物活性的化合物后,进一步进行更深入的研究。
1.2 结构活性关系研究结构活性关系研究是指通过对一系列同类结构的天然产物进行生物活性测试,揭示其结构与活性之间的关系。
这种研究有助于人们了解天然产物的活性部位和结构要素,指导后续的合成优化和药物设计。
1.3 机制研究天然产物的生物活性机制研究是指对其在生物体内的作用机制进行研究,揭示其生物学效应的发挥途径和分子靶点。
这种研究可通过分子生物学、细胞生物学和生物化学等多学科的手段进行。
2. 天然产物的合成天然产物的合成是指通过化学方法,从简单的起始原料合成目标天然产物的全合成或半合成过程。
2.1 全合成全合成是指从最基本的有机化合物出发,通过一系列反应步骤逐步构建目标天然产物的结构骨架,最终合成出完整的分子。
全合成通常需要解决反应选择性、立体选择性和合成步骤的优化等问题。
2.2 半合成半合成是指以天然产物为起始物质,通过合成化学的手段,对其结构进行修饰和改良。
半合成的优势在于可以通过结构改良,提高天然产物的药物活性或稳定性,或者引入新的化学团,赋予其新的功能。
3. 天然产物的应用前景天然产物的研究和合成对推动科学技术的发展和社会进步有着重要的作用。
3.1 新药开发许多现代药物都源自于天然产物,如青霉素、紫杉醇等。
天然产物的药物活性成分筛选研究
天然产物的药物活性成分筛选研究随着社会的发展,人们对健康和医药技术的要求也越来越高。
在现代医学技术中,药物是医生治疗疾病的一种重要手段。
传统医学中的草药也被越来越多的人所接受和研究。
作为天然产物的药物活性成分筛选研究,是目前医学领域中一个重要的课题。
理论缘由天然产物是指以自然植物、动物、矿物为原材料,通过传统加工技艺或现代技术,制成的药材、食品和保健品等产品。
天然产物在医学和生物学上也被广泛运用。
在化学结构多样的天然产物中,有许多具有药理活性成分。
这些活性成分,是由于原材料的生长环境、植物的生长年限、收获季节、产地等因素的影响而产生的。
因此,对天然产物及其药理活性成分的筛选研究,对于开发新型药物有着重要的意义。
方法探讨天然产物的药物活性成分筛选研究方法多样,包括传统的化学分离方法、生物技术方法和高通量筛选法等。
其中,正交试验是一种常用的天然产物活性成分筛选方法。
正交试验可以同时考察数种因素对反应的影响,而不必反复操作多次。
因此,这种方法能够快速地筛选出具有活性成分的植物。
此外,高通量筛选法也是一种新兴的筛选方法。
高通量筛选法可以在短时间内对数以万计的样品进行筛选,具有高效和准确性等优点。
这种方法通常用于对特定靶点的活性成分的筛选。
通过对靶点的分子结构进行分析,可以快速地锁定目标成分,而避免了对大量样品进行分离和提取的繁琐过程。
研究意义天然产物的药物活性成分筛选研究在未来医药发展中具有广阔的发展前景。
一方面,天然产物中具有活性成分的药材可以作为一种新型药物开发的有力领域。
另一方面,天然药物作为传统筛选方法的重要组成部分,应成为众多新型药物组成的重要部分。
此外,研究也有利于加强人们对传统中药的认识和了解,促进中华文化的传承和发扬。
未来展望天然产物的药物活性成分筛选研究,有望在未来医药领域得到更广泛的应用。
新兴的技术手段和方法,将为研究提供强有力的支撑。
未来将有更多的研究团队,加入天然产物药物活性成分筛选的研究中,探索更多植物的活性成分,并将其应用于新型药物的开发中。
天然产物的全合成及其生物活性研究
天然产物的全合成及其生物活性研究天然产物是指来源于自然界的化合物,具有广泛的生物活性和药理学效应。
然而,由于天然产物数量有限,往往存在于自然界中的量极少。
为了克服这个问题,科学家们通过全合成的方法来合成这些复杂的化合物,并研究它们的生物活性。
本文将探讨天然产物的全合成研究以及其与生物活性的关系。
天然产物的全合成是指利用有机合成化学方法将复杂的天然产物从简单的起始原料合成出来的过程。
由于天然产物的结构复杂性和立体选择性,合成过程具有一定的挑战性。
然而,随着合成化学的不断发展,许多复杂天然产物的全合成研究取得了重要的突破。
在天然产物的全合成研究中,研究人员往往采用多步反应的方法,逐步构建复杂的分子框架。
这些反应包括碳碳键的形成、羰基化合物的还原和氧化等。
通过合理选择反应条件和催化剂,研究人员可以高效地合成目标天然产物。
此外,新兴的合成方法如金属有机化学和过渡金属催化反应也为天然产品全合成带来了新的机遇。
天然产物的全合成不仅有利于解决天然产物供应不足的问题,还促进了对天然产物的结构和生物活性之间关系的研究。
通过合成具有不同结构变体的天然产物,研究人员可以评估其生物活性,并进一步了解结构与活性之间的关系。
这有助于我们设计和合成更有效的药物分子。
从合成天然产物到评估其生物活性,这个过程需要大量的化合物筛选和活性测试。
通过高通量筛选技术,研究人员可以快速筛选出具有潜在生物活性的化合物。
同时,利用现代生物技术手段,如蛋白质结晶学、核磁共振等,可以对合成的化合物进行结构分析和活性评估。
天然产物的全合成及其生物活性研究在药物研发中具有重要意义。
许多著名的药物分子,如紫杉醇、秋水仙碱等,都是通过全合成的方法获得的。
通过合成天然产物,研究人员可以优化其结构,改善其药理活性,并研发针对特定疾病的治疗方法。
综上所述,天然产物的全合成及其生物活性研究为药物研发提供了重要的方法和思路。
通过合成复杂的天然产物,我们可以不断深入了解其结构和活性之间的关系,并通过这些研究为新药研发提供指导。
天然产物生物活性成分的研究与应用
天然产物生物活性成分的研究与应用随着人类文明的不断进步,对于健康和美丽越来越重视,因此,在现今社会中,越来越多的人选择食用或使用天然产物的产品,以获得更好的保健和美容效果。
这一趋势的推动,也加速了关于天然产物生物活性成分的研究与应用。
什么是天然产物生物活性成分?天然产物生物活性成分是指天然植物、动物或微生物中所含的具有生物活性的基本物质,如黑枸杞中所含的多种黄酮类化合物、橄榄油中的多酚等。
这些生物活性成分,经过现代科技手段的提取和加工,可以应用于食品、保健品、化妆品等领域,并可以帮助人们保持健康、提升身心素质。
天然产物生物活性成分的研究随着现代科技技术的不断提高,对于天然产物生物活性成分的研究也得到了迅速的发展。
通过现代科技手段,研究人员可以更加有效地提取天然产物中的生物活性成分,并对其进行深入的研究分析。
例如,研究人员可以使用色谱、质谱、核磁共振等技术手段,对天然产物中的生物活性成分进行分离和鉴定,以确定具体的化学结构和功能。
此外,为了进一步研究天然产物生物活性成分的生物学效应,研究人员也使用细胞培养和动物实验等方法,探究其对人体肥胖、肿瘤、血脂异常等疾病的治疗效果。
这些研究成果不仅推动了天然产物生物活性成分的应用,也为人们提供了更为有效的健康保护手段。
天然产物生物活性成分的应用天然产物生物活性成分的应用范围非常广泛,可以应用于食品、保健品、化妆品等多个领域。
在食品行业中,天然产物中的生物活性成分可以增加食品的口感和营养价值,并可以减轻或预防某些疾病。
例如,蓝莓中含有大量的花青素,可以增强人体免疫功能和视力,降低心脏病的风险。
在保健品和化妆品行业中,天然产物中的生物活性成分可以起到滋补、美容、延缓衰老的作用,被广泛应用于各种保健品和化妆品中。
例如,雪莲花中的多种芳香物质,可以帮助缓解情绪、提高神经系统兴奋性,并被应用于多种保健品和化妆品中。
总之,天然产物生物活性成分的研究和应用,不仅有助于开发更多的健康保护产品,也可以促进科学技术的进步,为人类的健康和美丽事业作出更大的贡献。
天然产物与合成产物的生物活性比较
天然产物与合成产物的生物活性比较生物活性是指化合物对生命体产生影响或作用的能力,主要包括抑制细胞增殖、降低炎症反应、防止氧化应激等方面。
天然产物是指自然界中存在的有机或无机化合物,合成产物是指在实验室或工业过程中通过化学反应等方法人工合成的化合物。
近年来,随着生物技术和化学技术的不断发展,人们对天然产物和合成产物的生物活性进行了深入的研究和比较。
本文将从不同角度探讨天然产物与合成产物的生物活性比较。
一、天然产物与合成产物在生物活性上的差异天然产物和合成产物在化学结构上存在显著的差异,这也导致它们在生物活性方面存在一定的差异。
天然产物是由植物、动物或微生物等自然来源提取得到的化合物。
它们具有较为复杂的化学结构,具有多种生物活性分子,如碱性物质、醇类、酮类、酸类等,具有广泛的应用价值。
而合成产物则是经过人工合成的化合物,它们往往具有较为简单的结构,并且可以通过人工调整分子结构来增强其生物活性。
相比之下,由于天然产物的来源复杂,其制备方法和提取含量也存在较大的差异,因此天然产物的生物活性通常难以预测和控制。
二、天然产物与合成产物在医学上的应用在医学领域,天然产物和合成产物也有着不同的应用场景。
由于其天然来源、成分复杂、副作用小等优点,天然产物在医学领域得到了广泛的应用。
例如,茶树油和薄荷油具有很好的杀菌消毒作用,在口腔护理、皮肤护理等方面得到广泛的应用。
另外,中药也是一种天然产物,近些年来已经成为很多人的健康保健和医疗首选。
然而,尽管天然产物存在着许多优点,但是其生物活性的确认和利用仍然需要更多的研究和实验。
相比之下,合成产物则更加符合医药需求,可以通过人工调控提高其生物活性和可控性。
目前很多市面上的药物,如抗肿瘤药物、心血管药物等都是通过现代化学技术实现的人工合成,虽然合成产物往往比天然产物更具有毒性,但是在医学上存在着广泛的应用价值。
三、天然产物和合成产物的结合在这种情况下,总想将天然与合成相结合,以期望在生物活性方面获得最大的优势。
天然产物的合成及其生物活性机制研究
天然产物的合成及其生物活性机制研究天然产物一直以来都是有机化学领域非常重要的研究对象,因为它们拥有很多优秀的生物活性,并且以天然的方式合成出来,不仅能够被我们自身利用,还可以直接用于人类医疗健康及其他领域的研究开发。
因此,对于天然产物的研究一直是有机化学领域里的一个热门话题。
本篇文章将围绕天然产物的合成和生物活性机制两个方面展开讨论。
一、天然产物的合成天然产物的合成过程一般可以分为化学和生物两种方式。
其中化学合成方式可以进一步分为传统的有机合成和现代的金属有机化学合成两种。
1.传统的有机合成传统的有机合成方式是指利用有机化学反应原理,通过一些简单或复杂的有机反应过程来制备天然产物。
在这个过程中,可以利用天然产物本身的某些化学特性,然后通过加入化学试剂来改变反应路线或控制反应选择性等,从而得到我们想要的产物。
例如,在一些天然源中可以发现一些特殊的反应中间体,例如不对称二烷基化产物、不对称分子加成产物等,我们可以利用这些中间体,来得到一些异构体多样,结构更为复杂的化合物。
同时,这些中间体的形成也为新的合成方法和反应机理探索提供了契机。
2.现代的金属有机化学合成现代的金属有机化学合成方式则是利用金属催化剂,在化学合成中起到了至关重要的作用。
由于金属催化剂的引入,使得不少原本具有困难的反应可以实现,并且合成路线比起传统的那些过程会更加优美、高效和经济。
例如,在天然产物等方面,金属催化剂的引入可以实现一些基础化学反应,如烯基化反应、氧化反应、还原反应和芳香基化反应等,从而得到了更加有用的产物。
与此同时,金属有机化学合成在天然产物的研究中还发现了很多有趣的现象,例如金属催化剂可以选择性地识别和促进某些特殊的化学反应路线,从而得到新的各异的化学产物。
二、生物活性机制天然产物的绝大多数在生物活性方面具有非常广泛的应用和研究价值。
其中,很多天然产物发现后才由科学家们发掘出了它们的生物活性机制,有些机制甚至可以被用于药物的研发、设计及临床治疗等各个方向。
中医药材中的活性成分与鉴定方法
中医药材中的活性成分与鉴定方法活性成分是指中医药材中具有药理活性和治疗作用的化学成分。
中医学认为,药材中的活性成分是药物的主要组成部分,直接影响药物的疗效。
因此,对中医药材中的活性成分及其鉴定方法进行深入研究具有重要意义。
一、中医药材中的活性成分中药材中的活性成分种类繁多,根据其化学性质和药理作用,可分为以下几类:1. 生物碱类生物碱是指由含有一环或多环芳香核的含氮碱性天然产物,具有广泛的生物活性。
常见的中药材中含有的生物碱包括马钱子中的鸦片碱、黄连中的黄连素等。
2. 单体类单体是指一种特定的天然有机化合物,它通常是由一个基本单位构成的。
常见的中药材中含有的单体类活性成分包括黄酮类、黄酮糖苷类、生物类碱和苯乙基醇等。
3. 多糖类多糖是由多个单糖分子通过糖苷键连接而成的复杂碳水化合物。
多糖在中药中广泛存在,具有免疫调节、抗氧化、抗肿瘤等多种生物活性。
人参、枸杞等药材中的多糖成分是其药效的主要来源。
4. 有效成分组合许多中草药中的活性成分存在于复杂的生物组合中,相互之间具有协同作用或加强作用。
例如,天麻中的多种酯类成分共同发挥镇静和镇痛作用。
二、活性成分的鉴定方法为了准确鉴定中医药材中的活性成分,科学家们常常采用多种分析方法和技术。
以下是几种常用的鉴定方法:1. 薄层色谱法薄层色谱法是一种将化学样品通过分子在固定相上的吸附、分配和迁移来实现分离和鉴定的方法。
通过和标准物质对比,可以确定中药材中的活性成分。
2. 气相色谱法气相色谱法是一种通过样品在气相固定相之间的分配和迁移来分离和鉴定化学物质的方法。
该方法具有分离效果好、分离速度快、分析结果准确等优点。
3. 液相色谱法液相色谱法是一种将溶剂通过柱上固定的固定相,使溶质在固定相和溶剂之间分配和迁移来完成分离和鉴定的方法。
该方法适用于多种中药材中活性成分的分离和测定。
4. 质谱法质谱法是一种通过样品中化学物质的质量谱图来鉴定样品中的成分的方法。
质谱法具有高分辨率、高灵敏度和高特异性等特点,可以准确鉴定中药材中的活性成分。
生物活性天然产物的发现与合成
生物活性天然产物的发现与合成自古以来,天然产物一直是医药、食品等领域研究人员的热门话题。
随着现代科技的发展,我们能够更深入地了解和研究天然产物,并通过合成来获得更多的生物活性化合物。
本文将从发现天然产物的历史、生物活性天然产物的意义以及发现与合成的方法等方面一一探讨。
一、发现天然产物的历史发现天然产物的历史可以追溯到古代,古人们早在几千年前就已开始使用草药治疗疾病。
而现在,我们已掌握了更多的天然产物信息并发现了更多的植物和微生物产生的有益物质。
其中,天然产物通常被认为是存在于自然界中的有机化合物,包括多种植物、海洋生物和细菌等。
这些天然产物经过提取和纯化后可以产生各种生物学和医学效应,如抗菌、抗肿瘤、降血压等。
二、生物活性天然产物的意义天然产物的意义在于它们是天然的、生物活性的有机分子,能够发挥多种医疗效应。
这使得天然产物在药物研究和开发中变得越来越重要。
许多医药公司致力于从不同来源中寻找新药,而其中天然源产物是最常见的。
为什么呢?这是因为天然产物广泛存在于各种生物体中,并在漫长的生化过程中逐步优化其生物活性,因此具有潜在的疗效和药物开发价值。
与人工合成的化合物相比,天然产物更容易在体内被识别和代谢,并且可能具有更低的毒性和副作用。
三、发现与合成的方法天然产物在医药研究中的应用越来越广泛,但是天然产物的研究也面临一些挑战,比如含量低、来源不可预测、难以分离和纯化等。
因此,对于发现和合成生物活性天然产物,研究人员必须采用多种策略。
1.传统策略最传统的策略就是从天然物中提取生物活性成分。
这项工作可能非常繁琐,需要对大量的天然产物进行筛选和测试。
当然,这个过程也需要用到一些分离和纯化技术,常常会耗费大量的时间和精力。
现代医学科技的快速发展,为天然产物研究提供了更多的选择,包括亲和层析技术、质谱、NMR等。
2.基于活性筛选的策略一个适合于高通量活性筛选的方法是将化合物与已知靶标进行结合,并观察其表现的生物活性。
天然产物的全合成及其生物活性研究与优化
天然产物的全合成及其生物活性研究与优化近年来,天然产物在药物研发领域引起了广泛的关注和研究。
天然产物具有多样的化学结构和广泛的生物活性,被认为是药物研发的重要来源。
然而,由于其来源复杂和含量有限,全合成成为了研究的热点。
本文将探讨天然产物的全合成方法以及其生物活性的研究与优化。
一、天然产物的全合成方法天然产物的全合成是利用有机合成化学的手段,通过对天然物质中具有重要生物活性的结构进行全合成,以获取结构单一、生物活性更强的天然产物衍生物。
目前,天然产物的全合成方法主要包括以下几种:1.1 串联反应法串联反应法是将多种有机合成反应以连续的方式进行,实现天然产物的高效合成。
这种方法能够减少反应步骤,提高合成效率,并且在反应条件选择上更加灵活。
例如,格氏重排反应和环化反应的串联反应可以合成含有多个手性中心的天然产物,如卡巴培他滨。
1.2 催化反应催化反应是利用催化剂来促进反应的进行,在天然产物的全合成中发挥了重要作用。
例如,金属催化的包气催化反应可以高效合成具有复杂结构的环烯丙酮类天然产物,如金龙烯。
1.3 生物学合成生物学合成是利用微生物、植物或动物体内的天然合成途径,通过基因工程或代谢工程等手段来合成天然产物。
该方法具有环境友好、高效可控的特点,在合成复杂结构的天然产物方面具有巨大潜力。
例如,通过利用酵母菌的代谢途径,可以合成抗癌药物紫杉烷。
二、天然产物的生物活性研究与优化天然产物具有多样的生物活性,包括抗肿瘤、抗菌、抗炎、抗氧化等作用。
通过对天然产物的生物活性的研究与优化,可以进一步发掘其药物研发的潜力。
2.1 生物活性筛选生物活性筛选是通过对一系列天然产物衍生物进行生物活性测试,筛选出具有高效、低毒副作用的化合物。
常用的生物活性筛选方法包括细胞毒性测定、酶抑制活性测定、抗氧化活性测定等。
通过筛选出具有良好生物活性的化合物,可以为药物研发提供有力的候选物。
2.2 结构修饰优化结构修饰优化是对天然产物进行化学修饰,以改善其药效和生物利用度,并增强其稳定性和选择性。
天然产物中活性成分遴选方法研究进展
天然产物中活性成分遴选方法研究进展易人行; 戚进【期刊名称】《《广州化工》》【年(卷),期】2019(047)017【总页数】4页(P24-26,39)【关键词】活性成分遴选; 研究进展; 天然产物【作者】易人行; 戚进【作者单位】中国药科大学中药学院江苏南京 211198【正文语种】中文【中图分类】O625.7天然产物中生物活性成分的检测与发现是发现先导化合物的途径之一,也是新药开发中关键的组成部分。
由于传统的遴选方法多耗时耗力,具有较为明显的额弊端,不再满足现代化发展的需求,因此,寻找新的遴选方法具有一定的价值。
为了解决这些的问题,近年来,许多新型的技术应用于天然产物中活性成分的检测与发现。
本文总结了近年来文献报道的已经用于天然产物中活性成分和在未来在该领域具有一定应用潜力新技术,并进行了综述。
希望为天然产物中活性成分的检测与发现提供一定的参考。
1 生物亲和色谱生物色谱是利用固定化技术将一定的生物活性物质(酶,载体蛋白等)或仿生材料(脂质体等)等固定在一定的载体(二氧化硅、硅胶等)上,作为色谱固定相使用,上样后进行洗脱和分离[1]。
生物色谱同时具备色谱分离和生物活性的双重特点,可以在筛选生物活性成分的同时实现生物活性成分的分离和识别。
这减少了复杂体系中非活性成分的干扰[2]。
根据所用的色谱固定相,生物色谱主要细分为分子生物色谱法,细胞(膜)色谱法,仿生生物膜色谱法。
1.1 分子膜色谱分子膜色谱的固定相通常由活性生物大分子,如酶,受体,抗体,传递蛋白和DNA组成[3]。
上样后,提取物中的不同的成分可以在固定相内以不同的结合强度相互作用,从而可以利用不同极性的流动相洗脱,进一步对这些与大分子特异性结合的化合物进行分离和遴选。
并且还可以确定活性化合物和靶标之间的结合变量(例如血浆蛋白结合率、配体-受体亲和力等)或者鉴定新的活性化合物及其靶标,并且更好理解靶标与化合物之间的作用机制[4]。
这项技术已经被广泛应用,如Su 等[5]使用二氧化硅键合特定的DNA片段,用其作为固定相来筛选黄连和掌叶大黄中药提取物中的与该段DNA相互作用的有效成分。
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陈羽迪2012332870002 12生物制药(1)茶叶中茶多酚的粗提取与含量测定实验报告一、实验目的:1、了解并熟悉茶多酚的元素组成、结构构成、理化性质。
2、掌握溶剂萃取法粗提取茶多酚的原理与操作。
3、掌握酒石酸铁比色法测定茶多酚的含量的原理及操作。
4、了解分光光度计的使用方法和注意事项。
二、实验原理和应用:茶多酚(Tea Polyphenols)是茶叶中多酚类物质的总称,包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。
其中以黄烷醇类物质(儿茶素)最为重要。
茶多酚又称茶鞣或茶单宁,是形成茶叶色香味的主要成份之一,也是茶叶中有保健功能的主要成份之一。
研究表明,茶多酚等活性物质具解毒和抗辐射作用,能有效地阻止放射性物质侵入骨髓,并可使锶90和钴60迅速排出体外,被健康及医学界誉为“辐射克星”。
目前国内外茶多酚粗品的提取的方法主要有:溶剂萃取法、离子沉淀法、树脂吸附分离法、超临界流体萃取法、超声波浸提方法、微波浸提法等等。
在这些提取茶多酚的方法中,每种方法都有它各自的针对性和使用范围,使用时要根据各自的情况而定。
根据实验室的条件及实验要求,本实验采用溶剂萃取法对干茶叶中的茶多酚进行粗提取,即利用茶多酚易溶于乙酸乙酯等有机溶剂的原理进行液-液萃取。
茶多酚的测定方法有高锰酸钾直接滴定法和酒石酸铁比色法,由于高锰酸钾直接滴定法操作比较复杂,且靠肉眼观察颜色判断终点,如果样品溶液颜色较深时,可能影响测定结果。
本实验将应用酒石酸铁比色法测定茶多酚的含量。
酒石酸铁能与茶多酚生成紫褐色络合物,络合物溶液颜色的深浅与茶多酚的含量成正比。
因此可以用比色方法测定。
该法可避免高锰酸钾滴定法所产生的人为视觉误差。
三、实验仪器、材料和试剂实验仪器:分光光度计、干燥箱、电子天平、pH计、真空泵、纱布、漏斗、旋转蒸发仪、250ml 容量瓶、50ml 容量瓶、分液漏斗实验材料:干茶叶(市售散装茶即可)实验试剂:硫酸亚铁(FeSO4·7H2O) ,酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O) ,磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O) ,磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O) ,乙酸乙酯。
四、实验步骤与方法1、溶液的配制酒石酸亚铁溶液制备:称取0.25 g (准确至0.0001)硫酸亚铁,1.25 g酒石酸钾钠(准确至0.0001),用水溶解并定容至250 ml(低温保存,有效期10天)。
2、干茶叶的预处理将干茶叶洗净、晾干,烘干,最后粉碎。
粉碎的目的是与液体的接触面增大使提取率增高。
由于试验条件的限制,用剪刀代替粉碎机将干茶叶剪碎,并且用研钵研细,干茶叶量为50. 00g。
3、茶多酚的粗提取与定性检测称取经过预处理的干茶叶末30. 00g,加入250mL 90℃接近沸水中搅拌浸提、过滤,先后用250mL的乙酸乙酯萃取两次。
合并两次有机相。
减压蒸馏除去乙酸乙酯溶剂得黄色粉末状茶多酚。
从外观上看,为黄色粉末状。
物理性能为,易溶于水及乙醇,味苦涩。
4、茶多酚溶液的配置与含量的测定称取步骤3中提取的茶多酚粉末0.2500g,加水溶解定容至250mL,混匀,即为每毫升含1mg步骤3中提取的茶多酚粉末的溶液。
分别取茶多酚溶液1. 0mL、2. 0mL、3. 0mL、4. 0mL于4个50mL容量瓶中,各加水至10mL,再加酒石酸亚铁溶液10mL,加入pH为7. 5的磷酸缓冲液至刻度,混匀后用1cm比色皿,以空白试剂作参比,于波长540nm处测定吸光度A,计算实验数据,并绘制实验数据表格。
五、实验现象和数据处理将高山茶叶磨成粉末,加入蒸馏水得混有粉末的深绿色液体,水煮后颜色变黄,变为草绿色。
乙酸乙酯萃取后,上层浅黄色透明溶液,下层墨绿色浑浊液体,两相间的乳化层有大ω—茶多酚的含量(%),A—样品溶液的吸光度值,T—样品溶液的总体积(mL)V—测定用样品溶液的量(mL),m—样品质量(g)3.913—用1cm比色杯,当吸光度为1.0时,试液中茶多酚的浓度为3.913(mg/mL)表 1 实验数据汇总5、实验结果检验——绘制茶多酚标准曲线根据步骤4中所得的实验数据,绘制茶多酚标准曲线,斜率R处于0.95-1.05之间方可达到实验要求。
表 2 绘制标准曲线所需数据R=0.813六、注意事项1、磷酸盐缓冲液在常温下容易生长霉菌,放冰箱中保存或临用时现配。
2、茶多酚溶液应保持澄清,若溶解后溶液浑浊应先过滤。
3、实验前需仔细阅读分光光度计使用说明书及注意事项。
4、若茶多酚标准曲线斜率R不介于0.95-1.05之间,则实验数据无效。
七、实验结果与分析本次实验,所采用的测定方法主要为酒石酸亚铁比色法。
茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物,用分光光度法测定其含量。
利用比色法进行测定,可以有效地避免由视觉产生的误差,加以检验后可以得到较为准确的数据。
但经实验证明,酒石酸亚铁比色法测定的茶多酚含量明显偏高。
下表为杭州茶叶研究院用两种比色法测定茶叶中茶多酚含量的实验结果。
表 3 两种测定方法实验结果的比较茶多酚含量(%)名称干物率Folin试剂比色法酒石酸亚铁比色法龙井95.2 18.9 33.3碧螺春92.9 20.6 26.9特级滇红90.2 12.4 16.8冻顶乌龙96.9 14.4 19.8造成以上差异的原因有以下三点:第一,酒石酸亚铁比色法测得的是茶叶中多酚类物质的总含量,是亚铁离子与多酚类物质络合形成蓝紫色物质,在540nm处有最大吸收。
而Folin 比色法测得的结果是茶叶中酚羟基被高价钨氧化后形成蓝色物质在765nm处有最大吸收。
第二,酒石酸亚铁比色法在提取时采用沸水提取,而Folin比色法采用70%甲醇提取。
第三,酒石酸亚铁比色法采用经验系数测算茶多酚的含量,而Folin比色法通过标准曲线换算茶多酚的含量。
因此,可以得出Folin比色法在测定茶多酚含量的实验中测算更为准确。
陈羽迪2012332870002 12生物制药(1)实验二:茶叶中黄酮类化合物的提取和测定一、实验目的:1、了解黄酮类化合物对人体的药理和保健作用。
2、掌握茶叶中提取黄酮类化合物的方法。
3、掌握测定黄酮类化合物含量的方法。
二、实验原理和应用:黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环(A-与B-环)通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物,其基本母核为2-苯基色原酮。
黄酮类化合物结构中常连接有酚羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等官能团。
芦丁是黄酮类化合物之一,且对于紫外光具有极强的吸收作用。
天然黄酮类化合物多以苷类形式存在,一般易溶于水、乙醇、甲醇等极性强的溶剂中;但难溶于或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。
实验首先用紫外分光光度法,利用芦丁溶液在波长510nm处具有最大吸收的特点,测定标准芦丁溶液的吸光值,绘制标准曲线。
用无水乙醇提取茶叶中的黄酮类化合物,得到茶叶提取液。
取一定量的茶叶提取液,用紫外分光光度法测定吸光度,根据标准曲线测定提取液中总黄酮的含量。
绝大多数的植物中都含有黄酮类化合物,掌握对茶叶中黄酮类化合物的提取和测定方法,有利于对茶叶资源的综合利用。
对茶叶中黄酮类物质的提取、测定和纯化除以上方法外,还有其他几种常用方法:1)大孔树脂吸附法因为茶叶黄酮具有糖苷链和多酚结构,有一定的亲水性和极性,利于弱极性和极性树脂对其吸附。
而非极性树脂吸附黄酮的量偏小。
2)微波提取法微波具有试剂用量少、加热均匀、提取批量大、选择性好等优点。
以微波辐射的方式可加快反应速度。
在提取黄酮类化合物上取得很好的效果。
3)超声波辅助提取法是利用超声波具有的机械效应,空化效应和热效应,通过增大介质分子的运动速度、增大介质的穿透力来提取生物有效成分。
近年来越来越受到广泛重视。
超声波提取具有节时、节能、节料、提取率高的特点。
三、实验仪器、材料和试剂仪器:分光光度计,电子天平,恒温水浴锅,真空泵,布氏漏斗,250ml容量瓶,试管。
材料:茶叶粉末。
试剂:无水乙醇,芦丁标准品,亚硝酸钠,氢氧化钠,硝酸铝试剂(以上均为分析纯)。
四、实验操作1)绘制标准曲线总黄酮含量测定采用Al(NO3)3—NaNO2分光光度方法,黄酮与铝离子在碱性条件下与亚硝酸钠形成黄酮的铝络合物,生成稳定的黄色。
黄色的深浅与黄酮含量呈一定的比例关系,可与芦丁标准品作对照,于510 nm 波长处比色定量测定。
本实验中茶叶总黄酮含量测定的标准品为芦丁。
准确称取于115℃烘干至恒重的芦丁25 mg,用70%的乙醇溶解并定容至250 mL,使其浓度为100 μg/mL。
用70%乙醇将芦丁溶液稀释成10种不同浓度(0、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100 μg/mL)的溶液5 ml。
分别量取不同浓度的芦丁溶液1mL,同时加人70%乙醇1 mL、5%NaNO2溶液0.3 mL,混匀后静置6 min,加入10%Al(NO3)3溶液0.3 mL,混匀,静置6 min,再加入4%NaOH溶液2 mL,混匀,静置20 min,于510 nm波长处测定吸光度(A)。
测得线性回归方程。
2)提取茶叶中的黄酮类化合物称取1g茶叶粉末于烧杯中,加入20mL70%乙醇,用保鲜膜封口,置于80℃恒温水浴锅内1h,抽滤后得滤液。
3)量取1mL滤液,加人70%乙醇1 mL、5%NaNO2溶液0.3 mL,混匀后静置6 min,加入10%Al(NO3)3溶液0.3 mL,混匀,静置6 min,再加入4%NaOH溶液2 mL,混匀,静置20 min,于510 nm波长处测定吸光度。
根据黄酮溶液的浓度与吸光度值成正比,吸光度值越大,黄酮溶液浓度越大,可测定茶叶提取液中黄酮类物质的含量。
五、注意事项乙醇浓度,样品和乙醇溶液的固液比(g/mL),水浴温度和水浴时间均对总黄酮的提取率和测定浓度产生影响。
各个因素对茶叶黄酮提取得率的影响顺序是:乙醇浓度>固液比>温度>时间。
所以实验中要严格按照实验要求进行实验,样品准确量取,以减小实验误差。
实验用到的乙醇溶液浓度较高,实验时间较长,乙醇溶液要注意密封保存,防止乙醇溶液挥发,浓度减小,导致的对实验的影响。
六.实验现象芦丁稀释为一定浓度梯度的溶液,颜色由无色到黄色,随浓度上升而变深。
茶叶的乙醇溶液抽滤后得草绿色滤液。
经过稀释后接近无色,加入硝酸铝变浅黄绿色。
再加NaOH变橙红色溶液。
七、实验结果与分析本实验以已知的芦丁标准溶液的浓度为标准,与茶叶提取液中的黄酮含量相比较,相对测定出茶叶提取液中的黄酮含量。
这需要确保芦丁标准溶液的浓度尽量准确,实验所需试剂的浓度要达到分析纯,才能减小实验误差。
芦丁标准溶液算得的标准曲线,绘于图1中,可利用excel得出线性方程并计算R值。
图1 芦丁标准曲线R=0.942茶叶提取液中黄酮类化合物的测定含量实验数据,填于表1中表1 茶叶提取液中总黄酮的含量平均总黄酮含量编号乙醇浓度固液比水浴温度水浴时间总黄酮含量提取率平均提取率1 70% 80℃1h 0.65 6.5%2 70% 80℃1h 0.66 6.6%6.53%3 70% 80℃1h 0.65 6.5%。