细胞工程

细胞全能性：指每一个活细胞都具有产生一个完整个体的全套基因，在适宜的条件下，细胞具有发育成完整个体的潜在能力。

细胞脱分化：培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程就是细胞脱分化。

外植体：是指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料。

愈伤组织指植物受伤部位的细胞脱分化而不断增殖形成松散、无特定结构和功能的细胞团。

体细胞胚：离体培养下没有经过受精过程，但经过了胚胎发生过程所形成的胚的类似物统称为体细胞胚。

体细胞无性系变异：离体培养所获得的再生植株所表现出的变异（包括形态、生理生化、育性、抗性等方面）定义为体细胞无性系变异。

人工种子：任何一种经人工种皮包被或裸露的，具有形成完整植株能力的繁殖体均可称之为人工种子。

体细胞杂交：是指在人工控制条件下，不经过有性过程，两种体细胞原生质体相互融合产生杂种细胞。

非对称融合：利用物理或化学方法使某亲本的核或细胞质失活后再进行融合。异核体：指细胞质发生融合而细胞核未融合所形成的含有两个细胞核的融合子。花药培养：是指用植物组织培养技术将发育到一定阶段的花药剥离下来（切去花丝部分）接种到培养基上进行培养，最终形成完整植株的过程。

看护培养：将完整的花药或花药愈伤组织置于琼脂培养基上，再将灭菌后的滤纸放在花药或愈伤组织上，然后将预培养的花粉置于滤纸上进行培养的方法。

植板率：每个平板接种细胞总数中形成细胞团的百分率。

微繁殖：离体无性繁殖是在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖的技术。简称微繁殖。

玻璃化：在离体培养中，试管苗发生的形态、生理和代谢异常的现象。

胚胎培养：指在离体条件下使胚或具胚器官发育成幼苗的培养技术。

早熟萌发：幼胚接种后，离体胚不继续胚性生长，而是在培养基上迅速萌发成幼苗，通常称之为早熟萌发。

离体授粉：指在无菌条件下培养离体的未受精子房或胚珠和花粉，使花粉萌发产生的花粉管进入胚珠完成受精而结实的过程。

原球茎：离体培养中，兰科植物的茎尖、侧芽、花茎、叶、根等都可作为外植体诱导产生类似于原球茎的结构即类原球茎，也称原球茎。

植物脱毒技术：利用高温处理，茎尖组织培养等方法，脱除植物所感染的病毒，在超净无菌的条件下培养不带病菌的植株，进行营养繁殖，快速繁育和生产出无病毒的种苗、种薯、应运于大田生产。

原代培养：指将培养物放置在体外生长环境中持续培养，中途不分割培养物的培养过程。

传代培养：当细胞持续生长增值一段时间达到一定的细胞密度后，就应当将细胞分离到新的培养皿并补充新的培养液进行培养，即为细胞的传代培养。

永久细胞系：初代培养物开始传代培养后的细胞，即称之为细胞系，已获无限繁殖能力能持续生存的细胞系，称连续细胞系或无限细胞系。

有限细胞系：初代培养物开始第一次传代培养后的细胞，即称为细胞系，如细胞系的生存期限有限，则称之为有限细胞系。

体外转化：细胞在体外培养过程中发生与原代细胞形态、抗原、增殖或其它特性的可遗传的变化。

玻璃化冻存：是指液体转变为非晶态(玻璃态)的固化过程。

贴壁培养：指细胞贴附在一定的固相表面进行的培养。

半连续培养：指在反应器中投料和接种培养一段时间后，将细胞悬液移除一部分，同时再加入新鲜培养液进行培养的方法。

细胞同步化：是指为研究细胞周期的不同阶段的生化特征，必须获得与细胞周期一致性的细胞。

间接筛选：借助与突变表现型有关的性状作为选择指示或筛选压的方法。

细胞株：在平板培养中单个细胞经持续分裂，形成许多细胞团，尽可能地使每个细胞团均来自一个单细胞，这种细胞团称为细胞株。

胞质体：除去细胞核后由膜包裹的无核细胞，由细胞松弛素B处理后，经离心得到。

核体：应用细胞松弛素处理培养细胞时，细胞内的纤细网状结构便被切断，从而使被细胞膜所覆盖的细胞核移位。经离心分离，便可从胞质体(cytoplast)中分离得到被称为核体的物质。

杂交瘤技术：肿瘤细胞与体细胞融合形成的杂交细胞成为杂交瘤细胞，建立杂交瘤细胞系的技术成为杂交瘤技术。

接触抑制：当细胞在基质上分裂增殖，逐渐汇合成片形成连续性细胞单层后，即每个细胞与其周围的细胞相互接触时，细胞扩展运动停止，细胞就不再分裂而停止增殖，这一现象称之为接触抑制。

胚胎移植：指对优秀雌性动物进行超数排卵处理，在其发情配种后一定时间内从其生殖道取出早期胚胎，移植到同期发情的普通雌性动物生殖道的相同部位，让其产生后代的技术。

超数排卵：在动物发情周期的适当时期，用促性腺激素处理，诱发其卵巢上大量卵泡同时发育并排卵的技术。

体外受精：指把成熟卵母细胞或把未成熟卵母细胞经体外成熟培养后，与体内或体外获能的精子在体外条件下完成受精的过程。

胚胎干细胞：指从发育早期的胚胎内细胞团中分离培养出来的一种具有自我更新、无限增殖能力、能分化成代表3个胚层组织细胞能力的干细胞。

克隆：指遗传上完全相同的分子、细胞或来自同一祖先的生物个体的无性繁殖群体（不突变，相同的遗传结构）。

常用的植物细胞的培养基种类有哪些？各有什么特点？

MS培养基——无机盐浓度高，微量元素种类齐全，养分均衡。培养基中硝酸盐含量高，广泛用于培养再生植物。

B5培养基——较低的铵盐，较高的VB1，用于愈上组织和细胞悬浮培养，以及木本植物的培养。

N6培养基——较高硝酸盐，禾本科花药培养和柑橘类植物的花药培养。

White培养基——低盐培养基，用于生根培养。

常用的灭菌方法有哪些，各有什么优缺点？

湿热灭菌：即高压蒸汽灭菌，103kPa 121℃20-30分钟。（培养基、无菌水、布、橡胶类、玻璃器皿、金属制品）

干热灭菌：即在烘箱中加热至180℃40分钟，或170℃2小时。（玻璃器皿、金属器皿）

烧灼灭菌：用酒精灯烧灼接种器械、瓶口、棉塞、包头纸等。

过滤灭菌：细菌过滤器用于高温易分解的药品、液体培养基和蒸镏水等。

射线灭菌：用紫外灯15-20分钟。(接种室空气、台面和衣帽间)

熏蒸灭菌：接种室常采用定期熏蒸，熏蒸剂常用甲醛加高锰酸钾，一般每100ml 甲醛加5g高锰酸钾。（接种室）

药剂灭菌：培养材料表面灭菌；抗生素抑菌；人员用70%酒精。

动物细胞培养常用的培养及组成成分有哪几类，在离体培养中的功能是什么？

配制培养基时，加入一定量的植物生长调节物质，它们在离体培养过程中有哪些作用？

愈伤组织的形成大致可分为哪几个时期，各有何特点？

第一阶段为诱导期（启动期），表现为细胞质增生，并开始向细胞中央伸出细胞质丝，液泡蛋白体出现；细胞回复到分生细胞状态，成为胚性细胞。

第二阶段为分裂期，是细胞从开始分裂到持续分裂的时期。外层细胞迅速分裂，细胞体积变小并回复到分生组织状态，称为回复变化；可见大量分生细胞团。

第三阶段为分化期，是愈伤组织形成到器官发生时期。出现形态和功能各异的细胞，即出现细胞分化。

培养条件下的器官发生有哪些方式？影响其发生的因素有哪些？

①先芽后根②先根后芽③根芽同步发生

1）起始材料对器官分化的影响：被子植物比裸子植物容易培养。草本植物比木本植物容易培养。外植体对诱导反应及其再生能力的影响还体现在生理状态上，来源于生长活跃或生长潜力大的组织、器官的细胞更有利于培养。

2）激素对器官发生的影响：离体培养下的器官分化在大多数情况下是通过外源提供适宜的植物激素而实现的。在众多的植物激素中，生长素与细胞分裂素是两类主要的植物激素，在离体器官分化调控中占有主导地位。

3）光照对器官分化的影响：光照是离体培养中比较复杂的调节因子，光照时间、光照强度以及光质对器官分化均有影响。

4）基因调控对器官分化的影响

影响胚状体发生的主要因素有哪些？

1）激素的调控作用:球形胚期形成的生长素极性运输对于体细胞胚的进一步发