Tris-EDTA缓冲液(10×TE,pH7.4)
Tris-HCl缓冲液(1molL,pH7.4)
北京雷根生物技术有限公司 Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH7.4)简介:Tris(三羟甲基氨基甲烷)为弱碱,分子式为C 4H 11NO 3,相对分子量为121.14, 在25℃下pKa 为8.1,Tris 缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0~9.2之间。
Tris 碱的水溶液pH 在10.5左右,一般加入盐酸调节pH 值至所需值,即可获得该pH 值的缓冲液。
常用作生物缓冲液,常用pH 值为6.8、7.4、8.0、8.8,其pH 值随温度变化很大。
一般来说,温度每升高1℃,pH 值下降0.03。
1M Tris-HCl pH8.0是分子生物学中最常用的试剂之一,用来作为各种缓冲液的基础成分,调节酸碱度,例如配制Tris-EDTA 溶液,TBE 电泳缓冲液等。
Leagene Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH7.4)采用进口Tris 、去离子水配制而成,未经高压灭菌处理,被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂。
组成:操作步骤(仅供参考):1、 根据实验具体要求操作。
注意事项:1、 对人体有刺激性,请注意适当防护。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
相关:编号 名称 R00225 R00225 Storage Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH7.4) 100ml 500ml RT 使用说明书1份 编号 名称 NR0001 DEPC 处理水(0.1%) PE0018SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒 R00227Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH8.0,无菌) TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。
te缓冲液
te缓冲液1. 简介TE缓冲液是一种常用于核酸研究中的缓冲液。
TE缓冲液的全称为Tris-EDTA 缓冲液,其中Tris是三羟甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane),EDTA是乙二胺四乙酸(Ethylenediaminetetraacetic Acid)的缩写。
TE缓冲液常被用于核酸的储存、稀释和DNA的电泳分析。
2. 组成TE缓冲液的组成为:•10mM Tris-Cl•1mM EDTA3. 功能TE缓冲液具备以下功能:•维持等电点:TE缓冲液的pH值约为8.0,可在理想pH范围内维持核酸的等电点,保持其稳定性。
•稀释和储存:由于TE缓冲液中的EDTA可以与金属离子结合,阻止金属离子的催化作用,因此经TE缓冲液稀释储存的核酸可以减少降解和酶催化反应的发生。
•DNA电泳:TE缓冲液可用于DNA电泳分析,使DNA保持在双链状态,减少DNA降解和断裂。
4. 制备方法制备TE缓冲液的步骤如下:1.加入800mL去离子水或蒸馏水到一个无菌的容器中。
2.加入6.06g Tris-Cl固体,搅拌至完全溶解。
3.加入0.372g EDTA固体,搅拌至完全溶解。
4.调节pH值至8.0,可以用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)进行调节。
5.加入去离子水或蒸馏水直至总体积为1L。
6.混匀,用0.2μm滤器过滤消除杂质,得到TE缓冲液。
5. 注意事项在制备和使用TE缓冲液时,需要注意以下事项:•使用无菌的实验室器具、试剂和培养基。
•严格遵循实验室的安全操作规程,避免对人身和环境造成伤害。
•储存TE缓冲液时,使用无菌密封容器,避免污染和杂质的进入。
•注意TE缓冲液的pH值,需要在8.0附近,可以使用pH计进行测量和调节。
•TE缓冲液供实验使用前,需要用0.2μm滤器过滤消除杂质。
6. 结论TE缓冲液是核酸研究中必备的一种缓冲液,具备维持核酸稳定性、稀释储存和DNA电泳的功能。
在制备和使用TE缓冲液时,需要注意无菌操作、安全操作和pH值的调节。
实验室常用缓冲液配置方法
实验室常用缓冲液配置方法1)1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度:1 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2)10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度:100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量:1 L配制方法:1. 量取下列溶液,置于1 L烧杯中。
2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,均匀混合。
3. 将溶液定容至1 L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
3)1.5 M Tris-HCl (pH8.8)组份浓度:1.5 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
4)3 M 醋酸钠(pH5.2)组份浓度:3M 醋酸钠配制量:100ml配制方法:1.称量40.8g NaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中,加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至5.23.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后,室温保存。
5)PBS Buffer组份浓度:137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4配制量:1 L配制方法:1. 称量下列试剂,置于1 L烧杯中。
Tris-EDTA缓冲液(10×TE,pH7.4)
北京雷根生物技术有限公司
Tris-EDTA 缓冲液(10×TE,pH7.4)
简介:
Tris-EDTA 缓冲液简称TE, 即Tris-EDTA buffer(10mM Tris ,1mM EDTA pH7.4),用于溶解DNA 、保存DNA 等,是常用分子生物学试剂。
其主要原理是溶液中的金属离子容易破坏DNA ,而EDTA 可以螯合金属离子以达到保护DNA 的目的。
该试剂为浓缩液,经高压灭菌处理。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、用去离子水稀释后使用。
注意事项:
1、 如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
2、 注意无菌操作。
3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
相关:
编号 名称 R00193 Storage Tris-EDTA buffer(10×TE ,pH7.4) 500ml RT 使用说明书 1份 编号 名称 CC0005 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁) CC0023 D-Hanks 平衡盐溶液(1×,无酚红) DH0006
苏木素伊红(HE)染色液 R00017
EDTA 溶液(0.5mol/L,pH8.0) R00067
MES buffer(0.1mol/L,pH5.5) PW0053
Western 抗体洗脱液(碱性) TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种,下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方:一、试剂的配方1. Tris缓冲液:- 3 M Tris-Cl,pH 7.4(准备方法:将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2.NaCl溶液:-5MNaCl(准备方法:将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)3.验血试剂:-4%NaOH溶液(准备方法:将40gNaOH溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-5%CuSO4溶液(准备方法:将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-2%K4[Fe(CN)6]溶液(准备方法:将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)4.PBS缓冲液(磷酸盐缓冲液):-10×PBS缓冲液(准备方法:将80gNaCl,2gKCl,11.5gNa2HPO4,2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L。
pH值可以调节至7.4左右)5. Tris-EDTA缓冲液(TE缓冲液):- 10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH 8.0(准备方法:将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中,然后加入0.37 g EDTA,使用HCl调节pH值至8.0,并将溶液体积加至1 L)二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液:- 50 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,1% Triton X-100,pH 7.4(准备方法:将6.05 g Tris,5.8 g NaCl,0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2. Tris-Borate缓冲液(TBE缓冲液):- 89 mM Tris,89 mM boric acid,2 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将10.81 g Tris,5.49 g boric acid,3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)3. Tris-Glycine缓冲液:- 25 mM Tris,192 mM glycine,0.1% SDS,pH 8.3(准备方法:将3.03 g Tris,14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)4. Tris-Acetate缓冲液(TAE缓冲液):- 40 mM Tris,20 mM acetic acid,1 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将4.84 g Tris,1.86 g acetic acid,0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)5. Phosphate缓冲液:- 100 mM sodium phosphate,pH 7.0(准备方法:根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0,并将溶液体积加至1 L)以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方,并不是全部。
10×TBE电泳缓冲液使用说明书
应用 琼脂糖凝胶电泳。
温馨提示 1. 为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,带手套等。 2. 打开包装后,请尽快使用,避免细菌生长。
储存温度 室温保存。
包装清单 货号
HCY005 /
品名 10×TBE 电泳缓冲液
说明书
镁离子同时也是dna修复酶例如限制酶及dna聚合酶的辅因子所以edta在tbe中的浓度不宜过高
杭州昊鑫生物科技股份有限公司
htpp://
10×TBE 电泳缓冲液 10×TBE 电泳缓冲液
TBE 电泳缓冲液是 Tris、硼酸及 EDTA 的混合物。TBE 电泳缓冲液用于核酸电泳。Tris-酸 溶液可为 DNA 的去质子化及其溶解于水中提供稳定的环境。EDTA 为二价离子螯合剂,尤其是镁 离子。EDTA 可以保护核酸对抗酶的降解。镁离子同时也是 DNA 修复酶,例如限制酶及 DNA 聚合 酶的辅因子,所以 EDTA 在 TBE 中的浓度不宜过高。TBE 缓冲液中的硼酸是很多酶的抑制剂,这 些酶的抑制使得 TBE 缓冲液更加受到欢迎。
Tris-HCl缓冲液(0.05molL,pH7.4,无菌)
北京雷根生物技术有限公司 Tris-HCl 缓冲液(0.05mol/L,pH7.4,无菌) 简介:Tris(三羟甲基氨基甲烷)为弱碱,分子式为C 4H 11NO 3,相对分子量为121.14, 在25℃下pKa 为8.1,Tris 缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0~9.2之间。
Tris 碱的水溶液pH 在10.5左右,一般加入盐酸调节pH 值至所需值,即可获该pH 值的缓冲液。
常用作生物缓冲液,常用pH 值为6.8、7.4、8.0、8.8,其pH 值随温度变化很大。
一般来说,温度每升高1℃,pH 值下降0.03。
1M Tris-HCl pH8.0是分子生物学中最常用的试剂之一,用来作为各种缓冲液的基础成分,调节酸碱度,例如配制Tris-EDTA 溶液,TBE 电泳缓冲液等。
Leagene Tris-HCl 缓冲液(0.05mol/L,pH7.4,无菌)采用进口Tris 、去离子水配制,经高压灭菌处理。
组成:操作步骤(仅供参考):1、根据实验具体要求操作。
注意事项:1、 对人体有刺激性,请注意适当防护。
2、 注意无菌操作,避免微生物污染。
3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
相关:编号 名称 R00237 Storage Tris-HCl 缓冲液(0.05mol/L,pH7.4,无菌) 500ml RT 使用说明书1份 编号 名称DC0032 Masson 三色染色液DF0135 多聚甲醛溶液(4% PFA)NR0001 DEPC 处理水(0.1%)PE0018 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。
Tris-HCl缓冲液(1molL,pH7.4)
北京雷根生物技术有限公司 Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH7.4)简介:Tris(三羟甲基氨基甲烷)为弱碱,分子式为C 4H 11NO 3,相对分子量为121.14, 在25℃下pKa 为8.1,Tris 缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0~9.2之间。
Tris 碱的水溶液pH 在10.5左右,一般加入盐酸调节pH 值至所需值,即可获得该pH 值的缓冲液。
常用作生物缓冲液,常用pH 值为6.8、7.4、8.0、8.8,其pH 值随温度变化很大。
一般来说,温度每升高1℃,pH 值下降0.03。
1M Tris-HCl pH8.0是分子生物学中最常用的试剂之一,用来作为各种缓冲液的基础成分,调节酸碱度,例如配制Tris-EDTA 溶液,TBE 电泳缓冲液等。
Leagene Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH7.4)采用进口Tris 、去离子水配制而成,未经高压灭菌处理,被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂。
组成:操作步骤(仅供参考):1、 根据实验具体要求操作。
注意事项:1、 对人体有刺激性,请注意适当防护。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
相关:编号 名称 R00225 R00225 Storage Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH7.4) 100ml 500ml RT 使用说明书1份 编号 名称 NR0001 DEPC 处理水(0.1%) PE0018SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒 R00227Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH8.0,无菌) TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。
10×TBE缓冲液使用说明
10×TBE缓冲液TBE 缓冲液是生物学中常使用的核酸电泳缓冲盐溶液,主要用于DNA 的琼脂糖凝胶电泳。
TBE的主要成分是Tris-硼酸盐与EDTA,缓冲能力强,适合较长时间电泳,分辨率较高,电泳小于1kb的片段时分离效果好。
TBE 缓冲液中的硼酸成分会影响DNA回收效率以及后续的酶反应,若要进行DNA片段的琼脂糖凝胶电泳回收实验,建议使用TAE 缓冲液。
储存条件: 室温储存,有效期至少12个月。
缓冲液其他试剂有:5×TBE 缓冲液10×TBE缓冲液50×TAE 缓冲液D-PBS缓冲液(不含钙镁和酚红)PBS缓冲液干粉1×PBS缓冲液(pH7.2- 7.4)10×PBS缓冲液 (pH7.2- 7.4)柠檬酸钠缓冲液0.01mol/L, pH6.0DNA退火缓冲液(5X)5×蛋白上样缓冲液(含DTT)4×蛋白上样缓冲液(含DTT)2×蛋白上样缓冲液(含β-巯基乙醇)2×蛋白上样缓冲液(含DTT)4×SDS-PAGE分离胶缓冲液(PH=8.8)4×SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(PH=6.8)5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液10×电泳转移缓冲液(转膜液)Tris-Tricine-SDS-PAGE 凝胶缓冲液2×Tris-Tricine-SDS-PAGE 上样缓冲液 (含DTT) 柠檬酸钠缓冲液0.1mol/L,pH4.5,无菌溶液1×PBST缓冲液,PH7.2-7.4,0.01M10×PBST20×PBS缓冲液, PH7.2-7.4,工作浓度0.01M pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液pH9.0磷酸盐-生理盐水缓冲液pH9.0碳酸盐-甘油缓冲液基础β-半乳糖酶洗涤缓冲液10× tris-mops缓冲液10×DNA上样缓冲液10×MOPS缓冲液TE缓冲液(PH=8.0)0.5M EDTA(PH8.0)20×TBS1×TBST缓冲液STE缓冲液(PH8.0)1×Tris-tricine-SDS-PAGE电泳缓冲液(阴极-)10×Tris-tricine-SDS-PAGE电泳缓冲液(阴极-)10×Tris-tricine-SDS-PAGE电泳缓冲液(阳极+)1×Tris-tricine-SDS-PAGE电泳缓冲液(阳极+)10×TBST缓冲液MES 2-(N-吗啡啉)乙磺酸PIPES 1,4-哌嗪二乙磺酸4×非变性蛋白上样缓冲液。
TNE缓冲液(10×,pH7.4)
仅供科研版本号:190418TNE缓冲液(10×,pH7.4)【产品组成】【保存条件】4℃,12个月【产品概述】TNE缓冲液(10×,pH7.4)主要由Tris、EDTA、NaCl组成,所以简称为NTE缓冲液。
该试剂主要用于吸收和荧光光谱学定量RNA和DNA,只要考虑了污染物和缓冲液组分的作用,吸收测量时很直接简单的方法,荧光分析比A260更不易受干扰。
【使用方法】1、用去离子水稀释TNE缓冲液(10×,pH7.4)至1×。
2、取1ml1×TNE缓冲液吸入石英杯,放入单光束或双光束分光光度计中,在352nm处读值,仪器调零。
该空白溶液作为双光束仪器的参照。
对于单光束分光光度计,去除空白杯,插入含有DNA样品或标准品的石英杯,读数在280nm(蛋白)、260nm(核酸)、230nm(肽、酚、尿素)重复该过程。
3、用A260读数代入如下方程计算核酸的浓度(C):单链DNA:C(pmol/μl)=A260/(10×S)C(μg/ml)=A260/0.027双链DNA:C(pmol/μl)=A260/(13.2×S)C(μg/ml)=A260/0.020单链RNA:C(μg/ml)=A260/0.025寡核苷酸:C(pmol/μl)=100×A260/(1.5NA+0.71NC+1.2NG+0.84NT)其中,S代表DNA大小(单位是kb),N代表碱基数。
4、用A260/A280比值和A230和A325处的读值来估计核酸样品的纯度,比值在1.8~1.9显示DNA纯度高,比值在1.9~2.0显示RNA纯度高。
【注意事项】1、如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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常用电泳试剂配制方法
常用电泳试剂配制方法电泳试剂是在蛋白质或核酸电泳实验中使用的一系列化学试剂。
常用的电泳试剂包括缓冲液、凝胶、加载缓冲液、电泳盐溶液等。
以下是常用电泳试剂的配制方法。
一、缓冲液的配制方法:1.TAE缓冲液TAE缓冲液配方:0.04M缩醛酸,0.001M乙酸,0.001MEDTA,pH8.0。
配制方法:将缩醛酸溶解在适量的蒸馏水中,调节pH值为8.0,加入乙酸和EDTA,再用蒸馏水稀释至适量。
2.TBE缓冲液TBE缓冲液配方:0.089M缩醛酸,0.089M硼酸,0.002MEDTA,pH8.3配制方法:将缩醛酸溶解在适量的蒸馏水中,调节pH值为8.3,加入硼酸和EDTA,再用蒸馏水稀释至适量。
3. Tris-EDTA缓冲液 (TE缓冲液)TE缓冲液配方:10mM缩醛酸,1mMEDTA,pH8.0。
配制方法:将缩醛酸溶解在适量的蒸馏水中,调节pH值为8.0,然后加入EDTA,再用蒸馏水稀释至适量。
二、凝胶的配制方法:1.聚丙烯酰胺凝胶聚丙烯酰胺凝胶配方:30%丙烯酰胺,0.8%季铵盐,1M缓冲液,10%过硫酸铵。
配制方法:将丙烯酰胺溶解在适量的蒸馏水中,加入季铵盐,搅拌均匀后加入缓冲液,最后加入过硫酸铵,混合均匀后注射到凝胶板中,等待凝固。
2.熔融琼脂糖凝胶熔融琼脂糖凝胶配方:1%琼脂糖,1×TAE缓冲液。
配制方法:将琼脂糖溶解在适量的蒸馏水中,加热至完全融化,冷却至60-70°C后加入TAE缓冲液,混合均匀后倒入凝胶板中,等待凝固。
三、加载缓冲液的配制方法:1.6×加载缓冲液6×加载缓冲液配方:40%甘露醇,0.25%溴酚蓝,一定量的TAE或TBE缓冲液。
配制方法:先将甘露醇溶解在适量的蒸馏水中,加入溴酚蓝,搅拌均匀后加入适量的TAE或TBE缓冲液,混合均匀后即可。
四、电泳盐溶液的配制方法:1.DNA电泳盐溶液DNA电泳盐溶液配方:1×TAE缓冲液。
Tris-磷酸电泳缓冲液(10×TPE,RNase free)
北京雷根生物技术有限公司
Tris-磷酸电泳缓冲液(10×TPE,RNase free)
简介:
Tris-磷酸电泳缓冲液简称TPE ,1×TPE 工作液中含有90mM Tris-磷酸、2mM EDTA 。
LeageneTris-磷酸电泳缓冲液是10倍浓缩的TPE ,主要由900mM Tris-硼酸,20mM EDTA 等组成,经DEPC 处理,无RNase 。
使用时需用DEPC 处理水稀释为1×TPE 后使用。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、用DEPC 处理水至1×后使用。
注意事项:
1、 注意避免核酸酶污染。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
相关:
编号 名称 NA0045 Storage 10×TPE(RNase free) 500ml RT 使用说明书 1份 编号 名称
DC0032 Masson 三色染色液 NA0030 Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE) NH0043
SSC 缓冲液(20×,pH7.0) PE0080
Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH6.8) PW0053
Western 抗体洗脱液(碱性) TC1243 甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP 单试剂比色法)。
TES缓冲液(10×,pH7.5)使用说明
TES 缓冲液(10×,pH7.5)使用说明 货号:G0470 规格:500mL 保存:室温保存,有效期 6 个月。 产品内容: Tris(三羟甲基氨基甲烷)为弱碱, 分子式为 C4H11NO3, 相对分子量为 121.14, 在 25℃下 pKa 为 8.1, Tris 缓冲液的有效缓冲范围在 pH7.0~9.2 之间, 用来作为各种缓冲液的基础成分, 调节酸碱度。 TES 缓冲液(10×, pH7.5)由 100mM Tris-HCl 缓冲液(pH7.5)、 10mM EDTA(pH7.5) 以及微量的 SDS 组成,由于该溶液由 Tris-HCl、EDTA、SDS 组成,故而简称为 TES,属于 pH 缓冲液,稀释至 1×后使用。 操作步骤(仅供参考): 1、 根据实验具体要求操作,稀释至1×后使用。 注意事项: 1、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
细菌16SrDNA注意事项以及常见问题解析
细菌16SrDNA注意事项以及常见问题解析细菌 16S rDNA 鉴定主要分为 7 个部分:1.提取细菌基因组 DNA,2.设计/选择引物进⾏ PCR 扩增,电泳检测纯度与⼤⼩。
3.琼脂糖凝胶电泳分离4.胶回收⽬的⽚段5.⽬的⽚段测序。
6.BLAST ⽐对获取相似⽚段7.构建系统进化树试剂:1、培养基:通常选择组分简单且细菌⽣长良好的培养基(培养基组分过于复杂会影响 DNA的提取效果,也可以在裂解细菌前⽤ TE 缓冲液对菌体进⾏洗涤。
)。
2、1M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)(1L):121.1g Tris,加浓盐酸约(70ml, 60ml, 42ml),⾼温⾼盐灭菌后,室温保存。
冷却到室温后调 pH,每升⾼ 1,pH⼤约下降0.03个单位。
3、0.5M EDTA(pH8.0)(1L):186.1g Na2EDTA•2H2O,⽤ NaOH 调 pH ⾄ 8.0(约 20g),⾼温⾼压灭菌,室温保存。
4、10×TE Buffer(pH7.4,7.6,8.0)(1L):组分:100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA。
1M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)取100ml,0.5M EDTA(pH8.0)取 20ml。
⾼温⾼压灭菌,室温保存。
1×TE Buffer ⽤ 10×TE Buffer 稀释 10 倍即可。
5、10%SDS(W/V):称 10g,68加热溶解,⽤浓盐酸调 pH ⾄ 7.2。
室温保存。
⽤之前在 65溶解。
配置时要戴⼝罩。
6、5M NaCl:称 292.2gNaCl,⾼温⾼压灭菌,4保存。
、CTAB/NaCl(10%CTAB,0.7M NaCl):溶解 4.1g NaCl,加 10g CTAB(⼗六烷基三甲基溴化铵),加热搅拌。
⽤之前在 65溶解。
8、氯仿/异戊醇:按氯仿:异戊醇=24:1(V/V)的⽐例加⼊异戊醇。
Tris缓冲盐溶液(10×TBS,pH8.0)
北京雷根生物技术有限公司
Tris 缓冲盐溶液(10×TBS,pH8.0)
简介:
Tris 缓冲盐溶液简称TBS, 属于常规pH 缓冲液,常用于清洗Western Blot 中蛋白印迹膜或配制封闭液,是常用分子生物学试剂。
Tris 缓冲盐溶液主要成分为Tris-HCl(pH8.0)、氯化钠、防腐剂,不含Tween 20。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 根据实验具体要求操作。
2、 一般稀释,再加入Tween 20,即获得TBST 进行下游实验。
注意事项:
1、 如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
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编号 名称 PW0014 Storage Tris 缓冲盐溶液(10×TBS,pH8.0) 500ml 4℃ 使用说明书 1份 编号 名称 DC0032
Masson 三色染色液 PE0080
Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH6.8) PW0024
Tween20/TBS 溶液(10×TBST,pH7.5) PW0040
Western blot 一抗稀释液 PW0053
Western 抗体洗脱液(碱性) PW0084
丽春红S 染色储存液(10×Ponceau S) TO1013 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 比色法)。
Tris-HCl缓冲液(1molL,pH7.4)
北京雷根生物技术有限公司
Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH7.4)
简介:
Tris(三羟甲基氨基甲烷)为弱碱,分子式为C 4H 11NO 3,相对分子量为121.14, 在25℃下pKa 为8.1,Tris 缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0~9.2之间。
Tris 碱的水溶液pH 在10.5左右,一般加入盐酸调节pH 值至所需值,即可获得该pH 值的缓冲液。
常用作生物缓冲液,常用pH 值为6.8、7.4、8.0、8.8,其pH 值随温度变化很大。
一般来说,温度每升高1℃,pH 值下降0.03。
1M Tris-HCl pH8.0是分子生物学中最常用的试剂之一,用来作为各种缓冲液的基础成分,调节酸碱度,例如配制Tris-EDTA 溶液,TBE 电泳缓冲液等。
Leagene Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH7.4)采用进口Tris 、去离子水配制而成,未经高压灭菌处理,被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 根据实验具体要求操作。
注意事项:
1、 对人体有刺激性,请注意适当防护。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
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编号 名称 R00216 R00216 Storage Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH7.4) 100ml 500ml RT 使用说明书
1份 编号 名称 NR0001 DEPC 处理水(0.1%) PE0018
SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒 PW0111
Super ECL Plus 超敏发光液 TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。
Tris-EDTA抗原修复液(10×,pH8.5)
Tris-EDTA 抗原修复液(10×,pH8.5)简介:柠檬酸盐、EDTA 或Tris 等缓冲液在热的条件下可以使被福尔马林屏蔽的抗原重新暴露出来,同时又不会对抗原表位造成破坏,从而提高抗原的检出率,降低背景染色,提高诊断的准确率。
Tris-EDTA 抗原修复液(10×,pH8.5)可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
按照每个片子需要10ml 抗原修复液(1×)计算,100ml 抗原修复液(10×)可以用于100个样本的抗原修复。
组成:操作步骤(仅供参考):(一)石蜡切片1、脱蜡至水①二甲苯3次,每次3~5min 。
②无水乙醇脱水2次,每次3~5min 。
③95%的乙醇,3~5min 。
④90%的乙醇,3~5min 。
⑤80%的乙醇,3~5min 。
⑥70%的乙醇,3~5min 。
⑦蒸馏水冲洗2次,每次3~5min 。
2、抗原修复①用去离子水或双蒸水稀释Tris-EDTA 抗原修复液(10×,pH8.5)至1×。
②将切片浸泡在Tris-EDTA 抗原修复液(1×)中,95℃或沸水加热。
③抗原修复液(1×)使用前需预热。
3、免疫染色洗涤液洗涤1~2次。
4、封闭等后续的免疫染色步骤。
(二)冰冻切片:1、用去离子水或双蒸水稀释Tris-EDTA 抗原修复液(10×,pH8.5)至1×。
2、免疫染色洗涤液洗涤切片。
编号 名称 IH0296 Storage Tris-EDTA 抗原修复液(10×,pH8.5) 100ml 4℃ 使用说明书 1份3、将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95℃或沸水加热约。
4、抗原修复液(1×)使用前预热。
5、免疫染色洗涤液洗涤1~2次。
tris缓冲液的PH值
tris缓冲液的PH值使用TRIS缓冲液将pH控制在约7-8范围内,常规更多的会使用磷酸盐,因为其价格更加便宜,但是磷酸盐会导致其测试样品中的生物物质发生不良反应。
当要在溶液上进行pH测量时,必须认识到涉及pH电极系统的另一种“不良反应”。
大多数组合pH电极使用的普通氯化银-氯化银参比电极具有氯化钾盐桥,该桥被氯化银饱和。
这种系统在大多数样品中均能很好地起作用,但在含有蛋白质或相关物质的生物样品中却不能很好地起作用。
极低的银离子浓度(约0.0001 M)足以与蛋白质反应,并在电极的多孔液结结构中产生不溶的沉淀,因此由于产生大量的“液结”电势而导致pH测量错误穿过沉淀物。
通过使用带有甘汞参比内部元素的电极或“双结”设计,可以非常简单地避免此问题。
参比内部电池都包含在盐桥内的玻璃管结构中,而氯化钾溶液中不含重金属。
因此,没有不需要的沉淀物形成,参比结保持不堵塞,并且液接电位保持可以忽略不计。
Tris缓冲溶液中的准确pH测量Tris或tris(羟甲基)氨基甲烷已被广泛用作生物介质中的pH缓冲剂,已经有约35年了。
Tris不吸水,易溶于水,好的厂家纯度也高,它不会沉淀钙盐,在室温下可在溶液中稳定数月,并且不会抑制许多酶系统。
在60年代后期,当用于测量tris pH的参比电极具有亚麻纤维接头时,获得的pH读数将会出现不正确的情况,这个问题虽然很容易消除,但引发了许多有关与tris缓冲区一起使用的的问题。
此外,由于tris缓冲液的化学和物理性质,使用不当可能会导致pH值测量错误。
建议使用tris缓冲液时选用最适合pH测量的电极系统。
Tris缓冲液的化学和物理性质对pH的影响tris缓冲液在其实际缓冲液范围(pH 7至9)内,缓冲液值,稀释值和近似温度系数。
常用于生理测量的pH范围(pH 7至7.5)中的tris没有大的缓冲能力。
因此,使用tris缓冲液控制样品pH值时应格外小心。
为了获得准确的结果,在使用tris进行标准化时会利用温度pH依赖性,从而直接得出结论,使用tris来控制样品的pH值时,控制程度将取决于样品的温度。
常用缓冲液配置
实验室常用缓冲液配置方案1)1MTris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度:1MTris-HCl配制量:1L配制方法:称量gTris置于1L烧杯中。
加入约800ml的去离子水,充足搅拌溶解。
3.按下表量加入浓盐酸调理所需要的pH 值。
PH值浓HCl约70ml约60ml约42ml将溶液定容至1L。
高温高压灭菌后,室温保留。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,由于Tris溶液的pH值随温度的变化差别很大,温度每高升1℃,溶液的pH值大概降低个单位。
2)10×TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度:100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量:1L配制方法:1.量取以下溶液,置于1L烧杯中。
1MTris-HClBuffer(,,)100ml500mMEDTA(PH8.0) 20ml向烧杯中加入约800ml的去离子水,平均混淆。
将溶液定容至1L后,高温高压灭菌。
室温保留。
MTris-HCl(pH8.8)组份浓度:MTris-HCl配制量:1L配制方法:称量gTris置于1L烧杯中。
加入约800ml的去离子水,充足搅拌溶解。
用浓盐酸调理pH值至。
将溶液定容至1L。
高温高压灭菌后,室温保留。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,由于Tris溶液的pH值随温度的变化差别很大,温度每高升1℃,溶液的pH值大概降低个单位。
4)3M醋酸钠(pH5.2)组份浓度:3M醋酸钠配制量:100ml配制方法:1.称量NaAc3H2O·置于100-200ml烧杯中,加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调理pH值至3.加去离子水将溶液定容至100ml高温高压灭菌后,室温保留。
5)PBSBuffer组份浓度:137mMNaCl,mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4配制量:1L配制方法:1.称量以下试剂,置于1L烧杯中。
NaCl 8gKClNa2HPO4KH2PO4向烧杯中加入约800ml的去离子水,充足搅拌溶解。
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北京雷根生物技术有限公司
Tris-EDTA 缓冲液(10×TE,pH7.4)
简介:
Tris-EDTA 缓冲液简称TE, 即Tris-EDTA buffer(10mM Tris ,1mM EDTA pH7.4),用于溶解DNA 、保存DNA 等,是常用分子生物学试剂。
其主要原理是溶液中的金属离子容易破坏DNA ,而EDT A 可以螯合金属离子以达到保护DNA 的目的。
该试剂为10×的浓缩液,经高压灭菌处理。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、用去离子水稀释到1×后使用。
注意事项:
1、 如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
2、 注意无菌操作。
3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
编号 名称 R00193 Storage Tris-EDTA buffer(10×TE ,pH7.4) 500ml RT 使用说明书 1份。