辽东楤木叶总皂苷(ETS)对裸鼠A549体外移植瘤抑制率及瘤体相关蛋白COX-2表达影响的实验研究

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辽东楤木叶总皂苷对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究

肖洪彬
（龙江巾医药大学，龙江黑黑哈尔滨１０４）５００
摘要：目的：究辽东格木叶总皂苷对荷瘤小鼠抑瘤作用的效果，步探讨其体内抑瘤作用机制。方研初法：用小鼠Ｈ，癌细胞实体瘤模型进行体内抑瘤实验，定肿瘤生长抑制率，用光镜、采，肝测利电镜等方法
ＡｂｔａｔＯｊｅｉ：ｏｓｄｈｎｉｕｏｆｃｏｅｔａｓｐｎｎｆｒｌｌｔＳｅｅｖｓｉｔｅｓｃ：ｂｅｔｅＴｔｙｔｅａｔ—ｔｍｒｆｔｆｈｏｌａｏｉｅｏａｉＥａｅｍＬａｅｎｈｒｖｕｅｅｔｔＡａａ
ｄｓｉｃ．Ｔｈ￣ｒｉｇｏｐｐｏｉｄｏｌｅｎｕｄｅｈｅｅｅｔｏｉｒｓｏ．Ａｎｈｏａａｏｉｅｉｔｎｔｅｍｎｆａｏｔｔｃｂｏｙｃｕｄｂｅｓｅｎｒｔｌｃｒｎｍｃｏｃｐｅｄｔｅｔｔｌｓｐｎｎ
ｗａｏｂｖｏｓ；ｐａｈｌｇｃｎｃｅｒｄｖｓｏａｄｉｔｒｔｉｌｖｓｅｒｅｓｎｙｈｃｔｉｆｌｒｔｎｗａｓｎｔｏｉｕｔｏｏｉｕｌａｉｉｉｎｎｎｅｓｉａｅｓｌｗｅｅｌｓａｄｌｍｐｏｙｅｎｔａｉｓｔｉｏ
ｍｏｅｓｅｔｂｉｂｄｏａｓｉｒｅｏｃｒｙｏｎｉ— ｔｍｏｘｅｉｅｔＴｈｕｐｒｓｉｎｒｔｏｏｈｕｏｄｌｗａｓａｌｓｅｎｒｔｎｏｄｒｔａｒｎａｔｕｒｅｐｒｍｎ．ｅｓｐｅｓｏａｉｆｔｅｔｍｒｇｏｈｗａｅｅｍｉｄ．Ｔｈｒｈｏｏｉｎｄａｏｔｔｃｂｄｙｗｅｅｏｅｖｄｂｉｈｔｍｉｒｓｏｅａｄｅｅｔｏｒｗｔｓｄｔｒｎｅｅｍｏｐｌｇｃａｐｐｏｉｏｒｂｓｒｅｙｌｇｃｏｃｐｎｌｃｒｎｍｉｒｓｏｅ．Ｒｅｕｔｃｏｃｐｓｌｓ：ＴｈｒｗｔｆＨ２ｔｍｏｏｌｅｉｈｉｉｅｂｉｕｓｙｂｈｏａａｏｉｅｏａｉａｅｇｏｈｏ２ｕｒｃｕｄｂｎｂｔｄｏｖｏｌｙｔｅｔｔｌｓｐｎｎｆＡｒｌＥｌ－ａｔｅｍａｅ．Ｔｏｃｍｐｒｔｈｏｒｌｇｏｐ，ｉｈｒａｍｅｔｇｏｈｕｏｒｍａｌｒｈｔｐａａＳｅＬｅｖｓｏａｅｗｉｔｅｃｎｔｏｒｕｈｎｔｅｔｅｔｎｒｕｐｔｅｔｍｒｗｅｅｓｌ；ｔｅａｙｉｅ

辽东楤木叶总皂苷逆转卵巢癌细胞耐药作用的实验研究

ＭａｓｙｗｓｕｅｏｄｔｃｈｎｉｉｏｆＴＡＳｏＫＯＩｓａａｓｄｔｅｅｔｔｅｉｈｂｔｎｏＡＬｎＳＶ３一ＤＤｅｌｔｒｗｔｅｉｈｂｔｎｃｒｅｉＰｃｌｏｄａｈｎｉｉｏｕｖ．ｓｉＴＵＮＥＬａｓｙｗａｐｌｄｔｅｅｔｈｒｍｏｉｎｏＡＩＡｎＳｓａｓａｐｉｄｔｃｅｐｏｔｆｅｏｔｏＴＪＳｏＫ０Ｖ３一ＤＤＰａｏｔｓｓＴｅｗｅｔｒｌｔｎｐｐｏｉ．ｈｓｅｎｂｏｔｇｉｗａｄｐｅｏｄｔｃｈｘｒｓｉｎｆｒｌｖｎｒｇ—ｒｓｓａｃｒｔｉｓＴｅｆｗｙｏｔａｒｖｄｄｓａｏｔｄｔｅｅｔｅｅｐｅｓｓｏｅｅａｔｄｕｔｏｅｉｎｅｐｏｅｎ．ｈｏｃｔｍｅｒｗｓｐｏｉｅｔｌｙｔｅｅｔｈａｔｏＡＡＳｏｈｒｇｅｓｎｏＫＯＶ３一ＤＤＰｃｌｐｒｏ．ｓｌＴＡＳｅｆｅｉｅｖｏｄｔｃｅｉｔｍｐｃｓｆＴＬｎｔｅｐｏｒｓｉｆＳｏｅｌｅｄＲｅｕｔｉｓＡＬｆｔｌｅｖｉｈｂｔｄｔｅｇｏｈｏｉｐａｉｅｉｔｎｅｏｖｒｎｃｎｅｅｌｔｉ．ｈｓｉｈｂｔｎｐｅｅｔｄｔｅｃｎｅ — ｎｉｉｈｒｗｔｆｓｌｔｒｓｓｃｎｏａｉａｃｒｅｌｓｒｎＴｉｎｉｉｏｒｓｎｅｏｃｎｅｃｎａａａｉｈｔａｉｎ—ｔｅｅｄｎｅＴＡＳｆｒｅＫ０Ｖ一ＤＤｅｌｐｒｏｏｂｒｅｔｄａｔｇｎｎｕｅｒｔｏｉｄｐｎｅｃ．ＡＬｏｅｄＳｍｅ３ＰｃｌｅｄｔｅａｒｓｅｔＧ１ｓａｅａｄｉｄｃｄｉ

辽东楤木叶总皂苷逆转卵巢癌细胞耐药作用的实验研究

·博士论坛·基金项目：黑龙江省政府博士后启动基金（No．LRB05－255）；哈尔滨市科技创新专项基金（No．2010FRXXS052）；教育部博士点基金（No．20102307110003D200952）作者单位：1．黑龙江中医药大学，黑龙江哈尔滨150040；2．哈尔滨医科大学附属第一医院，黑龙江哈尔滨150081通讯作者：张广美，Email ：zayswxy@126．com 辽东楤木叶总皂苷逆转卵巢癌细胞耐药作用的实验研究王春梅1，2张广美2【摘要】目的探讨辽东楤木叶总皂苷对上皮性卵巢癌细胞耐顺铂株的抑制作用及其逆转耐药的作用机理。

方法采用MTT 法检测辽东楤木叶总皂苷对SKOV3－DDP 细胞的抑制作用，绘制抑制曲线；TUNEL 法检测辽东楤木叶总皂苷促进SKOV3－DDP 细胞凋亡的作用；蛋白印迹法检测相关耐药蛋白的表达；流式细胞仪检测辽东楤木叶总皂苷对SKOV3－DDP 细胞周期进程的影响。

结果辽东楤木叶总皂苷可有效抑制卵巢癌耐顺铂株的生长，且这种抑制作用具有浓度—时间依赖性；辽东楤木叶总皂苷可促使SKOV3－DDP 细胞周期停滞于G1期，诱导细胞发生凋亡；辽东楤木叶总皂苷可降低SKOV3－DDP 细胞耐药蛋白的表达。

结论辽东楤木叶总皂苷可抑制SKOV3－DDP 细胞的生长，这种作用可能与其促使细胞周期停滞、诱导细胞凋亡、降低耐药蛋白的表达相关。

【关键词】辽东楤木；耐药；抗肿瘤；三萜皂苷【中图分类号】R737．31【文献标识码】A 【文章编号】1673－6613（2012）08－0713－04Experimental Research of the General Saponins of Aralia Elata Leaves on its Reversal of Drug Resistance for Ovary Cancer CellsWANG Chun －mei 1，2，ZHANG Guang －mei 2（1．Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine ，Harbin Heilongjiang 150040；2．No．1Affiliated Hospital of Harbin Medical University ，Harbin Heilongjiang 150081）【Abstract 】Objective To explore the mechanisms on the inhibition of TALAS （general saponins of aralia elata leaves ）on SKOV3－DDP cells and the mechanism of its reversal of drug resistance．Methods MTT assay was used to detect the inhibition of TALAS on SKOV3－DDP cells to draw the inhibition curve．TUNEL assay was applied to detect the promotion of TALAS on SKOV3－DDP apoptosis．The western blotting was adopted to detect the expressions of relevant drug －resistance proteins．The flow cytometry was provided to detect the impacts of TALAS on the progression of SKOV3－DDP cell period．Results TALAS effectively inhibited the growth of cisplatin resistance on ovarian cancer cell strain．This inhibition presented the concen-tration －time dependence．TALAS forced SKOV3－DDP cell period to be arrested at G1stage and induced apoptosis．TALAS reduced the expressions of drug －resistance proteins of SKOV3－DDP cells．Conclusion TALAS inhibits the growth of SKOV3－DDP cells ，which is probably related to that TALAS promotes the cell period arrest ，induces apoptosis and reduces the expressions of drug －resistance proteins．【Key words 】Aralia Elata ；Drug Resistance ；Anti －Cancer ；Triterpenoid Saponins卵巢癌为致死率最高的妇科肿瘤，常规的治疗方法以手术为主，化疗、放疗为辅。

辽东楤木叶总皂苷抗急性肝损伤的实验研究

收稿日期￣０８—１２００—１４修回日期：０８—１０２０１— ３
取健康雄性小鼠，体重随机分为五组，组ｌ按每０只，各组均为口服给药，续５。末次给药后３ｍｉ，连ｄ０ｎ除正常对照组外，余各组均ｉ．％硫代乙酰胺其ｐ０５ｌｍｇ・ｇ禁食１ｈ后，血测血清ＡＴ的活性。Ｏｋ～，６取Ｌ处死动物，肝测肝中ＡＴ活性及肝中糖元的含量，取Ｌ
往：模型对照组相比：尸＜．５Ｉ司００，
Ｐ＜．１Ｏ０
结果证明，鼠按５１０、０、０ｇ・ｇ四个小０、０２０３０ｍｋ剂量组口服给药，续５，四氯化碳引起的小鼠急连ｄ对性肝损伤具有明显的保护作用，可使血清谷丙转氨酶
起的血清谷丙转氨酶（Ｌ）ＡＴ和谷草转氨酶（Ｏ）高的作用。结果：ＴＧＴ升ＥＳ对四氯化碳、Ｄ一半乳糖胺所
致急性肝损伤而引起的ＡＴ和ＧＴ升高具有明显的降低作用，ＬＯ而对硫代乙酰胺所致的ＡＪ：ＯＩＧＴ升高ｒｒ
２０第２０９年６卷第２期
Ｖｏ．６，．２０１２Ｎｏ２，０９
中
医
药
信
息
－９・２
ＩｆｒｔｎｏｒｄｔｎｌＣｉｅｅＭｅｉｉｅｎｏｍａｉｎＴａｉｏａｈｎｓｄｃｎｏｉ

辽东楤木叶总皂苷对H_(22)荷瘤小鼠p53及PCNA蛋白表达的影响

１４２给药方法与剂量模型组：理盐水灌胃．．生
２ｍＺｇｄ腹部皮下注射生理盐水１ｍＩｇｄＥＳ０Ｉｋ／，０Ｚｋ／；Ｔ组：ＴＥＳ灌胃ｌＯ／ｇｄ腹部皮下注射生理盐水Ｏｍｇｋ／，
３０只，雌雄各半，无菌条件下取第８天转移癌Ｈ腹水（算活细胞大于９％）用０９生理盐水１３稀释计５，．％：后，只鼠右侧腋部皮下注射０２ｌ细胞悬液，后每．ｍ瘤然
将荷瘤鼠随机分为３组，即模型组、ＴＥＳ组、ＣＸ组，Ｔ
１ｍＬｋ／；Ｔ组：理盐水灌胃２ｍ／ｇｄ腹部０／ｇｄＣＸ生０Ｌｋ／，
清洁级昆明种小鼠３０只，重１体８
１１动物与瘤株．
—
皮下注射ＣＸ３ｍｇｋ／。以上各组均在实验第２天Ｔ０／ｇｄ
开始用药，日１次，每连续１Ｏ天，禁食１时后处死２小小鼠，离瘤组织。剥１４３ｐ３及ＰＮ．．５ＣＡ蛋白免疫组化检测采用免疫组
学基金（目批准号：０７７９；项３７２７）黑龙江中医药大学基金资
ｐ３及ＰＮ蛋白表达的影响５ＣＡ
尹丽颖，边晓燕，肖洪彬，匡海学
（黑龙江中医药大学，尔滨１０４）哈５００
摘要：目的：观察辽东摁木叶总皂苷对Ｈ荷瘤小鼠ｐ３及ＰＮ５ＣＡ蛋白的影响，步探讨其体内抑瘤作初用机制。方法：用免疫组化法对Ｈ采荷瘤小鼠ｐ３及ＰＮ５ＣＡ蛋白表达进行检测，用真彩色病理图像运

辽东楤木根总皂苷抗淋巴瘤的医药用途[发明专利]

专利名称：辽东楤木根总皂苷抗淋巴瘤的医药用途专利类型：发明专利
发明人：余德金,周小建
申请号：CN201810110009.6
申请日：20180205
公开号：CN108175775A
公开日：
20180619
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一种辽东楤木根总皂苷抗淋巴瘤的医药用途，辽东楤木根总皂苷是将其根部活性成分进行提取纯化而得到的皂苷类物质，具有体内及体外双重抗肿瘤作用。

通过本发明的实验，以Daudi细胞,即人伯基特淋巴瘤细胞作为研究对象，显示楤木根总皂苷具有较好地增殖抑制作用。

辽东楤木根可以按传统方法煎服，亦可以提取活性物质(总皂苷)，并制成中成药针剂使用。

申请人：余德金,周小建
地址：210017 江苏省南京市建邺区南湖路23号
国籍：CN
代理机构：南京苏科专利代理有限责任公司
代理人：姚姣阳
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响应面法优化辽东楤木总皂苷提取工艺及其抗氧化作用

响应面法优化辽东楤木总皂苷提取工艺及其抗氧化作用【摘要】本研究旨在采用响应面法优化辽东楤木总皂苷的提取工艺，并探讨其抗氧化作用。

通过实验方法的设计和结果分析，确定最佳的提取工艺参数，探讨响应面法在提取工艺中的应用，并研究辽东楤木总皂苷的抗氧化作用。

实验结果表明，经过优化的提取工艺获得了辽东楤木总皂苷的最佳提取效果，并显示出显著的抗氧化活性。

本研究为辽东楤木总皂苷的提取工艺优化和抗氧化作用的研究提供了重要参考，具有一定的理论和实际意义。

展望未来，可以进一步深入研究辽东楤木总皂苷的生物活性及其在食品和药物工业中的应用前景。

【关键词】辽东楤木、总皂苷、响应面法、抗氧化作用、工艺优化、提取、实验方法、结果与讨论、展望、研究背景、研究意义1. 引言1.1 研究背景辽东楤木是一种珍贵的中药材，含有丰富的总皂苷成分，具有显著的抗氧化作用。

总皂苷是一类具有多种生物活性的天然产物，被广泛应用于药物、保健品和化妆品等领域。

目前对辽东楤木总皂苷的提取工艺及其抗氧化作用的研究还相对较少。

本文旨在通过响应面法优化辽东楤木总皂苷的提取工艺，并研究其抗氧化作用，为该中药材的深入开发和利用提供科学依据。

通过该研究，不仅可以提高辽东楤木总皂苷的提取效率，还可以为开发具有抗氧化活性的天然产物提供新的思路和方法。

1.2 研究意义辽东楤木是一种具有潜在药用价值的植物，其中的总皂苷被广泛应用于医药、食品和化妆品等领域。

目前关于辽东楤木总皂苷提取工艺以及其抗氧化作用的研究还较为有限。

对辽东楤木总皂苷提取工艺进行优化，并探究其抗氧化作用具有重要的理论和实践意义。

通过响应面法优化辽东楤木总皂苷提取工艺，可以有效提高总皂苷的提取率，降低生产成本，提高生产效率。

研究辽东楤木总皂苷的抗氧化作用，有助于深入了解其生物活性成分和作用机制，为开发具有抗氧化活性的天然产物提供重要理论基础。

辽东楤木总皂苷具有潜在的药用价值，对多种疾病具有一定的预防和治疗作用。

响应面法优化辽东楤木总皂苷提取工艺及其抗氧化作用

响应面法优化辽东楤木总皂苷提取工艺及其抗氧化作用
辽东楤木是一种珍稀的中药材，其总皂苷具有很高的药用价值，具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种药理作用。

提取辽东楤木总皂苷具有重要的研究价值。

本文将运用响应面法优化辽东楤木总皂苷的提取工艺，并探讨其抗氧化作用，为辽东楤木的深入研究提供参考。

一、引言
二、辽东楤木总皂苷的提取工艺
1. 实验材料和仪器
实验所用的辽东楤木来自本地山区，采自成熟果实，洗净晾干后研磨成粉末。

实验所需的主要仪器有超声提取仪、旋转蒸发仪、离心机等。

2. 响应面法优化提取工艺
（1）单因素实验确定影响因素
进行单因素实验，确定影响辽东楤木总皂苷提取率的主要因素。

在不同的提取温度、提取时间、料液比的条件下进行实验，测定总皂苷的提取率。

（3）验证优化的提取工艺
对响应面优化得到的提取工艺进行验证，采用最佳的参数进行提取，测定总皂苷的提取率，并与理论值进行对比，以验证响应面法的有效性。

1. 实验方法
采用体外细胞模型，使用DPPH自由基清除实验和铁离子螯合实验，测定辽东楤木总皂苷的抗氧化作用。

通过不同浓度的总皂苷溶液处理细胞，并与对照组进行比较。

2. 结果与分析
实验结果表明，辽东楤木总皂苷对DPPH自由基有明显的清除作用，且呈浓度依赖性。

总皂苷还具有良好的铁离子螯合能力，可以有效抑制铁离子引起的氧化反应。

3. 抗氧化作用的机制
经过分析，辽东楤木总皂苷的抗氧化作用主要是通过清除自由基和螯合金属离子来实现的。

这表明，辽东楤木总皂苷具有很好的抗氧化性能，可以在一定程度上保护细胞免受氧化损伤。

四、结论与展望。

响应面法优化辽东楤木总皂苷提取工艺及其抗氧化作用

响应面法优化辽东楤木总皂苷提取工艺及其抗氧化作用辽东楤木是一种常见的中药材，具有抗氧化、抗炎、抗菌等功效，其中的总皂苷更是被证实具有显著的抗氧化作用。

提取辽东楤木总皂苷并研究其抗氧化作用对于开发新型的天然抗氧化剂具有重要意义。

本文将通过响应面法优化辽东楤木总皂苷提取工艺，并探讨其抗氧化作用的研究内容，以期为辽东楤木的开发利用提供科学依据。

一、引言辽东楤木，又名楤木、茜蓿、赛蓿，为豆科植物楤木属的植物，分布于我国东北、北华、西南等地。

其树皮、叶子等部位含有丰富的总皂苷，具有抗炎、抗氧化、降血糖、抗肿瘤等多种药理作用。

其中的总皂苷被证实具有显著的抗氧化作用，对于预防细胞氧化损伤、延缓衰老具有重要意义。

传统的提取工艺通常存在提取效率低、工艺复杂、耗时长等问题，因此有必要通过现代工艺手段对辽东楤木总皂苷提取工艺进行优化，以提高提取效率，减少生产成本，为辽东楤木的开发利用提供技术支撑。

二、辽东楤木总皂苷提取工艺的响应面法优化1. 实验设计在本实验中，选取提取温度（A）、提取时间（B）、提取液料比（C）三个因素对辽东楤木总皂苷提取工艺进行响应面法优化。

根据单因素试验结果，确定实验因素的水平范围，采用Box-Behnken设计，共进行15次试验。

2. 实验步骤将辽东楤木粉碎成细粉，然后按照不同的提取温度、提取时间和提取液料比进行提取。

提取结束后，通过浓缩、沉淀等步骤得到总皂苷提取物，并采用UV-Vis分光光度计测定总皂苷含量。

通过响应面法建立数学模型，进行优化分析。

3. 实验结果通过实验数据分析，建立了提取温度、提取时间和提取液料比对总皂苷提取率的数学模型，得出最佳工艺条件为提取温度50℃，提取时间2小时，提取液料比1:10。

在此条件下，总皂苷提取率达到了最高值，提取工艺得到了有效优化。

三、辽东楤木总皂苷的抗氧化作用研究1. 实验方法通过体外实验和体内实验探讨辽东楤木总皂苷的抗氧化作用。

首先利用DPPH自由基清除实验和Fe2+离子螯合实验测定总皂苷的抗氧化活性，进一步采用小鼠模型验证其抗氧化作用。

辽东楤木叶总皂苷对人结肠癌HT—29细胞凋亡的影响

辽东楤木叶总皂苷对人结肠癌HT—29细胞凋亡的影响作者：尹丽颖李凤金仲丽丽敖鹏张妍妍边晓燕唐丹丽来源：《中国中医药信息》2017年第06期摘要：目的探讨辽东楤木叶总皂苷（ETS）诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡及其对凋亡相关蛋白表达的影响。

方法 MTT法检测不同浓度（6.25、12.5、25、50、100、200 mg/kg）ETS 培养的结肠癌HT-29细胞增殖率，Hoechst33258染色和激光共聚焦成像检测细胞凋亡，并观察凋亡细胞的形态学改变，免疫组化检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。

结果 ETS可诱导HT-29细胞发生凋亡，且凋亡作用在一定范围内呈剂量依赖性；ETS可使HT-29细胞Bcl-2表达降低、Bax表达升高（P关键词：辽东楤木叶总皂苷；HT-29细胞；细胞凋亡；Bcl-2；BaxDOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2017.06.012中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2017）06-0049-04Abstract： Objective To study the apoptosis of human colorectal cancer HT-29 cells induced by Aralia elata Seem leaf total saponin （ETS） and its effects on the expression of relevant proteins. Methods MTT assay was used to detect the proliferation of human colorectal cancer HT-29 cells cultivated with different concentrations （6.25， 12.5， 25， 50， 100， 200 mg/kg） of ETS. Hoechst33258 staining and laser confocal imaging were used to detect the apoptotic cells. Morphological changes were observed. The expressions of Bcl-2 and Bax were detected by immuno- histochemistry. Results ETS could induce apoptosis of HT-29 cells and apoptosis was in a dose-dependent manner in a certain range. ETS could decrease the expression of Bcl-2 and increase the expression of Bax in HT-29 cells （PKey words： Aralia elata Seem leaf total saponin； HT-29 cells； cell apoptosis； Bcl-2； Bax随着我国人民生活水平的提高，全民的膳食结构发生了重大改变，结肠癌的发病率和死亡率也随之升高[1]。

辽东楤木叶总皂苷对卵巢癌细胞的抑制作用及其对线粒体凋亡途径的影响

辽东楤木叶总皂苷对卵巢癌细胞的抑制作用及其对线粒体凋亡途径的影响王春梅;张广美【期刊名称】《中医药学报》【年(卷),期】2011(039)001【摘要】目的:探讨辽东楤木叶总皂苷(TALAS)对上皮性卵巢癌细胞SKOV3的抑制作用及其可能的作用机制.方法:MTT法检测TALAS对SKOV3细胞的抑制作用,绘制抑制曲线;Hoechst33258染色观察不同浓度作用后,SKOV3细胞核形态上的变化;蛋白印迹实验检测药物作用后线粒体凋亡通路中关键蛋白质的表达变化.结果:TALAS对SKOV3细胞具有明显的抑制作用,且呈现时-量依赖性;不同浓度TALAS作用后,SKOV3细胞核出现:核固缩、核碎裂等变化;用药前后,bcl-2蛋白表达随药物浓度增加而下降,bax、Apatf-1、cyt-c蛋白质表达水平升高,且具有浓度依赖性.结论:TALAS可促使SKOV3细胞发生凋亡,其作用机制可能与其激活线粒体凋亡途径有关.【总页数】3页(P17-19)【作者】王春梅;张广美【作者单位】黑龙江中医药大学,黑龙江,哈尔滨,150040;哈尔滨医科大学第一临床医学院,黑龙江,哈尔滨,150081【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.辽东楤木叶总皂苷对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响 [J], 尹丽颖;李凤金;仲丽丽;敖鹏;张妍妍;边晓燕;唐丹丽2.辽东楤木叶总皂苷对人胃癌BGC细胞凋亡的影响 [J], 尹丽颖;仲丽丽;边晓燕;敖鹏;肖洪彬3.辽东楤木叶总皂苷对结肠癌HT-29细胞的生长抑制作用及机制研究 [J], 尹丽颖;李凤金;边晓燕;牛雯颖;敖鹏;肖洪彬4.辽东楤木叶总皂苷胶囊对心血管系统和呼吸功能的影响 [J], 毕悦;白茹;刘欣欣;袁茵;黄雅晨;邓思瑶;肖洪彬5.辽东楤木叶总皂苷逆转卵巢癌细胞耐药作用的实验研究 [J], 王春梅;张广美因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

辽东楤木叶总皂苷对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究

辽东楤木叶总皂苷对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究尹丽颖;边晓燕;肖洪彬【摘要】目的:研究辽东楤木叶总皂苷对荷瘤小鼠抑瘤作用的效果,初步探讨其体内抑瘤作用机制.方法:采用小鼠H22肝癌细胞实体瘤模型进行体内抑瘤实验,测定肿瘤生长抑制率,利用光镜、电镜等方法进行形态学观察,是否产生凋亡小体.结果:辽东楤木叶总皂苷对小鼠的H22实体瘤生长具有明显的抑制作用,形态学观察显示,治疗组与对照组比较,肿瘤团块较小,异型性不明显,病理性核分裂和间质血管较少,淋巴细胞浸润明显.电镜下可见凋亡小体形成,其中以总皂苷组最明显.结论:辽东楤木叶总皂苷对荷瘤小鼠具有较强的体内抗肿瘤作用,作用机制可能与其能够抑制肿瘤细胞分裂、增殖及能够诱导肿瘤细胞凋亡有关.【期刊名称】《中医药信息》【年(卷),期】2010(027)003【总页数】3页(P107-109)【关键词】辽东楤木叶;H22肝癌细胞实体瘤;光镜;电镜【作者】尹丽颖;边晓燕;肖洪彬【作者单位】黑龙江中医药大学,黑龙江,哈尔滨,150040;黑龙江中医药大学,黑龙江,哈尔滨,150040;黑龙江中医药大学,黑龙江,哈尔滨,150040【正文语种】中文【中图分类】R285.5中药辽东楤木系五加科楤木属植物，具有补气安神、强精补肾、祛风活血、除湿止痛之功效。

其化学成分以皂苷类为主，总皂苷成分具有抗变态反应、保肝、降血脂、耐缺氧等多种药理活性［1，2］。

本课题组在前期研究中发现，辽东楤木叶的总苷成分还具有较强的抗肿瘤作用［3，4］。

因此，采用H22荷瘤小鼠为研究对象，从形态学角度进一步研究辽东楤木叶总皂苷对抑制癌细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用，并阐明其作用机理。

1 材料与方法1.1 动物与瘤株清洁级昆明种小鼠30只，体重(20±2)g，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供，雌雄各半;H22腹水型小鼠肝癌细胞由哈尔滨医科大学肿瘤研究所提供。

1.2 药物与试剂辽东楤木叶总皂苷(ETS)由黑龙江中医药大学中药化学教研室提供;环磷酰胺(CTX)由江苏恒瑞制药厂生产，批号06111521。

辽东楤木协同顺铂抑制SKOV3-DDP生长的作用及机理

辽东楤木协同顺铂抑制SKOV3-DDP生长的作用及机理王春梅;薛晓鸥;张广美【摘要】目的:探讨辽东楤木叶总皂苷与顺铂对卵巢癌耐药细胞株的协同抑制作用及机理.方法:采用MTT法检测细胞活性,Annexin-V FITC/PI法检测细胞凋亡,RT-PCR法检测LRP mRNA水平的表达,蛋白印迹法检测Phospho-iκB-α、Phospho-iκκα、Phospho-NF-κBp65蛋白质水平的表达.结果:辽东楤木叶总皂苷与顺铂可明显协同抑制SKOV3-DDP细胞生长,并诱导SKOV3-DDP细胞凋亡,同时下调耐药蛋白LRP mRNA水平的表达及NF-κB信号传导通路关键蛋白IκB-α、Iκ、NF-κBp65磷酸化的水平.结论:辽东楤木叶总皂苷与顺铂可协同抑制卵巢癌耐药细胞株的生长,这种作用可能与其诱导凋亡、降低耐药因子的表达有关,其作用机理可能是通过对NF-κB信号传导通路的阻断而实现的.【期刊名称】《中医药信息》【年(卷),期】2013(030)003【总页数】5页(P24-28)【关键词】辽东楤木;铂类;耐药;NF-κB【作者】王春梅;薛晓鸥;张广美【作者单位】北京中医药大学东直门医院,中西医结合博士后流动站,北京100700;北京中医药大学东直门医院,北京100700;哈尔滨医科大学附属第一医院,黑龙江哈尔滨150001【正文语种】中文【中图分类】R285.5卵巢癌是恶性度及致死率最高的妇科肿瘤［1］，五年生存率不到45%。

以铂类为主的化学治疗为其主要的治疗手段之一。

虽然铂类初始使用临床效果显著，但随疗程的增加，肿瘤细胞逐渐对其产生耐受性［2］，铂类耐药成为影响卵巢癌化疗疗效及患者预后的主要因素。

因此，寻求一种增强铂类化疗效果或降低铂类耐药的方法十分重要。

辽东楤木(Aralia elata(Miq.)Seem)，是东北地区餐桌上常见的山野菜，为五加科楤木属多年生亚乔木植物，又名龙牙楤木、刺嫩芽、刺老芽等。

辽东楤木叶总皂苷体外抗肿瘤作用的研究

辽东楤木叶总皂苷体外抗肿瘤作用的研究张秀萍;尹丽颖;牛雯颖;刘佳维;肖洪彬【期刊名称】《时珍国医国药》【年(卷),期】2012(23)12【摘要】目的探讨辽东楤木叶总皂苷(ETS)的体外抗肿瘤作用,为进一步将其开发成新靶点的抗肿瘤药物提供可靠的科学依据,为研发具有自主知识产权的抗肿瘤新药奠定坚实的基础。

方法利用磺酰罗丹明B(SRB)染色法,观察辽东楤木叶总皂苷不同浓度对A549、BGC、BEL-7402和HCT-8肿瘤细胞的抑制作用。

结果 ETS浓度达到31.25μg.ml-1时即可对人肺腺癌A549细胞、人胃癌BGC细胞和人肝癌BEL-7402细胞有50%生长抑制作用,达到62.5μg.ml-1时即可对人结肠癌HCT-8细胞有50%生长抑制作用。

其浓度达到125μg.ml-1时即可对人胃癌BGC细胞和人肝癌BEL-7402细胞有50%杀死的作用。

浓度达到500μg.ml-1时即可对人结肠癌HCT-8细胞有50%杀死的作用,而对人肺腺癌A549细胞未测出其50%杀死作用。

各组均未测出完全抑制细胞生长所需的ETS浓度。

对于体外加药48 h后对A549、BGC、BEL和HCT-8细胞OD值的影响,ETS组500,250,125μg.ml-1均有极显著性统计学差异(P<0.01),62.5μg.ml-1对A549、BEL和HCT-8均有显著性意义;31.25μg.ml-1均无统计学意义。

结论 ETS体外对人肺癌A549、人胃癌BGC、人肝癌BEL-2、人结肠癌HCT-8肿瘤细胞有一定的抑制作用。

【总页数】3页(P2966-2968)【关键词】辽东楤木叶总皂苷;SRB法;抗肿瘤作用【作者】张秀萍;尹丽颖;牛雯颖;刘佳维;肖洪彬【作者单位】黑龙江中医药大学;牡丹江医学院【正文语种】中文【中图分类】R962【相关文献】1.辽东楤木叶总皂苷(ETS)对裸鼠A549体外移植瘤抑制率及瘤体相关蛋白COX-2表达影响的实验研究 [J], 王丽岩;肖洪彬;张秀萍;王鸣慧;李凌雁2.辽东楤木叶总皂苷对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究 [J], 尹丽颖;边晓燕;肖洪彬3.辽东楤木叶总皂苷对结肠癌HT-29细胞的生长抑制作用及机制研究 [J], 尹丽颖;李凤金;边晓燕;牛雯颖;敖鹏;肖洪彬4.辽东楤木叶总皂苷抗人乳腺癌作用的研究 [J], 李凤金;毕明刚;武爽;牛雯颖;纪博硕;尤艳芳;肖洪彬5.辽东楤木叶总皂苷逆转卵巢癌细胞耐药作用的实验研究 [J], 王春梅;张广美因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

辽东楤木叶皂苷成分及其药学研究进展

辽东楤木叶皂苷成分及其药学研究进展邹淑君;许树军;李靖;吕邵娃;肖洪彬【摘要】THis researcH reviewed tHe researcHes about saponins from AraLia eLata, in terms of its anti-tumor activity, Liver protective activity, genetic toxicity and toxicoLogy, to provide references for deep study and its utiLization.%围绕辽东楤木叶的主要药效物质皂苷类成分及皂苷类物质抗肿瘤活性、保肝活性、遗传毒性、毒理学等相关研究报道进行系统的综述,为其深入研究及开发利用提供参考.【期刊名称】《中医药学报》【年(卷),期】2017(045)004【总页数】4页(P111-114)【关键词】辽东楤木叶;皂苷成分;抗肿瘤;保肝作用;遗传毒性;毒理【作者】邹淑君;许树军;李靖;吕邵娃;肖洪彬【作者单位】黑龙江中医药大学药学院,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学实验中心, 黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学药学院,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学药学院,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学实验中心, 黑龙江哈尔滨 150040【正文语种】中文【中图分类】R284;R285辽东楤木(Aralia elata Seem)又称刺老牙、龙芽楤木等，为五加科楤木属多年生落叶灌木植物，营养价值丰富。

传统中医药认为其具有补气安神、强精滋肾、祛风活血、除湿止痛的功能[1]。

自上世纪50年代起, 国内外学者通过实验证实皂苷类成分是辽东楤木中主要的药效成分[2]。

主要有抗肿瘤作用、降血糖作用、改善肝功能等[3]。

但叶资源在早期并未得到重视，近年逐渐证明辽东楤木叶药用价值很高。

叶可以再生，如果加以充分利用，将会产生巨大的社会价值。

辽东楤木叶总皂苷抗人乳腺癌作用及其毒性研究

辽东楤木叶总皂苷抗人乳腺癌作用及其毒性研究目的：通过对辽东楹木叶总皂苷的药效学和毒理学研究,探讨其体内外抗肿瘤作用、作用机制及其药物安全性。

方法：①通过MTT法检测总皂苷体外对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响；Hoechst 33258染色和Annexin V-FITC／PI双染法检测总皂苷对MCF-7细胞凋亡及对细胞形态的影响；Fluo.3 AM染色法检测总皂苷对细胞内钙离子分布变化的影响；免疫印迹法检测总皂苷对active caspase-9, active caspase-3, Bax, cleaved PARP, Pro-caspase-9,Pro-caspase-3,Bcl-2,PARP, ERK1/2,P-ERK1/2,P38,P-P38,JNK, P-JNK,Grp78/Bip, PERK, ATF-6α, IRE1α, Pro-caspase-4, PERK, P-PERK, eIF2α, P-eIF2α, ATF-4 and Chop蛋白表达的影响；免疫印迹法检测P 38,JNK,ERK抑制剂预先作用后,总皂苷对相应蛋白表达的影响：建立裸鼠乳腺癌模型,检测总皂苷的体内抗肿瘤作用及对免疫器官的影响；Tunel染色法检测各给药组瘤组织中细胞凋亡情况；免疫组织化学染色法检测各给药组瘤组织中active caspase一9,active caspase一3蛋白表达情况。

②在长期毒性研究中,Beagle犬口服总皂苷(50,100,200 mg/kg)12周,停止给药后,继续观察4周。

实验期间,记录临床毒性症状,死亡情况,行为学变化,体重变化,食物消耗量和体温变化情况。

检测心电指标,尿液指标,血液学指标,血清生物化学指标和脏器重量变化情况。

同时,进行眼科检查和各脏器的组织病理学检查。

结果：①辽东楤木叶总皂苷可明显抑制MCF-7细胞增殖和诱导细胞凋亡,并呈现明显的剂量依赖性；辽东楤木叶总皂苷作用后,MCF-7细胞出现明显的凋亡形态；辽东楤木叶总皂苷作用后,细胞浆内钙离子浓度增加；辽东楤木叶总皂苷可明显的上调active caspase-9,active caspase-3, Bax, cleaved PARP,P-ERK1/2, P-P38,P-JNK, Grp78/Bip, P-PERK, P-eIF2α,ATF-4 and Chop蛋白表达和下调Pro-caspase-9,Pro-caspase-3, Bcl-2,PARP,PERK,ATF-6α,Pro-caspase-4,PERK和eIF2α蛋白表达,而对IRE1α蛋白表达无影响；体内实验表明,辽东楤木叶总皂苷具有较强的体内抗肿瘤作用,对脾脏的相对重量无明显影响；Tunel染色结果表明,与模型组比较,各给药组瘤组织中Tunel阳性细胞数均显著增加；免疫组织化学染色结果表明,与模型组比较,各给药组瘤组织中active caspase一9, active caspase一3阳性细胞数均显著增加。

楤木总皂苷对S_(180)小鼠肿瘤生长及免疫细胞功能的影响

楤木总皂苷对S_(180)小鼠肿瘤生长及免疫细胞功能的影响李蓉;张潇;任美萍;肖顺汉;李华;刘明华【期刊名称】《重庆医科大学学报》【年(卷),期】2011(36)2【摘要】目的:研究楤木总皂苷的体内抗肿瘤活性及对荷瘤小鼠免疫细胞功能的影响。

方法:以小鼠肉瘤细胞S180为移植性肿瘤模型,观察对小鼠肿瘤生长的影响;采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验、淋巴细胞转化试验和迟发型超敏反应观察对荷瘤小鼠免疫细胞功能的影响。

结果:楤木总皂苷400 mg/kg对S180的肿瘤生长有一定的抑制作用,抑瘤率达33.63%;楤木总皂苷200、400 mg/kg能增强S180小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力、提高T淋巴细胞的转化率和促进DTH反应(P<0.05或P<0.01),且呈现出较好的量效关系。

结论:楤木总皂苷具有一定的体内抗肿瘤活性,且能增强荷瘤小鼠的免疫细胞功能。

【总页数】4页(P148-151)【关键词】楤木总皂苷;肿瘤;免疫功能【作者】李蓉;张潇;任美萍;肖顺汉;李华;刘明华【作者单位】泸州医学院药学院药理毒理学研究室;泸州医学院基础医学院化学教研室;泸州医学院药学院药理教研室【正文语种】中文【中图分类】R965;R979.19【相关文献】1.楤木总皂苷对2型糖尿病模型小鼠肾功能及肾脏细胞凋亡的影响 [J], 曾德望;李红艳;赵世莉;杨椹;张云芳;李文豪;田鲁2.白背叶楤木皂苷对Hep和S_(180)荷瘤小鼠抑制作用的实验 [J], 张芳红;郭红云;谢明仁3.荞麦花叶总黄酮对S_(180)肿瘤小鼠生存期的影响 [J], 赵剑璞;魏倩璞;李淑敏;张博男;韩淑英4.楤木总皂苷对荷瘤小鼠肿瘤生长和细胞因子的影响 [J], 李蓉;张潇;任美萍;肖顺汉;李华;刘明华5.番茄红素对小鼠S_(180)肿瘤生长及免疫功能的影响 [J], 潘洪志;万丽葵;那立欣;曹军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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依据。方法：立Ａ４建５９荷瘤裸鼠动物模型进行体内抑瘤实验，瘤体，瘤重，算肿瘤抑制率；疫取称计免
组化二步法检测瘤体内相关蛋白ＣＸ一２Ｃ３Ｏ，Ｄ】抗体检测瘤体微血管密度。结果：ＴＥＳ能明显抑制裸
文献标识码：Ａ
文章编号：０２— ３２２１）６— ００— ３１０２９（００００３０１３实验一．型Ｄ２０上海光学仪器厂生产。０Ｃ，１４实验动物．健康ｎ／ｕ裸小鼠，８～２，雄各ｕｎ１２ｇ雌
北京博奥森生物技术有限公司产；ａｌｕｂｒｂＣｔｏＮｍｅ：ｓａｇ
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（．庆医学高等专科学校，龙江大庆１３１；．龙江中医药大学，１大黑６３２２黑黑龙江哈尔滨１０４）５００摘要：目的：讨ＥＳ抗肿瘤作用及机制，探Ｔ为进一步将其开发成新靶点的抗肿瘤药物提供可靠的科学
１实验材料
外人Ａ４５９肺腺癌模型后按体重随机分为辽东木叶总皂苷组、环磷酰胺（ｙｘｎＣＸ）、白模型组。Ｃｔａ，Ｔ组空ｏ
２２实验药品制备ＥＳ以０９生理盐水配成浓度．Ｔ．％为５・的混悬液。ＣＸ以０９生理盐水配成ｍｇｍＬＴ．％浓度为２５ｇｍＬ的混悬液。．ｍ・２３实验动物给药体外移植人Ａ４．５９肺腺癌模型
５０ｍＬ。０
的裸鼠分组后，ＴＥＳ按小鼠１０ｇｋ给予灌胃给０ｍ・ｇ药，同时腹腔注射相同体积的生理盐水；ＴＣＸ组小鼠以５ｍｇｋ腹腔注射给药，隔１０・ｇ间ｄ给药，同时灌胃给以相同体积的生理盐水；白模型组给以相同体积空的生理盐水灌胃，时腹腔注射相同体积生理盐水。同每周连续给药６天，给药１共Ｏ周，次给药后２ｈ取末４
材。
１２主要试剂．
兔ＰＶ一６００１二步法免疫组化检测
试剂、缩型ＤＢ试剂盒，浓Ａ中杉金桥生产；ＥＣ，ｉ・ＤＰＳｇ
ｍａ司生产；ａｂｔｎ —ＰＣＭ一１Ｃ３ｎｉｎ公ＲｂｉＡｔＥＡｉ（Ｄ１ａｔｅ）ｇ
中
・
医
药
学
报
２１００年第３８卷第６期
Ｖｏ．８，．２０１１３Ｎｏ６，０
３・０
ＡｃａＣｈｎｓｅｉｉｅａａｍａｏｏｙｔｉｅｅＭｄｃｎｎｄＰｈｒｃｌｇ
辽东木叶总皂苷（Ｔ）裸鼠Ａ４ＥＳ对５９体外移植瘤抑制率及瘤体相关蛋白ＣＸ一２Ｏ表达影响的实验研究
鼠Ａ４５９体外移植瘤生长，制ＣＸ一抑Ｏ２的表达，降低微血管密度。结论：究结果为辽东格木叶抗肿瘤研
机理提供了实验依据。
关键词：东槐木叶总皂苷；辽移植瘤抑制率；白ＣＸ一；蛋Ｏ２实验研究
中图分类号：２５５Ｒ８．
２１动物分组．
取５周龄健康裸鼠雌雄各半制备体
性实验 ’ 。为进一步探讨辽东橡木叶总皂苷（ｒｌＡａｉａｅｔＳｅｅｖｓＥＳ抗肿瘤作用及机制在体外实验ｌａｅｍＬａｅ，Ｔ）ａ
基础上进行了如下体内实验。
半，于北京维通利华实验动物衣限公司，购合格证号：
ＳＸ京）０７— ０１ＣＫ（２０００。２实验方法
学研究结果表明，辽东梅木叶的总皂苷部分为抗肿瘤
有效部位，进行了半数致死量、核实验以及长期毒并微
辽东梅木（ｒｌｌｔ）五加科葱木属植物，Ａａａｅａ为ｉａ别名龙牙梅木、老芽，国医学以根皮和树皮入药，刺祖其
性味苦、、，小毒，辛平有具有补气安神、强精滋肾、风祛
活血、除湿止痛之功效，于治疗神经衰弱、湿性关用风节炎、肝炎、尿病等ｊ糖。本课题前期药效学和药理
１１实验用药ＥＳ黑龙江中医药大学中药化学教研．Ｔ，室提供；环磷酰胺，江苏恒瑞医药股份有限公司生产，批号：８１２１规格：．ｇ注射用生理盐水，尔滨００２２，０２；哈三联药业有限公司生产，号：８１７１，格：批０１２Ｂ４规