动物生物化学实验四
(整理)《动物生物化学课程标准与设计
《动物生物化学》课程标准与设计一、课程标准（一）课程定位《动物生物化学》课程是畜牧兽医专业必修的核心基础课程，生物化学是生物类、医学类、农学、环境、食品类等学科专业的一门重要的专业基础课。
是一门实践性、综合性较强的专业实践技能训练课程，是对专业核心能力系统训练的重要环节，在专业人才培养中具有十分重要的地位。
（二）课程任务通过本课程的学习使学生建立生物活性、酶促反应、生物转化等生物技术的基本思维观念，从而掌握“生物大分子的分离和纯化方法，糖、蛋白质、核酸及主要次生代谢产物的定性、定量和有关生物化学性质的分析技术，酶活性测定、动力学分析”等生化技术原理及操作手段，从而熟悉生物体内物质代谢产物积累过程及其调控，为后续课程打下思想基础和技术基础；并通过严格的实验要求和管理，使得学生能够胜任生物技术类企业专业岗位需求，并将所学的知识和技能渗透到社会实践及业务创新能力中去，培养务实创新的专门技术人才。
（三）教学目标1．能力目标：（1）专业能力目标通过本课程学习，能掌握三大物质的生命活动规律及蛋白质的转录、复制和翻译的基本过程，并能正确应用生物化学的实践操作技能，为后续课程打好基础。
（2）社会能力目标1）具有良好的思想政治素质、行为规范和职业道德。
2）具有较强的自我控制能力和团队协作能力，有较强的责任感和认真的工作态度。
3）具有较强的开拓发展的创新能力。
4）具有较强的口头与书面表达能力、人际沟通能力。
（3）方法能力目标1）具有较好的学习新知识与技能的能力。
2）具有较好的分析和解决问题的方法能力。
3）具有查找资料、文献获取信息的能力。
4）具有合理制定工作计划的能力。
2．知识目标1）掌握蛋白质、核酸、酶的基本理论、生物学功能及与临床应用的相关联系。
掌握糖类、脂类、氨基酸、核苷酸代谢等内容的临床相关知识。
2）熟悉糖类、脂类、氨基酸、核苷酸代谢及遗传信息传递的基本途径及生理意义。
3）了解物质的结构及代谢调节的过程。
3.素质目标1）理论课培养良好的学习习惯和严肃认真的学习态度。
动物生物化学实验复习题
《动物生物化学实验》复习题一.填空题1、生物化学实验的常用技术包括、、等。
2、牛奶中的主要蛋白质是，其占牛奶蛋白质总量的，其在pH值为的缓冲液中容易沉淀。
3、将制备酪蛋白时所得乳清，徐徐加热。
即出现沉淀。
此为乳清中的和。
4、Folin-酚试剂由和组成。
5、福林酚法测定蛋白质含量时，样品蛋白质含量的适宜范围为 ug/mL。
6、酶促反应速度最大时的环境温度称为，能使酶活性降低或丧失的物质称为，而对淀粉酶起此作用的物质是。
7、酶促反应速度最大时的pH称为，能使酶活性从无到有或使酶活性增加的物质称为，而对淀粉酶起此作用的物质是。
8、淀粉酶具有高度的性，催化蔗糖水解。
9、高浓度的硫酸铵一方面破坏了IgG分子表面的，而另一方面中和了其分子表面的，致使分子之间容易碰撞而沉淀。
10、DNA主要存在于，在细胞中，它与结合形成。
11、脱氧核糖核蛋白体在mol/L的NaLl溶液中溶解度小，在mol/L的NaLl溶液中溶解度大。
12、不连续的聚丙烯酰胺凝胶电泳具有较高的分辨率，是因为电泳时会产生三大效应，即，和电荷效应。
13、使用硫酸铵分级沉淀的优点：系数小而且大，不易引起蛋白质。
二．是非题（）1、酪蛋白在稀碱溶液中易溶解。
（）2、酪蛋白是一种不含硫的蛋白质。
（）3、Folin-酚法是一种光谱技术，主要仪器是可见光分光光度计。
（）4、Folin-酚法测定蛋白质含量时，样品应进行适当稀释。
（）5、Folin-酚法是测定蛋白质含量的常用方法。
（）6、Folin-酚法应该用同种蛋白质做对照。
（）7、做温度对淀粉酶活性影响时，沸水浴中试管取出后即可直接加入碘液观察结果。
（）8、NaCl中Na+1是唾液淀粉酶的激活剂。
（）9、CuSO4中Cu2+是唾液淀粉酶的抑制剂剂。
（）10、硫酸铵盐析制备的IgG，保留了其生物活性的。
（）11、在制备DNA过程中氯仿—异戊醇的主要作用是除去脂类物质。
（）12、PAGE时加入蔗糖是为了增加蛋白质的解离度。
动物生物化学课程标准
动物生物化学课程标准动物生物化学课程标准：培养学生的生物学基础知识与实际应用能力随着生命科学的发展，动物生物化学领域日益成为人们关注的焦点。
为了满足社会对动物生物化学专业人才的需求，动物生物化学课程作为生物学相关专业的核心课程，旨在培养学生的生物学基础知识和实际应用能力。
本文将阐述动物生物化学课程标准的主要内容，包括课程目标、课程内容、实验技能和评估方法。
一、课程目标动物生物化学课程的目标是让学生掌握动物生物化学的基本概念、原理和方法，了解生物化学在动物生产和动物健康中的应用。
通过本课程的学习，学生应具备以下能力：1、掌握动物生物化学的基本理论、基本知识和基本技能；2、了解动物生物化学的发展趋势和应用前景；3、具有运用动物生物化学知识解决实际问题的能力；4、具备一定的科研能力和创新精神。
二、课程内容动物生物化学课程内容主要包括以下几个部分：1、动物细胞的生物化学：介绍细胞的基本结构和功能，包括细胞膜、细胞器、蛋白质和核酸等。
2、动物代谢的基础知识：讲解能量代谢、物质代谢和信息传递等基本知识。
3、糖、脂类和蛋白质的代谢：详细介绍糖、脂类和蛋白质在动物体内的代谢过程及其调节机制。
4、核酸与基因表达：阐述核酸的结构与功能、基因表达调控等知识。
5、动物生物化学实验技术：介绍动物生物化学实验的基本技术和操作方法，包括光谱分析、色谱、电泳、离心和酶学等技术。
6、动物生物化学的应用：介绍动物生物化学在动物生产和动物健康中的应用，包括饲料转化、生长与发育、免疫与疾病等方面的知识。
三、实验技能动物生物化学是一门实践性较强的学科，学生需要掌握以下实验技能：1、基本的实验操作技术，如称量、溶解、过滤、蒸馏、萃取等；2、常用实验仪器的使用方法，如分光光度计、离心机、电泳仪等；3、实验数据的记录、整理和分析；4、根据实验结果进行结果讨论和总结。
四、评估方法为了检验学生对动物生物化学课程内容的掌握程度和应用能力，以下评估方法将被采用：1、课堂表现：包括出勤率、课堂提问、小组讨论等；2、作业和练习：包括课后作业、课堂练习、实验报告等；3、期末考试：以闭卷形式进行，主要考核学生对课程内容的掌握程度和应用能力；4、其他：参加学术讲座、科研实践等活动，表现优秀者可获得额外加分。
动物生物化学实验
采用修正法消除系统误差
预先将仪器的系统误差检定出来或计算出来，做出误差
表或误差曲线，然后取与误差数值大小相同、符号相反的 值作为修正值，进行误差修正。
即：x真=x测+x修
如天平砝码不准，应采用标准砝码进行校核，确定每个砝码的修 正值。在称量时就应加上相应砝码的修正值，容量瓶、滴定管、移液 管等容量仪器均可用水重量法求出各自的修正值。
差可采取多次测量，取平均值的办法来消除，而且测量 次数越多（在没有系统误差存在的情况下），平均值就 接近于"真值"。
五、实验室安全知识简介
（一）实验室安全
1. 安全用电 2. 水火无情 3. 严防中毒
4. 避免伤害 5. 生物危害 6. 射线伤害
（二）实验室灭火
1. 切断室内所有电源，火源 2. 报警 3. 导线着火时，切断电源或使用四氯化碳灭火器，不 能用水及二氧化碳灭火器，以免触电 4. 可燃性液体着火时，可用湿布或沙土覆盖，隔绝空 气灭火。不能用水灭火，这样会扩大燃烧面积。 5. 金属钠着火时可用砂子覆盖 6. 衣服着火切忌奔走，应卧地滚动灭火。
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球重力的倍数，单位是重力加速度“g” （980cm/sec2），
相对离心力RCF可用下式计算：
东北农业大学动物生物化学本科课程教案
东北农业大学动物生物化学本科课程教案第一章：动物生物化学概述1.1 课程介绍介绍动物生物化学的课程地位、研究对象和内容阐述动物生物化学在兽医和畜牧业发展中的重要性1.2 动物生物化学的基本概念解释生物化学、动物生物化学的定义探讨动物生物化学的研究方法和技术1.3 动物生物化学的发展简史回顾动物生物化学的发展过程和重要里程碑分析现代动物生物化学的发展趋势和挑战第二章：动物生物大分子2.1 蛋白质的结构与功能介绍蛋白质的基本组成单位、一级结构探讨蛋白质的空间结构、功能多样性及活性调控2.2 核酸的结构与功能阐述DNA、RNA的基本结构、功能及其在遗传信息的传递中的作用探讨核酸酶的作用机制及基因表达调控2.3 糖类的结构与功能介绍糖类的分类、分布及生物合成途径探讨糖类在能量代谢、细胞信号传导中的作用第三章：动物生物化学反应与调控3.1 酶学基本原理介绍酶的定义、特性及作用机制探讨酶促反应的调控及酶的抑制剂、激活剂3.2 生物氧化与抗氧化系统阐述自由基的产生、生物氧化过程及抗氧化酶系统探讨氧化应激与动物疾病、抗氧化剂的作用及应用3.3 钙信号与细胞代谢调控介绍钙离子的生物学功能、钙信号传递途径探讨钙信号在动物生长发育、骨骼肌收缩中的调控作用第四章：动物营养生物化学4.1 营养素的基本概念与代谢阐述蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素和矿物质等营养素的作用探讨营养素代谢过程、营养素缺乏与过量对动物健康的影响4.2 氨基酸代谢介绍氨基酸的分类、代谢途径及调控机制探讨氨基酸代谢紊乱与疾病的关系及氨基酸营养调控的应用4.3 脂肪代谢与能量代谢阐述脂肪的分类、脂肪代谢途径及调控机制探讨脂肪代谢紊乱与疾病的关系及脂肪营养调控的应用第五章：动物生物化学实验技术5.1 动物生物化学实验基本操作介绍动物生物化学实验器材、操作规范及实验安全阐述实验数据处理与分析方法5.2 光谱分析技术与应用探讨紫外光谱、红外光谱、核磁共振光谱等在动物生物化学中的应用分析光谱技术在生物大分子结构测定、代谢组学等领域的应用前景5.3 色谱技术及其在动物生物化学中的应用介绍气相色谱、液相色谱、色谱-质谱联用等色谱技术探讨色谱技术在动物生物化学分析、药物研发等领域的应用第六章：动物生物化学中的电泳技术6.1 电泳原理与技术介绍电泳的基本原理，包括琼脂糖凝胶电泳、SDS-PAGE等探讨电泳技术在蛋白质分析、DNA分析中的应用6.2 电泳实验设计与操作详细讲解电泳实验的设计步骤，包括样品制备、凝胶制备、电泳操作等提供电泳实验的troubleshooting 建议第七章：动物生物化学中的光谱分析技术7.1 紫外光谱和可见光谱探讨紫外光谱和可见光谱在生物大分子分析中的应用分析光谱技术在蛋白质和核酸分析中的应用7.2 荧光光谱和发光光谱介绍荧光光谱和发光光谱的基本原理探讨荧光光谱和发光光谱在生物分子检测和分析中的应用第八章：动物生物化学中的核磁共振技术8.1 核磁共振原理与技术解释核磁共振的基本原理，包括自旋量子、拉莫尔进动等探讨核磁共振技术在生物分子结构分析中的应用8.2 核磁共振实验设计与操作详细讲解核磁共振实验的设计步骤，包括样品制备、数据采集、数据分析等提供核磁共振实验的troubleshooting 建议第九章：动物生物化学中的质谱技术9.1 质谱原理与技术介绍质谱的基本原理，包括离子化、质量分析、检测器等探讨质谱技术在生物分子定性和定量分析中的应用9.2 质谱实验设计与操作详细讲解质谱实验的设计步骤，包括样品制备、质谱仪操作、数据处理等提供质谱实验的troubleshooting 建议10.1 实验数据分析方法介绍生物统计学在实验数据分析中的应用，包括描述性统计、假设检验等探讨实验数据分析软件的使用，如SPSS、R等讲解实验报告的结构和内容，包括引言、材料与方法、结果、讨论、结论等重点和难点解析：一、动物生物化学概述难点解析：理解动物生物化学的定义和研究方法，以及其在实际应用中的价值。
动物生物化学实验
动物生物化学实验1. 引言动物生物化学实验是研究动物体内生物分子的组成、结构和功能的重要手段。
通过实验可以深入了解动物体内的代谢过程、蛋白质合成、酶活性以及相关疾病的发生机制等。
本文将介绍一系列常用的动物生物化学实验方法和实验步骤。
2. 蛋白质含量测定实验2.1 实验原理蛋白质含量是衡量细胞或组织中蛋白质水平的重要指标。
常用的蛋白质含量测定方法有Lowry 法、Bradford法和BCA法等。
其中，BCA法是一种基于铜离子和比色反应的测定方法，具有灵敏度高、稳定性好的特点。
2.2 实验步骤•步骤1：制备待测样品。
将待测组织样品加入磷酸缓冲溶液中，用均匀器均匀打碎组织，使得细胞内的蛋白质充分溶解。
•步骤2：制备标准曲线。
选取一系列已知浓度的蛋白质标准品，分别加入不同浓度的BCA试剂，混匀后在37摄氏度下孵育一段时间，最后测定吸光度。
•步骤3：测定待测样品。
将待测样品加入BCA试剂中，混匀后在37摄氏度下孵育一段时间，最后测定吸光度。
•步骤4：计算蛋白质含量。
将待测样品的吸光度值与标准曲线相比较，根据吸光度值的差异计算待测样品中的蛋白质含量。
3. 酶活性测定实验3.1 实验原理酶活性测定是评估酶功能和酶水平的重要方法。
常用的酶活性测定方法有过氧化物酶（POD）活性测定、超氧化物歧化酶（SOD）活性测定和碱性磷酸酶（ALP）活性测定等。
3.2 实验步骤以POD活性测定为例：•步骤1：制备待测样品。
将待测组织样品加入磷酸缓冲液中，通过离心等方法使得细胞内的酶充分溶解。
•步骤2：制备标准曲线。
选取一系列已知浓度的酶标准品，分别加入过氧化氢溶液和柱剂，混匀后在一定时间内测定吸光度。
•步骤3：测定待测样品。
将待测样品加入过氧化氢溶液和柱剂中，混匀后在一定时间内测定吸光度。
•步骤4：计算酶活性。
将待测样品的吸光度值与标准曲线相对比，根据吸光度值的差异计算酶的活性。
4. 代谢产物检测实验4.1 实验原理代谢产物是动物体内代谢过程的关键物质，其含量和比例变化可以反映动物的代谢状态。
动物生物化学 教学大纲
《动物生物化学》教学大纲动物生物化学（animal biochemistry）是在分子水平上研究动物体的化学本质及生命活动过程中化学变化规律的科学，是动物医学专业/本硕连读动物医学专业/动物科学专业本科学生的专业基础课。
动物生物化学课程主要内容包括：各类生物分子特别是生物大分子（蛋白质、酶、核酸等）的结构、性质和功能；物质代谢过程与能量的释放、转移和储存，物质代谢和能量流动的相互联系和调节控制；信息分子的代谢和遗传信息的传递、表达和调节；动物器官、组织机能生物化学；以及相关基本知识和最新知识成果。
动物生物化学课程设置的目的在于为学生进一步学习动物生理学、动物遗传学、兽医微生物学、兽医免疫学、兽医药理学、兽医病理学、兽医临床诊断学等后续课程和进行科学研究奠定坚实的理论和技能基础。
一、各章节要点和授课时数第一章绪论2学时一、生物化学的涵义二、生物化学发展简史三、动物生物化学与动物生产和动物健康四、动物生物化学学习方略重点掌握动物生物化学的概念、研究对象和目的，以及在国民经济发展中的地位和作用；了解动物生物化学在国内、外发展的概况。
第二章蛋白质的结构与功能4学时一、概述二、蛋白质的基本组成单位—氨基酸三、蛋白质结构四、蛋白质的结构与功能的关系五、蛋白质的重要性质、分离纯化与鉴定重点掌握蛋白质在生命活动中的作用，蛋白质的一、二、三、四级结构概念与特征，蛋白质的结构与功能的关系；熟悉蛋白质的组成单位氨基酸，蛋白质的理化性质与分离纯化及测定。
第三章核酸化学2学时一、概述二、核酸的一级结构三、DNA的结构与功能四、RNA的结构与功能五、核酸的理化性质及其应用六、核酸酶和DNA限制性内切酶七、DNA一级结构测定与DNA的化学合成八、基因和基因组重点掌握核酸的一级结构，DNA的结构与功能，RNA的结构与功能，基因和基因组；熟悉核酸的理化性质及其应用，核酸酶和限制性核酸内切酶，DNA一级结构测定与DNA的化学合成。
动物的生物化学实验
结果呈现与解释
将实验结果以图表形式呈现，并结合专业知识对 结果进行解释和讨论。
ABCD
数据处理与分析
运用统计学方法对实验数据进行处理和分析，如 描述性统计、方差分析、回归分析等。
实验报告撰写
按照学术规范撰写实验报告，包括实验目的、方 法、结果、讨论和结论等部分。
05
实验结果分析与解读
数据统计与分析方法
描述性统计
对实验数据进行整理、归类，计算均值、标准差等统计量，以描述数 据的基本特征。
假设检验
通过设定假设、选择适当的检验方法（如t检验、F检验等），判断实 验数据是否存在显著差异。
方差分析
用于分析不同因素对实验结果的影响程度，以及因素间的交互作用。
回归分析
通过建立数学模型，探讨自变量与因变量之间的关系，预测实验结果 。
动物饲养管理
确保动物饲养环境符合标准， 提供充足的食物和水，避免应 激。
实验设计与伦理审查
制定详细的实验计划，并通过 伦理审查确保实验符合相关法 规。
试剂与仪器准备
提前准备好所需试剂和仪器， 确保其质量和性能符合要求。
实验操作规范与技巧
动物麻醉与固定
根据实验需求选择合适的麻醉方法和固 定方式，确保动物在无痛状态下进行实
生物安全研究
动物实验可用于评估生物武器、生物恐怖主义等生物安全威胁的风 险和防范措施。
THANKS
感谢观看
阐明生物小分子代谢途径
分析动物体内糖类、脂类、氨基酸等小分子的代谢过程，揭示其在能量供应、 物质合成与分解等方面的作用。
了解动物生理生化过程
探究动物细胞信号传导机制
通过研究动物细胞内的信号分子、受体、传导通路等，揭示细胞对外界刺激的响 应机制及细胞间的通讯方式。
《动物生物化学》课程标准
《动物生物化学》课程标准课程名称：动物生物化学课程类别：专业基础课课程学时：68学时课程学分：4学分一、课程性质与任务《动物生物化学》是将生物化学技术与生物技术有机融合的一门生命科学类的专业基础课程。
生物化学已成为生命科学的基本语言，是生命科学中发展最快并与其它课程广泛交叉与渗透的重要的核心课程，是当代生命科学各专业的重要的专业基础课程之一，也是一门实践性很强的课程。
根据高职高专技能型人才培养目标，围绕畜牧兽医等领域的知识需求进行课程内容整合，拟将专业基础课准确导向专业技术，实现“教学做合一”的教学理念。
通过本课程的学习使学生建立生物活性、酶促反应、生物转化等生物技术的基本思维观念，从而掌握“生物大分子的分离和纯化方法，糖、脂肪、蛋白质、核酸及主要次生代谢产物的定性、定量和有关生物化学性质的分析技术，酶活性测定及应用”等生化技术原理及操作手段，从而熟悉生物体内物质代谢产物积累过程及其调控，为后续专业课程的学习打下思想基础和技术基础。
本课程的教学目的是培养学生能够运用所学生物化学知识，从分子水平上认识和解释生命现象的能力。
本课程需要《动物解剖生理学》等课程为基础，同时又为《宠物营养》、《宠物疫病》等学科的学习打下基础。
二、课程目标（一）知识目标1．了解蛋白质的生物学功能、元素组成、多肽链的基本组成单位——L-a-氨基酸；必需氨基酸的概念。
准确描述肽键、多肽链、蛋白质一级结构、高级结构的概念。
理解蛋白质重要理化性质及有关的基本概念，掌握蛋白质分离纯化及测定方法。
2.掌握核酸的物质组成、组成核酸的基本单位核苷酸、细胞内重要的游离核苷酸。
掌握核酸的结构特征，了解核酸的结构与功能的关系。
了解核酸的一般性质，掌握DNA 的变性与复性及其应用。
3．了解酶的概念、命名和分类，酶的化学本质；掌握酶的特性，酶的结构和功能，酶的活性中心和必需基团。
理解酶促反应机理学说及要点。
熟记影响酶促反应动力学的几种因素，米氏常数的意义、酶活力的测定，调节酶、同工酶、酶（包括固定化酶）的制备和鉴定。
动物生物化学0578
4、分子的或综合生物化学发展时期 （1950～至今，机能生物化学）
孟德尔 豌豆杂交实验提出生物遗传的不是其形状本身， 而是它的遗传因子。 1895年 Miescher 发现核蛋白 1928年 格里非思 肺炎球菌转化实验 1944年 Avery等人首次证明DNA是遗传物质 1950年 Chargaff证明A=T G=C 1953年，Watson和Crick提出DNA的双螺旋结构模型 为标志，生物化学的发展进入分子生物学阶段。 1966年 遗传密码破译
2．Karg B. Mallis(美)发明PCR方法。 3．Michaet Smith(加拿大)建立DNA合成用与定点诱 变研究 1994年 Alfred G. Giillman（美）等，发现G蛋白及基因在 细胞内信号转导的作用。
1997年
1 stanley B.prusiner(美)发现一中新型的致病因子－感染性
三、生物化学的应用与展望
1、 生物化学是二十一世纪生命科学的带头学科。 学科热点： 基因组学
蛋白质组学 克隆（组织、器官、个体）
生物化学学科的新进展与热点问题
1、基因组计划研究的继续与深入 2、蛋白质组研究（后基因组研究） 3、RNA组计划正在兴起 4、基因表达调控 5、细胞信号传递 6、与医学密切相关的一些热点问题 7、端粒、端粒酶与细胞正常衰老、凋亡研究 8、与药物生产密切相关的基因工程研究 9、体内第三类生物大分子糖蛋白与蛋白聚糖 10、分子生物学中心法则的理论研究及相关技术研究
现代定义：研究生物分子，特别是生物大分子相互 作用、相互影响以表现生命活动现象原理的科学。
2、生物化学的研究内容
（1）研究生物体内物质的化学组成、结构、性质与 功能。
高等生物体主要由蛋白质、核酸、糖类、脂类以及 水、无机盐等组成，此外还含有一些低分子物质， 如维生素、激素、氨基酸、多肽、核苷酸及一些分 解产物。
《动物生化实验》实验一、生化实验基本知识
六、试剂
1．每2-3人合用一份试剂，在一般情况下，使用的试剂应该固 定。 2．取试剂瓶塞与量取用具（如吸管或滴管）不应分开，用后 应立即放回原处，量取用具应按规定放置。瓶塞与量具一旦 弄错，试剂即受损坏、污染，实验就可能失败。
3．标准试剂不应用潮湿之吸管与之直接接触，取出后不得再 放入原瓶。
七、玻璃仪器的洗涤
八、舍弃物的处理
舍弃物必须依照其性质作适当之处理。以免造成实验材 料之浪费，损坏水槽及下水管道，或污染实验环境。 1．所有固体舍弃物（例如用过的滤纸、损坏的软木塞及橡皮 物、玻璃渣、火柴梗等）。必须放入废物筒或篓中，切勿丢 水槽中。
2．废硫酸或洗液，应先倾入大量水中，再倒入水槽中，并以 大量水冲走。 3．实验完成后的沉淀或混合物，若含有可提取或收回的贵重 物品者，不可随意舍弃，应放入教师指定的回收器中。
二、常用生化仪器使用
离心机
离心技术（centrifugal
technique）：根据颗粒作匀速圆周
Hale Waihona Puke 运动时受到一个外向的离心力的行为而发展起来 的一种分离技术。 离心技术应用很广，诸如分离出化学反应后的沉淀物， 天然的生物大分子、无机物、有机物，在生物化学以及其它 的生物学领域常用来收集细胞、细胞器及生物大分子物质。
生物化学教研室现有教师5名，其中副教授2 名，讲师一名，博士二人，硕士一人。承担 校区各专业的生物化学教学。同时开展科研 工作，以动物生化和生化制药为主要研究方 向，旨在为现代养殖教育事业的发展培育新 人。
实验一、生物化学实验基本操作
第一部分 生物化学实验基本要求
一、实验目的
1．培养学生实事求是的科学作风，独立工作能力及 思维方法。 2．学习基础的生物化学实验方法，为今后的学习与 研究准备更好的条件。 3．培养学生爱护国家财物、爱护集体、团结互助的 优良道德品质。 4．培养学生的书面及口头表达能力。
动物生物化学实验教学中科学素养的培养
动物生物化学实验教学中科学素养的培养科学素养是现代社会所重视的素质之一，它包括科学知识、科学精神和科学方法等多个方面。
而在学校教育中，动物生物化学实验作为重要的实验教学内容，在培养学生科学素养方面发挥着不可替代的作用。
本文将从动物生物化学实验的特点、教学目标以及培养科学素养的方法等方面进行探讨，希望对相关教学工作者和学生有所启发。
一、动物生物化学实验的特点动物生物化学实验是通过对动物体内各种代谢过程进行实验研究，从而揭示动物生命活动的化学本质，是生物化学实验的重要组成部分。
与植物实验相比，动物实验更注重个体间的差异性，实验结果更直接、实验过程更复杂。
动物实验还需要注意动物的福利和生命权益，所以在设计和实施实验过程中需要更加细致和全面。
1. 培养学生的实验技能。
动物生物化学实验需要学生具备一定的实验操作能力和动手能力，通过实验操作能够熟练掌握实验仪器的使用方法，掌握动物实验的技巧和注意事项。
2. 培养学生的科学思维能力。
动物生物化学实验不仅是一种技术性的活动，更是一种科学性的思考和推理过程。
学生在实验过程中应当能够结合所学知识，运用科学方法解决实际问题。
3. 提高学生的实验安全意识。
动物生物化学实验中，学生需要注意动物的福利与生命权益，同时还需要注意实验操作的安全性，保护自己和他人的人身安全。
4. 增强学生的团队协作能力。
在动物生物化学实验中，往往需要学生进行小组合作，共同完成实验任务。
这样有利于培养学生的团队协作精神，提高学生的团队合作能力。
1. 强化科学知识的教学。
科学素养首先建立在扎实的科学知识基础之上。
在动物生物化学实验教学中，应当注重对相关生物化学和动物生理学知识的讲解和培养。
通过对生物化学代谢过程和动物体内物质的转化等知识进行系统的讲解和学习，让学生掌握动物生物化学实验的理论知识，为实验操作提供理论依据。
3. 强化实验数据的分析和思考。
动物生物化学实验中，学生需要收集实验数据，进行数据分析和总结，从而得出结论和提出问题。
动物生物化学实验重点
动物生物化学实验一、动物生物化学实验特点1．实验材料新鲜2．被测成分在动物组织、细胞中含量很少3．体外操作应尽量模拟生理环境条件4．在绝大多数条件下，生物分子是溶解在溶液中，很难直接看到所研究的内容二、注意事项1.工作服；严禁吸烟、饮水、进食；废液缸、冲稀、废物桶2.铬酸洗液；10%-20%尿素；硝酸3.恰当的吸管，减少误差三、离心机1．利用离心力把溶液中比重不同的固液分离。
分为常速、高速和超速离心机。
2．液体要加到三分之二左右、严格配平、不要超过最大转速、防止过热。
四、酶活性的观察1酶：活细胞产生，对特异底物有高效催化能力的生物催化剂，化学本质多数蛋白质。
影响酶活性：PH、温度、激活剂和抑制剂激活剂、抑制剂：能（升高）降低酶的活性，但又不使酶失活的物质《对酶有选择性》（区别于酶的失活）2淀粉在唾液淀粉酶的催化下会水解，水解程度随时间的延长而增加。
利用碘液指示水解程度：淀粉（蓝色）——糊精（深褐色、深红色）——麦芽糖、葡萄糖（棕黄色，碘液本身的颜色）337摄氏度、PH6.8（磷酸缓冲液中PH6.6）、激活剂0.5%NaCl、抑制剂1%CuSO44注意：温度对酶的影响中沸水浴后要冷却；酶反应的特异性检验中加斑氏试剂后沸水浴先砖红色沉淀；酶的活性通常是以测定酶作用的底物或产物在酶作用前后的变化来进行观察。
五、琥珀酸脱氢酶的作用及其竞争性抑制的观察1琥珀酸脱氢酶是三羧酸循环中的一个重要的酶，位于线粒体中，可使琥珀酸脱氢而生成延胡索酸。
在缺氧的条件下，适当的受氢体也可接受脱氢酶从底物上脱下的氢。
当甲烯蓝（蓝色）作为受氢体甲烯蓝被脱下的氢还原成甲稀白（无色物质）。
【甲稀白易氧化用液体石蜡液封】2酶的竞争性抑制作用：丙二酸化学结构与琥珀酸相似，可与琥珀酸竞争性的结合琥珀酸脱氢酶的活性中心，若已与丙二酸结合，则不能再催化琥珀酸脱氢，此现象称为酶的竞争性抑制作用。
解除酶的竞争性抑制作用：加大底物浓度的方法3研磨应充分；滴加试剂时，最后滴加心脏制备液。
生物化学实验
塞氏反应：酮糖在浓酸的作用下，脱水生成5-羟 基糠醛，后者与间苯二酚作用，呈红色，可用于 鉴定酮糖的存在。
杜氏反应：戊糖在浓酸溶液中脱水生成糠醛，后 者与间苯三酚作用生成桃红色物质，可用于鉴定 戊糖的存在。
用玻棒蘸去少量血清，将此血清均匀地涂在 载玻片的一端截面上（玻片宽度应小于薄 膜），然后轻轻与距纤维薄膜一端1.5cm处接 触，样品即呈一条状涂于纤维膜上。待血清 透入膜内，移去载玻片，将薄膜平贴于已放 在电泳槽上、并已浸透缓冲液的滤纸上，点 样端阴极。
电泳：接通电源，电泳条件：电压90－110ｖ，电流
1%阿拉伯糖
杜氏 试剂
现象（沸水浴加 热）并解释
1
1D
1ml
2
2D
1ml
3
3D
1ml
注意：观察颜色变化及变化时间。
思考题
莫氏反应中莫氏试剂为什么要直接加入溶 液中，不能滴在试管壁上?
加浓硫酸时，试管倾斜，硫酸缓缓加入， 为什么不能振动溶液？
实验二 氨基酸的纸层析
重点与难点：氨基酸纸层析的基本原理的 理解是本实验的难点。重点是掌握氨基酸 纸层析的操作方法和运用。 实验安排：4课时，每人独立实验，4人一 个层析缸。
展层：
在层析缸上口处中央，平行的贴上透明胶纸，胶 纸要绷紧。在点了样品的滤纸上端中点处垂直贴 上透明胶，将滤纸上的透明胶贴在缸口的透明胶 上。
注意：滤纸点样端朝下，刚好接触缸底，垂直悬 于缸中。当溶剂前沿展到距滤纸上端约1.0cm时 取出滤纸，用吹风机吹干。
显色：
喷瓶将茚三酮溶液均匀的喷在滤纸上。在约105℃的 条件下烘烤至各层析斑点显色为止。
动物生物化学实验课程设计
动物生物化学实验课程设计一、实验目的本实验旨在通过对动物生物化学进行实验，帮助学生了解动物体内生物分子的组成、结构和功能。
具体目的如下：1.掌握生物大分子的基本化学性质及其测定方法，比如蛋白质、核酸等；2.学习生物大分子的光谱测定方法；3.学会运用分光光度法、高效液相色谱法等生物化学分析方法。
二、实验材料和设备1.工作站（可用个人电脑代替）；2.维生素C标准品；3.离心管、试管、比色皿；4.pH计、分光光度计；5.注射器、滴管、移液管、量筒、过滤膜等。
三、实验步骤1. 基本物理化学实验学生可以进行如下实验：1.水的密度实验2.酸碱中和实验3.气体的制备4.氧化还原实验2. 生物化学实验1.蛋白质含量测定：分别用同浓度的卵清蛋白、牛血清蛋白和豆腐蛋白制成不同浓度的蛋白质标准溶液，并进行比色测定，构建标准曲线。
用NaOH打断所分离的各种蛋白质，得到氨基酸溶液，之后用二级胺磷酸标记法进行精确测量。
2.蛋白质酶解酶活性测定：采用卟啉酸、胱氨酸、琥珀酸等不同基质做蛋白质酶解，测量各个反应最终吸收的波长，计算各种型号酶的活性。
3.酶促反应速率测定：确定酶的最佳反应条件（最适 pH 值与温度），并用过量底物处理掉酶活性找到最大反应速率。
通过将底物浓度从低到高，记录反应速率变化，得出酶的米氏方程曲线。
3. 综合实验1.维生素C含量的测定：测定某品牌美容粉剂样品中的维生素C的质量分数。
利用样品中的维生素C还原 Fe3+ 得到 Fe2+，在锰绿试剂存在下交换反应生成锰原子。
将生成的绿色溶液中铵硫酸还原得到无色的 Mn2+，覆盖在锰原子溶液上生成氧化亚铁，并在此时棕色液层上加入定量的 0.0005 mol/L 的 KIO4 继续反应，直至棕色液上部逐渐变为白色，在热水浴中进行脱钙、过筛、干燥等操作，最后称量干燥的托盘和附着样品的铁粉，用铁粉的质量表示样品中的维生素 C 含量。
四、实验总结通过这次实验，学生掌握了生物化学的基本知识，掌握了生物大分子的测定方法、分析方法，并对动物体内生物分子的组成、结构和功能有了更深刻的了解，为今后的学习和研究打下了牢固的基础。
动物生物化学实验教程正式
动物生物化学实验教程正式实验一血清蛋白质含量测定牛血清蛋白：BSA。
血浆：指血液的液体成分，淡黄色（因含胆红素）。
含白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原。
血液经抗凝处理、离心沉淀后，获得的液体部分。
血清：血液凝固后，释出的液体。
不含纤维蛋白原及游离钙离子。
蛋白质定量分析是动物生物化学和其他生命科学研究中经常用到的实验项目。
蛋白质是生物体内最为重要的生物大分子之一，其种类繁多、结构多样、功能各异，而且分子量相差很大，所以很难建立一个理想而通用的蛋白质定量分析方法。
目前测定蛋白质含量的方法很多，常用的测定方法有Folin—酚法（Lowry法）、紫外吸收法、凯氏定氮法、考马斯亮蓝染料结合法等，每种方法在实践中都有其优点和局限性。
本实验采用考马斯亮蓝染料结合法（Bradford法）。
(灵敏度最高)一、实验目的1．掌握分光光度法测定的原理，分光光度计的结构和基本操作要点（光源-单色器-样品室-检测器-显示器）2．掌握考马斯亮蓝染料结合法测定蛋白质含量的原理和操作方法3．掌握微量移液器的使用方法4．了解蛋白质含量测定中标准曲线的制作方法二、实验原理染料考马斯亮蓝G-250（R250，结合后可以解离）在游离状态下呈红色，最大吸收峰为465nm。
它能与蛋白质的疏水微区结合，形成蓝色复合物，该复合物的最大吸收峰为595nm，在一定浓度范围内（为什么在一定范围内），其吸光度值与蛋白质含量成正比，故可用于蛋白质含量的测定。
三、实验操作步骤表1-1考马斯亮蓝染料结合法测定蛋白质含量试管号稀释的血清样品（mL）0.9%NaCl溶液（mL）考马斯亮蓝G-250溶液（mL）空白管-0.15样品管0.1-5室温静置5min，于波长595nm处，以空白管调“0”，测定样品管的吸光度值，查标准曲线，吸光度测定值所对应的蛋白质浓度就是稀释样品的蛋白质含量，然后乘以血清的稀释倍数（10倍），可得血清中蛋白质的含量。
四、实验试剂1．考马斯亮蓝G-250溶液（0.01%）：称取考马斯亮蓝G-250100mg，溶于50mL95%乙醇中，再加入100mL85%(W/V)浓磷酸，然后用蒸馏水定容至1000mL，置棕色瓶过夜（如有不容物，可用二层滤纸过滤）。
动物生物化学教案
动物生物化学教案1. 引言动物生物化学是研究动物体内生物分子及其转化的学科。
本教案旨在通过对动物生物化学的基本概念、重要分子和相关反应的介绍，帮助学生全面了解动物体内的生物化学过程，加深对动物体内分子组成和功能的理解。
2. 基本概念在开始学习动物生物化学之前，我们先来了解一些基本概念。
•生物化学：生物化学是研究生物体内化学反应和机制的学科。
它探讨了生物分子的结构、功能和相互作用，以及生物体内的代谢过程。
•动物生物化学：动物生物化学是生物化学的一个分支，主要研究动物体内的生物分子、代谢途径和相关生物化学反应。
3. 重要分子3.1 蛋白质蛋白质是动物体内最重要的生物分子之一。
它们由氨基酸经肽键连接而成，在动物体内具有多种功能，如构成细胞结构、催化化学反应和参与信号传导等。
3.2 碳水化合物碳水化合物是动物体内的重要能源来源。
它们由碳、氢和氧元素组成，通过细胞呼吸过程将葡萄糖等碳水化合物转化为能量。
3.3 脂类脂类是动物体内的主要存储能量的形式。
它们包括脂肪、磷脂和固醇等。
脂类在动物体内起到绝缘、保护和代谢调节等重要功能。
3.4 核酸核酸是动物体内的遗传物质，包括DNA和RNA。
它们通过碱基配对的方式存储和传递遗传信息，在蛋白质合成和基因调控等方面发挥重要作用。
4. 代谢途径4.1 糖代谢糖代谢是动物体内碳水化合物转化为能量的过程。
它主要包括糖原的合成和分解、糖酵解和柠檬酸循环等反应。
4.2 脂质代谢脂质代谢是动物体内脂类转化的过程。
它涉及脂肪的合成和分解、胆固醇的合成和降解等反应。
4.3 蛋白质代谢蛋白质代谢是动物体内蛋白质的合成和分解过程。
它包括蛋白质的翻译和转录等过程，以及蛋白质的降解和回收等反应。
4.4 核酸代谢核酸代谢是动物体内核酸的合成和降解过程。
它包括DNA的复制和修复、RNA的合成和降解等反应。
5. 实验示范为了进一步理解动物生物化学，我们将进行一些与生物分子和代谢途径相关的实验示范，如：•蛋白质琼脂糖凝胶电泳•酶活性测定实验•DNA提取实验6. 总结动物生物化学是研究动物体内生物分子及其转化的学科。
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实验四酪蛋白的制备
教学目的与要求：理解蛋白质两性性质和胶体的有关特性。
教学重点与难点：重点是掌握一种提取蛋白质的方法；难点是蛋白质提取的纯度。
教学方法与手段：讲授和学生动手操作。
学时安排：2学时
教学内容：
一、引言
蛋白质是两性电解质，蛋白质分子中可以解离的基团除 N- 端 a- 氨基与C- 端 a - 羧基外，还有肽链上某些氨基酸残基的侧链基团，如酚基、羟基、胍基、咪唑基等基团,它们都能解离为带电基团。
因此，在蛋白质溶液中存在着一种平衡。
调节溶液的 pH 使蛋白质分子的酸性解离与碱性解离相等,即所带正负电荷相等，净电荷为零，此时溶液的 pH 值称为蛋白质的等电点。
在等电点时，蛋白质溶解度最小，溶液的混浊度最大，配制不同 pH 的缓冲液，观察蛋白质在这些缓冲液中的溶解情况即可确定蛋白质的等电点。
二、实验目的、任务及原理
实验目的：掌握蛋白质两性性质和胶体的有关特性。
实验任务：学习从牛奶中制备酪蛋白的原理和方法。
实验原理：牛乳中的主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。
酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为4.7。
利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调至4.7时，酪蛋白就沉淀出来。
用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯酪蛋白。
三、实验的拓展(由本实验的完成深化和延伸所学的知识，启发学生利用现有的设备拓展出新的实验内容,培养学生的创新思维和创新能力。
)牛奶中制备酪蛋白→牛奶纯度检测→食品检测。
四、介绍主要仪器设备与使用
（一）材料：新鲜牛奶
（二）试剂
1、95%乙醇1200mL
2、无水乙醚1200mL
3、0.2mol/L pH4.7醋酸-醋酸钠缓冲液300ml
先配A液与B液
A液（0.2mol/L醋酸钠溶液）：称NaAC·3H2O 54.44g，定容至2000ml。
B液（0.2mol/L醋酸溶液）：称优纯醋酸（含量大于99.8%）12.0g定容至1000ml。
取A液1770ml，B液1230ml混合即得Ph4.7的醋酸-醋酸钠缓冲液3000ml。
4、乙醇-乙醚混合液
乙醇：乙醚=1 ：1（V/V）
（三）器具：离心机、抽滤装置（布氏漏斗）、精密pH试纸或酸度计、电炉、烧杯、
温度计
五、强调实验中要注意的问题
1、由于本法是应用等电点沉淀法来制备蛋白质，故调节牛奶液的等电点一定要准确。
最好用酸度计测定。
2、精制过程用乙醚是挥发性、有毒的有机溶剂，最好在通风橱内操作。
3、目前市面上出售的牛奶是经加工的奶制品，不是纯净牛奶，所以计算时应按产品的相应指标计算。
六、学生实验
（一）酪蛋白的粗提
100mL牛奶加热至40℃。
在搅拌下慢慢加入预热至40℃、pH4.7的醋酸缓冲液100mL，
用精密pH试纸或酸度计调pH至4.7。
将上述悬浮液冷却至室温。
离心15分钟（3000 r /min）。
弃去清液，得酪蛋白粗制品。
（二）酪蛋白的纯化
1、用水洗涤沉淀3次，离心10分钟（3 000r/min），弃去上清液。
2、在沉淀中加入30mL乙醇，搅拌片刻，将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。
用乙醇-乙醚混合液洗沉淀2次。
最后用乙醚洗沉淀2次，抽干。
3、将沉淀摊开在表面皿上，风干，得酪蛋白纯品。
（三）准确称重，计算含量和得率。
含量：酪蛋白g/100 mL牛乳（g%）
式中理论含量为3.5g/100mL牛乳。