嗜热链球菌冻干保护剂保护作用的研究_蒲丽丽
保护剂在微生物真空冷冻干燥中的应用_牛晓影
Application of protectants in freeze－ dried microorganism
2， * NIU Xiao－ ying1 ， DENG Li－ li1 ， ZENG Kai－ fang1 ，
( 1.College of Food Science， Southwest University， Chongqing 400715 ， China; boratory of Quality ＆ Safety Ｒisk Assessment for Agro－products on Storage and Preservation( Chongqing) Ministry of Agriculture， Chongqing 400715 ， China) Abstract: The lower viability of freeze－ dried microorganism restricts the development and application of fruits and vegetables biocontrol agents， probiotics and starter cultures in some extent ， but adding the appropriate protectants can compensate such deficiency widely. This paper summarized the application of protectants in lyophilization， and classifies the protectants from different angles， such as chemical structure， source， permeability， protective phase， and selects some common protectants， such as skimmed milk powder， trehalose， sodium glutamate， to illustrate their protective mechanism and applications. Besides， the paper introduced symergistic methods of protectants to show that using only one protectant during freeze － drying can not achieve ideal viability and the synergism of different protectants will make the commercialization of biocontrol agents and starter cultures possible. Key words: freeze－ drying ; protectant; protective mechanism; synergistic methods 中图分类号：TS201.1 文献标识码：A doi：10． 13386 / j． issn1002 － 0306． 2015． 01． 074 文 章 编 号：1002－0306 （ 2015 ） 01－0390－06
嗜热链球菌M5-5冻干保护剂配方的优化
嗜热链球菌M5-5冻干保护剂配方的优化焦琳;郑晓卫;屈晓宇;申彤;杨洁【摘要】为了研究不同冻干保护剂在真空冷冻干燥过程中对嗜热链球菌M5-5菌体细胞的保护效果,采用单因素试验和正交试验,以冻干后的菌体存活率为评价指标,考察9种冻干保护剂在冷冻干燥过程中对M5-5菌体的保护效果,以期获得最优保护剂配方.结果表明,海藻糖、甘油和脱脂乳作为单一冻干保护剂时,菌体细胞存活率分别为43.85％、47.51％和40.86％,显著高于其他6种保护剂(P＜0.05);通过正交试验确定冻干保护剂的最优配方为海藻糖60 g/L、谷氨酸钠20 g/L、甘油20 g/L、脱脂乳150 g/L,此时嗜热链球菌M5-5的冻干存活率可达88.41％.扫描电镜结果显示,添加保护剂配方组菌体细胞完整,表面光滑,说明该保护剂配方能有效减少冷冻干燥过程对菌体细胞的损伤.%In order to investigate the effect of different cryoprotectants on cell viability of Streptococcus thermophilusM5-5 in the process of vacuum freeze-drying,single-factor experiments combining with orthogonal experiments were carried out to optimize protective agents formula based on the cell survival rate of S.thermophilus M5-5 after vacuum freeze-drying.Results showed that the cell survival rate of S.thermophilus M5-5 using trehalose,glycerol and skim milk as protective agents was 43.85％,47.51％,and 40.86％,respectively,higher than that using other six protective agents.The optimum protective agents formula for S.thermophilus M5-5 were determined as follows:trehalose 60 g/L,sodium glutamate 20 g/L,glycerol 20 g/L,skim milk 150 g/L,and the cell survival rate of S.thermophilus M5-5 after vacuum freeze-drying reached 88.41％.Scanning electron microscope results showed that the cell withcryoprotectant addition was intact with smooth surface,which indicated that the well-performed cryoprotectant could effectively reduce the damage on bacterial cells during vacuum freeze-drying.【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2017(036)003【总页数】4页(P95-98)【关键词】嗜酸链球菌;冻干保护剂;扫描电镜【作者】焦琳;郑晓卫;屈晓宇;申彤;杨洁【作者单位】新疆大学生命科学与技术学院,新疆乌鲁木齐830046;中粮营养健康研究院生物技术中心,北京102209;新疆大学生命科学与技术学院,新疆乌鲁木齐830046;新疆大学生命科学与技术学院,新疆乌鲁木齐830046;新疆大学生命科学与技术学院,新疆乌鲁木齐830046【正文语种】中文【中图分类】TS202.3目前，糖类和脱脂乳是使用较广泛且保护效果明显的保护剂，但其作用机理尚不明确[14]。
疫苗生产用冻干保护剂的分类和作用机理研究
冻干保护剂是除赋形剂外,给于药物有效成分在冻干机冷冻干燥过程及冻干后储存阶段保护药物药效的成分。
常用保护剂有糖类、白蛋白、聚乙二醇等等。
冻干保护剂可影响生物制品的质量、效价和稳定性，改变生物制品的生产工艺，提高产品干燥能力并增大产品批次间的稳定性。
耐热冻干保护剂有免疫活性但无药理活性,可在冻干和保存时维持疫苗的稳定性,初次干燥时在适宜的温度下疫苗不倒塌，企业低成本即可获取。
一、分类（一）按相对分子量分按相对分子量分可分为低分子化合物和高分子化合物。
“酚子化合物彳氐分子化合物可提高微生物存活率,形成均一悬液,起到水分缓解作用。
如：酸性物质：谷氨酸、天冬氨酸、乳酸；中性物质：葡萄糖、孚廉、蔗糖、海藻糖、山梨醇；碱性物质：精氨酸、组氨酸。
2.高分子化合物高分子化合物对微生物有保护作用，可促进其升华形成耐热骨架阻断热传导和热辐射。
如：白蛋白、明胶、蛋白陈、脱月血粉。
水解明胶水解明胶可去掉杂质蛋白、无抗原性、无过敏反应、无热源，并且分子量小、均质、易溶于水，可过滤除菌，共熔点为-12o C o对微生物的保护作用高出普通明胶10%以上。
脱脂奶粉可促进升华、加热灭菌，易取得均质产品，并扩大细胞相互间的距离。
（二）按功能和性质分1耐热冻干保护剂耐热冻干保护剂在冻结和干燥过程中，可防止活性组分变性，如海藻糖、蔗糖、聚维酮（PVP）等。
2.填充剂可防止有效组分随水蒸气一起升华逸散，如：甘露醵、明胶等。
3.抗氧化剂产品的自身氧化可消耗冻干样品内部和环境中的氧；放入电子或氢离子，可阻断冻干样品中氧化链式反应，抑制氧化酶活性，防止样品在冷冻干燥及储藏过程中氧化变质。
如硫代硫酸钠、维生素E、维生素C等。
4.酸碱调整剂在冷冻干燥、储藏过程中，将生物制品PH值调整到活性物质ZUi稳定区域。
常用的有：磷酸二氢钾、磷酸氢钠。
（三）按物质的种类分1糖/多元醇类单糖（葡萄糖、半乳糖）：糖与生物制品活性组分的分子形成氢键而代替了原有水的位置，起保护作用；低聚糖（蔗糖、海藻糖）：低聚糖能起到低温保护功能?□脱水保护作用；海藻糖则具有相对较高的玻璃化转变温度。
嗜热链球菌的作用
嗜热链球菌的作用
嗜热链球菌是一种常见的细菌，它在许多生态系统中起着重要的作用。
以下是嗜热链球菌的一些主要功能：
1. 蛋白水解：嗜热链球菌能够分泌一系列蛋白酶，可以降解复杂的蛋白质为较小的肽段或氨基酸。
这种水解作用有助于嗜热链球菌分解有机物质，从而促进食物的分解和吸收。
2. 食物降解：嗜热链球菌以有机物质为主要食物源，包括植物残渣、动物尸体和其他细胞分解产物。
这种降解作用可以将有机物质转化为营养物质，供其他生物利用。
3. 氮循环：嗜热链球菌参与氮的循环过程。
它可以通过固定大气中的氮气来合成氨，然后将氨转化为亚硝酸盐和硝酸盐。
这些化合物可以作为植物的氮源，进一步促进植物生长。
4. 土壤生态系统：嗜热链球菌广泛存在于土壤中，并且对土壤生态系统起着重要的贡献。
它们参与有机物的分解、养分的循环和土壤结构的形成，有助于维持土壤的健康和可持续性。
5. 生物控制：嗜热链球菌还具有一定的抗菌能力，可以抑制其他一些有害细菌的生长。
这种生物控制作用有助于维持微生物群落的平衡，并保护植物和动物免受病原菌的侵害。
总之，嗜热链球菌在生态系统中扮演多种重要角色，包括有机物质分解、养分循环、土壤健康和生物控制等。
它们的存在和活动对于微生物群落的稳定和生态系统的健康至关重要。
副猪嗜血杆菌冻干保护剂试验研究
4562023制剂的候选噬菌体。
该噬菌体的成功分离,为鸭大肠杆菌病的噬菌体疗法提供参考。
参考文献:[1]M I LLER M,D EI U LI O A,H O LLA N D C,et al.C om pl et egenom es equence of X ant hom onas phage R i ver R i der,a novel N4-l i kebact er i ophage t hat i nf ect s t he s t r aw ber r y pat hogen X ant hom onas f r agar i ae[J].A r ch V i r ol,2020,165(12): 1481-1484.[2]黄培堂,王嘉玺,朱厚础.分子克隆实验指南[M].北京:科学出版社,2002.[3]冯书章,刘军,孙洋.细菌的病毒--噬菌体最新分类与命名[J].中国兽医学报,2007(4):604-608.[4]K ow al s ka J D,K azi m i er czak J,Sow ińs ka P M,et al.G r ow i ngT r end of Fi ght i ng I nf ect i ons i n A quacul t ur e Envi r onm ent-O ppor t uni t i es and C hal l enges of Phage T her apy[J].A nt i bi⁃ot i cs(B as el),2020,9(6):301.[5]赵尊福,阳亭亭,张焕容.某鸡场大肠杆菌噬菌体的分离鉴定及其生物学特性研究[J].中国畜牧兽医,2021,48(6): 2204-2211.[6]姚澜,张贝贝,王芷洋,等.禽致病性大肠杆菌噬菌体V b_E⁃coS_A H50的分离鉴定、生物学特性及全基因组分析[J].中国兽医科学,2022,52(12):1568-1577.[7]刘畅,刘教,陈进,等.1株可裂解bl aN D M-5及m cr-1阳性大肠杆菌噬菌体的分离与生物学特性[J].畜牧兽医学报,2022,53(3):857-866.[8]C H A N B K,A B ED O N S T,LO C-C A R R I LLO C.Phagecockt ai l s and t he f ut ur e ofphage t her apy[J].Fut ur e M i cr obi⁃ol ogy,2013,8(6):769-783.副猪嗜血杆菌冻干保护剂试验研究张小兰兆丰华生物科技(福州)有限公司福州350014摘要为获得最适合副猪嗜血杆菌的冻干保护剂及配比,选择牛乳蔗糖保护剂和明胶蔗糖保护剂分别与菌液进行不同配比的冻干试验,筛选出一种冻干后物理性状和菌种存活率均占优势的保护剂及配比。
乳酸菌冻干保护剂及保护机理的研究进展
化合物 ! 吸收峰位置不移动 " 由此认为糖类保护了 干燥状态下的蛋白结构 % 杨基础等研究认为 " 海藻 糖对酶的保护机理为 * 一方面海藻糖的羟基替代了 水分子同酶的酰胺基形成氢键 " 另一方面海藻糖分 子包裹在酶分子周围 " 或填充在酶蛋白分子的空间 结构内" 特别是酶的活性部位附近" 形成玻璃态" 有效的防止蛋白质分子发生三维结构的变化 " 从而 避免了酶的失活 %
两种因素的作用# 采取适宜的保护措施# 在很大程 度上可减轻或避免冷冻干燥对细胞带来的损伤$ 对 乳酸菌冻干保护剂及保护作用的机理进行了阐述 $ 关键词 ) 乳酸菌 & 冻干 & 保护剂 & 保护机理
*+:
真空冷冻干燥 ! 简称冻干 " 是制备和保存生物 材料最有效的方法之一 # 冻干是冷冻和干燥技术的 有机结合 $ 细胞在冻干过程中要经受冷冻和干燥两 种激烈因素的作用 # 损伤是不可避免的 $ 为了提高 真空冷冻干燥后微生物的存活率 # 人们进行了大量 的研究 $ 影响乳酸菌冻干效果的因素有很多 # 如菌 株 % 细胞大小及形状 % 生长阶段及速率 % 初始细胞 浓度 % )" 值 % 保护剂系统 % 预冻温度 % 降温速率 % 冷冻干燥条件 % 细胞含水量 % 细胞膜成分和复水条 件等 # 其中保护剂系统的影响最为突出 $ 若在冻干 时采取一定的保护措施% 加入适宜的保护剂系统# 可在很大程度上减轻或避免冷冻干燥对细胞带来的 损伤 $
细胞膜损伤 通常细胞膜中磷脂的极性端在一定程度上是以
水合形式存在的 # 而且每个磷脂的极性端与其它磷 脂分子的极性端被水分子隔开 $ 当磷脂干燥脱水时 # 极性端的密度增加 # 糖链间的范德华引力增强 # 平 时处于液晶态的脂膜变成凝胶态 # 相的变化使复水 时细胞膜的通透性增加 # 胞内一些可溶性物质发生 渗漏 # 从而导致细胞死亡 $ 冻干过程中 # 细胞膜脂 肪酸的不饱和度 % 链的长度 % 链的分支状态或环绕 状态存在动态变化 # 脂肪酸的动态变化与膜的流动 性密切相关 $ 微生物细胞的干燥损伤很大程度上是 由于膜脂性质 % 结构的变化使膜的流动性或完整性 改变 # 从而导致膜的功能失调 # 影响微生物的生命 活动 $
《不同冷冻保护剂对冷冻保存大鼠皮肤活性的影响》范文
《不同冷冻保护剂对冷冻保存大鼠皮肤活性的影响》篇一一、引言在医学和生物学领域，冷冻保存技术被广泛应用于细胞、组织和器官的保存。
然而，在冷冻保存过程中，细胞和组织的活性往往受到不同程度的损害。
为了保护这些细胞和组织免受冷冻过程中的损伤，冷冻保护剂的使用显得尤为重要。
本文旨在研究不同冷冻保护剂对冷冻保存大鼠皮肤活性的影响。
二、材料与方法1. 实验材料实验选用的材料包括大鼠皮肤组织、不同种类的冷冻保护剂等。
2. 实验方法（1）大鼠皮肤组织获取：选取健康成年大鼠，无菌条件下获取其皮肤组织。
（2）分组：将获取的皮肤组织分为若干组，每组使用不同的冷冻保护剂进行预处理。
（3）冷冻保存：将预处理后的皮肤组织进行冷冻保存。
（4）活性检测：对冷冻保存后的皮肤组织进行活性检测，比较不同组间的活性差异。
三、实验结果1. 不同冷冻保护剂对大鼠皮肤活性的影响通过对比不同组别皮肤组织的活性，我们发现使用特定种类的冷冻保护剂能够显著提高大鼠皮肤的活性。
其中，XX冷冻保护剂的效果最为显著，能够显著提高皮肤组织的存活率和活性。
而其他种类的冷冻保护剂，如YY、ZZ等，虽然也能在一定程度上提高皮肤活性，但效果不如XX冷冻保护剂明显。
2. 数据分析与图表展示我们将实验数据整理成表格和图表，直观地展示了不同冷冻保护剂对大鼠皮肤活性的影响。
通过数据分析，我们可以清晰地看到XX冷冻保护剂在提高大鼠皮肤活性方面的优势。
四、讨论本实验研究了不同冷冻保护剂对冷冻保存大鼠皮肤活性的影响。
实验结果表明，使用特定种类的冷冻保护剂能够显著提高大鼠皮肤的活性。
这一结果对于医学和生物学领域具有重要意义，因为冷冻保存技术的广泛应用使得细胞、组织和器官的保存成为可能。
然而，如何在保证保存效果的同时尽量减少对细胞和组织活性的损害，一直是研究者们关注的焦点。
通过本实验，我们发现XX冷冻保护剂在提高大鼠皮肤活性方面具有明显优势，这为今后的研究提供了新的思路和方向。
此外，本实验还存在一定的局限性。
保护剂对冷干和贮存过程中乳杆菌存活率的影响
的保 护剂和保 存条件进 行 了试 验 。 果表 明 ： 海 藻糖 、 氨 酸钠 、 结 ① 谷 蔗糖 、 山梨醇和乳糖 等 ５种保 护剂
对植 物乳杆 菌在 冷 冻干燥和 干燥后 贮存过 程 中均有 显著 的保 护作 用 ， 中 ， 藻糖 的保 护作 用最为 其 海 显著 ， 物乳 杆 菌存 活率 高达 ７ ． ％， 植 ８ ０ 而蔗糖 、 氨 酸钠 、 ９ 谷 乳糖 和 山梨 醇作 用稍 差 ； 添加 了不 同保 ② 护 剂制得 的植 物乳杆 菌粉在 ４℃和 ２ ５℃条件 下的 贮存 结果表 明 ， 着贮存 温度 的 升 高， 物乳杆 菌 随 植
研究及应 用前景 广泛 。 １ 材料 与方 法 １ 纪 初就 提 出 的真 空 冷 冻 干 燥 原 理 ，直 到 １１ 材料 ９世 ． １ ９ 才被首次 运用于 干燥生 物器 官和组 织 。在 之 １１１ 乳 酸菌 菌种 ８０年 ．． 后 的数 十年 中 ，真 空冷 冻干燥 技术 的应 用一 般都 只 植物 乳 杆 菌 （ ａｔ ａｉｕ ｌ ｔ ｕ ， Ｌｃｏ ｃ ｌｓｐ ｎａ ｍ） 由南 京 农 ｂ ｌ ａ ｒ
的 死亡率增 加 ， 随着保存 时间的延 长植物 乳杆 菌的 死亡速 度加 快 ， 添加 海 藻糖 可 以明显减 缓植 物乳
杆 菌的死亡速 度 。
关键 词
植物 乳杆 菌 ； 冷冻 干燥 ； 保护 剂 ； 活率 ； 存 保存 温度
Ｓ ｌ ．９ ８ ６７
中图分类号
随着我 国畜牧业 的迅 猛发 展 ，饲料 的需求 量 日 后 易恢 复原有 的特性 。利 用该 技术 制备 的乳 酸菌 干 益 加大 。青贮 饲料 由于其适 口性 好 、 消化 率高 ， 以及 燥 品具 有便于 贮藏 、携带 方便 、复 水性好 等许 多优 可 以缓解 青 绿饲 料 的地 区与季 节 的不 平 衡 等原 因 ， 点 。但是 ， 要制 备 出单 位重 量含 活菌数 高 、 复水 后活 已成为家畜 常用 的粗 饲料 。 实际生 产 中， 往因有 力 强 的高效 浓 缩 型乳 酸菌 发酵 剂 的 粉状 制 品， 在 往 必须 害微 生物 的大量 生 长使 青 贮饲 料 的 营养 损失 严 重 。 降低 冷 冻 干 燥 过 程 对 乳 酸 菌 细 胞 膜 的损 伤 作 用 。 为 了减少 青贮 饲料在 青贮 过程 中 的腐 烂及 营养成 分 Ｗｏｌ ｒ （９ ４ 在实验 室条件 下检测 了 ２ 株 乳酸 ｏｆ ｄ等 １ ８ ） ｏ ｌ 损失 ，应促 进乳 酸菌 的增殖 ，迅 速 降低青 贮过 程 的 菌 ，发现 了三株 基本 符合理 想 的青贮 添加 剂条件 的
保加利亚乳杆菌冻干保护剂保护作用的研究
附图c和附图d表明，海藻糖作为保护介质在干燥后起 支撑作用，保护介质形成的空间结构为保加利亚乳杆菌 菌体提供了空间屏障；冻干样品不失原有的固体骨架结构，
将单个菌落接入MRS液体培养基，经初次、二次扩培 至稳定期前期，保 加 利 亚 乳 杆 菌 14h 收 获 ，4 ℃ 、6000 × g 离 心15min，收集菌体。 1.2.2 保护剂溶液的配制
将5g海藻糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、葡萄糖、半乳糖、葡
收稿日期：2010-01-13
基金项目：“十五”国家重大科技专项（2002BA518A09）
作用的研究[J]. 中国酿造，2009（5）：49-52.
plantaricin ASM1: a new bacteriocin produced by Lactobacillus plan-
[10] 敖 灵，冯 敏，刘书亮，等. 肉源产广谱细菌素乳酸菌的筛选及其
tarum A-1[J]. Int J Food Microbiol, 2010, 137: 94-99.
有研究者认为，糖类保护剂由于具有多个羟基，可以 与菌表面自由基联结起来，避免菌体暴露在介质中，还可 与蛋白质形成氢键以取代水，保证蛋白质的稳定性。在溶 液中易结合水分子，发生水合作用，减少了游离水的含量 并增加了溶液的黏性，从而减缓晶核的生长过程，使形成 的冰晶较细小，以达到保护细胞的目的[3]。 2.2 保加利亚乳杆菌扫描电镜观察结果
冻干存活率/% 66.10 53.58 53.47 51.06 39.08 37.83 40.47 32.09 31.53 37.79 36.99 28.17 27.19 42.58 40.47 0.16
中度嗜热浸矿菌的冷冻干燥保护剂
膜通 透性 的改 变 和 代谢 损 伤 ［ 因此 ， 择适 宜 的 。 选 冷冻 温度 ， 加入 合适 的保 护 剂 减少 细 胞 膜 在 冷冻 干 燥 中的损 伤 ， 提高 菌存 活率 的关键 。 是 研究 了在冷 冻 干 燥前 合 适 的预 冻 温 度 ， 然后 以 甘油 、 蔗糖 、 脱脂 牛奶 、 海藻糖 为保 护剂 ， 采用 正 交试 验设 计 ， 化组 合 ， 优 筛选 出冷冻干 燥保 藏 中度 嗜热菌
２ ０ 高 压 灭 菌 ２ ｍｉ。 Ｂ： 质 硫 粉 高 压 灭 菌 。， ０ ｎ 单
２ ｍｉ 。将 Ｂ硫粉 以 １ ５ ０ ｎ 。 ％的量加 入到 Ａ 培养基 中 ， 作 为 中度 嗜热 菌 的培养基 。
１ １ ３ 保 护剂 系统 。预冻 试 验 保 护 剂 ： 油 ５ ， 。。 甘 ％
１ ％，２ ０ １ ％。正交试 验保 护剂 组合 ： 甘油 （ ％ ，２ ， ６ １％ １ ％） 蔗糖 （ ％ ，２ １ ％） 脱 脂 奶 粉 （ ％， ％ ， ８ ， ６ １ ％， ８ ， ４ ６
８ ％） 海 藻糖 （ ％ ， ％ ，０ 。 ， ２ ６ １ ％）
１ ２ 试 验 过 程 ．
周洪波 ， 曾伟 民 ， 李 莹 ， 刘 晰 ， 冠周 邱
（ 中南 大学 资 源加 工与 生物 工程 学院 ， 长沙 ４ ０ ８ ） １ ０ ３
摘 要 ： 通过正交试验结果 直观分析 、 因素指标分析和方差分析 ， 研究 真空冷冻干燥保藏法 中保护剂 的作用 。结果 表明 ， 保
护剂 的最 佳 组 合 类 型 为 甘 油 １ ％ 、 ２ 蔗糖 ６ 、 脂 牛 奶 ４ 、 藻 糖 １ ％ 。 保 护剂 种 类 对 提 高 存 活 率 的 影 响 依 次 为 ： 油 ＞海 藻 糖 ％ 脱 ％ 海 ０ 甘 ＞脱 脂 牛奶 ＞蔗 糖 。 使 用 最 佳 保护 剂组 合 可 使 冷 冻 干 燥 中度 嗜 热 菌 的 存 活 率 达 到 ８ ． ％ 。 ３７
一种微生物冻干保护剂及其制备方法和应用[发明专利]
![一种微生物冻干保护剂及其制备方法和应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/9daa843f28ea81c759f5781d.png)
专利名称：一种微生物冻干保护剂及其制备方法和应用专利类型：发明专利
发明人：郭本恒,吴正钧,韩瑨,高彩霞
申请号：CN201410790027.5
申请日：20141217
公开号：CN104611256A
公开日：
20150513
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种微生物冻干保护剂及其制备方法和应用。
该制备方法包括以下步骤：(1)将菌种接种于番茄汁蔗糖培养基中，20-35℃，100-300rpm振荡培养24-72小时，获得发酵液；(2)将步骤(1)所得发酵液稀释到原体积的2-10倍，调节该发酵液稀释液的pH至6.5-7.5，灭菌，冷却即得。
该制备方法工艺简便，所得冻干保护剂中菌株存活率高、该冻干保护剂保存稳定性极佳。
申请人：光明乳业股份有限公司
地址：201103 上海市闵行区吴中路578号
国籍：CN
代理机构：上海弼兴律师事务所
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抗冻多肽调控冷冻应激下嗜热链球菌生理功能机制的新见解
抗冻多肽调控冷冻应激下嗜热链球菌生理功能机制的新见解
抗冻多肽是一类具有抗冻性的生物活性物质，可以在低温环境下调节生物的生理功能。
嗜热链球菌是一种常见的细菌，具有一定的耐寒性。
近年来的研究表明，抗冻多肽可以调控冷冻应激下嗜热链球菌的生理功能，并且提供了一些新的见解。
首先，抗冻多肽可以增强嗜热链球菌的细胞膜稳定性。
冷冻应激会引起细胞膜的破损和溶解，导致细胞死亡。
抗冻多肽可以与细胞膜结合，形成一层保护膜，增加细胞膜的稳定性，减少冷冻应激对细胞膜的破坏。
其次，抗冻多肽可以调节嗜热链球菌的代谢活性。
冷冻应激会导致细胞代谢的降低，进而影响细胞的生长和繁殖。
抗冻多肽可以促进细胞内的能量代谢过程，增加ATP的产生，提高细
胞的代谢活性，从而增强嗜热链球菌的耐寒性。
此外，抗冻多肽还可以调节嗜热链球菌的抗氧化能力。
冷冻应激会引起细胞内氧化应激，产生大量的自由基，导致细胞膜的氧化损伤和细胞器的损伤。
抗冻多肽具有很强的抗氧化活性，可以清除自由基，减少氧化应激对细胞的损伤，从而保护嗜热链球菌的生理功能完整性。
综上所述，抗冻多肽可以通过增强细胞膜稳定性、调节代谢活性和提高抗氧化能力等途径，调控冷冻应激下嗜热链球菌的生理功能。
这些新见解为进一步理解抗冻多肽的作用机制提供了重要的参考，也为开发新的抗冻剂和抗冻蛋白提供了理论基础。
嗜热链球菌真空冷冻干燥前后发酵活力变化
嗜热链球菌真空冷冻干燥前后发酵活力变化田洪涛;贾英民;马雯;李丽华;胡彭亮【期刊名称】《中国乳品工业》【年(卷),期】2001(029)006【摘要】研究了冷冻干燥过程中不同保护剂对嗜热链球菌存活的影响, 试验了嗜热链球菌冷冻干燥前后发酵活力的变化. 结果表明, 不同保护剂对细胞冻干存活率和冻干发酵剂活菌含量均产生显著影响 (P<0.01); 复合保护剂Ⅱ为最优保护剂, 可使试验菌株的冻干存活率和冻干发酵剂活菌含量分别高达 97.27% 和3.22× 1010 g-1; 采用复合保护剂Ⅱ制成的试验菌株冻干发酵剂在乳中42 ℃发酵 12 h的细胞生长曲线、产酸曲线和 pH值下降曲线与冻干前对照发酵剂相比, 均无明显变化. 结果表明, 利用最适保护剂制备的冻干发酵剂可以直接作为生产发酵剂使用.【总页数】3页(P17-19)【作者】田洪涛;贾英民;马雯;李丽华;胡彭亮【作者单位】河北农业大学食品科技学院,;河北农业大学食品科技学院,;河北农业大学食品科技学院,;河北农业大学食品科技学院,;河北农业大学食品科技学院,【正文语种】中文【中图分类】TS252.1【相关文献】1.发酵乳中嗜热链球菌产乙醛和双乙酰的动态变化研究 [J], 席晓霞;于洁;王宏梅;乌仁图雅;扎木苏;秦艳婷;白娜;刘文俊;孙天松2.高发酵性能酸奶直投式发酵剂嗜热链球菌菌株的筛选 [J], 张志伟;王燕;韩墨3.低聚糖在瑞士乳杆菌和嗜热链球菌冷冻干燥过程中的保护作用 [J], 黄蓉; 周子文; 莫乔雅; 董明盛; 芮昕; 张秋勤; 陈晓红; 李伟4.天然低共熔溶剂对冷冻干燥期间嗜热链球菌活力的影响 [J], 乔颖;马锐;陈志刚5.产胞外多糖的嗜热链球菌ST冷冻干燥制剂的研究(英文) [J], 吴荣荣;王立平;高莉莉;刘伯衢;张柏林因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
混合乳酸菌复合冻干保护剂的研究
混合乳酸菌复合冻干保护剂的研究
陈贺佳;牟光庆
【期刊名称】《食品研究与开发》
【年(卷),期】2013(034)018
【摘要】将嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌按3∶2∶1比例制备乳酸菌冻干保护剂.通过正交试验确定混合乳酸菌最佳保护剂配方为:甘氨酸1.0％,脱脂乳10.0％,海藻糖7.0％,山梨醇1.0％.研究表明,冻干乳酸菌发酵剂发酵酸度、产香及产黏特性良好,且冷冻干燥法制备的复合冻干保护剂对菌种保护效果优于单一保护剂.
【总页数】4页(P133-136)
【作者】陈贺佳;牟光庆
【作者单位】大连工业大学食品学院,辽宁大连116034;大连工业大学食品学院,辽宁大连116034
【正文语种】中文
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4.乳酸菌冻干保护剂及保护机理的研究进展 [J], 蒲丽丽;刘宁;张英华;霍贵成;
5.乳酸菌冻干保护剂及保护机理的研究进展 [J], 蒲丽丽;刘宁;张英华;霍贵成
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动物用冻干疫苗耐热保护剂研制成功
动物用冻干疫苗耐热保护剂研制成功
云浦
【期刊名称】《畜牧兽医科技信息》
【年(卷),期】1999(000)023
【摘要】在我国动物用冻干疫苗,多年来必须在-15℃以下条件保存,这对于疫苗的生产、运输保存及使用等带来诸多困难。
黑龙江省生物制品一厂研究所张云浦高级兽医师主持的黑龙江省科委下达的《动物用冻干疫苗耐热保护剂的研究》课题,投资几十万元,历经三年多的研究。
采取多个配方,多种组合,不同配比,分别对不同种类的动物疫苗,进行了大量的试验研究。
完成了鸡传染性法氏囊,鸡传
【总页数】1页(P6-6)
【作者】云浦
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】S859.79
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嗜热链球菌冻干保护剂 保护作用的研究
蒲丽丽１， 刘宁２， 霍贵成２ （１．江苏畜牧兽医职业技术学院， 泰州 ２２５３００； ２．东北农业大学乳品科学教育部重点实验室， 哈尔滨 １５００３０）
摘要： 冷冻干燥前在菌液中加入保护剂， 可提高乳酸菌的冻干存活率。对多种保护剂的保护作用做了
２ 结果与讨论
２．１ 不同保护剂对嗜热链球菌冻干存活率的影响 配制 １５ 种不同的保护剂溶液， 将离心后的菌泥
悬浮其中， 菌悬液的活菌数为 ３．１２×１０８ｃｆｕ／ｍＬ， 冻 干 后计算冻干存活率， 每一处理三个重复（ｎ＝３）， 对结果 进行方差分析， 结果见表 １。
表 １ 嗜热链球菌冻干存活率方差分析结果
关于海藻糖对生物分子的保护作用， 提出了种 种假说， 目前主要有两种假说解释海藻糖稳定生物 分子的机制： 一种称为 “水替代”假说， 该假说认为 生物体大分子物质周围均包围着一层水膜， 这层水 膜对维持生物大分子的结构和功能是必不可少的， 当生物大分子失去维持其结构和功能特性的水膜时， 海藻糖能在生物大分子的失水部位以氢键形式连接， 形成一层保护膜以代替失去的结构水膜［３］； 另一种称 为 “玻 璃 态 ” 假 说 ， 该 假 说 认 为 通 过 海 藻 糖 玻 璃 化 转变的趋势， 导致无定形连续相的形成， 在这种结 构中分子运动和分子变性反应非常微 弱［４］。目前， 这 两种假说还不能完全解释现有的试验现象， 因此， 海藻糖保护生物活性物质的机理， 仍需深入研究。 ２．２ 嗜热链球菌扫描电镜观察结果
表 ２ 嗜热链球菌冻干保护剂的多重比较结果（ｎ＝３）
序号 １ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８ ９ １０ １１ １２ １３ １４ １５ １６
保护剂名称 海藻糖 蔗糖 麦芽糖 乳糖 葡萄糖 半乳糖 葡聚糖 谷氨酸 赖氨酸 甘油 甘露醇 ＰＥＧ４０００ ＰＥＧ８０００
谷氨酸钠 脱脂乳 无菌水
保护剂溶液浓度（％） 冻干存活率（％）
Ａｂｓｔｒ ａｃｔ： Ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｃｏｕｒｓ ｅ ｏｆ ｆｒｅｅｚｅ － ｄｒｙｉｎｇ， ｔｈｅ ｓ ｕｒｖｉｖａｌ ｒａｔｅｓ ｏｆ Ｌａｃｔｉｃ ａｃｉｄ ｂａｃｔｅｒｉａ ｉｎｃｒｅａｓ ｅｄ ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｐｒｏ－ ｔｅｃｔａｎｔｓ ａｄｄｅｄ． Ａｎｄ ｔｈｅ ｔｒｅｈａｌｏｓ ｅ ｈａｓ ｔｈｅ ｂｅｓ ｔ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｔｈｅｓ ｅ ｂａｃｔｅｒｉａ ｂｏｄｉｅｓ ， ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｏｔｈｅｒ １５ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｃｔａｎｔｓ ． Ｔｈｅ ｆｒｅｅｚｅ － ｄｒｙｅｄ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ｓ ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｌｕｓ ｗａｓ ｆｕｌｌ ａｎｄ ｕｎｆｒａｇｉｓ ａｂｌｅｒ， ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒｅｈａｌｏｓ ｅ， ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｏｂｓ ｅｒｖｅｄ ｂｙ ｓ ｃａｎｎｉｎｇ ｅｌｅｃｔｒｏ － ｍｉｃｒｏｓ ｃｏｐｅ． Ｂｕｔ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｗａｓ ｓ ｈａｐｅｃｈａｎｇｅｄ ａｎｄ ｃｏｌｌａｐｓ ｅｄ． Ａｌｌ ｔｈｅ ｒｅｓ ｕｌｔｓ ｓ ｕｇｇｅｓ ｔ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒｅｈａｌｏｓ ｅ ｔｏ ｔｈｅ ｂｏｄｉｅｓ ｏｆ Ｌａｃｔｉｃ ａｃｉｄ ｂａｃｔｅｒｉａ ｃｅｌｌ． Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄｓ： ｓ ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｌｕｓ ； ｆｒｅｅｚｅ－ ｄｒｙｉｎｇ； ｃｒｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ
５
７６．３７ａ
５
６２．５３ｂ
５
６０．２５ｃ
５
５８．０４ｄ
５
４２．７０ｈ
５
４０．５１ｉ
５
４０．３９ｉ
２
３７．７６ｊ
２
３６．１６ｊ
５
４５．７４ｇ
５
４２．５２ｈ
５
３５．２７ｋ
５
３２．８６ｌ
５
５１．４１ｆ
５
５６．２４ｅ
－
３．１５ｍ
著降低了嗜热链球菌的死亡率。 不同保护剂的保护效果也有所不同。在本试验
中， ７ 种浓度为 ５％的糖类保护剂保护 效 果 高 于 浓 度 为 ２％的 两 种 氨 基 酸 ， 其 中 双 糖 的 保 护 效 果 较 为 突 出 ， 冻 干 存 活 率 大 于 ５０％， 尤 其 是 海 藻 糖 ， 冻 干 存 活率为 ７６．３７％。
３３ Ｎｏ． ７． ２００７
工艺技术
（ａ） 不含保护剂的冻干样品（８０００×） （ｂ） 含海藻糖的冻干样品（８０００×）
（ｃ）含海藻糖的冻干样品（１０００×） （ｄ）含海藻糖的冻干样品（５０００×） 图 １ 嗜热链球菌扫描电镜照片
未加任何保护剂的嗜热链球菌冻干存活率只有 ３．１５％， 这 是 由 于 菌 体 在 冷 冻 干 燥 过 程 中 ， 冷 冻 冲 击伴随胞内冰晶的形成及对细胞膜的伤害， 可能 会导致细胞膜通透性的改变和代谢损伤。另一方 面冷冻冲击使水结成冰后， 细胞浆中残余部分的 溶 液 浓 度 会 增 大 ， 这 将 引 起 细 胞 内 ｐＨ 和 离 子 强 度 的改变以及有害化学反应速率的提高， 从而降低 乳 酸 菌 的 冻 干 存 活 率 。 加 入 ５％ 的 海 藻 糖 作 保 护 剂 ， 嗜 热 链 球 菌 的 冻 干 存 活 率 为 ７６．３７％ ， 见 表 ２， 可见海藻糖的加入， 大大提高了嗜热链球菌的冻 干存活率。分析其原因， 保护剂发挥了以下的作 用， 除了作为支持物和受体在复水过程中为干物 质提供一定的骨架结构外， 在冷冻干燥过程中能 够保护活细胞， 使得菌体细胞在冷冻干燥过程中 保留少量的水分以适应低温、干燥等能抑制或致 死 微 生 物 的 不 良 环 境 。 从 图 １ｂ 可 看 出 ， 嗜 热 链 球 菌附着在保护介质上， 减少了菌体暴露于外部的 区域， 减少了外界环境因素对菌体的影响， 从而 降低了菌体死亡的可能性。
变差来源 ＳＳ
ｄｆ
ＭＳ
Ｆ
Ｐ
组间 １２１１６．２３ １５ ８０７．７４８ ７２７．４０５ ０．０００
组内 ３５．５３４ ３２ １．１１０
总和 １２１５１．７６ ４７
方差分析结果表明： 不同保护剂对嗜热链球菌冻 干 存 活 率 影 响 的 显 著 性 概 率 值 Ｐ＝０．０００＜０．０５， 这 说 明不同保护剂对嗜热链球菌冻干存活率的影响显著 （Ｐ＜０．０５）。Ｄｕｎｃａｎ 新复极差法多重比较结果见表 ２。
Ｔｈｅ ｒｅ ｓ ｅ ａ ｒｃｈ ｏｆ ｃｒｙｏｐｒｏｔｅ ｃｔａ ｎｔ ｏｆ Ｓ ．ｔｈｅ ｒｍｏｐｈｉｌｌｕｓ ａ ｎｄ ｐｒｏｔｅ ｃｔｉｖｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ
ＰＵ Ｌｉ－ ｌｉ１， ＬＩＵ Ｎｉｎｇ２， ＨＵＯ Ｇｕｉ－ ｃｈｅｎｇ２
（１．Ｊ ｉａ ｎｇｓ ｕ Ａｎｉｍａ ｌ Ｈｕｓ ｂａ ｎｄｒｙ ＆ Ｖｅ ｔｅ ｒｉｎａ ｒｙ Ｃｏｌｌｅ ｇｅ ， Ｔａ ｉｚｈｏｕ， ２２５３００； ２．Ｋｅ ｙ Ｌａ ｂｏｒａ ｔｏｒｙ ｏｆ Ｄａ ｉｒｙ Ｓ ｃｉｅ ｎｃｅ ， Ｎｏｒｔｈｅ ａ ｓ ｔ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａ ｌ Ｕｎｉｖｅ ｒｓ ｉｔｙ， Ｍｉｎｉｓ ｔｒｙ ｏｆ Ｅｄｕｃａ ｔｉｏｎ， Ｈａ ｒｂｉｎ １５００３０）
随着乳酸菌对人体健康有益作用机理的深入研 究和揭示， 乳酸菌产品逐渐受到人们的重视。乳酸 菌菌粉是生产这些产品的重 方 法 是 真 空 冷 冻 干 燥 法（简 称 冻 干）［１］。 影 响乳酸菌冻干效果的因素有很多， 为了提高乳酸菌 冻干后的存活率， 本课题主要选择了保护剂进行了 研究， 并对保护剂的保护机理进行了探讨， 这对乳
将冻干菌粉用导电胶带黏贴在扫描电镜样品台
上 ， 用ＪＦＣ－ １６００型 离 子 溅 射 镀 膜 仪 在 样 品 表 面 镀 上 一 层１５００ｎｍ厚 的 金 属 膜（铂 膜）， 在ＪＳＭ－ ５６１０ＬＶ扫 描 电镜下放大不同倍数进行观察， 拍摄电镜照片见图１。
从图１中可看出， 冻干前在溶液中加入的保护介 质在干燥后起支撑作用， 在冻干过程中起保护作用。 冻干的样品不失原有的固体骨架结构， 保持原有的 形态。冻干样品是直接由冰晶升华而制成的， 因而 具有多孔结构， 见图１ｄ， 这样的结构使冻干的菌粉具 有理想的速溶性和速复水性。
从 表 ２ 的 比 较 结 果 中 可 看 出 ， １５ 种 不 同 的 保 护 剂 的保护效果均显著高 于 无 菌 水 的 对 照 样 ， １６ 号 处 理未加任何保护剂的嗜热链球菌冻干存活率只有 ３．１５％ ， 其 它 加 保 护 剂 的 样 品 冻 干 存 活 率 均 在 ３０～ ８０％之间 ， 这说明本试验所 选 用 的 １５ 种 保 护 剂 对 嗜 热链球菌的冷冻干燥均起到一定的保护作用， 且显
器厂； ＪＦＣ－ １６００ 离子溅射镀膜仪、ＪＳＭ－ ５６１０ＬＶ 扫描
电镜： 日本 ＪＥＯＬ 公司。
１．２ 方法
１．２．１ 菌 种 的 培 养 和 收 集 将 单 个 菌 落 接 入 ＭＲＳ 液
体培养基， 经初次、二次扩培至稳定期前期， 嗜热
链球菌 １０ｈ 收获， ４℃、８０００ｇ ／１５ｍｉｎ 离心收集菌体。
酸菌菌粉的生产及菌种的冻干保存均具有一定的理 论与实践意义。
１ 材料与方法
１．１ 材料 １．１．１ 菌种 嗜热链球 菌（Ｓ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）： 东 北 农 业 大学乳品科学教育部重点实验室分离保存， 经多次
收稿日期： ２００７－ ０１－ ２２ 基金项目： “十五”国家重大科技专项（２００２ＢＡ５１８Ａ０９）。 作者简介： 蒲丽丽（１９７８－ ）， 女， 河北沧县人， 硕士， 助教， 研究方向为食品科学。
比较， 其中海藻糖的保护效果最好； 在扫描电镜下观察了冻干后的嗜热链球菌， 加海藻糖保护的菌体细
胞饱满、完整， 对照则有变形和塌缩， 该结果较为直观地揭示了海藻糖对菌体细胞的保护作用。