HPLC法测定黄连药材及其炮制品中主要生物碱的含量

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高效液相色谱法测定黄连炮制品中6种生物碱的含量

ｏｆｔｈｅｂｅｒｂｅｒｉｎｅｉｎ１３．２４８ｐｇ．ｍＬ。。２６４．９６¨ｇ．ｍＬ～ｗａｓ０．９９９６．Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓａｎｄ
ｉｔｓＲＳＤｗｅｒｅ１０２．４％（ＲＳＤ１．１７％）、１０１．８％（ＲＳＤ１．３０％）、１００．３％（ＲＳＤ１．７６％）、１００．７％（ＲＳＤ１．７５％）、
ｐｒｏｄｕｃｔｓｏｆＣｏｐｔｉｓ（ｈｉｎｅｎｓｉｓＦｒａｎｃｈ．ｂｙＲＰ—ＨＰＬＣ．ＭＥＴＨＯＤＳ：ＡＸｔｉｍａｔｅＴＭＣ１８（４．６ｍｍＸ２５０ｍｍ，５ｕｍ）ｃｏｌｕｍｎｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｓｉｘａｌｋａｌｏｉｄｓｉｎｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｓｏｆ６ｂｐｔｉｓＣｈｉｎｅｎｓｉｓ
Ｆｒａｎｃｈ．Ｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｗａｓｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎ，０．１％ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（ａｄｊｕｓｔＰＨａｓ１０．０ｗｉｔｈａｍｍｏｎｉｕｍｂｉｃａｒｂｏｎａｔｅａｎｄａｍｍｏｎｉａ）ａｓｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅＡ：ＡｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅａｓｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅＢ，ａｔｒａｔｅｌｍＬ．ｍｉｎ～．Ｔｈｅｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏｆｃｏｌｕｍｎｗａｓｓｅｔａｔ３０℃．ａｎｄｔｈｅｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓｓｅｔａｔ２７０ｎｍ．
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ：Ｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｆｏｒｓｉｘａｌｋａｌｏｉｄｓ（ｊａｔｒｏｒｒｈｉｚｉｎｅ，ｃｏｌｕｍｂａｍｉｎｅ，ｅｐｉｂｅｒｂｅｒｉｎｅ，ｃｏｐｔｉｓｉｎｅ，ｐａｌｍａｔｉｎｅ，ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ）ｉｎｐｒｏｃｅｓｓｅｄ

HPLC法测定黄连药材及其炮制品中六种生物碱的含量

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈一０．２５ｍｏｌ・Ｌ乙酸铵和８ｍｍｏｌ・Ｌ十二烷基硫酸钠（ＳＤＳ）水溶液
（氨水调节ｐＨ９．３）（３６：６４）为洗脱剂，流速１ｍＬ・ｍｉｎ～，检测波长２７０ｎｍ，柱温３５℃ 。结果：盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的线性范围依次为０．００６９６ — ０．２３３、０．００４７５ — ０．１５２、０．００３３０ — ０．５２８、０．００６３１ — １．０１０、０．００４７１ — ０．７５３、０．０１７８－２．８８４ｇ・ｍＬ～；力口样回收率依
用的结果，如黄连中小檗碱具有较强的抗炎作用，
但是，黄连水提液的最低抑菌能力要强于小檗碱，
指标成分的种类，更有利于黄连及其炮制品的质量控制。
１仪器与试药岛津ＬＣ一２０Ａ型液相色谱仪；ＫＱ５２００型超声波
３．成都中医药大学中药学院
成都
６１００７２；４．太极集团有限公司重庆
４０１１４７）
摘
要：目的：测定黄连药材及其炮制品中盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、

高效液相色谱法测定黄连配方颗粒及饮片中盐酸小檗碱的含量

科技论坛
・４１・
高效液相色谱法测定黄连配方颗粒及饮片中盐酸小檗碱的含量
张彦辉
（哈尔滨圣泰生物制药有限公司，黑龙江哈尔滨１５００００）摘要：黄连具有抗茵、抗腹泻、解热、降血糖、抗真茵、抗病毒、抗炎、降血脂、抗溃疡等作用。本文采用高校液相测定了黄连配方颗粒及饮片中盐酸小檗碱的含量，固定相为：瑞士Ｈａｍｉｌｔｏｎ反相液相色谱柱ＨｘＳｉｌＣ１８液相色谱柱（１５０＂４．６ｍｍ，５ｕｎ），乙腈一０．０３３ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾（含０．５％２－乙胺，用磷酸调节ｐＨ至３．０）（３０：７０）Ｎ流动相，检测波长为３４５ｎｍ；此方法简便、准确、重现性好，可用于黄连配方颗粒及黄连饮片中盐酸小檗碱的含量测定。关键词：黄连配方颗粒；黄连饮片；含量黄连，属毛莨科黄连属，是一种常用中药，最早记载于《神农本溶液中含盐酸小檗碱０．２ｍｇ０。草经｝０－２１。黄连归心、脾、胃、肝、胆、大肠经，因其根茎呈连珠状而色２．４标准曲线的制备。制备浓度为５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、黄，所以称之为“ 黄连” ［３－５］。《药性赋》记载： “ 味苦，平，气寒，无毒。沉３５０、４００ｇ・ｍＬ－的对照品溶液，分别精密吸取ｌ０Ｌ注入ＨＰＬＣ，也，阴也。其用有四：泻心火，消心下痞满之状；主肠游，除肠中混杂记录色谱图。以峰面积积分值Ａ（曲为横坐标，进样量为纵坐标，绘之红；治目疾暴发宜用，疗疮疡首尾俱同。” 黄连具有清热燥湿，泻火制标准曲线，计算回归方程。试验表明，盐酸小檗碱对照品在解毒的功效。《药类法象》记载： “ 泻心火，除脾胃中湿热，治烦躁恶５０～４００ｇ・ｍＬ－范围内线性关系良好。心，郁热在中焦，兀兀欲吐。治心不痞满必用药也。仲景治九种心下２．５精密度试验。依照制备对照品溶液，精密吸取盐酸小檗碱对痞，五等泻心汤皆用之。 ” 高效液相色谱￣（ＨｉｇｈＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＬｉｑｕｉｄ照品溶液１０Ｌ重复进样６次，测定峰面积积分值，对照品峰面积Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ＼ＨＰＬＣ）Ｉ）［液体为流动相，采用．９３％。结果表明，本实验精密度良好。有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵２．６重现性试验。分别称取同批黄连配方颗粒样品６份，分别依人装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行照２．３项下供试品制备方法制备供试品，按质量标准含量测定项下检测，从而实现对试样的分析。本文采用高效液相法对黄连配方颗方法测定含量，并计算样品的ＲＳＤ值为０．８５％，结果表明，此含量测粒及黄连饮片中的盐酸小檗碱的进行了含量测定。定方法的重现性良好。１仪器与试药２．７稳定性试验。依照供试品制备方法制备供试品溶液，分别在青岛埃仑ＹＣ３０ｏ０离子色谱仪（青岛埃仑色谱科技有限公司）；０，３０，６０，９０分钟精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，恒奥ＨＴ一２３０１３．色谱柱温箱（天津市恒奥科技发展有限公司）；供试品盐酸小檗碱峰面积积分值的ＲＳＤ为０．８５％。结果表明盐酸小ＳＣＱ一１６８数控加热超声波清洗机（上海声彦超声波仪器有限公司）；檗碱至少在９０分钟内稳定。２．８回收率试验。采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试赛多利斯ａｒｉｕｍ⑧ ｍｉｎｉ新型纯水系统（德国赛多利斯集团）。乙腈（天津市精强化工有限公司）、磷酸二氢钾（郑州博豪化工产品有限品各６份，精密称定，分精密添加一定量的盐酸小檗碱对照品，按供测定含量（同时测定样品含量），公司）、三乙胺（郑州博豪化工产品有限公司）、磷酸（天津市精强化试品制备所述方法制备供试品溶液，计算回收率。６次测定的平均回收率为９９．３％，ＲＳＤ为１．０６％。工有限公司）、氨水（郑州博豪化工产品有限公司）、醋酸乙酯（天津３讨论市精强化工有限公司）、甲酸（天津市精强化工有限公司）、乙醇（郑分别考察乙腈一０．０３３ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾（含０．５％－－乙胺，用磷酸州博豪化工产品有限公司）、乙酸铵（天津市精强化工有限公司）、十二烷基硫酸钠（郑州博豪化工产品有限公司）。盐酸小檗碱对照品由调节ｐＨ至３．０）（３０：７０），乙腈一３０ｍｍｏｌ・Ｌ－碳酸氢铵水溶液（含有中国药品生物制品检定所提供。０．７％氨水、０．１％三乙胺）线性梯度洗脱，乙腈一水（４６：５４），乙腈一水三乙胺（３０：７０：０．１），醋酸乙酯一甲酸一乙醇（１５：５：２），乙腈一０．２５２含量测定ｏｌ・Ｌ－乙酸铵和８ｍｍｏｌ・Ｌ－一十二烷基硫酸钠（ＳＤＳ）水溶液（氨水调２．１色谱条件：依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如ｍＨ９．３）（４０：６０）不同比例的流动相，结果以乙腈－０．０３３ｍｏｌ／Ｌ磷下。色谱柱为瑞士Ｈａｍｉｌｔｏｎ反相液相色谱柱ＨｘＳｉｌＣ１８液相色谱节Ｐ０．５％三乙胺，用磷酸调节ｐＨ至３．０）（３０：７０）为流动相，供柱（１５０＂４．６ｍｍ。５ｕｎ）；乙腈一０．０３３ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾（含０．５％三乙胺，酸二氢钾治０．０３３ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾（含用磷酸调节ｐＨ至３．０）（３０：７０）为流动相；检测波长为３４５ｎｍ；流速试品各峰分离效果最好，故选用乙腈一０．５％三乙胺，用磷酸调节ｐＨ至３．０）（３０：７０）为流动相。黄连配方颗粒１．０ｍＬ・ｍｉｎ一１；柱温：３０％。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不得低于

黄连HPLC数字化指纹图谱研究及7种生物碱含量测定

黄连HPLC数字化指纹图谱研究及7种生物碱含量测定一、本文概述本文旨在通过高效液相色谱（HPLC）技术对黄连的数字化指纹图谱进行深入研究，并精确测定其中7种主要生物碱的含量。

黄连作为一种重要的中药材，具有清热解毒、燥湿止痢等功效，被广泛应用于中医临床。

其药效与其中的生物碱类成分密切相关，因此对黄连中生物碱的深入研究对于评价黄连质量、指导药材合理使用及优化生产工艺具有重要意义。

本研究将通过HPLC技术的精确分析，构建黄连的数字化指纹图谱，明确各生物碱在黄连中的含量，为黄连的质量控制提供科学依据。

本文还将探讨黄连中生物碱含量与其药效之间的关系，为黄连的药效评价和药物研发提供新的思路和方法。

二、材料与方法黄连药材购自全国各地具有代表性的药材市场，并经专家鉴定确保其质量。

甲醇、乙腈等色谱纯试剂购自公司，磷酸等分析纯试剂购自公司。

7种生物碱标准品（小檗碱、黄连碱、巴马汀、药根碱、表小檗碱、非洲防己碱、木兰花碱）购自公司，纯度均大于98%。

高效液相色谱仪（HPLC，型号：）配备二极管阵列检测器（DAD）及化学工作站；电子分析天平（精度：01mg）；超声波清洗器；旋转蒸发仪；离心机等。

将黄连药材粉碎成细粉，过目筛。

精密称取粉末适量，加入甲醇，于室温下超声提取分钟，离心后取上清液，用甲醇定容至一定体积，得黄连提取液。

色谱柱为C18柱（mm×mm，μm）；流动相为乙腈-磷酸水溶液（梯度洗脱）；检测波长设定为nm；柱温为℃；进样量为μL；流速为mL/min。

将黄连提取液按设定的色谱条件进行HPLC分析，记录色谱图。

采用相似度评价软件对所得色谱图进行预处理和相似度计算，构建黄连的HPLC数字化指纹图谱。

精密称取7种生物碱标准品适量，分别用甲醇溶解并定容至不同浓度，按设定的色谱条件进行HPLC分析，记录峰面积。

以峰面积为纵坐标，生物碱浓度为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。

将黄连提取液按设定的色谱条件进行HPLC分析，根据标准曲线计算各生物碱的含量。

黄连总生物碱的提取纯化及含量测定

黄连总生物碱的提取纯化及含量测定张中华;赵亚兰【摘要】目的:建立黄连醇提物、黄连总生物碱的提取纯化及含量测定.方法:黄连粗粉用22倍量70％乙醇提取,提取液回收乙醇,浓缩成干膏;取部分干膏用1 0倍量0.5％硫酸溶解、静置、过滤,酸水液加石灰乳调pH至10～ 12,过滤,滤液加浓HCL调pH为1～2,再加入药液量6％～ 10％的氯化钠盐析,放置,过滤,得沉淀A 与滤液A;将沉淀A溶于1 0倍量热水,加石灰乳调pH8.5 ～9,趁热过滤,再将滤液加HCL调至pH 2～3,放置,过滤,沉淀水洗至中性,抽干,将得到的总生物碱反复用热水溶解处理.将滤液A加氨水调至pH 8～9,放置,过滤,再将沉淀用乙醇重结晶,得小檗胺;用紫外分光光度法定总生物碱含量.结果:得黄连干膏,黄连总生物碱(纯度为92.84％) 15.8 9,小檗胺1.5g;盐酸小檗碱在浓度为0.579 μg/mL～8.682 μg/mL 范围内,线性方程为A=81.159C-0.02 2,r=0.999 9,浓度与吸光度呈现良好的线性关系.结论:制备黄连醇提物及黄连中总生物碱的方法简便易操作;盐酸小檗碱的含量测定方法稳定性好,精密度较高,重现性好,操作简便.【期刊名称】《西部中医药》【年(卷),期】2018(031)004【总页数】4页(P49-52)【关键词】黄连;总生物碱;提取纯化;紫外-可见分光光度法【作者】张中华;赵亚兰【作者单位】甘肃省中医院药学部,甘肃兰州730050;甘肃省中医院药学部,甘肃兰州730050【正文语种】中文【中图分类】R284黄连为毛茛科植物黄连(Coptis.chinensis Franch.)、三角叶黄连(Copfis.deltoidea C.Y.Chenget Hsiao)或云连(Coptis.teeta wall)的干燥根茎，作为中药始载于东汉《神农本草经》，被列为上品［1］。

其性寒味苦，可清热燥湿，泻火解毒。

HPLC法鉴定不同产地黄连饮片中含生物碱的研究

HPLC法鉴定不同产地黄连饮片中含生物碱的研究摘要】目的：研究高效液相色谱法（HPLC）在不同产地黄连饮片中生物碱检测中的价值。

方法：选择HPLC法分别检测各区域黄连中生物碱情况。

结果：不同区域黄连中小檗碱、黄连碱、表小檗碱、巴马汀生物碱以及总含量具有一定差别，其中四川洪雅县的黄连生物碱含量较高，而云南德钦县较低。

结论：HPLC在不同区域黄连生物碱的检验中效果显著，操作较为方便，具有一定重复性，鉴定结果的准确率较高，值得广泛推广及应用。

【关键词】生物碱；黄连；高效液相色谱法；饮片【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）21-0362-01黄连属于常见的中药饮片，具有泻火解毒、清热燥湿的功效，取得了较高的临床价值。

黄连的主要成分为生物碱，若能够准确掌握黄连中有效成分，选择疗效确切的鉴定方式在保证饮片质量中具有重要意义。

临床上常采取紫外分光光度计或者薄层扫描方式进行鉴定，虽然取得过一定检验价值，但效果并不明显[1]。

其中薄层扫描鉴定结果的准确性较低，而紫外分光光度计仅能够检出黄连中生物碱的总含量。

随着鉴定技术不断完善，临床认为采取HPLC法鉴定效果显著，不仅能够检出各生物碱含量，同时能够保证结果准确[2]。

因此本文展开研究，探讨HPLC法在不同区域黄连生物碱的检验中的价值，现作出如下报道。

1.资料与方法1.1 仪器与试剂日本日立公司生产的高效液相色谱仪器、色谱柱、超声波清洗器、电子分析天平、色谱数据工作站、乙腈色谱纯试剂、盐酸小檗碱以及双蒸水等。

1.2 方法将盐酸小檗碱判定为对照，按照HPLC法分别检测黄连中各生物碱含量。

1.3 色谱条件色谱柱为4.6mm*250mm，5um；流动相50:50的乙腈-0.1%磷酸液体，与0.1g/100ml的十二烷基磺酸钠混合，柱温设置为30℃，检验波长345nm，流速1.0ml/min。

1.4 配置溶液将100℃干燥后的盐酸小檗碱放入流动相中，浓度设置成240.6ug/ml；取0.1g黄连粉末，放置于锥形瓶中，加入流动相（80ml），采取超声处理，频率200W，功率40kHz，时间控制35min左右。

HPLC法测定黄连药材及其炮制品中六种生物碱的含量

HPLC法测定黄连药材及其炮制品中六种生物碱的含量阳勇;罗维早;孙建彬;王欣;花雷;李隆云;覃瑶【摘要】An HPLC method to determine six alkaloids of the Coptidis for Chinese Pharmacopoeia of 2015 Edition was established through C18 column. The mobile phase was CH3CN-0.25 mol·L-1 NH4Ac (36:64) (containing 8 mmol·L-1 SDS and adjusting pH 9.3 with ammonia) at the flow rate of 1 mL·min-1, the detective wavelength was 270 nm and the column temperature was 35 oC. The linear ranges of jatrorrhizine hydrochloride, columbamine hydrochloride, epiberberine hydrochloride, coptisine hydrochloride, palmatine hydrochloride and berberine hydrochloride were 0.006 96-0.233, 0.004 75-0.152, 0.003 30-0.528, 0.006 31-1.010, 0.004 71-0.753, 0.017 8-2.884 μg·mL-1, respectively. The average recoveries were 99.65%, 98.59%, 98.49%, 98.66%, 98.64%, 98.63% and RSD were 0.03%、0.15%、0.21%、0.12%、0.28%、0.23%, respectively. The method is simple and accurate, and can be used to determine the contents of jatrorrhizine, columbamine, epiberberine, coptisine, palmatine and berberine in the Coptidis.%目的:测定黄连药材及其炮制品中盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量,制定2015年版《中国药典》中黄连及其炮制品的质量标准.方法:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈-0.25 mol·L-1乙酸铵和8 mmol·L-1十二烷基硫酸钠(SDS)水溶液(氨水调节pH 9.3)(36:64)为洗脱剂,流速1 mL·min-1,检测波长270 nm,柱温35℃.结果:盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的线性范围依次为0.006 96-0.233、0.004 75-0.152、0.003 30-0.528、0.006 31-1.010、0.004 71-0.753、0.017 8-2.884μg·mL-1;加样回收率依次为99.65%、98.59%、98.49%、98.66%、98.64%、98.63%,RSD依次为0.03%、0.15%、0.21%、0.12%、0.28%、0.23%.结论:该方法简便、准确、可靠,可作为2015年版《中国药典》(一部)黄连质量标准中的含量测定方法.【期刊名称】《世界科学技术-中医药现代化》【年(卷),期】2015(017)003【总页数】7页(P596-602)【关键词】黄连;HPLC;生物碱;含量测定【作者】阳勇;罗维早;孙建彬;王欣;花雷;李隆云;覃瑶【作者单位】重庆市中药研究院重庆 400065;重庆市中药研究院重庆 400065;重庆市中药研究院重庆 400065;第三军医大学大坪医院野战外科研究所药剂科重庆400042;重庆市中药研究院重庆 400065;成都中医药大学中药学院成都 610072;重庆市中药研究院重庆 400065;重庆市中药研究院重庆 400065;重庆市中药研究院重庆 400065;太极集团有限公司重庆 401147【正文语种】中文【中图分类】R284.1黄连为毛茛科植物黄连 Coptis chinensis Franch.、三角叶黄连Coptis deltoidea C. Y. Cheng et Hsiao或云连Coptis teeta Wall. 的加工品[1]，其化学成分主要为生物碱类物质[2-5]。

HPLC测定不同产地黄连中6种生物碱的含量

ｗａｓ
ｆｏｕｎｄａｍｏｎｇｔｈｅｔｅｓｔｅｄｓａｍｐｌｅＳ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ｆｏｒｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ
Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄ
ａｎｄｒｅｐｅａｔａｂｌｅ
Ｇａｔｒｏｒｒｈｉｚｉｎｅ，Ｃｏｌｕｍｂａｍｉｎｅ，Ｅｐｉｂｅｒｂｅｒｉｎｅ，Ｃｏｐｔｉｓｉｎｅ，ＰａｌｍａｔｉｎｅａｎｄＢｅｒｂｅｒｉｎｅＣｈｉｎｅｎｓｉｓＦｒａｎｃｈ．Ｉｔ
ｃａｎ
ｉｎＣｏｐｔｄｓ
ｂｅｔｔｅｒｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅ
ｑｕａｌｉｔｙｏｆ
Ｃｏｐｔｉｓ
ＣｈｉｎｅｎｓｉｓＦｒａｎｃｈ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］
ＣｏｐｔｉｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓＦｒａｎｃｈ：
Ｇａｔｒｏｒｒｈｉｚｉｎｅ：Ｃｏｌｕｍｂａｍｉｎｅ：Ｅｐｉｂｅｒｂｅｒｉｎｅ：
Ｃｏｐｔｉｓｉｎｅ：Ｐａｌｍａｔｉｎｅ：Ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ：ＲＰ～ＨＰＬＣ
黄连为毛莨科植物黄连ＣｏｐｔｉｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓＦｒａｎｃｈ．、三角叶黄连￡ｄｅｌｔｏｉｄｅａＣ．Ｙ．ＣｈｅｎｇｅｔＨｓｉａｏ、云南黄连ＣｏｐｔｉｓｔｅｅｔａＷａｌｌ．的干燥根茎。药材依次习称“味连”、“雅连”、“云连”…。主要有效成分为生物碱类化合物拉’，其中小檗碱（ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ）含量最高，此外还有表小檗碱
２．３供试品溶液的制各取黄连粉末样品（过１００目筛）约０
１
ｇ，精密称定，置１５０
１２
全国第一届曲用植物化学与中药新曲研发技术创新研时会
２方法与结果
２．１色谱条件Ｘｔｉｍａｔｅ”ｃ。。色潜柱（４
６Ⅲｍ×２５０ｍｍ，５
ｕ口）；流动柑＾相３０
ｍｍｏ
Ｊ・Ｌ。
碳酸氢铵水镕液（害有０７％氨水、０１％兰乙胺），Ｂ相乙腈，线性梯度洗脱程序为０‘１５ｍ㈨１０％’２５％Ｂ：１５、２５３０％、４５％Ｂ；流速１ｍ１．・ｍ１ｎ‘；检测渡长２７０ｎｍ，托温为３０℃ ｕＬ。进样量１０在上述色谱条件下，盐酸曲根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸袁小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸Ｂ马汀、盐酸小檗碱理论塔扳数均不低于１００００。分离度投拖尾用子均苻舍音量测定要求。对照６＾及样品（峨眉地区味连）ＩＩＰＬＣ田见图１。

HPLC法测定不同产地黄连饮片中生物碱的含量

HPLC法测定不同产地黄连饮片中生物碱的含量罗文汇;李养学;胥爱丽;孙冬梅【摘要】目的考察不同产地黄连饮片中生物碱的含量.方法采用高效液相色谱法测定不同产地黄连饮片中表小檗碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱4种生物碱的含量,以乙腈-0.1%磷酸溶液(50:50)(每100Ll加十二烷基磺酸钠0.1g)为流动相,Agilent ZORBAx Eclipse XDB C18柱(4.6mm×250mm,5μm)为固定相,流速为1.0L/min,柱温为35℃,检测波长为345nm.结果盐酸小檗碱在0.096～0.480 μg范围内呈线性关系,回收率为97.95%,RSD为1.03%.结论本法测定黄连饮片中4种生物碱含量简单、快速、准确、重现性好,符合含量测定建立的要求,可以为判断黄连饮片质量的方法之一.【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2010(008)030【总页数】2页(P223-224)【关键词】黄连饮片;表小檗碱;黄连碱;巴马汀;小檗碱;高效液相色谱法【作者】罗文汇;李养学;胥爱丽;孙冬梅【作者单位】广东省中医研究所,510095【正文语种】中文【中图分类】R282.710.3黄连为毛茛科植物黄连Coptis chinensis Fanch.、三角叶黄连Coptis deltoideaC.Y.Cheng et Hsiao或云连Coptis teeta Wall.的干燥根茎。

具有清热燥湿，泻火解毒的功效，用于湿热痞满，呕吐吞酸，泻痢，黄疸，高热神昏，心火亢盛，心烦不寐，心悸不宁，血热吐衄，目赤，牙痛，消渴，痈肿疔疮；外治湿疹，湿疮，耳道流脓。

黄连有效成分为多种生物碱[1]。

本文采用高效液相色谱法以盐酸小檗碱为对照，分别计算表小檗碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的含量，比较了8个产地黄连饮片，为更好的控制黄连饮片质量提供了依据。

1 仪器与试药Agilent 1200高效液相色谱仪（美国）；Mettler-Toledo XS205DU电子分析天平（瑞士）；Agilent ZORBAX Eclipse XDB C18（4.6mm×250mm，5μm）色谱柱。

HPLC法测定黄连中生物碱的含量

HPLC法测定黄连中生物碱的含量作者：毛英王欢游仙丹等来源：《农业开发与装备》 2016年第1期毛英1，王欢2，游仙丹1，刘思1，连琰1*（1.怀化学院化学与材料工程学院，湖南怀化 418000；2.湖南大学化学化工学院，湖南长沙 410083）摘要：目的：研究中药材黄连中生物碱的HPLC测定方法。

方法：采用BDS Hypersil C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）；以乙腈、0.05mol·L-1磷酸二氢钾溶液（50：50）（每100ml中加十二烷基硫酸钠0.4g，再以磷酸调节pH值为4.0）为流动相；检测波长为345nm；流速：1.0ml·min-1；柱温：30℃；进样量：20μL。

结果：盐酸小檗碱在0.3～1.2μg范围内呈良好的线性关系，R2＝0.9935（n＝5），加样回收实验的平均回收率达到100.41%，RSD＝1.2%（n＝9）。

结论：该方法简便、准确、重现性好，可用于黄连药材中生物碱含量的控制方法。

关键词：高效液相色谱法；黄连；生物碱；药理研究；盐酸小檗碱0 引言黄连为多年生毛茛科草本植物[1-2]，药用部分主要取自黄连、三角叶黄连、峨嵋山野连或云连的根茎[3]。

野生黄连主要产于四川、云南、湖北，现今多采用荫棚栽培。

秋季采挖，除去须根和泥沙，干燥。

黄连作为临床常用药物，用于治疗湿热痞满、呕吐吞酸、泻痢、黄疸、高热神昏、心火亢盛、心烦不寐、血热吐衄、目赤、牙痛、消渴、痈肿疔疮；外治湿疹、湿疮、耳道流脓等[4]。

此外，黄连还具有很多药理作用譬如：抗病毒作用、抗阿米巴作用、抗炎、抗腹泻作用、对心血管作用、降血糖作用、降血脂作用、抗氧化作用、对血液系统的影响、抗溃疡作用[5-6]。

由于黄连的种类与炮制方法都非常多，地理分布也比较广泛，因此作为药材它们的质量不易控制。

黄连的主要药用成份生物碱的含量的准确测定对评价不同产地黄连与质量监控具有重要意义。

6种黄连饮片中6种生物碱的RP—HPLC含量测定及与“治消渴”药效学的

6种黄连饮片中6种生物碱的RP—HPLC含量测定及与“治消渴”药效学的谱—效关系分析建立生品、姜炙、醋炙、酒蒸、酒炙、萸炙6種黃连饮片中6种生物碱（盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱）的含量测定方法，并结合药效学结果探索其与药效学研究结果及中医疗效之间的关系。

采用Welch XtimateTMC18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，以0.1%三乙胺溶液（用碳酸氢铵和氨水调节pH 10）为流动相A，乙腈为流动相B，进行梯度洗脱（0～15 min，10%～25%B；15～25 min，25%～30%B；25～40 min，30%～45%B），流速1.0 mL·min-1，柱温30 ℃，检测波长270 nm。

6种生物碱分别在0.85～16.96 mg·L-1（r=0.999 7），1.25～24.96 mg·L-1（r=0.999 9），2.05～40.96 mg·L-1（r=0.999 9），3.65～72.96 mg·L-1（r=0.999 9），2.88～57.06 mg·L-1（r=0.999 8），13.25～264.96 mg·L-1（r=0.999 6）呈现良好的线性关系，平均加样回收率（n=9）分别为102.4%（RSD 1.2%），101.8%（RSD 1.3%），100.3%（RSD 1.8%），100.7%（RSD 1.8%），101.2%（RSD 1.5%），97.90%（RSD 2.0%）。

测定6种黄连饮片共36个批次的6种生物碱的平均质量分数分别为3.55，4.49，9.12，19.17，15.69，62.56 mg·g-1。

该文建立含量测定方法准确性高、重复性好，可用于6种黄连饮片中6种生物碱的含量测定。

采用主成分分析、分层聚类分析对含量测定及前期药效学研究结果进行数据分析，结果表明酒蒸、酒炙、萸炙3种黄连饮片与生品黄连饮片存在明显差异，酒蒸饮片与生品饮片具有最大的差异，其差异主要与血清甘油三酯（TG）、空腹血糖水平（FBG）有关，另外，盐酸非洲防己碱是6种生物碱成分中影响最大的生物碱成分。

HPLC测定黄连上清片中有效成分的含量

HPLC测定黄连上清片中有效成分的含量摘要：目的：建立多波长HPLC同时测定黄连上清片中三种成分含量的方法。

方法：采用Eclipse XDB-C18色谱柱（5 μm，150 mm×4.6 mm），以A（0.1%磷酸水溶液（0.1%三乙胺））-B（甲醇）为流动相进行梯度洗脱；检测波长分别为238 nm、230 nm、278 nm。

结果：栀子苷、盐酸小檗碱、黄芩苷质量浓度分别在各自浓度与峰面积线性关系良好；结论：该方法准确可靠，可用于该制剂的质量控制。

关键词：多波长HPLC；栀子苷；盐酸小檗碱；黄芩苷；含量测定材料与方法1 仪器与试药1.1 仪器 Agilent 1200系列高效液相色谱仪；真空抽滤泵（大连依利特公司）；涡旋混合器（XW-80A上海医科大学仪器厂）；Sartorius CP225D电子天平（德国Sartorius公司）；数控系列超声处理器FS-150N（上海生析超声仪器有限公司）。

1.2试药栀子苷对照品（97.5%，批号：110749-201316）；盐酸小檗碱对照品（98.1%，批号：110713-200208）；黄芩苷对照品（批号：110715-200514），来源都是中国食品药品检定研究院；色谱纯甲醇（天津市协和昊鹏色谱科技有限公司）；磷酸（分析纯）；三乙胺（分析纯）2 色谱条件2.1色谱柱 Eclipse XDB-C18（5 μm，150 mm×4.6 mm）；流动相为A（0.1%磷酸水溶液（0.1%三乙胺））-B（甲醇）；梯度洗脱（0 ～ 6 min，70% A；6 ～ 15 min，70% A ～60% A；15 ～ 25 min，60% A；25 ～ 30 min，60% A ～70% A）；流动相体积流量1.0 mL/min，柱温30 ℃，进样量5 μL；检测波长为230 nm（小檗碱）、238 nm（栀子苷）、278 nm（黄芩苷）。

2.2溶液的制备2.2.1对照品混合溶液的制备分别称取栀子苷、盐酸小檗碱、黄芩苷适量于50 mL容量瓶中，加甲醇溶解，定容至刻度，制成对照品贮备液。

HPLC法测定黄连盐酸小檗碱含量

HPLC法测定黄连盐酸小檗碱含量潘佑找;何晓衡;杨凯【期刊名称】《安徽农学通报》【年(卷),期】2009(015)019【摘要】以湖北省来凤县中药材基地生产的3种黄连:味连(Coptis chinensis Franch),雅连(Coptis deltoidea C.Y. Cheng et Hsiao),云连(Coptis teeta Wall)和利川市中药材基地生产的味连(Coptis chinensis Franch)为试材,以甲醇和乙醇为提取液,在85℃水浴中回流提取1.5h,用HPLC法测定比较不同种和同一品种不同产地的黄连盐酸小檗碱含量的差异. 结果表明:云连小檗碱含量最高,雅连其次,川连最低,利川中药材基地生产的黄连中小檗碱的含量比来凤县生产的要高.溶剂种类对黄连盐酸小檗碱的提取率有一定的影响,甲醇作为提取液时的提取率相对较高一些.【总页数】3页(P184-186)【作者】潘佑找;何晓衡;杨凯【作者单位】长江大学园艺园林学院,湖北荆州,434025;长江大学园艺园林学院,湖北荆州,434025;长江大学园艺园林学院,湖北荆州,434025【正文语种】中文【中图分类】S567.5+2【相关文献】1.RP-HPLC法测定黄连上清片中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量 [J], 张淑芬2.HPLC法测定黄连上清胶囊中盐酸小檗碱的含量 [J], 徐玉萍3.HPLC法测定天芪降糖胶囊中盐酸黄连碱和盐酸小檗碱的含量 [J], 李广生;李玥瑛;张清波;仲昭庆;笔雪艳4.HPLC法测定额勒更口服液黄连中盐酸小檗碱含量 [J], 李雨生5.HPLC法测定黄连解毒汤传统汤剂与配方颗粒中盐酸小檗碱和黄芩苷含量的研究[J], 梁盈军;舒洁倩因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

黄连五种主要生物碱的提取纯化及含量测定

［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ＲｈｉｚｏｍａＣｏｐｔｉｄｉｓ；ａｌｋａｌｏｉｄ；ｅｘｔｒａｃቤተ መጻሕፍቲ ባይዱｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｔｙｐｒｏｃｅｓｓ；ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｄｏｉ：１０．１３３１３／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３４８９０．２０１８０３２９００５
黄连味苦，性寒，归心、胃、肝、胆、大肠经，具有泻火解毒、清热燥湿的功效。黄连中含有小檗碱、巴马汀碱、黄连碱，表小檗碱等生物碱都具有较强的药理活性。现代药理研究表明，黄连主要有效成分生物碱类不仅具有抗菌、抗病毒的功效，还具有抗心律失常、改善充血性心力衰竭、扩张冠状动脉、降血糖、降血脂、抗血小板凝集、利胆、抗肿瘤等药理
２０１８年９月第２０卷第９期
中国现代中药ＭｏｄＣｈｉｎＭｅｄ
Ｓｅｐ２０１８Ｖｏｌ２０Ｎｏ９
·中药工业·
黄连五种主要生物碱的提取纯化及含量测定△
张纯刚１，唐静雅２，于琛琛１，程兰１，康廷国１
（１辽宁中医药大学药学院，辽宁大连１１６６２０；２大连医科大学附属第一医院药学部，辽宁大连１１６６２０）
［摘要］目的：探索出黄连五种主要生物碱的最优提取纯化方法及含量测定方法，为制剂研究奠定基础。方法：采用ＨＰＬＣ进行生物碱的含量测定，以黄连五种主要生物碱加和得率为指标，优选黄连五种主要生物碱提取及纯化工艺。盐酸药根碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的浓度，分别在０４８～４８０、３５２～３５２、２０４～２０４、１７２～１７２、１０２～１０２μｇ·ｍＬ－１（ｒ均大于０９９９）范围内，与峰面积呈良好的线性关系。结果：黄连提取最优的条件为黄连饮片，加８倍量１５％的硫酸溶液，煎煮３次，每次４０ｍｉｎ。纯化最佳工艺为黄连提取液用Ｃａ（ＯＨ）２调节ｐＨ５～６，滤液加ＨＣｌ调节ｐＨ１～２，加５％ＮａＣｌ，冰箱冷藏静置过夜，沉淀物干燥。结论：所建立的黄连五种主要生物碱提取纯化工艺及含量测定方法简单可靠。

RP-HPLC测定三种黄连中的生物碱含量

RP-HPLC测定三种黄连中的生物碱含量崔国辉;袁汉尧;周克元【摘要】目的建立反相高效液相色谱法测定黄连中的原小檗碱型生物碱含量的方法;比较云南黄连、北美黄连、四川黄连生物碱含量的差别.方法采用安捷伦C18色谱柱、乙腈-水为流动相、345 nm检测盐酸小檗碱、盐酸巴马亭、盐酸药根碱三种生物碱标准品的出峰时间以及三种黄连三种生物碱含量的多少.并对其进行精密度试验、样品稳定性试验、重现性试验、回收率试验.结果云南黄连、北美黄连、四川黄连三种黄连三种生物碱的含量分别为5.84%、1.26%、0.88%;6.15% 、1.35% 、0.95%和5.78%、1.38%、1.06%.加回收率分别为103.8%、103.8%、117.4%.结论云南黄连、北美黄连、四川黄连生物碱含量的差别没有统计学意义,本方法检测黄连中生物碱含量的方法快速简便,结果准确、可靠,重现性好.【期刊名称】《海南医学》【年(卷),期】2010(021)016【总页数】3页(P4-6)【关键词】黄连;高效液相色谱;原小檗碱型生物碱【作者】崔国辉;袁汉尧;周克元【作者单位】广东医学院检验学院临检教研室,广东,湛江,524023;广东医学院检验学院临检教研室,广东,湛江,524023;广东医学院检验学院临检教研室,广东,湛江,524023【正文语种】中文【中图分类】R284.1黄连是毛茛科植物黄连(Coptis chinensis franch)的干燥根茎,文献报道,它含有小檗碱、巴马亭、药根碱、黄连碱等多种原小檗碱型生物碱。

祖国医学记载其具有清热、解毒的作用,很早就用于消化系统的治疗和研究。

例如鲁劲松等[1]研究发现黄连总生物碱(TA)通过抑制胃炎时黏膜细胞的凋亡从而对幽门螺旋杆菌脂多糖(Helicobacterpylori,LPS)引起的大鼠胃部炎症有保护作用。

而黄连中的主要成分小檗碱可以诱导人结肠癌细胞株增殖抑制[2]。

利用高效液相色谱可以将黄连中主要的生物碱成分进行分离,可以用于黄连的质量控制以及主要成分含量的测定[3-4],但也存在很多问题,诸如分离差、峰型对称性差、色谱柱寿命短和试剂消耗大的问题。

HPLC法测定黄连中盐酸小檗碱和盐酸药根碱

HPLC法测定黄连中盐酸小檗碱和盐酸药根碱
李会;苏华
【期刊名称】《广东化工》
【年(卷),期】2013(40)15
【摘要】目的:建立黄连水提液中同时测定盐酸小檗碱和盐酸药根碱的高效液相色谱法.方法:加热回流法制备黄连药材水提液,反相高效液相色谱外标法同时测定盐酸小檗碱和盐酸药根碱的含量.结果:盐酸小檗碱和盐酸药根碱的的线性范围分别为:7.5～243.0 μg/mL和0.78～34.2μg/mL,平均回收率分别为99.3％和100.1％供试.药材中盐酸小檗碱和盐酸药根碱的含量为21.3 mg/g和9.6 mg/g.结论:该方法能用于黄连药材中盐酸小檗碱和盐酸药根碱的含量测定.
【总页数】2页(P170,141)
【作者】李会;苏华
【作者单位】陕西省石油化工研究设计院质量管理处,陕西西安710054;陕西省石油化工研究设计院质量管理处,陕西西安710054
【正文语种】中文
【中图分类】O65
【相关文献】
1.HPLC测定三黄止痒搽剂中盐酸药根碱和盐酸小檗碱的含量 [J], 吴樱;潘红娟;刘莉
2.HPLC法同时测定二妙丸中黄柏碱、木兰花碱、药根碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗
碱的含量 [J], 潘超;张莉;王玉
3.HPLC法同时测定黄柏中盐酸药根碱、盐酸巴马汀及盐酸小檗碱的含量 [J], 丁晴;徐德然
4.HPLC测定黄柏中的盐酸小檗碱、盐酸巴马汀和盐酸药根碱 [J], 唐艳梅;叶萌;向丽;彭秀
5.RP-HPLC法同时测定白头翁汤中盐酸小檗碱、盐酸药根碱、盐酸巴马汀的含量[J], 宣颖超;吴洁;张涛;穆祥
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高效液相色谱法同时测定黄连水煎剂中3种生物碱的含量

高效液相色谱法同时测定黄连水煎剂中3种生物碱的含量林川;王凌
【期刊名称】《海峡药学》
【年(卷),期】2012(024)009
【摘要】目的建立高效液相色谱法测定黄连中生物碱含量的方法.方法色谱柱为C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为水(含0.1％冰醋酸-2％醋酸铵)(A):乙腈(B)梯度洗脱,检测波长为345nm.结果在以上色谱条件下,小檗碱、巴马汀和药根碱分离效果好.结论此方法灵敏度高,重现性好,可用于黄连等含小檗碱型生物碱中药材及制剂的质量控制.
【总页数】3页(P70-72)
【作者】林川;王凌
【作者单位】福建省肿瘤医院药剂科福州350001;福建省立医院药学部福州350001
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.反相高效液相色谱法的运用对黄连中三种生物碱的含量测定 [J], 何洪林
2.高效液相色谱法同时测定马尾连及硬水黄连提取物中4种生物碱类成分含量 [J], 卞艳晶
3.黄连不同炮制品中3种生物碱含量的高效液相色谱法测定 [J], 宋平顺;卫玉玲;赵建邦;丁永辉
4.反相高效液相色谱法同时测定黄连、左金丸及反左金丸中三种生物碱的含量 [J], 朱妙琴
5.测定黄连中5种生物碱含量的高效液相色谱法研究 [J], 应懿;何志红;周世文;汤建林;杨雪;王璐
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HPLC法测定黄连、黄柏及其中成药中小檗碱型生物碱的含量

HPLC法测定黄连、黄柏及其中成药中小檗碱型生物碱的含量赵陆华;蔡星瀛;董善士;林似兰;安登魁
【期刊名称】《中国药科大学学报》
【年(卷),期】1989(20)2
【摘要】用HPLC法分离测定黄连、黄柏及其中成药三妙丸、左金丸、香连丸、木香槟榔丸、金黄散中小檗碱型生物碱—小檗碱、药根碱、巴马亭、黄连碱的含量,考察了提取时间对提取效果的影响。

色谱柱:PERKIN-ELMER分析型硅胶柱(250mm×3.9mm,10μm),流动相乙酸乙酯-甲酸-无水乙醇(15:3:2),检测波长
UV346nm,流速1ml/min,四种成分的回收率均在98～105%之间,变异系数
CV<5%。

【总页数】4页(P82-85)
【关键词】高效液相色谱;黄连;黄柏;生物碱
【作者】赵陆华;蔡星瀛;董善士;林似兰;安登魁
【作者单位】中国药科大学理化测试中心;中国药科大学药物分析教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R932.11
【相关文献】
1.RP-HPLC法同时测定黄连中四种原小檗碱型生物碱的含量 [J], 袁久荣;魏英勤;袁浩;徐娟;容蓉
2.高效液相色谱法测定复方黄连胶囊中小檗碱型生物碱的含量 [J], 贾恒明;李耀武;
马冬雪;宋青
3.HPLC法测定黄连中3种原小檗碱型生物碱的研究 [J], 刘娜;管淑玉;徐鹏;杨然存;于阿娟
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