正交试验优化酶法提取黄芪总黄酮工艺
正交试验优选黄芪主要有效成分的提取工艺
文章编 号：１０ ．３ ４２ １）１０ ５ —３ ０ ５５ ０ （０ １１－０ ９０
Ｏｐ ｉ ｉ ａ ｉ ｎ ｏ ｔ ａ ｔｎ ｔ ｅ Ｃｏ ｐ ｎ ｎ ｓ ｆ ｏ Ａｓｒ ｇ ｌ ｓ ｍｅ ｒ ｎ ｃ ｕ ｂ Ｏｒ ｈ ｇ ｎ ｌ ｔ ｚ ｔ ｆ Ｅｘ ｒ ｃ ｉ ｇ Ａｃ ｉ ｍ ｏ ｅ ｔ ｒ ｍ ｔａ ａ ｕ ｍｂ ａ ａ ｅ ｓ ｙ ｍ ６ ’ ２ ２ ８ ０ ２ ２ ２ ０ ４ ６ ２ ４ ５ ８ １ ０ １ １ １ ２ ４ ６ １ ８ ２ Ｄ ２ ４
水至 ２ ０ｍ ， ． Ｌ 按标准 曲线项下操作， 重复测定 ６次， 吸光度 分别
１２ ～ ７ ５ ｐ ／ Ｌ之 间 线性 关 系 良好 。 ． ５ ． ｇ ｍ
方法 操作， 计算黄芪 甲苷含量 及其转移率 。黄芪 甲苷转移 率＝ 干膏中黄 芪 甲苷含量／ 药材 中的黄 芪 甲苷含量 。高效液相色谱
图见 图 １ 。
２ ３４ 精 密度试验 ．．
精密吸取葡萄糖对照 品溶液 ０ ４ｍ ， ． Ｅ 加
ｉｖ ｓｉａ ｉｎ ａ ｄ ｔ ｂｅ Ｌ （４ ｎ ｅ ｔ ｔ ｎ ａ ｌ ９３ ）ｗａ ｓ ｄ ｔ ｏ ｄ ｔ ｔ ｅ ｏ ｔ ｏ ｏ ａ ｘ ｅ ｉ ｎ ．Ｒ ｓ ｌ ｈ ｅ ｔ ｇ ｏ ｓ ｕ ｅ ｏ ｃ ｎ ｕｃ ｈ ｒｈ ｇ ｎ ｌｅ ｐ ｒｍｅ ｔ ｅｕｔ Ｔ ｅ ｂ ｓ ｓ
Ｄ Ｆ ６ ５ 型真 空干燥 箱 （ Ｚ 一 ００ 上海精 宏设备 有 限公司） Ｃ １Ａ ；Ｌ 一 ０ Ｔ 型液相色谱仪泵 主机 （ 日本 岛津 ） Ｐ 一 ０ 型紫 外检测器 （ 、Ｓ Ｄ １Ａ 日
本 岛津 ） 碳 十 八 烷 基 硅 胶 柱 ；Ｈ ｎ ｏ ； ａｂ ｎ液 相 进 样 器 ， ０ Ｌ １０ Ｉ 。 Ｊ 黄 芪 药 材 购 于 广 州 二 天 堂 药 店 ；黄 芪 甲苷对 照 品 （ 国 药 中 品 生 物 制 品检 验 所 ， 号 ０ ８ — ０ ３ １ ；甲醇 、乙腈 为 色 谱 纯 ， 批 ７１２０１） 其他试剂为分析纯， 为纯净水 。 水 ２ 方 法 与 结 果
正交实验法优化黄芩中总黄酮的提取工艺研究
正交实验法优化黄芩中总黄酮的提取工艺研究发表时间：2020-01-09T09:24:09.513Z 来源：《医师在线》2019年22期作者：于琦[导读] 探讨优化黄芩中总黄酮的提取工艺方法 [摘要]目的：探讨优化黄芩中总黄酮的提取工艺方法。
方法：开展正交实验，以乙醇回流提取法为支撑，将总黄酮获得率设为评估指标，对乙醇浓度、料液比、提取时间3因素规划三个水平进行实验，探析最优的提取工艺。
结果：最优的提取条件为70%乙醇，料液比为1:9，提取时间是每次3h。
结论：乙醇回流提取法适用于黄芩中总黄酮的提取领域。
[关键词]黄芩；总黄酮；正交实验；提取工艺；工艺优化黄芩是唇形科黄芩属的数年生药用草本植物，截至今日，已从黄芩中发现了二百余种化合物，其中有20.0%以上为黄酮类化合物，很多研究指出[1]，黄酮类化合物在黄芩诸多潜在活化物中药用价值最高的成分。
依照黄酮类化合物的理化属性，加强提取工艺方法的研究与优化，是迫切需要研究的问题。
游离的黄酮类化合物和水难溶，故而在提取中多采用醇类进行。
为进一步提升黄芩中总黄酮的提取率，笔者采用正交实验法，具体内容如下：1材料和方法1.1药物和试剂：黄芩、亚硝酸钠、氢氧化钠及乙醇等。
仪器有循环水真空泵、光度计、恒温水浴锅及超声清洗锅。
1.2方法1.2.1制取对照品溶液与绘制标准曲线精确测量芦丁对照品，采用70%乙醇溶解并定容后，获得0.2㎎/ml的芦丁标准溶液,准确吸取芦丁标准溶液0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4ml，分别安置于5ml EP管内，分别加入70%乙醇到2.4ml。
加入0.25ml 5%亚硝酸钠后，摇匀静置5min后，加入08ml 1mol/L氢氧化钠，再加入0.32ml 70%的乙醇，在510nm波长位置检测吸光度，将吸光度(T) 、芦丁浓度(f)分别设为纵。
横坐标，绘制其对应的标准曲线。
1.2.2配制供试品溶液与检测总黄酮的获得率粉碎黄芩药材，精确量取重量不同的样品，继而依照不同的料液比加入适量无水乙醇，在不同提取时间条件下分别进行加热回流及提取，离心、过滤处理。
纤维素酶法提取黄芪总黄酮的工艺研究
纤维素酶法提取黄芪总黄酮的工艺研究背景黄芪是传统中药之一，被认为具有养血、补气、抗衰老等多种功效，因此被广泛应用于药品、食品和化妆品等领域。
其中黄芪总黄酮是黄芪的重要药效成分之一，已经被证明具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等作用。
因此，提高黄芪总黄酮的提取效率和纯度是很有必要的。
纤维素酶法提取黄芪总黄酮是目前比较常用的一种方法，主要是利用纤维素酶对黄芪中的纤维素进行降解，从而使黄芪总黄酮易于释放和提取。
本文就是要研究纤维素酶法提取黄芪总黄酮的最佳工艺条件。
实验步骤材料和仪器1.黄芪：从药材市场购买，进行清洗和研磨，制成粉末。
2.纤维素酶：从阿拉丁公司购买。
3.酸性乙醇：95%酒精和1%盐酸混合制备。
4.甲醇：纯度为99%。
5.N-苯基-2-萘胺（PNA）：从阿拉丁公司购买。
6.紫外分光光度计：使用 TU-1810型。
实验步骤1.将10克黄芪粉末加入500ml锥形瓶中；2.在37℃下添加一定量的纤维素酶溶液，控制pH值为5.5，开始酶法反应；3.反应时间根据表1进行选择；4.过滤液用酸性乙醇浸泡提取5次，每次30分钟；5.合并提取液，用甲醇重结晶。
表1：不同反应时间对纤维素酶法提取黄芪总黄酮的影响结果反应时间(min) 提取率(%)10 15.720 22.330 28.440 29.750 31.860 33.5结果分析实验结果表明，采用纤维素酶法提取黄芪总黄酮的最佳反应时间为60分钟。
此时，提取率达到33.5%，相对较高。
同时，从表1中还可以看出，反应时间每增加10分钟，提取率就会相应地提高1-2个百分点，但是过头就会反效果，提取率反而下降。
这说明黄芪中的黄酮类物质是一个复杂的混合物，其释放和提取存在一定的条件限制。
此外，在实验过程中还发现，在酸性乙醇提取过程中，末次提取液的黄酮含量很低。
因此，增加酸性乙醇的提取次数可以提高黄酮的收率和纯度。
结论综上所述，对黄芪总黄酮的提取采用纤维素酶法，最佳反应时间为60分钟，并且酸性乙醇提取次数应该控制在4次以上。
正交法研究黄芪桂枝五物汤中总黄酮的提取工艺 开题报告
5、匡海学.中药化学.北京:北京中医药出版社.2002:133 6、蔡少青.生药学.北京：人民卫生出版社 7、M．C．Mareucci，Pmpolis．Chemical Composition，Biological Properties and Therapeutic Activity[M]．Apidologie．1999，26，83 8、Lee ML. Analytical Supereritieal fluid Chroma-tography and Extraction， Chromatographic Conference[M]．InProvo VT，1990，437． 9、Pare J．R．J，SigouinM，Lapointe J．Miemwawresistednatural products extraction[C]．United States Patent，1991．
伍进行药效学比较，筛选出该方的针对各病症的有效部位及其最佳配伍比例做基础 准备工作。以期在不同层次上探讨有效成分群及有效成分群配伍与药效作用的相关 性。同时该试验结果也可为医药品、化妆品、食品做基础，也必将有广阔的前景。 以求解开中医学在临床应用，及中药工业化，新剂型开发方面的基础问题，充分体 现了其重要价值，实用性和可行性，必将黄芪桂枝五物汤配伍研究推向更深层次， 从而为研制高效低毒、成分基本清楚、作用靶点明确的创新型药物奠定基础对中药 的现代化和中药新药的开发有重大的意义。 2、创新性 首次对复方制剂黄芪桂枝五物汤中总黄酮的提取工艺进行研究，优化工艺，并 运用正交设计法研究不同因素搭配对总黄酮提取量的影响，方法具有创新性。 二、 拟采用的研究方法、手段及实验准备情况
1、整体思路 计划以乙醇浓度（60%、70%、80%三个梯度） 、粉碎粒度（粗粉、中粉、细粉三个 梯度） 、回流提取时间（30min、60min、90min 三个梯度）为考察因素，用乙醇回流 提取法，分别回流 2 次，合并提取液，然后用水饱和乙酸乙酯萃取 3 次，挥干乙酸 乙酯得浸膏，浸膏溶于水中致所需浓度，以芦丁作基准物质，用紫外分光光度法， 以样品中总黄酮含量为测定指标，采用正交试验优化五物汤中总黄酮的最佳提取工 艺。 2、具体步骤： (1)标准曲线的绘制：精密称取烘干至恒重的芦丁标准品配成0.2 mg/ mL 的对照溶 液,分别量取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL ,各加70%乙醇至5.0 mL ,于510 nm 处测其 吸光度值, 再以标准溶液浓度为横坐标，吸光度为为纵坐标绘制标准曲线。得到线性 回归方程，及线性范围。 (2)样品的制备：将原材料以乙醇浓度（60%、70%、80%三个梯度） 、粉碎粒度（粗 粉、中粉、细粉三个梯度） 、回流提取时间（30min、60min、90min 三个梯度）具体 见下表，考察 3 个因素,3 个水平，选用 L9 正交试验设计表对原材料进行回流提取实 验分别回流 2 次，合并提取液，然后用水饱和乙酸乙酯萃取 3 次，挥干乙酸乙酯得 浸膏，浸膏溶于水中致所需浓度，以芦丁作基准物质，用紫外分光光度法，测量吸 光度，再代入标准曲线回归方程，根据稀释倍数计算总黄酮浓度。将各组方案的总 黄酮浓度逐一带入正交试验表中，得到正交试验结果。
黄芪总黄酮提取技术论文
黄芪总黄酮的提取技术【中图分类号】tq46 【文献标识码】a 【文章编号】1672-3783（2011）02-0167-01【摘要】优选黄芪总黄酮的提取工艺。
【关键词】黄酮;提取工艺酶技术应用于中草药有效成分的分离提取取得了不少新的成果，尤其应用纤维素酶可破坏细胞壁的致密结构，加速药用有效成分的溶出，提高药用有效成分的提取率。
酶解过程的实质是通过酶解反应促进传质过程。
纤维素酶是一组能够降解纤维素生成葡萄糖的酶的总称。
纤维素是黄芪细胞壁的主要成分，亦是胞内黄酮等大分子溶出的主要屏障，利用纤维素酶水解细胞壁，利于胞内成分溶出。
1 仪器与试剂1.1 仪器:hh-6恒温水浴锅（江苏金坛市宏华仪器厂）；re-52cs 旋转蒸发器(巩义市英峪予华仪器厂)；予华牌循环水真空泵(河南省巩义市英峪予华仪器厂)；uv1101紫外/可见分光光度仪(上海天美科学仪器有限公司)；ay120电子分析天平（日本岛津公司）；kh-400kdb型高功率数控超声清洗器（昆山禾创超声仪器有限公司）；摇摆式高速中药粉碎机(大德中药机械有限公司)。
1.2 试剂:乙醇（无水乙醇）；5%亚硝酸钠；10%硝酸铝；4%氢氧化钠；乙酸（冰醋酸）；无水乙酸钠；芦丁对照品（中国药品生物制品检定所，批号:050923）, 黄芪购自广州致信中药饮片有限公司，纤维素酶 (活性单位≥15 u／mg)由上海伯奥生物科技有限公司提供。
2 方法与结果2.1 黄芪总黄酮成分提取:称取纤维素酶8 mg，用ph=4.5的hac-naac缓冲液10 ml混合后与1g黄芪粉末（过50目筛）混合均匀，在30℃下处理1 h后加95％的乙醇20 ml，在70℃下浸提1 h过滤，用20 ml体积分数85％的乙醇洗涤残渣过滤，合并滤液，回收乙醇，残渣溶于质量分数为85%的乙醇，定容至25 ml，精密吸取1 ml于25 ml的容量瓶中，30%乙醇定容,得供试品溶液。
2.2 黄芪总黄酮含量的测定（1）芦丁对照品溶液的制备:准确称取于芦丁对照品10 mg, 置于50 ml 容量瓶中, 加30%的乙醇30 ml, 超声使之溶解, 冷却至室温, 并稀释至刻度, 摇匀, 得浓度为200 μg/ml 的芦丁对照品溶液, 冷藏, 备用。
超声波辅助提取黄芪中总黄酮最佳工艺
◎ 李泽民，秦晓芳，李 霞，田舒媛，张 妍，王 鑫 （天津天狮学院食品工程学院，天津 301700）
Li Zemin, Qin Xiaofang, Li Xia, Tian Shuyuan, Zhang Yan, Wang Xin (School of Food Engineering, Tianshi College, Tianjin 301700, China)
关键词：黄芪；黄酮；超声波法；正交法 Abstract：Ultrasonic assisted extraction of total flavonoids in Astragalus membranaceus was optimized by orthogonal experimental design. Methods： Based on the single factor experiment, the factors selected were ethanol concentration, extraction temperature, material-liquid ratio, extraction time, etc. The investigation indicators were based on the total flavonoid extraction rate. The orthogonal extraction method was used to optimize the optimal extraction conditions. Results： The best process conditions were： etanol volume fraction 60%, extraction temperature 60 ℃ , material-liquid ratio 1：25（g ∶ mL）, extraction time 40 minutes, and total flavonoid extraction rate 0.446%. Key words：Radix astragali; Flavonoids; Ultrasonic method; Orthogonal test 中图分类号：R284.2
多指标正交实验优选红芪总黄酮提取工艺的研究
多指标正交实验优选红芪总黄酮提取工艺的研究袁菊丽;余晓辉;黄钰芳;李杏花【摘要】运用正交设计法,以总黄酮的得率及其抗氧化能力为评价指标,考察提取次数、溶剂浓度、提取时间、料液比4个因素对红芪总黄酮提取工艺的影响;紫外吸收法测定红芪总黄酮的含量,DPPH法测定总黄酮的抗氧化能力.结果表明,红芪总黄酮的最佳提取工艺为:药材加8倍量的65％乙醇,回流提取3次,每次40 min.在此条件下红芪总黄酮的提取率25.04％,抗氧化能力最佳,DPPH自由基清除率53.55％.%Using orthogonal design method,with total flavonoids yield and the antioxidant capacity of strength as the evaluation index.The effects of extraction times,solvent concentration,extraction time,solid to liquid than the four factors of total flavonoids of Radix Hedysari extractioneffect;ultraviolet absorption method for the determination of the content of total flavonoids of Radix Hedysari,DPPH method determination of total flavonoids antioxidant capacity.Results showed that the optimum extraction process of total flavonoids of Radix Hedysari:herbs plus 8 times the amount of 65％ ethanol,extracting 3 times,each time 40 min.Under these conditions,the extraction yield of total flavonoids of Radix Hedysari was 25.04％,and the antioxidant capacity is the best,and the DPPH free radical clearance was 53.55％.【期刊名称】《应用化工》【年(卷),期】2017(046)005【总页数】3页(P928-930)【关键词】红芪;总黄酮;提取;抗氧化性;DPPH自由基【作者】袁菊丽;余晓辉;黄钰芳;李杏花【作者单位】甘肃中医药大学教学实验中心,甘肃兰州730000;甘肃省高校中藏药化学与质量研究省级重点实验室,甘肃兰州730000;甘肃中医药大学教学实验中心,甘肃兰州730000;甘肃中医药大学教学实验中心,甘肃兰州730000【正文语种】中文【中图分类】TQ460.6+1;TQ460.7+2红芪(Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz.)为豆科植物多序岩黄芪干燥根[1]，有升阳补气、止汗固表、消肿利水、生津养血、行滞通痹、托毒排脓、敛疮生肌的功能，为补气要药，临床多用于治疗气虚引起的各种病症[2]。
正交试验法优选拳参中总黄酮的提取工艺
关键词 ： 参 ； 交试验 ； 拳 正 总黄 酮 ； 中图 分 类 号 ： ２ ４ ２ Ｒ ８ ． 文献标识码 ： Ａ
文 章 编 号 ： ０ ４ ２ ０ （ ０ ９ ０ — １ ７０ １０ －４ ７ ２ ０ ）２００ —３
大 黄具 有泻 热通 肠 、 凉血 解毒 、 瘀通 经 、 逐 利胆 退
提取条 件 为 ： 芒 硝 外 其 余 药 材 先 于 ６ 除 ５℃ 浸 泡 ３ ０ ｍｉ， ０ ｎ １ ０℃水煎煮 ２ ｎ 加水量 为 １ ０ｍｉ， Ｏ倍 ， 煮 ３次 。 煎 ２ ３ 小批 量放 大试验 按 处 方 比例 称 取 药 材 ， 总 ． 其
质量分 别 约为 １ ２和 ３ｋ ， ｇ各 １份 ， Ａ Ｂ Ｃ 方 案 ， 按 。。 即除芒 硝 外其余 药 材先 于 ６ ５℃浸 泡 ３ ｎ 然后 水 ０ｍｉ ， 煎煮 ２ ｎ 加 水量 为 １ ０ｍｉ ， Ｏ倍 ， 煮 ３次后 ， 成 清胰 煎 制 Ⅱ号浓 缩液 ， 行 小 批 量 放 大考 察 性 试 验 ， ＨＰ Ｃ 进 用 Ｌ
检 测结 合 大黄 素 、 合 大 黄 酚 的含 量 ， 定 值 基 本 一 结 测 致 ； 明该 工艺 提取 率高 、 定可 行 。 证 稳
３ 讨 论
摘 要 ： 的 优 选 拳 参 总 黄 酮 的 提 取 工 艺 。 方 法 以 芦 丁 为 目 对 照 品 ， Ｃ 。 显 色 剂 ， 立 拳 参 中 总 黄 酮 提 取 的 含 量 测 定 ＡＩ１ 为 建 方 法 ， 后 采 用 正 交 试 验 Ｌ （ ， 总 黄 酮 得 率 为 指 标 ， 察 然 。３） 以 考 乙 醇体 积 分 数 、 取 时 间 、 取 次 数 、 液 比 ４个 因素 对 拳 参 提 提 料 中 总黄 酮 含 量 的 影 响 。结 果 通 过 对 正 交 试 验 进 行 极 差 、 方 差分析 ， 确定拳参 中总黄酮提 取的 最佳 工艺条件为加 １ Ｏ倍 量 体 积 分数 为 ５ 的 乙 醇 ， 流 提 取 ３次 ， 次 １ｈ ５ 回 每 。结 论 正 交试 验 表 明 乙醇 体 积 分 数 对 拳 参 中 总 黄 酮 的 得 率 有 显 著 影 响 ， 次 为 提 取 次数 、 取 时 间和 料 液 比 。该 提 取 工 艺 比较 简 其 提
正交设计优选黄芪总黄酮提取工艺
【摘 要】 目的： 探究黄芪总黄酮提取的最优工艺参数。方法： 基于单因素试验，以黄芪总黄酮提取率为评价指标， 通过 L9 （ 34 ） 正交试验法对影响黄芪总黄酮提取率的 4 个因素 （ 乙醇浓度、水浴温度、料液比和提取时间） 进行考察，优 选黄芪总黄酮提取工艺参数。结果： 黄芪总黄酮提取的最优工艺参数为乙醇浓度 90% 、水浴温度 80 ℃ 、料液比 1∶ 12 和提
工艺参数， 以 期 为 黄 芪 资 源 的 合 理 开 发 以 及 临 床 应用提供科学依据。
1 材料与方法
1. 1 试药 蒙古黄芪药材饮片 （ 山西浑源万生黄 芪开发有限公司） ； 芦丁对照品 （ 中国食品药品检 定研 究 院，批 号： 100080 － 201610 ） ； 95% 乙 醇、 氢氧化钠、硝酸铝、亚硝酸钠等试剂均为分析纯。 1. 2 仪器 电热鼓风干燥箱 （ GZX － 9070MBE， 上海博讯实业有限公司医疗设备厂） ； 中药材粉碎 机 （ FW177，天津市泰斯特仪器有限公司） ； 万分 之一天平 （ BSA224S － CW，赛多利斯科学仪器北 京有限公司） ； 数显恒温水浴锅 （ HH － 2，国华电
Key words： Ｒadix Astragali； Total Flavonoids； OrthogonalTest； Extraction Process
黄 芪 是 山 西 的 一 种 重 要 道 地 药 材，始 载 于 《神 农 本 草 经 》， 味 甘、 性 温， 具 有 补 气 固 表、 排 脓降压、提高机体免疫力等功效，素有 “十药八 芪” 之称［1］。黄酮类化合物是黄芪发挥功效的主 要物质基础和有效部位，可作为抗氧化剂在清除 活性氧 自 由 基、 抗 菌 消 炎、 延 缓 衰 老、 抗 过 敏 等 方面有着显著的药理活性，并已在临床防治老年 高血压、冠心病和视网膜出血等疾病方面有着广 泛的应用［2 － 3］。因此，优化黄芪总黄酮的提取工艺 对其药理学作用的深入探究意义重大。本研究分 别对乙醇浓度、水浴温度、料液比和提取时间 4 个 因素进行单 因 素 试 验， 确 定 四 因 素 三 水 平， 设 计 L9 （ 34 ） 正交试验，考察黄芪总黄酮提取的最优
黄芪总黄酮的提取技术
孙 华 云
【 献 标识 码 】 文 Ａ 【 章 编 号 】 ６ ２ ３８ （０ １０ －０ ６ －０ 文 】 ７ － ７ ３２ １ ）２ １７ １
【 图分 类 号］ＴＱ４ 中 ６
【 要 】 选 黄 芪 总黄 酮 的提 取 工 艺 。 摘 优 【 Βιβλιοθήκη 词】 酮； 取工 艺 关 黄 提
酶 技术 应 用 于 中草 药 有 效 成 分 的分 离 提 取 取 得 了 不 少 新 黄 芪 粉 末 （ ５ 过 ｏ目 筛 ） 合 均 匀 ， 别 在 ３ ， ５ ４ ，５ ５ ， 混 分 ｏ ３ ， ｏ ４ ，ｏ
５ ５ Ｏｍｌ在 Ｏ 的成 果 ， 其 应 用 纤维 素 酶 可 破 坏 细 胞 壁 的 致 密 结 构 ， 速 药 ５ ℃ 下 处 理 １ｈ后 加 ９ 的 乙醇 ２ ， ７ ℃ 下 浸 提 １ｈ 尤 加 用 有 效 成分 的溶 出 ， 高 药 用 有 效 成 分 的 提 取 率 。酶 解 过 程 过 滤 ， ２ 体 积 分 数 ８ 的 乙 醇 洗 涤 残 渣 过 滤 ， 并 滤 提 用 Ｏｍｌ ５ 合 的 实 质是 通 过 酶 解 反 应 促 进 传 质 过 程 。纤 维 素 酶是 一 组 能 够 液 ， 回收 乙醇 ， 渣 溶 于 质 量 分 数 为 ８ 的 乙 醇 ， 容 至 ２ 残 ５ 定 ５
正交试验优选黄芪主要有效成分的提取工艺
正交试验优选黄芪主要有效成分的提取工艺赵晓晓;孙丽娟;蔡宇【摘要】目的优选黄芪中主要有效成分的提取工艺.方法以黄芪多糖和黄芪甲苷的转移率为考察指标,选取加水量、提取时间、提取次数3个考察因素,采用L9(34)正交表进行试验优选提取工艺.结果最佳提取工艺为10倍量水加热回流提取2次,每次2h.结论经正交试验优选的提取工艺合理可行.%Objective To optimize the technology of extracting main active components from Astragalus membranaceus. Methods The transfer rates of Astragalus Polysaccharide and Astragaloside IV were taken as indexes, water addition, extracting time and frequency were selected as 3 factors for investigation and table L9(34) was used to conduct the orthogonal experiment. Results The best extraction technology is to extract for tiwce with 10 fold water solution, and 2 h for each time. Conclusion The extracting technology is reasonable and feasible.【期刊名称】《中国中医药信息杂志》【年(卷),期】2011(018)011【总页数】3页(P59-61)【关键词】正交试验;黄芪多糖;黄芪甲苷【作者】赵晓晓;孙丽娟;蔡宇【作者单位】暨南大学药学院,广东广州510632;深圳市泰康制药有限公司,广东深圳518110;暨南大学药学院,广东广州510632【正文语种】中文【中图分类】R283.5黄芪为豆科植物蒙古黄芪 Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根[1],味甘性温,入脾、肺二经,有补气升阳、固表止汗、利水消肿和生肌等功效[2]。
正交试验优选黄芪有效成分的提取工艺
正交试验优选黄芪有效成分的提取工艺目的：优选黄芪有效成分的提取工艺。
方法：采用正交试验L9（34）优化提取工艺，以乙醇体积分数醇度、乙醇溶剂用量、提取时间、提取次数为考察因素，以主要有效成分黄芪甲苷，毛蕊异黄酮葡萄糖苷的提取率为指标。
结果：最佳工艺为用10倍量80%乙醇，回流提取2次，每次1 h。
结论：优选的工艺稳定、合理，可用于黄芪有效成分的提取及质量控制方法标准。
标签：黄芪；黄芪甲苷；毛蕊异黄酮葡萄糖苷；正交试验；提取工艺黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.var.mongholicus（Bge.）Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.的干燥根，具有补气升阳、固表止汗、利水消肿、生津养血、行滞通痹、托毒排脓、敛疮生肌之功效，临床应用广泛，为常用补气中药，其有效成分具有明确的药效作用等[1-2]。
按中国药典2010年版一部规定的质量考察标准，需进行主要指标成分：黄芪甲苷，毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的测定[3]。
但相关测定研究方法仍存在一些不足[4]。
同时研究提高不同黄芪有效成分提取率的方法也在不断开展，如纤维素酶提取法、微波提取工艺法、超微粉碎提取方法等[5-7]。
在本项实验研究中笔者采用了正交试验法进行了相关研究并取得一定的研究结果，现介绍如下。
1 材料1.1 仪器Aglient 1200 HPLC-DAD液相色谱仪（美国安捷伦科技有限公司）；sartorius OSA-22电子分析天平；DZKW-4型电热恒温水浴锅等。
1.2 药材及试剂黄芪，购自北京，产地内蒙古，经鉴定为规定品种的中药饮片，符合中国药典2010年版一部规定[3]。
黄芪甲苷对照品（中国食品药品检定研究院，批号：110781-200613），毛蕊异黄酮葡萄糖苷（中国食品药品检定研究院，批号：101030-200510）；甲醇、乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。
正交设计法优选黄芪提取工艺研究
正交设计法优选黄芪提取工艺研究摘要：本研究利用正交设计法优选黄芪提取工艺，通过单因素试验确定了黄芪提取工艺的主要因素，然后使用正交设计法对主要因素进行优化，得到了较优的提取工艺。
结果表明，黄芪提取物的最佳工艺条件为：料液比为1:16、乙醇浓度为70%、提取时间为60min、提取温度为70℃。
在此条件下，黄芪提取物的总黄酮含量为1.07mg/g，比单因素试验提高了20.2%。
关键词：黄芪；提取工艺；正交设计法；总黄酮含量引言黄芪是一种常见的中药材，具有补气、益血、养阴等功效。
黄芪中含有丰富的总黄酮类化合物，对人体具有重要的保健作用。
因此，黄芪的提取工艺研究具有重要的意义。
在黄芪的提取过程中，提取工艺是影响提取物质量和品质的重要因素。
目前，常见的提取工艺包括超声波提取、微波提取、水提取、乙醇提取等。
但是，不同的提取工艺对提取物质量和品质的影响不同，因此需要通过实验确定最佳的提取工艺。
正交设计法是一种常用的实验设计方法，它可以同时考虑多个因素对实验结果的影响，从而确定最佳的实验条件。
因此，本研究利用正交设计法优选黄芪提取工艺，得到了较优的提取工艺。
材料与方法1. 实验材料黄芪（产地：四川省宜宾市），乙醇（优级纯，天津化学试剂厂），醋酸乙酯（优级纯，天津化学试剂厂），硫酸钠（优级纯，天津化学试剂厂），铝石蜡板（优级纯，国药集团化学试剂有限公司）。
2. 实验仪器超声波提取仪（KQ-500DE，科瑞仪器有限公司），离心机（TGL-16G，上海安必信仪器有限公司），恒温水浴锅（HH-4，上海凯莱仪器有限公司），紫外分光光度计（TU-1901，北京普尔生物技术有限公司）。
3. 实验方法3.1 单因素试验通过单因素试验确定黄芪提取工艺的主要因素，包括料液比、乙醇浓度、提取时间、提取温度。
3.2 正交设计试验使用正交设计法对主要因素进行优化，设计L9（3^4）正交表，共进行9次实验，利用紫外分光光度计测定黄芪提取物的总黄酮含量。
正交实验法从黄芩中提取总黄酮
正交实验优选黄芩中总黄酮的提取工艺林春莲（江西中医药大学330004）伍振峰（江西中医药大学重点实验室330004）中文摘要目的:优选黄芩中总黄酮的提取工艺并测定其含量。
方法：利用酶解法选取加液量、提取时间、提取次数为考察因素，通过L9（33）正交实验筛选最优提取工艺；采用紫外分光光度法，以芦丁为对照品测定黄芩中总黄酮的含量。
结果：优选得到的工艺条件为采用14倍量水提取两次，每次90分钟。
结论：优选的提取工艺简单、方便、提取率高，可达到实验要求。
关键词：正交实验 ; 黄芩; 总黄酮 ; 提取工艺 ; 紫外分光光度法AbstractPurpose: to optimizing extraction technology and determination of the content of total flavonoids in scutellaria baicalensis georgi. Methods: by using enzymatic hydrolysis and fluid volume, extraction time, extraction times to examine factors, through L9(33) orthogonal experiment to screen the optimal extraction ing ultraviolet spectrophotometry, with rutin as reference substance determination of the content of flavonoids in radix scutellariae. Results: the optimization of process conditions for the extraction of 14 times the amount of water used twice, 90 minutes at a time. Conclusion: the optimal extraction process is simple, convenient, high extraction yield and can meet the experimental equirements.Keywords:O orthogonal test; Rradix scutellariae ; Flavonoids ; Eextraction technology ; UV spectrophotometry前言黄芩是常用的中药,为唇形科植物黄芩(Scutellariae baicalensis)的干燥根，黄芩味苦性寒，具有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎等功效。
正交设计优选复方黄芪胶囊提取工艺
精宏实验设备有限公司) ꎻ５Ｌ / Ｈ５０ｗ 型超纯水机( 艾科浦重庆
颐洋企业发展有限公司) ꎻＴＣ￣１５ 套式回流提取恒温器( 海宁
市新华医疗器械厂) ꎮ
１ ２ 试药 黄芪甲苷对照品( 购自中国食品药品检定研究院
作者简介:方火花ꎬ女(１９８９ － ) ꎮ 毕业于福建医科大学本科ꎮ 职称:
药师ꎮ 从事医院药学工作ꎮ
黄芪甲苷含量为考察指标ꎬ采用高效液相￣蒸发光散射法检测黄芪甲苷含量优选提取工艺ꎮ 结果 优选出的水提复方黄芪胶囊最佳提取工艺
为:加 １２ 倍量的水ꎬ回流提取 １ｈꎬ提取 ３ 次ꎮ 结论 该方法优选出的水提复方黄芪胶囊的提取工艺简便易行ꎬ合理可行、提取效率高ꎬ适用于在
工业化生产中应用ꎮ
关键词:黄芪甲苷ꎻ正交试验ꎻ提取工艺ꎻ高效液相色谱
超纯水ꎻ甲醇、乙腈为色谱纯ꎻ各味药材( 福建省回春药业有
限公司) ꎮ
２ 方法与结果
２ １ 黄芪甲苷的测定
２ １ １ 色谱条件:ＬＣ￣２０Ａ 型高效液相色谱仪ꎻ色谱柱为 Ｘｔｉ￣
ｍａｔｅＣ１８ (４ ６ × ２５０ｍｍ) 色谱柱ꎻ流动相为乙腈￣水 ( ３２ ∶ ６８ꎬｖ /
ｖ) ꎻ柱温为 ４０℃ ꎻ流速为 １ ０ｍＬｍｉｎ － １ ꎻ进样量 ２０μＬꎻ检测器
海峡药学 ２０２０ 年 第 ３２ 卷 第 ２ 期
〔 Ｊ〕 中国合理用药探索ꎬ２０１７ꎬ１４(２) :１０￣１３ꎬ２７
国中药杂志ꎬ２０１７ꎬ４２(２４) :４６９５￣４６９９
〔５〕 胡明ꎬ邹龙ꎬ江星明ꎬ等 中药治疗骨质增生的研究进展〔 Ｊ〕 中医
〔８〕 杜易平ꎬ龚成明ꎬ李楠ꎬ等 穿山龙中薯蓣皂苷元的萃取与测定
药师?从事医院药学工作?复方黄芪胶囊主要由黄芪绿萍等六味药物组成?适用于日常辐射或是肿瘤中放疗化疗引起的白细胞下降免疫功能低下食欲不振神疲乏力头晕气短等症状?对肿瘤放射治疗中因辐射损伤造成的淋巴细胞微核率增高等有改善作用?常常用于辐射损伤?该方以黄芪为君药?黄芪为豆科植物蒙古黄芪astragalusmembranaceusfisch????bge????var????mongholicusbge????hsiao或膜荚黄芪astragalusmembranaceusfisch????bge????的干燥根1?其中黄芪甲苷为本方的主要活性成分?具有降压增强免疫力抗病毒抗癌及抗衰老等作用2?为了生产符合国家食品药品质量标准?保证临床用药疗效的稳定性?本文通过建立正交试验?以药物干浸膏得率和黄芪甲苷含量为参考指标?运用hplcelsd的检测方法?从而优选得出复方黄芪胶囊的最佳提取工艺?1仪器和试药1????1仪器lc20a型高效液相色谱仪日本岛津?al204型电子天平梅特勒托利多仪器上海有限公司?re2000b型旋转蒸发仪上海亚荣生化仪器厂?shz型循环水式真空泵上海亚荣生化仪器厂?kq2200e型超声波清洗器昆山市超声仪器有限公司?elsdlt型elsd检测器日本岛津?数显恒温油浴锅金坛市江南仪器厂?xtimatec184????6250mm色谱柱?dzf6050型真空干燥箱上海精宏实验设备有限公司?5lh50w型超纯水机艾科浦重庆颐洋企业发展有限公司?tc15套式回流提取恒温器海宁市新华医疗器械厂?1????2试药黄芪甲苷对照品购自中国食品药品检定研究院批号
正交设计优选黄芪总黄酮和总皂苷的提取工艺
正交设计优选黄芪总黄酮和总皂苷的提取工艺
王光忠;胡迪;陈敬炳
【期刊名称】《中成药》
【年(卷),期】2004(026)010
【摘要】黄芪为豆科植物膜荚黄芪Astragalus membranceus Bunge的干燥根，为常用中药，具有补气固表、利尿、排毒、敛疮生肌等作用。
黄芪所含成分复杂，但主要可分为三大类即黄酮类、皂苷类和多糖类。
具有增强免疫系统、抗氧化、延缓衰老、改善心功能状态、抗病毒、抗癌等功效。
对其有效成分提取工艺研究，多以多糖为主。
【总页数】2页(P附3-附4)
【作者】王光忠;胡迪;陈敬炳
【作者单位】湖北省中医药研究院,湖北,武汉,430074;湖北省中医药研究院,湖北,武汉,430074;湖北省中医药研究院,湖北,武汉,430074
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
1.正交设计法优选岗梅中总皂苷的提取工艺研究 [J], 周惠卿;余澄清;陈冰冰
2.正交设计优选鸡骨草总黄酮和总生物碱的提取工艺 [J], 程瑛琨;陈勇;王璐;李敏;
钟丽丽;滕利荣
3.正交设计优选黄芪总黄酮提取工艺 [J], 梁泰帅;赵肖琼;冯美
4.正交设计优选黄芪总黄酮和总皂苷的提取工艺 [J], 王光忠; 胡迪; 陈敬炳
5.正交设计优选大麻药总皂苷提取工艺 [J], 陈旅翼; 黄利豪; 兰洲; 刘鹏; 梅之南因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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正交试验法优化黄芪免疫增强颗粒剂的提取工艺郭亚群【摘要】[目的]观察正交试验法优化黄芪免疫增强颗粒剂水提取工艺的效果.[方法]以干膏得率和总黄酮提取率为指标,采用正交试验,以加水量、提取次数及提取时间为因素,优选最佳条件.[结果]加水量为8倍,提取3次,每次1.5h下提取干膏得率和总黄酮提取率最高.[结论]优选的提取工艺的干膏得率和总黄酮提取率较高.【期刊名称】《浙江中医药大学学报》【年(卷),期】2011(035)003【总页数】3页(P405-406,409)【关键词】黄芪;总黄酮;正交试验【作者】郭亚群【作者单位】浙江省东阳市中医院,东阳322100【正文语种】中文【中图分类】R282.711.1 仪器 TU-1800PC型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司),BP211D型分析天平(德国Sartorius公司),HH.W 21.CU 600型号水浴锅(上海医疗器械七厂),R502B型旋转蒸发仪(上海申生科技有限公司),D1810C型自动双重纯水整流器(上海申生生物技术有限公司),Waters600高效液相色谱仪;Waters600E四元泵;Waters2996 PDA检测器;Empower工作站(美国 Waters 公司)。
1.2 主要试剂及药品黄芪免疫增强颗粒剂(自制),淫羊藿苷(中国药品生物制品检定所,批号:110737-200312);水为双蒸水;所用试剂均为分析纯。
2.1 总黄酮含量测定方法的建立[1-4]2.1.1 对照品溶液的制备精密称取淫羊藿苷对照品10.0mg,置25m L容量瓶中,加甲醇溶解,并稀释至刻度,摇匀,即得(淫羊藿苷0.4mg·m L-1)。
2.1.2 样品溶液的制备取本品约2.0g,研细,精密称定,置具塞三角瓶中,精密加入无水乙醇25mL,超声提取30min,补足原重,摇匀,过滤,取续滤液,即得。
2.1.3 检测波长的选择精密量取上述对照品溶液0.6mL,置10mL容量瓶中,加0.1mol·L-1三氯化铝溶液1.0m L,混匀,加甲醇稀释至刻度,摇匀,于70℃恒温水浴中加热10min,取出后室温放冷。
正交试验设计优化黄芪总黄酮提取工艺
正交试验设计优化黄芪总黄酮提取工艺王婷; 陈港; 赵宝娥; 李思淼; 景明惠; 魏凤凤; 李欠【期刊名称】《《农业科技与信息》》【年(卷),期】2019(000)022【总页数】4页(P36-39)【关键词】黄芪; 总黄酮; 超声提取法; 正交试验【作者】王婷; 陈港; 赵宝娥; 李思淼; 景明惠; 魏凤凤; 李欠【作者单位】甘肃农业大学农学院甘肃兰州730070【正文语种】中文【中图分类】R284.2黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根，春、秋两季采挖，除去须根与根头，晒干。
黄芪味甘，微温，归脾、肾经。
具有举气升阳，固表止汗，利尿消肿，生津养血等功效[1]。
主要产地为甘肃陇西县、山西浑源县、陕西米脂县等。
以甘肃陇西的黄芪质量最佳，因此甘肃陇西县被誉为“中国黄芪之乡”。
黄芪中主要含有黄芪多糖和黄酮、皂苷三大类化学成分[2，3]。
黄酮类化合物的提取方法主要有醇提法、热水提取法和碱性水或碱性稀醇提取法[4-7]。
本研究以黄芪中总黄酮为质量控制指标，采用了紫外分光光度法测定了甘肃黄芪总黄酮的吸光度[8]，采用超声辅助提取，正交试验设计优化黄芪总黄酮的提取工艺[9-11]，研究不同的提取条件对黄芪中总黄酮提取工艺的影响，最终得到最优提取方案。
1 材料与仪器1.1 材料黄芪（购自兰州复兴厚药庄，产地甘肃）；芦丁标准品；无水乙醇、亚硝酸钠、氢氧化钠、硝酸铝等。
1.2 仪器电热恒温鼓风干燥箱（型号为GZX-GF101-4BS-II，上海跃进医疗器械有限公司）；电子天平（型号为HX203T，慈溪市天东衡器厂）；洁昇超声（深圳市得康科技有限公司）；飞穗牌小型粉碎机（上海嘉定粮油仪器有限公司）；调温型电热套（型号为PTHW，郑州科丰设备有限公司）；紫外可见分光光度计（UVBluestar 300424，北京莱伯泰科仪器有限公司）。
正交试验法优选黄芪中总黄酮提取工艺
正交试验法优选黄芪中总黄酮提取工艺赵琦;张军武【期刊名称】《云南中医学院学报》【年(卷),期】2012(35)1【摘要】Objective; Select the best condition for extraction process of total flavonoids from Radix Astragali. Method; Regard the total extract yield and the yield of total flavonoids as indicators, total flavonoids extraction conditions were optimized by using orthogonal test method. Four factors were examined by three levels; the a-mount of solvent ( A), ethanol concentration ( B ) , extraction time ( C), extraction frequency (D). Results: The best extraction process of total flavonoids from Radix Astragali by ethanol is A2B2C1D2, that is, it was extracted with 10 times the amount of 70% ethanol two times, 60min every time. Conclusion: The method can provide a stable basis for extraction process of total flavonoids from Radix Astragali.%目的:优选黄芪总黄酮的提取工艺条件.方法:采用正交试验法对黄芪总黄酮提取工艺条件进行优选,以总提物和总黄酮含量为指标,考察影响提取指标的4个因素,即溶媒用量(A),乙醇浓度(B),提取时间(C),提取次数(D);每个因素取3个水平.结果:用乙醇提取黄芪总黄酮的最佳工艺为A2B2C1D2,即用10倍量70％乙醇回流提取2次,每次60min.结论:此法稳定可行,可为黄芪总黄酮提取工艺的确定提供依据.【总页数】3页(P27-29)【作者】赵琦;张军武【作者单位】咸阳市卫生学校,陕西咸阳712000;陕西中医学院,陕西咸阳712046【正文语种】中文【中图分类】R284.2【相关文献】1.正交试验法优选罗汉松果实中总黄酮的提取工艺 [J], 黄凤音;甄丹丹;丘琴;潘翠柳;陈明伟;甄汉深;韦锦梅2.正交试验法优选狗尾草中总黄酮提取工艺研究 [J], 杨楠;韩国庆;高建萍;3.正交试验法优选狗尾草中总黄酮提取工艺研究 [J], 杨楠;韩国庆;高建萍4.正交试验法优选散痛风凝胶膏贴剂中总黄酮类成分提取工艺 [J], 司云珊;翟宏业;王玉;马力;耿琍5.正交试验法优选光明护眼凝胶膏贴剂中总黄酮类成分提取工艺 [J], 司云珊;翟宏业;王玉;马力;耿琍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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正交试验优选黄芪有效成分的提取工艺牟稷征;崔翰明;卢贺起【期刊名称】《中国医学创新》【年(卷),期】2013(000)029【摘要】Objective:To study extract technology for effective ingredient of Radix Astragali by Orthogonal Experiment,the purpose promotes mass detection method of Radix Astragali.Method:The extract technology were used Orthogonal Experiment by L9(34).The research factors were determined Alcohol concentration,Alcohol dosage,extract time and extract frequency.The effective ingredient of Radix Astragali were observed for AstragalosideⅣand Calyco sin Glucoside,which they were index for extraction rate.Result:The 10 volume times alcohol,80%concentration alcohol,2 recirculation times and one time of 1 hour were discovered for optimization technology. Conclusion:The extract condition be sure to stable and reasonable. That can be to make use of extraction in effective ingredient and quality control method for Radix Astragali.%目的：优选黄芪有效成分的提取工艺。
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Abstrcts： Cellulase enzymolysis assisted ethanol extraction of astragalus total flavonoids from Astragalus membranaceus was optimized in the paper． To observe and study this，the effects of factors including enzymatic content，enzymolysis time，solid-to-liquid ratio，ethanol concentration，extraction time，extraction temperature on the extraction rates of astragalus total flavonoids were explored by single-factor and orthogonal test． The results showed that solid-to-liquid ratio was the most critical factor affecting the extraction rate of astragalus total flavonoids，followed by ethanol concentration and extraction temperature，extraction time exhibited less effect on extraction rate of astragalus total flavonoids． The optimal extraction conditions were solid-to-liquid ratio of 30mL / g，ethanol concentration of 90% ，extraction temperature of 75℃ ，extraction time of 2． 5h after cellulase enzymolysis pretreatment in the conditions of enzymatic content of 7． 5μL / g，enzymolysis pH4． 0，enzymolysis temperature 55℃ ，enzymolysis time of 1． 5h，astragalus total flavonoids extraction was up to 0． 57% and improving 46． 15% compared with the traditional ethanol extraction of 0． 39% ．
其他 条 件 不 变，分 别 考 察 酶 解 时 间 依 次 为 0． 5、1． 0、1． 5、2． 0、2． 5h； 液固比为 10、15、20、25、 30、35mL / g； 乙 醇 浓 度 为 70、75、80、85、90、95% （ v / v） ； 提取时间为 0． 5、1． 0、1． 5、2． 0、2． 5h； 提取 温度为 60、65、70、75、80、85℃ 的不同条件下对黄 芪总黄酮提取率的影响，通过比较黄芪总黄酮提 取率 的 高 低 分 别 确 定 酶 解 时 间、液 固 比、乙 醇 浓 度、提取时间及提取温度的适宜范围。 1． 2． 6 正交试验设计
酶添加量的选择： 精密称取 4． 0g 黄芪粉，在 液固比 20mL / g，pH 值 4． 0，温度 55℃ ，酶解预处 理 1h，乙 醇 浓 度 80% ，提 取 时 间 1h，提 取 温 度 75℃ 的条件下，分别考察酶添加量 20、30、40、50、 60μL 对黄芪总黄酮提取率的影响。通过比较黄 芪总黄酮提取率的高低确定酶添加量的适宜范 围。
8
1． 2． 1 工艺流程
将自然晒干蒙古黄芪剪切成 2 ～ 3cm 左右的
小段放于 80℃ 热风烘箱中干燥后粉碎成黄芪粉
末。精密称取黄芪粉末约 4． 00g，加 20mL 乙酸 －
乙酸钠缓冲液，再加入一定量的纤维素酶，在 pH
值4． 2，温度 55℃ ，酶解预处理一段时间后，在不
同条件下，乙醇回流提取一段时间，过滤、用 80%
Байду номын сангаас
的乙醇洗涤残渣过滤、合并滤液、抽滤、回收乙醇，
滤液用相同体积的石油醚进行萃取，回收下层液，
pH 值调至 7． 0，用 30% 的乙醇定容 250mL，然后
取 2mL 样品 进 行 测 定，计 算 黄 芪 总 黄 酮 的 提 取
率。
1． 2． 2 芦丁标准曲线的绘制
精密 称 取 在 105℃ 干 燥 恒 重 的 芦 丁 对 照 品
XIE Lan-hua1 ，DU Bing1 ，YE Qiong-juan1 ，ZHANG Jia-yi1 ，YANG Tao2 ，YANG Gong-ming1 （ 1． College of Food，South China Agricultural University，Guangzhou 510642，China；
1 试验材料与方法
1． 1 试验材料与设备 蒙古黄芪（ 内蒙古乌兰察布市医药总公司中
一药业公司） ； 纤维素酶（ 酶活力≥6200TU / mg，诺 维信（ 中国） 生物技术有限公司） ； 芦丁标准品（ 广 州成硕试剂有限公司） ； 氢氧化钠、亚硝酸钠、无 水醋酸钠、硝酸铝、无水乙醇、石油醚，及冰醋酸， 均为分析纯。
正交试验优化酶法提取黄芪总黄酮工艺———谢蓝华，杜冰，叶琼娟，张嘉怡，杨涛，杨公明
正交试验优化酶法提取黄芪总黄酮工艺
谢蓝华1 ，杜 冰1 ，叶琼娟1 ，张嘉怡1 ，杨 涛2 ，杨公明1
( 1． 华南农业大学食品学院，广州 510642; 2． 广一中药材种植有限公司， 内蒙古 乌兰察布 012000)
平行测定，以吸光度 Y 为纵坐标，芦丁质量浓度 X （ μg / mL） 为横坐标，绘制标准曲线［15］。
1． 2． 3 黄芪总黄酮的测定
采用紫外分光光度法测定总黄酮含量，具体
操作如下： 取 2mL 样品溶液于 25 mL 容量瓶中，
分别加入 5% 亚硝酸钠溶液 0． 3 mL，摇匀，静置 6
min 后，加入 10% 硝酸铝溶液 0． 3mL，摇匀，静置
南农业大学食品学院，E-mail: gzdubing@ 163． com。
7
包装与食品机械 2013 年第 31 卷第 3 期
统的中药之一，主要分布于我国东北、华北和西北 等地，为国家三级保护植物，含有总黄酮、多糖、皂 甙、多种氨基酸、叶酸及铁、锰、锌、硒等微量元素， 具有补气固表、消除水肿、排除脓毒、促进新生组 织细胞增殖等功效［1］。现代医学研究表明，黄酮 是黄 芪 中 主 要 生 理 活 性 物 质 之 一，在 清 除 自 由 基［2］，防止生物膜过氧化作用［3］、抑菌抗病毒［4］、 保护心血管系统［5］、提高机体免疫力等方面具有 显著药理 功 效［6］，在 医 药、食 品 及 日 化 等 领 域 有 广阔的应用前景。
Key words： Radix astragali； total flavonoids； cellulase； ethanol extraction
黄芪，又名绵芪、绵黄芪，为豆科多年生草本 植物。蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，是我国传
收稿日期： 2012 － 12 － 12; 修稿日期： 2013 － 01 － 08 基金项目： 广东省科技计划农业攻关项目( 2012B020311006) 作者简介： 谢蓝华( 1987 － ) ，男，硕士，主要从事食品生物技术方面的研究。 通信作者： 杜冰( 1973 － ) ，男，副教授，主要从事食品生物技术方面的研究，通信地址: 510642 广东广州市天河区五山街五山路 483 号 华
目前，黄酮类物质的提取方法有碱水提取法、 有机溶剂提取法、微波辅助提取法、超声辅助提取 法、超临 界 CO2 萃 取 法、表 面 活 性 剂 法 等［7 － 12］。 生物酶法提取黄芪中的总黄酮是在传统的溶剂提 取方法的基础上，根据黄芪细胞壁的结构组成，利 用酶反应所具有的高度专一性等特点，选择纤维 素酶，将细胞壁的组成成分水解或是降解，破坏细 胞壁的结构，使有效成分充分暴露出来，溶解、混 悬于溶剂中，从而达到提高黄芪总黄酮提取率的 目的［13 － 14］。国内外有关纤维素酶解辅乙醇提取 黄芪总黄酮的研究报道较少，因此，本试验采用纤 维素酶解技术辅助乙醇浸提黄芪总黄酮，以黄芪 总黄酮提取率为参考指标，探求酶法预处理后对 黄芪总黄酮含量的影响，并优化提取工艺参数，为 黄芪总黄酮的提取工艺提供数据参考。
DF － 15 型流水式中药材粉碎机（ 温岭市大 德中药机械有限公司） ； Mettler-Toledo PL203 型电 子天平（ 梅特勒 － 托利多仪器上海有限公司） ； HH － 6 型数显恒温水浴锅（ 常州澳华仪器有限公 司） ； 752 － N 型紫外分光光度计（ 上海精密仪器 有限公司） ； PHS － 3C 型精密 pH 计（ 上海精密仪 器有限公司） ； SHZ － Ⅲ型循环水真空抽虑机（ 上 海亚荣生生化仪器厂） 。 1． 2 试验方法
25 mL 容量瓶中，分别加入 5% 亚硝酸钠溶液 0． 3
mL，摇匀，静置 6 min 后，加 入 10% 硝 酸 铝 溶 液
0． 3 mL，摇匀，静置 6 min，加入 1mol 氢氧化钠溶
液 4． 0mL，摇匀，分别用 30% 乙醇定容，摇匀，静
置 15 min，于 500 nm 波长处测定吸光度，做三个
w ———黄芪水分含量 / %
正交试验优化酶法提取黄芪总黄酮工艺———谢蓝华，杜冰，叶琼娟，张嘉怡，杨涛，杨公明
1． 2． 4 黄芪中水分含量的测定 采用 GB / T5009． 3 － 2003《食品中水分的测