AKR1家族基因AKR1C1,AKR1C3,AKR1B1调控肺腺癌A549细胞顺铂耐药的研究
醛酮还原酶AKR1C3介导乳腺癌阿霉素耐药的作用及其机制
乳腺癌（breast cancer，BC）是女性中最常见的 肿瘤［1-2］。其治疗方案包括手术切除、化疗、放疗和
联合治疗［3］。化疗的耐药性一直是困扰 BC 患者临 床治疗的难题［4］。阿霉素（doxorubicin，DOX）是被
收稿日期 2021-03-05 * 通信作者 Tel：13851847586 E-mail：zhaoli@cpu. edu. cn 基金项目 国家自然科学基金资助项目（No. 81830105）
1. 2 仪 器 正置荧光显微镜（德国 Leica 公司）；化学发光
成像仪（上海天能科技有限公司）；多功能酶标仪， PCR 扩增仪（美国 Thermo 公司）。 1. 3 细胞株
人 乳 腺 癌 细 胞 MCF-7（中 国 科 学 院 上 海 细 胞所）。
2方法
2. 1 细胞培养 将 MCF-7 细 胞 接 种 于 含 10% FBS，1% 青 霉
AKR1C3在恶性肿瘤及抗肿瘤药物中的研究进展
AKR1C3 还 与 除 前 列 腺 癌 之 外 的 其 他 癌 症 有 着 紧 密 的 联 系。 有 研 究 为 判 断 AKR1C3 基 因 在 胃 癌 组 织 中 的 表 达 水 平，通 过对新鲜胃癌组织样本和其癌旁组织进行蛋白免疫印迹分析和 对 137 例胃癌样本经过免疫组化实验验证得出结论：胃癌组织中 的 AKR1C3 转录本和蛋白水平较其邻近的正常组织明显降低，且 AKR1C3 的表达与胃癌临床病理特征和胃癌患者的预后密切相 关 [8]。Tiryakioglu NO 等研究证实：携带有 AKR1C3 基因 rs12529
世界最新医学信息文摘 2019 年第 19 卷第 37 期
127
·综述·
AKR1C3 在恶性肿瘤及抗肿瘤药物中的研究进展
方亚妮
（陕西中医药大学，陕西 咸阳）
摘要：醛酮还原酶超家族 AKR1 家族是一类可将人体细胞内具有强突变剂作用的醛或酮等分子还原为醇的蛋白质总称。AKR1C3 是 AKR1 家 族成员中的一员，可合成非常重要的类固醇激素合成酶。近来年许多研究发现 AKR1C3 与许多恶性肿瘤的发生发展密切相关，且其参与了调 控多种抗肿瘤药物敏感性的机制中去，故本文将对近几年来 AKR1C3 基因与恶性肿瘤和抗肿瘤药物的相关研究作一综述。 关键词：醛酮还原酶家族；AKR1C3；癌症；抗肿瘤药物 中图分类号：R73 文献标识码：A DOI: 10.19613/ki.1671-3141.2019.37.060 本文引用格式：方亚妮 . AKR1C3 在恶性肿瘤及抗肿瘤药物中的研究进展 [J]. 世界最新医学信息文摘 ,2019,19(37):127,129.
0 引言
醛 酮 还 原 酶 超 家 族（Aldo-Keto reductase superfamily, AKR） 是 以 还 原 型 辅 酶 Ⅱ（NADPH）为 辅 酶 的 一 类 可 将 人 体 细 胞 内 具 有强突变剂作用的醛或酮等分子还原为醇的蛋白质总称。醛酮 还 原 酶 超 家 族 包 含 了 现 已 知 的 超 过 40 个 酶 或 蛋 白 质，而 AKR1 基 因 家 族 是 其 中 一 个 分 支，包 含 有 10 个 基 因。AKR1 家 族 成 员 AKR1C1-C4 的 同 源 性 超 过 86%, AKR1C4 主 要 在 肝 脏 表 达，而 1C2 和 1C3 主要在前列腺和乳腺表达。
苯甲酰胺类化合物的应用及其药物的生产技术
本技术公开了一种苯甲酰胺类化合物的新用途。
具体而言，本技术中的4(3,5二甲氧基苯甲酰)N(4羟基5异丙基2甲基苯基)苯酰胺具备AKR1B10抑制剂的功能，同时对AKR1B1具有较好的抑制活性，可以用于制备与AKR1B10相关的抗癌药物。
权利要求书1.一种苯甲酰胺类化合物的应用，其特征在于，所述苯甲酰胺类化合物为4-(3,5-二甲氧基苯甲酰)-N-(4-羟基-5-异丙基-2-甲基苯基)苯酰胺，该化合物或其可药用盐在制备用于预防和/或治疗与AKR1B10和AKR1B1中的一种或两种相关的肿瘤细胞的增殖和抗凋亡过程中的癌症疾病的药物中的应用，其中4-(3,5-二甲氧基苯甲酰)-N-(4-羟基-5-异丙基-2-甲基苯基)苯酰胺的结构式如下：2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述可药用盐为4-(3,5-二甲氧基苯甲酰)-N-(4-羟基-5-异丙基-2-甲基苯基)苯酰胺与无机酸和有机酸中的一种或两种以上形成的药学上可接受的盐，该盐为酸加成盐。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述无机酸包括盐酸、磷酸和硫酸。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述有机酸包括醋酸、马来酸、枸橼酸、苯磺酸、甲基苯磺酸、富马酸和酒石酸。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述与AKR1B10和AKR1B1中的一种或两种相关的肿瘤细胞包括鳞状细胞肺癌、胰腺癌、早期肝癌、子宫癌、胆管癌、胰腺癌、胃癌和食管癌。
6.一种预防和/或治疗AKR1B10和AKR1B1中的一种或两种相关的癌症的药物，其特征在于，该药物的有效成分为权利要求1或2中所述4-(3,5-二甲氧基苯甲酰)-N-(4-羟基-5-异丙基-2-甲基苯基)苯酰胺或其药学上可接受的盐的一种或两种以上。
技术说明书一种苯甲酰胺类化合物的应用及其药物技术领域本技术属于医药技术领域，涉及一种小分子化合物的医药应用，具体涉及4-(3,5-二甲氧基苯甲酰)-N-(4-羟基-5-异丙基-2-甲基苯基)苯酰胺或其可药用盐在制备用于治疗与AKR1B10相关的癌症疾病的药物，特别是AKR1B10抑制剂中的用途。
AKR1C3在恶性肿瘤及抗肿瘤药物中的研究进展
近年来有研究证实，AKR1C3 与一些癌症患者对放疗的耐受 有着密切的关系。Sun SQ 等研究指出 AKR1C3 的过表达可通过 激活细胞增殖通路 MAPK 信号通路，使得前列腺癌患者对放疗的 敏 感 性 降 低 [12]。 同 样 的，在 食 管 癌 对 放 疗 耐 受 的 细 胞 中 也 发 现 有 AKR1C3 基因的过表达现象。AKR1C3 还被证明与一些抗肿 瘤药物的耐药性相关。Shiiba 团队的研究表明，AKR1C3 与顺铂 和 5- 氟尿嘧啶这两种化疗药物的耐药性相关 [13]。而 Matsunaga T 的实验结果则证实，基于 siRNA 技术，下调 AKR1C3 表达同样 显著提高了结直肠癌细胞 HCT-15 对顺铂的药物敏感性 [14]。另 外，AKR1C3 基因的过表达还可以引起肿瘤细胞对蒽环类药物的 耐药 [15]。Liu C 等研究证明前列腺癌患者对于阿比特龙这种内 分泌药物产生耐药的主要机制是由 AKR1C3 激活雄激素合成信 号通路从而引起的患者体内雄激素合成增强所致 [16]。甄明慧等 通过 shRNA 沉默前列腺癌 PC3 细胞的 AKR1C3 基因表达证实：
AKR1C3 基因是 AKR1 基因家族的一员，AKR1C3 在体外既 可 以 催 化 氧 化 反 应，也 可 以 催 化 还 原 反 应，但 由 于 它 与 细 胞 主 要 的还原剂 NADPH 具有纳米级的亲和力，所以在体内主要是一种 还原性酶。AKR1C3 基因首先在人类的前列腺和胎盘 cDNA 文 库中被克隆，后被证实 ARK1C3 基因编码的酶可以催化前列腺素 D2 (PGD2)、PGH2 和 PQ 的 还 原 [1]，可 将 强 效 雄 激 素 5α- 双 氢 睾 酮形成弱雄激素 17β- 二醇、雄甾酮和雄烯二酮 , 同时可调控雄激 素受体的配体活性，是一种非常重要的类固醇激素合成酶 [2]。并 且 AKR1C3 在核受体通路中扮演着非常重要的角色，它可调控诸 如雌激素受体（ER），雄激素受体（AR）等与其相应的配体结合 [3]。 由于 AKR1C3 是一种类固醇激素合成酶，所以在一些与激素相关 的癌症细胞中，AKR1C3 均存在异常表达的现象，特别是前列腺 癌 [4]。但在近几年的研究中，也有一些关于 ARK1C3 在非激素相 关的癌症中异常表达，或是与一些癌症耐药性相关的报道，这些研 究结果为癌症患者的治疗提供了新的理论基础，所以，本研究将对 AKR1C3 进几年来与癌症相关的研究做一综述。
放射抗拒的肺腺癌A549细胞端粒酶活性与放射敏感性的关系
０ ． ０ １ ） 。５组 细胞的放射敏感性随着放射剂量 的增高而逐渐 降低 。Ａ ５ ４ ９组、 Ａ ５ ４ ９ — ２组 、 Ａ ５ ４ ９ － ４组 、 Ａ ５ ４ ９ —
８组 的端粒酶活性 与其 放射敏感性呈负相关 （ Ｐ＜０ ． ０ １ ） ， 以上 ４组 ｈ Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ ｍＲ Ｎ Ａ的相 对表达含量与放射 敏感性呈负 相关 （ Ｐ＜ ０ ． Ｏ １ ） 。 结论
第５ １ 卷
２１ ４
第 ３期
哈尔滨 医科大学学报
Ｊ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＨＡＲＢ Ｉ Ｎ ＭＥＤＩ ＣＡＬ ＵＮＩ ＶＥＲＳ Ｉ ＴＹ
Ｖｏ １ ． ５１ ． Ｎｏ ． ３
２ ０ １ ７年 ６月
Ｊ ｕ ｎ．，２ ０１ ７
放 射 抗 拒 的肺 腺 癌 Ａ ５ ４ ９细胞 端 粒 酶 活性 与 放 射 敏 感 性 的关 系
的相对表达含量 ， 克 隆形 成 实验 检测其 放 射敏 感性 。 结果 经过不 同剂量 照射 后 的 Ａ ５ ４ ９组 ， Ａ ５ ４ ９ — ２
组， Ａ ５ ４ ９ － ４组 ， Ａ ５ ４ ９ ． ８组 的 端粒 酶 活 性 分 别 为 １ ． １ ３ ０±０ ． ０ ２ ３ ， １ ． ３ ０ ３±０ ． ０ ４ ８ ， １ ． ６ ２ ０±０ ． ０ ２ ６ ， １ ． ９ ５ ３± ０ ． ０ ６ ３ ， ４组 间的差 异具 有 统计 学 意 义 （ Ｐ＜０ ． ０ ５） ， 但 Ａ ５ ４ ９ — １ ２组 的端 粒酶 活 性 明显 降 低 ， 为 ０ ． ９ ７ ０± ０ ． ４２ ０ ， 与以上 ４组 的端 粒 酶 活性 差 异 具 有 统计 学 意义 （ Ｐ＜０ ． ０ ５） 。Ａ ５ ４ ９组 、 Ａ ５ ４ ９ － ２组 、 Ａ ５ ４ ９ － ４组 、 Ａ ５ ４ ９ — ８组 的 ｈ Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ ｍ Ｒ Ｎ Ａ的相对表达含量分别 为 ０ ． ４ １ ±０ ． ０ ２ ， ０ ． ５ ６± ０ ． ０ ４， ０ ． ６ ９± ０ ． ０ ３ ， ０ ． ８ ２± ０ ． ０ ５ ， 表 达含量 明显 升高 ， 且 ４组 间的差异具有 统计 学意义 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） ； 但 Ａ ５ ４ ９ — １ ２组 的 ｈ Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ ｍ Ｒ Ｎ Ａ的相 对表 达含量 明显 降低 ， 为０ ． ２ ３±０ ． ０ ２ ， 与 以上 ４组 ｈ Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 的相 对 表达 含 量 具 有 统计 学 意 义 （ Ｐ＜
akr1c1在恶性肿瘤中的研究进展
临床与实验病理学杂志 ＪＣｌｉｎＥｘｐＰａｔｈｏｌ ２０１９Ａｕｇ；３５（８）
网络出版时间：２０１９－８－１６１５：０７ 网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０７３．Ｒ．２０１９０８１６．１５０６．０１３．ｈｔｍｌ
·综 述·
ＡＫＲ１Ｃ１在恶性肿瘤中的研究进展
接受日期：２０１９－０５－１８ 基金项目：广西卫计委科研项目（Ｚ２０１８０１０３） 作者单位：１桂林医学院第二附属医院病理科，桂林 ５４１１９９
２桂林医学院研究生学院，桂林 ５４１００４ 作者简介：周 晨，女，硕士研究生。Ｅｍａｉｌ：４４３６０１０６５＠ｑｑ．ｃｏｍ
肖胜军，男，教授，博士生导师，通讯作者。Ｅｍａｉｌ：ｘｉａｏｓｈ ｅｎｇｊｕｎ＠ｇｌｍｃ．ｅｄｕ．ｃｎ
周 晨１，２，肖胜军１
摘要：人 ２０α羟基类固醇脱氢酶（ａｌｄｏｋｅｔｏｒｅｄｕｃｔａｓｅｆａｍｉｌｙ１ ｍｅｍｂｅｒＣ１，ＡＫＲ１Ｃ１）是 醛 酮 还 原 酶 （ａｌｄｏｋｅｔｏｒｅｄｕｃｔａｓｅ， ＡＫＲｓ）超家族成员之一。ＡＫＲ１Ｃ１的功能：（１）调节雄激素、 雌激素和孕激素的代谢，参与多种生理功能，与类固醇激素 依赖型恶性肿瘤密切相关；（２）ＡＫＲ１Ｃ１的过表达可降低化 疗的敏感性，增加化疗耐药性，是导致化疗失败的主要原因。 近年有研究已证实 ＡＫＲ１Ｃ１对肿瘤的侵袭、转移、化疗药物 耐药有着重要的作用。因此，分析 ＡＫＲ１Ｃ１对肿瘤发生、发 展的分子机制及靶向治疗有重要意义。该文针对 ＡＫＲ１Ｃ１ 在恶性肿瘤中的研究进展作一综述。 关键词：肿瘤；ＡＫＲ１Ｃ１；ＡＫＲｓ；研究进展；文献综述 中图分类号：Ｒ７３０ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００１－７３９９（２０１９）０８－０９３８－０３ ｄｏｉ：１０．１３３１５／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｊｃｅｐ．２０１９．０８．０１３
AKR1B10基因与肿瘤关系的研究进展
AKR1B10基因与肿瘤关系的研究进展AKR1B10在肺癌、肝癌、乳腺癌等肿瘤中高表达，促进肿瘤的生长并产生耐药性。
通过抑制AKR1B10可以抑制肿瘤的生长，并增加肿瘤对化疗药物的敏感性。
标签：AKR1B10 醛糖还原酶；耐药性1 AKR1B10简介AKR1B10又叫做醛糖还原酶相似蛋白-1（ARL-1），小肠还原酶表达显著的增高了5-30倍，可能是因为参与了与烟草相关的多环芳烃及其有害代谢产物的清除。
2.2肝癌:AKR1B10是一种新型的鉴定人肝细胞癌（HCC）的蛋白。
AKR 在大鼠肝癌中诱导产生，并认为它可能对快速增长的癌细胞产生的有害的代谢产物有至关重要的解毒作用。
大鼠肝癌诱导的一个叫Spot17的蛋白，它与大鼠AKR具有高度同源性，大约29 ％的肝癌过度表达AKR，这其中的约54 ％是过度表达的AKR1B10。
2.3AKR1B10基因沉默对大肠癌细胞的生长抑制作用:异位表达在293T细胞的AKR1B10有促进细胞增殖的作用。
用化学合成的siRNA，敲除在大肠癌细胞HCT-8表达的AKR1B10基因。
针对编码区的siRNA1，使AKR1B10的表达下调到60％以上，针对3’ 端非编码区的siRNA2 ，AKR1B10的表达减少95％以上。
AKR1B10使细胞的生长率减少大约50％和抑制将近40％的DNA合成。
更重要的是，AKR1B10下调大大降低半固体培养基中细胞灶的形成率和集落的大小，这表明AKR1B10在HCT-8细胞增殖中起着关键作用。
AKR1B10下调增强了HCT-8细胞对丙烯醛和丁烯醛的易感性，从而导致细胞迅速肿胀死亡。
2.4乳腺癌:AKR1B10在乳腺癌上皮细胞磷脂醛信号: 磷脂的氧化会产生一些生物活性醛，诱导内皮细胞产生单核细胞趋化因子和提高单核细胞内皮细胞粘附。
它们还充当清道夫配体受体，摄取氧化脂蛋白或凋亡细胞，参与磷脂醛代谢的生化途径。
虽然磷脂醛显示低毒性，但由于其独特的结构特征，可触发特定的信号通路。
akr1b10基因沉默对肝癌细胞增殖和凋亡的影响
７９８
临床肝胆病杂志第 卷第期 年月 ， ， ３６ ４ ２０２０ ４ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｈｅｐａｔｏｌ Ｖｏｌ．３６ Ｎｏ．４ Ａｐｒ．２０２０
： Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ Ａｌｄｏ － ｋｅｔｏ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ ｆａｍｉｌｙ １ ｍｅｍｂｅｒ
（ ） （ ） Ｂ１０ ＡＫＲ１Ｂ１０ ｉｎ ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ＨＣＣ ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ＣＣＬＥ ｄａｔａｂａｓｅ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｍＲＮＡ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ
ＡＫＲ１Ｂ１０ ｉｎ ｎｏｒｍａｌ ｌｉｖｅｒ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ＨＣＣ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ． Ｔｈｅ ＵＡＬＣＡＮ ａｎｄ Ｏｎｃｏｍｉｎｅ ｄａｔａｂａｓｅｓ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｍＲＮＡ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ
ＡＫＲ１Ｂ１０ ｉｎ ＨＣＣ ｔｉｓｓｕｅ ａｎｄ ａｄｊａｃｅｎｔ ｔｉｓｓｕｅ． Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＫＲ１Ｂ１０ ｂｅ
， ｔｗｅｅｎ ＨＣＣ ｔｉｓｓｕｅ ａｎｄ ａｄｊａｃｅｎｔ ｔｉｓｓｕｅ． ＡＫＲ１Ｂ１０ ｉｎ ＨｅｐＧ２ ａｎｄ Ｈｕｈ７ ｃｅｌｌｓ ｗａｓ ｋｎｏｃｋｅｄ ｄｏｗｎ ｂｙ ｌｅｎｔｉｖｉｒｕｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ （ ） ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ＡＫＲ１Ｂ１０ ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ ｇｒｏｕｐ ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｆｕｒｔｈｅｒ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｓｈＡＫＲ１Ｂ１０ １＃ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｓｈＡＫＲ１Ｂ１０ ２＃ ｇｒｏｕｐ ． ＡｎｎｅｘｉｎＶ － ， ， ＡＰＣ ／ ＰＩ ｄｏｕｂｌｅ ｓｔａｉｎｉｎｇ ｃｏｌｏｎｙ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ａｓｓａｙ ａｎｄ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｘｅｎｏｇｒａｆｔ ｔｕｍｏｒ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｏｆ ＨＣＣ ， ， ｃｅｌｌｓ ｃｏｌｏｎｙ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅ ｉｎ ｔｈｅ ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｘｅｎｏｇｒａｆｔ ｔｕｍｏｒ ａｆｔｅｒ ＡＫＲ１Ｂ１０ ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ． Ｔｈｅ ｐｅｒｏｘｉｄｅ － ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ， ， ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｐｒｏｂｅ ＤＣＦＨ － ＤＡ ａｎｄ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｍｅａｓｕｒｅ ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ＲＯＳ ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｓｕｃｈ ａｓ ｐ － ＡＴＭｓｅｒ１９８１ γ － ， ， Ｈ２ＡＸ ｃ － Ｃａｓｐａｓｅ － ３ ａｎｄ ｃ － ＲＡＲＰ ｉｎ ＨＣＣ ｃｅｌｌｓ． Ａ ｏｎｅ － ｗａｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｖａｒｉａｎｃｅ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ ｄａｔａ ｂｅｔｗｅｅｎ ， ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｇｒｏｕｐｓ ａｎｄ ｔｈｅ ＳＮＫ － ｑ ｔｅｓｔ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｆｕｒｔｈｅｒ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ． Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ＣＣＬＥ ｄａｔａｂａｓｅ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ； ｍＲＮＡ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＫＲ１Ｂ１０ ｉｎ ＨＣＣ ｃｅｌｌｓ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｎｏｒｍａｌ ｌｉｖｅｒ ｃｅｌｌｓ ｔｈｅ Ｏｎｃｏｍｉｎｅ ｄａｔａｂａｓｅ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｔｈａｔ ； ｔｈｅ ｍＲＮＡ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＫＲ１Ｂ１０ ｉｎ ＨＣＣ ｔｉｓｓｕｅ ｗａｓ ｍｏｒｅ ｔｈａｎ １０ ｔｉｍｅｓ ｔｈａｔ ｉｎ ａｄｊａｃｅｎｔ ｔｉｓｓｕｅ ｔｈｅ ＵＡＬＣＡＮ ｄａｔａｂａｓｅ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ， ＡＫＲ１Ｂ１０ ｇｅｎｅ ｗａｓ ｈｉｇｈｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ＨＣＣ ｔｉｓｓｕｅ． Ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｉｘ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＫＲ１Ｂ１０ ｉｎ ＨＣＣ ｔｉｓｓｕｅ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉ ， ｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ａｄｊａｃｅｎｔ ｔｉｓｓｕｅ． Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ｔｈｅ ＡＫＲ１Ｂ１０ ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ ｇｒｏｕｐ ｈａｄ ａ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ （ ） （ ） ｔｈｅ ｃｏｌｏｎｙ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ＨＣＣ ｃｅｌｌｓ Ｐ ＜ ０． ００１ ａｎｄ ａ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｉｎ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｒａｔｅ Ｐ ＜ ０． ００１ ． Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ， ， ��
akr1b1分子量
akr1b1分子量
AKR1B1是一种醛糖还原酶，其分子量约为36 kDa。
醛糖还原酶是一种参与糖代谢的酶类，主要参与多种生物化学过程，包括糖尿病的发展。
AKR1B1在糖尿病的发展中起着重要作用，因此对其分子量的研究具有重要意义。
从化学角度来看，分子量是指一个分子的质量，通常以dalton （Da）为单位。
AKR1B1的分子量约为36 kDa，这意味着一个
AKR1B1蛋白分子的质量大约为36,000 dalton。
这个数值对于研究人员来说是非常重要的，因为它有助于确定蛋白质的结构和功能。
另外，从生物学角度来看，分子量也与蛋白质的功能和相互作用有关。
在细胞中，AKR1B1的分子量决定了它在细胞内的定位、与其他蛋白质的相互作用等。
因此，了解AKR1B1的分子量有助于理解其在细胞内的生物学功能。
总的来说，AKR1B1的分子量约为36 kDa，这个数值对于研究人员来说具有重要意义，有助于他们更好地理解这种蛋白质在生物学和疾病发展中的作用。
IGF-1经AKT通路对人肺癌A549细胞增殖、侵袭与转移的影响
蛋白( Ｅ￣ｃａｄｈｅｒｉｎ) 蛋白表达ꎮ 结果 与对照组相比ꎬＩＧＦ￣１ 组可明显促进细胞增殖ꎬ加速细胞迁移与侵袭ꎬ并伴有 ｐ￣ＡＫＴ、ＭＭＰ￣
２、ＭＤＭ２ 蛋白表达增加及 Ｅ￣ｃａｄｈｅｒｉｎ 蛋白表达降低( Ｐ<０ ０５) ꎻＡＫＴ 通路特异性抑制剂 ＬＹ２９４００２ 可显著抑制上述作用ꎮ 结论
血清的 ＲＰＭＩ１６４０ 培养基中ꎬ３７℃ 、５％ ＣＯ２ 常规培养
将细胞随机分成对照组、 ＬＹ２９４００２ 组、 ＩＧＦ￣１ 组和
ＩＧＦ￣１ ＋ ＬＹ２９４００２ 组ꎮ ＩＧＦ￣１ 及 ＡＫＴ 抑 制 剂
ＬＹ２９４００２ 终浓度分别 ２００ ｎｇ / ｍｌ、２０ μｍｏｌ / Ｌꎮ 每组
至少重复 ３ 次ꎬ培养 ４８ ｈ 后检测ꎮ
刘思嘉等 ＩＧＦ￣１ 经 ＡＫＴ 通路对人肺癌 Ａ５４９ 细胞增殖、侵袭与转移的影响 第 １３ 期
２８４９
ＩＧＦ￣１ 经 ＡＫＴ 通路对人肺癌 Ａ５４９ 细胞增殖、侵袭与转移的影响
刘思嘉１ 刘析璘１ 黄婷１ 兰蕙１ 叶丽平１ꎬ２
( 锦州医科大学 １ 病理生理学教研室ꎬ辽宁 锦州 １２１００１ꎻ２ 生物人类学研究所)
ＩＧＦ￣１( ａｂｂｋｉｎｅ) ꎻＬＹ２９４００２( ＭＣＥ) ꎮ
１ ３ 细胞培养及分组 Ａ５４９ 细胞在含 １０％ 胎牛
ꎮ
传代ꎮ 细胞融合至 ７０％ ~ ８０％ 时无血清饥饿过夜ꎮ
膜ꎬ与 新 生 血 管 生 成、 肿 瘤 发 生 发 展 密 切 相 关
〔４〕
上皮型钙黏附蛋白( Ｅ￣ｃａｄｈｅｒｉｎ) ꎬ主要维持上皮细
AKR1B抑制剂在制备治疗肺癌药物中的应用[发明专利]
![AKR1B抑制剂在制备治疗肺癌药物中的应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/9ebc60ba690203d8ce2f0066f5335a8102d266de.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010498449.0(22)申请日 2020.06.04(71)申请人 上海交通大学医学院地址 200025 上海市黄浦区重庆南路280号(72)发明人 朱亮 张可人 陈红专 雷绘敏 唐亚斌 张雨霏 沈瑛 马春爽 吕倩明 (74)专利代理机构 上海盈盛知识产权代理事务所(普通合伙) 31294代理人 孙佳胤(51)Int.Cl.A61K 45/06(2006.01)A61K 31/4188(2006.01)A61K 31/517(2006.01)A61K 31/5377(2006.01)A61K 31/426(2006.01)A61K 31/506(2006.01)A61P 35/00(2006.01)A61P 35/04(2006.01)(54)发明名称AKR1B抑制剂在制备治疗肺癌药物中的应用(57)摘要本发明提供了AKR1B抑制剂在制备治疗肺癌药物中的应用，所述AKR1B抑制剂包括索比尼尔或依帕司他。
本发明首次发现AKR1B抑制剂能够显著抑制肺癌细胞增强的迁移能力和干性特征，抑制肺癌细胞的增殖能力和细胞活力，联合肺癌的靶向药物(厄洛替尼、吉非替尼或奥希替尼等)使用均能显著抑制耐药复发现象的产生。
更重要的是，AKR1B抑制剂中依帕司他已为上市药物，临床用于治疗糖尿病并发症，本发明首次发现依帕司可老药新用于治疗肺癌以及预防耐药，将使更多肺癌患者获益。
权利要求书1页 说明书8页 附图4页CN 111671906 A 2020.09.18C N 111671906A1.AKR1B抑制剂在制备治疗肺癌药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的AKR1B抑制剂在制备治疗肺癌药物中的应用，其特征在于，所述肺癌包括小细胞肺癌和非小细胞肺癌。
3.根据权利要求1所述的AKR1B抑制剂在制备治疗肺癌药物中的应用，其特征在于，所述AKR1B抑制剂包括索比尼尔或依帕司他。
K-ras反义核酸抑制肺腺癌细胞A549的生长
K-ras反义核酸抑制肺腺癌细胞A549的生长李尊岭;邵淑红;焦飞;岳真;李有杰【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2011(027)011【摘要】目的:探讨K-ras反义核酸抑制肺癌生长的机制.方法:应用Western blotting检测K-ras基因在6例肺腺癌标本和A549细胞中的表达;构建K-ras基因的反义表达载体(命名为antisense-K-ras-pcDNA3.1),转染后,MTT法测细胞的生长曲线,Annexin V检测细胞凋亡;Western blotting检测cyclin A、cyclin D1、cyclin E、CDK2、CDK4、P53、Rb和caspase-3的表达.结果:在A549细胞和6例肺腺癌标本中,A549细胞和4例标本中K-ras基因高表达;MTT结果显示从第4 d开始,转染K-ras反义核酸的细胞生长明显受到抑制,而且细胞凋亡现象较明显;Western blotting显示转染反义K-ras基因的细胞中cyclin A、cyclin D1、cyclin E、CDK2和CDK4的表达降低,而caspase-3、P53和Rb的表达升高.结论:K-ras基因反义核酸能够抑制细胞生长,可能与cyclin A、cyclin D1、cyclin E、CDK2和CDK4的表达降低和caspase-3、P53、Rb的表达升高有关.【总页数】5页(P2096-2100)【作者】李尊岭;邵淑红;焦飞;岳真;李有杰【作者单位】生物化学与分子生物学教研室,分子遗传学研究所;应用心理学教研室,山东,烟台,264003;生物化学与分子生物学教研室,分子遗传学研究所;生物化学与分子生物学教研室,分子遗传学研究所;生物化学与分子生物学教研室,分子遗传学研究所【正文语种】中文【中图分类】R734【相关文献】1.CT120反义寡核苷酸抑制肺腺癌细胞A549的生长 [J], 李尊岭;邵淑红;谢书阳;焦飞;石寿森;于雪艳2.脂质体介导的VEGF-C反义寡核苷酸对肺腺癌细胞系 A549生长、凋亡的影响[J], 郭旭峰;徐中华;陈勇兵;杨文涛;徐忠恒;钱永跃3.紫杉醇-顺铂联合药物控释系统对肺腺癌细胞系 A549细胞生长的抑制作用 [J], 崔永;柳明亮;吴炳群;段新春;龚民4.反义核酸抑制RON基因表达对A549的体外作用 [J], 潘铁成;徐利军;李军;赵金平;陈涛;张霓;魏翔;潘友民;刘立刚5.消岩汤剂拆方配伍对A549肺腺癌细胞体外生长抑制作用研究 [J], 李小江;贾英杰;于建春;张小青;杜晓玲;朱津丽;孟醒因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
YC-1增强乏氧人肺腺癌A549细胞放射敏感性的作用机制研究的开题报告
YC-1增强乏氧人肺腺癌A549细胞放射敏感性的作
用机制研究的开题报告
题目：YC-1增强乏氧人肺腺癌A549细胞放射敏感性的作用机制研
究
背景：肺癌是全球最常见的癌症之一，放疗作为常规治疗手段之一，在肺癌治疗中有着广泛应用。
然而，肺癌细胞对放疗的耐受性较高，进
而影响治疗效果。
YC-1是治疗心血管疾病的一种药物，近年来发现可以
增强多种肿瘤细胞的放疗敏感性，但其在乏氧条件下促进肺癌细胞放射
敏感性的作用机制尚未明确。
研究目的：本研究旨在探究YC-1增强乏氧人肺腺癌A549细胞放射
敏感性的作用机制。
研究内容：
1. 采用MTT法和流式细胞术，研究YC-1在乏氧条件下对A549细
胞的增殖和凋亡影响以及对放疗敏感性的影响。
2. 利用Western blot和ELISA技术，探究YC-1对A549细胞的HIF-1α表达水平、VEGF、Bcl-2、Bax等相关蛋白表达和氧化应激反应的影响。
3. 运用qRT-PCR技术检验YC-1对A549细胞DNA修复相关基因表
达的影响。
预期结果：
1. YC-1能够增强乏氧条件下A549细胞的放疗敏感性。
2. YC-1通过抑制HIF-1α表达水平等多个机制影响A549细胞的增殖和凋亡，提高A549细胞的放疗敏感性。
3. YC-1能够影响A549细胞的DNA修复机制，从而加强放疗的疗效。
意义：本研究从分子机制上阐明了YC-1提高A549细胞放疗敏感性的作用，为肺癌放疗的临床治疗提供了新的思路和药物选择。
Polo-like激酶1反义RNA对肺癌细胞A549生长的实验研究
Polo-like激酶1反义RNA对肺癌细胞A549生长的实验研究周琼;张建初;金阳;张晓菊;陶晓南;白明【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2007(023)007【摘要】目的:探讨Polo-like激酶1(Plk1)基因表达下调对肺癌细胞周期分布及其生长的影响.方法:培养肺腺癌细胞株A549,构建表达Plk1反义RNA的质粒pcDNA3-Plk1,通过脂质体介导转染A549细胞,采用RT-PCR和Western blotting的方法检测Plk1基因的表达,细胞计数、BrdU脉冲标记检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期变化和凋亡,MTT法检测长春瑞宾(NVB)对各组细胞的生长抑制率.结果:A549细胞转染pcDNA3-Plk1后24 h,Plk1 mRNA及蛋白表达均下降;细胞变圆、漂浮、增殖减慢;S期细胞百分数(BrdU标记指数)显著低于对照组(P ＜0.05);转染后48 h A549细胞出现G2/M期阻滞(P＜0.05)并发生凋亡;等浓度化疗药物诺维本对转染pcDNA3-Plk1细胞的抑制率明显高于各对照组(P＜0.05),转染pcDNA3与未转染的对照细胞差异无显著(P＞0.05).结论:pcDNA3-Plk1的转染能下调Plk1基因的表达,抑制A549细胞增殖,诱导凋亡,并能增加A549细胞对化疗药物的敏感性.【总页数】5页(P1352-1356)【作者】周琼;张建初;金阳;张晓菊;陶晓南;白明【作者单位】华中科技大学同济医学院附属协和医院呼吸内科,湖北,武汉,430022;华中科技大学同济医学院附属协和医院呼吸内科,湖北,武汉,430022;华中科技大学同济医学院附属协和医院呼吸内科,湖北,武汉,430022;华中科技大学同济医学院附属协和医院呼吸内科,湖北,武汉,430022;华中科技大学同济医学院附属协和医院呼吸内科,湖北,武汉,430022;华中科技大学同济医学院附属协和医院呼吸内科,湖北,武汉,430022【正文语种】中文【中图分类】R734【相关文献】1.RNA干扰技术抑制Polo-like激酶1表达对A549细胞的影响 [J], 周琼;金阳;张晓菊;苏远;陶晓南;白明2.Aurora A反义寡核苷酸对人肺癌细胞系A549细胞生长与细胞周期的影响 [J], 伍钢;孟睿;答邦明;李贵玲;刘莉3.Polo-like激酶1反义RNA对肺癌细胞A549细胞周期的影响 [J], 周琼;白明;苏远4.反义端粒酶RNA对肺癌细胞A549抑制作用研究 [J], 田凤军;王智勇5.RNA干扰INK4位点反义非编码RNA抑制人肺癌细胞系生长的分子机制 [J], 肖颖;王正晖;牛秀珑;申去非因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
醛糖还原酶AKR1B1与肺癌的相关性研究
醛糖还原酶AKR1B1与肺癌的相关性研究孙基丰;孙婷婷;李超;金秀妍;张昊【摘要】在蛋白水平和核酸水平考察醛糖还原酶AKR1B1在肺癌细胞和肺细胞表达差异,研究醛糖还原酶AKR1B1肺癌的相关性.通过分子生物学手段,原核表达AKR1B1重组蛋白,制备AKR1B1小鼠多克隆抗体.利用ELISA、RT-PCR技术,检测肺细胞MRC-5和肺癌细胞A549的表达差异.AKR1B1蛋白原核表达的最适条件为:IPTG浓度1mmol/L,诱导时间24h,诱导温度为16℃时,蛋白含量达到1.9mg/ml.小鼠多克隆抗体,效价为1:32000.醛糖还原酶AKR1B1在蛋白质水平上肺细胞与肺癌细胞的比例为1:3;核酸水平上肺细胞与肺癌细胞的比例为1:4.1.成功表达醛糖还原酶AKR1B1,在肺癌细胞中蛋白质与核酸表达量均比肺细胞中高,预示醛糖还原酶AKR1B1可能是肺癌标记物或者是作为治疗的药物靶点,本实验为肺癌的诊断及治疗提供实验依据及理论基础.【期刊名称】《长春理工大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2018(041)006【总页数】6页(P141-146)【关键词】醛糖还原酶AKR1B1;原核表达;酶联免疫检测;逆转录【作者】孙基丰;孙婷婷;李超;金秀妍;张昊【作者单位】长春理工大学生命科学技术学院,长春 130022;长春理工大学生命科学技术学院,长春 130022;长春理工大学生命科学技术学院,长春 130022;长春理工大学生命科学技术学院,长春 130022;长春理工大学生命科学技术学院,长春130022【正文语种】中文【中图分类】R33醛糖还原酶AKR1B1蛋白（Aldehyde Reductase，AR）是醛酮还原酶（AKRs）超家族中的重要成员之一。
它是NADPH依赖型的多功能酶类，蛋白的空间结构为一条含有巯基的单链的多肽，一般以单体的形式存在于生物体内[1-3]。
醛糖还原酶（AKRs）超家族的许多成员都与人类的各种肿瘤疾病的发生发展密切相关。
RNAi沉默HIF-1α基因调控乏氧肺腺癌A549细胞放射敏感性和自噬能力
《中国癌症杂志》2013年第23卷第6期CHINA ONCOLOGY 2013 Vol.23 No.6413 RNAi沉默HIF-1α基因调控乏氧肺腺癌A549细胞放射敏感性和自噬能力邹燕梅 熊华 肖志平 于世英 袁响林华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心，湖北 武汉 430030 ［摘要］ 背景与目的：乏氧导致肿瘤细胞放射敏感性下降是引起肿瘤放疗抵抗、复发转移的根源。
HIF-1α基因在乏氧调控中起关键作用，但HIF-1α基因在乏氧肺腺癌放射敏感性中的作用及其与自噬的关系尚未阐明。
本研究建立利用RNAi沉默HIF-1α基因的乏氧肺腺癌A549细胞模型，以此探讨HIF-1α对乏氧细胞放射敏感性和自噬的影响。
方法：构建靶向抑制HIF-1α的shRNA表达质粒，转染乏氧A549细胞，筛选稳定表达的克隆细、SF2、SER 胞，将其命名为A549/HIF-1α-shRNA，同时设阴性对照A549/Neg-shRNA。
克隆形成实验检测细胞D0等值。
Western-blot检测细胞照射前后HIF-1α、LC3、c-parp蛋白的表达。
结果：乏氧A549细胞的SF2为0.62，高于常氧A549细胞，SER为1.45；乏氧A549细胞照射后LC3Ⅱ增加，c-parp下调。
乏氧A549细胞HIF-1α表达增加；A549/HIF-1α-shRNA细胞HIF-1α表达降低；A549/HIF-1α-shRNA细胞的SF2为0.45，SER为0.72，低于A549/ Neg-shRNA细胞；A549/HIF-1α-shRNA 细胞照射后LC3Ⅱ降低，c-parp上调。
结论：稳定转染及RNAi技术建立的HIF-1α表达抑制克隆可以成为简单实用的细胞模型；shRNA抑制HIF-1α的表达可提高乏氧A549细胞的放射敏感性，降低自噬活性。
［关键词］ 乏氧；自噬；放射敏感性；HIF-1α；RNAi DOI: 10.3969/j.issn.1007-3969.2013.06.003 中图分类号：R734.2 文献标志码：A 文章编号：1007-3639(2013)06-0413-07Effect of HIF-1α expression inhibition by RNA interference on radiosensitivity and autophagy of hypoxic human lung adenocarcinoma cell line A549 ZOU Yan-mei, XIONG Hua, XIAO Zhi-ping, YU Shi-ying, YUAN Xiang-lin (Cancer Center, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan, Hubei, 430030, China)Correspondence to: XIONG Hua E-mail: xionghua2001@ ［Abstract］ Background and purpose: Hypoxia induced the decreased radiosensitivity of tumor cells, which was the cause of tumor radioresistance and relapse and metastasis. During the course, HIF-1a played the most important role in the regulation of hypoxia. However, it’s still unknown about the effect of HIF-1a on the radiosensitivity of hypoxia tumor cells and the relationship with autophagy. This study was to inhibit HIF-1α expression in hypoxic lung adenocarcinoma cell line A549 with RNA interference (RNAi), and explore its effect on hypoxic cell radiosensitivity and autophagy.Methods: Plasmids pHIF-1α-shRNA and Neg-shRNA (negative control) were constructed and transfected into hypoxic A549 cells, this positive clone was named A549/HIF-1α-shRNA. Clone formation array was applied to calculate the value of D0, SF2, SER. The expression of HIF-1α, LC3, c-parp was detected by Western blot.Results: The SF2 of hypoxic A549 cell was 0.62, which was higher than that of normoxic A549 cell, SER was 1.45.The level of LC3Ⅱ increased significantly and the level of c-parp decreased after the radiation of hypoxic A549 cell.The level of HIF-1a increased in hypoxic A549 cells. The expression of HIF-1α in hypoxic A549 cells was suppressed markedly after transfection of HIF-1α-shRNA; this clone was named A549/HIF-1α-shRNA. The SF2 and SER were significantly lower in A549/HIF-1α-shRNA cells, 0.45 and 0.72 respectively. Under the hypoxic condition and after the inhibition of HIF-1α, the expression of LC3Ⅱ decreased significantly and the expression of c-parp increased.Conclusion: We successfully established a cell model that HIF-1α expression was suppressed almost completely by基金项目：国家自然科学基金青年科学基金(No：81201779)。
胡桃醌通过降低AKT活性抑制肺癌A549细胞增殖
胡桃醌通过降低AKT活性抑制肺癌A549细胞增殖刘元银;雷淑慧;杨燕;蒋幼凡【摘要】目的探讨肽酰脯氨酰顺反异构酶(PIN1)抑制剂胡桃醌(Juglone)对肺癌A549细胞增殖的影响及分子机制.方法用胡桃醌(0、6.25、12.5、25和50μmol/L)处理A549细胞,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡及周期,real-time PCR检测PIN1、AKT mRNA表达,Western blot检测PIN1、AKT 及AKT-pS473蛋白表达.结果胡桃醌能浓度依赖性抑制A549细胞增殖,促进细胞凋亡,将细胞周期阻滞在G2/M期和S期.与对照组相比,各处理组PIN1 mRNA水平随着胡桃醌浓度增加而降低(P＜0.05).不同浓度胡桃醌处理组PIN1蛋白表达为1.032±0.056、0.892±0.024、0.596±0.023和0.396±0.021,均显著低于对照组的1.280±0.046(P ＜0.05)；AKT-pS473蛋白表达为0.554±0.023、0.464±0.018、0.362±0.015和0.228±0.020,均显著低于对照组的0.626±0.015(P ＜0.05)；48 h处理组PIN1及AKT-pS473蛋白表达分别为0.575±0.036和0.338±0.014,显著低于24h的0.764±0.032和0.436 ±0.023(P ＜0.05).结论 PIN1抑制剂胡桃醌可以抑制肺癌A549细胞的增殖,其机制可能是通过降低AKT-pS473活性来实现的.%Objective To explore the effect and mechanism of PIN1 inhibitor Juglone on cell proliferation of human lung cancer cells A549 in vitro.Methods A549 cells were treated by different concentrations of Juglone.Cell proliferation was measured by MTF assay respectively.The apoptosis rate and cell cycle of A549 cells were detected by flow cytometry.Real-time PCR was carried to detect the mRNA expression of PIN1 and AKT.Western blot were used to observe the protein expression of PIN1 and AKT-pS473 in cells.Results With the increasing ofJuglone's concentration,the inhibition effect on proliferation and the apoptosis rate of A549 cells enhanced in a dose-depended manner,andA549 cells cycle were blocked in G2/M and S period.Real-time PCR result showed the mRNA level of PIN 1 in A 5 4 9 cells treated by Juglone significantly decreased compared with control group.Western blot showed that the protein expression of PIN1 in Juglone groups were 1.032 ±0.056,0.892 ± 0.024,0.596 ± 0.023,0.396 ±0.021,significantly lower than that of control group 1.280 ±0.046 (P ＜0.05).the protein expression of AKT-pS473 in Ju glone groups was 0.554 ±0.023,0.464 ±0.018,0.362±0.015,0.228 ±0.020,significantly lower than control group 0.626 ± 0.015 (P ＜ 0.05).the protein expression of PIN1 and AKT-pS473 in cells treated by Juglone for 48 h were 0.575 ±0.036 and 0.338 ±0.014,signif icantly lower than 0.764 ±0.032 and 0.436 ± 0.023 of 24 h group (P ＜ 0.05).Conclusions Inhibiting the expression of PIN1 with Juglone can significantly depress the proliferation activity of A549 through decreasing the phosphorylation level of AKT.【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2013(033)008【总页数】6页(P1032-1037)【关键词】肽酰脯氨酰顺反异构酶;胡桃醌;细胞增殖;肺癌【作者】刘元银;雷淑慧;杨燕;蒋幼凡【作者单位】重庆医科大学附属第二医院呼吸内科,重庆400010;铜梁县人民医院重症监护科,重庆402560;攀枝花市中心医院呼吸内科,四川攀枝花617067;重庆医科大学附属第二医院呼吸内科,重庆400010【正文语种】中文【中图分类】R734.2肽酰脯氨酰顺反异构酶(peptidyl-prolyl cis/trans isomerase，PIN1)是目前已知调节磷酸化丝氨酸/苏氨酸基序顺反构象变化唯一的酶［1］，在多种肿瘤组织中都呈现过表达［2］。
Ku80基因在人A549肺腺癌细胞照射前后表达的对比研究
Ku80基因在人A549肺腺癌细胞照射前后表达的对比研究叶健;任振义;王利民;王娇莉;顾清【期刊名称】《浙江医学》【年(卷),期】2011(33)7【摘要】目的探讨Ku80基因在人A549肺腺癌细胞中的表达水平.将A549肺腺癌细胞接种裸鼠,以不同强度的射线照射,探求Ku80蛋白和Ku80 mRNA在放射治疗前后水平变化.方法利用免疫组化、荧光定量PCR方法检测经过不同强度的射线照射前后的A549肺腺癌细胞的Ku80蛋白含量和Ku80 mRNA的表达.结果接种在裸鼠的A549肺腺癌细胞经过射线照射后同等时间(24、48h),Ku80蛋白和Ku80 mRNA随着照射强度1、4、8Gy的增强而增加(P＜0.05);经过4、8Gy射线照射后48h,测得A549肺腺癌细胞中的Ku80蛋白和Ku80 mRNA较同样强度射线照射后24h而增加(P＜0.05).结论人A549肺腺癌细胞的Ku80蛋白和Ku80 mRNA在一定的照射强度范围内随着照射强度的增强而增加,并在一定的时间范围内随着照射后时间的延长而表达增多,推测Ku80基因可能与肺腺癌细胞放射损伤修复有密切关系.%Objective To investigate the changes of Ku80 gene expression in human lung adenocarcinoma cell line A549 before and after radiotherapy.Methods Human lung adenocarcinoma A549 cells were inoculated to nude mice and exposed to different doses of irradiation.The expressions of Ku80 protein and mRNA in A549 cells were detected by immunohistochemistry and real- time Q- PCR, respectively.Results The expressions of Ku80 protein and Ku80 mRNA in A549 cells were significantly increased 24 and 48h after exposure to 1Gy, 4Gy and 8Gyirradiation (P＜0.05).After cells were exposed to 4Gy and 8Gy irradiation for 48h, the Ku80 protein expression was higherthan that exposed with the same dose for 24h (P＜0.05).Conclusion The expressions of Ku80 protein and Ku80 mRNA in human lung adenocarcinoma A549 cells are increased after exposure to irradiation in a dose- and time- dependent manner, which suggests that Ku80 gene expression may be involved in the repairing of radiation damages.【总页数】4页(P1000-1003)【作者】叶健;任振义;王利民;王娇莉;顾清【作者单位】310006,杭州市第一人民医院呼吸科;310006,杭州市第一人民医院呼吸科;310006,杭州市第一人民医院呼吸科;310006,杭州市第一人民医院呼吸科;310006,杭州市第一人民医院急诊科【正文语种】中文【相关文献】1.IKBKB在人肺腺癌细胞株A549及其耐药细胞株A549/DDP中的表达和意义[J], 齐康;李洋;李雪冰;张芳;邵宜;周清华2.SOCS3基因在人肺腺癌细胞株A549中的表达及其对细胞增殖的影响 [J], 余祖滨;白莉;闵家新;姚珂;张国强3.薏苡仁注射液联合X线照射对人肺腺癌细胞A549抑制作用的机制研究 [J], 吕品田;周坤;王亚珍;刘斌;萧娟4.人肺腺癌细胞A549放射治疗前后Dystrobrevin蛋白表达的变化 [J], LUAN Jin-wei;WU Xiao-yuan;LI Jia-qi5.正常人胚肺HELF、人肺腺癌细胞A549和转染RARβ表达载体的A549蛋白质组差异分析 [J], 李尊岭;于雪艳;胡国强;刘师莲;田克立;胡晓燕因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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(1. Department of Medicai Technology, Shaanxi Universityof Chinese Medicine, Xi'an 712046, China； 2. Colleee of Life Science, Northweet University, Xi'an 710069, China)
凋亡作用。以上结果表明，AKR1家族中的AKR1C1和AKR1B1基因在调节A549细胞顺
3耐药中起到了关键的作用。 关 键词：肺腺癌；顺3;耐药；AKR1
中图分类号：Q291 文献标识码：A DOI ： 10.16152/ki.xdxUzr. 2019-03-008
Regulation of cisplatin resistance by AKR1C1, AKR1C3 and AKR1B1 genes in luug adeeocarcinoma A549 cellt
Abstraci: To investigate the impact of AKR1 fdmiiy genet, including AKR1C1 , AKR1C3 and AKR1B1 on cis pitin resistance in lung adenoccrcinoma A549 celis. Whoie-transcriptome sequencing was performed te com pare the genome-wide gene expression pHerns of the cispltin—isint cell line A549/DDP with those of its prognitor cell line A549. Our data revealed that AKR1C1 , AKR1C3 and AKR1B1 increesed sionificentlo in A549/DDP c—Is. Based on the results of tOe RNAquantification analysis, inhibitors assay and RNAinterferenceexpeamenh ,we found that combination of cisplatin and inhipitor of AKR1C1 oe AKR1B1 sioniPcantlo en hanced the drug sensitivity of A549/DDP cells. Nevertheless inhibition of AKR1C3 exeeed no inauence on cisplatin snsitivito of A549/DDP cells. Also, ce-knockdown of AKR1C1 and AKR1B1 sionificantly enhancd
收稿日期：2018-11-13 基金项目：国家自然科学基金资助项目(31271353) 作者简介:方亚妮，女,陕西汉中人,从事肿瘤分子生物学研究。 通讯作者:戴鹏高，男，陕西西安人，教授，从事药物基因组学研究。
第3期
方亚妮等:AKR1家族基因AKR1C1.AKR1C3 .AKR1B1调控肺腺癌A549细胞顺钳耐药的研究 -377 -
兎
西北大学学报(自然科学版)
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2019 年 6 月，第49 卷第 3 期,Jun. ,2019,Vol.49,No.3
Journal of Northwest University ( Natural Science Edition)
•生命科学•
AKR1 家族基因 AKR1C1 ,AKR1 C3 ,AKR1B1 调控 腺癌A549细胞顺&耐药的研究
the cyto-toxicity and cell apoptosis induced by cispldtin, suggesting that these genes were closely dssocidt% with cisplatin esistdnce. Key words: lung adenocercinoma A cisplatin ； esistdnce; AKR1
方亚妮1,刘金辉】，石小玲1,戴鹏高2
(1.陕西中医药大学医学技术学院，陕西西安712046；2.西北大学生命科学学院，陕西西安710069)
摘要:探究醛酮还原酶家族 1 ( Aldo-Ketu Reductases family 1, AKRБайду номын сангаас) 3 个基因 AKR1C1,
AKR1C3 ,AKR1B1调控肺腺癌A549细胞顺3耐药的作用。通过对肺腺癌A549细胞及相 应的顺3耐药细胞A549/DDP的差异表达基因谱进行分析，发现AKR1家族的3个成员
AKRC1,AKR C3及AKR1B1同时在A549/DDP细胞中显著上调。在细胞水平上对这3 个基因进行了 RNA定量实验,抑制剂实验和RNA干扰实验,观察其是否参与调控A549/
DDP对顺3的药物敏感性。研究结果证实：AKR1C1或AKR1B1酶活抑制剂与顺3联合 使用可显著提高A549/DDP细胞的顺3敏感性，而抑制AKR1C3酶活性并不能引起 A549/DDP对顺3的敏感性增强；此外，基于RNA干扰技术，在A549/DDP细胞中同时敲 减AKR1C1和AKR1B1不仅增强了顺3的细胞毒性，且同时显著增强了顺3诱导的细胞
肺癌是我国发病率和死亡率最高的恶性肿 瘤。根据中国癌症流行病学调查数据统计,2015 年我国确诊为肺癌的人数高达73. 3万，发病率在 所有癌症中占据首位;肺癌死亡病例为61. 0万 人，死亡人数居癌症首位⑴@近年来其发病率和 死亡率也有日益增加的趋势。非小细胞肺癌占肺 癌病理类型的80%左右⑵，可近一步分为大细胞 癌，鳞状细胞癌及腺癌3种类型，其中腺癌患者所 占比重最高,50%左右⑶@由于病情的隐匿性, 大多数肺腺癌患者在确诊时已处于晚期，无法进 行手术治疗，因此以钳类药物为基础的放化疗成 为这些患者治疗的主要的临床手段⑷，其中顺钳 作为化疗的一线药物一直被沿用至今⑸@