超高压液相-质谱联用快速测定食品中罗丹明B

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食品中罗丹明B的检测方法

着色剂俗称色素，是食品添加剂的一种，按照着色剂的来源，可分为天然色素和合成色素两大类。我国食品安全国家标准 GB 2760-2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》中明确规定了其在食品中允许添加的范围和用量。罗丹明 B 是一种人工合成的碱性染料，一般常用于实验室中细胞荧光染色剂、有色玻璃、特色烟花爆竹等行业。罗丹明 B 会导致老
3 高效液相色谱 - 质谱法
高效液相色谱 - 质谱法是在高效液相的基础上串联质谱的一种检测分析方法，与高效液相相比，加强了组分的鉴定能力。程慧等 [8] 用乙酸乙酯 - 环己烷（1 ∶ 1，V/V）超声提取香肠中残留的罗丹明 B，经过凝胶色谱净化系统净化并浓缩后，用高效液相色谱 - 质谱仪作为子离子进行检测。胡侠等 [9] 针对辣椒粉及辣椒油中的罗丹明染料创建了相应的高效液相色谱 - 串联质谱测定方法。样品经过正己烷或甲醇水溶液提取
Kong Fandi, Pang Mingli, Shi Yiyang, Lu Siyao, Zhou Qianwen (Jiaxing Branch of Zhejiang Academy of Inspection and Quarantine, Jiaxing 314001, China)
摘要：罗丹明 B 是一种人工合成碱性染料，对人体有一定的致癌作用，因此，国家将其列为禁用添加剂。本文综述了食品中罗丹明 B 常用的检测方法，并对各检测方法的特点进行相应的分析与评价。
Key words：Rhodamine B; Detection; Food
中图分类号：TS201.6
随着经济的不断发展，人们的生活水平也在不断的提高。“吃”作为最基本的生存需求，人们已经不再仅仅满足于吃饱，还要吃好，所以食品添加剂应运而生。食品添加剂是为改善食品色、香、味等品质及为满足防腐、加工工艺的需要而加入食品中的人工合成或者天然物质 [1]。目前我国食品添加剂有 23 个大类，上千个品种，常见的添加剂有甜味剂、抗氧化剂、着色剂、防腐剂及营养强化剂等。随着人们对“吃”的要求越来越高，添加剂对身体所带来的健康隐患让人越来越重视。

食品中罗丹明B测定(BJS,201905)

食品中罗丹明B测定（BJS,201905）食品中罗丹明B的测定BJS2019051范围本方法规定了食品中罗丹明B的液相色谱测定方法及液相色谱-质谱/质谱确证方法。

本方法适用于半固态调味料、花椒及花椒粉、花椒油、牛肉干、蜜饯、水果干制品中罗丹明B的测定和确证。

2原理试样中罗丹明B用含酸的甲醇水溶液提取后，经混合型阳离子固相萃取小柱净化，采用液相色谱荧光检测器检测，外标法定量。

试样中检出罗丹明B 后采用液相色谱质谱/质谱法进行确证。

3试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

3.1甲醇（CH3OH）：色谱纯。

3.2乙腈（C2H3N）：色谱纯。

3.3甲酸（CH2O2）：色谱纯。

3.4氨水（NH₃·H₂O）：色谱纯。

3.5含0.1%甲酸的水溶液:取甲酸（3.3）1mL用水稀释至1000mL，用滤膜（0.22μm，水相）过滤后备用。

3.650%甲醇水溶液:准确量取500mL甲醇（3.1）于1L容量瓶中，用水定容至刻度。

3.7含0.1%甲酸的甲醇水溶液：取1mL甲酸（3.3），用甲醇水溶液（3.6）稀释至1000mL。

3.8含0.1%甲酸的乙腈溶液：取1mL甲酸（3.3），用乙腈（3.2）稀释至1000mL，滤膜（0.22μm，有机相）过滤后备用。

3.9含0.1%甲酸的乙腈水溶液：取0.1mL甲酸（3.3）和35mL乙腈（3.2），用水稀释至100mL，混匀。

3.10含5%氨水的甲醇溶液：取5mL氨水（3.4），用甲醇稀释至100mL，混匀。

（临用现配）3.11罗丹明B标准品：罗丹明B标准品的分子式、相对分子量、英文名称、CAS登录号见表1，纯度≥99%。

表1罗丹明B标准品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量中文名称英文名称CAS登录号分子式相对分子量罗丹明BRhodamineB81-88-9C28H31ClN2O3479.013.12罗丹明B标准储备液：准确称取罗丹明B标准品10mg（精确至0.0001g），置于100mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，制成浓度为100μg/mL的标准储备液。

食品中罗丹明B的测定BJS201905

食品中罗丹明B的测定BJS 2019051 范围本方法规定了食品中罗丹明B的液相色谱测定方法及液相色谱-质谱/质谱确证方法。

本方法适用于半固态调味料、花椒及花椒粉、花椒油、牛肉干、蜜饯、水果干制品中罗丹明B的测定和确证。

2 原理试样中罗丹明B用含酸的甲醇水溶液提取后，经混合型阳离子固相萃取小柱净化，采用液相色谱荧光检测器检测，外标法定量。

试样中检出罗丹明B后采用液相色谱质谱/质谱法进行确证。

3 试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682 规定的一级水。

3.1 甲醇（CH3OH）：色谱纯。

3.2 乙腈（C2H3N）：色谱纯。

3.3 甲酸（CH2O2）：色谱纯。

3.4 氨水（NH₃·H₂O）：色谱纯。

3.5 含0.1%甲酸的水溶液: 取甲酸（3.3）1 mL用水稀释至1000 mL，用滤膜（0.22 μm，水相）过滤后备用。

3.6 50%甲醇水溶液:准确量取500 mL甲醇（3.1）于1 L容量瓶中，用水定容至刻度。

3.7 含0.1%甲酸的甲醇水溶液：取1 mL甲酸（3.3），用甲醇水溶液（3.6）稀释至1000 mL。

3.8 含0.1%甲酸的乙腈溶液：取1 mL甲酸（3.3），用乙腈（3.2）稀释至1000 mL，滤膜（0.22 μm，有机相）过滤后备用。

3.9 含0.1%甲酸的乙腈水溶液：取0.1 mL甲酸（3.3）和35 mL乙腈（3.2），用水稀释至100 mL，混匀。

3.10 含5%氨水的甲醇溶液：取5 mL氨水（3.4），用甲醇稀释至100mL，混匀。

（临用现配）3.11 罗丹明B标准品：罗丹明B标准品的分子式、相对分子量、英文名称、CAS登录号见表1，纯度≥99%。

表1 罗丹明B标准品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量3.12 罗丹明B标准储备液：准确称取罗丹明B标准品10 mg（精确至0.0001 g），置于100 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，制成浓度为100 μg/mL的标准储备液。

液相色谱串联质谱法检测辣椒制品中罗丹明B的含量

ＹＡＮＧＧｕｉ－ｌｉｎｇｍ，ＭＥＮＧＢｉｎｇ－ｂｉｎｇ。，ＷＡＮＧＹｅ＿ｊｕ。，ＹＵＬｉｎ。
（１．ＨａｒｂｉｎＦｏｏｄＩｎｄｕｓｔｒｙＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｈａｒｂｉｎ１５００２５，Ｃｈｉｎａ；２．ＨａｒｂｉｎＦｏｏｄＩｎｄｕｓｔｒｙＩｎｓｔｉｔｕｔｅＣｏ．，Ｌｔｄ．，Ｈａｒｂｉｎ１５００２５，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＡｎａｎａｌｙｓｉｓｍｅｔｈｏｄｉｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｎｇｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＲｈｏｄａｍｉｎｅＢｉｎｃｈｉｌｉｐｒｏｄｕｃｔｓ
的定性定量分析。
关键词：液相色谱串联质谱；罗丹明Ｂ；辣椒制品
中图分类号：ＴＳ２０７．３
文献标识码：Ａ
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００ —９９７３．２０１３．０５．０２６
文章编号：１０Ｏ０ —９９７３（２０１３）０５ —０１Ｏ８一Ｏ３
ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＲｈｏｄａｍｉｎｅＢｉｎＣｈｉＩｉＰｒｏｄｕｃｔｓＵｓｉｎｇＵＩｔｒａＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＬｉｑｕｉｄＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ＴａｎｄｅｍＭａｓｓＳｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｉｃＭｅｔｈｏｄ

食品中罗丹明B的测定解决方案-八角茴香

订购电话：北京：400-608-7719上海：021-6126 3966 广州：020-8559 3520 食品中罗丹明B 的测定解决方案罗丹明B 又称玫瑰红B ，或碱性玫瑰精，是一种人工合成碱性荧光染料。

由于罗丹明B 具有价格低廉、色泽红艳、稳定性强等特点，部分不良商贩将其作为苏丹红替代品为花椒、辣椒等食品染色，取得好的卖相，以求以次充好，售高价。

有研究显示，罗丹明B 会直接危害到人体的身体健康，具有潜在的致癌、致突变性和心脏毒性。

2008年，我国将其列入第一批《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单》中，明确规定不允许用作食品添加剂及食品染色。

目前，罗丹明B 的检测常用中性氧化铝固相萃取柱进行前处理净化，但要控制氧化铝的活性，且操作步骤繁琐，回收率结果无法保证；也有行业标准《SN/T 2430－2010进出口食品中罗丹明B 的检测方法》以乙酸乙酯/环己烷提取罗丹明B ，凝胶渗透色谱系统净化后，液相色谱荧光检测器或液相色谱质谱/质谱仪测定，但该方法需购置凝胶渗透色谱仪，且前处理有机溶剂消耗量大，耗时长，不能被广泛使用。

迪马科技在克服上述两种方法缺陷基础上开发出ProElut PXC 固相萃取柱净化，液相色谱荧光检测器测定方法，对多种食品基质中罗丹明B 进行测定。

该方法无需使用大型设备凝胶渗透色谱仪，具有简便，快速，溶剂消耗少，回收率结果稳定，易于广泛使用等优势。

以下为详细解决方案，供您参考！八角茴香中罗丹明B 的测定1 适用范围适用于八角茴香中罗丹明B 的检测。

2 样品准备(1) 取1 g 样品于50 mL 离心管中，加入10 mL 提取液*，均质1 min ， 6000 rpm 下离心2 min ，收集上清液；订购电话：北京：400-608-7719 上海：021-6126 3966 广州：020-8559 3520 (2) 残渣再用10 mL 提取液* 涡旋混合提取2 min ，6000 rpm 下离心2 min ；合并两次提取液；(3) 在40 ℃下用减压蒸馏将提取液蒸干，然后用6 mL 1%磷酸水溶液超声溶解，待净化。

高效液相色谱荧光法测定辣椒酱中的罗丹明B

高效液相色谱荧光法测定辣椒酱中的罗丹明B刘谦;白帆;刘丽丽【摘要】[目的]建立辣椒酱中罗丹明B的高效液相色谱荧光检测法.[方法]将样品中的罗丹明B用一定比例的丙酮和正己烷提取,经过氧化铝固相萃取柱净化浓缩后,用液相色谱荧光检测器检测其含量.[结果]试验得出,罗丹明B在0.005～0.050 mg/kg浓度范围内,线性关系良好,相关系数为0.999;方法的定量检测限为0.005 mg/kg,平均回收率高.[结论]该试验建立的方法快速、准确、灵敏度高,适用于辣椒酱中罗丹明B的测定.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2014(000)001【总页数】2页(P248-249)【关键词】液相色谱;荧光检测法;罗丹明B【作者】刘谦;白帆;刘丽丽【作者单位】保定出入境检验检疫局,河北保定071051;保定出入境检验检疫局,河北保定071051;保定出入境检验检疫局,河北保定071051【正文语种】中文【中图分类】O657.7+2罗丹明B，俗称“花粉红”，又称玫瑰红B或碱性玫瑰精，是一种人工合成的具有鲜桃红色的染料，分子式为C28H31ClN2O3，分子量为479.017 5，化学结构式如图1所示。

罗丹明B常温下为绿色结晶或红紫色粉末，易溶于水、甲醇及乙醇，微溶于丙酮、氯仿、盐酸和氢氧化钠溶液。

由于罗丹明B在溶液中荧光现象比较强烈，在实验室中细胞荧光染色剂、有机玻璃和特色烟花爆竹、环境保护、钢铁生产、矿石生产等行业中得到了比较广泛的应用［1-4］。

图1 罗丹明B化学结构式罗丹明B曾经被用做食品添加剂，但也有研究结果表明［5-6］，罗丹明B有致癌性，同时其可能造成人皮肤及内脏红染、心肌纤维断裂、横纹模糊和肺水肿等，该物质的摄取、吸入及皮肤接触均会造成急性和慢性中毒伤害。

但罗丹明B具有价格低廉的特点，脂溶性良好，比其他水溶性染料如诱惑红、赤鲜红和柠檬黄等更易于在辣椒及制品上染色且不易褪色，一些不法企业及商贩用罗丹明B作为食用色素对辣椒及其制品进行染色，以次充好。

超高效液相色谱荧光法检测调味品中罗丹明B残留量

Ｘ１０５２８Ｘ１（一０９９８７。．４０．９６）
２５２检出限．．
按所确定的实验条件，对标准混合溶液逐级稀释进行测定，３倍信噪比计算该方法的按
２０
广州化学
第３６卷
定量检测限，得出调味品中罗丹明Ｂ的方法检测限为０１ｇｋ（／．ｇ／ｇＳＮ￣３。）
离心１ｎ０ｍｉ。取上清液用于固相萃取柱的净化。２）含油调味品（如：辣椒油，火锅底料等）例，将样品匀浆，称取５０ｇ于１．０５ｍＬ离心管中，加入５ｍＬ石油醚（００Ｃ）６￣９￣，摇匀，弃去石油醚层，重复一次Ｎ２吹去剩余的
丹明Ｂ会引致皮下组织生肉瘤，被怀疑是致癌物质Ｌ。１Ｊ
罗丹明Ｂ在溶液中有强烈的荧光，用作实验室中细胞荧光染色剂及有色玻璃、特色烟花爆竹等行业【。中国卫２］生部将其列于《品中可能违法添加的非食用物质和易食滥用的食品添加剂品种名单（第一批）中，禁止在食品中使用【。然而，一些企业为了降》３】低成本将其作为食用色素使用。为了保障人民的健康安全，建立快速可靠的检测方法至关
中图分类号：０５．；Ｔ２７３６７７２Ｓ０．
文献标识码：Ａ
罗丹明Ｂ（ｈｄｍｉｅＲｏａｎＢ）又称玫瑰红Ｂ，或碱性玫瑰精，俗称花粉红，是一种具有鲜桃红色的人工合成的染料，其化学结构式如图ｌ所示。经老鼠试验发现，罗

液相色谱-质谱法测定熟肉制品中罗丹明B、碱性橙2和酸性橙Ⅱ

ＯｒａｎｇｅＨｉｎＤｅｌｉｍｅａｔｓｂｙｈｉｇｈｐｅｒｆｏｅｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
ｃｏｕｐｌｅｄｗｉｔｈｔａｎｄｅｍｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ
测定。关键词：高效液相色谱一串联质谱法；工业染料；熟肉制品中图分类号：０６５８文献标识码：Ａ文章编号：１００４— ８６８５（２０１６）２０— ２９０８— ０４
ＳｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＲｈｏｄａｍｉｎｅＢ，ＢａｓｉｃＯｒａｎｇｅ２ａｎｄＡｃｉｄ
ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＨＰＬＣ—ＭＳ）．ＭｅｔｈｏｄｓＳｅｐａｒａｔｉｏｎｓｗｅｒｅｐｅｒｆｏｒｍｅｄｗｉｔｈａｎＡｇｉｌｅｎｔＥｃｌｉｐｓｅＸＤＢ—Ｃ１８ｃｏｌｕｍｎａｔａｌｆｏｗｒａｔｅｏｆ０．３ｍｌ／ｍｉｎ．Ｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｗａｓｗａｔｅｒ（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ０．１％ｆｏｒｍｉｃａｃｉｄ）一ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ．Ｕｓｉｎｇｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ

超高效液相色谱-串联质谱法测定火锅食品中的罗丹明B和6G

ＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＬｉｑｕｉｄＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．ＴａｎｄｅｍＭａｓｓＳｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ
ｉａｎ－ｈｕｏ，ＬＩＡＮＧＣｈｉ—ｑｉｏｎｇ，ＳＨＩＹｉｎｇ。
（１．ＦｏｓｈａｎＳｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎａｎｄＴｅｓｔｉｎｇＣｅｎｔｅｒｆｏｒＱｕａｌｉｔｙａｎｄＭｅｔｒｏｌｏｇｙ，Ｆｏｓｈａｎ５２８２２５，Ｃｈｉｎａ；
６９，６～１０１．１
，ｗｉｔｈｔｈｅ
ｒｅｌａｔｉｖｅｓｔａｎｄａｒｄｄｅｖｉａｔｉｏｎｓｆｒｏｍ４．２ｔｏ１０４．Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｄｅｖｅｌｏｐｅｄｉｓｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ．ａｃｃｕｒａｃｙａｎｄ．
ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｔＯｂｅｕｓｅｄｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇＲｈｏｄａｍｉｎｅＢａｎｄＲｈｏｄａｍｉｎｅ６Ｇｉｎｓａｍｐｌｅｓｗｉｔｈａ
第４３卷第４期２０１８年４月
中国调味品
ＣｈｉｎａＣｏｎｄｉｍｅｎｔ
分析检测
超高效液相色谱一串联质谱法测定火锅食品中的罗丹明Ｂ和６Ｇ
吴正双，林显活，梁炽琼，石英。
（１．佛山市质量计量监督检测中心，广东佛山５２８２２５；２．佛山市食品药品检验检测中心，广东佛山５２８０００；３．天津工业大学管理学院，天津３００３８７）
梁炽琼（１９７３－），女。高级工程师，硕士，主要从事食品检测工作。
一
１８２ —
第４３卷第４期２０１８年４月

液相色谱-串联质谱法检测食品中罗丹明B的残留量

药品检测I白旭东等：液相色谱-串联质谱法检测食品中罗丹明B的残留量液相色谱串联质谱法检测食品中罗丹明B的残留量白旭东，孙晓娟，谷岩(辽宁省检验检测认证中心，辽宁沈阳110036)【摘要】目的：建立食品中罗丹明B的液相色谱-电喷雾质谱检测方法(UPLC-ESI-MS/MS)。

方法:样品经酸化乙腈提取，正己烷去脂后，经固相萃取小柱(MCX)净化，富集后采用液相色谱-电喷雾质谱进行检测，以正离子多反应监测模式测定，外标定量。

结果:罗丹明的线性范围为2-50 ng/mL，加标回收率为90.0%~110.0%，相对标准偏差小于10.0%(n=6);方法检出限为丨叩/ kg。

结论:该方法快速、准确、灵敏，适合用于食品中罗丹明B的确证检测。

【关键词】罗丹明B;液相色谱串联质谱仪；固相萃取;食品;残留量【DOI编码】10.3969/j.issn.1674-4977.2020.05.022Determination of Rhodamine B Residues in Feed by Liquid Chromatography-Tandem Mass SpectrometryBAIXu-dong,SUNXiao-juan,GU Yan(Liaoning Inspection,Examination &Certification Centre,Shenyang110036,China)Abstract：Objective To establish an analytical method for the detection of rhodamine B residues in feed. Methods After the samples were extracted by acidified acetonitrile,it was purified by solid phase extraction cartridge(MCX) after removal of fat, after enrichment, it was detected by a high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS). The positive electrospray ionization (E SI+) mode and multiple reactions monitoring (MRM) were adopted to detect, external standard method was used for quantitative determination. Results The linear range of rhodamine B was 2.0-50 ng/mL. The average recoveries of rhodamine B from spiked sample at three concentration levels were between 90% and 110% with RSD(n=6) ,the relative standard deviations (RSDs) were less than 10%(n=6). The limits of quantitation (LOD) were 1|ig/kg. Conclusion The proposed method is fast, accurate and sensitive, which is suitable for detecting rhodamine B in feed samples.Key words ：Rhodamine B ；liquid chromatography tandem mass spectrometer ；solid phase extraction ；food ；residues罗丹明B(rhodamine B，RhB)，又称玫瑰红B，俗称花粉纸、油漆、钢铁、矿业等领域的工业染料，罗丹明B具有潜在的红["。

超高效液相色谱-串联质谱法同时检测火锅底料中罗丹明B、碱性橙2、酸性橙2和碱性嫩黄O

当代化工研究Modern Chemical Research28基础研究2020•14超高效液相色谱—串联质谱法同时检测火锅底料中罗丹明B、碱性橙厶酸性橙2和碱性嫩黄0*史新宇'梅英杰2黄锦燕2陈素燕2（1.淄博市产品质量监督检验所山东2550002.淄博市食品药品检验研究院山东255000）摘耍：采用固相萃取法同时提取、净化、富集火锅底料中罗丹明B、碱性橙2、酸性橙2和碱性嫩黄0,并建立了用超高效液相色谱-串联质谱法对四种工业色素定性定量检测的分析方法.前处理部分采用含0.1%甲酸的乙睛为提取溶剂，用饱和了正己烷的乙睛溶液去除脂肪，超声波萃取；采用固相萃取柱净化，两步洗脱；色谱部分釆用C18色谱柱(2.1mm x50mm, 1.7jjm),乙睛-0.1%甲酸水(含5mmol/L乙酸铁)为流动相进行梯度洗脱.在最优条件下：罗丹明B、碱性橙2、酸性橙2和碱性嫩黄0在相应线性浓度范围内，线性良好，相关系数M均大于0.998,四种物质餉检出限分别为0.20g g/kg. 1.0g g/kg, 1.8gg/kg, 3.1gg/kg,日内、日间相对标准偏差(n=5)均小于&0%,平均回收率为83.7%-102,4%.关键词：工业色素；火锅底料；固相萃取；超高效液相色谱-串联质谱中图分类号：0657文献标识码：ADetermination of Rhodamine B,Chrysoidine,Acid Orange2,AuramineO in Chafing Dish by Ultra Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass SpectrometryShi Xinyu1,Mei Yingjie2,Huang Jinyan2,Chen Suyan2(l.Zibo Institute of Product Quality Supervision and Inspection,Shandong,2550002.Zibo Institute of F ood and Drug Inspection,Shandong,255000)Abstract:A solid p hase extraction column clean-up and ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry(UPLC-MS/ MS)method was successfully developed f or simultaneous determination of r hodamine B,chrysoidine,acid orange2,auramine O in chafing dish.In the p re-treatment p rocess,the sample was extracted with0.1%f ormic acid-acetonitrile,removing offat by acetonitrile saturated n-hexane,ultrasonic extraction woj used;solid phase extraction column was selected to refine four analytes by two step elution.Cl8(2.1 1.7pm)column was used as phase extraction column,acetonitrile-0.1%aqueous formic acid(containing5mmol/L ammonium acetate)as the gradient eluent in chromatography tests.Under the optimized conditions:rhodamine B,chrysoidine,acid orange2and auramine O had a good linear correlation in the corresponding concentration ranges(R2>0.998).The detection limits of f our substances were0.20,1.0,1.8,3.1fig/kg,respectively.Intra-day and interday relative standard deviations(n=5)were less than8.0%respectively.The average recoveries ranged f rom83.7%to102 Key words：industrial dyes\chafing dish^solid p hase extraction^ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry民以食为天，食以安为先，食品安全重于泰山。

高效液相串联质谱法检测辣椒油中的罗丹明B

THEORY 丨理i£fiH荇高效液相串联质谱法检测辣椒油中的罗丹明B罗丹明B是一种被怀疑致癌物质，又称玫瑰红B,或碱性玫瑰精，俗称花粉红，是一种具有鲜桃红色的人工合成的染料。

辣椒油中罗丹明B的检测是日常检测项目，一般采用液相串联质谱法进行检测。

本文优化了已有方法，简洁方便地检测辣椒油中的罗丹明B。

实验部分仪器、试剂与材料ACQUITY UPLC卜Class超高效液相色谱仪、XevoTQ-S m icro电喷雾串联四级杆质谱仪；PCX柱子；乙腈，色谱纯；正己院，色谱纯；实验用水为milli-Q高纯水；罗丹明B标准溶液。

实验条件液相色谱条件：Waters ACQUITY U PLC BEH C18柱（50mmx2.1mm,1.7|im)色谱柱；柱温40°C;进样量1HL;流速为0.3mL/min;流动相A为0.1%甲酸水溶液，B为乙腈。

梯度洗脱程序为：0.00~1.00min,85%~85%A;1.00~2.00m in,85%~15%A；2.00~3.00m in,15°/o~15%A；3.00~4.00min,15%~85%A；4.00~5.00min,85%~85%A〇质谱条件：电喷雾离子源；正离子扫描；毛细管电压0.5kV;离子源温度150°C;去溶剂气500°C;去溶剂气流量（氮气）800L/h;气帘气流量50L/h;多反应监测（MRM)模式检测；罗丹明B的离子监测条件为下表所示。

物质监测离子(m/z)Conev〇lt3g6(\/)Collision energy(V)罗丹明B443.3/399.23015443.3/355.23017样品处理：取l.Og辣椒油，加入10m l含2%三氯乙酸的正己院溶液，超声萃取5min。

依次用5m l甲醇，5m丨水，5ml 甲醇活化PCX柱子。

10m丨上述正己烷提取液直接上样净化，弃去滤液。

5m l氨水甲醇溶液洗脱，收集洗脱液。

食品检测实验室质量控制与管理液相色谱-串联质谱法测定调味品中罗丹明B

FOOD INDUSTRY I THEORY 食品检测实验室质量控制与管理液相色谱-串联质谱法测定调味品中罗丹明B文王海澍王云衢鞍山市食品药品检验所罗丹明B (Rhodamine B) 又称玫瑰红B，或碱性玫瑰精，俗称花粉红，是一种具有鲜红桃色的人工合成染料，曾经用作食品添加剂，但后来实验证明罗丹明B致癌，现已不允许用作食品染色。

作为一种具有潜在的致癌、致突变性的心脏毒性的人工合成碱性荧光染料，罗丹明B在市场上被不法商贩添加于调味品如辣椒面、辣椒酱、花椒、火锅底料等中，从中牟取利益。

我国各地食品药品监督管理局曾多次对非法添加罗明丹B进行专项检查。

因此，调味品中罗丹明B的测定研究可为食品监管部门提供技术支持,在保障食品安全方面具有重大意义。

1. 仪器设备安捷伦液相色谱-质谱联用仪1260-6460（软件版本：MassHunter Version B.06.00）；SPS202F 电子天平，梅特勒-托利多（常州）称量设备系统有限公司2. 试剂及标准物质甲醇，色谱纯；甲酸（纯度88%）；罗丹明B（纯度：98.6%）lot：40815。

标准溶液配制：准确称取按其纯度折算为100%质量的标准品0.0100g，置于100mL容量瓶中，甲醇定容，配制储备液（0.1mg/mL）；中间储备液：取1mL标准储备液于100mL容量瓶中，用甲醇水（1∶1）定容，中间储备液浓度（1000ng/mL）；标准使用液：取1mL中间储备液于100mL容量瓶中，用甲醇水（1∶1）定容，配制成标准使用液（10ng/mL）;分别移取标准使用液50、100、250、500、750μL，用甲醇水（1∶1）定容1mL，配制成0.5、1、2.5、5、7.5、10 ng/mL系列标准工作液。

3. 仪器测试条件ESI源；正模式；色谱柱：C18柱，2.1mm×100mm，1.7µm；柱温：35ºC；进样量：10µL；流速0.2mL/min;梯度洗脱条件见表1。

高效液相色谱法测定食品中罗丹明B 含量的不确定度评估

科技文苑Jul 2020 CHINA FOOD SAFETY 51 引言罗丹明B（Rhodamine B）是一种具有鲜桃红色的人工合成染料，其在溶液中会发出强烈的荧光，常用于实验室中细胞荧光染色剂、有色玻璃、特色烟花爆竹等行业。

罗丹明B 曾经被用作食品添加剂，但经实验证明其存在致癌性后，已被禁止用于食品染色。

但是，时至高效液相色谱法测定食品中罗丹明B 含量的不确定度评估□ 朱晓雯付金凤常州市食品药品监督检验中心摘　要：本试验的目的是建立高效液相色谱法测定罗丹明B 的不确定度评估方法，采用食品中罗丹明B 经固相萃取、反相色谱柱分离、流动相等度洗脱、外标法定量的方法，依据《测量不确定度评定与表示》考察了称量、标准溶液配制、仪器重复测量等带入的不确定度，并对不确定度的各分量进行计算合成。

结果显示，当食品中罗丹明B 的含量为0.0052±1.81×10-4mg/kg 时，在95%的置信区间下，其扩展不确定度为1.81×10-4mg/kg（k=2）。

究其原因，测定过程中的不确定度主要来源于对照品称量、对照品溶液制备及样品定容过程。

因此得出结论，本方法对食品中罗丹明B 的含量测定具有一定的参考意义。

本研究采用高效液相色谱法[1]对食品中罗丹明B 的含量进行测定，并依据《测量不确定度评定与表示》（JJF1059.1-2012）[2]和《化学分析中不确定度的评估指南》[3]（CNAS －GL06）对食品中罗丹明B 检测的不确定度进行测量和分析，以期为食品中罗丹明B 的检测提供科学依据。

1 材料与方法1.1 材料与试剂甲醇、乙腈（色谱纯），德国默克公司；罗丹明B对照品（批号510081-201401），中国食品药品检定研究院；供试样品为花椒油（批号：2016.04.08），厂家A。

高效液相色谱- 串联质谱法测定火锅底料中的罗丹明B

108 食品安全导刊 2019年5月
2.3　市售火锅底料中罗丹明B 的检测结果
本研究按照上述方法，测定了市
售的12种火锅底料（多油型或少油型），均未检出罗丹明B，也从一定
程度上说明，目前本地区的火锅底料
食品暂无违法添加罗丹明的情况。

2.4　方法学验证
2.4.1　标准曲线
将1.3.1方法中配制的标准溶液上
机测定，以浓度为横坐标，峰面积为
纵坐标绘制标准曲线（见图2），并
计算出相关系数（r ），结果见表2。

由实验结果可知，回归方程相关系数大于0.999 9，线性关系良好。

2.4.2　回收率和精密度
在3个火锅底料样品中分别加入
低、中、高浓度的待测物，每个浓度做6个平行试验，计算加标回收率和相对标准偏差，实验结果见表3。

由实验结果可知，回收率在90.3%～97.0%，相对标准偏差在5.1%～9.3%，回收率高，重现性好，具有较高的准确性和可靠性，能满足定量检测的要求。

图1　罗丹明B 的MRM 图
图2　罗丹明B 的标准曲线
表2　回归方程及相关系数表
化合物
回归方程
相关系数r 罗丹明B Y =66 774X -16 169
0.999 9表3　回收率及精密度
化合物加标水平/μg/kg
回收率/%
相对标准偏差/%
罗丹明B
0.595.39.31.097.07.95.0
90.3
5.1。

超高压液相-质谱联用快速测定食品中罗丹明B

超高压液相-质谱联用快速测定食品中罗丹明B摘要建立食品中微量罗丹明B残留量超高压液相串联质谱检测方法。

以乙腈对样品进行提取，离心过膜后用UPLC-MS/MS对样品进行定量分析。

罗丹明B在0.5 ng/mL~50 ng/mL范围内呈良好线性关系，添加量为5.0、10.0、50.0时回收率为96.3%~100.2%，RSD在1.0%~6.2%之间，检出限为5 μg/kg。

本法快速、简单、适合实验室快速分析检测。

关键词罗丹明B；超高压液相色谱串联质谱中图分类号O657 文献标识码 A 文章编号1673-9671-(2012)051-0216-02罗丹明B（rhodamine B），俗称花粉红，分子式为C28H31ClN2O3，分子量479，是一种碱性荧光染料，由于其颜色鲜艳，不易退色，并且价格低廉作为荧光试剂已被广泛用于食品、环保、矿业和钢铁等领域。

而有关研究[1]表明，罗丹明B会引致老鼠皮下组织生肉瘤，半数致死量（大鼠，经口）500 mg/kg，美国曾对该物质进行研究，显示其具有致癌性，由于其潜在的危害性，欧盟等国已不允许使用。

目前食品中罗丹明B的检测方法主要有固相萃取-液相色谱法，凝胶色谱净化浓缩后串联质谱法。

2011年各地质监局开展了食品中违法添加罗丹明B的专项检查，建立一种快速准确的检测方法在质检日常检测工作中显得尤为重要。

本文采用有机溶剂快速提取后，用UPLC-MS/MS进行测定，外标峰面积定量，建立适用于食品中罗丹明B的检测方法。

1 材料与方法1.1 材料、试剂与仪器罗丹明B标准品（Rhodamine B，CAS号：81-88-9，C28H31ClN2O3，纯度≥99.0%）；甲醇、甲酸、乙腈（均为色谱纯）Merck公司。

Waters PDA TQD高效液相色谱串联质谱仪（配超高效液相色谱系统，包括四流路二元泵、自动进样器、柱温箱、电喷雾离子源（ESI）、三重四级杆质量分析器）美国Waters公司；MultiReax振荡混匀器，Heielolph公司；Allegra X-22R冷冻离心机，美国贝克曼库尔特公司；0.22 μm针式过滤器等。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产调味品中的罗丹明B、结晶紫和孔雀石绿

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产调味品中的罗丹明B、结晶紫和孔雀石绿张贞理;张平;申大忠【期刊名称】《分析化学》【年(卷),期】2012(040)003【摘要】1 引言罗丹明B常被违法用于调味品的染色,孔雀石绿和结晶紫因具有消毒和杀菌作用而常被违法应用于水产品养殖中.三者结构类似,都具有高毒、高残留和致癌、致畸、致突变等特点,色谱分离较难,且由于食品基质复杂,对质谱检测影响较大.目前,单独检测3种物质的方法分别有高效液相色谱法[1]、气相色谱-质谱法[2]、液相色谱-质谱法[3]和液相色谱-串联质谱法[4],未见有应用固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法对复杂食品基质中上述3种物质同时测定的报道.%A method was developed for the simultaneous determination of rhodamine B, crystal violet and malachite in aquatic flavourings based on solid phase extraction-ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry. The samples were extracted with acetonitrile-buffer, partitioned against methylene dichloride and then cleaned up by a solid phase extraction cartridge. The target analytes were separated on a BEH C18 column with gradient elution using acetonitrile and water (containing 0. 2% (V/V) formic acid) as mobile phases. The linear ranges were from5×10-4 to 1 mg/L with the limits of detection of 0. 18-0. 48μng/kg. The recoveries of the method were 90. 7% -96.8%, 78. 4% -90.3%, 78. 6% -88. 9%, respectively.【总页数】2页(P487-488)【作者】张贞理;张平;申大忠【作者单位】山东师范大学化学化工与材料科学学院,济南250014;淄博市产品质量监督检验所,淄博255063;山东师范大学化学化工与材料科学学院,济南250014;山东师范大学化学化工与材料科学学院,济南250014【正文语种】中文【相关文献】1.高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物的含量 [J], 刘谦;刘丽丽;吴新欣;李熙2.高效液相色谱-四极杆串联线性离子阱质谱法测定水产品及饲料中的孔雀石绿、结晶紫及其代谢物 [J], 赵善贞;周瑶;盛永刚;张旖;谌鸿超;邓晓军3.超高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留量[J], 郑香平;吴文凡;赵建晖;陈志涛;陈春添;郑字4.超高效液相色谱-串联质谱法测定鱼中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留量 [J], 周贻兵;吴坤;刘利亚;王娅芳;李磊;林野5.同位素稀释超高效液相色谱串联质谱法测定水产品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留量的不确定度评定 [J], 刘柱; 徐潇颖; 赵超群; 陈万勤; 梁晶晶; 毛思浩; 华颖因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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超高压液相-质谱联用快速测定食品中罗丹明B
摘要建立食品中微量罗丹明B残留量超高压液相串联质谱检测方法。

以乙腈对样品进行提取，离心过膜后用UPLC-MS/MS对样品进行定量分析。

罗丹明B在0.5 ng/mL~50 ng/mL范围内呈良好线性关系，添加量为5.0、10.0、50.0时回收率为96.3%~100.2%，RSD在1.0%~6.2%之间，检出限为5 μg/kg。

本法快速、简单、适合实验室快速分析检测。

关键词罗丹明B；超高压液相色谱串联质谱
中图分类号O657 文献标识码 A 文章编号1673-9671-(2012)051-0216-02
罗丹明B（rhodamine B），俗称花粉红，分子式为C28H31ClN2O3，分子量479，是一种碱性荧光染料，由于其颜色鲜艳，不易退色，并且价格低廉作为荧光试剂已被广泛用于食品、环保、矿业和钢铁等领域。

目前食品中罗丹明B的检测方法主要有固相萃取-液相色谱法，凝胶色谱净化浓缩后串联质谱法。

2011年各地质监局开展了食品中违法添加罗丹明B的专项检查，建立一种快速准确的检测方法在质检日常检测工作中显得尤为重要。

本文采用有机溶剂快速提取后，用UPLC-MS/MS进行测定，外标峰面积定量，建立适用于食品中罗丹明B的检测方法。

1 材料与方法
1.1 材料、试剂与仪器
罗丹明B标准品（Rhodamine B，CAS号：81-88-9，C28H31ClN2O3，纯度≥99.0%）；甲醇、甲酸、乙腈（均为色谱纯）Merck公司。

1.2 标准储备液及工作液的配制
准确称取适量罗丹明B标准品，用乙腈配制成质量浓度为100 μg/mL的标准储备液。

此溶液在0℃～4℃避光保存，可使用3个月。

标准工作溶液：取适量标准溶液配制成浓度为1.0 ng/mL，5.0 ng/mL，10.0 ng/mL，25.0 ng/mL，50.0 ng/mL，100 ng/mL的工作曲线溶液，避光保存。

1.3 液相色谱-质谱条件
色谱柱：Acquity UPLC BEH C18柱（2.1 mm×50 mm，1.7 μm）；柱温：30℃；流动相A：甲醇（含0.1%甲酸溶液），流动相B：水（含0.1%甲酸溶液）梯度洗脱程序见表1；流速：0.25 mL/min；进样量：5 μL；离子源：电喷雾离子源（ESI）；扫描方式：正离子；检测方式：多反应监测（MRM）；毛细管电压：3.0 kV；离子源温度：130℃；脱溶剂气温度：400℃；锥孔气流量（氮气）：50 L/h；脱溶剂气流量（氮气）：600 L/h；碰撞气压力（氩气）：0.18 mL/min；定性离子对、定量离子对、锥孔电压、碰撞能量、驻留时间见表2。

1.4 样品前处理
称取2.0样品于50 mL离心管中，准确加入10 mL乙腈，于振荡混匀器上混
匀振荡30 min，于8000 r/min离心10 min，上清液过
0.22 μm微孔滤膜后直接进样。

2 结果与分析
2.1 提取方法的优化
在前处理方法的试验过程中，首先采用了固相萃取方法，选择了OASIS 的HLB小柱，菲罗门的C18小柱，其回收率在70%-128%之间，回收率不稳定且方法繁琐。

同时我们采用了GPC作为净化手段，样品经过净化后杂质减少，但是处理一个样品耗时长，有机试剂量大，不适用于日常工作中大批量样品的快速分析，后我们采用乙腈直接提取，通过高速离心去掉大部分杂质，方法回收率好，操作简单快速。

2.2 色谱质谱条件的确立
通过梯度洗脱程序优化，罗丹明B保留时间为2.0 min，峰形对称尖锐；通过对质谱参数的优化，确定了最佳实验参数，罗丹明B标准品的色谱图见图1。

2.3 线性范围和检出限
配制罗丹明B质量浓度为0.5、1、2、5、10、50 ng/mL的标准溶液，测定峰面积，以质量浓度为横坐标、峰面积为纵坐标，绘制标准溶液的工作曲线，在0.5 ng/mL～10 ng/mL质量浓度范围内，标准品质量浓度与峰面积值均有良好的线性关系。

本方法的检出限为5 μg/kg，满足国家风险监测中对罗丹明B检测的限量要求。

2.4 加标回收率和测定精密度
取空白辣椒样品，加入不同浓度的标准品做加标回收试验，分别添加 5.0 μg/kg、10.0 μg/kg、50.0 μg/kg三个不同水平质量浓度，每个添加水平做6个平行样品，表3数据表明该方法测定罗丹明B精密度和回收率良好。

3 结论
使用乙腈对样品中的罗丹明B进行提取后用UPLC-MS/MS进行分析，样品前处理简单快速，方法回收率好检测限低，有利于监督部门开展大量的日常检测工作。

参考文献
[1]吴云龙,熊玉峰,房晖.一种潜在的激光制冷介质-罗丹明B掺杂PMMA[J].功能材料与器件学报,2004,10(2):383-396.
[2]陈国珍,黄贤智,郑朱梓等.荧光分析法(第二版)[J].北京:科学出版社,1990:69.
[3]黄亮.固相萃取-液相色谱法测定食品中罗丹明B[J].食品工业,2011,8:114-116.
[4]程慧,李兵,占春瑞.腊肠中罗丹明B的高效液相色谱串联质谱检测方法[J].食品科学,2010,31(4):223-225.。