银杏花粉粗多糖脱色工艺研究
银杏叶多糖提取、纯化及其含量的测定
银杏叶多糖提取、纯化及其含量的测定【摘要】目的研究银杏叶多糖的提取纯化及含量测定。
方法通过对不同的提取次数、固液比及提取时间等实验，以及对粗多糖纯化的研究，确立各因素条件，采用苯酚-硫酸法测定其多糖含量。
结果各因素条件为浸提温度80℃，提取时间3 h，固液比1∶30，提取2次，用活性炭纯化。
由此得银杏叶中粗多糖的得率为12.2%，纯化后的多糖得率为9.8%。
测定提取的粗多糖中多糖含量为35.7%，纯化后的多糖含量为43.3%，多糖含量测定相对标准偏差小于3.0%。
结论该方法纯化效果好，测定重现性好，得出银杏叶中多糖含量为4.3%。
【关键词】银杏叶多糖提取纯化多糖测定Abstract:ObjectiveThe extraction and purification methods for polysaccharide in Gingko leaves were studied and the content of polysaccharide in it was determined.MethodsThe condition of each factor for extraction and pruification from the leaves of Gingko was established through the experiments of extraction times， different ratios of material to extraction solvent and extraction time.The method of phenol-sulfuric acid was applied to determination of the content of the polysaccharide.ResultsThe conditions of the factors were extraction temperature 80℃，extraction time 3h，material to extraction solvent1:30 ，extraction 2 times and activated carbon for purification.Raw polysaccharide in gingko leaves was 12.2%，the polysaccharide after prurified was 9.8%， the content of polysaccharide in the raw polysaccharide was 35.67%，and in the pure one was 43.32%，ConclusionThe purification method is efficient and stable. The content of polysaccharide in gingko leaves is 4.3%.Key words:Ginkgo leaves； Polysaccharide； Extraction；Purification； Determination of polysaccharide多糖又称多聚糖（polysaccharide），是构成生命活动的四大基本物质之一，不仅是机体主要供能物质，同时还具有多种多样的生物学功能，在生命活动中参与了细胞的各种活动。
判断银杏多糖提取工艺的优良
判断银杏多糖提取工艺的优良,可以从以下几个方面考虑: ①银杏多糖的得率。
②所提粗银杏多糖的含糖量。
③整个工艺流程是否经济。
④保持所提的银杏多糖具有活性。
1 水煮醇沉法多糖的提取通常采用水煮醇沉的常规方法。
银杏(包括银杏叶、白果和外种皮)中多糖提取一般先用石油醚脱脂，再经热水提取乙醇沉淀得多糖。
多糖加水复溶，透析去除小分子化合物，再去蛋白、醇沉可得粗多糖。
1.1银杏多糖的提取100g烘干粉碎银杏叶于索氏提取器中用石油醚(沸程30～60℃和60～90℃)连续抽提至无色[2]，风干后分三次加入3000ml 水，90℃浸提6h。
合并滤液，90℃恒温蒸发浓缩至过滤液原体积的30%。
浓缩液3000r/min 离心15min，上清液加入3 倍体积95% 乙醇沉淀多糖。
多糖沉淀加水复溶，透析、S e v a g 法去蛋白。
样液再以4倍体积9 5 % 乙醇沉淀多糖，最后经无水乙醇脱水，丙酮、乙醚洗涤，得灰白色银杏叶多糖粉末S e v a g 法去蛋白法操作步骤：取干燥银杏粗多糖6份，每份10g,加入10ml蒸馏水溶解，配置成溶液。
按氯仿：正丁醇为5：1配置S e v a g,试剂，多糖溶液与S e v a g,试剂按5：1混合后，剧烈震荡20min,使蛋白质变质而生成凝胶物，2000r/min离心10min中后除去两相界面处的蛋白质。
分别操作0 1 2 3 4 5次，收集上层滤液，用乙醇醇沉至含水量为80%，4℃静置24小时后，离心收集沉淀，真空干燥，即得到去蛋白后的银杏多糖。
1.2不同溶剂提取银杏多糖的比较称取处理的当归20 g 3份,分别加入溶剂0. 3 mol/L的盐酸、0. 3 mol/L的氢氧化钠,蒸馏水各10 mL,浸泡1. 5 h,于恒温水浴下回流1. 5 h,提取2次,过滤,合并滤液离心,取上清,减压浓缩至30 mL ,加95%的乙醇使最终乙醇浓度为75% ,静置一夜,抽滤取沉淀,将沉淀用无水乙醇,乙醚,丙酮洗涤,干燥得银杏多糖粗品。
银杏果多糖树脂脱色工艺
装柱体积 1BV，配制 2 mg / mL 的脱蛋白后的多 糖溶液 1BV 上样，选择上样速度为 0. 5，l，1. 5，2. 0， 2. 5 mL / min，再用 2BV 的蒸馏水淋洗，合并多糖脱色 液和洗脱液，分别测其多糖、色素、蛋白质的含量，考 察上样流速对吸附效果的影响。 1. 3. 3. 2 上样浓度对脱色效果的影响
在上柱速度为 1. 5 mL / min，上柱浓度为 4 mg / mL 条件下，考察脱色 1 号的柱容量。 1. 3. 4 分析方法 1. 3. 4. 1 多糖测定及保留率的计算
1 材料与方法
1. 1 实验材料 银杏 果 多 糖 （ 实 验 室 提 取） ； 脱 色 1 号、D900、
D101、HD-8、NKA9、DA-201、AB-8、S-8 型 大 孔 树 脂 （ 沧州宝恩吸附材料科技有限公司） 。 1. 2 仪器设备
7200 型分光光度计（ 尤尼柯（ 上海） 仪器有限公 司） ； JD200-2 型电子天平（ 北京塞多利斯仪器有限公 司） ； 数显式恒温水浴锅（ 常州国华电器有限公司） ； TDL-5-A 型离心机（ 上海安亭科学仪器厂） ； SHB-Ⅲ
25、35、45℃ 的恒温振荡箱中振荡 2 h（ 120 r / min） ， 振荡结束后，滤纸过滤多糖溶液，溶液经 5 000 r / min 离心 20 min 后，考察不同树脂对提取液的脱色率、总 糖保留率和蛋白质去除率பைடு நூலகம் 1. 3. 3 动态吸附实验 1. 3. 3. 1 上柱速度对脱色效果的影响
银杏多糖的研究进展
银杏多糖的研究进展仰榴青１，徐佐旗２，吴向阳２，刘 倩２，陈 钧２，刘 洁２（１．江苏大学药学院，江苏 镇江 ２１２００１；２．江苏大学生物与环境工程学院，江苏 镇江 ２１２０１３）摘 要：银杏多糖是一类具有重要生理和药理活性作用的功能活性成分，是目前研究的热点之一。
本文对银杏多糖的提取、分离纯化、定性定量分析、活性研究和临床应用等最新进展进行综述，并指出存在问题和今后研究的主要方向。
关键词：银杏；多糖；综述Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｎ Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｆｒｏｍ Ｇｉｎｋｇｏ ｂｉｌｏｂａ ＬＹＡＮＧ Ｌｉｕ－ｑｉｎｇ１，ＸＵ Ｚｕｏ－ｑｉ２，ＷＵ Ｘｉａｎｇ－ｙａｎｇ２，ＬＩＵ Ｑｉａｎ２，ＣＨＥＮ Ｊｕｎ２，ＬＩＵ Ｊｉ１（１．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｊｉａｎｇｓｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｅｎｊｉａｎｇ， ２１２００１，Ｃｈｉｎａ；２．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｊｉａｎｇｓｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｅｎｊｉａｎｇ， ２１２０１３，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ ：Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｆｒｏｍ Ｇｉｎｋｇｏ ｂｉｌｏｂａ Ｌ ａｒｅ ａ ｋｉｎｄ ｏｆ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｗｈｉｃｈ ｈａｖｅ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ， ａｎｄ ｔｕｒｎ ｉｎｔｏ ｏｎｅ ｏｆ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｆｏｃｕｓｅｓ． Ｔｈｅ ｌａｔｅｓｔ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ， ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ， ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ ａｎｄ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ａｎａｌｙｓｉｓ， ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｆｒｏｍ Ｇｉｎｋｇｏ ｂｉｌｏｂａＬ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｓｕｍｍａｒｉｚｅｄ． Ｔｈｅ ｐｒｏｂｌｅｍｓ ａｔ ｐｒｅｓｅｎｔ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｄｉｒｅｃｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ ｆｕｔｕｒｅ ｏｎ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｆｒｏｍ Ｇｉｎｋｇｏ ｂｉｌｏｂａＬ ｈａｖｅ ｂｅｅｎ ｐｕｔ ｆｏｒｗａｒｄ．Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｇｉｎｋｇｏ ｂｉｌｏｂａ Ｌ；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ；ｓｕｍｍａｒｙ中图分类号：Ｒ２８４．２；Ｒ２８５．５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２－６６３０（２００４）１１－０３７２－０４收稿日期：２００４－０７－１２作者简介：仰榴青（１９６５－），女，副教授，博士，主要从事天然产物化学和中药新药开发研究。
银杏果外种皮多糖的脱色工艺及抗氧化活性研究
银杏果外种皮多糖的脱色工艺及抗氧化活性研究作者：赵浩晨王婉婷雷佳美徐艳来源：《江苏农业科学》2020年第10期摘要：以银杏果肉质外种皮为原料，采用水提醇沉法提取其水溶性多糖。
以过氧化氢为脱色剂，多糖脱色率和保留率为指标，脱色时间、脱色温度、pH值和过氧化氢体积分数为试验因素，进行单因素试验，以确定影响脱色的因素及其水平，采用L9（34）正交设计进行优化试验。
采用1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）法、还原力测定法对多糖进行抗氧化活性检测。
结果表明，脱色温度为 60 ℃，脱色时间为1 h，pH值为8，过氧化氢加入量为8%时脱色效果最佳。
抗氧化测定结果表明，银杏外种皮多糖具有良好的抗氧化活性，脱色后抗氧化活性略有降低。
关键词：银杏果;外种皮;过氧化氢;脱色;多糖;抗氧化活性中图分类号： R284.2 ;文献标志码： A ;文章编号：1002-1302（2020）10-0228-04收稿日期：2019-04-09基金项目：沈阳农业大学大学生科技创新項目（编号：201810157338）。
作者简介：赵浩晨（1996—），男，辽宁抚顺人，主要从事生物工程研究。
E-mail：99644880@。
通信作者：徐艳，博士，讲师，主要从事天然产物活性研究。
E-mail：1472105886@。
银杏（Ginkgo biloba L.）果，俗称白果，其营养非常丰富，在许多国家和地区均有大量分布，自古以来被当作营养丰富的高级滋补品[1]。
目前，对银杏叶和果的研究已取得了很多进展[2-4]，但对银杏果果外种皮的研究还较少。
银杏果外种皮是银杏种子硬壳外面的肉质部分，长期以来被作为废物丢弃，既浪费了资源，又污染了环境[5]。
据统计，我国每年约有3万t外种皮作为废物被丢弃。
近几年的研究表明，银杏外种皮具有多方面药理活性，有较高的利用价值[6]。
银杏外种皮含有多种化合物，包括多糖、酚酸、黄酮、银杏内酯等[7-9]。
其中，多糖含量最高，且具有抗氧化、抑菌、增强免疫力等多种生物活性[10-11]。
银杏落叶粗多糖除蛋白方法的筛选及优化
银杏落叶粗多糖除蛋白方法的筛选及优化王筱瑜;季子非;萨日娜;耿丽晶;周围【摘要】本文以除蛋白率和多糖损失率为指标,比较了Sevage法、TCA法、等电点法和酶法清除银杏落叶粗多糖中蛋白的效果,筛选出最优除蛋白方法,并寻求银杏落叶粗多糖除蛋白的最佳工艺.结果表明,酶法和等电点法都为除蛋白较好方法,并优化酶-等电点结合法除蛋白的最佳工艺条件为:酶添加量为0.90％(以底物计算),酶解时间为1.1 h,酶解温度46℃,酶解pH为4.7.在此条件下,除蛋白率92.73％±0.13％,多糖损失率9.28％±0.12％.此方法除蛋白率较高,多糖损失率较低,为多糖在食品领域中的利用提供实验依据.【期刊名称】《食品工业科技》【年(卷),期】2019(040)010【总页数】6页(P232-237)【关键词】银杏落叶;除蛋白;工艺优化;酶-等电点结合法【作者】王筱瑜;季子非;萨日娜;耿丽晶;周围【作者单位】锦州医科大学食品科学与工程学院,辽宁锦州121001;锦州医科大学食品科学与工程学院,辽宁锦州121001;锦州医科大学食品科学与工程学院,辽宁锦州121001;锦州医科大学食品科学与工程学院,辽宁锦州121001;锦州医科大学食品科学与工程学院,辽宁锦州121001【正文语种】中文【中图分类】TS255银杏叶是银杏科银杏树的叶。
银杏树是古老的树种之一,世界上70%的银杏资源分布在我国[1]。
目前,已经从银杏叶中发现了140多种化学成分[2],这说明银杏叶存在很大的开发潜力。
目前,我国每年有大量的银杏落叶被燃烧处理,不但浪费资源,而且污染环境,如若将其有效成分提取出来,运用到医药、食品等行业中,将对人类生活有较大意义。
银杏多糖是银杏叶中的一种有效成分,其可从银杏叶、果和外种皮中提取,具有抗肿瘤、调节免疫、降血脂[3]、抗炎[4]、抗氧化[5]等功能。
姚鑫[6]的研究表明,银杏落叶中的多糖含量高于其他时期,而影响银杏落叶中的多糖提取率的主要影响因素是提取过程中蛋白的去除效果。
银杏多糖、提取纯化方法及其作为烟草保润剂的应用[发明专利]
![银杏多糖、提取纯化方法及其作为烟草保润剂的应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/d46dd5b677232f60ddcca1e9.png)
专利名称：银杏多糖、提取纯化方法及其作为烟草保润剂的应用
专利类型：发明专利
发明人：陈芝飞,孙志涛,王文领,芦昶彤,杨峰,郝辉,宋金勇
申请号：CN201410292783.5
申请日：20140626
公开号：CN104031160A
公开日：
20140910
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一种银杏多糖及其提取纯化方法，具体为：将粉碎过的干燥银杏用乙醚索氏提取后，残渣挥干再用沸水进行提取，沸水提取液浓缩、离心，取上清液醇沉静置，再次离心收集沉淀物，洗涤后用蒸馏水溶解，再加入1－2‰的木瓜蛋白酶于50±5℃水浴中放置2－4h，采用Sevage法脱除蛋白，活性炭脱色后减压浓缩，冷却后进行流水透析，透析结束后再次醇沉静置，沉淀于60－70℃干燥得粗多糖。
试验证明：本发明银杏多糖对卷烟具有很好的物理和感官保润作用，并且可以降低卷烟的刺激性和杂气，提高卷烟烟气的圆润感和舒适性，可作为一种性能优良的烟草保润剂在卷烟中应用。
申请人：河南中烟工业有限责任公司
地址：450000 河南省郑州市农业东路29号
国籍：CN
代理机构：郑州联科专利事务所(普通合伙)
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银杏果实(白果)多糖提取工艺优化及其抑菌活性分析
江苏农业学报(Jiangsu J.qfAgr.Sci.),2020,36(6)：1551~1558http：//1551吴海霞，田志芳.银杏果实(白果)多糖提取工艺优化及其抑菌活性分析[J].江苏农业学报,2020,36(6)：1551-1558.doi：10.3969/j.issn.1000-4440.2020.06.027银杏果实(白果)多糖提取工艺优化及其抑菌活性分析吴海霞1,田志芳2(1.运城学院生命科学系/特色农产品加工山西省重点实验室，山西运城044000； 2.山西省农业科学院农产品加工研究所,山西太原030031)摘要：以银杏(Ginkgo biloba L.)果实(白果)为原料，利用响应面分析法优化白果多糖的提取工艺，并分析白果多糖的抑菌活性。
以多糖得率为指标，通过单因素试验及响应面分析，探讨液料比、提取温度及提取时间等因素对白果多糖得率的影响，从而建立白果多糖的提取工艺模型,得出其最佳提取工艺条件;结合牛津杯法及二倍稀释法,分析白果多糖的抑菌活性及最小抑菌质量浓度。
结果表明，白果多糖的最佳提取工艺条件如下:液料比45ml: 1g,95t浸提3.Oh,在该条件下多糖得率为19.67%。
抑菌试验结果表明，白果多糖对细菌有一定的抑制活性，对枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis)的抑制活性最强，最小抑菌质量浓度为2.50mg/ml;白果多糖对大肠杆菌(Escherichia coli)的抑制活性也较强，当白果多糖质量浓度为15.00mg/ml时，抑菌圈直径约为2.25cm；白果多糖对真菌几乎无抑制活性,因而不具有广谱抑菌活性。
关键词：银杏果实(白果)；多糖；响应面分析；抑菌活性中图分类号：S792.950.1文献标识码：A文章编号：1000-4440(2020)06-1551-08Optimization of extraction technology of polysaccharides from Ginkgo biloba L.fruit(Ginkgo biloba seed)and antibacterial activityWU Hai-xia1,TIAN Zhi-fang2(1.Department of Life Science,Yuncheng University/Shanxi Key Laboratory qf Characteristic Agro-Products Processing,Yuncheng044000,China； 2.Institute of Agro-Products Processing,Shanxi Academy of Agricultural Sciences,Taiyuan030031,China)Abstract:Ginkgo biloba seed was used as raw material,the conditions of extracting polysaccharides were optimized based on response surface method(RSM),and the antibacterial activity was studied.The yield of polysaccharide was used as the index,single factor tests and RSM were performed to study the effects of liquid-to-solid ratio,extraction temperature and extraction time on polysaccharide yield.The mathematical model of polysaccharides extraction was established,and the optimum extraction conditons were obtained.The antibacterial activity and minimum inhibitory concentration of polysaccharides were analyzed by Oxford cup method and double dilution method.The results showed that the optimum extraction con-收稿日期：2020-05-18基金项目：山西省高等学校科技创新项目(2019L0865)；山西省“1331”工程重点学科项目(098-091704)；运城学院博士科研启动项目(YQ-2017010)；运城学院学科群学科研究项目(XK-2018001、XK-2019034)；特色农产品加工山西省重点实验室开放课题项目；山西省重点研发计划重点项目(201903D211006)作者简介:吴海霞(1980-),女，山西河津人,博士，副教授，主要研究方向为植物活性成分及其构效关系。
银杏花粉粗多糖脱色工艺研究
银杏花粉粗多糖脱色工艺研究
郝功元;吴彩娥;杨剑婷;贾韶千;徐文斌
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2009(030)014
【摘要】为优选银杏花粉粗多糖的脱色材料,以多糖保留率和脱色率为考察指标,通过比较聚酰胺、树脂、粉末活性炭和颗粒活性炭四种不同的脱色剂的脱色效果,选择一种较好的脱色剂进行单因素和正交试验.结果表明:颗粒活性炭优于其他3种脱色剂,通过正交试验法研究脱色条件,颗粒活性炭脱色最佳工艺参数为脱色时间4h、脱色温度50℃、脱色剂用量0.15g/ml.
【总页数】4页(P136-139)
【作者】郝功元;吴彩娥;杨剑婷;贾韶千;徐文斌
【作者单位】南京林业大学森林资源与环境学院,江苏,南京,210037;南京林业大学森林资源与环境学院,江苏,南京,210037;南京林业大学森林资源与环境学院,江苏,南京,210037;南京林业大学森林资源与环境学院,江苏,南京,210037;南京林业大学森林资源与环境学院,江苏,南京,210037
【正文语种】中文
【中图分类】S789.9
【相关文献】
1.银杏果多糖树脂脱色工艺 [J], 杨强;李新华;林子木
2.银杏外种皮粗多糖提取工艺研究 [J], 吴向阳;茆广华;仰榴青;吴静波;朱小宦
3.松花粉多糖的活性炭脱色方法 [J], 陈红剑;黄勇
4.银杏果外种皮多糖的脱色工艺及抗氧化活性研究 [J], 赵浩晨; 王婉婷; 雷佳美; 徐艳
5.黑果腺肋花楸果粗多糖提取及脱色工艺 [J], 于淼;谢春阳;姚成龙;高尊
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不同因子对银杏多糖提取率的影响
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五、结论
• (1) 在银杏叶多糖的水提醇沉的工艺中,温度是 影响银杏叶多糖提取率的主要因素, 其次为提取 时间和料液比, 银杏叶多糖水提醇沉的最佳工艺 条件为提取2次, 每次2小时, 提取温度为90℃, 采用苯酚- 硫酸法测定银杏叶中多糖提取率为 5.09%。 • (2) 本研究主要是采用正交实验分析结果, 正交 实验是研究多因素、多水平的一种设计方法, 它 能够在因素变化范围内均衡抽样, 并且使每次实 验都具有较强的代表性。
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二、正交试验
A 料液比 1 1 1 2 2 2 3 3 3 3.977 3.260 3.790 0.717 因素 B 时间(h) 1 2 3 1 2 3 1 2 3 3.447 4.367 3.213 1.154 C 温度(℃) 1 2 3 2 3 1 3 1 2 2.857 4.397 3.730 1.540
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(3)本实验采用苯酚- 硫酸法测定银杏叶多糖的含量, 在测 含量时要注意“浓硫酸”加入要足量, 因为该反应的原 理是多糖或寡糖被浓硫酸在适当高温下水解, 产生单糖, 并迅速脱水成糖醛衍生物, 该衍生物在强酸条件下与苯 酚起显色反应。如果浓硫酸加入量不足, 会使水解不完 全, 单糖不能充分释出; 但加入量也不能过多, 如果加 入过多, 会使释出单糖或衍生物被部分破坏, 影响含量 测定。
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3 正交试验设计 根据单因素试验结果，以多糖提取率为考察指标， 选取料液比、浸提温度、浸提时间三项作为考察 因素，各取三个水平，进行L9(33)正交试验设计， 以确定银杏粗多糖提取的最优工艺条件，因素水 平表如下
水平
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银杏外种皮多糖的研究进展.
中性盐、三氯醋酸
茚三酮反应蓝紫色 280nm紫外光谱吸收峰
红外光 谱检测显示 该多糖构型 为α-呋喃 糖糖苷键构 型，且含酰 胺键；
GBEP红外光谱图
滤纸：新华1号层析滤纸
层析时间：4h
溶剂：正丁醇：冰醋酸：水 =4∶1∶5； 正丁醇：吡啶：水=3∶2∶1.5 显色剂：苯胺-邻苯二甲酸。
粉红色斑点：木糖、阿拉伯糖
5 GBEP的药理作用研究
5.1免疫促进作用 5.2抗衰老作用 5.3对恶性肿瘤的影响 5.4抗炎作用
5.1免疫促进作用
机体的免疫功能尤其是T淋巴细胞介 导的细胞免疫功能状态与恶性肿瘤的发 生及转移有着密切的关系。 资料表明：进行性肿瘤患者的T淋巴 细胞数量及功能均低于正常。GBEP腹腔 注射和（或）灌胃给药，可促进正常小 鼠和荷瘤（皮下接种S180，下同）ICR小 鼠特异性体液和细胞免疫功能以及非特 异性免疫功能，这对防癌抗癌是有积极 意义的。
研究发现用GBEP给荷瘤小鼠、环磷酰胺 （CTX）抑制小鼠及正常小鼠灌胃给药，检测小 鼠血清SOD及MDA含量，发现GBEP可明显提高荷瘤 小鼠血清SOD活性，并能降低MDA含量，也能改善 CTX抑制小鼠的上述指标，但对正常小鼠无明显 影响，表明GBEP有促进机体在病理状态下的自由 基清除能力。 同时GBEP可延长小鼠游泳时间及缺氧时的存 活时间，并能对抗CTX所抑制的小鼠迟发型皮肤 超敏反应（DCH），提高CTX所抑制的小鼠IL-2活 性，表明可增强免疫抑制状态小鼠的免疫功能， 提示GBEP可延长小鼠的衰老。
3 GBEP的成分分析
3.1 GBEP的定性分析 3.1.1理化性质 3.1.2纸层析 3.2 GBEP的定量分析
3.1.1理化性质
XT-4熔点测定仪
银杏叶中水溶性多糖的提取及抗氧化活性试验
银杏叶中水溶性多糖的提取及抗氧化活性试验摘要：采用水溶醇沉的方法从银杏叶中提取水溶性多糖。
通过正交试验得到的最优提取条件为料液比1：30，80℃浸提 3.5h。
在此提取条件下干物质提取率为9.025%，并且多糖占提取物的20.9%，占银杏叶的1.887%。
对提取物的抗氧化活性进行试验。
多糖浓度为4.18ug/ml、8.36ug/ml和4.18ug/ml时，相应浓度的提取物对羟自由基、DPPH和超氧自由基的清除率分别为64.05%、17.62%和11.8%。
但是与多糖浓度相同时，抗坏血酸对羟自由基、DPPH和超氧自由基的清除率分别为9.15%、5.76%和5.72%。
关键词：多糖提取条件抗氧化活性银杏叶引言羟自由基和超氧自由基是生物体内主要的不稳定的氧自由基，它们是造成机体老化和组织损伤的主要原因，并且对许多疾病的发生变化产生影响。
近年来，研究表明，植物多糖对自由基具有一定的抗氧化作用。
银杏是一种古老而又珍贵的树木，被誉为“活化石”。
在中国，银杏叶被作为中草药治疗哮喘已有几千年了。
现代研究表明，银杏叶具有降血压，扩张周边血管，增加毛细血管和静脉血液流向头部，改善血液粘稠性，减少脑神经元的氧化代谢，和清除自由基的作用。
此外，银杏树已经显示出极强的适应能力：它是在广岛原子弹爆炸之后，爆炸中心第一种生长发芽的绿色植物。
用丙酮和水从银杏叶中得到的包含24%黄酮苷的提取物被命名为EGb761，在药理作用方面的推广使用已经有几十年了。
这些研究主要着眼于叶子中黄酮和萜类物质的组成成分。
在本实验中，以水作为萃取溶剂，以乙醇作为沉淀剂，从银杏叶中提取包含多糖的提取物，并且对该物质对于羟自由基，超氧自由基和DPPH的抗氧化火星进行研究。
材料与方法多糖的提取银杏叶，2006年10月初采自中国大连民族学院，取2g银杏叶干粉，用水浸提，在浓缩液中加入五倍体积的乙醇，沉淀得到多糖。
基于前人的研究，以正交试验优化提取条件。
采用苯酚硫酸法于481nm下测定提取物中多糖含量。
银杏叶多糖的制备研究报告
银杏叶多糖的制备研究报告银杏叶多糖的制备研究报告摘要本研究通过对银杏叶的提取和脱脂处理，得到银杏叶粉末。
然后采用多糖提取方法，利用醇沉法、无水乙醇沉淀法和醚萃取法，制备了银杏叶多糖。
通过分析研究了不同参数对多糖得率和含量的影响，并对多糖进行了理化性质和抗氧化活性的测定。
结果显示，最佳提取条件为醇沉法：提取时间为3小时、提取温度为60℃、提取液浓度为1:30、提取次数为3次，多糖得率为16.5%、含量为58.2%。
同时，银杏叶多糖具有良好的理化性质和抗氧化活性，具有很大的应用潜力。
引言银杏树（Ginkgo biloba）是一种古老的树种，鲜叶中含有丰富的多糖物质。
银杏叶多糖是一种具有多重保健功效的天然生物活性物质，被广泛应用于食品、医药和化妆品等领域。
因此，研究银杏叶多糖的制备方法和性质具有一定的理论和实用价值。
材料与方法1. 材料•银杏叶：新鲜银杏叶收集于当地银杏园，洗净晾干；•乙醇：优质纯度乙醇；•氯仿：优质纯度氯仿；•硫酸：优质纯度硫酸；•各种实验仪器：如醇沉提取仪、离心机、旋转蒸发仪等。
2. 银杏叶多糖的制备1.银杏叶粉末制备：将银杏叶干燥研磨成粉末；2.醇沉法提取：取一定量的银杏叶粉末，加入一定比例的乙醇，在恒温水浴中进行醇沉提取，调节提取时间、温度和液固比等参数；3.无水乙醇沉淀法：将醇沉提取得到的液体通过旋转蒸发仪获得浓缩液，然后添加无水乙醇，并利用溶剂的变化进行多糖的沉淀；4.醚萃取法：将多糖沉淀用氯仿进行醚萃取，去除杂质；5.干燥和粉碎：将醚萃取得到的多糖用旋转蒸发仪获得粉末状的多糖。
3. 多糖的理化性质测定1.多糖含量测定：采用石蜡法检测多糖含量；2.多糖分子量测定：采用凝胶渗透色谱法检测多糖分子量；3.多糖溶解性测定：采用不同溶剂进行多糖的溶解性测定。
4. 多糖的抗氧化活性测定1.D PPH自由基清除能力测定：采用DPPH法测定多糖对自由基的清除能力；2.还原力测定：采用还原力法测定多糖的还原力；3.超氧化物歧化酶（SOD）活性测定：采用显色法测定多糖的SOD活性。
银杏叶渣中多糖的提取及其抗氧化活性研究_吴巧攀
2.2 2.2.1
多糖提取条件的选择 提取时间的选择 取银杏叶渣 10 g，3 份，
置 250 mL 圆底烧瓶中，加入 70 mL 水，分别提取 1，2，3 h。过滤，定容至 250 mL。按“2.1”项下 方法测定多糖含量，结果见图 1。
[1]
[2]
图 1 提取时间对多糖提取率的影响 Fig 1 Effect of extraction duration on extraction ratio of polysaccharides
(1.Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine, Hangzhou 310053, China; 2.Zhejiang Institute of TCM & Natural Drug Co.Ltd, Hangzhou 310052, China) ABSTRACT: OBJECTIVE To develop the optimal extraction technology of polysacchrides from residue of Ginkgo biloba leaves, and conduct anti-oxidant tests. METHODS Taking the extraction ratio of polysaccharides for evaluation index and detected by phenol-sulfuric acid method, the optimal technology was obtained through single factor experiments. And experiments were taken on reducing activity and scavenging activity against DPPH. RESULTS The optimal extraction conditions were material-to-liquid ratio of 1∶7, extraction time of 2 h, 2 times, alcohol precipitation concentration of 90%, alcohol precipitation time of 1 h. The polysaccharides obtained had a good reducing activity and scavenging activity against DPPH. CONCLUSION The technology is convenient and workable, stable and dependable, which is suitable for industrial manufacture. The polysaccharides obtained have strong anti-oxidant activities. KEY WORDS: residue of Ginkgo biloba leaves; polysaccharides; extraction; scavenging free radicals; anti-oxidant activity
银杏果实多糖的提取工艺
银杏果实多糖的提取工艺摘要：银杏果含有多种微量元素和营养物质，既可药用，又可食用，可以有效疏通血管，促进体内代谢，美容养颜。
国内外研究人员大部分都在对银杏果的其他成分进行研究，银杏果实多糖的报道相对来说较少。
本论文以银杏果实为原料，借用蒽酮硫酸比色法进行银杏果实多糖含量测定，来确定热水浸提法是否能够更好的提取银杏果多糖。
对具体研究的结果进行了简单的论述：通过采取实验法，即单因素法，从中得出水浴温度和料液比以及浸取时间的最佳提取量范围，经过调整单因素，控制其他变量，最终得出结论。
关键词：银杏果实；提取多糖；蒽酮硫酸比色法；正交试验1 引言银杏果的价值一直被人们所重视，这也将银杏果的有效成分慢慢地被大家看见，而银杏果实中的多糖，也被研究员们发现，银杏果中的多糖为酸性多糖，并不是“白果有毒”的凶手，它没有细胞毒性，也具有植物多糖的免疫调节、抗氧化、抑菌等药理活性。
水提法是传统提取植物多糖的首选方法，但是该方法的提取率较低，为了克服这个缺点，逐渐也产生了酶解提法、微波辅助提取法、超声波辅助提取法、超临界萃取法等新型提取技术。
本课题以银杏果为原材料，借助蒽酮硫酸比色法进行多糖含量测定，经过单因素试验、正交试验，目的是为了确定热水浸提法提取白果多糖的最佳工艺。
2 相关概述2.1 银杏果简介银杏(Ginkgo biloba)属银杏科银杏属裸子植物。
自古，就被视为珍贵树种，并在我国大范围推广种植,其产量占全世界的70%。
之所以称其为珍贵树种，是因为它用途广泛，不仅可以作为食品、药材、木材、化妆品等原料，发挥其经济功能，而且可以美化环境，发挥其生态功能，同时也具有极高的观赏价值。
现代银杏树的分布主要靠人工栽培、人工移植，我国是最大的栽植培育基地。
其他国家归根究底都是从中国移植得银杏树种。
目前已知有银杏树分布的国家有日本，加拿大，俄罗斯，朝鲜，美国等。
因为银杏树生长本需要土壤等其他外界环境因素，所以在我国种植银杏树的地方都集中在广西柳州，安徽砀山、山东临沂，江苏邳州以及浙江等地。
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银杏花粉粗多糖脱色工艺研究郝功元，吴彩娥*，杨剑婷，贾韶千，徐文斌(南京林业大学森林资源与环境学院，江苏 南京 210037)摘 要：为优选银杏花粉粗多糖的脱色材料，以多糖保留率和脱色率为考察指标，通过比较聚酰胺、树脂、粉末活性炭和颗粒活性炭四种不同的脱色剂的脱色效果，选择一种较好的脱色剂进行单因素和正交试验。
结果表明：颗粒活性炭优于其他3种脱色剂，通过正交试验法研究脱色条件，颗粒活性炭脱色最佳工艺参数为脱色时间4h 、脱色温度50℃、脱色剂用量0.15g/ml 。
关键词：银杏花粉；脱色；颗粒活性炭Decolorization of Crude Polysaccharide from Ginkgo biloba PollenHAO Gong-yuan ，WU Cai-e*，YANG Jian-ting ，JIA Shao-qian ，XU Wen-bin(College of Forest Resources and Environment, Nanjing Forestry University, Nanjing 210037, China)Abstract ：Polyamides, D101 macroporous resin, powdered activated carbon and granular activated carbon were separately adopted to decolorize the crude polysaccharide from Ginkgo biloba pollen. Granular activated carbon had the best decolorization efficiency in terms of weighed score for retention rate of polysaccharide and decolorization rate. One-factor-at-a-time method was adopted to investigate the effects of three crucial factors (namely, decolorization duration, temperature and decolorant quantity) on decolorization of the crude polysaccharide. Subsequently, the three factors were optimized using orthogonal array design. The optimal decolorization duration, temperature and decolorant quantity were 50 ℃, 4 h and 0.15 g/ml, respectively.Under these conditions, the decolorization rate was over 72.84% and 88.19% of polysaccharide was recovered.Key words ：Ginkgo biloba pollen ；decolorization ；granular activated carbon中图分类号：S789.9 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2009)14-0136-04收稿日期：2008-10-17基金项目：南京林业大学引进高层次人才科研基金项目(2006-1)作者简介：郝功元(1983－)，男，硕士研究生，研究方向为经济林产品加工利用。
E-mail ：ppjhgy@ *通讯作者：吴彩娥(1963－)，女，教授，博士，研究方向为食品工程新技术及食品活性物质分离纯化。
E-mail ：sxwucaie@银杏又名公孙树、白果树，是最古老的中生代孑遗植物之一，有裸子植物活化石之称[1]，银杏花粉是银杏的配子体，富含黄酮、多糖、内酯类化合物等[2-3]。
多糖是由多个单糖分子经糖苷键结合而成，是构成生命的四大基本物质之一，也是生物体储存能量的物质，研究发现，少数特殊的多糖具有抗肿瘤、抗衰老、抗感染、降血糖血脂、辅助治疗艾滋病等方面的生物活性，近年来，又发现有些多糖的糖链在控制细胞的分裂和分化、调节细胞的生物氧化和调亡方面起着重要作用[4-6]。
开发银杏花粉多糖既可以增加多糖种类，为整个多糖研究领域增添新的内容，又可以充分利用银杏资源，有着广泛的开发前景。
脱色是多糖开发利用的一个重要步骤，多糖提取中常含有色素类物质，严重影响了生产工艺指标的选定和最终成品的质量，必须加以去除。
目前对于银杏花粉多糖中脱色的研究还鲜见报道，因此本实验主要应用物理方法对银杏花粉多糖进行脱色，依据脱色的综合效果对不同的脱色方法进行筛选，以期得到一种有效的脱色方法，为银杏花粉多糖的开发提供一定的理论依据。
1材料与方法1.1材料与试剂银杏花粉采自南京林业大学校园。
粉末活性炭、颗粒活性炭(3～7μm)、聚酰胺、D101大孔吸附树脂、无水乙醇、氢氧化钠、浓盐酸、浓硫酸、蒽酮均为分析纯；蒸馏水。
1.2仪器与设备DKZ-2型电热恒温振荡水槽 上海精宏实验设备有限公司；TG16-WS台式高速离心机长沙湘仪离心机仪器有限公司；TU-1800PC紫外可见分光光度计北京普析通用仪器有限责任公司；AL-104电子分析天平北京赛普分利斯天平有限公司；SCIENTZ-ⅡD超声波细胞粉碎机宁波新芝生物科技股份有限公司。
1.3方法1.3.1银杏花粉粗多糖的制备工艺流程银杏花粉→匀浆机破壁→超声波提取→过滤→浓缩→醇沉→烘干→银杏花粉粗多糖1.3.2多糖含量的测定方法标准曲线的制备：配制浓度为0.1mg/ml的葡萄糖标准溶液。
准确移取此葡萄糖标准液0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml分别置于10ml具塞试管中，补充蒸馏水使体积为1ml，摇匀，迅速加入5ml蒽酮-硫酸试液，摇匀，冷却至室温，沸水浴中加热10m i n后，冷却，以蒸馏水作空白对照，于波长620nm处测定吸光度[7]，以葡萄糖浓度(x)对吸光度(y)作回归处理，得回归方程：y=5.315x－0.0015，R2=0.9988。
CDFV糖含量(%)=———×100m式中：C为供试液中葡萄糖的浓度，mg/ml；D为供试液稀释倍数；F为换算因子；V为溶液体积，ml；m为供试花粉质量，m g。
1.3.3换算因子的测定准确称取已干燥至恒重的自制银杏花粉精多糖(粗多糖经脱蛋白、脱色、透析)0.0300g，置于50ml干净烧杯中，用少量蒸馏水溶解，完全转入100ml容量瓶中，备用。
精密移取该溶液1.0ml，按照1.3.2节的方法测定吸光度，重复三次，计算出银杏花粉精多糖中葡萄糖的浓度，按下式计算出换算因子：F=A/B式中：A为所配液体中多糖浓度；B为标准曲线计算所得葡萄糖浓度。
计算得到F=0.93。
1.3.4不同脱色剂脱色方法聚酰胺脱色方法：称取20g处理过的聚酰胺，湿法装柱，再准确量取50m l粗多糖样品原溶液，上柱，以1倍柱体积的去离子水以1.0ml/min的流速进行洗脱。
D101树脂脱色方法：称取20g处理过的D101树脂，湿法装柱，再准确量取50ml粗多糖样品原溶液，上柱，以1倍柱体积的去离子水以1.0ml/min的流速进行洗脱。
粉末活性炭脱色方法：准确称取4g粉末活性炭放入锥形瓶中，再在瓶中分别加入准确量取的20ml多糖样品原溶液(粉末活性炭用量为0.20g/ml)，将锥形瓶放入的恒温水浴锅内振荡2h，将瓶中溶液经过滤、离心处理。
颗粒活性炭脱色方法：准确称取4g颗粒活性炭放入锥形瓶中，再在瓶中分别加入准确量取的20ml多糖样品原溶液(活性炭用量为0.20g/ml)，将锥形瓶放入40℃的恒温水浴锅内振荡2h，将瓶中溶液经过滤、离心处理。
1.3.5脱色率的计算将银杏花粉多糖样品的水溶液(含色素的样品)于200～600nm波长范围内进行全波长扫描，发现溶液在可见光区无吸收峰，而且从200nm到600nm吸收呈递减趋蓝光的波长中间段450nm作为检测波长[8]。
A1－A2脱色率(%)=————×100A1式中：A1为溶液脱色前的吸光度；A2为溶液脱色后的吸光度。
1.3.6多糖保留率的计算在波长620nm处测定溶液多糖的吸光度。
B1－B2多糖保留率(%)=————×100B1式中：B1为溶液脱色前多糖的吸光度；B2为溶液脱色后多糖的吸光度。
1.3.7脱色效果评价方法脱色效果的评判因素有多糖保留率和脱色率两项，而且两个因素对于脱色效果的影响效果是一样的，因此本实验在脱色剂的选择实验和正交试验中采取加权评分法处理数据。
评分标准为：将各项指标除以该指标所在列的最大值再乘以100，为该项得分。
设定多糖保留率(x)和多糖脱色率(y)两者的权重系数均为0.5，对两项指标进行加权求和。
通过公式z=0.5x+0.5y，得到综合评分(z)。
2结果与分析2.1脱色剂的选择以粉末活性炭、颗粒活性炭、D101树脂、聚酰胺为脱色剂对银杏花粉粗多糖脱色，进行脱色剂选取实验，结果见表1。
脱色剂多糖浓度A450nm多糖保留率多糖脱色率综合种类(μg/ml)(%)(%)评分聚酰胺脱色17.350.29360.8628.4966.02 D101树脂18.050.24163.3141.3682.86粉末活性炭26.080.34191.4517.0368.04颗粒活性炭27.470.26996.3534.3591.53多糖原溶液28.510.411表1 脱色剂选择实验结果Table 1 Comparison of decolorization efficiencies of differentdecolorants注：多糖原溶液指脱色前溶液，其他为脱色后溶液。
由表1可看出，四种脱色剂对同种多糖溶液的脱色综合效果有明显的差异，D101树脂的脱色效果较好，但是其多糖保留率较低；粉末活性炭多糖保留率较高，但是其脱色效果较差。
综合考查各脱色剂对多糖溶液脱色后的脱色率和多糖保留率，发现颗粒活性炭的脱色率和多糖保留率均较高，从加权评分法分析也可以看出颗粒活性炭有最高的综合评分，因此，颗粒活性炭为本次脱色剂选择实验的最佳结果，并以其作为脱色剂进行脱色单因素和正交试验。
2.2银杏花粉多糖脱色的单因素试验2.2.1脱色时间对脱色效果的影响以颗粒活性炭为脱色剂分别对银杏花粉粗多糖溶液脱色1、2、3、4h ，脱色剂用量为0.20g/ml ，温度为50℃。
不同脱色时间下多糖脱色率和多糖保留率比较见图1。