高效液相色谱法测定板蓝根水提物(R—s)—告依春的含量
RP-HPLC法测定复方公英片中(R,S)-告依春的含量-3页word资料
RP-HPLC法测定复方公英片中(R,S)-告依春的含量复方公英片具有清热解毒的功效，用于上呼吸道感染引起的发热，微恶风，有汗，口渴，鼻流浊涕，咽喉肿痛，咳吐黄痰等症。
其处方由板蓝根，蒲公英两味原料药组成，原标准中无含量测定项，为更好地控制产品质量，我们对其板蓝根中(R,S)-告依春含量测定方法进行了研究，采用高效液相色谱法测定(R,S)-告依春的含量并进行了方法学验证。
结果表明该法专属性好、误差小、简便可操作性强，适用于本品的质量控制。
1仪器与试药高效液相色谱仪：岛津LC-2010液相色谱仪，紫外检测器，色谱数据处理工作站：LCsolution色谱工作站。
样品与试剂：(R,S)-告依春对照品（批号 111753-200601，中国药品生物制品检定所)；甲醇为色谱纯；水为超纯水；其它试剂为分析纯；复方公英片由云南白药集团丽江药业有限公司（批号：20100601、20100602、20100603），四川珍珠制药有限公司（批号：100101059）等提供。
2方法与结果2.1色谱条件色谱柱：迪马C18柱(4.6×250mm，5μm)，柱温：25℃，流速1.0ml.min-1，检测波长：245nm，进样量30ul，流动相：以甲醇为流动相A，以0.02%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；理论板数按(R,S)-告依春峰计算应不低于1000。
2.2对照品溶液的制备取(R,S)-告依春对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 ml含4 µg的溶液，即得。
2.3供试品溶液的制备取样品20片，除去包衣精密称定，研细，取约5片重，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入水50ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）50分钟，取出，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，即得。
2.4线性关系考察：精密称取(R,S)-告依春对照品适量，加甲醇制成每1ml含55.2μg的溶液，精密吸取对照品溶液各0.1、1、2、3、4、5、10、14μl，分别注入液相色谱仪，测定，结果见表2。
高效液相色谱法测定板蓝根注射液中(R,S)-告依春的含量
高效液相色谱法测定板蓝根注射液中(R,S)-告依春的含量韩立;班付国;周红霞;王林;刘素梅;张跃京【摘要】建立了板蓝根注射液中(R,S)-告依春含量测定的高效液相色谱方法.采用Waters XBridge C 18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.02％磷酸溶液(7∶93)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长245 nm,柱温30℃.在1～40μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.9998),系统精密度RSD为0.31％(n=6),平均回收率为98.6％(RSD=0.36％).本方法重现性好,可用于该制剂的质量控制.【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2014(048)004【总页数】3页(P32-34)【关键词】高效液相色谱法;板蓝根注射液;(R,S)-告依春;含量测定【作者】韩立;班付国;周红霞;王林;刘素梅;张跃京【作者单位】河南省兽药监察所,郑州450008;河南省兽药监察所,郑州450008;河南省兽药监察所,郑州450008;河南省康星药业股份有限公司,郑州451464;河南省兽药监察所,郑州450008;河南省兽药监察所,郑州450008【正文语种】中文【中图分类】S853.76板蓝根注射液为十字花科植物菘蓝(Isatis Indigotica Fort.)的干燥根，以水提醇沉法提取后制成的灭菌水溶液。
作为一种清热解毒、凉血利咽的中兽药注射液，它具有抗菌、抗病毒、抗内毒素、增强免疫的作用，尤其在抗病毒方面疗效确切［1－2］，用于治疗家畜流感、仔猪白痢、肺炎及某些发热性疾病。
板蓝根注射液的成分复杂多样，主要有靛蓝、靛玉红、(R，S)－告依春、多种有机酸、核苷、氨基酸等多种成分［3－4］。
以往报道的含量测定方法多为测定板蓝根注射液中靛蓝、靛玉红、有机酸、氨基酸的含量［5－7］，但该制剂为水煎提取液，靛蓝、靛玉红为脂溶性，在水提液中溶解性小，因此难以作为含量控制指标。
板蓝根颗粒浸膏中(R,S)-告依春的含量测定研究
告依春 ） 为板蓝根抗流感病毒的主要有效成分之一 ， 有文
献报道测定不同厂家的板 蓝根颗粒 中的表 告依春 的含 量 ， 含量差别较大。板蓝根颗 粒按国家 标准 制法 项下制成 的板 蓝 根浸膏 （ 以下称 板蓝 根颗粒浸 膏）作为板蓝根 的提取物 ，一
些 企业 采取 异地 委托 生产 ， 为 能较 好 的对 委 托 生产 的浸 膏进 行 质 量 监控 ，且 浸 膏 的 Ｔ Ｌ Ｃ 鉴 别又 符合 药 典 要求 。 笔 者 尝试
ｉ ｌ ｑ ｕ ｉ ｄ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ（ ＨＰ Ｌ Ｃ ） ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍ ｉ ｎ ａ ｉ ｔ ｏ ｎ ｏ ｆ （ Ｒ， Ｓ ） 一ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｓ ｐ ｒ ｉ ｎ ｇ ． Ｃ ｏ ｎ ｃ ｌ ｕ ｓ ｉ ｏ ｎ ： ｕ ｓ ｉ ｎ ｇ ｔ ｈ ｉ ｓ ｌ ａ ｗ ｈ ａ ｓ ｇ ｏ ｏ ｄ ｓ ｅ ｐ ａ ｒ ａ ｉ ｔ ｎ ｇ
定 的质 量 控 制 。
பைடு நூலகம்
【 关键词 】浸 膏；板蓝根 ；（ Ｒ ， Ｓ ） － 告依春 ；高效液相 色谱 法 【 中图分类号 】Ｒ ９ １ 【 文献标识码 】Ａ
【 文章编号 】１ ０ ０ ８ ． １ １ ５ １ （ ２ ０ １ ４ ） ０ ８ ． ０ １ ０ ７ ． ０ ２
Ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｒ ａ ｄ ｉ ｘ ｉ ｓ ａ ｔ ｉ ｄ ｉ ｓ ｐ ａ ｒ ｔ ｉ ｃ ｌ ｅ ｃ ｏ ｎ ｃ ｒ ｅ ｔ ｅ（ Ｒ， Ｓ 卜 ｔ Ｏ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ａ ｃ ｃ ｏ ｒ ｄ ｉ ｎ ｇ ｔ ｏ ｔ ｈ ｅ ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ
ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｓ ｐｒ ｉ ｎｇ
高效液相色谱法测定蒲地蓝消炎片中RS-告依春含量
Ｃｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ Ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｎｇ ｏ ｆ
Ｓ —Ｅｐｉ ｇ ｏ ｉ ｔ ｒ ｉ ｎ ｉ ｎ Ｐｕ ｄｉ ｌ ａ ｎｘ ｉ ａ ０ ｙ ａ ｎ Ｔａ ｂｌ ｅ ｔ ｓ ｂ ｙ Ｈ ＰＬＣ
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Ｐ ｈ ｏ ｓ ｐ ｈ ｏ ｉ ｒ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ （ ８： ９ ２ ） ， Ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗａ ｖ ｅ ｌ ｅ ｎ ｇ ｔ ｈ ｗ ａ ｓ ２ ４ ５ ｎ ｍ ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｌ ｆ ｏ ｗ ｒ ａ ｔ ｅ ｗａ ｓ １ ． ０ ｍＬ／ ｍｉ ｎ ． Ｒｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ Ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｗ ａ ｓ ｇ ｏ ｏ ｄ
２ ０ １ ７ 年 ３月 ５ 日 第 ２ ６卷第 ５期
Ｖ０ １ ． ２ ６ ， Ｎｏ ． ５ ， Ｍａ ｒ ｃ ｈ ５ ， ２ ０１ ７
Ｃｈｉ ｎ ａ Ｐｈ ａ ｒ ｍａ ｃ ｅ ｕ ｔ ｉ ｃ ａｌ ｓ
中目茄
・
研究 ・
Ｄ ｒ ｕ ｇ Ｒ ｅ ｓ
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ６ — ４ ９ ３ １ ． ２ ０ １ ７ ． ０ ５ ． ０ ０ ９
高效液相色谱法同时测定板蓝根药材中5种成分的含量
高效液相色谱法同时测定板蓝根药材中5种成分的含量肖平;陈建伟;李祥;李进【摘要】Objective To establish a HPLC method for simultaneous determination of uracil,hypoxanthine,guanosine, thymine,and( R,S)-goitrin in Isatidis Radix. Methods The determination was performed on a Hanbon Hedera C18 column (4. 6 mm×250 mm,5 μm). The mobile phase consisted of acetonitrile( A)and water( B)with linear gradient elution at the flow rate of 1.0 mL·min-1. The column temperature was 30 ℃. Detection wavelength was 254 nm. Results The linear range ofuracil,hypoxanthine,guanosine,thymine,and(R,S)-goitrin was 1.97-39.40 mg·L-1(r=0.999 9),1.25-50.00 mg·L-1(r=0.999 9),0.25-10.40 mg·L-1(r=0. 999 6),2. 84-56. 70 mg·L-1(r=0. 999 9),and 0. 72-28.80 mg·L-1(r=0.999 8), respectively. The average recovery was 99. 36%(RSD=0. 91%),99.79%(RSD=1. 12%),100. 90%(RSD=1. 71%),98. 67%(RSD=1. 50%),and 99. 33%(RSD=0. 94%),respectively. Conclusion The method issimple,accurate,reliable,reproducible and sensitive,which can be used as an effective method for quality control of Isatidis Radix.%目的：建立高效液相色谱法同时测定板蓝根药材中尿嘧啶、次黄嘌呤、鸟苷、胸腺嘧啶、（ R，S）-告依春5种成分的含量。
HPLC测定板蓝根颗粒中表告依春的含量
２１０ 回收率试验 精密称取 ６份供试品 （批号： ０９０６２６，表告依春含量为 ０８２１ｍｇ／ｇ），每份约 ２０ｇ， 置具塞的锥形瓶中，分别加入表告依春对照品约 １００ ｍｇ，按 “２２”方法制备供试品溶液，按 “２１” 的 色谱条件进样测定。计算回收率。结果表告依春的平 均回收率为 ９９２０％，ＲＳＤ （ｎ＝６）为 ０９４％ 。 ２１１ 样品含量测定 取三个批次的板蓝根颗粒， 按 “２２” 方法制备供试品溶液，按 “２１” 的色 谱条件进样测定，计算含量。结果见表 １。
表１
批号 ０９０６２４ ０９０６２５ ０９０６２６
含量 ／ｍｇ／ｇ ０８１０ ０７８５ ０８２１
３ 讨论
２６ 线性关系考察 精确量取 ２３的对照品溶液 １０、２０、４０、６０、８０、１００、１５０、２００ｍＬ，分 别置 １０ｍＬ量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，制成不同 浓度的对照品溶液，并按 “２１”色谱分析条件进行 检测分析，对不同进样量的色谱峰值变化进行记录， 以表告依春对照品峰面积 （Ｙ）的变化与进样量 （Ｘ） 的关 系 进 行 线 性 回 归 分 析。得 回 归 方 程 为 Ｙ＝ １０５６５５６Ｘ－０７３ （ｒ＝０９９９９），表 明 表 告 依 春 在 ０１０３２～２０６４μｇ范围内与峰面积具良好的线性关系。 ２７ 精 密 度 试 验 取 同 一 批 次 样 品 （批 号： ０９０６２４），按 “２２” 项下的方法制备供试品溶液， 按 “２１” 项下的色谱条件连续进样 ６次，记录峰 面积。结果表告依春峰面积的 ＲＳＤ为 ０３３％，表 明仪器精密度良好。 ２８ 溶液稳定性试验 取同一批次样品 （批号： ０９０６２５），按 “２２” 的方法制备供试品溶液，分别 在 ０、１、２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、 ２４ｈ时按 “２１” 的色谱条件进样测定，记录峰面 积。结果表告依春峰面积的 ＲＳＤ为 ０８５％，表明 供试品溶液在 ２４ｈ内较稳定。 ２９ 重 复 性 试 验 取 同 一 批 次 样 品 （批 号： ０９０６２６），按 “２２” 的方法制备供试品溶液，平行 制备 ６份，按 “２１” 的色谱条件进样测定。表告 依春的平均含量为 ０８２１ｍｇ／ｇ，ＲＳＤ为 １０％，结 果表明重复性良好。
高效液相色谱法测定板蓝根颗粒中（R,S）-告依春的含量
高效液相色谱法测定板蓝根颗粒中（R,S）-告依春的含量巩伟;刘忠良;赵庆华;文凤娥;李鹏;张琨;赵梅【摘要】目的：建立高效液相色谱(HPLC)法测定板蓝根颗粒中(R,S)-告依春的含量并讨论含量限度。
方法色谱柱为 SHIMADZU VP-ODS 柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.02%磷酸溶液(7：93),流速1.0 mL·min-1,检测波长为245 nm,自动进样器进样,进样量10μL。
分别依照转移率、测定结果统计数据讨论含量限度。
结果(R, S)-告依春在0.0587~150.3495μg·mL-1质量浓度范围内线性关系良好(r=0.9997,n=7),低、中、高加入量平均回收率分别为98.72%,98.40%,98.60%,RSD 分别为1.84%,0.50%,1.82%。
依照转移率、测定结果统计数据确定含量限度存在问题。
结论该法操作方便、结果准确,精密度好,专属性强,可用于板蓝根颗粒的质量控制；(R,S)-告依春的含量限度应依据药动学和药效学数据确定。
%Objective To establish HPLC method for determination of (R,S)-epigoitrin in Banlangen granules and discuss the content limitation. Methods The samples were separated on SHIMADZU VP-ODS (150 mm×4.6 mm, 5 μm) and the mobile phase consisted of methol-0. 02% phosphoric acid solution (7:93) at a flow rate of 1. 0 mL. min-1 . The detection wavelength was set at 245 nm and the injection volume (in automatic sampler) was 10 μL. The content limitation was assessed according to the transfer rate and statistical data of the results. Results (R,S)-epigoitrin showed a good linear relationship at concentration of 0. 0587 – 150. 349 5 μg·mL-1(r = 0. 999 7, n = 7). The average recovery rate was 98. 72% , 98. 40% and 98. 60% , respectively; RSD was 1. 84% , 0. 50% and 1. 82% , respectively. The content limitation of (R,S)-epigoitrin was unreasonableaccording to the transfer rate and the statistical data of the results. Conclusion The method is easy and simple to operate, accurate and stable in results, and highly specific, thus it is applicable for the quality control of Banlangen granules. The content limitation should be determined on the basis of pharmacokinetic and pharmacodynamic data.【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2015(000)006【总页数】5页(P791-795)【关键词】板蓝根颗粒;(R,S)-告依春;含量限度;色谱法,高效液相【作者】巩伟;刘忠良;赵庆华;文凤娥;李鹏;张琨;赵梅【作者单位】济南军区联勤部药品仪器检验所，济南 250022;济南军区联勤部药品仪器检验所，济南 250022;济南军区联勤部药品仪器检验所，济南 250022;济南军区联勤部药品仪器检验所，济南 250022;济南军区联勤部药品仪器检验所，济南 250022;济南军区联勤部药品仪器检验所，济南 250022;济南军区联勤部药品仪器检验所，济南 250022【正文语种】中文【中图分类】R927.2;R284.1板蓝根颗粒具有清热解毒、凉血利咽功效，其现行法定质量标准为《中华人民共和国药典》2010年版第二增补本[1]，检验项目包括鉴别、检查等，无含量测定。
HPLC法测定板蓝根颗粒浸膏中(R,S)—告依春的含量
HPLC法测定板蓝根颗粒浸膏中（R，S）—告依春的含量目的：建立板蓝根颗粒浸膏中（R，S）-告依春的HPLC含量测定方法。
方法：色谱柱为Agilent C18 色谱柱（250×4.6mm，5μm），流动相为甲醇-0.02%磷酸溶液（4.5：95.5），检测波长为245nm，柱温为30℃，流速为1.0mL·min- 1。
结果：（R，S）-告依春在0.02392 ～0.23916 μg的范围内与峰面积值成良好的线性关系（r=0.9997），平均加样回收率（n=6）为101.2%，RSD为3.2%。
结论：该方法简单、准确、专属性强，作为板蓝根颗粒浸膏中（R，S）-告依春的含量测定方法，为板蓝根颗粒的生产提供内控指标。
标签：板蓝根颗粒浸膏；（R，S）-告依春；含量测定板蓝根颗粒为板蓝根单方制剂。
《中国药典》2010年版板蓝根颗粒功能主治为具有清热解毒，凉血利咽的功效。
用于肺胃热盛所致的咽喉肿痛、口咽干燥、腮部肿胀；急性扁桃体炎、腮腺炎见上述证候者[1] 。
其制法为水提后浓缩，用60%乙醇醇沉后，取上清液浓缩至浸膏。
与辅料混合制粒而成。
有研究报道，（R，S）-告依春为板蓝根中的抗病毒活性成分[2]。
为了控制本品浸膏的质量，以（R，S）-告依春的含量为考察指标，建立本品浸膏中（R，S）-告依春的含量方法，为板蓝根颗粒的的生产提供内控指标。
1 仪器和试药戴安Ultimate 3000型高效液相色谱仪，Agilent C18 色谱柱（250×4.6mm，5μm），AE200型十万分之一分析天平（瑞士梅特勒公司），XP26型百万分之一分析天平（瑞士梅特勒公司）。
板蓝根颗粒浸膏由贵州星州药业股份有限公司提供，批号为20131001，20131002。
（R，S）-告依春（批号111753-201304）对照品购自中国药品生物制品检定研究院，甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
2 方法和结果2.1 色谱条件色谱柱：Agilent C18 色谱柱（250×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇-0.02%磷酸溶液（4.5：95.5）；流速：1.0mL·min-1；检测波长：245nm；柱温：30℃；进样量：10μL。
高效液相色谱法测定板蓝根注射液中(R,S)-告依春的含量
ｃ ｈ ｒ ｏ ｍ ａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｉ ｃ ｃ ｏ ｌ ｕ ｍ ｎ ｏ ｆ Ｗａ ｔ ｅ ｒ ｓ Ｘ Ｂ ｒ ｉ ｄ ｇ ｅ Ｃ １ ８ （ １ ５ ０ ｍｉ ｎＸ ４ ． ６ ｍ ｍ， ５ ｘ Ｉ ｍ）ｗ ａ ｓ ｕ ｓ ｅ ｄ ， ｗ ｉ ｔ ｈ ｔ ｈ ｅ ｍ ｏ ｂ ｉ ｌ ｅ ｐ ｈ ａ ｓ ｅ ｏ ｆ
［ 摘 要 ］ 建 立 了板 蓝根 注 射 液 中（ Ｒ， Ｓ ） 一 告 依 春含 量 测定 的 高 效 液 相 色 谱 方 法。采 用 Ｗａ ｔ ｅ ｒ ｓ
Ｘ Ｂ ｒ ｉ ｄ ｇ ｅ Ｃ １ ８色谱柱 （ １ ５ ０ ｍｍｘ ４ ． ６ ｍｍ， ５ ｘ Ｉ ｍ） ， 甲醇 一 ０ ． ０ ２ ％磷酸溶液 （ ７：９ ３ ） 为流 动相， 流速 为
（ １ ． 河南省兽药监察所 ， 郑州 ４ ５ ０ ０ ０ ８； ２ ． 河南 省康星药业股 份有 限公司 ， 郑州 ４ ５ １ ４ ６ ４ ）
［ 收稿 日期 ］ ２ ０ １ ４ － ０ １ — ０ ９ ［ 文献标识码 ］ Ａ ［ 文章编号 ］ １ ０ ０ ２ － １ ２ ８ ０（ ２ ０ １ ４ ） ０ ４ — ０ ０ ３ ２ — ０ ３ ［ 中图分类号 ］ ￥ ８ ５ ３ ． ７ ６
Ｒ Ｓ Ｄ ｏ ｆ ｓ ｙ ｓ ｔ ｅ ｍ ｐ ｒ ｅ ｃ ｉ ｓ ｉ ｏ ｎ ｗ ａ ｓ ０ ． ３ １ ％（ ｎ ＝６ ） ， ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ａ ｖ ｅ ｒ ａ ｇ ｅ ｒ ｅ ｃ ｏ ｖ ｅ ｒ ｙ ｗ ａ ｓ ９ ８ ． ６ ％（ Ｒ Ｓ Ｄ： ０ ． ３ ６ ％） ． ｈｅ Ｔ ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｉ ｓ
该 制剂 的质 量控 制。
［ 关键 词 ］ 高效 液相色 谱 法 ； 板 蓝根注 射液 ； （ Ｒ， Ｓ ） 一 告依春 ； 含 量测定
高效液相色谱法测定板蓝根水提物(R—s)—告依春的含量
高效液相色谱法测定板蓝根水提物（R—s）—告依春的含量目的采用高效液相色谱法测定板蓝根水提物中（R-s）-告依春的含量，对板蓝根提取物进行质量控制。
方法高效液相所用的色谱柱为phenomenex （250mm×4.6mm，5um），流动相为甲醇-水（15：85），流速为1mL/min，柱温为30°C，检测波长为245nm。
结果在含量测定中，（R-s）-告依春的质量浓度在1.6125～51.6ug/mL范围内与其峰面积呈良好的线性关系（R2=0.99954，n=6）。
结论本方法快速、准确、精密度、稳定性、重复性好，可以测定板蓝根药材中（R-s）-告依春的含量。
标签：板蓝根提取物；高效液相色谱法；（P.-S）-告依春；含量测定[文献标识码]B板蓝根为十字花科植物菘蓝（Isatis indigoticaFort）的干燥根，载于《神农本草经》中，是传统的抗病毒中药之一。
长时间的临床调查与研究已经表明板蓝根具有清热解毒，凉血利咽的功效。
可用于肺胃热导致的口干舌燥、咽喉肿痛、腮部肿胀、腮腺炎、急性扁桃体炎等症的治疗。
板蓝根中含有靛玉红、（R-S）-告依春、蔗糖、靛蓝、氨基酸等多种有效成分，查阅相关文献可知，板蓝根的这几种成分都有相关学者在研究，并且得到了很多的研究成果。
（R-S）-告依春是板蓝根中抗病毒的代表性成分，本研究旨在进一步制定板蓝根配方颗粒质量控制的新方法，为相关研究提供依据及参考。
现将结果报道如下。
1.材料与仪器1.1仪器高效液相色谱仪紫外一可见光（型号：SPD-16，岛津仪器有限公司）；KQ2200型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；（50mL、100mL、1000mL）量筒；微孔滤膜过滤装置；25mL容量瓶；万分之一天平。
1.2材料与试剂板蓝根药材饮片（安徽源和堂药业股份有限公司，151021）；（R-S）-告依春对照品（中国食品药品检定研究所，251505）；甲醇。
HPLC法同时测定板蓝根颗粒中腺苷和(RS)-告依春的含量
Ｓ ｉ ｍｕ ｌ ｔ ａ ｎ ｅ ｏ ｕ ｓ Ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ａ ｄ ｅ ｎ ｏ ｓ ｉ ｎ ｅ ａ ｎ ｄ（ Ｒ， Ｓ ） ・ ｇ ｏ ｉ ｔ ｒ ｉ ｎ
分析 ， 考察各产 品中腺苷 和（ Ｒ， Ｓ ） ． 告依春 的含量 。结果 ： 腺苷 和 （ Ｒ， Ｓ ） 一 告依 春分别 在 ０ ． ０ ９ ８ ２— ３ ． ９ ２ ８ ０ ￣ ｇ和 ０ ． ０ ２ １ １— ０ ． ８ ４ ４ ０ ￣ ｇ
间， 峰面积与浓度呈 良好 的线性关 系 ， 平均加样 回收率腺苷为 ９ ９ ． ３ ％， Ｒ Ｓ Ｄ＝１ ． ６ ％（ ｎ ＝ ９ ） ， （ Ｒ， Ｓ ） 一 告 依春为 ９ ９ ｏ ｉ ｔ ｒ ｉ ｎ ｗ ａ ｓ ｌ ｉ ｎ ｅ ａ ｒ ｒ ａ ｎ ｇ ｅ ｏ ｆ ０ ． ０ ２ １ １— ０ ． ８ ４ ４ ０ １ ｘ ｇ （ ｒ ＝ ０ ． ９ ９ ９ ９ ） ， ｔ ｈ ｅ ａ ｖ ｅ ｒ ａ ｇ ｅ ｒ ｅ ｃ ｏ ｖ ｅ ｙ ｒ ｗ ａ ｓ ９ ９ ． ０ ％（ Ｒ Ｓ Ｄ＝１ ． ８ ％， ｎ＝ ９ ） ．Ｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｅ ｒ ｐ ｒ ｉ ｓ ｅ ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｂ ａ ｎ ｌ ｎｇ ａ ｅ ｎ ｒａ ｇ ｎ ｕ ｌ ｅ ｓ ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｏ ｆ ａ ｄ ｅ ｎ ｏ ｓ ｉ ｎ ｅ ａ ｎ ｄ（ Ｒ， Ｓ ） 一 ｇ ｏ ｉ ｔ ｒ ｉ ｎ ｉ ｎ ｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｃ ｅ ｉ ｓ ｖ ｅ ｙ ｒ ｂ ｉ ｇ ， ｔ ｏ ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ｔ ｈ ｅ ｑ ｕ ａ ｌ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ ｂ ａ ｎ ｌ ａ ｎ ｇ ｅ ｎ ｇ ｒ ａ ｎ －
HPLC法测定板蓝根颗粒中(R,S)-告依春的含量
29 Journal of China Prescription Drug Vol.19 No.3·实验研究·板蓝根颗粒是国家基本药物[1]，其主要的成分为板蓝根，它是十字花科植物菘蓝的干燥根[2]，其他的辅料一般为蔗糖、糊精。
它是我国常见的中成药，二年生的草本，高50～100 cm左右，通常是在秋季进行采收。
它具有清热、解毒、辟疫、杀虫的功效，而且还能凉血，预防感冒，其中（R，S）-告依春是抗病毒的有效成分之一[3-5]。
对于各种因素引起的喉咙肿痛，或者是扁桃体发炎以及咽喉炎等疾病，都可以口服板蓝根颗粒进行调理[6]。
本次实验选取了14种不同批号的板蓝根颗粒进行研究，以期为板蓝根颗粒中（R，S）-告依春的含量测定及质量控制提供数据和方法的验证。
1 仪器与材料1.1 仪器RIGOLL-3000高效液相色谱仪；BSA224S-CW型号的电子天平（万分之一）；AP-O1P型超声波清洗器。
1.2 试药试剂不同批号板蓝根颗粒（批号分别为E19A005，180305，190301，190225，1903045，190301， 190510，181023，180607，190221，1811055，8302B38，190135，20190417），（R，S）-告依春对照品（批号：GYC20200112），甲醇（色谱纯），水（超纯水），其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱：Compass C18（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相：甲醇-0.02%磷酸水（20∶80），检测波长为245 nm，流速为1.0 ml/min，柱温：30℃[6]。
2.2 溶液的制备2.2.1 对照品贮备液取（R，S）-告依春对照品14.9 mg置100 ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度作为对照品贮备液。
2.2.2 对照品溶液HPLC法测定板蓝根颗粒中（R，S）-告依春的含量陈磊，陈建萍，刘雪梅，吴芝园＊（苏州卫生职业技术学院，江苏苏州 215009）【摘要】目的 建立板蓝根颗粒中（R，S）-告依春的含量测定方法。
高效液相色谱法测定板蓝根水提物(R-S)-告依春的含量
ｌ ｉ ｑｕｉ ｄ ｃ ｈｒ ｏｍ ａ ｔ ｏｇ ｒ ａｐｈｙ
ｄ ｉ Ｎ Ｆｅ ｎ ｇ ｈｕ ａ
Ｈｅ ｆ ｅ ｉ Ｃｅ ｎ ｔ ｅ ｒ Ｆｏ ｒ Ｆ ｏ ｏ ｄ Ａｎ ｄ Ｄｒ ｕ ｇ Ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ， Ｈｅ ｉ ， Ａｎ ｈ ｕ ｉ ２ ３ ８ ０ ０ ０ 。 Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ
十 目医 药 番 苄 晕 ２ ０ １ ６ 年１ ２ 月第６ 卷第２ ３ 期
・
药物研 究 ・
高效 液相色谱 法测定板蓝根 水 提物 （ Ｒ－ Ｓ）一 告依 春 的 含量
金 凤 华
安 徽省合肥 市食品药品检验 中心 ， 安徽合 肥 ２ ３ ８ ０ ０ ０ ［ 摘要 】目的 采 用 高效 液 相 色谱 法 测定 板 蓝根 水 提 物 中 （ Ｒ — ｓ ） 一告 依 春 的含量 ， 对 板 蓝根 提 取物 进行 质 量 控 制 。 方 法 高效 液相所用 的色谱柱 为 ｐ ｈ ｅ ｎ ｏ ｍ ｅ ｎ ｅ ｘ（ ２ ５ ０ ｍ ｍ× ４ ． ６ ａ ｒ ｍ， ５ ｍ） ， 流 动 相 为 甲醇 一 水（ １ ５ ： ８ ５ ） ， 流速 为 ｌ ｍ Ｌ ／ ｍ ｉ ｎ ， 柱 温为 ３ ０ ｃ Ｃ ， 检测波长 为 ２ ４ ５ ｎ ｍ。 结 果 在 含 量 测 定 中 ， （ Ｒ — Ｓ ） 一告 依 春 的 质 量 浓 度 在 １ ． ６ １ ２ ５～ ５ １ ． ６ ｇ ／ ｍＩ 范 围内 与其 峰 面积 呈 良好 的线 性 关 系（ Ｒ ＝ ０ ． ９ ９ ９ ５ ４ ， ｎ ＝ ６ ｏ 结论 本 方 法快 速 、 准确 、 精 密度 、 稳 定性 、 重复 性好 ， 可 以测 定 板 蓝根 药 材 中（ Ｒ — ｓ ） 一 告 依 春 的 含量 。 【 关键 词 】 板 蓝根 提 取物 ； 高 效液 相 色谱 法 ； （ Ｋ－ Ｓ ） 一告依春 ； 含量 测 定
HPLC测定板蓝根药材及其制剂中 表告依春的含量
HP LC 测定板蓝根药材及其制剂中表告依春的含量安益强1,2,贾晓斌1,23,袁海建1,孙 娥1,许珍珍1(1.江苏省中医药研究院中药新型给药系统重点实验室国家中医药管理局名医名方适宜剂型重点实验室,江苏南京210028;2.江苏大学药学院,江苏镇江212013)[摘要] 目的:建立HP LC 测定板蓝根药材及其制剂中表告依春含量的方法,为板蓝根药材及其制剂的质量控制提供依据。
方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Z ORBAX S B 2C18(416mm ×150mm,5μm );流动相乙腈2水2磷酸2三乙胺(8150∶90172∶0173∶0105);流速017mL ・m in -1;检测波长245n m,柱温30℃。
结果:表告依春含量测定的线性范围010204～013060μg (r =019998),平均加样回收率98199%,RS D 1131%。
结论:建立了高效液相色谱法测定板蓝根药材及其制剂中表告依春含量的方法,该方法准确、可靠,可用于板蓝根药材及其制剂的质量评价。
[关键词] 板蓝根;表告依春;高效液相色谱法;制剂;含量测定[中图分类号]R 284.1 [文献标识码A [文章编号]100125302(2008)1822074204[收稿日期] 2008203204[基金项目] 江苏省中医药领军人才项目(2006);苏州市科技计划(SSY0606)[通讯作者] 3贾晓斌,Tel:(025)85637809,E 2mail:jxiaobin2005@hot m ail .co m 板蓝根为常用抗病毒中药,始载于《神农本草经》,《中国药典》2005年版一部收载为十字花科植物菘蓝Isatis ind igotica Fort .的干燥根[1],表告依春为板蓝根抗病毒的代表性有效成分之一[2],是反映板蓝根药材及其制剂质量的一个重要指标;虽有文献报道过板蓝根提取物中表告依春在大鼠体内的药代动力学研究[3],但至今尚未有测定板蓝根药材及其制剂中表告依春含量的方法报道。
HPLC法测定板蓝根颗粒中RS-告伊春的含量
HPLC法测定板蓝根颗粒中RS-告伊春的含量朱文灯;张倩;吴翠;霍艳萍;凌娅【摘要】Objective To establish the determination method of RS-Goitrin in isatidis radix granula.Methods Using high performance liquid chromatography (HPLC) method, Kromasil C18 chromatographic column (250 mm×4.6 mm, 5μm), mobile phase of acetonitrile-0.01%phosphoric acid (6∶94), the velocity 1.0 mL/min, column temperature 30℃, detection wavelength of 250 nm.Results Puerarin in sample quantity is 1.94~30.98μg/mL range, show a good linear relationship (r=0.9997). Quant itative limit of 7.12 ng/mL, the recovery was 96.1%, RSD was 1.6% (n=9).Conclusion This method is rapid and accurate. The stability of the method, good repeatability, and can be used for isatidis radix granula quality control are analyzed.%目的：建立板蓝根颗粒中RS-告伊春含量测定方法。
方法采用高效液相色谱法，Kromasil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5μm），流动相为乙腈-0.01%磷酸（6∶94），流速1.0 mL/min，柱温30℃，检测波长为245 nm。
浸泡时间对板蓝根有效成分表告依春含量测定影响的考察
本文采 用 ｕ Ｖ — ｖ ｉ ｓ 法对 啤酒花 胶囊 中总 多酚 和总黄 酮进行 含 量测 定 ， 建 立该制剂 的质量 标准 。 １ 仪器与试 药 １ ． １ 仪器 ： ｕ ｖ 一 ２ ５ ０ １ Ｐ Ｃ型 紫 外可 见 分 光 光度 计 ； Ｆ Ａ ２ ０ ０ ４ Ｎ型万 分 之一 电子天 平 ； Ｋ Ｑ 一 ５ ０ ０ Ｄ Ｅ型数控 超声 波清洗 器 。 ｌ － ２ 试药 ： 没食子 酸对照 品 ， 芦 丁对 照品 。 水为 重蒸馏水 ； 试剂 均为分 析纯 ； 辅 料 均为 药用级 。
１ ． ０ ｈ ， 放冷， 称重 ， 用 水补 足损 失 质量 ， 用微孔 滤膜 （ ０ ． ４ ５ ｐ ａ ｎ ） 滤过，
即得供 试 品溶 液 。 ２ ． １ ． ４ 样 品测 定 ： 分别精 密 吸取 对 照品溶 液和供 试 品溶 液各 ｌ Ｏ ｌ ｚ ｌ ， 注入液 相色谱 仪 ， 按“ ２ ． １ ． １ ” 项 下色 谱条 件 ， 用外 表法 测定 ， 并计 算 各样 品中表告 依春 的含量 。 ２ ． １ ． ５标 准 曲线 的制 备 ：精 密 量取 浓度 为 ４ ５ ． ６ ￣ ｇ ， ／ ｍ ｌ 对 照 品溶 液 ０ ． ２ … ０ ５ １ ． ０ 、 １ ． ５ 、 ２ ． ０ ｍ ｌ ， 分 别 置于 ｌ Ｏ ｍ ｌ 量瓶中， 加 流 动相 至 刻度 ， 摇匀 ， 得 到浓 度 分 别为 ０ ． ９ １ ２ 、 ２ ． ２ ８ 、 ４ ． ５ ６ 、 ６ ． ８ ４ 、 ９ ． １ ２ １ ￣ ｇ ／ ｍ ｌ 的对 照品 溶液 ，分 别 精密 吸 取上 述 ５ 种 不 同 浓度 的对 照品 溶液 １ ０ ， 按 “ ２ ． １ ． １ ” 项 色谱 条件 进行 测 定 ， 以峰面 积 （ Ｙ ） 与对 照 品浓度 （ ｘ ） 进
板蓝根饮片、板蓝根颗粒中(R,S)-告依春的含量测定
板蓝根饮片、板蓝根颗粒中(R,S)-告依春的含量测定王宁莉;周振旗;贾万仓【摘要】目的建立测定板蓝根饮片与颗粒中(R,S)-告依春含量的高效液相色谱(HPLC)法.方法采用超声提取进行样品处理,以HPLC法测定指标成分(R,S)-告依春的含量.色谱柱采用Agilent C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为35℃,检测波长为245 nm,流动相为甲醇-水(15:85),流速为1.0 mL/min.结果用水作为溶剂超声(功率250 W,频率30 kHz)1 h为提取方法较煎煮法高效、环保;(R,S)-告依春质量浓度在0.0031～0.0434 g/L范围内与峰面积线性关系良好(r=0.99994);饮片和颗粒中(R,S)-告依春平均回收率分别为98.08％和97.86％,RSD分别为0.79％和0.55％(n=6).结论该方法易于掌握、准确度高、重复性好,适用于板蓝根饮片、板蓝根颗粒中指标成分(R,S)-告依春的含量测定.%Objective To establish an HPLC method for content determination of ( R, S ) -epigoitrin in Banangen Granules and Radix isatidis. Methods The sample was processed by ultrasonic extraction, the content of ( R, S ) -epigoitrin was determined by HPLC method. Agilent C18 column ( 250 mm × 4. 6 mm, 5 μm ) was adopted, the column temperature was 35 ℃, the detection wavelength was 245 nm, the mobile phase was methanol-water ( 15 :85 ) , and the flow rate was 1. 0 mL/min. Results Ultrasonic extraction method by using water as solvent to extract in 1 h ( power 250 W, frequency 30 kHz ) was more environment-friendly and high efficient than the method of decoction extraction, and ( R, S)-epigoitrin had good linear relationship in the range of 0. 0031-0. 0434 g/L( r=0. 99994). The average recovery rates of ( R, S ) -epigoitrin in Banangen Granules and Radix isatidis were 98. 08％ and 97.86％, and RSDs were 0. 79％ and 0. 55％ ( n=6 ) . Conclusion The method is easy to grasp, it has high accuracy and good reproducibility, which is suitable for the content determination of ( R, S ) -epigoitrin in Banangen Granules and Radix isatidis.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2018(027)003【总页数】3页(P30-32)【关键词】板蓝根;高效液相色谱法;(R,S)-告依春;含量测定【作者】王宁莉;周振旗;贾万仓【作者单位】陕西省铜川市食品药品检验检测中心,陕西铜川 727031;陕西省铜川市食品药品检验检测中心,陕西铜川 727031;陕西省铜川市宜君县人民医院,陕西铜川 727200【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R286.0板蓝根，又名靛青根、蓝靛根、大青根，十字花科植物菘蓝 Isatis indigotica Fort．的干燥根[1]，性寒，味先微甜后苦涩，具有清热解毒、预防感冒、利咽之功效，主要用于温毒发斑、舌绛紫暗、烂喉丹痧等。
建立板蓝根颗粒清洁验证的HPLC法
建立板蓝根颗粒清洁验证的HPLC法刘利;周凡;胡志林【摘要】目的：建立板蓝根颗粒清洁验证的HPLC法。
方法：色谱柱为C18柱；流动相为甲醇：0.02%磷酸水溶液（7∶93）；检测波长245nm；流速0.8ml/min；柱温30℃；进样量10μL。
理论板数按R，S-表告依春峰计应不得低于5000。
结果：板蓝根颗粒中表告依春的含量在3.9～95μg/ml （A=85322C-72006，r=0.9995）内呈良好线性关系，平均回收率102.80%，RSD 1.22%；表告依春的残留量在0.04～1.0μg/ml（A=90115C-13204，r=0.9997）内呈良好线性关系。
结论：方法简便，稳定可靠，可以用于板蓝根颗粒中表告依春的质量控制；清洁后水样中表告依春的残留量低于限度。
%Objective:To estabLish an HPLC method of BanLangen GranuLes’ cLeaning vaLidation.Method:The sampLes were used with C18 and the mobiLe phase of methanoL-0.02% phosphate (7∶93).The fLow rate was set at 0.8ml/min and the detection waveLength was set at 245nm.CoLumn temperature was 30℃ and sampLe voLume was 10uL.TheoreticaL pate number shaLL not be than5000.ResuLts:The Linear range was3.9~95μg/ml (A=85322C-72006r=0.9995),and the average recovery was 102.8% with the RSD was1.22%.The residuaL of epigoitrin from 0.04 to 1.0μg/ml (A=90115C-1320.4 r=0.9997) in Linear.ConcLusion :This method is convenient, repeatabLe and reLiabLe, and couLd be used for the quantitative controL of BanLangen granuLes; After cLeaning the residues in the water was Lesser than epigotrin by Limit residues.【期刊名称】《北方药学》【年(卷),期】2014(000)011【总页数】3页(P10-11,12)【关键词】高效液相色谱法;板蓝根颗粒;清洁验证;R,S-表告依春【作者】刘利;周凡;胡志林【作者单位】新疆华世丹药物研究有限责任公司乌鲁木齐 830011;新疆华世丹药物研究有限责任公司乌鲁木齐 830011;新疆华世丹药物研究有限责任公司乌鲁木齐 830011【正文语种】中文【中图分类】R286.0板蓝根为常用中药材，为十字花科菘蓝属植物菘蓝（Ⅰsatisindigotica Fort）的干燥根，性寒味苦，具有清热解毒、凉血利咽之效，临床上广泛用于抗菌、抗病毒，增强机体免疫力，是清热解毒类重要的代表药物，表告依春为板蓝根抗病毒的代表性成分之一[1-2]。
高效液相色谱法测定板蓝根水提物(R-S)-告依春的含量
高效液相色谱法测定板蓝根水提物(R-S)-告依春的含量
金凤华
【期刊名称】《中国医药科学》
【年(卷),期】2016(006)023
【摘要】目的采用高效液相色谱法测定板蓝根水提物中(R-S)-告依春的含量,对板蓝根提取物进行质量控制.方法高效液相所用的色谱柱为
phenomenex(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(15:85),流速为1mL/min,柱温为30℃,检测波长为245nm.结果在含量测定中,(R-S)-告依春的质量浓度在1.6125~51.6μg/mL范围内与其峰面积呈良好的线性关系(R2=0.99954,n=6).结论本方法快速、准确、精密度、稳定性、重复性好,可以测定板蓝根药材中(R-S)-告依春的含量.
【总页数】4页(P57-60)
【作者】金凤华
【作者单位】安徽省合肥市食品药品检验中心,安徽合肥 238000
【正文语种】中文
【中图分类】R286.0
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定板蓝根颗粒中（R,S）-告依春的含量 [J], 巩伟;刘忠良;赵庆华;文凤娥;李鹏;张琨;赵梅
2.高效液相色谱法测定板蓝根颗粒中表告依春含量 [J], 崔田;张祖亮
3.手性高效液相色谱法测定板蓝根中表告依春和告依春含量 [J], 聂黎行;王钢力;戴忠;林瑞超
4.高效液相色谱法测定板蓝根注射液中(R,S)-告依春的含量 [J], 韩立;班付国;周红霞;王林;刘素梅;张跃京
5.高效液相色谱法测定板蓝根颗粒中表告依春的含量 [J], 范春芳;张枚
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高效液相色谱法测定板蓝根水提物（R—s）—告依春的含量
作者：金风华
来源：《中国医药科学》2016年第23期
[摘要]目的采用高效液相色谱法测定板蓝根水提物中（R-s）-告依春的含量，对板蓝根提取物进行质量控制。
方法高效液相所用的色谱柱为phenomenex（250mm×4.6mm，5um），流动相为甲醇-水（15：85），流速为1mL/min，柱温为30°C，检测波长为245nm。
结果在含量测定中，（R-s）-告依春的质量浓度在1.6125～51.6ug/mL范围内与其峰面积呈良好的线性关系（R2=0.99954，n=6）。
结论本方法快速、准确、精密度、稳定性、重复性好，可以测定板蓝根药材中（R-s）-告依春的含量。
[关键词]板蓝根提取物；高效液相色谱法；（P.-S）-告依春；含量测定
[中图分类号]R286.0
[文献标识码]B
[文章编号]2095-0616（2016）23-57-04
板蓝根为十字花科植物菘蓝（Isatis indigoticaFort）的干燥根，载于《神农本草经》中，是传统的抗病毒中药之一。
长时间的临床调查与研究已经表明板蓝根具有清热解毒，凉血利咽的功效。
可用于肺胃热导致的口干舌燥、咽喉肿痛、腮部肿胀、腮腺炎、急性扁桃体炎等症的治疗。
板蓝根中含有靛玉红、（R-S）-告依春、蔗糖、靛蓝、氨基酸等多种有效成分，查阅相关文献可知，板蓝根的这几种成分都有相关学者在研究，并且得到了很多的研究成果。
（R-S）-告依春是板蓝根中抗病毒的代表性成分，本研究旨在进一步制定板蓝根配方颗粒质量控制的新方法，为相关研究提供依据及参考。
现将结果报道如下。
1.材料与仪器
1.1仪器
高效液相色谱仪紫外一可见光（型号：SPD-16，岛津仪器有限公司）；KQ2200型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；（50mL、100mL、1000mL）量筒；微孔滤膜过滤装置；25mL容量瓶；万分之一天平。
1.2材料与试剂
板蓝根药材饮片（安徽源和堂药业股份有限公司，151021）；（R-S）-告依春对照品（中国食品药品检定研究所，251505）；甲醇。
2.板蓝根水提物的制备
以加水量、提取次数、提取时间作为三个研究因素来研究板蓝根的水提工艺。
依据相关文献资料设置三个水平参数，优选出最佳的提取工艺。
板蓝根提取工艺的提取流程为：用粉碎机将板蓝根饮片打粉，取2号及4号筛中间的粉末和4号筛筛下的粉末。
每次按（过4号筛不超过40%）的比例取中间粉和筛下粉20g，用自来水提取，用正交设计法，设计出九组不同的加水量，提取次数，提取时间提取工艺，每一组平行重复三次，将每组提取得到的提取液放入离心机中离心。
取离心过后提取液的上清液，置85℃水浴锅上水浴蒸发掉溶剂，将在水浴锅上蒸的粘稠浸膏放入60℃烘箱中烘干，得干浸膏，计算出膏率。
3.板蓝根浸膏中（R-S）-告依春的含量测定
3.1色谱条件
为了使（R-S）一告依春更好地显现在高效液相分析图中，需要确定一个有效的分析方法及检测条件。
查阅相关文献，对影响供试品中（R-S）一告依春出峰的几个因素进行考察：色谱柱类型的选择，流动相的选择及流动相比例的选择，柱温箱温度的选择，流速的选择及检测器的选择等。
由于C18色谱柱具有适应性好，保留值大，稳定性好等诸多优点，已经作为高效液相中使用最广泛的色谱柱种类之一。
色谱柱phenomenex（250ram×4.6mm，5um）的分离效果可以达到（R-S）-告依春很好的分离，故选用C18色谱柱phenomenex（250mm×4.6mm，5um）。
因为本次实验所用流动相的比例已经确定，故采用等度洗脱的方法，用甲醇和水作为流动相，流动相的比例为15：85。
先把洗脱时间设计为30min，通过用对照品溶液的摸索，可以得到（R-S）-告依春大约在7.5min左右出峰。
所以把洗脱时间设计为10min，每次的进样量为20uL，检测波长设为245nm，流速设为1mL/min，柱温箱的温度设为30℃。
3.2溶液的制备
3.2.1对照品溶液的制备用万分之一电子天平精密称取（R-S）-告依春对照品1.032mg，加入10mL容量瓶中，加入水至刻度，配成浓度为103.2ug/mL的对照品溶液。
从103.2ug/mL对照品溶液中精密吸取1mL，并吸取1mL水，加入到刚才吸取的1mL对照品溶液中，配制成浓度为51.6ug/mL的对照品溶液，同样的方法配制浓度为1.6125ug/mL，3.225ug/mL，
6.45ug/mL，12.9ug/mL，25.8ug/mL的对照品溶液。
3.2.2供试品溶液的制备精密称取一定量的板蓝根浸膏，相当于0.4g的板蓝根药材粉末，精密加入超纯水25mL，振荡摇匀使溶解。
用针管和微孔滤膜将溶解过的板蓝根溶液过滤并注入EP管中，贴上标签，即得供试品溶液。
3.3系统适应性试验
分别取对照品及供试品溶液，按上述色谱条件进行色谱分析，记录检测所得到的色谱图。
结果显示，在选定的色谱条件下，分离度为大于13，理论塔板数大于5000。
见图1～2。
3.4线性关系的考察及标准曲线的绘制
精密量取（R-S）-告依春对照品储备溶液（51.6ug/mL）1mL，分别稀释成浓度为25.8斗咖L，12.9ug/mL，6.45ug/mL，3.225ug/mL，1.6125ug/mL的对照品溶液，按低浓度至高浓度依次各进样20uL，注入高效液相色谱仪中，测定各个对照品溶液的峰面积值，把各个对照品溶液浓度作为横坐标，把各个对照品溶液检测到的峰面积值作为纵坐标，以此绘制出标准曲线。
得出（R-S）-告依春的标准曲线为：y=81943x-14683，R2=0.99954。
结果表明（R-S）-告依春对照品溶液在浓度为1.625～51.6ug/mL的范围内与其峰面积呈良好的线性关系。
见表1、图3。
3.5精密度实验
取同一浓度的（R-S）一告依春对照品溶液（浓度是51.6ug/mL），进样量为20uL，注入高效液相色谱仪中，连续进样6次，6次峰面积的RSD为1.20%。
表明高效液相色谱仪的精密度良好。
见表2。
3.6稳定性试验
取正交实验的第7次实验（25倍水，提取1次，每次75rain）所得到的浸膏，这次实验的浸膏得率为31.14%。
精密称定，按“供试品溶液制定”项下的配制方法配制供试品溶液，放冰箱内备用。
分别于0，2，4，8，12，24h精密吸取供试品溶液20uL，注入高效液相色谱仪中。
由于峰面积的RSD=1.26%，表明供试品溶液在24h内保持稳定。
见表3。
3.7重复性实验
取正交实验的第9次试验（25倍水，提取3次，每次75min）所得到的浸膏，这次实验的浸膏得率为43.27%，精密量取浸膏0.17308g，一共称取6份。
将称取得浸膏放入25mL容量瓶中，加超纯水至容量瓶的刻度线。
振荡摇匀使溶解。
将配制好的供试品溶液用针管通过微孔滤膜注入EP管中，既得所需的供试品溶液。
将配制好的6份供试品溶液按顺序注入高效液相色
谱仪中，进样量为20uL。
高效液相色谱仪所测得的参数如下表4所示。
由于峰面积的
RSD=2.49%，表明该实验方法的重复性好。
见表4。
3.8加样回收率实验
取已知同一供试品6份，配制成供试品溶液，经高效液相及标准曲线算得其浓度为
12.57ug/mL，取供试品溶液0.1mL，再取浓度为1.6125ug/mL的对照品溶液0.9mL，将两者混匀，制成新的供试品溶液；取供试品溶液（浓度为12.57ug，mL）1mL，浓度为6.45ug/mL的对照品溶液2mL，将两者混匀，制成另一种新的供试品溶液；再取供试品溶液（浓度为
12.57u/mL）1mL，浓度为51.6ug/mL的对照品溶液0.25mL，将两者混匀，制成第三种供试品溶液。
依次注入高效液相色谱仪中，所得参数如下表5所示。
根据公式：加样回收率=实际测得的量（ug）一供试品中所含（R-S）-告依春的量（ug）/加入对照品的量（ug）×100%。
见表5。
4.讨论
本论文研究了用高效液相色谱法测定板蓝根水提物中（R-S）-告依春的含量，该法重复性好，准确度高。
但是，做高效液相所使用的色谱条件不同也会影响高效液相的效率，检测波长依据《中国药典》现行版一部板蓝根项下的规定，测定波长为245nm。
在流动相及流动相的比例选择上，经查阅大量文献资料了解到，以甲醇一水为流动相时响应值好，峰形良好，理论塔板数，分离度等符合要求。
在提取溶剂的选择上，查阅大量文献。
由于（R-S）-告依春为水溶性成分，所以直接用水对样品进行稀释处理，操作方便，经济节省，对环境无污染。
中国药典中药材品的检验标准一般都较成熟，本文的研究思路是参考药典拓展开来，还存在不足之处，尚需进一步深入研究。