第02章药物的鉴别实验

v
n n
（三）、折光计
1、其准确度可达 ±0. 0002 2、测定折光率的范围在 1. 3000~1.7000 3、测定用的折光计需能读数至0 .0001 。
（四）、折光法在药物分析中的应用 1、 鉴别与纯度检查 2、 定量 1）、 标准曲线法 2 ）、 折光率测定法 C =（n - n。）/ F C 药物溶液的浓渡（g/ml，%）; n 一定温度下（通常为20℃ ）测得的折光率; n。为同温度下水的折光率; （20℃时 n。= 1.3330 ） F 为折光率因素----药物溶液的浓度每增减1 % 时， 其折光率的增减数。
为折射角 v1为在（ ）中 的传播速度 V2为在（） 中的传播速度
光疏物质 界面
（ ）
光密物质（） 法线
折射线
n=
Sinⅰ ________ Sin
=
v 1 ______ v2
折光的一般原理
阿贝折射仪的原理
法线
0 1 Sin90 n=________= _______ Sinc Sinc
1、有机氟化物 2、有机酸盐 3、芳香第一胺类 4、托烷生物碱类 5、无机金属盐
6、无机酸根
（三）专属鉴别试验
药物的专属鉴别试验（specific identification test ）是证 实某一种药物的依据，它是根据每一种药物化学结构的差异 及其所引起的物理化学特性不同，选用某些特有的灵敏的定
性反应，来鉴别药物的真伪。
三、鉴别方法 （一）化学鉴别方法 1、呈色反应鉴别法 2、沉淀生成反应鉴别法 3、荧光反应鉴别法 4、气体生成反应鉴别法 5、测定生成物的熔点
（二） 光谱鉴别法
1、紫外光谱鉴别法 2、红外光谱鉴别法 红外光谱法是一种专属性很强、应 用较广（固体、液体、气体样品）的鉴别方法。主要用于组 分单一、结构明确的原料药、特别适用于用其他方法不易区 分的同类药物，如磺胺类、甾体激素类和半合成抗生素类药 品。
第二章
一、概述
药物的鉴别试验
药物的鉴别试验（ identification test ）是根据药物的分子 结构、理化性质，采用化学、物理化学或生物化学方法来判断 药物的真伪。
二、鉴别实验的项目
（一） 性状 药物的性状（description ）反映了药物特有的物理性质，
一般包括外观、溶解度和物理常数等。
增高6 ℃时折光率减少了： 0.0001 × 6 = 0.0006 故20 ℃时折光率为 1.3460 + 0.0006 =1.3466
________________________
1.3466 －1.3330 0.00131
C=
= 10.38
答: KI溶液的浓度为10.38%
二、旋光度测定法：
5 x 4 3 2 1
0
C1 c2 c3
c4 cx c5
c
旋光法的定量方法-------标准曲线法
例 如：用2分米长测定管，在 20 ℃时测葡萄糖 。 注射液的旋光度为+9.80 ，计算该葡萄糖注射液 的浓度。
解：按药典规定葡萄糖（无水品）的比旋度为 [ ]D =52 .75 （取+52 .50 ~ 53.00 ）的平均 值）
折光率测3 n2 n1 0
c1 c 2 c 3
c4 c x c 5
例1：KCl溶液，在于20 ℃时测得其折光率为 1.3564 ，溶剂（水）在20 ℃的折光率为 1.3330。已知KCl的折光率因素（F）为 0.00117 求KCl溶液的浓度。 解： 1.3564 - 1.3330 C = ————————— =20 （g /ml ，% ） 0.00117 答：KCL溶液的浓度为20% 。
M C 6H 12 O6 • H2O
M C 6H 12O6
180 . 17
即:葡萄糖注射液中含葡萄糖的含量为 10.22%。 直按取样测定时，本题计算也可按中国药典规定，将 乘以 1.0426 即得供试品中每100ml含 C6 H12 O6 • H2 O的克数 : 9.8 × 1.0426 = 10.22 （ %）。
具有旋光性的物质一般分为两大类： 1）、具有晶格的物质。 2 ）物质的分子具有不对称结构。
（一）：旋光性与比旋光度（或称比旋度）：
偏振面沿顺时针方向旋转的旋光物质,叫右旋。通 常以 “+ ” 或 “d ” 表示。沿反时针方向旋转的旋光物 质叫左旋， 通常以 “ — ” 或 “ I ” 表示。 此种旋转在一定的条 件 下，有一定度数，称为 “ 旋光度 ” ，用符号 “”表示。
采用温度每增加 1 ℃ 时，溶液折光率的差数来校正： 根据实验测定的结果，一般药物的水溶液，若 以20 ℃ 为标准，温度每升高1 ℃ ，其折光 率较2 0 ℃时减小0.0001 ；每降低 1 ℃，折光率较20 ℃ 时增加 0.0001, 故水溶液可用此进行校正。 例如：在 26℃时测得 KI溶液的折光率为 1.3460，已 知： KI的 F为 0.00131,求溶液中 KI的浓度。 解：将 26 ℃时的折光率换为 20 ℃时的折光率 26 - 20 = 6 ℃ 每增高 1 ℃ ，折光率较 20 ℃时减小 0 .0001 。
3、鉴别条目简练，选择专属的方法进行鉴别， 平均每个品种收载2条左右。
四、 鉴别试验条件
鉴别试验的目的是判断药物的真伪。 （一）溶液的浓度 （二）溶液的温度
（三） 溶液的酸碱度
（四）试验的时间 （五）干扰成分的存在
五、鉴别试验的灵敏度
（一）反应灵敏度和空白试验
在一定的条件下，能在尽可能稀的溶液中观测出尽可能少 量的供试品，反应对这一要求所能满足的程度，即称为反应的 灵敏度（sensitivity）。它以两个相互有关的量，即最低检出量 （minimum detectable quantity ）（又称检出限量）和最低检 出浓度（minimum detectable concentration ）（又称界限浓度） 来表示。 所谓空白试验，就是在供试品鉴别试验完全相同的条件下， 除不加供试品外，其他试剂均同样加入而进行的试验。 （二）提高反应灵敏度的方法 1、加入与水互不相溶的有机溶剂提取浓集
1、 外观 2、 溶解度
3、物理常数
物理常数是鉴定药品质量的重要指标。其测定
结果不仅对药品具有鉴别意义，也反映了该药品的纯杂程度。药 典收载的物理常数包括： 相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、 折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收系数。
（二） 一般鉴别试验
一般鉴别试验（general identification test）是依据某一类药 物的化学结构或理化性质的特征，通过化学反应来鉴别药物的真 伪。对无机药物是根据其组成的阴离子和阳离子的 特殊反应 ；对 有机药物则大都采用典型的官能团反应。
i=900
入射线 c 临界角 折射线
入射角的正弦 sin i 1 n= ----------------------- = ---------------- = -------Sin r v2 折射角的正弦 （二）、影响折光率的因素
1、 T 2、 ; 3、压力（对于液体和固体影响不显著 4、与溶液的浓度有关（ C n ）
（三）色谱鉴别法
1、薄层色谱鉴别法
岛津CS-9000 双波长薄层扫描仪
瑞士CAMAG SCANNER 3 薄层扫描仪
2、高效液相色谱鉴别法
气相色谱鉴别法
3、纸色谱鉴别法
（四）生物学法 （五）药物鉴别方法新动向 1、仪器方法用于药物的鉴别数量大大增加，尤其 是红外光谱法和高效液相色谱法。 2、制剂广泛采用IR法鉴别。
自然光
偏振光片 或称尼科 尔棱镜
偏振光
供试品管
偏振面转
（含旋光性物质的溶液 ） 过了一定 的角度
旋光法的一般原理
（二）、影响旋光度因素
1 2 3 4 5
、温度 [ ] 、波长 [ ] 、溶剂 、 浓度 、液层厚度
t
（三）、旋光法在药物分析中应用
1 、定性与杂质检查 2 、溶液的含量测定 1）标准曲线法 2）比旋光度法
20
。
。
。
现已知 L =2 dm 则 ：
= 9.80
。
100 100 9.80 C = ———— = —————— = 9.29 （ % ） 20 [] D L 52 .75 2
计算所得含水葡萄糖的浓度,葡萄糖注射含量是按 结晶葡萄糖（C6H12O6• H2 O）计算的。
故下列计算结果应为： 198 .17 9.29 × —————— = 9.29 × ————— =10.22（% ）
2、改进观测方法
附
一、折光率测定法 定义： 利用测定物质的折光率来进行定性定量的分析 方法，叫折光法。
折光率是用折光计来测定的，常用阿贝折光计测定。
（一）折光的一般原理：
光线自一种透明介质进入另一个透明介质的时候， 由于两种介质密度不同，光进行的速度发生变化，所以， 光线就发生如图折射：
入射线
i i为入射角
采用同温度溶剂 的折光率来校正折光率：
例2：在26 ℃测得KI溶液的折光率为1.3460。已知： KI的F为0.00131 。求其浓度。
解：查26 ℃时水的折光率为1.3324 。 1.3460 - 1.3324
C =
______________________
= 10.38（%）
0.00131
答：碘化钾浓度为 10.38 %。