生化检验辅导:血糖酶法测定的主要特点
2017年临床检验技师考试生化检验第二章重要考点(1)
2017年临床检验技师考试生化检验第二章重要考点(1)糖尿病的实验室检查一、血糖测定血糖测定是检查有无糖代谢紊乱的最基本和最重要的指标。
(一)样本:血浆或血清。
血糖测定一般可以测血浆、血清和全血葡萄糖。
由于葡萄糖溶于自由水,而红细胞中所含的自由水较少,所以全血葡萄糖浓度比血浆或血清低10%~15%,且受红细胞比容影响。
一般来说用血浆或血清测定结果更为可靠。
除与标本的性质有关外,血糖测定还受饮食、取血部位和测定方法影响。
餐后血糖升高,静脉血糖 < 毛细血管血糖 < 动脉血糖。
所以如果不是特殊试验,血糖测定必须为清晨空腹静脉取血。
取血后如全血在室温下放置,血糖浓度每小时可下降5%~7%(约10mg/dl)左右;如立即分离血浆或血清,则可稳定24h。
如不能立即检测而又不能立即分离血浆或血清,就必须将血液加入含氟化钠的抗凝瓶,以抑制糖酵解途经中的酶,保证测定准确。
(二)方法1.氧化还原法:(Folin-Wu法)葡萄糖可使二价铜离子还原为一价铜离子,然后一价铜离子又可和某些化合物显色进行测定。
葡萄糖与碱性铜试剂共热与磷钼酸成蓝色钼兰该法易受血中其他还原糖的干扰,现已淘汰。
2.缩合法:邻甲苯胺法(0-TB法)利用邻甲苯胺类在酸性环境中可与葡萄糖醛基缩合成葡萄糖基胺,后者脱水生成Schiff氏碱,再经结构重排,生成有色物质。
该法操作简便,灵敏度高,主要缺点是试剂腐蚀性大,邻甲苯胺被怀疑有致癌性,既有碍于健康又易损坏仪器。
以上非酶法均为非特异性方法,由于非糖还原物质,如谷胱甘肽,维生素C、肌酸、肌酐、尿酸等也都能参与反应,可使结果比酶法偏高0.3~0.6mmol/L。
3.酶法:包括葡萄糖氧化酶-过氧化物酶(GOD-POD)偶联法、己糖激酶(HK)法和葡萄糖氧化酶-氧速率(GOD-OR)法。
酶法采用特定的酶促生化反应步骤,因此具有特异性高。
(1)葡萄糖氧化酶-过氧化物酶偶联法(GOD-POD法):目前应用最广泛的常规方法。
生化检验技术实验报告
一、实验目的1. 掌握血糖测定的原理和方法。
2. 熟悉血糖测定仪器的操作流程。
3. 了解血糖在人体代谢中的重要性。
二、实验原理血糖测定是通过检测血液中的葡萄糖浓度来评估血糖水平。
常用的血糖测定方法有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法和葡萄糖氧化酶-氧电极法等。
本实验采用葡萄糖氧化酶法进行血糖测定。
葡萄糖氧化酶(GOD)催化葡萄糖与氧气反应生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的催化下分解为水和氧气,氧气在电极上还原,产生电流,电流大小与葡萄糖浓度成正比。
三、实验设备与试剂1. 实验设备:血糖测定仪、微量移液器、移液管、一次性采血针、酒精棉球、消毒液等。
2. 实验试剂:葡萄糖氧化酶试剂盒、葡萄糖标准品、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制(1)准备标准溶液:将葡萄糖标准品用蒸馏水稀释成不同浓度的标准溶液。
(2)按照试剂盒说明书设置血糖测定仪,将标准溶液分别加入测定管中。
(3)开启血糖测定仪,依次测定各标准溶液的血糖浓度,记录数据。
(4)以葡萄糖浓度为横坐标,测定值为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 血糖测定(1)用酒精棉球消毒采血部位,用一次性采血针对准静脉,待血液流出后,用消毒液消毒采血针。
(2)用微量移液器吸取适量血液,加入测定管中。
(3)按照试剂盒说明书设置血糖测定仪,将测定管放入测定仪中。
(4)开启血糖测定仪,待测定仪显示血糖浓度后,记录数据。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制绘制标准曲线,得到线性方程:y = 0.0037x + 0.0035,R² = 0.9987。
2. 血糖测定本次实验测得血糖浓度为4.5 mmol/L。
六、实验讨论1. 本实验采用葡萄糖氧化酶法进行血糖测定,操作简便、快速,准确性较高。
2. 在实验过程中,要注意控制操作误差,如准确配制标准溶液、正确设置测定仪等。
3. 血糖测定对于糖尿病等疾病的诊断和治疗具有重要意义,本实验有助于加深对血糖测定原理和方法的理解。
生化检验复习重点详解1
生化检验复习重点详解11.与糖尿病相关生化检测指标有哪些?它们的临床意义有何不同?2.简述目前糖尿病的诊断标准3.简述OGTT4.黄疸的形成机制有哪些5.反映肾小球滤过功能的试验有哪些6.简述临床检验生物化学的进展及发展趋势:7.根据米-曼式方程计算,当[s]=3Km时,其反应速度V为多大7.简述正常血浆中的酶动态特点及影响酶浓度的因素8.简述病理性血浆中酶浓度异常的机制9.简述酶浓度的测定方法10.简述酶偶联反应法的原理:11.简述临床同工酶的分析方法:12.简述体液中酶浓度测定的主要影响因素及控制13.临床酶学测定之前,标本的采集、处理与贮存有何注意点?14.简述自动生化分析仪进行临床酶学测定时系数K值的计算与应用15.简述ALT测定及其临床意义:16. AAT的临床意义有17.简述CK及其同工酶测定的临床意义50. Apolipoprotein 检测的临床意义。
51.DHLC 抗动脉粥样硬化的功能成的α2β2四聚体。
11氨基酸代谢库(metabolic pool):食物蛋白质经过消化而被吸收的氨基酸与体内组织蛋白质降解产生的氨基酸混在一起,分布在体内各处,参与代谢,称为氨基酸代谢库。
12氨基酸血症(amino-acidemia):当酶缺乏出现在代谢途径的起点时,其作用的氨基酸将在血液环中增加,称为氨基酸血症。
这种氨基酸如从尿中排出,则称为氨基酸尿症(amino-aciduria)。
13高糖血症(hyperglycemia):是糖代谢紊乱导致血糖浓度高于参考范围上限的异常现象,主要表现为空腹血糖损伤,糖耐量减退和糖尿病。
14糖尿病(diabetes mellitus,DM):是一组由于胰岛素分泌不足和或胰岛素作用低下而引起的糖代谢紊乱性疾病,其特征是高血糖症。
15OGTT:是在口吸一定量葡萄糖后2h内进行系列血糖浓度测定,以评价不同个体的血糖调节功能的一种标准方法。
16高脂蛋白血症:指血浆中CM,VL,DL,LDL,HDL等脂蛋白有一种或几种浓度过度升高的现象。
血糖的定量测定(葡萄糖氧化酶法)
血糖的定量测定(葡萄糖氧化酶法)血糖是指血液中葡萄糖的含量。
葡萄糖是人体主要的能量来源,血糖的测定是检查人体内部能量代谢状态的重要项目之一。
这篇文章将介绍血糖定量测定的实验原理、方法以及实验注意事项。
一、实验原理血糖的定量测定方法主要是利用葡萄糖氧化酶将血液中的葡萄糖在催化反应下转化为过氧化氢和D-酮糖酸,利用过氧化氢的比色法来测定血糖的含量。
具体反应式为:(1)葡萄糖+O2+H2O→葡萄糖氧化酶 D-酮糖酸+H2O2(2)2H2O2+Fe2+→2H2O+Fe3++O2(3)Fe3++TSC(三硝基苯胺)→FeTSC3(红色化合物)其中,TSC(三硝基苯胺)为过氧化氢的比色试剂,用Fe2+作催化剂促进反应进行,所生成的红色化合物FeTSC3与过氧化氢的浓度呈线性关系。
二、实验材料1.血糖标准品:10mmol/L2.葡萄糖氧化酶3.三硝基苯胺(TSC)、醋酸钠、乙二胺四醋酸盐二水合物(EDTA•2H2O)、氢氧化钠(NaOH)4.0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.5)5.准确量杯、试管、离心管、吸光度计、恒温水浴器、移液管三、实验步骤1.制备血清样品:将血液放置静置后离心取血清,制成5mmol/L、10mmol/L、15mmol/L、20mmol/L的葡萄糖标准品。
2.实验组织:3个组别,每组3个试管。
A组:加1mL的10mmol/L葡萄糖标准品;B 组:加1mL的血清标本;C组:加入1mL的磷酸盐缓冲液作为对照组。
注意,每组要做三个平行实验。
3.反应体系准备:①将实验组织中的标准品、血清样本和磷酸盐缓冲液分别加入3毫升离心管中。
②分别加入1mL葡萄糖氧化酶。
③分别加入1mL EDTA全部气泡排除。
⑤每组混合后放置在37℃下反应20分钟。
⑥在上述反应过程中,加入2毫升0.1mol/L的NaOH溶液使溶液呈碱性,使催化反应更为稳定。
4.吸光测定:将反应充分混合后,吸取适量的样品,放到吸光度计槽,设定波长为505nm,用对照组值进行比较,计算出各组的吸光度,并根据标准曲线计算出各样本的葡萄糖含量。
生化检验辅导:血糖测定酶法的主要特点
目前血糖测定主要采用酶法,包括:
①已糖激酶法,该法准确度和精密度高,特异性高于葡萄糖氧化酶法,适用于自动化分析,为葡萄糖测定的参考方法;
②葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法,该法准确度和精密度都能达到临床要求,并且操作简便,适用于常规检验;
③葡萄糖氧化酶-极谱分析法,该法是GOD-POD的改良方法,它以氧电极进行极谱分析,直接测定葡萄糖氧化酶法第一步反应消耗的氧来进行定量,摒弃了特异性不高的第二步反应。
该法可用于血浆、血清、脑脊液及尿液标本的测定,但由于血细胞会消耗氧气,故不能用于全血标本;
④葡萄糖脱氢酶法,该法高度特异,不受各种抗凝剂和血浆中其他物质的干扰,制作成固相酶,可用于连续流动分析,也可用于离心沉淀物的分析。
血糖 生化检测 原理
血糖生化检测原理
血糖是指血液中葡萄糖的浓度,通常用于评估糖尿病的诊断和管理。
生化检测是通过分析生物体内的化学成分来评估健康状况的一种方法。
血糖的生化检测原理涉及到葡萄糖在体内的代谢过程以及检测方法的工作原理。
首先,我们来看一下葡萄糖在体内的代谢过程。
葡萄糖是人体细胞获取能量的重要来源,它主要通过饮食摄入,然后进入血液循环。
胰岛素是一种激素,它在血糖升高时会被释放出来,促使细胞摄取葡萄糖并储存为能量或转化为脂肪。
当血糖浓度降低时,胰岛素的分泌减少,使得肝脏释放储存在其中的葡萄糖,以维持血糖水平的稳定。
接下来是血糖的生化检测方法的工作原理。
常见的血糖检测方法包括血糖仪测定、血清葡萄糖测定、葡萄糖耐量试验等。
其中,血糖仪测定是最常用的方法之一。
它通过一小滴血液与试纸上的化学试剂发生反应,然后使用电子仪器测量反应产生的电流或色素变化来确定血糖浓度。
血清葡萄糖测定则是通过化学分析方法,将血清中的葡萄糖与特定试剂发生反应,再利用光度计或电化学方法测定反应产物的浓度来确定血糖水平。
葡萄糖耐量试验则是通过口服
葡萄糖后测定血液中葡萄糖浓度的变化来评估胰岛素的分泌功能和血糖调节能力。
总的来说,血糖的生化检测原理涉及到葡萄糖在体内的代谢过程以及检测方法的工作原理。
这些检测方法能够帮助医生评估糖尿病患者的血糖水平,指导治疗方案的制定,以及监测治疗效果。
希望这些信息能够帮助你更全面地了解血糖生化检测的原理。
生化检验重点
名解1.血浆固有酶:此类酶属血浆蛋白的固有成分,在血浆中发挥特定催化作用,也称血浆特异酶。
如凝血酶原、纤溶酶原等属于蛋白酶的凝血与抗凝血因子。
2.同工酶:同一种属中由不同基因或等位基因所编码的多肽链单体、纯合体或杂合体,具有相同的催化作用,但其分子构成、空间构象、理化性质、生物学性质以及器官分布或细胞内定为不同的一组酶称为同工酶。
3.巨酶:血浆中可出现相对分子质量远大于该酶正常相对分子质量的一些酶,称巨分子酶或酶的大分子形式,简称巨酶。
4.急性时相反应蛋白:在急性炎症性疾病如感染,创伤,心肌梗死和肿瘤等情况下,AAT、AAG、Cp、CRP、Hp、以及α1-抗糜蛋白酶,血红素结合蛋白、C3、C4纤维蛋白原等血浆蛋白浓度会显著升高,而血浆PA、Alb、TRF出现相应的降低。
这些血浆蛋白质统称为~ 5.高尿酸血症:由尿酸排泄障碍或嘌呤代谢紊乱引起6.痛风:是一组疾病,由遗传性和(或)获得性尿酸排泄减少和(或)嘌呤代谢障碍,导致高尿酸血症及尿酸盐结晶形成和沉积,从而引起特征性急性关节炎、痛风石、间接性肾炎,严重者呈关节畸形及功能障碍,常伴尿酸性尿路结石,仅有高尿酸血症,即使合并尿酸性结石也不能称为痛风。
7.脂蛋白:由于TG(三酰甘油)和胆固醇都是疏水性物质,在血液中必须与特殊蛋白质和PL等形成亲水的球形大分子,才能被运输并进入组织细胞,这种球形大分子复合物被称作脂蛋白。
8.载脂蛋白:脂蛋白中的蛋白质具有运输脂质的作用,故被称为载脂蛋白。
9.氧离曲线:若以PO2对血氧饱和度作图,以PO2为横坐标,血氧饱和度为纵坐标,所绘制的曲线称为氧离曲线。
10.骨代谢:正常成熟骨的代谢主要以骨重建的形式进行。
骨重建是骨的循环性代谢方式,在调解激素和局部细胞因子等的协调作用下,骨组织不断吸收旧骨(骨吸收),生成新骨(骨形成)。
如此周而复始地循环进行,形成了体内骨代谢的稳定状态。
10.微量元素:根据机体对微量元素的需求分类必需微量元素和非必需微量元素,人体必需微量元素:维持人的生命,保证正常生理功能所必需的,缺乏会导致某种疾病或严重功能不全。
生化检验辅导:酶活性的测定方法
(1)按反应时间分类法:20世纪50年代以前大都使用固定时间法。
这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性,现多已不用。
50年代中期开始采用连续监测法。
这种方法用自动生化分析仪上完成,可以测酶反应的初速度,其结果远比固定时间法准确,在高浓度标本尤为明显,但本法也受到反应时间,反应温度,试剂等的影响,应加以注意。
1)定时法:通过测定酶反应开始后某一时间段内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法,称为两点法,其中t1往往取反应开始的时间。
在酶反应一定时间后,往往通过加入强酸、强碱、蛋白沉淀剂等,使反应完全停止,所以也叫中止反应法。
2)连续监测法:又称为动力学法或速率法、连续反应法。
在酶反应过程中,用仪器监测某一反应产物或底物浓度随时间的变化所发生的改变,通过计算求出酶反应初速度医学`教育网搜集整理。
3)平衡法:通过测定酶反应开始至反应达到平衡时产物或底物浓度总变化量来求出酶活力的方法,又叫终点法。
(2)按监测方法分类法:
①分光光度法;②旋光法;③荧光法;④电化学方法;⑤化学反应法;⑥核素测定法;⑦量热法。
生化检验项目
生化检验项目一、任务背景生化检验项目是临床医学中常用的检验方法之一,通过对血液、尿液、体液等样本中的生化指标进行检测,可以评估人体的生理功能和病理状态,为临床诊断和治疗提供重要依据。
本文将详细介绍生化检验项目的标准格式文本。
二、检验项目及标准格式文本1. 血液生化指标检测血液生化指标检测是常规的生化检验项目之一,主要包括以下指标:(1) 血糖测定血糖测定是评估糖代谢功能的重要指标,可用于糖尿病的诊断和治疗监测。
标准格式文本如下:检测方法:酶法测定正常参考范围:空腹血糖浓度为3.9-6.1 mmol/L结果解读:血糖浓度高于正常范围可能提示糖尿病或其他糖代谢异常。
(2) 血脂检测血脂检测用于评估血液中脂质的水平,包括总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇等指标。
标准格式文本如下:检测方法:酶法测定正常参考范围:- 总胆固醇:<5.2 mmol/L- 甘油三酯:<1.7 mmol/L- 高密度脂蛋白胆固醇:>1.0 mmol/L- 低密度脂蛋白胆固醇:<3.4 mmol/L结果解读:血脂水平异常可能与心血管疾病的风险增加相关。
(3) 肝功能检测肝功能检测用于评估肝脏的生理功能和病理状态,包括丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、总胆红素、直接胆红素和白蛋白等指标。
标准格式文本如下:检测方法:酶法测定正常参考范围:- 丙氨酸氨基转移酶:男性<40 U/L,女性<32 U/L- 天门冬氨酸氨基转移酶:男性<37 U/L,女性<31 U/L- 总胆红素:<17.1 μmol/L- 直接胆红素:<6.8 μmol/L- 白蛋白:35-55 g/L结果解读:肝功能异常可能与肝炎、肝硬化等肝脏疾病相关。
2. 尿液生化指标检测尿液生化指标检测是评估尿液中的生化成分的重要方法,主要包括以下指标:(1) 尿蛋白定性检测尿蛋白定性检测用于评估尿液中蛋白质的存在与否,可用于肾脏疾病的筛查和监测。
标准格式文本如下:检测方法:免疫层析法结果解读:阳性结果可能提示肾脏疾病或其他病理状态。
生化检验相关实验简化版
一、血糖检测:--糖尿病1、葡萄糖氧化酶法:过氧化物酶;4-氨基安替比林和苯酚氧化缩合生成红色的醌类化合物(Trinder反应);505nm2、己糖激酶法:NADPH 340nm二、血清总蛋白检测:1、微量凯氏定氮比色法:纳氏试剂(碘化钾汞复盐),棕黄色440nm2、双缩脲法:540nm3、血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳分析:等电点不同,从正极开始:白蛋白,α1,α2,β,γ三、血清白蛋白检测1、电泳法2、免疫化学法3、染料结合法(溴甲酚绿BCG),最常用,无需分离白蛋白和球蛋白;蓝绿色630nm。
四、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定--肝功能损害1、赖氏比色法:丙氨酸,α-酮戊二酸;2,4-二硝基苯肼(腙)红棕色505nm五、血清(尿)淀粉酶检测--急性胰腺炎1、碘-淀粉比色法:AMY:淀粉酶蓝色660nm六、血清乳酸脱氢酶测定—心肌梗死、肝病和某些恶性肿瘤1、LD, 2,4-二硝基苯肼(腙)红棕色440nm七、血清肌酸激酶(CK)测定—骨骼肌、心肌、脑组织,心肌梗死、多发性肌炎、休克1、比色法:无机磷酸法、酶偶联丙酮酸测定法、肌酸显色法(常用):A TP,肌酸与双乙酰和α-萘酚生成红色化合物;540nm2、速率法3、荧光分析法八、血清碱性磷酸酶(ALP)测定—肝胆系统、骨骼系统1、氨基安替比林比色法:ALP在碱性条件下使磷酸苯二钠水解,生成磷酸和游离酚,后者与4-氨基安替比林作用,并经铁氰化钾氧化成红色醌类化合物,510nm。
2、速率法:ALP在碱性条件下,使磷酸对硝基苯酚(4-NPP)释放出磷酸基团,生成磷酸基团和游离的对硝基苯酚(4-NP),形成黄色的醌,405nm九、血清γ-谷氨酰基移换酶(GGT)测定—肝胆系统1、底物:L-γ-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺;受体:双甘肽,在GGT的催化下,谷氨酰基转移到双甘肽分子上,同时释放出黄色的3-羧基-对硝基苯胺,405nm十、血清三脂酰甘油测定—动脉硬化1、分溶抽提-乙酰丙酮显色法:皂化反应、甘油、过碘酸。
生化检验血糖ppt课件
30
3、特殊类型的糖尿病
细胞基因缺陷:常染色体显性遗传,表现为胰岛素 分泌的轻度受损和胰岛素作用缺陷。 胰岛素作用基因缺陷:胰岛素受体变异。 胰岛素的外分泌疾病:各种原因继发糖尿病。 内分泌疾病所致:拮抗激素过量。
31
4、妊娠期糖尿病(GDM)
GDM:指在妊娠期间发现的糖尿病,包括任何程度的 糖耐量减退或糖尿病发作,但已知糖尿病伴妊娠者 不属此型。其发病率约为孕妇的1%--2%。 妊娠期糖 尿病有以下特点: 1、孕前未发现糖尿病或糖耐量 减低。 2、妊娠期糖尿病对胎儿的影响以自然流产, 胎死宫内,早产及围产期死亡为多见,分娩巨大儿 较多。
快测定。若不能及时测定,标本应中加入碘乙 酸钠或氟化钠抑制糖酵解作用,可使血葡萄糖 在室温下稳定3天。
44
2.应用评价 FPG是糖尿病的常用检测项目,但在2型糖尿病中, 高血糖是相对较晚才产生的,因此仅应用FPG这个 标准将延误诊断,并对糖尿病人群的流行估计过低。
45
葡萄糖的测定方法及评价:
目前多采用酶法测定血浆葡萄糖,主要 用的是已糖激酶和葡萄糖氧化酶,也有用 葡萄糖脱氢酶。
46
(1)已糖激酶法
葡萄糖+ATP HK
6-磷酸葡萄糖+ADP
G-6-PD
6-磷酸葡萄糖+NADP+
6-磷酸葡萄糖酸+NADPH+H+
NADPH在340nm处有一吸收峰,其吸光度增加与血 糖浓度成正比。本法准确度和精密度高,特异性高,适
用于自动化分析。轻度溶血、脂血、黄疸等不干扰测定 。
47
(2)葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法:
28
特点:
①典型病例常见肥胖的中老年人。 ②起病较慢、症状较轻,体检时发现。病人可
血糖葡萄糖氧化酶法测定原理
血糖葡萄糖氧化酶法测定原理嘿,朋友们!今天咱就来讲讲血糖葡萄糖氧化酶法测定原理。
这可真是个神奇又重要的玩意儿呢!你想想看,血糖就像我们身体里的一个小秘密,它的高低可关系到我们的健康呢!而葡萄糖氧化酶法就像是一个厉害的侦探,能把这个小秘密给揪出来。
简单来说呀,葡萄糖氧化酶就像是一个特别的小助手,它对葡萄糖那可是情有独钟。
当我们把血液样本放进去,这个小助手就会立刻行动起来,和葡萄糖紧紧地拥抱在一起。
然后呢,通过一系列的反应,就会产生一些其他的物质。
这就好比一场奇妙的化学反应舞会!葡萄糖和氧化酶在舞池中尽情舞蹈,然后产生出各种信号,让我们能知道血糖的情况。
是不是很有趣呀?而且哦,这个方法就像一个精准的指南针,能准确地指引我们了解血糖的数值。
它可不会随便糊弄我们,总是能给出可靠的结果呢!咱再打个比方,血糖葡萄糖氧化酶法就像是一个经验丰富的老中医,通过望闻问切,就能把身体的状况摸得透透的。
只不过这里的“望闻问切”是通过一系列的化学反应来实现的。
你说,这是不是很神奇呀?我们的科技发展得可真是厉害,能想出这么巧妙的办法来检测血糖。
这可给医生和我们自己都带来了很大的帮助呢!如果没有这个方法,我们怎么能知道自己的血糖正不正常呢?那岂不是像在黑暗中摸索一样,心里没底呀!但有了它,就好像有了一盏明灯,照亮我们了解自己身体的道路。
所以呀,大家可别小看了这个血糖葡萄糖氧化酶法测定原理,它可是我们健康的小卫士呢!它能让我们及时发现问题,采取措施,让我们的身体一直保持棒棒的状态。
总之呢,血糖葡萄糖氧化酶法测定原理真的是太重要啦!它就像一个默默无闻的英雄,在背后守护着我们的健康。
我们要感谢科学家们发明了这么好的方法,让我们能更好地了解自己的身体。
让我们一起为这个神奇的方法点赞吧!原创不易,请尊重原创,谢谢!。
血糖测定原理
血糖测定原理血糖测定是指通过一系列的生化反应和仪器设备来测量人体血液中的葡萄糖浓度,这是一项非常重要的临床检测项目。
血糖水平的高低直接影响着人体的健康状况,因此准确地测定血糖浓度对于诊断糖尿病、监测糖尿病患者的治疗效果以及其他疾病的诊断都具有重要意义。
血糖测定的原理主要是基于酶促反应和光学测定技术。
当我们进行血糖测定时,首先需要将患者的血液样本加入到含有葡萄糖氧化酶和其他辅助试剂的试剂盒中。
葡萄糖氧化酶是一种特殊的酶,它能够催化葡萄糖和氧气发生氧化反应,生成葡萄糖酸和过氧化氢。
而过氧化氢是一种具有较强氧化性的物质,它能够与另一种特殊的酶——过氧化物酶发生反应,产生一种可以发出光信号的化合物。
这个化合物的光信号强度与血液中葡萄糖浓度成正比,因此我们可以通过光学仪器来测定血液中葡萄糖的浓度。
在实际的血糖测定过程中,我们通常会使用便携式血糖仪来进行测定。
这种仪器通常由采血针、试纸和测量仪器三部分组成。
首先,我们需要使用采血针在患者的指尖抽取一滴血液,然后将血液滴在试纸上。
试纸上的化学物质会与血液中的葡萄糖发生反应,产生一个可以发出光信号的化合物。
最后,测量仪器会通过光学传感器来测定这个化合物的光信号强度,从而计算出血液中葡萄糖的浓度。
需要注意的是,血糖测定的准确性受到许多因素的影响,比如说患者的饮食、运动、药物使用等。
因此,在进行血糖测定时,我们需要尽量控制这些影响因素,以确保测定结果的准确性。
此外,不同类型的血糖仪可能会有一定的误差范围,因此在进行长期监测时,建议使用同一款血糖仪来进行测定,以减小误差。
总的来说,血糖测定是一项非常重要的临床检测项目,它通过酶促反应和光学测定技术来测定血液中葡萄糖的浓度。
在实际操作中,我们通常会使用便携式血糖仪来进行测定,但需要注意测定结果的准确性受到许多因素的影响。
因此,在进行血糖测定时,我们需要尽量控制这些影响因素,以确保测定结果的准确性。
血糖检验中酶检验方法与快速检验方法的比较
血糖检验中酶检验方法与快速检验方法的比较发表时间:2016-11-12T15:11:58.040Z 来源:《医药前沿》2016年11月第31期作者:毛亚军[导读] 在血糖检验中酶检验法更加准确,快速检验法更加便捷,可将这两种方法结合起来使用。
(江苏省东台市三仓人民医院检验科江苏东台 224200)【摘要】目的:比较血糖检验中酶检验方法与快速检验法的检验结果。
方法:选取2015年5月至2016年3月在我卫生院接受血糖检验的患者78例,所有患者均抽取静脉血进行酶检验与快速检验,比较两种检验方法所得结果。
结果:静脉血酶检验法血糖值明显高于快速检验法(P<0.05),而静脉血酶检验法与末梢血快速检验所得血糖值无显著差异(P>0.05)。
结论:在血糖检验中酶检验法更加准确,快速检验法更加便捷,可将这两种方法结合起来使用,为疾病诊断与治疗提供准确依据。
【关键词】血糖检验;酶检验方法;快速检验【中图分类号】R446.11 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2016)31-0366-02 血糖检验属于临床中常见检验项目,可为人们提供疾病治疗、健康监控的科学依据,对于患者康复有重要促进作用[1]。
因此,对患者血糖进行及时、准确的测定具有重要意义。
常规生化仪酶检验为临床中血糖检验比较准确的方法,应用较多,然而其也存在一定不足,如操作复杂、检验耗时较长等,对于危急重症患者而言这一检验方法可能造成病情延误。
快速血糖仪检验为近年来研发的一种新的检验方法,操作简便且准确率较高[2]。
为分析酶检验法和快速检验方法结果的差异,本研究选取78例接受血糖检验的患者,分析其酶检验、快速检验法结果,现报道如下。
1.资料与方法1.1 临床资料选取2015年5月至2016年3月在我卫生院接受血糖检验的患者共计78例,所有患者均由于临床检验需要接受血糖检验。
男46例,女32例,年龄29~56岁,平均(44.6±5.7)岁;疾病类型:糖尿病44例,脑梗死3例,心血管疾病16例,昏迷11例,脑出血4例。
生化检验辅导:酶法测定钠原理
酶法测定钠的原理是利用钠依赖的β-半乳糖苷酶催化人工底物ONPG(邻硝基酚β-D-吡喃半乳糖苷);分解释放出有色产物邻硝基酚,在波长420nm处测吸光度变化。
酶法测钾的原理是利用对丙酮酸激酶的激活作用,后者催化磷酸烯醇式丙酮酸变为乳酸同时伴有还原型辅酶Ⅰ的消耗,在波长340nm处测NADH的吸光度下降。
酶法测氯的原理是利用氯使α-淀粉酶与钙离子结合变成有活性的形式,然后与α-和β-葡萄糖苷酶共同催化人工合成底物2-氯4-硝基苯酚-口-D麦牙庚糖苷(CNP-G7)使其水解产生2-氯4-硝基苯酚,此产物在波长405nm处有最大吸收,血氯浓度与淀粉酶活性成正比,同时也与2-氯4-硝基苯酚的生成量成正比。
酶法的优点是不需特殊仪器,缺点是价格较贵。
生化实验血糖的测定
实验四
血糖的测定
血糖及血糖水平的概念:
血糖:指血液中的单糖:葡萄糖 血糖水平:血浆中葡萄糖浓度 血糖总维持在恒定水平: 3.9~6.7mmol/L
评价
结果较可靠、但邻-甲苯胺须蒸馏后使用,有毒性。
空腹正常血糖参考值
3.9~6.1mmol/L或70-110mg/dL
葡萄糖氧化酶法:该法特异性高,反应条件温和,能 反映血中葡萄糖的真实含量,且已推广出试剂盒, 广泛应用与临床。
Folin-Wu法:该法对葡萄糖无特异性,一切还原物质 均可产生同样的反应。虽血液中葡萄糖为主要还原 物质,但仍存在其他非糖还原物质,故该法其参考 值较其他方法略高。
测定管光密度
测定管葡萄糖含量 =
×5
(mmol/L)
标准管光密度
注意事项
正确使用比色器皿:手拿比色皿的毛面;比色液 应占比色皿的2/3。
血糖测定应在取血后2小时内完成,放置太久,血 糖易分解,故使含量降低。
酶酚混合液一般现用现配。
补充实验
测2-3名同学早餐后和空腹血糖的 水平,并比较二者之间的区别。
A=KLC
朗伯-比尔定律应用
A标=KC标L A样=KC样L
C样=
A样 A标
× C标
标准品法测定未知样品含量
分光光度计的使用
1. 接通电源,调整波长。 2. 比色杯中加入空白及待测样品,并放入分光光度计中
,注意:加入样品量不超过比色杯体积的2/3。 3. 调模式为“透射比”,对空白对照进行调“0”(开盖
酶法血糖测定实验报告
一、实验目的1. 掌握酶法测定血糖的原理和操作步骤。
2. 了解血糖测定的临床意义及其在糖尿病诊断中的应用。
3. 培养实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理血糖测定是临床医学中一项重要的生化检测项目,用于评估机体糖代谢状况。
酶法测定血糖是常用的方法之一,其原理如下:葡萄糖氧化酶(GOD)能催化葡萄糖与氧气反应生成葡萄糖酸和过氧化氢。
过氧化氢在过氧化物酶(POD)的催化下,与色原性受体发生反应,生成红色化合物。
该化合物在特定波长下有最大吸收峰,其吸光度值与血糖浓度成正比。
三、实验材料与仪器1. 仪器:血糖分析仪、微量移液器、酶标板、恒温水浴箱、离心机等。
2. 试剂:葡萄糖标准液、血清/血浆、酶法血糖测定试剂盒(含葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、色原性受体、底物等)。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制:(1)将葡萄糖标准液按照试剂盒说明书进行稀释,配制成不同浓度的标准溶液。
(2)取酶标板,每孔加入100μl标准溶液。
(3)加入酶反应液,混匀后置于恒温水浴箱中反应。
(4)在特定波长下测定吸光度值。
(5)以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 样品测定:(1)取血清/血浆样品,按照试剂盒说明书进行稀释。
(2)取酶标板,每孔加入100μl样品溶液。
(3)加入酶反应液,混匀后置于恒温水浴箱中反应。
(4)在特定波长下测定吸光度值。
(5)根据标准曲线,计算样品中葡萄糖浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制:以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。
曲线线性良好,相关系数R²>0.99。
2. 样品测定:取受试者血清/血浆样品,按照上述方法进行测定。
结果显示,受试者血糖浓度为5.8mmol/L。
六、实验讨论1. 酶法测定血糖具有操作简便、快速、准确等优点,是临床常用的血糖测定方法。
2. 影响血糖测定的因素包括样品处理、酶反应条件、仪器校准等。
本实验中,通过严格控制实验条件,确保了结果的准确性。
血糖检测要了解生物酶特性
血糖检测要了解生物酶特性*导读:若能自我了解不同酶的特性,对于血糖监测的准确性提高极为有益。
目前中国糖尿病患者人数已仅次于印度,居世界第二位。
预计2025年更将高达5930万人。
而目前对糖尿病病情进行有效管理的关键是血糖检测,血糖监测也是糖尿病管理中的重要组成成分。
……若能自我了解不同酶的特性,对于血糖监测的准确性提高极为有益。
目前中国糖尿病患者人数已仅次于印度,居世界第二位。
预计2025年更将高达5930万人。
而目前对糖尿病病情进行有效管理的关键是血糖检测,血糖监测也是糖尿病管理中的重要组成成分。
据了解,血糖仪是一个完整的采血、检测、分析等过程的综合反映,其主要技术含量都在一张张小小的“塑料片”内部,而试纸的核心就是生物酶,不同酶和辅酶有不同的特性,检测的准确性、精确性和抗干扰能力也各不相同。
患者若能自我了解不同酶的特性,对于血糖监测的准确性提高也极为有益。
现在血糖试纸常用酶主要为葡萄糖氧化酶和葡萄糖脱氢酶两种,各有特点,对氧含量、药物、其他糖类物质的反应也不尽相同。
葡萄糖氧化酶对葡萄糖特异性高,但由于反应过程需要氧的参与,因此测量结果容易受血氧含量影响而造成结果出现偏差;试纸也容易与空气中氧气发生反应,一般应在开封后三四个月内用完。
那么,哪些情况下会对血氧含量产生影响呢?据专家介绍,呼吸衰竭、心衰、严重感染、海拔高度甚至剧烈运动都是影响血氧浓度的因素。
相比之下,葡萄糖脱氢酶不受血液或空气中氧分子的干扰,试纸一般可以使用至标明的有效期,但是由于反应过程需要一定的辅酶和介质的参与,有些辅基如吡咯喹啉醌(PQQ)可能与注射用麦芽糖、口服木糖和半乳糖发生反应,造成结果假性升高,所以除应用含有上述糖类的特定患者之外,葡萄糖脱氢酶技术可应用于其他合适的患者。
上海交大附属第一人民医院糖尿病研究室副主任王煜非教授说,在患者的血氧含量及红细胞压积容易发生不可预知变化的临床科室,谨慎使用葡萄糖氧化酶技术的血糖监测系统,应改用葡萄糖脱氢酶技术的血糖监测系统或用生化法测定血糖。
血糖测定实验报告原理
血糖,即血液中的葡萄糖,是人体重要的能量来源。
正常情况下,血糖浓度保持在一定范围内,以维持人体各项生理功能的正常进行。
然而,当血糖浓度超出正常范围时,可能导致糖尿病等疾病的发生。
因此,血糖测定对于糖尿病的早期诊断、治疗及预后评估具有重要意义。
二、实验原理血糖测定的原理主要包括以下几种方法:1. 葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法是临床常用的血糖测定方法之一。
其原理是:葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化反应,产生过氧化氢。
过氧化氢在过氧化物酶的催化下与色原性氧受体缩合,形成红色化合物。
此物质在特定波长(如505nm)处有最大吸收峰,其吸光度值与葡萄糖含量成正比。
通过测定吸光度值,即可计算出样品中的葡萄糖浓度。
2. 己糖激酶法己糖激酶法是国际临床化学和实验室医学联盟(IFCC)推荐的参考方法。
其原理是:己糖激酶催化葡萄糖与ATP反应生成葡萄糖-6-磷酸,同时消耗ATP。
葡萄糖-6-磷酸在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的催化下,生成NADPH。
NADPH在340nm波长处有特征吸收峰,其吸光度值与葡萄糖含量成正比。
通过测定吸光度值,即可计算出样品中的葡萄糖浓度。
3. 酶联免疫吸附测定法(ELISA)酶联免疫吸附测定法是一种基于抗原-抗体反应的定量分析方法。
其原理是:将葡萄糖抗体与固相载体结合,形成固相抗体。
待测样品中的葡萄糖与酶标记的葡萄糖抗体结合,形成固相抗体-葡萄糖-酶标记抗体复合物。
洗涤去除未结合的酶标记抗体后,加入底物,酶催化底物产生颜色反应。
通过测定颜色反应的吸光度值,即可计算出样品中的葡萄糖浓度。
4. 试纸法试纸法是一种简便、快捷的血糖测定方法。
其原理是:试纸上的葡萄糖氧化酶与待测样品中的葡萄糖反应,产生过氧化氢。
过氧化氢在过氧化物酶的催化下,与色原性物质反应,形成有色物质。
有色物质的颜色深浅与葡萄糖含量成正比,通过比色即可判断血糖浓度。
1. 葡萄糖氧化酶法(1)将待测样品与试剂混合,置于反应杯中。
(2)将反应杯放入分光光度计,在特定波长下测定吸光度值。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
目前血糖测定主要采用酶法,包括:
①已糖激酶法,该法准确度和精密度高,特异性高于葡萄糖氧化酶法,适用于自动化分析,为葡萄糖测定的参考方法;
②葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法,该法准确度和精密度都能达到临床要求,并且操作简便,适用于常规检验;
③葡萄糖氧化酶-极谱分析法,该法是GOD-POD的改良方法。
它以氧电极进行极谱分析,直接测定葡萄糖氧化酶法第一步反应消耗的氧来进行定量,摒弃了特异性不高的第二步反应。
该法可用于血浆、血清、脑脊液及尿液标本的测定,但由于血细胞会消耗氧气,故不能用于全血标本;
④葡萄糖脱氢酶法,该法高度特异,不受各种抗凝剂和血浆中其他物质的干扰,制作成固相酶,可用于连续流动分析,也可用于离心沉淀物的分析。