临床基因扩增检验试验的设置质量管理体系的-山东临床检验中心
临床基因扩增实验室管理和质量保证
失控的可能原因
弱阳性质控样本 核酸提取过程中的随机误差 仪器 试剂
阴性质控样本 扩增产物的污染 核酸提取过程中标本间的交叉污染
• THANK YOU!
临床基因扩增检验的室内质量控制
分析前的质量控制
实验室的正确设置 仪器、设备的管理 试剂质量 人员培训 规范操作
分析中的质量控制
常规检测临床标本的同时，测定一份或连续 测定数份含一定浓度分析物的质控样本，用 统计学方法判断质控样本的检测结果是否偏 出允许范围，进而决定常规标本检测结果的 有效性。
必须注意空气流向（通过实验室的空气压力 而实现）缓冲室：负压源自用于更换工作衣和工作鞋) 实验室：常压
各功能区内设置相应的仪器和设备 模板制备区设生物安全柜 各功能区内的任何物品不可移至其它功能区
原则： 各功能区互相独立 设缓冲间, 保持区域间完全分隔 各区物品专用
临床基因扩增检验实验室必须经过国家有关 部门的验收认可
（稳定可靠的质控品 切实可行的统计方法）
稳定可靠的室内质控物
质控样本的基质与待测样本一致 所含待测物浓度应接近试验的决定性水平
定性检测：检测的阳性判断值 定量检测：检测浓度范围的下、上限 稳定性、生物安全性 已知靶值或预期结果 单批量大、廉价
每次扩增必须设置监测污染发生的阴性 质控
切实可行的统计方法
必须遵循申报程序
（扫描程序）
第二节 临床基因扩增实验室的质量保证
室内质量控制 （internal quality control, IQC）
室间质量评价 （external quality assessment, EQA）
标本的采集、运送、保存及其质量控制
按检测要求建立标准操作程序和质量控制 规则
临床基因扩增检验实验室的设置质量管理体系的建立及其技术验收
产物分析区
核酸扩增后产物分析方法,如膜上或微孔板上 探针杂交方法,琼脂糖凝胶电泳,聚丙烯酰胺凝 胶电泳,核酸测序等方法。
本区是最主要的扩增产物污染来源，因此必 须注意避免通过本区的物品及工作服将扩增 产物带出。由于本区有可能用某些可致基因 突变和有毒物质，故应注意实验室人员的安 全防护。
卫检字2002第8号
临床基因扩增检验实验室技术验收申请表
一.基因扩增实验室基本情况 二.提供材料情况（十部分）
《医疗机构执业许可证》 拟设置基因扩增实验室医院医疗资源状况、对该检 测的需求及实验室运行的预测分析 拟设置基因扩增实验室的设置平面图 实验室主要负责人简历表 实验室工作人员一览表
临床基因扩增检验实验室技术验收申请表
试剂准备区
试剂分装应在超净台中进行 扩增反应混合液应使用分子生物学级的，试
剂制备好后应有质检： 一是否有污染（是否 有假阳性存在）、二是使用弱阳性质控物检 测试剂的扩增效果。
标本制备区
仪器设备配置标准：
生物安全柜 ， 2～8℃冰箱，-20℃或-80℃冰 箱；高速台式冷冻离心机；混匀器；水浴箱或加 热模块；微量加样器（覆盖1～1000µl）；可移动 紫外灯（近工作台面）；超净工作台，消耗品； 一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心 管和加样器吸头（带滤心）；专用工作服和工作 鞋；专用办公用品等。
样品处理对核酸扩增有很大影响，必须使用有效的 核酸提取方法，可在开展临床标本检测前对提取方法进 行评价。
标本制备区
温育既可在加热模块也可在水浴中进行。加 热模块和水浴应在每次使用时，都要对所设置 的温度使用已经校准的温度计进行校准。
卢志明-山东省临床基因扩增检验实验室的管理
第八条 省级临床检验中心或省级卫生行政部门指定机 构应当制订医疗机构临床基因扩增检验实验室技术审 核办法，组建各相关专业专家库，按照《医疗机构临 床基因扩增检验工作导则》对医疗机构进行技术审核。 技术审核办法报请省级卫生行政部门同意后实施。
临床基因扩增检验实验室管理的现状
2002年以前 《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》(卫医发〔2002〕10号） 培训临床基因检验人员 开始临床基因检验实验室的验收工作 2010年《临床基因扩增实验室管理办法》 2014年高通量基因测序试点工作 《个体化医学检测实验室管理办法》（征求意见稿）
2019/4/24
医学实验室质量和能力认可准则在组织病理学检查领域的应用说明 遗传病相关个体化医学检测技术指南（试行2016） 测序技术的个体化医学检测应用技术指南（试行2016） 个体化医学检测微阵列基因芯片技术规范 感染性疾病相关个体化医学分子检测技术指南 《山东省临床基因扩增检验实验室技术审核办法》
其他实验室
其他实验室
走廊
走廊
其他实验室
空气流向 标本制备区
其他实验室
其他实验室
其他实验室
2019/4/24
A
扩增及产物 分析区
标本制备区 门
试剂准备区 门
门
外走廊
门
扩增区
门 产物分析 区
标本制备 区 门
门
试剂准备 区
门 外走廊
门
B
2019/4/24
“无基因”或“无核酸” 概念的重要性！！！
临床基因扩增检验实验室的设置、质量管理
实验室使用和管理：
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标本接受区
试剂准备区
样本制备区 扩增区
产物分析区
区域的适当合并： “由于测定技术总是在发展之中，
区域的合并应根据仪器的特点而定”
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小结：
从核心仪器特点、实验室的现状出发，综 合考虑管理要求
有关职责进行审核。
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管理要求（现场考核）：
送审的文件描述与实验室实际情况的一致 性
实际运行与文件规定的一致性 人员素质：对文件的认知、熟悉、灵活运
用程度
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现场考核的实际内涵： 认识到不到位 落实到不到位 符合性检查加指导性检查 有重点的全面检查
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标本制备区：
临床标本的保存
核酸提取、储存及
其加入至扩增反应 管
测定RNA时cDNA的合 成
不得在本区对样本进 行PCR扩增
冰箱 (2~8℃和-20℃或-80℃) 高速台式冷冻离心机
水浴箱和/或加热模块 生物安全柜 混匀器
微量加样器 可移动紫外灯 专用工作服和工作鞋
四个组成部分的关系：
关键：核心——过程（活动） 纽带——程序组织结构 Nhomakorabea程序
资源
过程
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过程
理解
“过程”的重要性 1、工作是通过过程来完成的。 2、质量管理是通过对各种过程的控制 来实现的。 3、质量管理本身也是一系列的过程
过程的分解、控制 过程的有机组合
临床基因扩增检验实验室质量管理手册
临床基因扩增检验实验室质量管理手册
简介
本手册旨在规范临床基因扩增检验实验室的质量管理流程，以提高检验质量并确保患者安全。
质量管理流程
1. 检验前准备
- 确认患者信息的准确性和完整性
- 根据检验要求准备样本
- 校正和确认仪器的准确性和稳定性
2. 检验过程控制
- 按照标准操作程序进行检验
- 确认样品正确匹配
- 记录检验数据，并对异常数据进行分析和处理
3. 质量控制
- 确认质控方法的准确性和可行性
- 测试质对质控样本
- 分析质控结果，及时纠正异常结果
4. 检验结果的分析和审核
- 检查正常和特殊值
- 对异常结果进行处理和检讨
- 最终结论的审核和确认
5. 数据保存和传输
- 建立合适的数据保存和传输机制，确保数据的完整性和保密性
- 纳入质量管理体系中，保证数据安全和可及性
6. 质量管理体系监督与评价
- 借鉴ISO9000等标准体系，不断完善和更新质量管理手册
- 定期对质量管理体系进行内部审核和外部评估，及时发现和解决问题。
结束语
以上是临床基因扩增检验实验室的质量管理手册，请按照规范操作流程进行检验，加强质量管理意识，确保每一个检验结果科学可靠、安全可靠、可追溯、可重复，最终造福患者。
02-山东省医疗机构临床基因扩增检验实验室的管理 -张炳昌
第二章
n
实验室审核和设置
第六条 医疗机构向省级卫生行政部门提出临床基因 扩增检验实验室设置申请，并提交以下材料： （一）《医疗机构执业许可证》复印件； （二）医疗机构基本情况，拟设置的临床基因扩增检 验实验室平面图以及拟开展的检验项目、实验设备、 设施条件和有关技术人员资料； （三）对临床基因扩增检验的需求以及临床基因扩增 检验实验室运行的预测分析。
三、技术审核委托
n
省卫生厅在收到申请起10个工作日内，对医疗 机构提交申请资料的完整性、实验室设置需求 等进行初审，初审结果符合要求的，委托山东 省临床检验中心进行技术审核；初审结果不符 合要求的，正式函复申请机构。
四、初步技术审核
n
山东省临床检验中心接到省卫生厅委托后5个工作日 内，对照《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办 法》和《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》 等有关标准及要求，对申请开展临床基因扩增检验的 医疗机构实验室进行初步技术审核，提出整改建议。 实验室进行整改后，试运行三个月。
n
我省PCR实验室存在的主要问题
n
技术人员没有经过培训、或培训的人员少，继续教育 跟不上
n n
开展临床基因检验的实验室没有验收 已验收的PCR实验室，日常工作不能很好的落实《医疗 机构临床基因检验实验室管理办法》的要求
n
到5年的换证期限，没有申请换证
我省PCR实验室存在的主要问题
n n n n n n n n n
n
第十九条 对于擅自开展临床基因检验项目的医疗机 构，由省级卫生行政部门依据《医疗机构管理条例》 第四十七条和《医疗机构管理条例实施细则》第八十 条处罚，并予以公告。公告所需费用由被公告医疗机 构支付。 第二十条 医疗机构临床基因扩增检验实验室出现以 下情形之一的，由省级卫生行政部门责令其停止开展 临床基因扩增检验项目，并予以公告，公告所需费用 由被公告医疗机构支付：
临床基因扩增检验的质量保证
扩增仪孔间温度的重复性和均一性 的检测方法
第二种方法并非直接测定孔内温度，而是 通过扩增功能来间接获知孔间的均一性， 即将加有一已知的含一定浓度的阳性质控 样本的扩增反应管置于扩增仪各孔中按常 规进行扩增检测，观察结果的一致性程度， 如果有某一个或几个孔结果有问题，则应 确定这一个或几个孔是否会重复性地得到 假阴性结果，如果是，则表明相应孔的热 传导有损坏。
测定中质控样本的设置、数量 及排列顺序
每次检测究竟使用几个质控样本并排在临床标 本中的哪个位置最为适宜？从理论上说，为最 大可能地检出实验的随机和系统误差，应每隔 几份临床标本插入1份质控样本，但考虑国内目 前的实际情况及成本效益，一般来说，如果临 床基因扩增检验的标本量不是特别大，定性测 定有一份接近cut-off的弱阳性和一份阴性质控 样本应可以满足要求。而定量测定则要根据试 验的测定范围，采用高、中、低三种浓度的质 控样本。至于在测定中的排列顺序，可排于标 准品或校准品之后，临床样本之前。
基因扩增仪器设备的质控仪器设备质控方法失控标准扩增仪仪器校验实验当仪器移动时实验失败热电偶监测温度扩增功能检测每月一次个月一次如靶温度或温度差异超出允许范待测孔未出现扩增检测温度程序打印每次测定时打印程序不对校准每年2不符合要求水浴箱温度检测每次实验不符合要求酶标仪预防性维护及校准每年2不符合要求带滤塞吸头的使用及质检首先制备一个含12甘油及色素如甲基橙的水溶液如果吸头的最大体积为100l则将加样器吸取体积调至110120l再套上吸头后吸取上述有色液体
定
义
正态分布的基本统计学含义可用均数（）、 标准差（s）和概率来说明。
临床基因扩增检验实验室 常规测定步骤
标本收集：选择测定项目、标本收集和保存。 实验室测定：标本接收、贴标签、样本处理、 核酸扩增、产物检测、测定的有效性和临床 诊疗价值。 报告和解释：结果发出、结果解释和临床管 理。
山东省卫生厅转发卫生部办公厅关于印发医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法的通知的通知
山东省卫生厅转发卫生部办公厅关于印发医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法的通知的通知文章属性•【制定机关】山东省卫生厅•【公布日期】2011.03.15•【字号】鲁卫医字[2011]34号•【施行日期】2011.03.15•【效力等级】地方规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】卫生医药、计划生育综合规定正文山东省卫生厅转发卫生部办公厅关于印发医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法的通知的通知（鲁卫医字〔2011〕34号）各市卫生局，大企业卫生处，省（部）属医疗机构：现将《卫生部办公厅关于印发＜医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法＞的通知》（卫办医政发[2010]194号，以下简称《办法》）转发给你们，并结合我省实际提出以下要求，请一并贯彻执行。
一、经研究，我厅指定山东省临床检验中心作为山东省医疗机构临床基因扩增检验技术审核机构，负责组建技术审核专家组，受我厅委托对申请临床基因扩增检验实验室设置的医疗机构进行技术审核、开展现场检查等相关工作。
二、申请设置临床基因扩增检验实验室的医疗机构，须按照《办法》有关规定，向我厅提交《山东省临床基因扩增检验实验室技术审核申请书》（附件1），由我厅委托山东省临床检验中心进行技术审核。
三、山东省临床检验中心受我厅委托组织对医疗机构进行技术审核时，需严格按照《山东省临床基因扩增检验实验室技术审核办法》（附件2）和《医疗机构临床基因扩增检验工作导则》规定的工作程序、技术标准进行。
四、山东省临床检验中心受我厅委托组织专家开展现场检查时，参与检查的工作人员需佩戴由我厅统一发放的证件。
未按照要求出示证件的，医疗机构可拒绝接受检查。
附件：1.山东省临床基因扩增检验实验室技术审核申请书2.山东省临床基因扩增检验实验室技术审核办法二〇一一年三月十五日附件1：山东省临床基因扩增检验实验室技术审核申请书申报单位（盖章）：申报日期：希望审核时间：山东省卫生厅印制二〇一一年三月十一日山东省临床基因扩增检验实验室技术审核申报材料目录1.医疗机构设置临床基因扩增检验实验室正式申请；2.《医疗机构执业许可证》复印件；3.拟设基因扩增检验实验室的设置平面图；4.拟设置基因扩增检验实验室医院的医疗卫生资源状况、对临床基因扩增检验实验室的需求情况以及实验室运行的预测分析；5.检验报告样单（2份）；6.实验室技术审核相关表格；7.实验室相关程序文件和标准操作程序（SOP）；8.其它有关质量文件名称或证明材料。
临床基因扩增检验实验的设置、质量管理体系的建立及技术验收
有具体时间）保存条件和要求 制定保证标本安全，即如何防止标本丢失、掉换、变质的
措施
试剂和消耗品的质检 SOP
试剂质检的基本方面，如试剂的抗干扰能力（主 要是针对提取试剂），即对溶血、脂血标本扩增 抑制作用的了解。可通过自行制备含已知量病毒 核酸的不同程度溶血或脂血的标本进行质检。如 为定量检测试剂，还应包括检测的重复性、线性 范围等的质检，通常使用2-3份样本进行检测即可。 如为定性检测试剂，则应重点考察测定下限，可 用系列稀释的含已知量靶核酸的血清标本进行
接收的标本应收集在原始容器中 在核酸提取时带入至标本制备区
什么样的临床基因扩增检验实验室 是最标准的？
临床基因扩增实验室设置的一般原则
各区独立 注意风向 因地制宜 方便工作
“十六字口诀”
实验室质量管理体系的建立
质量手册 质量体系程序文件 标准操作程序
(相关记录表格)
质量管理的内涵
对实验记录者的签名方式的规定和要求
实验记录管理的基本方面：指定专门的管理人； 有专门的保存处如柜子等；记录的登记归档方法； 记录的借阅及销毁记录；记录保存的时间；电子 记录的备份保存具体方法及保存时间等
室内质量控制 SOP
明确室内质控物的来源及浓度 明确所选用的质控方法 明确失控的判断标准或所采用的失控规则 明确失控后的分析及处理措施
仪器设备的维护和校准SOP
责任人 维护和校准的基本方面：光路、滤光片、
波长、加热模块的清洁、具体的校准点选 择（如加样器的校准体积点选择、温度计 的校准温度点选择等）、维护和校准的具 体方法包括用具 校准合格的判断标准 维护和校准的间隔时间
仪器设备的操作 SOP
临床基因扩增检验实验室的设置质量管理体系的建立及其技术验收
七、记 录
有记录管理制度：适合自身实际情况，符合现行规 章制度；
原始记录、计算和导出数据应归档并保存 校准和检测记录的重现性； 记录应有有关人员的签字； 所有记录和报告都要妥善保管并保密。
八、报 告
检测结果的报告应准确、清晰和客观 定性测定报告“阴性”或“阳性;定量测定则以拷贝数 /ml或IU/ ml报告；避免二者之间的混淆 每份报告应包括以下信息：标题、唯一性标识、检测标 本说明、标本特性和状态、标本接收日期和检测日期、 检测方法结果或参考范围、检测和校核人员签字及发出 日期 如对报告有效性有疑问，实验室应立即通知临床相关科 室予以改正 用电话、传真、电子邮件报告结果时的保密原则
标本制备区
标本的制备应在生物安全柜内进行，可防止气 溶胶的扩散。标本制备全过程都应戴一次性手套， 并经常更换，手套污染很容易导致标本间的交叉污 染。处理具有传染危险性的标本时，最好戴双层手 套，当手套与标本有接触时即可弃掉外层手套。
标本制备区
实验时所用的加样吸头必须带滤塞，并注意滤塞不 能是后插入的而是结合在吸头内壁上疏水性膜滤塞，这 样才能有效防止气溶胶对加样器的污染。
产物分析区
视检测方法不同而定。基本仪器设备如下： 微量加样器（覆盖1～200µl）；可移动紫外灯 （近工作台面）；消耗品：一次性手套、一次性吸 水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头（带滤 心）；专用工作服和工作鞋；专用办公用品等。
产物分析区
本区是唯一能打开扩增后反应管的地方。由于本工 作区应设置为负压状态，空气流向为由外向内，以 防止扩增产物气溶胶流出，故本区可无缓冲间。
仪器、检测试剂、消耗品（包括离心管、带 滤心吸头等）的选购、验收、储存和质检的 SOP文件等。最重要的是这些SOP文件的可 操性如何。
山东省卫生厅转发卫生部办公厅关于印发医疗机构临床基因扩增检验
山东省卫生厅转发卫生部办公厅关于印发医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法的通知的通知【法规类别】卫生综合规定【发文字号】鲁卫医字[2011]34号【发布部门】山东省卫生厅【发布日期】2011.03.15【实施日期】2011.03.15【时效性】现行有效【效力级别】地方规范性文件山东省卫生厅转发卫生部办公厅关于印发医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法的通知的通知（鲁卫医字〔2011〕34号）各市卫生局，大企业卫生处，省（部）属医疗机构：现将《卫生部办公厅关于印发＜医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法＞的通知》（卫办医政发[2010]194号，以下简称《办法》）转发给你们，并结合我省实际提出以下要求，请一并贯彻执行。
一、经研究，我厅指定山东省临床检验中心作为山东省医疗机构临床基因扩增检验技术审核机构，负责组建技术审核专家组，受我厅委托对申请临床基因扩增检验实验室设置的医疗机构进行技术审核、开展现场检查等相关工作。
二、申请设置临床基因扩增检验实验室的医疗机构，须按照《办法》有关规定，向我厅提交《山东省临床基因扩增检验实验室技术审核申请书》（附件1），由我厅委托山东省临床检验中心进行技术审核。
三、山东省临床检验中心受我厅委托组织对医疗机构进行技术审核时，需严格按照《山东省临床基因扩增检验实验室技术审核办法》（附件2）和《医疗机构临床基因扩增检验工作导则》规定的工作程序、技术标准进行。
四、山东省临床检验中心受我厅委托组织专家开展现场检查时，参与检查的工作人员需佩戴由我厅统一发放的证件。
未按照要求出示证件的，医疗机构可拒绝接受检查。
附件：1.山东省临床基因扩增检验实验室技术审核申请书2.山东省临床基因扩增检验实验室技术审核办法二〇一一年三月十五日附件1：山东省临床基因扩增检验实验室技术审核申请书申报单位（盖章）：申报日期：希望审核时间：山东省卫生厅印制二〇一一年三月十一日山东省临床基因扩增检验实验室技术审核申报材料目录1.医疗机构设置临床基因扩增检验实验室正式申请；2.《医疗机构执业许可证》复印件；3.拟设基因扩增检验实验室的设置平面图；4.拟设置基因扩增检验实验室医院的医疗卫生资源状况、对临床基因扩增检验实验室的需求情况以及实验室运行的预测分析；5.检验报告样单（2份）；6.实验室技术审核相关表格；7.实验室相关程序文件和标准操作程序（SOP）；8.其它有关质量文件名称或证明材料。
临床基因扩增检测的全面质量管理
•实验室管理•临床基因扩增检测的全面质量管理江佳佳 李晓华【摘要】 临床基因扩增检测工作的全面质量管理是在传统检验质量控制体系基础上的延伸。
着重整体规划，将实验室建筑流程纳入质量管理范围。
从细节着手，把好检测标本质量关。
借助信息管理系统，保障分析前阶段的质量管理。
加强操作合规性，规范开展性能验证工作，认真评价检测过程有效性，保障实验过程的质量管理。
密切联系临床，延伸分析后质量管理内涵。
总之，临床基因扩增实验室的质量管理应包括从基因扩增实验室建设和检测标本的前处理，到检测结果获得后与临床的沟通，进行全过程的严格和规范化的管理操作。
【关键词】 质量管理； 基因扩增； 实验室DOI ：10.3877/cma.j.issn.2095-5820.2017.04.012作者单位：215600 江苏大学附属澳洋医院病理和检验医学中心1，230088 合肥，国家基因检测技术应用示范中心(安徽)2，510005 广州金域医学检验集团股份有限公司临床基因组学中心3通信作者：李晓华，Email ：joshua28li@ Management of quality control for clinical gene amplification test Jiang Jiajia 1, Li Xiaohua 1,2,3. 1The Affiliated Aoyang Hospital of Jiangsu University, 215600 Zhangjiagang, China; 2National Center for Gene Testing Technology Application & Demonstration, 230088 Hefei, China, 3Regional Center for Clinical Genomics, East of China, KingMed Diagnostics Group, 510005 Guangzhou, China Corresponding author: Li Xiaohua, Email: joshua28li@【Abstract 】 Overall management of quality control for clinical gene amplification test should be considered as an extension operation of traditional laboratory quality control system. It should initiate from the design of laboratory layout to the process of laboratory construction to emphasize the overall plan. To ensure the quality of pre-analysis management, the quality of specimen should be monitored carefully and all the information and data should be managed by utilizing computerized system. During analytic process, the operational compliance should be strengthened to ensure a correct operation. Then, verification procedure for the result should be standardized, and the effectiveness of the test should be carefully evaluated. In addition, the effective communication between laboratory staff and clinician should be established. In sum, to ensure the clinical significant of results, clinical gene amplification test should be managed carefully from the laboratory design to each step of test practice including the post-analysis and discussion with clinician.【Key words 】 Quality management; Gene amplification; Clinical laboratory随着分子诊断技术的应用日益广泛，越来越多的基因检测项目在临床诊疗中得以应用，这不仅可为诊断提供依据，更有助于疾病的早期干预。
临床基因扩增检验实验室工作规范
临床基因扩增检验实验室工作规范为使基因扩增检验技术有效地应用于临床，更好地为疾病的预防、诊断和治疗服务，保证检验质量，特制定本规范。
一、临床基因扩增检验实验室的规范化设置及其管理临床基因扩增检验实验室的规范化设置详见《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》(卫医发[2002]10号文)附件《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》。
为避免污染，必须严格遵循《临床基因扩增检验实验室设置标准》设置临床基因扩增检验实验室。
临床基因扩增检验实验室四个隔开的工作区域中每一区域都须有专用的仪器设备。
各区域都必须有明确的标记，以避免设备物品如加样器或试剂等从其各自的区域内移出从而造成不同的工作区域间设备物品发生混淆。
进入各个工作区域必须严格遵循单一方向顺序，即只能从试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区(简称扩增区)至产物分析区，避免发生交叉污染。
在不同的工作区域应使用不同颜色或有明显区别标志的工作服，以便于鉴别。
此外，当工作者离开工作区时，不得将各区特定的工作服带出。
清洁方法不当也是污染发生的一个主要原因，因此实验室的清洁应按试剂贮存和准备区至扩增产物分析区的方向进行。
不同的实验区域应有其各自的清洁用具以防止交叉污染。
(一)试剂贮存和准备区下述操作在该区进行：贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。
贮存试剂和用于标本制备的材料应直接运送至试剂贮存和准备区，不能经过产物分析区。
在打开含有反应混合液的离心管或试管前，应将其快速离心数秒。
试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的贮存试剂。
当贮存试剂溶液经检查可用后，应将其分装贮存备用，避免由于经常打开反应管吸液而造成污染。
含反应混合液的离心管或试管在冰冻前都应快速离心数秒。
大多数用于扩增的试剂都应冰冻贮存。
为避免因单次反应取液而频繁的冻融主贮存试剂，应分装冰冻贮存试剂溶液。
贮存试剂的分装体积根据通常在实验室内一次测定所需的扩增反应数来决定。
临床基因扩增检验实验室的设置及技术验收
临床基因扩增检验实验室的设置及技术验收临床基因扩增检验实验室设置完成并建立了相应的质量保证体系后，实验室就要申请验收，为使技术验收规范有效地进行，卫生部临床检验中心拟定了“临床基因扩增检验实验室技术验收表”，内容包括：（1）实验室设置和设备；（2）设施和环境；（3）人员；（4）设备管理；（5）检测方法；（6）标本管理；（7）记录；（8）报告；（9）质量控制和（10）抱怨等十章共三十八条。
其依据是《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》（卫医发[2002]10 号）（以下简称《管理办法》）和《临床基因扩增检验实验室工作规范》（卫检字[2002]8 号）（以下简称《工作规范》），下面对其作一简要解释。
一．实验室设置和设备本章共七条。
要求实验室必须按照《管理办法》中的有关规定进行规范分区，并且各区要有明确的标记，以及配备有开展临床基因扩增检验所必须有的仪器设备，满足《管理办法》和《工作规范》的要求。
本章将每个区所应具备的基本仪器设备按随《管理办法》下发的《临床基因扩增检验实验室设置标准》完全列出，在验收时，对实验室进行逐条查对。
如何设置一个合格的实验室是每一个临床基因扩增检验实验室首先要遇到的问题，因为一个实验室一旦经过设置装修，如不符合要求，则会出现很大的麻烦，甚至不得不拆了重来。
那么怎样才能设置一个合格的实验室呢？简单地说，就是十六个字，“各区独立、注意风向、因地制宜、方便工作”。
同时要注意临床标本的接收问题。
对于临床基因扩增检验实验室的分区及其设备配置，在卫部颁发的《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》（卫医发[2002]10 号）中作了明确规定，并且卫生部临床检验中心发出的配套文件《临床基因扩增检验实验室工作规范》（卫检字[2002]8 号）又对各区的功能及注意事项作了阐述。
但具体到某一个实验室如何根据自身的实际情况设置实验室，则仍常使实验室感到没底，因此，本处拟对临床基因扩增检验实验室设置和工作流程的一般原则再作一些具体的阐述，并尽可能举出一些实例加以说明。
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质量管理的内涵
写你所做的
做你所写的 记录你已做的 分析你已做的 质量持续改进
怎样编写SOP？
1.检验项目SOP
应根据申华人民共和国卫生行业标准
编号WS/T 227-2002 “临床检验操作规程编写要求”编写项目的 SOP文件 原则上，每一收费的检验项目都应有与之相 应的SOP文件，尽管某些项目SOP文件可以 简单一些
仪器每日保养记录表
月保养记录表
项目校准程序和计划
校准对于检验结果在规定的报告范围内的准
确和可靠是必要的。 校准是一个测试和调整仪器或者检验系统， 试剂盒的过程，以提供检验反应和所测物质 之间的准确关系。 用配套校准品进行校准是量值溯源开始，厂 家应保证校准品的最终溯源
校准计划
校准计划是指检验项目的校准频度。
临床PCR 实验室质量管理的特点
（一）“无基因”概念
（二）实验室要有严格的人员进入限制和程
序 （三）使用合格的试剂和消耗品
临床基因扩增检验实验室相关记录
临床基因扩增检验实验室需要记录的有临床标本接 收中的患者个人有关资料（如姓名、性别、年龄 等）、标本接收日期、标本特性、标本的状态、标 本的编号等；检测前的仪器设备和试剂的准备等； 检测中的试剂生产厂家、试剂批号、检测日期、检 测结果、质控结果及分析、检测人（签字）、质检 人（签字）等、检测后的实验台面、仪器设备等的 消毒和清洁、紫外线照射等。记录要持之以恒。
质量管理
质量管理不是表面文章，其精髓就是所有与实验室 检验质量有关的环节全部要有章可循，并按章进行。 这即是对实验室实际操作技术人员的约束，同时也 是对实验室负责人的约束，不能随心所欲，比如说 仪器、试剂、消耗品的购买，都必须按程序进行。 这是与我们传统的平常只查考勤、查卫生等到出现 问题时再处罚个人的经验管理模式所完全不同的， 这个观念和意识的转变首先应是实验室负责人，然 后才是具体的实验操作人员。
文件：仪器设备SOP文件，试验项目操作SOP文件，质
量、管理SOP文件等。如某个具体的项目临床标本的收
集、处理、保存、检测等，具体仪器的操作使用、校
准及维护等。
SOP文件与程序文件之间的区别在于后者的原则
性要强一些，针对的是一个系列或一个方面的工作。
临床基因扩增检验实验室的技术验收 文件要求
临床基因扩增检验实验室的技术验收申请表
实验室必须保存停止使用的操作手册副本， 并保存到停止使用两年后才能销毁。
维护和校准的基本方面：光路、滤光片、波
长、加热模块的清洁、具体的校准点选择 （如加样器的校准体积点选择、温度计的校 准温度点选择等）、维护和校准的具体方法 包括用具 校准合格的判断标准 维护和校准的间隔时间
编写中应特别注意，要书写： 1 拒收标本的规定 2 质控品使用水平和频率，允许限的纠正措 施 3 操作性能的概要。如：精密度、病人结果 可报告范围、方法学比较等。 4 对检验结果为病危报警值的处理
手册必须由主任批准，签字和
注明日期。 如果实验室改变领导，手册须 由现领导再批准，签字和注明日 期。
仪器设备的操作 SOP
按照每台仪器设备的使用说明书，将其详细
操作步骤包括开机关机次序、编程、调试、 运行、计算等按实际使用中的先后顺序逐项 列出，最后还应有使用的注意事项。
仪器SOP文件
应根据厂家提供的操作说明书编写适合
实验室实际简明扼要操作程序，大致有： 开关机程序. 常规操作程序 特殊(急诊、复测、…)操作程序 仪器维护程序 其它
每次校准数据记录表 对校准数据变化的评估 根据美国CLIA
88规定、还要对校准结果 进行验证（Verification）。用一己知浓 度样品，稀释成不同浓度，检测后观察 所测浓度是否准确，是否成线性。
接收 接收的标本应收集在原始容器中 在核酸提取时带入至标本制备区
什么样的临床基因扩增检验实验室 是最标准的？
理想的PCR实验室设置1
理想的PCR实验室设置2
临床基因扩增实验室设置的一般原则
各区独立
注意风向 人员流向 物品流向
二.实验室质量管理体系的建立
质量手册 质量体系程序文件 标准操作程序
(相关记录表格)
质量管理体系的建立
质量手册 程序文件 标准操作程序（SOP）
质量手册
定义：阐明一个实验室的质量方针， 并描述其质量体系的文件。
其主要内容包括目录、批准页、前言、质量方针、 组织结构、人员职责、实验室设施环境、仪器设备、 溯源性、检验方法、标本管理、记录、报告等，是对 上述各方面质量管理的一般性描述。
临床基因扩增检验实验室的设置 及质量管理体系的建立
山东省临床检验中心 张炳昌
一.临床基因扩增检验实验室的设置
依据：卫生部颁发的《临床基因扩
增检验实验室管理暂行办法》（卫 医发[2002]10号）
临床标本的接收
通常的工作流程：标本采集
血清分离
编号
保存或检测
应在四个测定区域之外的地方或区域内
程序文件
程序文件则是对通用于整个实验室的某些方面工
作的文件化描述。
主要包括实验室文件和档案等的管理、内审、管
理评审、人员培训、投诉处理、保密、计算机安全、
新项目开展、量值溯源、试剂仪器及实验用品的购买、
标本管理、废物处理等方面。
标准操作程序
SOP最为具体，最具有可操作性，也是使用频率
最高的文件，与实验室的日常工作密切相关。常用SOP
后提出来的实验室所必须具有的程序文件， 大部分是SOP ，少部分是程序文件，对实验 室的质量手册没作要求。
怎样来编写SOP 文件
这一点目前大部分实验室都觉得不知从何写起，希 望有一个标准模式。其实细细思考一下，你某一项 检验应该怎样做才能保证质量，然后就将这些过程 写下来就可以了。其实这些SOP 文件究竟采用何种 格式编写并不重要，关键的是要具体，要具有可操 作性，要让既使是第一次接触该SOP 的人也能按其 完成相关操作。一定要有这样一种观念，即SOP 文 件不是拿来给别人看的，而是拿来给自己实验室技 术人员用的，一定要从实际出发，做得到的才写进 去，做不到的就不要写进去。