DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B使用说明
各种葡聚糖凝胶的分离范围及用途
各种葡聚糖凝胶的分离范围及⽤途SephadexG-10葡聚糖凝胶 G-10 分离范围<700 适⽤于脱盐、肽与其它⼩分⼦的分离Sephadex G-15 葡聚糖凝胶 G-15 分离范围<1500 适⽤于脱盐、肽与其它⼩分⼦的分离Sephadex G-15 葡聚糖凝胶 G-15 分离范围<1500 适⽤于脱盐、肽与其它⼩分⼦的分离Sepharose 6B 琼脂糖凝胶 6B 分离范围：1000-5000，适⽤于脱盐、肽与其它⼩分⼦的分离ConA-Sepharose ConA 琼脂糖凝胶分离范围：1000-5000，适⽤于脱盐、肽与其它⼩分⼦的分离Sephadex G-25 Medium 葡聚糖凝胶 G-25 中分离范围 1000-5000 适⽤于脱盐、肽与其它⼩分⼦的分离Sephadex G-25 Medium 葡聚糖凝胶 G-25 中分离范围 1000-5000 适⽤于脱盐、肽与其它⼩分⼦的分离Sephadex G-25 Fine 葡聚糖凝胶 G-25 细分离范围 1000-5000 适⽤于脱盐、肽与其它⼩分⼦的分离Sephadex G-25 Fine 葡聚糖凝胶 G-25 细分离范围 1000-5000 适⽤于脱盐、肽与其它⼩分⼦的分离SephadexG-50 Medium 葡聚糖凝胶 G-50 中分离范围 1500-30000 Sephadex G-50 Medium 葡聚糖凝胶 G-50 中分离范围1500-30000 Sephadex G-75 葡聚糖凝胶 G-75 分离范围 3000-80000 Sephadex G-75 葡聚糖凝胶 G-75 分离范围 3000-80000 DEAE Sepharose FF DEAE琼脂糖凝胶 FF 分离范围：3000-80000 Sephadex G-100 葡聚糖凝胶G-100 分离范围 4000-150000Sephadex G-100 葡聚糖凝胶 G-100 分离范围 4000-150000Sephadex G-150 葡聚糖凝胶 G-150 分离范围 5000-300000DEAE Sepharose CI-6B 琼脂糖凝胶CI-6B 分离范围：5000-300000 Sephadex G-150 葡聚糖凝胶 G-150 分离范围 5000-300000Sephadex G-200 葡聚糖凝胶 G-200 分离范围 5000-600000Sephadex G-200 葡聚糖凝胶 G-200 分离范围 5000-600000Sephadex G-200 葡聚糖凝胶 G-200 分离范围 5000-600000DEAE Sephadex A-25 DEAE葡聚糖凝胶 A-25 颗粒⼤⼩：40-120µm 分离⼤⼩：⼩蛋⽩及巨⼤分⼦DEAE Sephadex A-25 DEAE葡聚糖凝胶 A-25 颗粒⼤⼩：40-120µm 分离⼤⼩：⼩蛋⽩及巨⼤分⼦DEAE Sephades A-50 DEAE DEAE葡聚糖凝胶 A-50 颗粒⼤⼩：40-120µm，分离范围：⼩蛋⽩及巨⼤分⼦。
DNA的琼脂糖凝胶电泳实验原理和操作步骤
DNA的琼脂糖凝胶电泳实验原理和操作步骤DNA的琼脂糖凝胶电泳是一种常用的分子生物学技术，用于分析DNA 的大小和纯度，以及进行DNA分子的分离和纯化。
凝胶电泳实验可以帮助我们确定DNA样本的大小和获得纯化的DNA片段供进一步研究使用。
下面是DNA琼脂糖凝胶电泳实验的原理和操作步骤。
【原理】DNA琼脂糖凝胶电泳是根据DNA分子在电场中的不同迁移速率来分离大小不同的DNA片段。
琼脂糖凝胶是一种凝胶状物质，其孔隙大小能够将DNA分子限制在一定范围内，较大的DNA分子迁移速率较慢，而较小的DNA分子迁移速率较快。
琼脂糖凝胶通常是在平均浓度为1%至2%之间的范围内制备，以便在不同大小的DNA分子之间提供适当的分辨率。
实验中，DNA样品通过切割酶或PCR等方法获得，样品经过核酸电泳缓冲液稀释，并在琼脂糖凝胶板上进行电泳。
凝胶板两侧连接电源，DNA 的带电粒子将在电场的作用下从负极迁移到正极，迁移过程中形成DNA的“条带”，条带的位置和长度反映了DNA的大小。
通常，DNA条带由荧光染料或核酸染料标记，以便在电泳结束后进行可视化。
【操作步骤】以下是DNA琼脂糖凝胶电泳实验的一般操作步骤：1.制备琼脂糖凝胶板：a.准备琼脂糖粉末和核酸电泳缓冲液（通常为TAE或TBE缓冲液）。
b.按照说明书将琼脂糖粉末溶解于核酸电泳缓冲液中。
c.将溶液加热至沸腾并搅拌，使琼脂糖完全溶解。
d.将溶液倒入预先准备好的电泳仓中，插入梳子或制备好的孔板，使其凝固。
2.样品制备：a.提取DNA样品并测定其浓度。
b. 将DNA样品稀释到适当浓度，通常为10-50 ng/μL。
c. 添加适当的加载缓冲液，通常是一些染料和甘胺酸（glycine）或其他添加剂。
3.DNA加载和电泳：a.打开琼脂糖凝胶仓盖，将DNA样品负载于凝胶孔内。
b.将DNA负载区域和样品标注在电泳仓中，以便在电泳结束后可以准确识别DNA带。
c.关闭盖子，将电泳仓放入电泳设备中。
琼脂糖凝胶CL-6B亲和色谱法一步纯化蚯蚓半乳凝素
琼脂糖凝胶CL-6B亲和色谱法一步纯化蚯蚓半乳凝素陈义烘;黄慧敏;李任强【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2007(25)3【摘要】环节动物的S型凝集素在结构和生化性质上都有别于一般的S型凝集素,其在抗癌等研究方面的潜在价值重大.根据环节动物S型凝集素的性质,采用惰性分子筛填料Sepharose CL-6B(琼脂糖凝胶CL-6B)作为亲和色谱介质对蚯蚓S型凝集素进行了纯化.以2 mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)-MEPBS(4 mmol/L β-巯基乙醇,150mmol/L NaCl,20 mmol/L磷酸盐,pH 7.2)溶液作为平衡液,以氨水(150 mmol/L,pH 10.5)作为洗脱液得到的蛋白质经SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)、凝血实验及荧光检测等证明了其即为蚯蚓S型凝集素.该方法只需一个步骤即可从蚯蚓提取液中分离到纯的S型凝集素,比传统方法更加快捷高效,优越性明显.该方法的应用将有利于对环节动物S型凝集素的深入研究.【总页数】5页(P332-336)【作者】陈义烘;黄慧敏;李任强【作者单位】暨南大学生物工程学系,广东,广州,510632;暨南大学生物工程学系,广东,广州,510632;暨南大学生物工程学系,广东,广州,510632【正文语种】中文【中图分类】O658【相关文献】1.高效亲和液相色谱法纯化基因重组人白细胞介素-2 [J], 郭立安;董建中2.亲和色谱法从融合蛋白GST-IL-6中纯化重组人白细胞介素-6 [J], 吴蕾;甘一如;林峰;黄鹤3.广州管圆线虫半乳凝素基因的克隆表达、蛋白纯化及免疫反应性研究 [J], 郝丽;吴焜;陈晓光;王琼4.半乳凝素-3促血管生成素-2肝肠黏连蛋白与消化道肿瘤的关系 [J], 唐艳5.通过膨胀床离子交换色谱法从未澄清的乳链球菌亚种乳A164的培养液中一步纯化乳链球菌素Z [J], CheighCI;陈丹;朱春宝因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
CM-琼脂糖凝胶CL-6B使用说明
CM-琼脂糖凝胶CL-6B使用说明货号：S9230规格：100mL一、简介CM-琼脂糖凝胶CL-6B是将羧甲基键合在高流速琼脂糖凝胶上形成的一种弱阳离子交换介质。
广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
本品呈白色球状凝胶，无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
二、亲和填料特性项目指标离子交换基团-O-CH2COO-离子交换类型弱阳离子，可交换离子Na+基质6%交联琼脂糖蛋白质吸附容量Ribonuclease(MW13700)120mg/ml总离子交换量0.10-0.14mmol/ml介质形状球形粒径45~165μm最高流速200cm/h工作温度4~40℃耐压0.3MPapH值稳定性2~14(短时间，在位清洗)4~13(长时间)pH工作范围6~12化学稳定性在以下液体中稳定：所有常用的水相缓冲液；1mol/L氢氧化钠；8mol/L尿素；6mol/L盐酸胍；70%乙醇*检测条件：层析柱10mm×300mm*柱床高15cm，25℃，流动相为0.1mol/LNaCl。
三、适用范围本产品具有高化学稳定性、高流速、高载量、好的机械性能、可在位清洗、多次重复使用等特点，非特异性吸附低，回收率高，适用于工业规模生产，适用于在pH工作范围内可形成正离子的生物大分子的分离纯化，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
四、注意事项产品应密封贮存在4℃~25℃（保存溶液为20%乙醇），通风、干燥、清洁的地方。
不能冷冻。
用过的柱子贮存在4℃（20%乙醇）。
本产品避免与氧化剂接触；避免在pH值<4时长时间暴露(一周，20℃)。
保质期：5年。
五、操作步骤：1、装柱（1）让所有的材料和试剂达到室温。
配制初始缓冲液（平衡液）和洗脱缓冲液。
（2）根据柱子大小取所需量的凝胶，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始缓冲液（按凝胶：缓冲液=3：1的比例）配成匀浆。
（3）将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位（液面略高于滤膜），务必使底端无气泡。
琼脂糖凝胶电泳常考操作流程
琼脂糖凝胶电泳常考操作流程
准备工具：用蒸馏水将制胶工具洗干净，准备好制胶平板，用琼脂将模具边缘封闭，架好梳子。
配制琼脂糖凝胶：根据要分离的样品（DNA）大小配制合适浓度的琼脂糖凝胶。
将一定量的琼脂糖干粉加入到合适体积的锥形瓶中，加入一定量的电泳缓冲液（30ml左右TAE）。
融化琼脂糖：将琼脂糖放入到微波炉内加热融化，冷却片刻（不烫手即可）。
浇灌凝胶：融化后的琼脂溶液摇晃混匀，倒入电泳槽中，等其凝固。
凝固凝胶：室温下凝固30-40min左右，小心的拔出梳子，取出凝固好的凝胶放入电泳槽内，准备上样。
加入电泳缓冲液：在电泳槽中倒入电泳缓冲液（TAE）；没过胶面1mm左右，去除胶孔内的气泡。
上样：将DNA样品和对应体积的上样缓冲液（loading buffer）和染料混合，用抢混匀后加入到凝胶孔内。
电泳：上样结束，接通电源，红色正极，黑色负极，DNA样品有负极往正极运动，加样孔侧为负，，40-50v电压，电压30敏左右即可（<40min）。
观察结果：电压结束，关闭电源，凝胶成像仪上观察电压位置并比对marker 判断大小。
琼脂糖凝胶CL-6B亲和色谱法一步纯化蚯蚓半乳凝素
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PH9109 DEAE Sepharose CL-6B DEAE-琼脂糖凝胶 CL-6B 使用手册
PH9109|DEAE Sepharose CL-6BDEAE-琼脂糖凝胶CL-6BCatalog No：PH9109Size： 100ML Store at4℃DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B是将二乙胺基乙基键合在快流速琼脂糖凝胶上形成的一种弱阴离子交换介质。
广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
1外观本品呈白色，球状、无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
2理化指标项目指标离子交换基团-O-CH2CH2-N+(C2H5)2H离子交换类型弱阴离子，可交换离子Cl-基质6%交联琼脂糖蛋白质吸附容量120mgHSA/ml介质总离子交换容量0.13~0.17mmol/ml介质形状球形粒径45~165μm流速*150cm/h工作温度4~40℃耐热pH7水中120℃30min耐压0.3MPapH稳定性1~14(短时间,在位清洗);2~12(长时间)pH工作范围3~12化学稳定性在以下液体中稳定：所有常用的水相缓冲液；1mol/L氢氧化钠；8mol/L尿素；6mol/L盐酸胍；70%乙醇*检测条件：层析柱10mm×300mm*柱床高15cm，25℃，流动相为0.1mol/LNaCl。
3包装产品以聚胺酯瓶密封包装，外贴标签，注明“品名、体积、颗粒大小”等内容。
4运输运输中应避免日晒、雨淋、重压，严禁与有毒、有害物品混运。
5贮存产品应密封贮存在4℃~25℃（保存溶液为20%乙醇），通风、干燥、清洁的地方。
不能冷冻。
用过的柱子贮存在4℃（20%乙醇）。
6注意事项本产品避免与氧化剂接触；避免在pH值<4时长时间暴露(一周，20℃)。
7保质期5年。
8应用本产品具有高化学稳定性、高流速、高载量、好的机械性能、可在位清洗、多次重复使用等特点，非特异性吸附低，回收率高，适用于工业规模生产，适用于在pH工作范围内可形成负离子的生物大分子的分离纯化，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书
5. 快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要 乙醇沉淀。
注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的 传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 溶胶液中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染 皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水 或者生理盐水冲洗。
1. 在长波紫外灯下，用干净刀片将所需回收的DNA条带切下，尽 量切除不含DNA的凝胶，得到凝胶体积越小越好。
2. 将切下的含有DNA条带凝胶放入1.5ml离心管，称重。 先称一个空1.5ml离心管重量，然后放入凝胶块后再称一次，两次 重量相减，得到凝胶的重量。
3. 加3倍体积溶胶液DD。 如果凝胶重为100mg，其体积可视为100μl，则加入300μl溶胶液。 如果凝胶浓度大于2％，应加入6倍体积溶胶液。 4. 56℃水浴放置10分钟（或直至胶完全溶解）。每2-3分钟涡旋震
3. 回收纯化的DNA片段一般在100bp到40kb之间，过长、过短片段 的回收效率迅速降低。
4. 回收DNA的量和起始DNA的量、洗脱体积、DNA片断大小有 关。一般1-15μg， 100bp-5kb的DNA片段，回收率可高达85％。
5. 切胶回收时，紫外灯观察对DNA片段有损坏作用，应该尽可能 使用能量低的长波紫外线，并且尽可能的缩短紫外线下处理的 时间。
试剂盒组成保存50次dr0101100次dr0102200次dr0103平衡液室温5ml10ml20ml溶胶液dd室温50ml50ml2200ml漂洗液wb室温15ml25ml50ml第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液eb室温10ml15ml15ml吸附柱ec室温50个100个200个收集管2ml室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果
凝胶电泳操作步骤
琼脂糖凝胶电泳操作步骤
一、仪器
二、试剂
三、操作步骤：
1.用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净，放在制胶平板上，封闭模具边缘，架
好梳子；实验室有几种不同厂家的模具和梳子，请注意配套使用；
2.根据欲分离DNA片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶：准确称
量琼脂糖干粉，加入到配胶用的三角烧瓶内，定量加入电泳缓冲液（一般20~30 ml）；
3.放入到微波炉内加热熔化（30ml体积需1-2min左右）。
冷却片刻，按照
5ul/100ml的比例加入EB荧光染料(EB有毒，操作时带手套、口罩，防止交叉污染)，轻轻旋转以充分混匀凝胶溶液，倒入电泳槽中，注意不能产生气泡，若有气泡则用枪尖排除，静置，待其凝固；
4.室温下30~45分钟后凝胶完全凝结，小心拔出梳子，将凝胶同模具一同安放
在电泳槽内；
5.向电泳槽中倒入电泳缓冲液，其量以没过胶面1mm为宜，如样品孔内有气
泡，应设法除去；
6.在DNA样品中加入10×体积的载样缓冲液（loading buffer），混匀后，用枪将
样品混合液缓慢加入被浸没的凝胶加样孔内；同时取一孔加入DNA marker 6ul，以测定核酸大小。
7.接通电源，红色为正极，黑色为负极，切记DNA样品由负极往正极泳动(靠
近加样孔的一端为负)。
100V恒压电泳40min即可（根据指示剂泳动的位置，判断是否终止电泳，一般前端染料到2/3处即可）
8.电泳完毕，关上电源，在凝胶成像仪上观察电泳带及其位置，并与核酸分子
量标准Marker比较核酸的大小。
琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书
琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书如下：琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒是用于从混合物中纯化和回收琼脂糖凝胶的试剂盒。
下面是具体的操作方法及步骤说明：1. 准备工作：a. 将琼脂糖凝胶样品放置于冷室中，在4℃下保存。
b. 准备所需的琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒及其附件。
2. 细胞破碎：a. 将琼脂糖凝胶样品加入细胞破碎试剂，并将细胞破碎试剂与样品混合均匀。
b. 在室温下，将样品放置于振荡器中，并在高速摇床上以600 rpm摇动60分钟。
3. 退火：a. 将样品加热至70℃，并在水浴保温器中保温5分钟。
b. 然后快速将样品冷却至室温。
4. 离心：a. 将样品离心15分钟，以去除细胞碎片和残留杂质。
b. 将上清转移到干净的离心管中，并避免沉淀。
5. 琼脂糖凝胶回收：a. 向离心管中加入等体积的琼脂糖凝胶凝胶缓冲液，并将样品与凝胶缓冲液混合均匀。
b. 将混合物加热至65℃，并保温10分钟。
c. 快速冷却混合物至室温，并离心10分钟，从而使琼脂糖凝胶沉淀。
d. 将上清倒掉，并保留沉淀。
6. 洗涤：a. 向琼脂糖凝胶沉淀中加入1 mL 75%乙醇，然后轻轻颠倒离心管，使乙醇与琼脂糖凝胶充分混合。
b. 离心琼脂糖凝胶沉淀和乙醇混合物10分钟，并将上清倒掉。
c. 重复上述步骤一次。
7. 干燥：a. 向琼脂糖凝胶沉淀中加入1 mL无水乙醇，然后快速颠倒离心管，使无水乙醇与琼脂糖凝胶充分混合。
b. 离心琼脂糖凝胶沉淀和无水乙醇混合物10分钟，并将上清倒掉。
c. 重复上述步骤一次。
8. 最终回收：a. 将琼脂糖凝胶沉淀放置在干燥器中，将温度设置为50℃，并将它们完全干燥。
b. 最后，将琼脂糖凝胶沉淀转移到干净的容器中，并储存于冷室中。
请注意，以上操作步骤仅供参考。
在使用试剂盒之前，务必阅读和按照试剂盒的详细说明书执行实验。
DEAE-产品说明
Bestarose DEAE-琼脂糖凝胶FF产品说明书DEAE-琼脂糖凝胶FF是将二乙胺基乙基键合在快流速琼脂糖凝胶上形成的一种弱阴离子交换介质。
广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
1. 外观本品呈白色，球状、无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
2. 理化指标*3．包装产品以聚胺酯瓶密封包装，外贴标签，注明“品名、体积、颗粒大小”等内容。
4．运输运输中应避免日晒、雨淋、重压，严禁与有毒、有害物品混运。
5．贮存产品应密封贮存在4℃~25℃(保存溶液为20% 乙醇)，通风、干燥、清洁的地方。
不能冷冻。
用过的柱子贮存在4℃(20% 乙醇)。
6.注意事项本产品避免与氧化剂接触；避免在pH值< 4时长时间暴露(一周,20℃)。
7.保质期：5年。
8.应用本产品具有高化学稳定性、高流速、高载量、好的机械性能、可在位清洗、多次重复使用等特点，非特异性吸附低，回收率高，适用于工业规模生产，适用于在pH工作范围内可形成负离子的生物大分子的分离纯化，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
下面简要介绍介质的使用过程。
8.1 装柱⑴让所有的材料和试剂达到室温。
配制初始缓冲液(平衡液)和洗脱缓冲液。
⑵根据柱子大小取所需量的凝胶，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始缓冲液(按凝胶：缓冲液=3：1的比例)配成匀浆。
匀浆作脱气处理。
⑶将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位(液面略高于滤膜)，务必使底端无气泡。
⑷用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。
打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。
⑸打开蠕动泵，让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过，使柱床稳定。
用2~3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。
8.2平衡让平衡缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和pH不变。
平衡液是低浓度的缓冲溶液，如Tris 、PBS等。
8.3上样⑴样品用平衡液配制，浑浊的样品要离心和过滤后上样。
苏州蓝晓生物科技有限公司Seplife CL-6B琼脂糖层析介质说明书
Seplife CL-6B说明书1.产品介绍Seplife CL-6B琼脂糖层析介质是用6%交联琼脂糖制备成的凝胶颗粒，本产品为传统的琼脂糖层析介质，具有非特异性吸附低，回收率高，可多次重复使用等特点，可用于分子量差异大、对分辨率要求不高的样品的凝胶层析纯化。
2.性能介绍产品牌号Seplife CL-6B外观白色球状凝胶，无臭无味基质6%交联琼脂糖凝胶pH稳定性3~13（长期），2~14（短期，在位清洗[CIP]）可耐8mol/L 尿素、6mol/L 盐酸胍；有机溶剂，如：乙醇、DMF、化学稳定性THF、DMS、氯仿、丙酮、吡啶、二甲基甲酰胺、二氯乙烷、乙腈排阻极限10000~4×106（球蛋白）粒径（um）45~165耐压流速＊（cm/h）110~210cm/ h(在0.15Mpa）耐热性120℃，pH7水中20min应用用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的凝胶过滤层析纯化＊检测条件：层析柱16mm×300mm；＊柱床高10cm；温度25℃；流动相为0.1mol/L NaCl。
3.使用方法3.1 装柱装柱按照标准操作规程操作。
必须保证每种材料都处于工作温度，凝胶装柱前需要脱气。
3.2平衡使用2~5倍柱床体积的上样平衡液平衡柱子，务必使流出液的电导和pH同上样缓冲液的电导和pH完全一致。
3.3上样（1）样品用缓冲液配制，浑浊的样品要离心和过滤后上样。
含盐量过大、浓度过小的样品要先做处理，再上样。
（2）介质对样品组分的分离是按组分分子量大小进行的，分子量大的先流出来。
（3）上样体积约为柱体积的1~2%，越小分离效果越好。
3.4洗脱用缓冲液洗脱，洗脱中保持流速、缓冲液组成不变。
3.5再生一般用缓冲液洗到平衡，可再次使用。
3.6清洗（1）对于沉淀蛋白、非特异性吸附蛋白和脂蛋白，可用0.5M NaOH清洗去除；（2）对于非特异性吸附较强的蛋白、脂蛋白和脂类，可先用2倍柱床体积的非离子去污剂（0.1%）清洗，然后用2~3倍柱床体积的缓冲液清洗直至pH和电导保持不变。
琼脂糖凝胶电泳的操作步骤
琼脂糖凝胶电泳的操作步骤琼脂糖凝胶电泳的操作步骤如下:1. 制备1%琼脂糖凝胶(大胶用70ml,小胶用50ml):称取0.7 g(0.5 g)琼脂糖置于锥形瓶中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小烧杯.微波炉加热煮沸3次至琼脂糖全部融化,摇匀,即成1.0%琼脂糖凝胶液.2. 胶板制备:取电泳槽内的有机玻璃内槽(制胶槽)洗干净,晾干,放入制胶玻璃板.取透明胶带将玻璃板与内槽两端边缘封好,形成模子.将内槽置于水平位置,并在固定位置放好梳子.将冷却到65?左右的琼脂糖凝胶液混匀小心地倒入内槽玻璃板上,使胶液缓慢展开,直到整个玻璃板表面形成均匀胶层.室温下静置直至凝胶完全凝固,垂直轻拔梳子,取下胶带,将凝胶及内槽放入电泳槽中.添加1×TAE电泳缓冲液至没过胶板为止 .3. 加样:在点样板或parafilm上混合DNA样品和上样缓冲液,上样缓冲液的最终稀释倍数应不小于1X.用10 ul微量移液器分别将样品加入胶板的样品小槽内,每加完一个样品,应更换一个加样头,以防污染,加样时勿碰坏样品孔周围的凝胶面.(注意:加样前要先记下加样的顺序).4. 电泳:加样后的凝胶板立即通电进行电泳,电压60-100V,样品由负极(黑色)向正极(红色)方向移动.电压升高,琼脂糖凝胶的有效分离范围降低.当溴酚蓝移动到距离胶板下沿约1cm处时,停止电泳.(5)电泳完毕后,取出凝胶,用含有0.5 ug/ml的溴化乙锭1×TAE溶液染色约20 min,再用清水漂洗10 min.(6)观察照相:在紫外灯下观察,DNA存在则显示出红色荧光条带,采用凝胶成像系统拍照保存实验原理闭合环状质粒、线性质粒和开环质粒DNA由于构形不同，在加溴化乙锭的琼脂糖凝胶电泳上呈现不同的迁移率，因而在紫外灯下观察，能区别闭合环状质粒DNA(cccDNA)、线性质粒DNA(L-DNA)和开环质粒DNA(ocDNA)。
实验材料和试剂(一)实验样品质粒pUC118(二)试剂1(l DNA/HindIII分子量标准2(溴酚蓝指示剂点样缓冲液0.2% 溴酚蓝50% 蔗糖3(1mg/ml溴化乙锭溶液4(电泳缓冲液(TAE)40 mmol/L Tris-乙酸1 mol/L EDTA(配制方法:24.2克Tris碱，5.71ml冰乙酸，10ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)，定容至5000ml)5(0.7% 琼脂糖凝胶(配制方法:称取琼脂糖0.35克，加入50ml TAE电泳缓冲液)(三)仪器微量移液器电泳仪水平电泳槽透射紫外观察仪实验步骤1(选择合适的水平式电泳槽，调节电泳槽平面至水平。
琼脂糖凝胶电影操作方法
琼脂糖凝胶电影操作方法琼脂糖凝胶电泳是一种常见的分离和检测生物大分子的方法，广泛应用于分子生物学、生物化学以及遗传学等领域。
下面我将详细介绍琼脂糖凝胶电泳的操作步骤和注意事项。
1. 准备工作首先，准备琼脂糖凝胶电泳所需的试剂和仪器设备，包括琼脂糖粉末、缓冲液、DNA样品、DNA标记物和电泳槽等。
2. 制备琼脂糖凝胶将适量的琼脂糖粉末加入缓冲液中，搅拌均匀直至完全溶解，并加热至约80以促进溶解。
然后，将琼脂糖溶液倒入预先准备好的电泳槽中，在琼脂糖溶液表面涂上适量的凝胶刷，用以定位样品孔洞位置。
3. 定位DNA样品孔洞在琼脂糖溶液凝固之前，在刷上的凝胶表面使用透明塑料薄膜压实，然后将DNA 样品孔洞定位模板放置在薄膜上，轻轻旋转以使其与凝胶完全接触。
待凝胶完全凝固后，将模板轻轻取出，即可得到清晰的DNA样品孔洞。
4. 加载DNA样品和DNA标记物将待测的DNA样品进行预处理，包括酶切、PCR扩增等步骤。
然后，将DNA 样品与DNA标记物按照比例混合，将混合物加入到样品孔洞中。
同时，加入一份DNA标记物作为内参。
5. 进行电泳将装有样品的电泳槽放置在电泳仪中，加入适量的缓冲液，确保完全浸没凝胶。
接下来，将正负极电极连接到电泳槽的两端，注意保持正确的极性。
根据实验需求，设定适当的电流和电压参数，开始电泳。
6. 可视化和记录结果经过一定时间的电泳，待DNA样品在凝胶中分离并到达所需距离后，关闭电源，将凝胶取出。
可使用紫外光或荧光成像设备对凝胶进行成像，观察带状图案并拍照记录。
也可以使用DNA染色剂对凝胶进行染色，然后观察和记录结果。
在进行琼脂糖凝胶电泳的操作过程中，还需要注意以下事项：1. 严格遵守实验室的安全操作规程，戴上实验手套和实验眼镜等个人防护用具。
2. 凝胶刷、电泳槽等实验仪器设备要保持清洁，以免影响实验结果。
3. 缓冲液的配制要准确无误，确保电泳条件的稳定性。
4. 千万不能用手直接触摸琼脂糖凝胶，以免污染样品。
琼脂糖凝胶电泳标准操作流程
琼脂糖凝胶电泳标准操作流程琼脂糖凝胶电泳操作标准流程一、实验目的琼脂糖凝胶电泳是常用的检测核酸的方法，具有操作方便、经济快速等优点。
本铜人阵学习DNA琼脂糖凝胶电泳的使用技术，此关为能力考核，通关成功后，代表具备操作琼脂糖电泳的能力。
二、实验原理琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA分子混合物的方法，这种电泳方法以琼脂凝胶作为支持物，利用DNA分子在泳动时的电荷效应和分子筛效应，达到分离混合物的目的。
DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电，在电场中向阳极移动。
在一定的电场强度下，DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应，即分子本身的大小和构型是主要的影响因素。
DNA分子的迁移速度与其相对分子量成反比。
不同构型的DNA分子的迁移速度不同。
如环形DNA分子样品，其中有三种构型的分子：共价闭合环状的超螺旋分子（cccDNA）、开环分子(ocDNA)、和线形DNA分子(IDNA)。
这三种不同构型分子进行电泳时的迁移速度大小顺序为:cccDNA＞IDNA＞ocDNA影响核酸分子泳动率的因素主要还是：1、DNA分子大小；2、琼脂糖浓度；3、DNA构想；4、所用的电压；5、琼脂糖种类；6、电泳缓冲液核酸电泳中常用的染色剂是溴化乙锭（ethidium bromide EB）。
溴化乙锭是一种扁平分子，可以嵌入核酸双链的配对碱基之间。
在紫外线照射BE-DNA 复合物时，出现不同的效应。
254nm的紫外线照射时，灵敏度最高，但对DNA损伤严重；360nm紫外线照射时，虽然灵敏度较低，但对DNA 损伤小，所以适合对DNA样品的观察和回收等操作。
300nm紫外线照射的灵敏度较高，且对DNA损伤不是很大，所以也比较适用。
三、材料、试剂及器具1、材料不同大小的基因组片段；2、试剂Hind III digest DNA Marker（分子量标准）(TaKaRa)；D2000(TianGen)；BIOWESTAGAROSE（西班牙琼脂糖）；加样缓冲液（6x）：溴酚黄；电泳缓冲液（1×TAE）；溴化乙锭（EB）；3、仪器及器具（1）移液器、吸头、锥形瓶（2）电泳系统：电泳仪、水平电泳槽、托盘、胶托、梳子等。
DEAE凝胶使用说明
DEAE凝胶使用说明1.准备工作：-检查DEAE凝胶的质量：确保没有受到严重污染或老化，外观应为均匀的白色颗粒。
-确保实验室内的仪器和设备已经彻底清洁，并消毒所需的器具。
-准备所需的缓冲液和其他试剂，确保其符合实验目的和DEAE凝胶的使用要求。
2.DEAE凝胶的预处理：-使用1M氢氧化钠（NaOH）溶液将DEAE凝胶悬浊液平衡至碱性条件，通常使用10倍体积的溶液。
-在室温或较高温度下（取决于溶液性质），搅拌凝胶膏悬浊液约30分钟。
-通过过滤或离心凝胶悬浊液，将其与清洁的缓冲液或水相分离。
3.DEAE凝胶的装填：-将经过预处理的DEAE凝胶放入柱子中，确保填充均匀。
-起初，可以使用较低的流速将缓冲液通过凝胶柱，以避免凝胶的移位或破碎。
4.样品应用：-将待分离的样品溶解在适当的缓冲液中，并使用适当的浓度和pH值进行预处理。
-以缓慢的速度将样品注入DEAE凝胶柱中，以避免柱床破碎并确保样品均匀分布。
5.洗脱和洗涤：-使用适当的缓冲液进行柱洗脱，以清除非目标分子和其他杂质。
-可使用梯度洗脱，逐渐增加盐浓度或改变缓冲液的pH值，以逐步洗脱需纯化的目标分子。
-可使用电镜、紫外吸收光谱等方法监测样品的洗脱效果。
6.贮存和保养：-分离纯化后的目标物质，根据其特性选择适当的储存条件，并确保它们的稳定性和活性。
-要洗涤和存储DEAE凝胶柱，使用适当的缓冲液，并跟随厂家提供的建议来保持柱子的良好状态。
1.DEAE凝胶在潮湿环境中易吸湿结块，因此应储存在干燥的环境中，并避免接触水分。
2.在使用DEAE凝胶前，应仔细阅读和遵守产品厂家提供的操作手册和说明。
3.使用适当的防护设备，如手套和实验室外套，以避免对身体造成伤害。
4.避免直接接触凝胶材料，以免发生过敏或刺激。
5.处理使用过的DEAE凝胶时，遵循有关废弃物处理的当地法规。
DEAE凝胶是一种常用的分离纯化工具，但其使用需要严格控制各个步骤和条件。
正确使用和操作DEAE凝胶可以提高实验结果的可靠性和重复性，并提高样品纯度。
蓝色琼脂糖凝胶安全操作及保养规程
蓝色琼脂糖凝胶安全操作及保养规程蓝色琼脂糖凝胶是一种用于蛋白质分离和纯化的常见凝胶。
由于其具有高分辨率和可视化优势，成为实验室中广泛应用的常见试剂。
但是，在使用该试剂时需要注意一些问题，以充分发挥其优势，同时确保实验室人员和环境的安全。
本文将介绍蓝色琼脂糖凝胶的安全操作及保养规程。
1. 实验室人员的安全蓝色琼脂糖凝胶可能对实验室人员的健康造成损害。
在操作过程中，需要注意以下几点：1.佩戴防护手套：蓝色琼脂糖凝胶可能对皮肤造成刺激和敏感，因此在操作过程中需要佩戴防护手套，以避免皮肤接触。
2.使用防护眼镜：在染色过程中，染料可能会溅到面部和眼睛，因此需要佩戴防护眼镜，以避免染料进入眼睛。
3.空气质量：染色过程中会产生烟雾和气味，因此需要确保实验室的空气流通，以避免呼吸不畅。
2. 操作步骤在使用蓝色琼脂糖凝胶时，需要遵循以下步骤：1.为琼脂糖凝胶增加透明度：将琼脂糖凝胶浸泡在去离子水中，以增加透明度，避免背景过度暗淡。
2.加载样品：将样品沿凝胶电泳槽中的负极端点迅速地加载到凝胶中，以避免样品分散或漏出。
3.电泳：设置恰当的电场大小、电压和电泳时间，以确保样品充分分离。
4.去染色：将蓝色琼脂糖凝胶浸泡在去离子水中，以去除多余染料。
最好去除达到期望染色的阶段。
5.水浸泡：将染色后的凝胶浸泡在去离子水中，以消除液体中的过量盐分和缓冲剂。
3. 保养方法正确的保养可以延长琼脂糖的使用寿命，并确保其稳定性。
1.存储条件：将凝胶存储在4°C左右的冰箱中，确保凝胶始终处于潮湿状态。
2.包装：在每次使用完成后，将凝胶置于原始包装中，并确保包装完整。
3.清洗：使用去离子水清洗电泳槽和相关器材，并确保彻底干燥。
4.保养：定期（至少每半年）进行系统性的检查，以确保器材和相关设备的正常运行和完整性。
4. 总结在实验室中操作蓝色琼脂糖凝胶时，需要注意实验室人员的安全，遵循操作步骤，以及正确的保养方法。
正确的操作和保养将有助于确保实验结果的精确和准确，同时确保实验室人员和环境的安全。
琼脂糖凝胶电泳中染料的使用
现在一种染料叫做GoldView可以代替EB，这种染料的毒性比EB低毒了很多，而且是琼脂糖加热，温度降低后再加的，染色效果还不错，而且比较方便，跑完胶就可以直接在紫外下看！但是跟EB 还有一定的差距（同样的体系亮度没有EB亮）。
我们一般采用GoldView做一般性的实验，要发文章的图再拿去用EB染，这样会比较好一点。
以下是一点个人心得：goldview对RNA没有任何的显色能力！！！。
实际上这是很大的问题。
鉴于EB的强致癌作用，很多明智的老板在选用goldview的时候基本上就废止了EB的生存空间。
但对于RNA试验来说，这无疑是致命的。
第一次提RNA的时候就用goldview跑，结果什么都没有，气了好几天，结果今下午终于知道原因了，不知咱RNA提的不好，是染料的原因啊！各位提RNA的同学一定要小心这个东西啊！——RNA杀手！！！原则上讲，为健康着想，goldview还是值得肯定的实验室使用新的核酸染料-goldview,取代原先用的溴化乙锭-EB.goldview现在是由赛百盛出售.以下摘自官方网站:GoldViewTM 核酸染料——使用说明概述GoldViewTM是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型核酸染料，采用琼脂糖电泳检测DNA时，GoldViewTM与核酸结合后能产生很强的荧光信号，其灵敏度与EB相当，使用方法与之完全相同。
在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光，而单链DNA呈红色荧光。
GoldView不仅能染DNA，也可用于染RNA。
通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验，致突变性结果均为阴性；而溴化乙锭（EB）是一种强致癌剂。
因此用GoldviewTM代替EB不失为一种明智的选择。
使用方法1. 将100ml琼脂糖凝胶溶液（浓度一般为0.8%~2%）在微波炉中融化。
2. 加入5µl GoldView，轻轻摇匀，避免产生气泡。
3. 冷却至不烫手时倒胶，待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳。
胺基活化琼脂糖凝胶安全操作及保养规程
胺基活化琼脂糖凝胶安全操作及保养规程胺基活化琼脂糖凝胶介绍胺基活化琼脂糖凝胶是一种常用于蛋白质纯化和分离的层析介质。
其基质为琼脂糖，表面带有胺基组分，能与带有酸性官能团的蛋白质发生非共价键结合。
胺基活化琼脂糖凝胶广泛应用于生物化学、分子生物学、医药和食品工业等领域。
安全操作规程准备工作在使用胺基活化琼脂糖凝胶前，需要做好以下准备工作：1.确保实验室环境干净整洁，无任何物质污染。
2.检查琼脂糖凝胶的质量和有效期，如有问题请勿使用。
3.确保自己已了解和掌握琼脂糖凝胶的性质和使用方法。
操作步骤1.取出所需琼脂糖凝胶，在光线较弱的情况下检查是否有气泡和破损等缺陷。
2.将琼脂糖凝胶放入所需仪器内，并将其充分均匀化。
3.在进行层析前，先用缓冲液洗涤琼脂糖凝胶。
洗涤液可根据实验需求和琼脂糖凝胶的性质而定。
4.处理完毕后，关闭仪器并仔细清洗仪器内外部份，以防留下污染物。
5.处理废弃物时，遵循相应的垃圾分类规定。
事项注意1.在操作过程中，要佩戴适合的实验室个人防护装备，包括实验衣、手套、防护眼镜等。
2.使用琼脂糖凝胶时，需注意不要强力碰撞、振动或扭曲等，以防止糖凝胶变形或破损。
3.琼脂糖凝胶不耐高温，储存环境温度不应超过25℃，尽量避免阳光直射。
保养规程为了保护琼脂糖凝胶的质量及延长其使用寿命，需做好以下保养工作：1.琼脂糖凝胶在未使用时，应储存于避光、防潮、干燥的环境中。
2.在储存期间，应注意检查琼脂糖凝胶外观，如有气泡或破损等缺陷应及时更换。
3.使用之前，需先进行适当的搅拌，使其均匀化。
4.层析后，应及时彻底清洗琼脂糖凝胶，清除污垢和残留物。
5.长期储存时应加入适当保存液，根据琼脂糖凝胶不同种类和特性而定。
总结胺基活化琼脂糖凝胶是一种广泛应用于蛋白质分离纯化的介质，但在使用时也需要遵循安全操作规程，做好保养工作，以保障实验结果和个人安全。
DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B使用说明
DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B使用说明一、简介DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B是将二乙胺基乙基键合在快流速琼脂糖凝胶上形成的一种弱阴离子交换介质。
广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
本品呈白色，球状、无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
二、亲和填料特性项目指标离子交换基团-O-CH2CH2-N+(C2H5)2H离子交换类型弱阴离子，可交换离子Cl-基质6%交联琼脂糖蛋白质吸附容量120mgHSA/ml介质总离子交换容量0.13~0.17mmol/ml介质形状球形粒径45~165μm流速*150cm/h工作温度4~40℃耐热pH7水中120℃30min耐压0.3MPapH稳定性1~14(短时间,在位清洗);2~12(长时间)pH工作范围3~12化学稳定性在以下液体中稳定：所有常用的水相缓冲液；1mol/L氢氧化钠；*检测条件：层析柱10mm×300mm*柱床高15cm，25℃，流动相为0.1mol/LNaCl。
三、适用范围本产品具有高化学稳定性、高流速、高载量、好的机械性能、可在位清洗、多次重复使用等特点，非特异性吸附低，回收率高，适用于工业规模生产，适用于在pH工作范围内可形成负离子的生物大分子的分离纯化，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
四、注意事项1、产品应密封贮存在4℃~25℃（保存溶液为20%乙醇），通风、干燥、清洁的地方。
不能冷冻。
用过的柱子贮存在4℃（20%乙醇）。
2、本产品避免与氧化剂接触；避免在pH值<4时长时间暴露(一周，20℃)。
3、保质期：5年。
五、操作步骤：1、装柱（1）让所有的材料和试剂达到室温。
配制初始缓冲液（平衡液）和洗脱缓冲液。
（2）根据柱子大小取所需量的凝胶，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始缓冲液（按凝胶：缓冲液=3：1的比例）配成匀浆。
（3）将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位（液面略高于滤膜），务必使底端无气泡。
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DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B使用说明
一、简介
DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B是将二乙胺基乙基键合在快流速琼脂糖凝胶上形成的一种弱阴离子交换介质。
广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
本品呈白色，球状、无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
二、亲和填料特性
项目指标
离子交换基团-O-CH2CH2-N+(C2H5)2H
离子交换类型弱阴离子，可交换离子Cl-
基质6%交联琼脂糖
蛋白质吸附容量120mgHSA/ml介质
总离子交换容量0.13~0.17mmol/ml介质
形状球形
粒径45~165μm
流速*150cm/h
工作温度4~40℃
耐热pH7水中120℃30min
耐压0.3MPa
pH稳定性1~14(短时间,在位清洗);2~12(长时间)
pH工作范围3~12
化学稳定性在以下液体中稳定：
所有常用的水相缓冲液；1mol/L氢氧
化钠；
*检测条件：层析柱10mm×300mm*柱床高15cm，25℃，流动相为0.1mol/LNaCl。
三、适用范围
本产品具有高化学稳定性、高流速、高载量、好的机械性能、可在位清洗、多次重复使用等特点，非特异性吸附低，回收率高，适用于工业规模生产，适用于在pH工作范围内可形成负离子的生物大分子的分离纯化，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
四、注意事项
1、产品应密封贮存在4℃~25℃（保存溶液为20%乙醇），通风、干燥、清洁的地方。
不能冷冻。
用过的柱子贮存在4℃（20%乙醇）。
2、本产品避免与氧化剂接触；避免在pH值<4时长时间暴露(一周，20℃)。
3、保质期：5年。
五、操作步骤：
1、装柱
（1）让所有的材料和试剂达到室温。
配制初始缓冲液（平衡液）和洗脱缓冲液。
（2）根据柱子大小取所需量的凝胶，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始缓冲液（按凝胶：缓冲液=3：1的比例）配成匀浆。
（3）将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位（液面略高于滤膜），务必使底端无气泡。
（4）用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。
打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。
（5）打开蠕动泵，让缓冲液用使用时流速的 1.33倍的流速流过，使柱床稳定。
用2~3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。
2、平衡
让平衡缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和pH不变。
平衡液是低浓度的缓冲溶液，如Tris、PBS等。
3、上样
（1）样品用平衡液配制，浑浊的样品要离心和过滤后上样。
盐浓度太大的样品处理后再配。
（2）一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡液洗去杂质，再选择一种洗脱液洗下目标产品。
（3）介质对样品组分吸附的程度取决于样品的带电性质、流动相的离子强度和pH值。
盐浓度小，介质对样品组分吸附较牢。
用DEAE介质时，推荐的pH值是大于目标产品等电点1个单位。
4、洗脱
DEAE介质可用增大盐浓度或减小pH值进行洗脱，常用增大盐浓度的办法洗脱。
5、再生
一般用高盐浓度的缓冲液（含1~2mol/L NaCl）洗或减小pH洗10倍以上柱体积，接着用结合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用。
若有失活蛋白质或脂类物质在再生时洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。
6、在位清洗
（1）对于以离子键结合上去的蛋白，可以用2M Nacl去除。
（2）对沉淀蛋白、对以疏水性结合的蛋白或脂类，可用1M NaOH去除。
（3）对强疏水性结合的蛋白、脂类等，用4~10倍柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗，但要注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加，否则容易产生气泡。
清洗完毕后，用至少3倍缓冲液平衡柱子。
7、注意
在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。
在使用过程中，不能使用强酸，如使用酸洗，应使用浓度低于0.1M的冰醋酸。
8、去热源
用0.5M的氢氧化钠清洗柱子5~6小时或用0.1M的氢氧化钠24小时。
或用以下方法步骤去除：
（1）2倍柱体积的70%乙醇；
（2）2倍柱体积50mM Tris-HCl pH7.5；
（3）1倍柱体积4M尿素；
（4）3倍柱体积的Tris缓冲液+0.1M Nacl；
以上缓冲液都在无热源的双蒸水中配制。
9、消毒
用0.5~1M NaOH室温下洗8~10倍柱体积，初始缓冲液平衡柱子。
10、灭菌
置介质于高压灭菌锅中120℃下30分钟。