常用染色剂及配制
染色配方计算和染液的配制—染色配方计算
染色配方计算
染色配方计算
某染色处方如下:
活性染料艳红x-3B
1%(owf)
NaCl(促染剂)
30g·L-1
Na2CO3(固色剂)
15g·L-1
浴比:1:20
织物 100 g
还记得这个处方吗?现在让我们计算各组分的用量吧。
染色配方计算
1、染料用量 :活性染料艳红x-3B 1%(owf)
----owf(对织物重)(on weight of fabric)
公式: owf =(染料用量/织物重)×100% 1% = x / 100g x =1 g
举一反三:owf=1% 如:织物重1g, 织物重1kg,
染料用量 1?0mg ; 染料用量 1?0g 。
染液浓度表示方法
2、助剂用量 质量浓度(克/升浓度 g ·L-1 )---与染液体积有关
首先计算染液体积 浴比:织物的质量(g)与染液的体积(mL)之比 1 : 20 = 100 :y y = 2000mL = 2L
再计算助剂用量
计算公式: ρB =
NaCl : 30 = z /2 z = 60g Na2CO3 : 15= z /2 z = 30g
测色与配色
染料母液的配制
染液浓度表示方法
某染色处方如下:
活性染料艳红x-3B
1%(owf)
NaCl(促染剂)
30g·L-1
Na2CO3(固色剂)
15g·L-1
浴比:1:20
织物 100 g
你能理解其中的含义吗?
染液浓度表示方法
1、染料用量的表示方法 ----owf(对织物重)(on weight of fabric) 定义:指染料用量相对于织物质量的百分数 相当于质量分数 公式:owf =(染料用量/织物重)×100%
常用染色液配方
实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培养基的配制
实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培养基的配制一、实验室常用染料性能介绍1.苏木精:苏木精是一种常用的组织染料,其主要成分是吡啶类化合物。
苏木精具有很好的亲水性,对细胞核染色效果好,特别适用于观察细胞的核结构和形态。
2.基本蓝1:基本蓝1是一种亲水性染料,也是常用的组织染料。
它能与细胞内核酸结合,使细胞核显色。
基本蓝1在显微镜下观察时呈现出暗蓝色,有良好的穿透性,可以用来观察细胞的核仁、蛋白质沉积等。
3.伊红:伊红是一种细胞染色常用的酸碱指示剂。
它在碱性条件下呈红色,在酸性条件下呈黄色,可以用来染色观察细胞的酸性和碱性成分。
4.甲磺酸伊地洛尔:甲磺酸伊地洛尔是一种常用的荧光染料,可以与细胞膜结合,形成荧光标记的细胞,用于细胞增殖、迁移等研究。
在实验室中,还有很多常用的药品试剂和培养基需要配制。
下面介绍一些常见的配制方法:1.X溶液的配制:X溶液通常是用于细胞培养的培养基中的一种添加剂。
具体的配制方法是将X溶液的粉末称取适量加入适量的去离子水中,搅拌均匀即可。
X溶液可以用于抗菌、抗霉等作用。
2.磷酸缓冲盐水的配制:磷酸缓冲盐水经常用于细胞培养中的一种缓冲液。
配制磷酸缓冲盐水需要称取适量的氢磷酸盐和二氢磷酸盐加入适量的去离子水中,搅拌均匀并调节pH值即可。
3.阿霉素的配制:阿霉素是一种常用的抗生素,常用于细胞培养中的抗菌作用。
阿霉素的配制需要将相应的阿霉素粉末加入适量的溶剂中,搅拌均匀形成阿霉素溶液。
4.LB培养基的配制:LB培养基是著名的富含营养成分的培养基,常用于大肠杆菌等细菌的培养。
LB培养基的配制需要称取适量的草莓粉末、酵母粉末、纯化骨粉和氯化钠加入适量的去离子水中,通过高压灭菌形成LB培养基。
以上仅为常用染料性能介绍及部分常用药品试剂和培养基的配制方法,实验室中还有很多其他药品试剂和培养基需要进行配制或选购,要根据实际需要进行选择和使用。
常用染色液的配制
常用染色液的配制1.染料饱和酒精溶液的配制配制染色液常先将染料配成可长期保存的饱和酒精溶液,用时再予以稀释配制。
配制饱和酒精溶液,应先用少量95%酒精先在研钵中徐徐研磨,使染料充分溶解,再按其溶解度加于95%酒精之中,贮存于棕色瓶中即可。
附表1 几种常用染料在95%酒精中的溶解度(26℃)染料名称美蓝结晶紫龙胆紫碱性复红沙黄溶100mL95%酒精中的重量(g) 1.4813.8710.003.203.412.常用染色液的配制(1)碱性美蓝(亦称骆氏美蓝)染色液:取美蓝饱和酒精溶液30ml,加入0.01%氢氧化钾水溶液l00mL,混合即成。
此染色液在密闭条件下可保存多年。
若将其在瓶中贮至半满,松塞棉塞,每日拔塞摇振数分钟,并不时加水补充失去的水分,约1年后可获得多色性,成为多色美蓝染色液。
(2)草酸铵结晶紫(亦称赫克结晶紫)染色液:取结晶紫饱和酒精溶液2mL,加蒸馏水18mL稀释10倍,再加入1%草酸铵水溶液80mL,混合过滤即成。
(3)革兰氏碘溶液:将碘化钾2g置乳钵中,加蒸馏水约5mL。
再加入碘片1g,予以研磨,并徐徐加水,至完全溶解后,注入瓶中,被加蒸馏水至全量为300mL即成。
此液可保存半年以上,当产生沉淀或褪色后即不能再用。
(4)沙黄水溶液:沙黄也称番红花红。
将沙黄饱和酒精溶液以蒸馏水稀释10倍即成。
此液保存期以不超过4个月为宜。
(5)石炭酸复红染色液:取3%复红酒精溶液10mL,加入5%石炭酸水溶液90mL混和过滤即成。
(6)稀释石炭酸复红染色液:将石炭酸复红染色液以蒸馏水稀释10倍即成。
(7)3%盐酸酒精(亦称含酸酒精):加浓盐酸3mL于95%酒精97mL中即成。
(8)瑞士染色色液:取瑞氏染料0.1g置乳钵中,徐徐加入甲醇,研磨以促其溶解。
将溶液倾入有色中性玻瓶中,并数次以甲醇洗涤乳钵,亦倾入瓶内,最后使全量为60mL即可。
将此瓶置暗处过夜,次日滤过即成。
此染色液须置于暗处,其保存期约为数月。
常用染色液配制
常用染色液配制The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 20201.草酸铵结晶紫染色液A液:结晶紫,95%乙醇25mL。
B液:草酸铵,蒸馏水1000mL。
制备时,将结晶紫研细,加入95%乙醇溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合静止48h后,过滤后使用。
2.鲁格尔氏(路戈氏)碘液碘,,蒸馏水300mL。
先用3~5mL蒸馏水溶解KI,再加入碘片,稍加热溶解,加足水过滤后使用。
3.脱色液:95%乙醇;或丙酮乙醇溶液:95%乙醇70mL,丙酮30mL4.沙黄(番红)染色液%沙黄(番红)乙醇溶液:沙黄(番红),95%乙醇100mL。
此母液存放于不透气的棕色瓶中,使用时取20mL母液加80mL蒸馏水使用。
5.%美兰染色液溶解于100mL蒸馏水中。
6.吕氏碱性美蓝色染色液A液:美蓝,95%乙醇30mL。
B液:,蒸馏水100mL,分别配制A液和B液,混合即可。
7.瑞氏染色液瑞氏染料粉未,甘油3mL,甲醇97mL。
将染料放乳钵内研磨,先加甘油,后加甲醇,过夜后过滤即可。
8.5%孔雀绿水溶液(芽孢染色用)孔雀绿,蒸馏水100mL。
先将孔雀绿放乳钵内研磨,加少许95%乙醇溶解,再加蒸馏水。
9.黑色素水溶液(荚膜负染色用)黑色素10g,蒸馏水100mL,40%甲醛(福尔马林)。
将黑色素溶于蒸馏水中,煮沸5min,再加福尔马林作防腐剂,用玻璃棉过滤。
10.硝酸银鞭毛染色液A液:单宁酸,,福尔马林(15%),1%,蒸馏水100mL。
B液:,蒸馏水100mL。
将AgNO3溶解后,取出10mL备用,向其它的90mL硝酸银液中加浓氢氧化铵,则形成很厚的沉淀,再继续滴加氢氧化铵到刚刚溶解沉淀成为澄清溶液为之。
再将备用的硝酸银慢慢滴入,则出现薄雾,但轻轻摇动后,薄雾状的沉淀又消失,再滴入硝酸银,直到摇动后,仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为之。
常用染色液和试剂的配制
一、埃利希(EhrIiCh)氏苏木精染液先将苏木精2g溶于IOOm1乙醇中,再加冰醋酸IOm1,混合后加蒸储水IOOm1和IOOm1甘油,然后加硫酸铝钾(约Iog)至饱和,搅拌均匀,倒入瓶中。
将瓶口用1层纱布包着小块棉花塞上,放在暗处通风的地方,并经常摇动促进“成熟”,直到液体颜色变为深红色为止。
成熟时间约2-4周。
若加0.4g碘酸钠可加快成熟。
二、吉姆萨(GiemSa)氏母液将吉姆萨粉末Ig先溶于少量甘油,在研钵内研磨30min以上,至看不见颗粒为止,再将全部(66m1)剩余甘油倒入,于56℃温箱内保温2h。
然后再加入甲醇(66m1),搅匀后保存于棕色瓶中。
母液配制后放入冰箱可长期保存,一般刚配制的母液染色效果欠佳,保存时间越长越好。
临用时用PH6.8的磷酸盐缓冲液稀释10倍。
三、瑞(Wright)氏染液称取瑞氏染料粉末OJg于研钵内研细后,加入少量甲醇再反复研磨,最后将全部甲醇(总共60m1)加入研匀,染料全部溶解后,将染液保存于棕色瓶内备用。
四、醋酸洋红染液将洋红粉末Ig倒入IOOm145%醋酸溶液中,边煮边搅拌,煮沸(沸腾时间不超过30s),冷却后过滤,即可使用。
也可再加入1%~2%铁明矶水溶液5-10滴,至此液变为暗红色而不发生沉淀为止。
如制作永久标本染色时,可加入饱和氢氧化铁或醋酸铁(媒染剂)溶液数滴,至染色液呈浅蓝色为止。
五、硫堇染液(工作液)①干液(硫堇):硫堇Ig或2g溶于Ioom150%乙醇中,溶解后过滤备用;②醋酸钠缓冲液:醋酸钠∙3H2O9.7g,巴比妥钠14.7g,溶于50Om1蒸储水中;③0.1mo1/1盐酸;按①:②:③=40:28:32比例配成混合液,调pH5.7±0.2,即得硫堇工作液。
六、0.02%盾纳斯绿B(JanusGreenB)用0.9%生理盐水溶液配制。
七、甲基绿一派洛宁染液(Unna试剂)派洛宁0.25g,甲基绿0.15g,95%乙醇20m1,甘油20m1。
常用染色液配方范文
常用染色液配方范文
染色液是一种常见的化学染料,用于染色纺织品、皮革、木材等材料。
下面是一些常用的染色液配方,供参考:
1.酸性染色液配方:
-甲醛:5%(染色前处理)
-醋酸:2%(酸洗、pH调节)
-染料:1-3%(根据颜色需求)
-辅料:盐酸、硫酸、硫酸铵等(根据具体工艺条件)
2.碱性染色液配方:
-乙醇胺:5-10%(碱性调节)
-染料:1-3%(根据颜色需求)
-辅料:碱性添加剂(根据具体工艺条件)
3.偶氮染料染色液配方:
-偶氮染料:0.5-2%(根据颜色需求)
-萃取剂:1-5%(用于溶解染料)
-辅料:乙醇、盐酸、润湿剂等(根据具体工艺条件)
4.基于金属盐的染色液配方:
-金属盐:如铜盐、铁盐、铅盐等
-酸洗剂:如盐酸、硝酸等
-辅料:酸性调节剂、沉淀剂等(根据具体工艺条件)
5.响应性染料染色液配方:
-响应性染料:根据所使用的响应性染料种类和需求量决定
-辅料:如还原剂、氧化剂等(根据具体工艺条件)
注意事项:
-在配制染色液时,选择合适的溶剂和添加剂,确保染料能够均匀分
散在溶液中,达到较好的染色效果。
-不同类型的染料有不同的适应pH范围,因此在选择配方时需要考虑
染料的酸碱性。
-染色液的具体配方需根据不同的染色物料和工艺要求进行调整。
这些仅是一些常见的染色液配方,实际应用中还需要根据具体的染料、染色物料和工艺要求进行调整和优化。
最佳的染色液配方应该结合实验室
试验和生产实际,以确保染色效果的质量和稳定性。
常用染色剂的配方
常用染色剂的配方常用染色剂的配方(一)天然染料1、苏木精(Hematoxylin)苏木精是从南美的苏木(Haematoxylon campechianum)干枝中用乙醚浸制出来的一种色素,是最常用的染料之一。
苏木精不能直接染色,必须暴露在通气的地方,使他变成氧化苏木精(又叫苏木素)后才能使用,这叫做“成熟”。
苏木精的“成熟”过程需时较长,配置后时间愈久,染色力愈强。
被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。
所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。
常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。
苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体,易溶于酒精,微溶于水和甘油,是染细胞核的优良材料,他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。
分化时组织所染的颜色因处理的情况而异,用酸性溶液(如盐酸—酒精)分化后呈红色,水洗后仍恢复青蓝色,用碱性溶液(如氨水)分化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。
2、洋红(Carmine)洋红又叫胭脂红或卡红。
一种热带产的雌性胭脂虫干燥后,磨成粉末,提取出胭脂红,再用明矾处理,除去其中杂质,就制成洋红。
单纯的洋红不能染色,要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。
常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸,碱性溶液有氨水、硼砂等。
洋红使细胞核的优良染料,染色的标本不易褪色。
用作切片或组织块染都适宜,尤其适宜于小型材料的整体染色。
用洋红配成的溶液染色后能保持几年。
洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。
3、靛蓝洋红(Indigo carmine)是由木蓝(Indigofera)提出的靛蓝(Indigo)加上亚硫酸钠而成。
为蓝色酸性染料,作为细胞质的染色剂。
常与苦味酸合成苦味酸靛蓝洋红(picro-indigo-carmine),呈绿色,可与碱性品红作对比染色。
4、地衣红(Orcein)是由地衣(Lecanora parella)中取得的染料,可在酸性或碱性溶液中染色。
植物细胞学中应用较多,尤其对于某些植物的染色体染色,效果比醋酸洋红更好。
常用染色剂及配制
常用染色剂及配制常用染色剂及配制供组织学诊断用的优秀常规染色剂,不仅须使细胞核和细胞浆有选择性着染,也要使结缔组织着色。
苏木素-伊红染色的切片适当分色,可使这些结构得以区分,胞核表现为蓝色,胞浆和结缔组织纤维呈各种色调的粉红,因此这是一种最常用的常规染色剂。
一、苏木素-伊红染色的基本原理苏木素是最早用于生物学上的天然染色剂之一,百余年来,一直是生物学实验室最常用的组织学中细胞核的染料,它是从苏木树的树心中提炼出来的,为浅褐色结晶或淡黄褐色的粉末状物。
易溶于乙醇、甘油,也可溶于热水。
苏木素本身没有染色能力,它经过氧化后,能产生具有染色能力的苏木红,苏木红又称为氧化苏木素或苏木因。
苏木素变成苏木红的过程叫作“成熟”。
成熟的方法一般有两种:一种是把配制好的苏木素液在开口瓶中放置两个月以上,让其在日光和空气中的氧的作用下使之氧化。
故一般地盛苏木素的瓶子放在向阳处,时间愈长,染色的效果愈好。
常配制一大瓶,备长期使用。
另一种方法是在苏木素液中加入氧化剂,如磺酸钠,过锰酸钾,氧化汞,双氧水等。
用这种方法成熟与用第一种方法者不同的是,它放置时间愈长,染色的效果愈低。
这是因为苏木红被继续氧化可生成无色的化合物,故一次不宜配制过多,还应放置40C冰箱内避光保存以延长使用时间。
它的优点是配制后即可使用。
成熟的苏木素对组织并无亲和力,须加入含金属离子的媒染剂,才能达到染色的目的。
一般用于明矾苏木素的媒染剂为钾明矾或氨明矾。
主要是利用明矾中的铝离子和苏木红结合形成的铝沉淀色素为紫蓝色,对染色质有很大的亲和力,水和酒精都不能使其褪色。
用于铁苏木素的媒染剂是三价铁离子,苏木红的铁沉淀色素为黑蓝色,不溶于水,因此,故不能配制大量含媒染剂的混合液,一般用时现配,或在染色过程中,先用铁明矾媒染,然后再染苏木素,如磷钨酸苏木素染色即是。
常规苏木素染色的对比染色是用伊红,也有采用焰红,因为焰红比伊红色泽更鲜明,此外还有采用橘黄G,比布里希猩红,波尔多红等作为对比染色。
染色剂配制
常用染色液的配制1.草酸铵结晶紫染色液A液:结晶紫2.5g,95%乙醇25mL。
B液:草酸铵1.0g,蒸馏水1000mL。
制备时,将结晶紫研细,加入95%乙醇溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合静止48h后,过滤后使用。
2.鲁格尔氏(路戈氏)碘液碘1.0g,KI 2.0g,蒸馏水300mL。
先用3~5 mL蒸馏水溶解KI,再加入碘片,稍加热溶解,加足水过滤后使用。
3.脱色液:95%乙醇;或丙酮乙醇溶液:95%乙醇70mL,丙酮30mL4.沙黄(番红)染色液2.5%沙黄(番红)乙醇溶液:沙黄(番红)2.5g,95%乙醇100mL。
此母液存放于不透气的棕色瓶中,使用时取20mL母液加80mL蒸馏水使用。
5.0.1%美兰染色液0.1g溶解于100mL蒸馏水中。
6.吕氏碱性美蓝色染色液A液:美蓝0.3g,95%乙醇30mL。
B液:KOH 0.01g,蒸馏水100mL,分别配制A液和B液,混合即可。
7.瑞氏染色液瑞氏染料粉未0.3g,甘油3mL,甲醇97mL。
将染料放乳钵内研磨,先加甘油,后加甲醇,过夜后过滤即可。
8.5%孔雀绿水溶液(芽孢染色用)孔雀绿5.0g,蒸馏水100mL。
先将孔雀绿放乳钵内研磨,加少许95%乙醇溶解,再加蒸馏水。
9.黑色素水溶液(荚膜负染色用)黑色素10g,蒸馏水100mL,40%甲醛(福尔马林)0.5mL。
将黑色素溶于蒸馏水中,煮沸5min,再加福尔马林作防腐剂,用玻璃棉过滤。
10.硝酸银鞭毛染色液A液:单宁酸5.0g,FeCL3 1.5g,福尔马林(15%) 2.0mL,1%NaOH 1.0mL,蒸馏水100mL。
B液:AgNO3 2.0g,蒸馏水100mL。
将AgNO3溶解后,取出10mL备用,向其它的90mL硝酸银液中加浓氢氧化铵,则形成很厚的沉淀,再继续滴加氢氧化铵到刚刚溶解沉淀成为澄清溶液为之。
再将备用的硝酸银慢慢滴入,则出现薄雾,但轻轻摇动后,薄雾状的沉淀又消失,再滴入硝酸银,直到摇动后,仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为之。
实验室常用染色液和试剂配方
实验室常用染色液和试剂配方【很全】实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
常用染色液的配制
常用染色液的配制1.吕氏(Loefflev)美蓝染色液A液:2%美蓝(Methylene blue)95%酒精溶液B液:10%KOH溶液取A液30ml、B液0.1ml与100ml蒸馏水混合。
2.石炭酸复红染色液A液:4%碱性复红(basic fuchsin)95%酒精溶液将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解、配成A液。
B液:5%石炭酸溶液取A液10ml、B液90ml混合即可。
一般可将此溶液稀释5-10倍使用。
但稀释液易变质失效,一次不宜多配。
3.革兰氏(gram)染色液(1)草酸铵结晶紫染液:A液:1%结晶紫(Crystal violet)95%酒精溶液B液:1%草酸铵(Ammonium oxalate)溶液取A液20mlB液80ml,静置48/小时后使用。
(2)路哥氏(Lugol)碘液:碘片1.0g、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液另,待碘全部溶解后,加够水即成。
(3)95%酒精溶液(4)蕃红(沙黄)复染液:2.5%蕃红(Safranlne O)95%酒精溶液。
取此液10ml与90ml蒸馏水混匀即成。
4.芽孢染色液(1)5%孔雀绿(Malachite green)溶液。
(2)0.5%蕃红溶液。
(3)苯酚品红溶液称取11g碱性品红溶于100ml无水酒精中。
再取上述溶液10ml与100ml 5%的苯酚溶液混合,过滤备用。
(4)黑色素(nigrosin)溶液10%黑色素溶液,置沸水浴中30min后,滤纸过滤二次,补加水到100ml, 然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。
5.荚膜染色液(1)黑色素水溶液将黑色素在蒸馏水中煮沸5min,配成5%溶液,然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。
(2)蕃红染色液与革兰氏染色液中的蕃红复染液相同。
6.鞭毛染色液A液:单宁酸5.0g、FeC131.5g、蒸馏水100ml,福尔马林(15%)2.0ml、NaOH(1%)1.0ml。
高中生物-染色剂
高中生物染色剂1、斐林试剂配制:1)甲液质量浓度为 0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100ml2)乙液质量浓度为0.05g/ml,取5gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml临用时将甲、乙液等量混合作用:鉴定还原性糖:C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等。
还原性糖与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀。
如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。
2、班氏尿糖定性试剂配制:称取17.4克无水硫酸铜(CuSO4)溶解于100毫升热蒸馏水中,冷却后,稀释到150毫升。
称取柠檬酸钠173克及无水碳酸钠(Na2CO3)100克,加蒸馏水600毫升,加热使之溶解,冷却后,稀释到850毫升。
把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中,搅匀后即为班氏尿糖定性试剂。
用细口瓶贮存备用(为了防止氢氧化铜沉淀的生成,故加入柠檬酸钠。
柠檬酸钠是一种亲水性掩蔽性络合物形成剂,它能与铜离子形成可溶性络盐)。
使用方法同斐林试剂,所不同的是班氏试剂可长期使用。
3、双缩脲试剂配制:A液:质量浓度为 0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100mlB液:质量浓度为0.01g/ml,取1gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml使用时,先加A液,后加B液作用:鉴定蛋白质,蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可产生紫色反应。
也可用于鉴定多肽。
4、苏丹Ⅲ :配制:取0.1g苏丹Ⅲ,溶解在20ml95%酒精中作用:鉴定脂肪,脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染成红色)。
5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液(1:1)作用:用于洋葱根尖的解离,即使组织中的细胞相互分离开来。
能杀死细胞固定。
6、质量浓度为0.01g/mL的或0.02g/mL龙胆紫溶液(或醋酸洋红溶液)配制:是将龙胆紫溶解在质量分阶段数为2%的醋酸溶液中配制而成作用:使细胞核内的染色体着色,便于观察。
7、质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液作用:观察成熟植物细胞质分离时用。
生物常用染色剂
4、苏丹Ⅲ
配制:取0.1g苏丹Ⅲ,溶解在20ml95%酒精中
作用:鉴定脂肪,脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染成红色)。
5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液(1:1)。
作用:用于洋葱根尖的解离,即使组织中的细胞相互分离开来。能杀死细胞固定。
6、质量浓度为0.01g/mL的或0.02g/mL龙胆紫溶液(或醋酸洋红溶液)
作用:用来测定淀粉,淀粉遇碘后,形成紫色的复合物。
13、二苯胺
配制:称取1.5g二苯胺,溶于100mL冰醋酸中,再加1.5mL浓硫酸,用棕色瓶保存。临用前,在10mL的上述溶液中再加入0.1mL体积分数为0.2%的乙醛溶液。
作用:DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色。
14、NaOH:用于吸收CO2(验证光合作用需要CO2)或改变溶液的pH,
15、Ca(OH)2:鉴定CO2(验证呼吸作用产生CO2)。
16、NaHCO3:提供CO2等。
1、斐林试剂
配制:1)甲液质量浓度为 0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100ml
2)乙液质量浓度为0.05g/ml,取5gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml
临用时将甲、乙液等量混合
作用:鉴定还原性糖:C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等。
还原性糖与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀。如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。
作用:(1)用于观察根对矿质元素离子的交换吸附观察;
(质被细菌污染情况。
是活体染色剂。
9、丙酮
是有机溶剂,在叶绿体中色素提取时,用于溶解叶绿体中的色素。可用酒精替代,不过提取色素时将绿叶放入酒精中隔水加热
常用染色液的配方
常用染色液的配方染色液是一种用于给纤维或织物上色的溶液,可以通过调整其成分的配比来获得不同颜色的染色效果。
以下是一些常见的染色液配方,涵盖了不同颜色和纤维材料的染色需求。
1.无酶法染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量-草酸:10g-盐:60g-分散剂:适量2.酶法染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量-酶解剂:2g-分散剂:适量3.酸性染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量- 醋酸:20ml-分散剂:适量4.乳液染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量-乳化剂:适量- 硫酸:10ml-盐:60g-分散剂:适量5.染料固定剂染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量-染料固定剂:根据需要调整用量-盐:60g-分散剂:适量6.阴离子染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量-还原剂:适量-分散剂:适量7.阳离子染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量-盐:60g-分散剂:适量上述配方仅为一般参考,实际配方可能会因具体染色要求和纤维类型的不同而有所调整。
在进行染色之前,应根据纤维类型、染料选择和染色效果的要求进行配方调整。
此外,注意遵循相关安全操作和环保要求,以确保染色过程的安全和可持续性。
在实际染色过程中,可以根据需要使用其他添加剂来调整染色液的性能,如增稠剂、酸碱调节剂、湿润剂等。
此外,注意控制染色液的pH值、温度和时间等参数,以获得理想的染色效果。
总之,染色液的配方是根据具体需求和材料类型来确定的,在实际应用中需要充分考虑材料特性和染色效果,并注意安全环保要求。
常用微生物染色法
1革兰染色法:2.1.1染色剂的配制1.1.1结晶紫液称取结晶紫2.0g,加95%乙醇20ml,使溶解为甲液,另取草酸铵0.8g,加水80ml,使溶解为乙液。
甲、乙液相混,静置48小时后使用。
贮存在密闭的棕色瓶中。
有效期为3个月。
1.1.2碘液称取碘化钾2.0g,加水3~5ml,使溶解,再投入碘1.0g,用力振摇,使之全部溶解,加水稀释至300ml,即得,贮存在棕色瓶中。
密闭保存,有效期为1个月。
1.1.3脱色液:95%乙醇。
1.1.4复染液:a.沙黄(番红)复染液:称取沙黄0.25g,加95%乙醇10ml溶解,然后再加纯化水至100ml即得。
b.稀石碳酸复红染液:称取碱性复红2.5g,研细,加95%乙醇25ml。
放置过夜,用滤纸过滤,加5%石碳酸水溶液20ml混合,为石碳酸复红液,再取此液10ml,加水90ml,即成稀石碳酸复红液。
1.2染色操作方法:1.2.1涂片、干燥在载玻片上,滴一滴无菌水或生理盐水,用接种环挑少许菌苔在水涂成一薄层;或将长菌的培养液取少许轻轻涂在载玻片上,自然干燥,也可以在微火焰上通过几次,使菌体固定。
1.2.2染色步骤a滴加结晶紫液,覆盖约1分钟,水洗,(勿使水直接冲洗涂片处)。
b滴加碘液,覆盖约1分钟,水洗、吸干。
C用95%的乙醇褪色至脱色乙醇不呈紫色为止,约20~30秒,水洗吸干。
D滴加沙黄染液或稀石碳酸复红染1分钟,水洗吸干。
1.2.3染色结果革兰氏阳性菌染成紫色,革兰氏阴性菌染成红色。
1.3注意事项1.3.1涂片必须洁净无油,以免影响涂片质量。
1.3.2涂片的菌量不可太浓厚,否则看不清单个菌落形态。
易出现假阳性。
1.3.3用火焰固定时,不可过热,以载玻璃片不烫手为宜。
1.3.4一般以检查培养18—24小时的菌为宜,革兰氏阴性菌染色反应较稳定,不受菌龄的影响。
革兰氏阳性菌易受菌龄影响,较老的细胞如培养24—48小时以上,则有部分或全部细胞转成阴性反应,所以培养18—24小时染色镜检为宜。
常用染色液的配制
常用染色液的配制一、骆氏美蓝染色液(碱性美蓝染色液)甲液:美蓝0.3克,95%酒精30ML乙液:0.01%氢氧化钾溶液100ML甲、乙混合即可,密闭保存,一年后可获多色性。
二、革兰氏染色液1、草酸铵结晶紫染液甲液:结晶紫2G,95%酒精20ML,或结晶紫饱和酒精溶液2ML加蒸馏水18ML。
乙液:草酸铵0.8克,蒸馏水80ML。
甲、乙混合,静置48小时,过滤后备用,可较久贮存。
2、革兰氏碘溶液碘片1G,碘化钾2G,蒸馏水300ML碘化钾+3-5ML蒸馏水,溶解后+碘片,摇匀后+蒸馏水至足量。
3、95%酒精,用作脱色剂4、碱性复红染色液碱性复红(一品红)0.1G,蒸馏水100ML可用沙黄水溶液或稀释石炭酸复红液代替此液。
沙黄水溶液:沙黄饱和酒精溶液+10倍蒸馏水,保存期小于4个月。
稀释石炭酸复红染色液:石炭酸复红液10ML+蒸馏水90ML三、抗酸染色液1、石炭酸复红染色液3%碱性复红酒精溶液10ML+5%石炭酸水溶液90ML,过滤即可。
2、盐酸酒精液浓盐酸3ML+95%酒精97ML四、克利特氏荚膜染色液1、美蓝溶液:美蓝1G+96%酒精10ML+100ML蒸馏水2、碱性红溶液:碱性复红0.03G+1ML96%酒精+99ML蒸馏水五、瑞特氏染色液1、0.1G瑞特氏染粉研磨,再加中性甘油3ML,充分研磨,后徐徐加入甲醇液60ML,边研边搅,存于棕色瓶中过夜,过滤后贮于棕色瓶中,越久越好。
2、磷酸盐缓冲液甲液:磷酸氢二钠23.86G,1000ML蒸馏水。
乙液:磷酸二氢钾9.07G,1000ML蒸馏水。
4份甲液+1份乙液即可。
常用染色液的配制.
常用染色液的配制1.番红水液番红0.1g溶入蒸馏水,定溶至100ml。
2. 番红酒液番红0.5g或1g溶入50%酒精,定溶至100ml3. 固绿染液固绿0.1g溶入95%酒精,定溶至100ml。
4. 碘-碘化钾染液碘化钾溶入100ml蒸馏水,再加入1g碘,溶解后即可使用。
5. 苏丹Ⅲ(或Ⅳ)染液将0.1g苏丹Ⅲ或Ⅳ溶解在50ml丙酮中,再加入70%酒精50ml。
6.改良苯酚品红染液原液A:将3g碱性品红溶入100ml 70%酒精,此液可长期保存。
原液B:将10mlA液加入到90ml 5%苯酚水溶液中。
原液C:将55mlB液加入到6ml的冰醋酸和6ml的38%的甲醛中。
染色液:取C液20ml,加45%冰醋酸80ml,充分混匀,再加入1g山梨醇,放置14天后使用,可保存3年。
7. 间苯三酚染液将5g间苯三酚溶入100ml 95%酒精(若溶液呈黄色,即为失效)。
8. 中性红染液将0.1g中性红溶入100ml蒸馏水,用时稀释10倍。
9. 钌红染液将5~10mg钌红溶入25~50ml蒸馏水,现用现配。
10.龙胆紫染液将0.2g龙胆紫溶入100ml蒸馏水。
现常用结晶紫代替。
必要时可将医用紫药水稀释5倍后代用。
11.铁醋酸洋红染液先将100ml 45%醋酸水溶液置入200ml的锥形瓶中煮沸,移去火苗,然后慢慢地分多次加入1g 洋红粉末(切记不可一次倒入)。
待全部倒入后,再煮沸1~2min,并悬入一生锈的小铁钉于染液中,过1min后取出,使染色剂略含铁质,以增加染色性能。
静置12h后过滤于棕色瓶中备用(置于避光处)。
12.苏木精染液苏木精的配方很多,常用的有如下3种:配方Ⅰ:苏木精水溶液0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中,静置24h后可使用。
配方Ⅱ:代氏苏木精(De larfield’s haematoxylin)甲液:苏木精1g + 无水酒精6ml乙液:硫酸铝铵(铵矾)10g + 蒸馏水100ml丙液:甘油25ml + 甲醇25ml分别配制甲、乙两液,将甲液一滴滴地加入乙液中,充分搅拌后,放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口,置于温暖和光线充足处7~10天,再加入丙液,混匀后静置1~2月,至颜色变为深紫色后,过滤备用,可长期保存。
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常用染色剂及配制
供组织学诊断用的优秀常规染色剂,不仅须使细胞核和细胞浆有选择性着染,也要使结缔组织着色。
苏木素-伊红染色的切片适当分色,可使这些结构得以区分,胞核表现为蓝色,胞浆和结缔组织纤维呈各种色调的粉红,因此这是一种最常用的常规染色剂。
一、苏木素-伊红染色的基本原理
苏木素是最早用于生物学上的天然染色剂之一,百余年来,一直是生物学实验室最常用的组织学中细胞核的染料,它是从苏木树的树心中提炼出来的,为浅褐色结晶或淡黄褐色的粉末状物。
易溶于乙醇、甘油,也可溶于热水。
苏木素本身没有染色能力,它经过氧化后,能产生具有染色能力的苏木红,苏木红又称为氧化苏木素或苏木因。
苏木素变成苏木红的过程叫作“成熟”。
成熟的方法一般有两种:一种是把配制好的苏木素液在开口瓶中放置两个月以上,让其在日光和空气中的氧的作用下使之氧化。
故一般地盛苏木素的瓶子放在向阳处,时间愈长,染色的效果愈好。
常配制一大瓶,备长期使用。
另一种方法是在苏木素液中加入氧化剂,如磺酸钠,过锰酸钾,氧化汞,双氧水等。
用这种方法成熟与用第一种方法者不同的是,它放置时间愈长,染色的效果愈低。
这是因为苏木红被继续氧化可生成无色的化合物,故一次不宜配制过多,还应放置40C冰箱内避光保存以延长使用时间。
它的优点是配制后即可使用。
成熟的苏木素对组织并无亲和力,须加入含金属离子的媒染剂,才能达到染色的目的。
一般用于明矾苏木素的媒染剂为钾明矾或氨明矾。
主要是利用明矾中的铝离子和苏木红结合形成的铝沉淀色素为紫蓝色,对染色质有很大的亲和力,水和酒精都不能使其褪色。
用于铁苏木素的媒染剂是三价铁离子,苏木红的铁沉淀色素为黑蓝色,不溶于水,因此,故不能配制大量含媒染剂的混合液,一般用时现配,或在染色过程中,先用铁明矾媒染,然后再染苏木素,如磷钨酸苏木素染色即是。
常规苏木素染色的对比染色是用伊红,也有采用焰红,因为焰红比伊红色泽更鲜明,此外还有采用橘黄G,比布里希猩红,波尔多红等作为对比染色。
苏木素-伊红染色,在组织病理学中,是一种日常使用最为广泛的常规染色方法。
一张优质的染色切片,可以清晰地观察到各种不同的组织结构以此作为病理诊断的确切依据。
再根据此染色切片所见,分别进行不同的特殊染色。
二、染液的配制
在实验室内常用的苏木素染液有以下几种,不同的仅是染色时间以及比较每种染色方法彼此的优缺点,不过各有优劣。
(一)苏木素染液的配制方法如下
1.Harris氏苏木素液
甲液:苏木素1g
无水酒精10ml
乙液:硫酸铝钾20g
蒸馏水200ml
丙液:一氧化汞0.5g
经典的配制方法是,先将甲液加热溶解后,密封待用,再将乙液加热溶解至沸,去火,待溶液仍处于小沸腾状态时再将甲液徐徐倾入其中,全部混合后,再使溶液在短时间内加热至沸腾,去火,最后,将氧化汞缓慢倾入溶液中(氧化汞一定要慢慢少量分次加入,切忌急躁。
因氧化汞倒入后,溶液会迅速膨胀易沸出容器外而发生危险。
)此时液体变为深紫色,待氧化汞全部放入后,再将溶液加温至沸腾片刻,立即将溶液放入流动的冷水中,并缓缓地连续摇晃至溶液完全冷却为止。
隔夜后过滤,加入冰醋酸(按5%比例)混匀,再过滤后保存于
冰箱内备用。
我们在实验工作中摸索了一种Harris氏苏木素的配制方法,染色效果很好,特介绍如下。
配方:(配制2000ml)
苏木素9g
硫酸铝胺(铵明矾)200g
氧化汞7g(5—10g)
冰醋酸100ml
蒸馏水2000ml
器具:
3000毫升三角烧瓶1个
200毫升量筒1个
1000毫升量筒1个
漏斗1个(大)
滤纸1大张
另备脱脂棉、电炉、湿抹布、大称量纸、流水槽等。
(器具要求达到化学洁净)
配法:
1.将苏木素溶于100毫升无水乙醇中,密封备用。
2.将200克铵明矾溶于2000毫升蒸馏水中,加热至沸。
3.去火。
加入苏木素酒精搅拌,加热至沸。
4.去火。
缓缓加入氧化汞。
5.微火煮至有金属膜产生。
6.去火。
以湿抹布包住三角烧瓶的颈部。
迅速放置于冷水浴中冷却,缓缓摇动烧瓶至液体完全冷却为止。
7.静置避光过夜。
棉花过滤。
滤液中加入冰醋酸(按5%的比例加入),混匀,滤纸过滤,备用。
注意事项:
1.配制好的苏木素液,未经使用的可长期置冰箱(冷藏)内保存。
2.盛液体的烧瓶要质优并且容积要大,防止忽速冷却对破裂和煮沸时液体溢出。
2.Hansen氏苏木素液
甲液:苏木素1g
无水酒精10ml
乙液:硫酸铝钾(钾明矾)20g
蒸馏水200ml
丙液:高锰酸钾1g
蒸馏水16ml
先将甲液加热溶解,然后将乙液加热溶解,将甲、乙两液混合。
再将丙液溶解后缓缓滴入,待全部混合后,再次煮沸一分钟,冷却后过滤,即可使用。
3.Heidenhain氏铁苏木素液
甲液:硫酸铁铵(紫色结晶)5g
蒸馏水100ml
乙液:苏木素0.5g
无水酒精10ml
蒸馏水90ml
此液要求硫酸铁铵只有紫色的透明结晶才能使用;苏木素是溶于洒精中然后加水。
苏木素液需放置4-5周才能成熟。
临用时将甲、乙两液等量混合后使用。
(也可先将苏木素用无水酒精配成5%的贮备成熟,用时取10毫升加蒸馏水至100毫升使成乙液)此苏木素液能染许多结构,但只能用于退行性染色法,需要熟练的分化,初学者宜用减半浓度的铁明矾分色,熟悉后再用原浓度分色。
此液与其它的苏木素染色技术有两个不同a.媒染剂与苏木素分开使用。
b.所用的媒染剂亦用作为分色剂。
4.Ehrilich氏酸性苏木素液
主要应用一般染色和粘液,骨组织的染色
配方:苏木素2g
纯酒精100ml
甘油100ml
蒸馏水100ml
冰醋酸10ml
钾明矾15g
将苏木素溶于纯酒精,再将钾明矾溶于蒸馏水中,溶解后将甘油倾人混合,然后加入苏木素酒精混合,最后加人冰醋酸,溶液全部混合后,应暴露在日光下使其自然成熟,时间约要三个月。
(若加人300毫克碘酸钠,使苏木素迅速氧化则可立即使用。
)此液贮存愈久染色力愈强。
(可保持数年之久)染色时间5——20分钟,结果甚佳。
5.Delafreld氏苏木素液
主要应用于一般染色,弹力纤维的染色。
甲液:苏木素4g
纯酒精25ml
乙液:饱和铵明矾水溶液(约10%)40毫升
丙液:甘油100ml
甲醇100ml
先将苏木素溶于酒精,再将甲液混合在乙液中,置于白色瓶中并暴露在阳光下约一周,然后过滤,将丙液加人滤液中,待溶液呈暗灰色时再过滤,滤液密封保存。
6.Mayer氏明矾苏木素液
主要应用于一般染色,骨组织染色,及免疫组化染色。
配方:苏木素0.1g
钾明矾5g
碘酸钠0.02g
拘椽酸0.1g
水合氯醛5g
蒸馏水100ml
先将苏木素及水煮沸溶解,加人钾明矾与碘酸钠,搅动直到全部溶解为止。
再加人水合氯醛和拘椽酸,完全溶解后染液呈蓝紫色。
加热煮沸五分钟,冷却后过滤即成。
此染液染切片5——15分钟,不需分化,充分水洗后,可使细胞核显蓝色并且非常细致清晰,通常用于对比染色。
7.Weigert氏铁苏木素液
甲液苏木素1g
无水酒精(或95%酒精)100ml
乙液29%三氯化铁水溶液4ml
蒸馏水95ml
盐酸1ml
临用时,取甲、乙液等量混合即可应用。
混合时应将乙液加人甲液内,染液呈紫黑色。
铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用,因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀,所以铁作媒染液时,必须与染液分别配制和分别保存,染片时临时混合应用。
由于这是一种铁苏木素,它将胞核染成黑色。
能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用,且不会被光线退色,因此比钾矾苏木素染色较为持久。