微生物学检验志贺菌属

志贺菌鉴定依据
肠道选择平板上无色半透明菌落 KIA：KA－－ MIU：－ ＋/－ － 与志贺菌多价诊断血清和各群血清凝集 注意与EIEC、类志贺邻单胞菌、动力不 明显的沙门菌鉴别
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与EIEC的鉴别
生化反应鉴别试验 粘质酸盐－ － －
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微生物学检验
标本采集 ◆粪便或肛拭 ◆新鲜脓血便 ◆立即送检或床边接种 ◆保存于30％甘油盐水或卡-布培养基
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检验程序
KIA MIU、IMViC
多价血清玻片凝集 菌落涂片染色
粪便或肛拭 肠道选择平板
可疑菌落
增菌
初步鉴定 最终鉴定 报告结果
因子血清凝集 系统生化反应
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沙门菌属
肠道沙门菌 邦戈沙门菌
肠道亚种
致病沙门菌多为
萨拉姆亚种
肠道亚种
双亚利桑那亚种
亚利桑那亚种
豪顿亚种
英迪加亚种
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形态染色
革兰阴性杆菌，无芽孢、无荚膜、有周 鞭毛，多数菌株有菌毛
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沙门菌
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培养特性
兼性厌氧、营养要求不高 在肠道选择培养基上呈无色半透明S型菌落 菌落，与志贺菌菌落相似。 SS平板－－无色菌落，产H2S菌株，菌落中 心呈黑色 Mac平板－－无色菌落 EMB平板－－无色菌落
我国以B群为主
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不典型菌株的鉴定
在鉴定中如遇生化反应符合，血清学不 凝集；血清学凝集，生化反应不符合， 可考虑不典型菌株。 将不典型菌株在肉汤中反复传代，促其 恢复典型性状
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志贺菌快速鉴定试验
直接凝集试验 免疫荧光菌球法 协同凝集试验 乳胶凝集试验 分子生物学方法
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志贺菌抗原分类
菌种 群 型
亚型
痢疾志贺菌 A 1～10
8a、8b、8c
福氏志贺菌
B
1～6x、 1a、1b、2a、2b、3a、 y变种 3b、3c、4a、4b
鲍氏志贺菌 C 1～18
宋内志贺菌 D
1
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抵抗力
对理化因素抵抗力弱 尤其对酸敏感 对消毒剂敏感 易产生耐药性
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变异性
肠道杆菌
志贺菌属
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志贺菌
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培养特性
兼性厌氧、营养要求不高 在肠道选择培养基上呈无色半透明S型菌 落菌落 SS平板－－无色菌落 Mac平板－－无色菌落 EMB平板－－无色菌落 宋内志贺菌多呈扁平、R型菌落，个别菌 株可迟分解乳糖
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生化反应
S-R变异 耐药性变异 毒力变异
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临床意义
致病物质： ◆菌毛 ◆内毒素 ◆志贺毒素：属外毒素，由A群志贺菌产生，具有肠
毒、细胞毒、神经毒作用 所致疾病：经肠道传染，引起细菌性痢疾，有3种 临床类型，即急性菌痢、慢性菌痢、中毒性菌痢 免疫性： ◆主要依赖局部SIgA， ◆病后免疫力不迟久
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志贺菌鉴别
与EIEC的鉴别
与类志贺菌的鉴别 与动力不明显、不产H2S的沙门菌的鉴
别
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志贺菌血清学鉴定
先用志贺菌多价诊断血清鉴定群，再用A、 B、C、D群单价血清鉴定血清型。 A群以1、2型为主，多有K抗原 C群型别多 D群只有1个血清型 B群型别多，抗原结构复杂，多无K抗原。
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与类志贺邻单胞菌的鉴别
鉴别试验
氧化酶
动力 半乳糖苷渗透酶
（ONPG）
类志贺菌 ＋ ＋ ＋
志贺菌 － － －
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与动力不明显、H2S阴性沙门菌的鉴别
鉴别试验
沙门菌诊断血 清玻片凝集试
验
沙门菌 ＋
志贺菌 －
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大肠埃希菌生化反应结果
KIA
MIU
IMViC
氧
斜底 气
检验方法
将待检标本接种肠道选择平板，35℃培养18～24 小时。
若标本含菌量少，可先增菌（GN增菌液）4～6小 时再分离培养。
挑取无色半透明菌落，进行初步生化反应鉴定。
符合志贺菌生化反应特征可进行血清学鉴定
血清学鉴定先用志贺氏多价诊断血清作玻片凝集 试验，若凝集再用A、B、C、D群诊断血清鉴定到 种、型。
血清学鉴定需注意K抗原的阻断作用，并应考虑是 否为EIEC。
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志贺菌鉴定
初步鉴定 ●挑取可疑菌落接种KIA、MIU培养基 ●若符合KIA：KA－－；MIU：－ ＋/－ －， 再作志贺菌多价诊断血清玻片凝集试验 最后鉴定：全面生化反应和单价血清玻片凝集 试验 若出现生化反应符合，血清学不凝集现象，应 考虑K抗原的阻断作用，可将菌液加热 100℃15～30min后，重复凝集试验，仍不凝集 可考虑EIEC，需进行鉴别。
动 吲尿
面 层 体 H2S 力 哚 酶
I
化 M Vi C 酶
A A ＋/- － ＋/- ＋ － ＋ ＋ － － －
K A － － ＋ ＋－ ＋ ＋ － － －
K A － － － ＋－ ＋ ＋ － － －
K A ＋ － ＋/- ＋ － ＋ ＋ － － －
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肠道杆菌
沙门菌属
沙门菌属
是寄生于人类和动物肠道中，生物学性 状相似的革兰阴性杆菌
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几种沙门菌的抗原组分
组（群） A组 B组
C组 D组
型
PA PB
S.typhimuriun PC
S.cholerae S.typhi
S.enteritidis
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生化反应
氧化酶试验（－） 分解葡萄糖、不分解乳糖 KIA：KA＋＋（伤寒沙门菌产酸不产气KA－ ＋） MIU：＋ － － IMViC：－＋ － ＋ 赖氨酸脱羧、鸟氨酸脱羧：＋
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抗原结构
O抗原：化学成分为脂多糖；耐热；与相应 抗体结合出现颗粒状凝集；沙门菌分群依据。 H抗原：化学成分为蛋白质；不耐热；与相 应抗体结合出现絮状凝集；沙门菌分型依据。 Vi抗原：位于菌体外层；抗原性强，相应抗 体可作为筛选带菌者指标；不耐热；能阻止 O抗原与相应抗体结合；伤寒沙门菌和丙型 副伤寒沙门菌有Vi抗原，有V－W变异。
氧化酶试验（－） 分解葡萄糖、不分解乳糖，（个别菌株 迟分解乳糖或不分解乳糖） KIA：KA－－ MIU：－ ＋/－ － IMViC：－/＋ ＋ － － 除A群外，均能发酵甘露醇
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抗原结构
只有O、K抗原，无H抗原 K抗原可阻断O抗原与相应抗体的凝集 根据O抗原分4群和44型
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