基因转染骨髓基质干细胞构建组织工程心脏瓣膜的实验研究
关于对人胚胎干细胞研究进程的理解与认识
关于对人胚胎干细胞研究进程的理解与认识摘要对于生命科学及其相关科学术语,近些年已很深入地进入我们的生活。
诸如关于生物制药、基因工程、蛋白质、酶、抗生素等知识呈现一种强烈的冲击。
生命科学的前沿与人类的健康存在密切关系,主要研究现在比较前沿的科学,即尚处于研究阶段的科学。
本文就自己所了解的人体胚胎干细胞研究进程的了解我与认识,做了较为全面的探究,给人耳目一新之感。
关键词人胚胎干细胞;研究进程;理解与认识客观地说,在现实生活中,我们存在很多的无奈与伤感,比如:眼睁睁地看着亲人、朋友无望地离去却没有任何办法,我们无法摆脱对抗生素的依赖,因此我们就要去寻找更加安全、更加人性化的治疗方法和关键技术的突破!这,就是生命科学前沿技术研究要带给我们的不竭动力和最大的福音。
因此,对于人胚胎干细胞研究进程,让人们充满好奇与兴趣。
由于不能面面俱到,本文主要针对人胚胎干细胞当前研究与发展,梳理和传达一下相关观点。
什么是胚胎干细胞定义?是指使受精卵分裂发育成囊胚内团细胞的细胞,它具有体外培养、无限增殖、自我更新和多向分化的特性。
一般认为,全能性干细胞应具有三个特征:来源于一个全能性细胞群体;具有正常的细胞核型;具永生性,在胚胎状态下能无限制的分裂。
胚胎干细胞极为神奇:它发于当发,止于当止。
本质上,它不过是精子进入一个卵子并结合而成的受精卵而已。
但这之后,就神奇地由一个细胞变成两个细胞,再由2个而4个,再由4个变成8个,在该长耳朵的地方分化成组成耳朵的所有细胞,在该长胳膊的地方分化成组成胳膊的所有细胞。
当一个完整的人形成后,组成他身体的绝大部分细胞就停止分化,不再具有分化能力。
无论在体外还是体内环境,胚胎干细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。
它能够治疗诸多疑难杂症。
现在我们听到最多的,就是关于白血病的治疗用到胚胎干细胞的案例。
一般而言,白血病患者必须要找到与之相适应的骨髓才能进行移植。
而现在的孩子大多为独生子女,而两个不相干的人骨髓相配的概率几乎为十万分之一,所以就产生了很大麻烦。
【国家自然科学基金】_组织构建与生物活性因子_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140731
2009年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
科研热词 银杏内酯b 转化生长因子β 血管舒张因子刺激的磷酸蛋白 血管支架 血管再狭窄 血小板 脂肪干细胞 组织工程 昆虫细胞sf9 昆虫杆状病毒 支架 心肌细胞 小鼠组纵因子 小分子干扰rna 反应器 功能阻断性单克隆抗体 内皮细胞 体内内皮化 一氧化氮 ⅰ型胶原 smad4 igf-1
2011年 科研热词 推荐指数 骨组织工程 1 进化分析 1 转录调控 1 角质细胞生长因子 1 血管生成 1 血管化 1 腺病毒载体 1 脂肪因子 1 脂联素 1 胶原 1 肿瘤转移 1 聚乳酸-羟基乙酸共聚物 1 缺氧 1 缓释支架 1 绿色荧光蛋白 1 组织蛋白酶l 1 组织工程化皮肤 1 组织工程 1 纳米生物材料 1 纳米微囊 1 纤维环 1 种子细胞 1 瞬时表达 1 生物活性玻璃 1 生物活性因子 1 生物因子 1 淋巴管新生 1 次级淋巴组织趋化因子(slc/ccl21) 1 核心启动子 1 构建 1 文献综述 1 支架 1 拮抗剂 1 小麦 1 大鼠 1 基因克隆 1 噬斑 1 反向pcr 1 功能复合 1 仿生构建 1 人组织因子途径抑制物-2 1 三角帆蚌 1 u937单核细胞 1 npcedrg基因 1 dreb启动子 1 cc类趋化因子受体ccr7 1 cca序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24
科研热词 组织工程 骨髓间充质干细胞 骨形态发生蛋白7 骨形态发生蛋白2 褪黑素 蛋白酶体成熟蛋白 腺病毒 胶原凝胶 组织工程皮肤 真皮替代物 生物材料 成骨诱导 成骨蛋白 成骨活性 成纤维细胞 干细胞 小鼠 启动子 共转染 ⅰ型胶原 suppressor of fused hedgehog信号通路 foxp3 cd4 t细胞
骨髓基质细胞中MGAT3催化的平分型N-糖链对血液细胞黏附和迁移的影响
骨髓基质细胞中MGAT3催化的平分型N-糖链对血液细胞黏附和迁移的影响张鑫;庞星辰;李想【摘要】骨髓基质细胞是造血微环境的重要组成之一,在促进造血干细胞生成血细胞的各个环节中起着十分重要的作用.研究了人骨髓基质细胞HS5中抑制平分型N-糖链的表达,并观察其对共培养体系中血液细胞黏附和迁移的影响.利用基因工程技术在HS5中沉默平分型N-糖链合成中的关键酶,即N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(MGAT3),用凝集素染色检测发现沉默MGAT3后HS5中平分型N-糖链的表达量降低.通过共培养发现,HS5中的平分型N-糖链降低后,血液细胞KG1a和PL-21对HS5的黏附能力降低,迁移能力也随之降低.由此表明,平分型N-糖链参与的骨髓造血微环境对调控血液细胞黏附和迁移方面有重要的生物学功能.【期刊名称】《生物学杂志》【年(卷),期】2018(035)005【总页数】5页(P28-32)【关键词】MGAT3;平分型N-糖链;基质细胞HS5;血液细胞,细胞黏附;细胞迁移【作者】张鑫;庞星辰;李想【作者单位】江南大学生物工程学院,无锡214122;江南大学生物工程学院,无锡214122;江南大学生物工程学院,无锡214122;西北大学生命科学院,西安710069【正文语种】中文【中图分类】R733.3骨髓造血微环境(hemopoietic bone marrow microenviorment, HBMM)是由骨髓中邻近造血干细胞的特殊细胞群组成,在干细胞调节、自我更新和分化中起重要作用[1]。
骨髓基质细胞是造血微环境的重要组成之一,在促进造血干细胞生成血细胞的各个环节中起着十分重要的作用[2]。
在研究骨髓基质细胞时,人骨髓基质细胞HS5、HS27a 是最常用的细胞株,HS5成纤维状,能分泌多种细胞因子如CSF(Colony stimulating factor)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、IL-8 和IL-11 等,而HS27a 呈现出表皮细胞状,分泌较低水平的生长因子[3]。
骨髓间充质干细胞研究与应用概况
骨髓间充质干细胞研究与应用概况于雷;高俊玲【摘要】骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal cells,BMSCs)是当下热点研究对象之一。
1867年德国病理学家Cohnheim教授[1]在研究创口愈合过程中发现骨髓中存在一种非造血系统的多潜能细胞,但研究因为条件原因未能深入。
后来有研究者[2]在20世纪60年代开展一系列开创性研究,发现从骨髓中分离得到长梭状、成纤维细胞样的细胞群,在塑料培养皿中呈集落样贴壁生长;1987年,又发现这种骨髓单核细胞可在一定的条件下分化为成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞。
培养增殖二十代后仍保有其多向分化的潜能。
于是把这种多能细胞称为间充质干细胞(mesenchyma stem cell,MSC)。
【期刊名称】《华北理工大学学报:医学版》【年(卷),期】2018(020)002【总页数】5页(P164-168)【关键词】骨髓间充质干细胞;肺纤维化;缺血性脑卒中【作者】于雷;高俊玲【作者单位】[1]华北理工大学基础医学院,河北唐山063000;[1]华北理工大学基础医学院,河北唐山063000;【正文语种】中文【中图分类】R329.2骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal cells,BMSCs)是当下热点研究对象之一。
1867年德国病理学家Cohnheim教授[1]在研究创口愈合过程中发现骨髓中存在一种非造血系统的多潜能细胞,但研究因为条件原因未能深入。
后来有研究者[2]在20世纪60年代开展一系列开创性研究,发现从骨髓中分离得到长梭状、成纤维细胞样的细胞群,在塑料培养皿中呈集落样贴壁生长;1987年,又发现这种骨髓单核细胞可在一定的条件下分化为成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞。
培养增殖二十代后仍保有其多向分化的潜能。
于是把这种多能细胞称为间充质干细胞(mesenchyma stem cell,MSC)。
胰岛素样生长因子-1在骨损伤中的作用和其基因治疗研究
fI褒岛装拌乍K圳f一1茁骨损伤中的作用投其基因冶疗研究摘要中文摘要一、胰岛素样生长因子一l(IGF.1)在骨损伤修复中的作用研究目的:探讨骨折合并中枢神经损伤后,在骨折愈合加速过程中IGF.1所起的作用。
方法:将30例住院患者和5例健康自愿者分为4组(单纯脑外伤、骨折合并脑外伤、单纯骨折各10例,正常组5例)。
于受伤后3、7、14天抽取外周静脉血,离一心后得血清,用ELISA法测定血清中IGF一1含量;用三种浓度(01%、1%及lo%,vv)的血清作用于人骨髓基质干细胞,MTT法测定骨髓基质干细胞的增殖情况。
结果:单纯脑外伤、骨折合并脑外伤组IGF一1含量相似于正常组,但均高于单纯骨折组,差异有显著统计学意义(P<0.01)。
4组血清对人骨髓基质干细胞增殖均有促进作用,并且这种作用呈浓度依赖性。
在血清浓度为10%时,各组血清的促骨髓基质干细胞增殖的作用呈现差异,脑外伤合并骨折组、脑外伤组的作用与正常组相似,但显著高于单纯骨折组。
结论:(1)与单纯骨折组相比,颅脑外伤后血清对骨髓基质干细胞增殖有促进作用。
(2)颅脑外伤后血清中IGF一1含量显著高于单纯骨折组,但与正常组相比并不增加。
因此,体液调节因素(IGF一1)是中枢神经损伤骨折愈合加速的可能原因。
关键词中枢神经损伤骨折愈合骨髓基质干细胞胰岛素样生长因子一1二、人胰岛素样生长因子。
1基因的克隆及在真核细胞的瞬时表达目的:构建人胰岛素样生长因子.1(IGF一1)的真核表达载体,并在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)内进行表达。
方法:用RT-PCR法从人肝细胞中克隆人I(茁一1的基因,将其连入真核表达载体pSecTag/FRT/V5一His,用NheI和BamHi双酶切及测序鉴定筛选阳性克隆;用脂质体法将阳性克隆转染CHO细胞:收集转染后的细胞上清,用Westernblot进行检测。
结果:琼脂糖电泳显示RT-PCR扩增出210bD的条带;PCR产物与载体连接后,经酶切和测序鉴定得到一个阳性克隆:Westernblot检测显示转染后细胞上清出现与预计值相符的约7.7kDa的特异性条佑}。
细胞生长因子诱导骨髓基质干细胞成骨的研究进展
244・综述・细胞生长因子诱导骨髓基质干细胞成骨的研究进展刘道华综述,夏德林审校(泸州医学院附属口腔医院口腔颌面外科,四川泸州646000)关键词:骨髓基质干细胞;骨形态发生蛋白;基因修饰;诱导成骨中图分类号:R365.681文献标识码:A文章编号:1671—8348(2010)02—0244—03骨髓基质干细胞(bonemesenehymalstemcells,BMSC)被认为是骨组织工程中最有应用前景的理想种子细胞…。
由于BMSCs具有分化多方向性的特点,而骨组织T程学要求其向单一方向分化,所以,BMSCs的定向诱导具有重要作用。
就其成骨方向来说,常用的具有诱导作用牛长因子有骨形态发生蛋白(BMP)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子一口(TGF—B)、胰岛素样生长因子(IGF)、m管内皮牛长冈子(VEGF)等。
它们不仅可单独作用,相互之间也存在着密切的兰系,可复合使用。
本文就细胞生长因子对BMSCs分化及增殖的诱导作用作一综述。
1骨形态发生蛋白(bonemorphogeneticprotein。
BMP)骨形态发生蛋白(bonemo叩hogeneticprotein,BMP)是一组疏水性的酸性糖蛋白,属于转换牛长因子超家族。
BMP是一组具有很强骨诱导活性的生长因子,可能足诱导骨髓基质1:细胞向成骨细胞系转化的基本信号因子,其中研究最多也是成骨活性最强的是BMP-2和BMP-7。
BMP-2可明显加速BM—SCs向成骨细胞转化,.日T促进成骨细胞Iii『体细胞向成骨细胞转化。
研究表明,BMP首先与细胞膜上的丝氨酸/苏氨酸激酶受.体相结合,形成I、Ⅱ型丝氨酸/苏氨酸激酶受体的j聚体,然后将信息转导入细胞内,经第2信使MAD(matheragainstdpp)的磷酸化,将信息导入细胞核内,从而激活或调整DNA的结合活性,使BMP活性相关的基因表达,产生相应的牛物效应。
对BMP的骨诱导活性人们看法比较一致,其在体内通过募集问充质细胞,并诱导其向成骨细胞或成软骨细胞方向分化,同时协同其他调节因子共同参与诱导骨形成;在体外不仅能够调节成骨细胞的转化,对骨祖细胞以及间充质细胞均具有强烈的骨诱导活性,而且可能使诱导性骨细胞向确定性骨细胞转化。
慢病毒介导骨形态发生蛋白2和血管内皮生长因子165双基因转染促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化
慢病毒介导骨形态发生蛋白2和血管内皮生长因子165双基因转染促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化周桢杰;李强;李诗鹏;陶旋;马跃刚【摘要】背景:骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)和血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor 165,VEGF-165)均为骨修复过程中必不可少的细胞因子,利用慢病毒转染干细胞研究双因子作用下细胞的生物学改变具有重要意义.目的:探讨慢病毒介导人BMP-2和人VEGF-165双基因转染(2次转染)骨髓间充质干细胞的可行性以及转染后细胞的诱导成骨性能.方法:将骨髓间充质干细胞分为4组:①未转染组;②空载组:通过2次相同感染复数的空载慢病毒转染细胞;③BMP-2组:转染了单个目的基因的细胞(Lv-BMP-2/GFP);④BMP-2/VEGF-165组:通过2次转染后携带双目的基因的细胞(Lv-BMP-2/GFP,Lv-VEGH-165/RFP).转染后不同时间点Western Blot检测目的蛋白表达,MTT法检测各组细胞增殖活性,转染后14 d检测各组细胞碱性磷酸酶活性.结果与结论:①空载组、BMP-2组、BMP-2/VEGF-165组在荧光显微镜下均可见相应的绿色及红色荧光蛋白表达;②转染后3 d,BMP-2组、BMP-2/VEGF-165组均有相应目的蛋白高表达;转染后7,14,21 d,目的蛋白检测无明显变化(P>0.05);③BMP-2/VEGF-165组增殖稍快于BMP-2组(P<0.05),BMP-2组明显快于未转染组、空载组(P<0.05);④BMP-2组、BMP-2/VEGF-165组碱性磷酸酶活力明显高于未转染组、空载组;⑤结果表明,慢病毒介导的hBMP-2和hVEGF-165双基因经2次转染成功转入兔骨髓间充质干细胞内,并长期稳定表达,该双因子的表达能通过刺激细胞碱性磷酸酶生成促使细胞更好的向成骨细胞分化.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2018(022)025【总页数】6页(P3950-3955)【关键词】骨髓间充质干细胞;骨形态发生蛋白2;血管内皮生长因子165;慢病毒;基因转染;细胞增殖;碱性磷酸酶;干细胞;国家自然科学基金【作者】周桢杰;李强;李诗鹏;陶旋;马跃刚【作者单位】桂林医学院附属医院,广西壮族自治区桂林市 541001;桂林医学院附属医院,广西壮族自治区桂林市 541001;桂林医学院附属医院,广西壮族自治区桂林市 541001;桂林医学院附属医院,广西壮族自治区桂林市 541001;桂林医学院附属医院,广西壮族自治区桂林市 541001【正文语种】中文【中图分类】R394.2文章快速阅读:文题释义:慢病毒载体:是以人类免疫缺陷Ⅰ型病毒为基础发展起来的基因治疗载体,其对分裂细胞和非分裂细胞均具有较强的感染能力。
福建省百校联考2024届高三下学期正月开学考试生物试卷(含答案)
福建省百校联考2024届高三下学期正月开学考试生物试卷学校:___________姓名:___________班级:___________考号:___________一、单选题1.马尔堡病毒是第一种被发现的线状病毒,其遗传物质为RNA,可编码7种病毒蛋白,包括糖蛋白4、RNA聚合酶等。
下列关于与尔堡病毒的核酸和蛋白质的分析,错误的是( )A.马尔堡病毒的KNA上储存着特定的遗传信息B.马尔堡病毒糖蛋白4的基本组成单位包括氨基酸C.马尔堡病毒细胞膜上某些蛋白质可能具有运输功能D.马尔堡病毒的RNA聚合酶可参与RNA的复制过程2.溶酶体起源于高尔基体,内含多种酸性水解酶。
过氧化物酶体的大小与溶酶体相当,其起源于内质网,内含丰富的氧化酶和过氧化氢酶,具有解毒的作用。
下列关于溶酶体和过氧化物酶体的分析,不合理的是( )A.二者含有的再均能降低相关化学反应所需要的活化能B.二者含有的酶在细胞质基质中及生物体外不具有催化活性C.利用差速离心法可能无法有效将溶酶体和过氧化物酶体分离D.推测吞噬细胞内前者数量多,肝脏细胞内后者数量多3.毛发的形成和生长依赖于毛囊干细胞的增殖和分化。
研究发现,衰老的色素细胞会产生大量的骨桥蛋白,该蛋白作为一种信号分子,作用于毛囊干细胞的CD44受体,进而激活毛囊干细胞,引起毛发强劲生长。
该研究成果对于治疗脱发等有重要意义。
下列叙述正确的是( )A.衰老的色素细胞可释放大量骨桥蛋白,物质运输效率普遍提高B.衰老色素细胞的形态、结构和功能发生改变,不利于毛发再生C.色素细胞的衰老受遗传机制决定的程序性调控,丧失进行选择性表达的基因D.色素细胞与毛囊干细胞通过骨桥蛋白实现胞间信息交流,使后者细胞周期缩短4.下图分别表示某动物(2n)精巢中正在分裂的甲细胞和乙细胞,用红色荧光和绿色荧光分别标记其中两条染色体的着丝粒,在荧光显微镜下观察着丝粒附时间的变化,发现其依次出现在细胞①~③(或①~④)的不同位置处。
骨髓基质干细胞向心肌细胞分化的研究进展
Marrow Stromal Stem
Cells into Cardiomyocytes and Its Clinical Applications
GUAN Chun—yan, GAO Hang
(Cardiology
Department,The First
Affiliated
Hospital
ofLiaoning Medical College,Jinzhou 中图分类号:Q21
物¨2t1”。5-Aza为一抗肿瘤药物,早在1985年就有人
cells,HSCs)和BMSCs,前者可分
化成所有类型的造血细胞旧J,后者则是一类非造血细 胞的多能干细胞,属成体干细胞,可贴壁生长,形态类 似成纤维细胞。近年发现,BMSCs不仅具有体外高度 扩增、多向分化潜能,还可被移植和抑制移植物抗宿主 病等特性,所以又被称为骨髓间质干细胞。
cells into native
myocardial fibers・anatomic
forfunctionalimprovements[J].JThorac
590.
Cardiovase
Surg,2002,124(3):584-
[15]Beltrami
tent
AP,Barheehi L,Torella D。et a1.Adult cardiac stem cells
增后的细胞能保持原有细胞正常的核型和端粒酶活 性。虽然BMSCs约有20%的细胞处于静止G0期,但 其足以维持增殖分化,满足移植需要。BMSCs不仅有 一定的自我更新能力,可分化为骨、软骨和脂肪等多种
类型的基质细胞071,在一定外界环境条件下还能实现 跨系统分化(transdifferentiation)。大量实验表明,BM—
多西环素诱导表达下IL23基因转染小鼠骨髓基质细胞促进造血
文章编号(Article ID):1009-2137(2003)04-0335-06・论著・多西环素诱导表达下IL23基因转染小鼠骨髓基质细胞促进造血蒋激扬,李爱玲,谢蜀生北京大学医学部免疫系,北京100083摘要 本研究探讨用多西环素调控IL23基因表达的小鼠骨髓基质细胞系对小鼠造血干细胞增殖分化的促进作用。
构建含小鼠IL23基因逆转录病毒载体系统,转染小鼠骨髓基质细胞系,获得QXMSC1Tet2on2IL23;体外加入多西环素诱导IL23基因表达并检测IL23表达活性;观察细胞培养条件上清液对造血祖细胞集落形成单位的作用及QXMSC1Tet2on2IL23与骨髓细胞共培养对造血干细胞增殖分化的影响。
结果表明:多西环素提高了QXMSC1Tet2 on2IL23细胞系IL23的表达,促进骨髓造血祖细胞克隆形成数;与骨髓细胞共培养可促进造血干细胞的增殖分化。
结论:应用多西环素诱导外源基因转染的骨髓基质细胞IL23的表达,可促进造血。
关键词 多西环素;IL23;骨髓基质细胞;QXMSC1;造血干细胞;基因转染中图分类号 R392.4;R33112文献标识码 AThe Enhancing E ffects of IL23G ene T ransfected Murine Bone Marrow Stromal Cells on H ematopoiesis under Control of DoxycyclineJ IAN G Ji2Yang,L I Ai2Ling,XIE Shu2ShengDepart ment of I m m unology,Peki ng U niversity Health Science Center,Beiji ng100083,Chi naAbstract To study enhancing effect of IL23gene transfected bone marrow stromal cell which can be induced b y doxycycline(Dox)to express IL23cytokine on the proliferation and differentiation of hematopoietic stem cell,retrovirus vector system contained mIL23cDNA was established and bone marrow stromal cell line was transfected,and obtained QXMSC1Tet2on2IL23,in which expression level of IL23can be modulated by Dox.The activities of IL23were measured under different Dox concentrations.The numbers of hemato poietic progenitors(CFU2GM,CFU2E,CFU2GEMM and L TC2IC)were measured and the ca pacity of QXMSC1Tet2on2IL23sustaining hematopoietic progenitor cell growth was evaluated.The results showed that IL23gene transfected stromal cell line QXMSC12Tet2on+IL23expressed high concentration of IL23in vit ro under control of Dox.The su pernatant of QXMSC12Tet2on+IL23was able to increase the number of CFU2GM,CFU2E and CFU2GEMM.The total numbers of nucleated cells and long2term cultured colonies increased in L TC2IC assay.It is concluded that in the culture of QXMSC12Tet2on+IL23cells,Dox actually enhancedIL23expression,and thus augmented the proliferation and differentiation of hematopoietic stem/progenitor cells invit ro. K ey w ords doxycycline;IL23;bone marrow stromal cell;QXMSC1;hemato poietic stem cell;gene transfectionJ Ex p Hem atol2003;11(4):335-340影响异基因骨髓移植后造血和免疫功能重建的原因较多,其中骨髓移植前的放、化疗对骨髓造血微环境的损伤是重要原因之一。
组织工程骨表面微观形貌和生物矿化的实验研究
组织工程骨表面微观形貌和生物矿化的实验研究宁寅宽;李强;蔡伟良;武成聪;陈佳滨;石正松【摘要】Objective Green fluorescent protein( GFP) labeling, scanning electron microscope and energy disper-sive spectrometer ( SEM/EDS) were applied to observe surface microstructure and biological mineralization of tissue engineering bone for the purpose of evaluating the decalcified bone matrix ( DBM ) scaffold materials of biological properties in tissue engineering bone. Methods The rabbit bone-marrow mesenchymal stem cells ( BMSCs) were marked by Ad-GFP. Real-time growth of the cells was observed by an inverted fluorescence microscope after the os-teoinductive culture on to DBM, and surface microstructure and biological mineralization of tissue engineering bone were observed by SEM/EDS. Results The cells on surface of DBM had a good adhesion, overlap growth, as ob-served by an inverted fluorescence microscope, and a higher level of transient expression of GFP was confirmed af-ter 14 days in vitro culture. SEM image showed that DBM had a porous structure, with pore diameter ranging from 300 to 600μm, and a porosity rate was around 90%. The tissue engineering bone showed that cells grew adherently on the surface of DBM, matrix secretion was strong, and the DBM was covered by rough biological mineralization. X-ray photoelectron spectroscopy showed that the surface of rough biological mineralization consisted of Calcium, Phosphorus sediment,and its Calcium and Phosphorus ratio ( Ca/P) was 1.46. Conclusion Tissue engineering bone constructed by DBM scaffoldmaterials in vitro has excellent biological properties, and combined application of GFP labeling, SEM and X-ray photoelectron spectroscopy is a feasible method for evaluating DBM scaffold material in tissue engineering bone.%目的:用绿色荧光蛋白( GFP)标记结合扫描电镜和X射线能谱分析( SEM/EDS)技术对组织工程骨的表面微观形貌和生物矿化进行观测,以评价脱钙骨( DBM )支架体外构建组织工程骨的生物性能。
SOX-9
类髓孩细胞的分化 . 中国组织I程磅究。2 0 1 5 .1 9 ( 1 9 ) : 2 9 5 3 - 2 9 5 8 .
d o i : l 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 2 0 9 5 - 4 3 4 4 . 2 0 1 5 . 1 9 . 0 0 1
主 题词 :
通 讯 作 者 :银 和 平 ,主任
医师 ,教授 , 硕 士 生导 师 ,
骨 髓 :阃质 于细咆 :转 染 ;S O X9转 录 函子 :生长 分化 因子 基 金资 助 : 内蒙吉 自然科 学基 金【 2 0 0 9 MS 1 ’ 1 1 1
内蒙 古 医科 大 学 第二 附属 医院微 创 脊 柱 外科 , 内蒙 古 自治 区呼 和浩 特 市
关键词 :
杜 志才 , 男,1 9 8 1年生 , 内蒙 古 自冶 区呼 和 浩特 市 人 ,汉族 ,南 方 医科 大 学 在 读 博 士 ,主 治 医师 , 主 要 从 事脊 柱 退行 性 疾 病 方 面的研 究 。
于 细跑 :骨髓 于细瞻:髓核缅跑 :S O X - 9  ̄G D F - 5 :转染 :骨髓 闻充质于细匏 :细瞻分化 :内蒙吉 自然科 学基金
中国组织工程研究
笫 7 9眷 第 7 9
2 0 1 5—0 5—0 7出版
W WW . C RT E R . o r g
C h i n e s e J o u ma l o f T i s s u e E n g me e i f n g R e s e a r c h Ma y 7 , 2 0 1 5 V o 1 . 1 9 , N o . 1 9
骨髓间充质干细胞移植治疗缺血性心脏病的研究进展
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收稿日期:2009.-06-06修回日期:2009—10-30
骨髓间充质干细胞移植治疗缺血性心脏病的研究进展
江苏省南京市六校联合体2023-2024学年高三10月联合调研生物试题及答案
D.图②③中的细胞有2个染色体组,12个四分体
5.某男子的一条14号和一条21号染色体相互连接形成一条异常染色体,如图甲。减数分裂时异常染色体的联会如图乙,配对的三条染色体中,任意配对的两条染色体分离时,另一条染色体随机移向细胞任一极。下列叙述正确的是( )
19.气孔开放与保卫细胞中积累K+密切相关。研究发现水稻叶片保卫细胞细胞质膜上OSAI蛋白受光诱导后活性提高,泵出H+,然后激活K+进入细胞,如图1所示,回答下列问题:
(1)水稻保卫细胞的内壁(靠气孔侧)厚而外壁薄,较薄的外壁易于伸长,向外扩展,当保卫细胞吸水膨胀时,气孔____。该情况下,④的含量短时间内将会____,进而可将更多的____中的能量转化为有机物中的化学能。
C.细胞自噬能降解细胞内的自身物质,维持细胞内环境的稳定
D.图中细胞自噬过程体现了细胞间的信息交流功能
4.编号①~⑤ 图像是显微镜下拍到的二倍体(2n=24)哺乳动物精巢中减数分裂不同时期的图像。下列叙述正确的是( )
A.在减数分裂的过程中,细胞出现的先后顺序是①→②→③→⑤→④
B.用弱碱性溶液甲紫能使染色体染成深色,便于观察染色体的形态和数目
(3)部分mRNA在核糖体上翻译出 多肽借助引导肽进入____进行初步加工,之后由囊泡包裹沿着____进入高尔基体再进行加工、分泌。
(4)与DNA疫苗相比,mRNA疫苗的安全性更有优势,这是因为mRNA疫苗不会进入____内,减少了整合到宿主细胞基因组中的风险。与灭活病毒疫苗相比,RNA疫苗的优点有____(至少答两点)。
A.DNA水平上的分子生物学证据是研究生物进化最直接、最重要的证据
B.对尼安德特人线粒体DNA进行测序的目的是测定基因在染色体上的排列顺序
SDF-1促进BMSCs迁移的研究进展
SDF-1促进BMSCs迁移的研究进展刘想忠;李章华;许海甲【摘要】骨髓中主要包括两种多能干细胞, 即造血干细胞 (hematopoietic stem cells, HSCs) 和骨髓间充质干细胞 (bone marrow derived mesenchymal stem cells, BMSCs).BMSCs具有多种分化潜能, 在一定条件下可向多种细胞方向分化, 并且具有免疫调节能力.由于取材方便, 不会违背伦理问题.因此近年来, 其在免疫调节及组织工程学方面的应用有着越来越重要的作用.基质细胞衍生因子-1 (stromal cell-derived factor 1, SDF-1) 属于趋化因子家族, 与其受体CXCR4 (C-X-C Chemokine Receptor 4) 相互作用后对BMSCs具有明显定向趋化作用, 虽然近年来有很多研究对其作用机制进行了探讨, 但具体机制仍不十分清楚.本文对近年来SDF-1及其受体对BMSCs的趋化作用机制进行总结, 旨在为后续进一步研究提供参考.%Bone marrow stem cells mainly include hematopoietic stem cells (HSCs) and bone marrow derived mesenchymal stem cells (BMSCs). BMSCs not only have multiplex potential of differentiation, but also have immunomodulatory properties. They can differentiate into various cells. Recently, BMSCs have been increasingly used in the field of immunomodulatory and tissue engineering because of easily available and no ethnic violation. Stromal cell-derived factor 1 (SDF-1) is a member of chemokine family. It has obvious migration effect on BMSCs after binding to its receptor CXCR4 (C-X-C Chemokine Receptor 4). Although there are many studies about the migration mechanism of BMSCs, the detail has not been explanted clearly. This paper summarizes the mechanism of themigration of BMSCs by SDF-1 and its receptors in recent years. We hope that this could provide a reference for further research.【期刊名称】《中国骨质疏松杂志》【年(卷),期】2019(025)003【总页数】8页(P408-415)【关键词】骨髓间充质干细胞;基质细胞衍生因子;迁移【作者】刘想忠;李章华;许海甲【作者单位】武汉大学附属同仁医院(武汉市第三医院), 湖北武汉 430000;武汉大学附属同仁医院(武汉市第三医院), 湖北武汉 430000;武汉大学附属同仁医院(武汉市第三医院), 湖北武汉 430000【正文语种】中文【中图分类】R329.2骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)是近年来发现的多能干细胞,存在于骨髓之中,含量在0.01%以下,属于成体干细胞的一种,具有多种分化能力及自我更新能力,在不同的诱导环境下可分化成种细胞,如成骨细胞,软骨细胞,心肌细胞及脂肪细胞等。
促进心肌组织原位再生修复的机制及新策略研究
促进心肌组织原位再生修复的机制及新策略研究1. 引言1.1 概述心肌组织的损伤和退化是导致心血管疾病的主要原因之一,也是严重威胁人类健康的问题。
虽然心脏具有有限的再生能力,但其与其他器官相比较为有限,无法有效修复受损的心肌组织。
因此,寻找促进心肌组织原位再生修复的机制和新策略成为了目前医学研究领域的一个重要课题。
1.2 文章结构本文将分为五个主要部分进行阐述。
首先,在引言部分我们将对文章进行概述,并介绍整篇文章的结构安排。
其次,在第二部分我们将详细探讨目前关于心肌组织再生修复机制方面的研究成果,包括心肌细胞增殖能力、内源性再生潜能以及炎症介导的心肌修复机制等内容。
第三部分将聚焦于促进心肌组织原位再生的策略研究,包括细胞移植策略、基因治疗策略以及生物材料应用策略。
第四部分将详细介绍实验结果与讨论,包括心肌细胞增殖、内源性再生潜能、炎症介导的心肌修复以及不同策略的实验结果与讨论。
最后,在结论部分,我们将对整个研究进行总结,并探讨其研究意义和未来发展方向。
1.3 目的本文的目的是通过深入探讨促进心肌组织原位再生修复的机制和新策略,为解决心脏疾病治疗中存在的问题提供理论依据和治疗思路。
希望通过对相关领域的最新研究成果进行综合整理与分析,全面了解心肌组织再生修复机制,并为新策略的开发提供参考。
通过这一工作,旨在推动心血管医学领域的进步,为改善患者生活质量做出贡献。
2. 心肌组织再生修复机制研究2.1 心肌细胞增殖能力研究:心肌细胞的增殖能力一度被认为非常有限,而心肌损伤后的修复则主要通过形成瘢痕组织来实现。
然而,近年来的研究表明,成体心脏中仍存在具有增殖潜能的心肌细胞。
这些心肌细胞可以在特定条件下重进入生命周期,并开始进行有限的增殖。
因此,理解和提高成体心脏中心肌细胞增殖能力是一项重要的研究方向。
目前已经发现多个信号通路和分子机制参与了心肌细胞增殖过程。
例如,在哺乳动物中,Wnt信号通路、Hippo信号通路、Notch信号通路等都被证实对于调控心肌细胞的增殖非常重要。
细胞转染实验报告
一、实验目的本实验旨在通过细胞转染技术将外源基因导入哺乳动物细胞中,研究外源基因在细胞中的表达情况,为进一步研究基因功能奠定基础。
二、实验原理细胞转染是指将外源DNA、RNA或蛋白质等生物大分子导入细胞内,使其在细胞内稳定存在并表达的过程。
常用的细胞转染方法有脂质体介导转染、电穿孔转染、病毒载体转染等。
本实验采用脂质体介导转染方法,利用脂质体将外源DNA包裹并导入细胞内。
三、实验材料1. 细胞:HEK293细胞2. 外源DNA:目的基因片段3. 脂质体:转染试剂4. 细胞培养试剂:DMEM高糖培养基、胎牛血清、胰蛋白酶、双抗5. 仪器:细胞培养箱、倒置显微镜、离心机、PCR仪、凝胶成像系统四、实验步骤1. 细胞培养:将HEK293细胞接种于6孔板,培养于DMEM高糖培养基中,置于37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养至细胞密度达到80%。
2. DNA提取:采用DNA提取试剂盒提取目的基因片段,进行PCR扩增,得到目的基因。
3. 脂质体转染:按照脂质体说明书进行操作,将目的基因片段与脂质体混合,室温孵育20分钟。
4. 转染:将脂质体-DNA混合物加入培养好的细胞中,轻柔摇匀,使脂质体均匀分布。
37℃、5%CO2培养箱中培养6小时。
5. 洗涤:用无血清培养基洗涤细胞2次,去除未转染的脂质体。
6. 继续培养:更换新鲜培养基,继续培养细胞24小时。
7. 实验验证:7.1 RT-PCR检测:提取细胞总RNA,进行RT-PCR扩增,检测目的基因在细胞中的表达情况。
7.2 Western Blot检测:提取细胞总蛋白,进行SDS-PAGE电泳,转膜,加入一抗和二抗,检测目的蛋白在细胞中的表达情况。
五、实验结果1. RT-PCR检测结果:目的基因在细胞中成功表达,与阴性对照组相比,实验组目的基因表达量明显升高。
2. Western Blot检测结果:目的蛋白在细胞中成功表达,与阴性对照组相比,实验组目的蛋白表达量明显升高。
转基因技术在组织工程体外软骨组织培养中的应用
转基因技术在组织工程体外软骨组织培养中的应用王立春;韩雪峰;张宏颖;石义钢;韩剑锋;夏景君;林欣【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2004(008)020【摘要】目的:研究骨形态发生蛋白-2重组腺病毒(Ad-BMP-2)转基因对骨髓基质细胞(mesenchymal stem cell,MSC)与纤维蛋白凝胶构成的复合物体外培养的影响.方法:Ad-BMP-2转染原代培养的MSC,通过细胞生长曲线、免疫组化、甲苯胺蓝染色透射电镜观察转基因MSC的BMP-2和CoHagenⅡ及蛋白多糖表达.结果:转基因MSC经纤维蛋白体外三维培养后免疫组化和甲苯胺蓝染色呈阳性;电镜显示细胞生长良好,有基质合成.结论:Ad-BMP-2能够通过促进MSC分泌BMP-2诱导CollagenⅡ和蛋白多糖的表达,在纤维蛋白三维支架中形成软骨基质.【总页数】3页(P3966-3968)【作者】王立春;韩雪峰;张宏颖;石义钢;韩剑锋;夏景君;林欣【作者单位】哈尔滨医科大学附属第二临床医学院骨外科,黑龙江省,哈尔滨市,150086;哈尔滨医科大学附属第二临床医学院骨外科,黑龙江省,哈尔滨市,150086;哈尔滨市穆斯林医院内科,黑龙江省,哈尔滨市,150042;哈尔滨医科大学附属第二临床医学院骨外科,黑龙江省,哈尔滨市,150086;哈尔滨医科大学附属第二临床医学院骨外科,黑龙江省,哈尔滨市,150086;哈尔滨医科大学附属第二临床医学院骨外科,黑龙江省,哈尔滨市,150086;哈尔滨医科大学附属第二临床医学院骨外科,黑龙江省,哈尔滨市,150086【正文语种】中文【中图分类】R318【相关文献】1.DegraPol支架上培养人气管软骨细胞体外合成组织工程软骨 [J], 杨林;纪玲;王正;Walter Weder2.力学因素在体外构建组织工程化软骨中的应用 [J], 田甜;章庆国3.聚乳酸/聚乙醇酸与脱细胞软骨粒支架及聚乳酸/聚乙醇酸-脱细胞软骨粒支架体外构建组织工程软骨的比较 [J], 张军武;张永红4.不同浓度重组人BMP-7促进骨髓间充质干细胞复合组织工程支架材料TCP-COL体外构建组织工程软骨的研究 [J], 孟繁钢;何爱珊;张志奇;吴刚;杨子波;林子洪;龙毅;廖威明5.软骨脱细胞基质仿生支架体外构建组织工程软骨 [J], 贾立涛;姚琳;刘延群;张沛灵;刘豫;曹谊林;周广东因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
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, , c o u n t e d o n t h e e i h t h d a f r o m t h e b e i n n i n o f c e l l s r o w i n MT T m e a s u r e d w i t h e l e c t r o n m i c r o s c o . R e s u l t s n t h e c o n t r o l r o u m a r r o w I g y g g g g p y g p s t e m c e l l s o n t h e s u r f a c e a l m o s t c o m l e t e l w e r e o f f a n d a e a r e d b a r e v a l v e s t e n t s u n d e r e l e c t r o n m i c r o s c o e a f t e r s c o u r i n b m e s e n c h m a l p y p p p g y y ; , , f l u i d w i t h h i h f l o w b o n e w h i l e i n r e c o a t e d F n C B D r o u e v e n a f t e r h i h f l o w f l u i d e r o s i o n t h e r e w e r e s a r s e c e l l s r e m a i n e d a n d v a l v e u l s a t i n - g p p g p p g 6 4g ; s t e n t s a m o n c e l l s c e l l s r e t a i n e d o n v a l v e s u r f a c e i n A d . F n C B D w e r e s i n i f i c a n t l m o r e t h a n t h a t i n t h e c o a t F n C B D c e l l s r o u r e r o u . S o m e - g g y p p p 6 4g 6 4g , r o w n s t r a t i f i e d c e l l o l a r i t c h a n e d a n d t r e n d e d t o t r a n s f o r m a t i o n o f i n v i v o c e l l . C o n c l u s i o n B o t h r e c o a t e d F n C B D n d t r a n s f e c t i o n - g p y g p 6 4a , A d . F n C B D o u l d s i n i f i c a n t l e n h a n c e t h e a d h e s i o n o f BM S C s o n a c e l l u l a r a o r t i c v a l v e l e a f l e t s a n d t h e w h o l e l e a f l e t s w h i l e t r a n s f e c t i o n o r c i n e g y p 6 4c A d . F n C B D s b e t t e r . 6 4i :G ; ; ; K e W o r d s e n e t r a n s f e c t i o n B o n e m a r r o w s t r o m a l c e l l s T i s s u e e n i n e e r i n H e a r t v a l v e g g y
心脏瓣膜疾病 是 危 及 人 类 健 康 的 一 种 严 重 的 疾 人工心 病 。 目前最有效的治疗方法是瓣膜替换手术 , 脏瓣膜有机械瓣 和 生 物 瓣 两 大 类 。 尽 管 其 能 有 效 地 改善血流动力学 , 提高病人的生活质量 , 延长寿命 , 但 均未达到理想程度 , 仍然存在各种各样的缺陷 。 由于 机械瓣需要终生抗 凝 , 有 出 血 和 栓 塞 等 并 发 风 险; 生 钙 化 等 问 题, 无 法 长 期 使 用。 组 织 物瓣则存在衰坏 、 工程心脏瓣膜 ( 是利用组织工程技术 , 将活细 T EHV) 胞种植于瓣膜支架上 , 制造出一种与受者组织相容性
,F 中国冶金工业医学杂志 2 0 1 5 年第 3 2 卷第 1 期 C h i n M e d J M e t a l l I n d 3 2N o . 1 y
·1· 论 著
基因转染骨髓基质干细胞构建组织工程心脏瓣膜的实验研究
( ) 6 0 5 . 9 7 4 文献标志码 :A 文章编号 :1 0 0 5-5 4 9 5 2 0 1 5 0 1-0 0 0 1-0 4 中图分类号 :R
E x e r i m e n t a l s t u d o f e n e t r a n s f e c t i o n b o n e m a r r o w p y g s t r o m a l c e l l s f o r t i s s u e e n i n e e r i n h e a r t v a l v e g g
5 个 。 在 开始 种 植 细胞的 第 8 天 取瓣叶进 行细胞 计数 , 电镜扫描 MT 4×1 0 T 检测。结果 对照组在经过脉动冲刷实验高流量液
体 的 冲刷以后 , 其 表面 的 骨髓 间 质干 细胞 几近完 全 脱 落 , 电镜扫描 下为 裸露 的 瓣膜 支架 ; 而预涂 F n C B D 6 4 组 虽然经 过 高 流 量 的 流 体 冲刷 , 有 稀疏 的细胞 残留 , 细胞 间 有 瓣膜 支架 的 结 构 ; 转染 A 某 d . F n C B D n C B D 6 4组瓣膜表面存留的细胞比预涂 F 6 4组 明 显 多, 细胞 可见排列极 性 改 变 , 有 向 活 体 内 细 胞 转 化 的 趋 势。结 论 预 涂 F 些部位 细胞 呈复层 生 长 , n C B D d . F n C B D 6 4和转染 A 6 4均能 明 显 增 强 BM 而转染 A S C s在去 细胞 猪主动脉瓣叶及 整 体瓣膜上 的 黏附 , d . F n C B D 6 4 的效 果更好 。 骨髓基质干 细胞 ; 组织 工 程 ; 心脏瓣膜 关键词 : 基因 转染 ;
5 , i n a d v a n c e a n d n o t e m b e d d e d a s a c o n t r o l s u s e n s i o n w a s i n o c u l a t e d n u m b e r o f c e l l s e a c h l e a f l e t w a s 4× l 0 w h i c h w e r e r e r o u . C e l l e n t r a e d - p p g p p p
:O b s t r a c t b e c t i v e T o e x l o r e a n e f f e c t i v e w a t o e n h a n c e c e l l a d h e s i o n t o a c c e l e r a t e i n v i t r o t i s s u e e n i n e e r i n h e a r t v a l v e A p y g g j c o n s t r u c t e d . r o k a r o t i c M e t h o d s o c o n s t r u c t r e c o m b i n a n t a d e n o v i r u s v e c t o r A d . F n C B D 6 4b f i b r o n e c t i n c e l l b i n d i n d o m a i n( F n C B D T p y y g 6 4) , , ) , e x r e s s i o n e x t r a c t i o n s h e e m a r r o w s t r o m a l c e l l s( BM S C s i n v i t r o c u l t u r e a n d b i o l o i c a l c h a r a c t e r i s t i c s a n a l s i s a c e l l u l a r r e a r a t i o n o r c i n e p p g y p p p , , l a t e s( v a l v e a c e l l u l a r l e a f l e t s w a f e r u n d e r s t e r i l e c o n d i t i o n s i n t o 9 6 e l l v e n t r i c u l a r s i d e u F n, F n C T D b o v i n e s e r u m a l b u m i n B S A a o r t i c -w p p) 6 4,
XU R u i WANG Z h i i a n, i a n - - j q g o T h o r a c i c S u r e r J i u u a n D i s t r i c t H o s i t a l o B a o t o u, B a o t o u I n n e r M o n o l i a 0 1 4 0 6 0, C h i n a D e a r t m e n t f g y, y p f g p
徐瑞剑 , 王志强 包头市 九 原 区 医 院胸外科 , 内蒙古 包头 0 1 4 0 6 0
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加快组织 工 程 心脏瓣膜 的 体 外 构 建 。 方法 通过纤维 连 接 蛋 白 羧 摘要 : 目的 探索一种行之 有 效的方法增 强 细胞 黏附 力 , 的 原 核表达 、 提取 和 纯化 , 构建 F 并进行绵羊骨髓基质干 基端 细胞 结合域 ( F n C B D n C B D d . F n C B D 6 4) 6 4基 因 重 组 腺 病 毒 载 体 A 6 4, ) 细胞 ( 的 体 外 分离培养及生物 学 特性分析 , 制备去 细胞 猪主动脉 瓣 , 在无菌条件下将脱细胞瓣叶圆片置入9 心 BM S C s 6孔板中( , 、 室面向上 ) 分别给予 F 预先 包 埋 , 未预 包 埋作为对照组 。 细胞 悬液 接 种 , 每只 瓣叶 种 植 细胞 数 为 n F n C T D B S A) 6 4牛 血 清 白 蛋 白(