C-反应蛋白检测试剂盒(全量程)试制工作总结

C-反应蛋白检测试剂盒（全量程）试制工作总结

一、概述

C反应蛋白（C-reactive protein）是一种能与肺炎链球菌C多糖体反应形成复合物的急性时相反应蛋白，半衰期19小时；血清CRP由肝脏合成，白细胞介素1b、6以及肿瘤坏死因子是其合成的最重要的调节因子；CRP的分子量为105 500，由含有五个相同的未糖基化的多肽亚单位组成，每个亚单位含有187个氨基酸，这些亚单位间通过非共价键连结成环状的五聚体，并有一个链间二硫键。

1930年，Tillett和Francis首次在急性大叶性肺炎患者的血清中发现一种能在Ca2+存在时与肺炎球菌细胞壁中的C－多糖发生特异性沉淀反应的物质。1941年，Avery等测知它是一种蛋白质，故称为C反应蛋白(CRP)。1944年，Jones将其作为临床风湿热诊断标准的次要指标之一。后来，人们在非感染性疾病和感染性疾病患者的急性期血清中都测到了CRP，于是人们认为，CRP是组织损伤的一种非特异性反应。进一步研究发现：病毒或细菌感染、梗塞、免疫复合物沉积等因素都可导致组织损伤。在组织损伤的急性期，肝脏合成的一些血浆蛋白显著增加，这些蛋白质通称为急性时相蛋白，其中CRP是急性时相蛋白中变化最显著的一种。CRP在正常人血清中其含量极微；在组织受到损伤、炎症、感染或肿瘤破坏时CRP可以在数小时内急剧上升，可增高数倍或数百倍，2-3天达峰值，待病情改善时逐渐下降，恢复正常。CRP被广泛应用于临床疾病的早期诊断及鉴别诊断，其升高可见于：1、组织损伤、感染、肿瘤、心肌梗塞及一系列急慢性炎症性疾病，如风湿性关节炎、全身性血管炎、多肌痛风湿病；2、术后感染及并发症的指标：手术后病人CRP升高，术后7—10天CRP水平应下降，如CRP不降低或再次升高，提示可能并发感染或血栓栓塞；3、可作为细菌性感染和病毒性感染的鉴别诊断：大多数细菌性感染会引起患者血清CRP升高，而病毒性感染则多数不升高。

超敏C反应蛋白（High sensitivity C-reactive protein）与CRP并不是两种蛋白，只是从灵敏度上加以区分, 超敏C反应蛋白(Hs-CRP)最低检测限达0.1 mg/l; 原先认为CRP是正常的血清却发现同未来发生心血管疾病密切相关,大量研究资料表明,动脉粥样化的血栓去除了是脂肪堆积的过程外也是一个慢性炎症过程,；Hs-CRP轻度升高与冠状动脉事件、中风及周围血管病相关，是一项独立的危险因素；HS-CRP已被证实是由慢性炎症引发心血管疾病的独立危险因素，检测其浓度对心血管疾病的干预及预后起重要作用而被临床重视。流行病学调查也显示,hs-CRP 水平升高者发生急性脑卒中的几率是正常健康人的2 倍, 发生心肌梗死的几率是正常者的3 倍。2003 年欧洲高血压防治指南( ESH/ESC) 正式推荐, 高

血压患者需检测hs-CRP 水平。

目前国内用于全自动生化仪的免疫透射比浊法试剂CRP出现了两种（普通CRP与超敏CRP），普通CRP有较高的线性但灵敏度不好，超敏CRP有较高的灵敏度但线性较低，这样就出现了一种试剂两种名称，用途也有所区别；近几年来，随着检验技术的发展，开始出现了一种全量程CRP，这种CRP即能满足较高的灵敏度，又能满足较高的线性，如日本一化，申索佑福等，我公司通过与中科院上海生物研究所合作，近期已完成全量程CRP的试制，经公司自检与医院试用，结果表明与免疫散射比浊法一致性好；公司已计划于近期完成临床与注册，正式推向市场；

二、国内外研究情况

2.1临床研究

CRP作为一种急性时相反应蛋白，被广泛应用于临床。

2.1.1用于细菌和病毒感染的鉴别诊断

当细菌感染引发炎症，在炎症进程开始4～7小时就可开始升高，且升高的幅度与细菌感染的严重程度相一致，病毒感染时CRP不增高，以此鉴别感染的性质，指导临床治疗，减少不必要的抗生素治疗，有效防止抗生素的滥用。这些感染临床上常见于肺炎、支气管炎、咽喉炎、细菌性脑膜炎、伤寒、化脓性关节炎、尿路感染、骨盆炎、阑尾炎等等。在鉴别细菌或病毒感染方面，比白细胞计数及分类计数更准确，特别是老年人，免疫系统反应顺应性下降，可能有感染发生但临床上并无发热、白细胞升高等情况，此时检测CRP有助于检出细菌感染。

2.1.2肿瘤监测

CRP的测定用于肿瘤的治疗和预后：CRP术前上升,术后下降，不受放疗、化疗和皮质激素治疗的影响，有助于临床评估肿瘤的进程。

2.1.3监控病情变化及术后感染，并用于抗生素疗效观察

CRP在血中升高的幅度与感染的程度正相关。有研究表明，术后6小时左右，CRP开始升高，如无并发症应在术后三天下降直至正常，如术后出现感染，则CRP长时间不下降；术前CRP升高者，术后感染率也远高于术前CRP不高者。对于烧伤病人，可检测CRP以警示是否发生败血症，以便及时应对治疗。对疑有败血症的新生儿，在24～48小时内作CRP的动态监测，可作为是否停止抗生素治疗的可靠依据，而血培养的时间则需更长，培养结果出来之前无法排除败血症。对细菌感染作抗生素治疗时，动态检测CRP是必要的，它比临床体征更早作出并发症警报和治疗效果的判定，在粒细胞缺乏症或机体免疫状态抑制时更有临床意义。

2.1.4用于评估急性胰腺炎的严重程度

入院时CRP>110mg/l，可能是出血性胰腺炎（临床灵敏度８８％，特异性９４％）；当CRP>250mg/l时,可提示为广泛性坏死性胰腺炎。

2.1.5风湿病

类风湿性关节炎患者CRP与疾病相关性较大，比临床症状出现要早4-6周。

2.1.6肺部感染

肺炎在年老人群中较难诊断，通常不大有发热。在许多情况下ＣＲＰ>100mg/l，提示细菌感染，如肺炎或化脓性支气管炎。典型的病毒性肺炎不会超过50mg/l。

2.1.7儿科感染性疾病：

在儿童急性淋巴细胞白血病常发性细菌败血症，CRP超过100mg/ L,则视为有细菌感染;儿童CRP细菌性脑膜炎时平均195mg/L，而病毒性脑膜炎则低得多。

2.1.8肾脏移植排异

移值后8天CRP下降至正常，如发生排斥反应则血清肌酐、尿氮、CRP 皆升高。CRP升高在排斥反应发生之前4天出现。但是，感染也可发生CRP升高，要注意两者鉴别。

2.1.9 心血管疾病

随着检验技术的发展,原先认为CRP是正常的血清却发现同未来发生心血管疾病密切相关,大量研究资料表明,动脉粥样化的血栓去除了是脂肪堆积的过程外也是一个慢性炎症过程,；CRP轻度升高与冠状动脉事件、中风及周围血管病相关，是一项独立的危险因素；

①未来发生心血管疾病发病率和死亡率的预测指标

Hs-CRP是健康人未来发生心血管事件一个有价值的预测指标，许多研究证实Hs-CRP能预测首次心肌梗死和疾病的发作，内科健康研究（PHS）显示，Hs-CRP位于最高四分位数的病人未来发生卒中危险增加2倍，未来发生心肌梗死危险增加3倍，未来发生周围血管疾病的危险增加4倍。这种预测作用长期稳定存在于吸烟和非吸烟者中，且独立于其他危险因素。Hs-CRP是已知CHD病人未来心血管病发病和死亡的预测指标，欧洲ECTA研究组的资料显示，稳定性心绞痛（SAP）和不稳定性心绞痛（UAP）病人Hs-CRP浓度每升高一个标准差，非致命性心肌梗死或心脏性猝死的相对危险增加45%。

②急性冠脉综合症（ACS）的预后指标

Hs-CRP测定对ACS的预后价值，首先是在急性局部缺血和不稳定心绞痛的病人中提出的，

重度不稳定型心绞痛（UAP）病人入院时若Hs-CRP≥3mg/l 比Hs-CRP﹤3mg/l 者心绞痛复发、冠状动脉血管置换术、心肌梗死和心血管疾病致