普鲁士蓝染色液(细胞专用) 操作步骤及注意事项

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细胞染色操作步骤及注意事项

细胞染色操作步骤及注意事项概述细胞染色是一种常用的实验手段，它可以通过标记细胞的某些特定结构或分子，帮助研究者观察和研究细胞的结构和功能。

本文档将介绍细胞染色的常用操作步骤及注意事项。

操作步骤步骤一：细胞固定1. 取出培养皿中的细胞载玻片。

2. 用PBS缓冲溶液洗涤细胞载玻片，去除培养基中的残留物质。

3. 使用细胞固定液（如4%的甲醛溶液）固定细胞，通常固定时间为15-30分钟。

4. 用PBS缓冲溶液洗涤细胞载玻片，去除固定液中残留的甲醛。

步骤二：细胞渗透1. 取出细胞载玻片中的细胞。

2. 用PBS缓冲溶液洗涤细胞载玻片，去除固定剂中的残留物质。

3. 在细胞载玻片上滴加渗透液（如0.1% Triton X-100），孵育10-15分钟。

4. 用PBS缓冲溶液洗涤细胞载玻片，去除渗透液中的残留物质。

步骤三：染色1. 取出细胞载玻片中的细胞。

2. 在细胞载玻片上滴加适当浓度的染色液（如DAPI染料），孵育时间根据实验需要而定（通常为5-15分钟）。

3. 用PBS缓冲溶液洗涤细胞载玻片，去除染色液中的残留物质。

步骤四：显微观察1. 将细胞载玻片翻转到显微镜载玻片上。

2. 加入一滴适当的封片液（如甘油/丙酮溶液）。

3. 用显微镜观察和拍摄细胞。

注意事项1. 操作时要注意佩戴实验手套和眼部防护设备，避免接触有毒或有害物质。

2. 细胞固定液需要根据实验需要和细胞类型进行选择，避免使用具有细胞毒性的固定液。

3. 染色液要根据需要选择，确保染色剂与研究对象的亲和力。

4. 操作过程中要注意细胞的温度和湿润度，避免细胞损伤。

5. 洗涤的PBS缓冲液要充分冲洗，避免残留物质对结果的影响。

6. 操作前要确保显微镜和镜头清洁，以获得清晰的观察结果。

7. 操作结束后要及时清理实验台面和工具，避免交叉污染。

结论细胞染色是一种重要的细胞学研究手段，通过本文档介绍的操作步骤及注意事项，可以帮助研究者正确地进行细胞染色实验。

合理的实验操作和注意细节能够提高实验结果的准确性和可靠性。

普鲁士蓝染色步骤

普鲁士蓝染色步骤
普鲁士蓝染色的步骤包括：
1. 切片：将待染色的组织切成3~5微米的薄片。

2. 烤片：将切片放入烤片机中，在70℃下烤制30分钟。

3. 捞片：将烤好的切片放入水浴锅中，温度设置为49℃，浸泡20秒后取出。

4. 脱蜡、复水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ中脱蜡，然后放入无水乙醇、75%乙醇、蒸馏水中复水。

5. 染色：将切片放入普鲁士蓝染色工作液中，完全覆盖组织，室温染色1小时。

染色后，用自来水冲洗切片，去除多余的染料。

6. 复染：将切片放入普鲁士蓝染液C中，室温染色3~5分钟。

染色后，用自来水冲洗至切片流水无色。

7. 脱水封片：将切片经3次无水乙醇脱水，每次5分钟，再经二甲苯透明5分钟，然后以中性树胶封片。

以上是普鲁士蓝染色的基本步骤，每一步都需要仔细操作以保证染色效果。

普鲁士蓝染色试剂盒的染色原理

普鲁士蓝染色试剂盒的染色原理
首先，普鲁士蓝是一种阳离子染料，可以与阴离子物质发生结合。

它的颜色为深蓝色，对于电镜染色或组织切片的染色非常适用。

其次，普鲁士蓝染色试剂盒的染色原理与铁离子的还原反应有关。

普鲁士蓝染色试剂盒中包含了还原剂和氧化剂。

还原剂将铁离子还原为两价的铁离子，而氧化剂将两价的铁离子氧化为三价的铁离子。

铁离子在试剂盒中的相互转变过程中，会和普鲁士蓝结合形成普鲁士蓝染料。

这种染料具有很强的颜色稳定性和耐光性。

在实际的染色过程中，首先需要准备待染物样本，通常是细胞切片或组织切片。

然后将待染物样本浸入染色试剂盒中，使其充分浸透。

接着，将样本置于特定条件下进行染色反应。

染色反应的条件通常包括温度、反应时间以及试剂盒中存在的其他化学物质的浓度等。

染色反应进行的时间越长，染色的深度越深。

染色反应进行的温度越高，染色的速度越快。

普鲁士蓝染色试剂盒中的其他化学物质对染色反应的影响也非常重要。

例如，存在过量的铁离子会抑制染色反应的进行，而存在过量的氧化剂会使染色淡化。

最后，染色完成后，需要通过温和洗涤、脱水和固定来清洁和稳定染色结果。

这样可以去除多余的染色物质，使染色结果更加清晰和稳定。

总而言之，普鲁士蓝染色试剂盒的染色原理主要涉及阳离子染料的结合特性，以及铁离子的还原和氧化反应。

这种染色方法适用于电镜染色和组织切片的染色研究中，具有简单、快速、稳定等优点。

铁染色标准操作程序

铁染色标准操作程序1.检验目的通过对骨髓涂片铁染色测定，可用于的缺铁性贫血与其他原因引起的贫血的鉴别诊断。

2.检测原理骨髓内的铁蛋白及含铁血黄素（细胞外铁）和幼红细胞内的铁粒（细胞内铁）在盐酸环境下与亚铁氰化钾作用，生成亚铁氰化铁，即普鲁士蓝反应，定位于含铁部位。

3.标本新鲜的骨髓涂片。

4.试剂4.1固定剂4.2亚铁氰化钾溶液(A液)4.3盐酸溶液(B液)4.4沙黄溶液(C液)5.环境与安全5.1环境温度要求：2~8℃保存,有效期12 个月。

5.2以上所有试剂每瓶试剂开封后应注明启用日期、失效期（开瓶后6个月，或有效期内使用完）并附签名。

5.3安全：工作中所有与病人的样本接触或有潜在性接触可能的样本都视为污染物。

在操作时有必要穿戴保护性的工作服、外套和手套。

5.2在处理废弃样本时不可触摸废弃物，一定戴手套和护目镜以避免直接接触。

如果操作人员不小心接触血液、试剂、废弃物/皮肤或衣物上沾到了样本、试剂及废液，用大量清水冲洗并适当考虑必要的医疗措施。

6.操作步骤6.1工作液配制：6.1.1.浸染工作液配制（一份浸染工作液量为40ml，至少可同时放置8—10张涂片）:A液20ml、B液20ml各倒入染液缸（自备染液缸），混匀。

6.1.2.滴染工作液配制（一份滴染工作液为2ml）：于试管内加入A、B液各1ml，混匀。

6.2染色步骤：6.2.1 骨髓片在空气中干燥后，滴加固定剂（用前恢复室温，并充分摇匀）布满涂片固定约30—60秒，蒸馏水冲洗，待干或滤纸吸干。

6.2.2 滴加或浸入工作液布满涂片37度染色60分钟，蒸馏水充分冲洗5分钟，待干或滤纸吸干。

6.2.3 C液室温复染1—2分钟，蒸馏水冲洗，干后镜检。

7.结果判断7.1细胞外铁：先用低倍镜观察未完全展开的骨髓小粒，再用油镜判断。

铁可染成蓝色颗粒，小珠及小块。

“—”无蓝色铁粒可见。

“1+”有少量铁粒或仅见少量铁小珠“2+”有多量铁粒和铁珠“3+”有许多铁粒或有铁珠和少数小块“4+”有极多铁粒，铁珠，并有许多小块7.2细胞内铁：记数100个有核红细胞，记录阳性细胞（胞浆中有蓝色颗粒者）的百分率，同时注意细胞内铁颗粒数目，大小，染色深浅等，有无环形铁粒幼红细胞。

普鲁士蓝测定法-定义说明解析

普鲁士蓝测定法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述部分:普鲁士蓝测定法是一种常用的分析化学方法，用于测定溶液中的亚铁离子（Fe2+）的浓度。

该方法以其简单、快速和准确的特点而被广泛应用于环境监测、化学分析和生物科学研究等领域。

在普鲁士蓝测定法中，普鲁士蓝（Prussian Blue）作为指示剂，通过与亚铁离子形成可见光谱的深蓝色沉淀来进行浓度的测定。

普鲁士蓝是一种由亚铁离子和氰酸根离子所组成的无机化合物，其具有较高的稳定性和灵敏度。

本文旨在全面介绍普鲁士蓝测定法的原理、步骤和应用，并对其进行评价和展望。

首先，我们将详细阐述普鲁士蓝测定法的原理，包括指示剂的选择和反应机理。

随后，我们将介绍该方法的具体步骤，包括样品的处理和浓度计算等。

最后，我们将探讨普鲁士蓝测定法在不同领域的应用，例如环境水质监测和医学诊断等。

通过对该方法的全面分析和综合评价，我们可以更好地了解普鲁士蓝测定法的优势和局限性，并为未来的研究提供一些建议和展望。

综上所述，本文将对普鲁士蓝测定法进行深入的探讨和总结，旨在为读者提供一个关于该方法的全面介绍，并推动其在实际应用中的进一步发展和运用。

1.2 文章结构文章结构部分的内容可以描述普鲁士蓝测定法长文的整体框架和各个部分的内容摘要。

文章结构如下：1. 引言：本部分介绍普鲁士蓝测定法的概述，包括其基本原理、步骤和应用范围。

同时，描述文章的结构和各个部分的内容概要。

2. 正文：2.1 普鲁士蓝测定法的原理：该部分详细解释普鲁士蓝测定法的基本原理，包括反应机理和主要的化学反应过程。

同时，探讨普鲁士蓝与待测物质之间的关系和相互作用。

2.2 普鲁士蓝测定法的步骤：本节介绍普鲁士蓝测定法的具体操作步骤，包括实验所需试剂和仪器设备，以及每个步骤详细的操作流程。

同时，说明每个步骤的目的和原理，并提供实验中可能遇到的注意事项。

2.3 普鲁士蓝测定法的应用：该部分列举普鲁士蓝测定法在不同领域中的应用案例，包括环境分析、化学分析和生物医学研究等。

普鲁士蓝染色试剂盒学习课件.docx

普鲁士蓝染色试剂盒(PERLS STAIN，伊红法)
产品简介：
Perls 普鲁士蓝是非常经典的组织化学反响，是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法，其染色原理为：亚铁氰化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸别离出来，三价铁与亚铁氰化钾反响，生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁氰化物普鲁士蓝，所以该反响被称为普鲁士蓝反响。

三价铁的亚铁氰化物是一种很稳定的化合物，在反响后可用红色染色剂进展复染，如核固红、伊红、中性红等。

含铁血黄素〔Hemosiderin〕是一种血红蛋白源性色素，为金黄色或棕黄色颗粒，因其含铁、金黄色，故称为含铁血黄素。

当红细胞被巨噬细胞吞噬后，在溶酶体酶的作用下，血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。

Perls 普鲁士蓝反响〔Prussian blue reaction〕又称为含铁血黄素染色，即经过亚铁氰化钾和稀酸处理后可以产生蓝色，常见于吞噬细胞内会间质内，主要显示三价铁盐。

Perls stain 常用于显示局部组织内各种出血性病变，常见于吞噬细胞内。

在判断含铁血黄素沉积时，用Perls 反响可以得到证实，该染色方法可以很好的区分含铁血黄素和其他色素。

该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广、可以进展复染。

普鲁士蓝染色试剂盒〔Perls stain，伊红法〕，其复染液采用伊红染色液，也是常用的复染液，该复染液染色时间较核固红染色液要短。

保存：RT避光保存，有效期 1 年。

关键词：普鲁士蓝染色试剂盒(PERLS STAIN，伊红法)
普鲁士蓝染色试剂盒(PERLS STAIN，伊红法)相关染色产品:。

普鲁士蓝实验报告

一、实验目的1. 了解普鲁士蓝染色的原理和操作步骤。

2. 掌握利用普鲁士蓝染色观察组织中铁元素分布的方法。

3. 提高实验操作技能，培养严谨的科学态度。

二、实验原理普鲁士蓝是一种亚铁氰化铁，具有较强的亲和力，可以与组织中的铁元素结合形成蓝黑色沉淀。

在酸性条件下，切片内的高铁盐与亚铁氰化钾反应生成亚铁氰化铁，进而与组织中的铁元素结合，形成蓝黑色沉淀。

通过显微镜观察，可以观察到组织中铁元素的分布情况。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 人肝组织切片- 亚铁氰化钾- 氯化铁- 核固红染液- 固定液- 20倍样本体积的固定液- 石蜡切片- 冰冻切片- 显微镜2. 实验仪器：- 烧杯- 移液器- 离心机- 显微镜- 显微摄影仪四、实验步骤1. 样本准备：- 将人肝组织切片置于20倍样本体积的固定液中固定24小时以上，常温运输。

- 固定时间不宜过长，以免组织结构变形，切勿冷冻结冰。

- 石蜡切片常温运输，冰冻切片-20℃运输。

2. 染色：- 将固定好的切片置于烧杯中，加入适量的亚铁氰化钾溶液，在室温下进行染色。

- 染色时间约为30分钟。

3. 核固红染色：- 将染色好的切片用蒸馏水冲洗干净。

- 加入核固红染液，室温下进行染色。

- 染色时间约为10分钟。

4. 脱水封片：- 将染色好的切片用无水乙醇进行脱水处理。

- 最后用中性树胶封片。

5. 显微镜观察：- 将封片后的切片置于显微镜载物台上，使用显微镜观察。

- 观察组织中铁元素的分布情况，记录观察结果。

五、结果与分析1. 铁元素、含铁血黄素呈蓝色，细胞核呈红色。

2. 在显微镜下观察，可见肝组织内存在蓝色颗粒，为铁元素、含铁血黄素的沉积。

3. 铁元素主要分布在肝细胞内的线粒体、溶酶体等细胞器中。

六、讨论1. 普鲁士蓝染色是一种简单、快速、灵敏的染色方法，可用于观察组织中铁元素的分布。

2. 实验过程中，固定时间的控制对组织结构的影响较大，应严格按照实验要求进行固定。

3. 染色过程中，亚铁氰化钾和氯化铁的浓度、染色时间等因素会影响染色效果，应进行优化。

普鲁士蓝染色法测铁含量方法

普鲁士蓝染色法测铁含量方法全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：普鲁士蓝染色法测铁含量方法是一种常用的化学分析方法，通过将待测样品与普鲁士蓝（Prussian Blue）反应，可以测定样品中铁含量的浓度。

普鲁士蓝是一种具有深蓝色的化合物，由亚铁氰化钾和铁离子反应生成。

在分析化学领域中，普鲁士蓝经常被用来检测和测定金属离子的存在和浓度，尤其是铁离子。

测定铁含量是分析化学中的一个重要课题，铁是人体和大自然中广泛存在的一种常见金属元素。

人体内的铁对于维持身体正常的生理功能扮演着重要的角色，但铁元素也可能对人体健康造成危害。

准确测定铁含量对于科学研究和临床诊断具有重要意义。

制备普鲁士蓝沉淀的方法是将待测样品与亚铁氰化钾和盐酸混合，煮沸后冷却至室温，普鲁士蓝沉淀会在反应中生成并沉淀出来。

然后用盐酸将剩余的亚铁氰化钾和铁离子溶解，使普鲁士蓝沉淀可以完全转化为可溶性形式。

接着用溶剂将普鲁士蓝溶解，并测定其吸光度，从而计算出样品中的铁含量。

普鲁士蓝染色法测铁含量方法具有操作简便、结果稳定可靠的特点，适用于工业生产和实验室研究中对铁含量进行快速测定的需求。

该方法不需要昂贵的设备和复杂的操作流程，成本低廉，适用性广泛。

在进行普鲁士蓝染色测铁的实验中，需要注意以下几点：样品的制备和操作过程应该严格遵循实验步骤，避免引入外界干扰因素；实验中使用的试剂和溶剂应该是纯度高、质量稳定的，并且需要保持试剂的保存条件，避免受到污染或分解；在测定普鲁士蓝的吸光度时，应该注意光路的校准和仪器的标定，保证测定结果的准确性和可靠性。

普鲁士蓝染色法测铁含量方法是一种简单、快速、可靠的化学分析方法，适用于测定各种类型样品中的铁含量。

通过科学的实验设计和操作规范，可以获得准确的铁含量测定结果，为科研工作和生产实践提供有力的支持。

第二篇示例：普鲁士蓝染色法是一种常用的测定铁含量的方法之一，该方法利用普鲁士蓝作为指示剂，通过其与铁离子的络合反应来测定样品中的铁含量。

卢卡斯快蓝染色方法

卢卡斯快蓝染色方法卢卡斯快蓝染色方法是一种常用的细胞染色方法，可用于检测细胞活力和细胞死亡。

该方法利用卢卡斯快蓝染料（Lucas' blue dye）染色细胞，通过观察染色程度来判断细胞的代谢活性和细胞死亡。

下面将详细介绍卢卡斯快蓝染色方法的步骤和注意事项。

材料准备：1.卢卡斯快蓝染料：该染料可通过购买或实验室内部配制获得。

2.预培养的细胞：将需要染色的细胞预先培养在含有适宜培养基和10%胎牛血清（FBS）的培养皿中，培养至80%以上的细胞与。

步骤：1.细胞处理：将细胞从培养皿中收集，可以使用胰酶消化细胞层来释放细胞。

2.细胞计数：使用血细胞计数板或显微镜下的细胞计数室对细胞进行计数。

计算细胞密度，使得每个培养皿上包含需要染色的目标细胞数量。

3.细胞复悬液的制备：将细胞计数到的细胞用含适宜培养基的离心管中，并在合适的转速下离心细胞10分钟，以平均沉降细胞和去除上清液。

4.细胞复悬液的制备：将细胞计数的细胞用含适宜培养基的离心管中，并在合适的转速下离心细胞10分钟，以平均沉降细胞和去除上清液。

5.染色：将细胞沉积沉积在离心管底部，轻轻地加入适量的卢卡斯快蓝染料，使其完全覆盖细胞。

将离心管放置在37摄氏度的培养箱中，染色时间为30分钟。

6.染料去除：将染过色的细胞与同等体积的PBS缓冲液混合，轻轻地摇动离心管，使细胞充分洗涤。

然后进行一次离心，以去除洗涤液。

7.观察和图像采集：将离心管中的细胞再次悬浮在PBS缓冲液中。

用显微镜观察染色细胞的形态和颜色，使用显微镜目镜拍摄细胞图像。

注意事项：1.在染色过程中，应尽量避免操作过程中的摇晃和振荡，以防细胞聚集和泡泡形成。

2.在染色过程中一定要控制染料的用量，以免过量染色影响结果的准确性。

3.过程中的所有步骤应在严格无菌条件下进行，以免污染样品。

4.在观察和图像采集时，应选择合适的放大倍数和曝光时间，以确保细胞的形态和颜色能够准确显示出来。

5.细胞的数量和密度在染色前要进行合理控制，以确保染色结果的可比性和可重复性。

普鲁士蓝制备实验报告

普鲁士蓝制备实验报告一、实验目的本实验的目的是制备普鲁士蓝，并通过实验探究其制备过程及形成机制。

二、实验原理普鲁士蓝是一种重要的无机配位化合物，其化学式为Fe7(CN)18.普鲁士蓝可以通过两步反应制备，首先是Fe(III)与陈旧酸铁盐和氢氧化钾反应生成FeOH(II)x(CN)6-x2-；然后再与陈旧酸铁盐反应生成本实验中的普鲁士蓝。

三、实验步骤1. 实验前准备：将陈旧酸铁盐溶解于适量的水中，制备氢氧化钾的饱和溶液。

2. 反应步骤：- 取一些陈旧酸铁盐溶液，加入适量的氢氧化钾溶液，搅拌均匀。

- 将上一步得到的溶液加热至沸腾，反应进行数分钟。

- 过滤得到的溶液，放置冷却。

- 收集晶体，用冷水洗涤数次，然后晾干至常温。

四、实验结果完成上述步骤后，我们观察到普鲁士蓝呈现出深蓝色的颜色，并且呈现出晶体的结构。

五、实验讨论普鲁士蓝是由Fe(III)和CN-离子配位而成的络合物。

在本实验中，首先发生的反应是Fe(III)与陈旧酸铁盐和氢氧化钾反应生成FeOH(II)x(CN)6-x2-，然后再与陈旧酸铁盐反应生成普鲁士蓝。

在该反应过程中，氢氧化钾的加入起到了一个重要的催化剂的作用，可以加速反应速率。

而将反应溶液加热至沸腾则有助于促进反应的进行，并且可以使晶体结构更加稳定。

通过过滤和洗涤的步骤，可以去除反应时产生的杂质，最终得到较为纯净的普鲁士蓝晶体。

值得注意的是，普鲁士蓝具有一定的毒性，实验操作时应注意安全，并避免吸入普鲁士蓝粉末或溶液。

六、实验结论通过本实验的操作步骤，我们成功制备出了普鲁士蓝晶体，并观察到其深蓝色的色彩和晶体的结构。

通过反应原理的讨论，我们进一步了解了普鲁士蓝的制备机制。

本实验为进一步研究普鲁士蓝的应用提供了基础，同时也加深了我们对于无机配位化合物的认识。

革兰氏染色液操作步骤及注意事项

革兰氏染色液操作步骤及注意事项革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，通过这种方法，可以将细菌分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G）两大类。

以下将详细介绍革兰氏染色液的操作步骤及注意事项。

一、操作步骤1、涂片制备首先，在干净的载玻片上滴一小滴生理盐水。

然后，用无菌接种环挑取少量待检细菌培养物，与生理盐水混合均匀，形成薄薄的菌膜。

最后，让涂片自然干燥。

2、固定将干燥后的涂片通过火焰加热固定，加热时要让玻片背面接触火焰，来回通过 2 3 次，以杀死细菌并使其牢固地附着在玻片上。

3、初染在涂片上滴加结晶紫染色液，染色 1 2 分钟。

之后，用细水流轻轻冲洗涂片，直至流下的水无色为止。

4、媒染滴加碘液覆盖涂片，媒染 1 分钟。

同样用细水流冲洗，去除多余的碘液。

5、脱色用 95%的乙醇脱色，脱色时间约 20 30 秒，直到流出的乙醇无色或稍显淡紫色为止。

立即用细水流冲洗，终止脱色。

6、复染滴加沙黄复染液，染色 1 2 分钟。

用细水流冲洗，吸干水分后，在显微镜下观察。

二、注意事项1、涂片质量涂片不宜过厚，否则会影响染色效果，导致细菌重叠，难以分辨。

涂片应均匀，避免出现局部厚、局部薄的情况。

2、固定温度和时间固定时火焰温度不宜过高，以免破坏细菌形态。

固定时间要适中，过长或过短都会影响染色结果。

3、染色时间每种染色液的染色时间都要严格控制。

初染时间不足，会导致革兰氏阳性菌染色不充分；时间过长，则可能使革兰氏阴性菌也染上颜色。

脱色时间更是关键，脱色过度会使革兰氏阳性菌被误判为阴性菌；脱色不足，则会使革兰氏阴性菌被误判为阳性菌。

4、冲洗方式冲洗时水流要细、缓，避免直接冲掉涂片上的细菌。

冲洗的角度要合适，尽量从玻片的一端冲洗，避免染色液在玻片上残留。

5、染色液质量染色液应定期配制或购买新鲜的，以保证染色效果。

储存染色液时要注意避光、防潮，防止其变质。

6、显微镜观察观察时要先低倍镜找到视野，再换高倍镜观察。

发蓝处理工操作规程

涂蓝处理工人操作规程
1．工作前，穿戴规定的防护设备并打开通风装置，通风10～15
分钟。

发蓝槽应有独立的抽风设备。

2．工作中根据工艺要求调整发蓝液成分。

调整时加入烧碱每块重
量不应超过1kg，并应吊挂溶液，不应直接加入槽中，且不得在高温下进行。

3．加水调节发蓝罐容积时，冷水应沿槽壁缓慢加入，防止碱液溅出。

4. 在进入和离开插槽之前关闭电源。

零件出入槽时，要夹紧扎牢，轻拿轻放，防止溶液溅出伤人。

5．应随时清除发蓝溶液表面的浮渣。

6．发蓝后的工件应立即清洗。

7．废液应集中回收或中和后统一处理，经化验合格后方能排放。

8．工作完毕，立即清洗并刮伤设备附近的地面．关闭开关，整理
工作场所。

做好交接班记录。

普鲁士蓝染色试剂盒（增强型）说明书

普鲁士蓝染色试剂盒（增强型）货号：G1428规格：4×2ml （试用装）/4×10ml/4×20ml 保存：-20℃，避光，有效期6个月产品组成：试剂名称4×2ml 4×10ml 4×20ml 保存试剂(A):Perls 染色工作液试剂(A1):Perls A 液1ml5ml 10ml RT,避光试剂(A2):PerlsB 液1ml 5ml 10ml RT 临用前按照1：1混匀即为Perls 染色工作液。

试剂(B)：孵育工作液试剂(B1):孵育浓缩液0.2ml 1ml 2×1ml 4℃，避光试剂(B2):孵育稀释液 1.8ml 9ml 18ml RT临用前按照1：9混匀即为孵育工作液。

试剂(C)：增强工作液试剂(C1):增强A 液 1.9ml 9.5ml 19ml -20℃，避光试剂(C2):增强B 液0.1ml0.5ml1ml4℃，避光临用前按照19：1的比例混匀即为增强工作液。

试剂(D):复染液2ml 10ml 20ml RT,避光产品说明：Perl's 铁染色法是检测细胞和组织中非血红素铁的常用组织化学方法之一，通过形成蓝色的普鲁士蓝沉淀检测骨髓及肝、脾、肾等组织细胞中的铁离子，然而，对于含铁不丰富的器官，如脑组织，运用此法常常由于蓝色沉淀形成过少而无效。

普鲁士蓝染色试剂盒（增强型）利用级联放大的原理对阳性信号进行了放大显示，适用于含铁较不丰富或铁沉积较少的组织铁染色。

自备材料：恒温箱或水浴锅、湿盒、1*PBS 、蒸馏水操作步骤:(仅供参考)1、组织石蜡包埋切成3-7um 的切片2、切片常规脱蜡复水。

试剂盒从冰箱取出复温20min 至室温（25-30℃），湿盒注水置于37℃恒温箱预热20min 。

3、按照1：1的比例配置Perls 染色工作液，滴加到切片上至完全覆盖组织，置于湿盒内37℃孵育20min 。

4、取出切片，蒸馏水轻轻冲洗三次，每次10s ，按照1：9配置孵育工作液。

普鲁士蓝染色方法(核固红法)

相关产品：
产品 Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒 Annexin V-EGFP/PI 凋亡试剂盒 MTT 细胞增殖及毒性检测试剂盒 CCK-8 细胞增殖毒性检测试剂盒 WST-1 细胞增殖毒性检测试剂盒 MTS 细胞增殖与毒性检测试剂盒 DAPI 染色试剂盒
产品号 BB-4101 BB-4102 BB-4201 BB-4202 BB-4203 BB-4204 BB-4133
冰冻切片： 1、用蒸馏水冲洗 2-3 分钟。 2、染色、透明、封固等步骤同上，染色时间相应缩短。
细胞染色： 1、4%多聚甲醛固定 10-20 分钟。 2、自来水冲洗 2-3 分钟。 3、蒸馏水冲洗 2-3 分钟。 4、染色、透明、封固等步骤同上，染色时间相应缩短。
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染色结果：含铁血黄素、三价铁为蓝色；细胞核和其他组织为红色。
使用方法：使用前试剂 A1 和 A2 等量混合均匀，即为 Perls 染色试剂 A。现配现用。
石蜡切片： 1、常规脱蜡至水。 2、蒸馏水洗 1 分钟。 3、试剂 A 染色 15-40 分钟。 4、蒸馏水充分冲洗 2-5 分钟。 5、核固红试剂 B 淡染细胞核 5-10 分钟。 6、水冲洗。 7、常规脱水透明。 8、中性树胶封片。
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组份编号
44371A 44371B 4471C
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产品简介：贝博 Perls 普鲁士蓝染色试剂盒常用于显示局部组织内的各种出血性病变。在判断含铁
血黄素沉积时，用 Perls 染色可以得到证实，可以很好的区分含铁血黄素和其他色素。本试剂盒稳定性好，可以长期保存，应用范围广。
本试剂盒复染液采用最经典最常用的核固红复染液。

普鲁士蓝染色步骤

普鲁士蓝染色步骤
普鲁士蓝染色是一种常用的染色方法，以下是普鲁士蓝染色的步骤：
1. 准备样本：选择需要染色的组织或细胞样本，并进行固定处理，以保持其形态结构和细胞膜完整性。

2. 脱水：将样本在一系列浓度逐渐增加的乙醇溶液中脱水，通常从低浓度的乙醇（例如70%）开始，逐渐升级到较高浓度的乙醇（例如100%）。

3. 渗透：将脱水后的样本置于乙醇溶液中进行渗透处理，以便样本能够更好地与染色剂作用。

常用的渗透试剂包括丙酮和二甲苯。

4. 染色：将渗透后的样本放置于普鲁士蓝染色液中，通常是由硫酸亚铁和稀盐酸混合而成的。

样本需要在染色液中浸泡一段时间，以使普鲁士蓝与样本中的铁离子结合形成可见的蓝色沉淀。

5. 漂洗：将染色后的样本用蒸馏水冲洗，以去除多余的染色剂和盐酸残留。

6. 脱色：在经过漂洗后，可以使用酸性醇溶液脱色样本。

常用的酸性醇溶液包括酸醇溶液（一般为1%醋酸、95%乙醇和蒸馏水的混合物）或者酸性甲醇溶液（一般为1%醋酸和99%甲醇的混合物）。

脱色的时间需根据样本的含铁量进行调整。

7. 脱水：将脱色后的样本在乙醇溶液中进行脱水，与步骤2中的脱水过程类似。

8. 渗透：将脱水后的样本进行渗透处理，与步骤3相同。

9. 封片：将渗透后的样本置于合适的封片介质中，如Canada balsam或普鲁士蓝嵌片胶，然后用封片玻片封住样本。

10. 镜检：将封好的样本镜检放置于显微镜下观察，利用光学显微镜即可看到染色的效果。

以上就是普鲁士蓝染色的步骤，通过这一方法可以对含铁物质进行染色，形成蓝色沉淀，从而观察和研究样本中的铁元素分布情况。

普鲁士蓝制备实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 学习普鲁士蓝的制备方法；2. 掌握普鲁士蓝的合成原理及反应条件；3. 了解普鲁士蓝的物理性质和应用。

二、实验原理普鲁士蓝是一种蓝色的铁氰化物，化学式为Fe4[Fe(CN)6]3。

它是一种具有特殊性质的无机颜料，具有优良的化学稳定性和物理性质。

本实验采用单铁源水热法合成普鲁士蓝。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：电子天平、烧杯、滴定管、搅拌器、高压反应釜、干燥箱、磁力搅拌器、红外光谱仪、X射线衍射仪、扫描电镜等。

2. 试剂：FeSO4·7H2O、K4[Fe(CN)6]、NaOH、H2O（去离子水）、无水乙醇、丙酮等。

四、实验步骤1. 配制溶液：准确称取FeSO4·7H2O 1.5g，溶解于50mL去离子水中，配制成0.03mol/L的FeSO4溶液。

2. 氰化：向FeSO4溶液中加入0.1mol/L的K4[Fe(CN)6]溶液，使Fe2+与Fe3+的摩尔比为3:1。

3. 调节pH值：用NaOH溶液调节溶液pH值至8.5。

4. 水热反应：将上述溶液转移至高压反应釜中，在150℃下反应24小时。

5. 冷却：反应结束后，自然冷却至室温。

6. 过滤、洗涤：将反应产物过滤，用去离子水洗涤3次。

7. 干燥：将洗涤后的产物在60℃下干燥24小时。

8. 研磨：将干燥后的产物研磨成粉末。

9. 分析与表征：对产物进行红外光谱、X射线衍射、扫描电镜等分析。

五、实验结果与分析1. 红外光谱分析：普鲁士蓝的特征吸收峰为Fe-C和C-N键的振动，与理论值吻合。

2. X射线衍射分析：普鲁士蓝的晶体结构为三方晶系，晶胞参数为a=0.984nm，c=1.502nm。

3. 扫描电镜分析：普鲁士蓝粉末颗粒大小约为100-200nm，表面光滑。

4. 普鲁士蓝的制备过程简单，成本低，产物质量稳定。

六、实验结论本实验采用单铁源水热法成功制备了普鲁士蓝，产物质量稳定，具有良好的应用前景。

通过红外光谱、X射线衍射和扫描电镜等手段对产物进行了表征，证实了产物为普鲁士蓝。

化学普鲁士蓝的制备及检测方法

化学普鲁士蓝的制备及检测方法化学普鲁士蓝是一种著名的化合物，它是一种金属配合物，可作为重要的指示剂和催化剂。

我们生活中很多物品中都含有普鲁士蓝，如墨水、染料、医药、垃圾处理等领域。

在化学实验中，制备普鲁士蓝是一项基础性的实验，本文将介绍化学普鲁士蓝的制备及检测方法。

一、化学普鲁士蓝的制备1. 实验原理化学普鲁士蓝来源于二价铁离子与六价铁氰化物的配合，化学式为Fe4[Fe(CN)6]3，又称偏铁氰化铁。

在制备过程中，需要先制备出三价铁离子，再与六价铁氰化物反应，最终得到化学普鲁士蓝。

2. 实验步骤（1）将5g硫酸铁加入到酸性的、含有5g亚硝酸钠的水中，搅拌均匀；（2）将稀盐酸滴加到混合液中，直至溶液变为浑浊，继续搅拌；（3）反应结束后，滴加硫酸铵的饱和溶液并充分搅拌。

此时出现“石花”结晶沉淀；（4）用蒸馏水洗涤沉淀，再用丙酮去除水分；（5）将6g氰化钾加入蒸馏水中并搅拌均匀，再加入95%乙醇以提高反应速率；（6）将“石花”沉淀溶于稀盐酸中，慢慢滴入氰化钾的混合溶液中，同时保持搅拌，形成深蓝色的溶液；（7）将深蓝色的溶液过滤、洗涤，干燥于80度的烘箱中，最终得到普鲁士蓝。

二、化学普鲁士蓝的检测方法化学普鲁士蓝的检测方法包括重量法、红外光谱法、紫外光谱法、X光粉晶衍射法、磁性测定法等多种方法。

其中，常见的是红外光谱法和重量法。

1. 红外光谱法红外光谱法通过分析普鲁士蓝分子的振动频率来反推其分子结构，从而进行检测。

普鲁士蓝分子的结构中包含一个六面环的铁氰化物配体和一个四面体的铁离子，其中六面环的氰基的振动频率与铁离子形成的四面体的振动频率有明显差异，因此可以利用红外光谱检测鉴定化学普鲁士蓝的结构。

2. 重量法重量法是利用重量测量的方法来检测普鲁士蓝的含量，常用的方法是恒重法。

在此方法中，首先需要将普鲁士蓝溶解于适当的溶剂中，然后将溶液滴加到干燥稳定的瓷皿中，置于烘箱中烘烤至恒重，通过计算瓷皿的重量，可以简单粗略地测量普鲁士蓝的含量。

普鲁士蓝染色液（细胞专用）操作步骤及注意事项

普鲁士蓝染色液（细胞专用）操作步骤及注意事项普鲁士蓝染色液(细胞专用)操作步骤及注意事项货号：G1426规格：2×20ml/2×50ml有效期:12个月产品内容:试剂内容2×20ml2×50ml StorageA1:Perls stain A10ml25ml RT 试剂(A):Perls stainA2:Perls stain B10ml25ml RT临用前，取A1、A2等量混合即为Perls stain，不宜提前配制。

试剂(B):Perls复染液20ml50ml RT避光产品说明：含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素，为金黄色或棕黄色颗粒，因其含铁，且为金黄色，故称为含铁血黄素。

当红细胞被巨噬细胞吞噬后，在溶酶体酶的作用下，血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。

Perls普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色，即经过亚铁氰化钾和稀酸处理后可以产生蓝色，常见于吞噬细胞或间质内，其染色原理在于亚铁氰化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来，三价铁与亚铁氰化钾反应，生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁氰化物。

普鲁士蓝染色液主要用于显示细胞中铁离子，常见于吞噬细胞内，可以很好地区分含铁血黄素与其他色素。

该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广，可以进行复染。

自备材料：1、固定液：甲醇或4%多聚甲醛2、蒸馏水操作步骤(仅供参考)：1、制备血液、骨髓涂片，甲醇固定5min或4%多聚甲醛固定10～20min。

2、用配制好癿Perls stain(见注意事项4)滴满涂片，37℃孵育30min。

3、自来水冲洗2次，每次2min。

4、用Perls复染液滴染于涂片，复染30s～1min。

5、水洗、晾干、镜检。

染色结果：铁颗粒蓝色幼红细胞核红色细胞外铁分级：-无蓝色颗粒+有少量铁粒或偶见铁小珠2+有较多铁粒或铁小珠3+有很多铁粒、铁小珠和少数小块状4+有极多铁粒、铁小珠，并有许多小块细胞内铁：计数100个有核红细胞，记录细胞质中含有蓝色铁粒细胞(铁粒幼红细胞)癿百分率。