台盼蓝染色 配置方法
台盼蓝染色实验原理和步骤
台盼蓝染色实验原理
台盼蓝(Trypan Blue) 就是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常用于检测细胞就是否存活。
活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。
分子式:C34H24N6O14S4Na4,分子量: 960、82,可溶于水(10mg/ml)。
实验原理:正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。
通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。
因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞与死细胞。
台盼蓝就是组织与细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。
注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。
台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。
台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。
实验步骤:
1、配制4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4℃保存。
使用时用PBS稀释至0、
4 %。
2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。
3、染色:细胞悬液与0、4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。
(终浓度0、04%)
4、计数:在3分钟内,分别计数活细胞与死细胞。
5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。
6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%
注意:
1、保存条件:室温保存。
2、有潜在致癌危险,实验时穿实验服并戴一次性手套与口罩操作。
台盼蓝染色实验原理和顺序
台盼蓝染色实验原理和顺序一、原理:台盼蓝(Trypan Blue)是一种生物染色剂,能与细胞核酸结合,使染色细胞呈现出蓝色。
它在生物学实验中被广泛应用于细胞计数、活死细胞鉴定和细胞凋亡检测等方面。
台盼蓝染色实验的原理是:台盼蓝能穿透细胞膜和胞吞体膜,进入胞内与细胞的核酸结合,使细胞呈现出蓝色。
对于活细胞而言,由于细胞膜的完整性,台盼蓝无法穿透细胞膜,因此保持细胞的透明度。
而对于死细胞而言,细胞膜已破损,台盼蓝可以进入细胞内与核酸结合,导致细胞呈现出蓝色。
通过台盼蓝染色可以直观地区分出活细胞和死细胞。
二、顺序:1.收集细胞:将待染色的细胞收集到离心管中,可以是细胞培养物、悬液中的细胞或组织样本。
2.离心:将离心管放入离心机,以适当的离心速度离心,使细胞沉淀在离心管底部。
3.丢弃上清液:将上清液倒掉,留下细胞沉淀。
4.加入台盼蓝溶液:加入适量的台盼蓝溶液(通常浓度为0.4%),使其覆盖细胞沉淀。
5.培养:将离心管放入孵化箱或培养箱中,使细胞与台盼蓝溶液接触,并保持一定的温度和湿度条件下培养。
6.等待染色:根据实验需要,可以选择不同的染色时间,通常为5-15分钟。
7.停止染色:在所选择的染色时间结束后,取出离心管,加入一定量的细胞培养基或缓冲液,停止台盼蓝的作用。
8.离心洗涤:将细胞沉淀洗涤2-3次,去除细胞外的台盼蓝。
9.准备载玻片:在载玻片上涂一层细胞培养基或缓冲液,并将细胞沉淀悬浮于上述液体中。
10.制备覆盖片:取一块覆盖玻片,用镊子夹持,并将玻片的一角轻轻接触到液体表面,由一端缓慢地将玻片放置于载玻片上,使两者尽量平行,避免产生气泡。
11.固定载玻片:将载玻片倒置在平板上,待其干燥。
12.定焦观察:将载玻片放置在显微镜载玻片夹上,利用显微镜观察细胞的染色情况。
通过以上步骤,我们可以成功地进行台盼蓝染色实验,观察细胞的活死情况,并进行细胞计数、活死细胞鉴定等相关研究。
台盼蓝染色实验原理和步骤
台盼蓝染色实验原理
台盼蓝Trypan Blue 是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常用于
检测细胞是否存活;活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色;分子式:C34H24N6O14S4Na4,分子量: ,可溶于水10mg/ml;
实验原理:正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成
蓝色;通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡;因此,借助台盼蓝
染色可以非常简便、快速地区分活细胞和;台盼蓝是组织和中最常用的死细胞
鉴定染色方法之一;注意也有台盼蓝拒染现象;台盼蓝染色后,通过显微镜下或
显微镜下拍照后计数,就可以对细胞进行比较精确的定量;台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单;
实验步骤:
1、配制4%台盼蓝:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加至100ml,用滤纸过滤,4℃保存;使用时用PBS稀释至 %;
2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释;
3、染色:细胞悬液与%台盼蓝溶液以9:1混合混匀;终浓度%
4、计数:在3分钟内,分别计数活细胞和死细胞;
5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而拒染呈无色透明状;
6、统计细胞活力:活细胞率%= 活细胞总数/活细胞总数+死细胞总数×100%注意:
1.保存条件:室温保存;
2.有潜在致癌危险,实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩操作;。
台盼蓝染色实验原理和步骤
台盼蓝染色真验本理之阳早格格创做
台盼蓝(Trypan Blue) 是细胞活性染料,时常使用于检测细胞膜的完备性,还时常使用于检测细胞是可存活.活细胞没有会被染成蓝色,而死细胞会被染成浓蓝色.分子式:
C34H24N6O14S4Na4,分子量: 960.82,可溶于火
(10mg/ml).
真验本理:平常的活细胞,胞膜结构完备,不妨排斥台盼蓝,使之没有克没有及够加进胞内;而丧得活性或者细胞膜没有完备的细胞,胞膜的通透性减少,可被台盼蓝染成蓝色.常常认为细胞膜完备性丧得,即可认为细胞已经牺牲.果此,借帮台盼蓝染色不妨非常烦琐、赶快天区别活细胞战死细胞.台盼蓝是构造战细胞培植中最时常使用的死细胞审定染色要领之一.注意凋亡小体也有台盼蓝拒染局面.台盼蓝染色后,通过隐微镜下曲交计数或者隐微镜下拍照后计数,便不妨对于细胞存活率举止比较透彻的定量.台盼蓝染色只需3-5分钟即可完毕,而且支配非常简朴.
真验步调:
1、配造4%台盼蓝母液:称与4g台盼蓝,加少量蒸馏火研磨,加单蒸火至100ml,用滤纸过滤,4℃保存.使用时用PBS密释至0.4%.
2、胰酶消化揭壁细胞,造备单细胞悬液,并做适合密释.
3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混同混匀.(末浓度0.04%)
4、计数:正在3分钟内,分别计数活细胞战死细胞.
5、镜下瞅察,死细胞被染成明隐的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状.
6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%
注意:
1.保存条件:室温保存.
2.有潜正在致癌伤害,真验时脱真验服并戴一次性脚套战心罩支配.。
台盼蓝染色
台盼蓝染色操作步骤
2011/5/5来源:上海泛柯生物科技有限公司
台盼蓝是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。
还常用于细胞是否存活。
活细胞不会被染成蓝色,死细胞会被染成蓝色。
操作步骤:
1、制作4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加至100ml,用滤纸过滤,4度保存。
使用时,用PBS 稀释至0.4%
2、胰酶消化单壁细胞,制备单细胞悬液,并适当稀释。
3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合均匀。
(终浓度为0.04%)
4、计数:在三分钟内,分别计数活细胞盒和死细胞
5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,活细胞拒染呈无色透明状
6、统计细胞活力:活细胞率(%)=活细胞数/(活细胞数+死细胞数)×100%
PBS:磷酸缓冲液。
台盼蓝染色实验原理和步骤
台盼蓝染色实验原理和步骤
台盼蓝染色实验原理
台盼蓝(Trypan Blue) 是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常
用于检测细胞是否存活。
活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。
分子式:C34H24N6O14S4Na4,分子量: ,可溶于水(10mg/ml)。
实验原理:正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进
入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼
蓝染成蓝色。
通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。
因此,
借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和。
台盼蓝是组织和中最
常用的死细胞鉴定染色方法之一。
注意也有台盼蓝拒染现象。
台盼蓝染色后,通过显微镜下或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞进行比较精确的定量。
台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。
实验步骤:
1、配制4%台盼蓝:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加至100ml,用滤
纸过滤,4℃保存。
使用时用PBS稀释至 %。
2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。
3、染色:细胞悬液与%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。
(终浓度%)
4、计数:在3分钟内,分别计数活细胞和死细胞。
5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而拒染呈无色透明状。
6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%
注意:
1.保存条件:室温保存。
2.有潜在致癌危险,实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。
台盼蓝染色实验原理和步骤
台盼蓝染色实验原理
台盼蓝(Trypan Blue) 是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常用于检测细胞是否存活。
活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。
分子式:C34H24N6O14S4Na4,分子量: 960.82,可溶于水(10mg/ml).
实验原理:正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。
通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。
因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞.台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。
注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。
台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量.台盼蓝染色只需3—5分钟即可完成,并且操作非常简单.
实验步骤:
1、配制4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4℃保存。
使用时用PBS稀释至
0.4 %。
2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。
3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。
(终浓度
0。
04%)
4、计数:在3分钟内,分别计数活细胞和死细胞。
5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状.
6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%
注意:
1。
保存条件:室温保存。
2。
有潜在致癌危险,实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩操作.。
台盼蓝染色实验原理和步骤
台盼蓝染色实验原理
台盼蓝〔Trypan Blue) 是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常用于检测细胞是否存活。
活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。
分子式:C34H24N6O14S4Na4,,可溶于水
〔10mg/ml)。
实验原理:正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。
通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。
因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。
台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。
注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。
台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比拟精确的定量。
台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。
实验步骤:
1、配制4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4℃ %。
2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。
3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。
〔终浓度0.04%〕
4、计数:在3分钟内,分别计数活细胞和死细胞。
5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。
6、统计细胞活力:活细胞率〔%〕= 活细胞总数/〔活细胞总数+死细胞总数〕×100%
注意:
1.保存条件:室温保存。
2.有潜在致癌危险,实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。
台盼蓝染色实验原理和步骤
台盼蓝染色实验原理和步骤蓝染是一种传统的染色技术,起源于中国,在日本也有悠久的历史。
蓝染色实验是为了研究蓝染工艺的原理和步骤,以便更好地理解和应用蓝染技术。
下面是台盼蓝染色实验的原理和步骤。
一、实验原理:蓝染是利用大蓝(天然靛蓝)的还原性能,将其氧化为淡蓝或蓝紫色,再使其还原为不溶于水的颜料沉淀物质,直接着色于织物纤维上,形成美观、持久、不退色的蓝色。
二、实验步骤:步骤一:准备材料1.织物:选择一块白色的纯棉织物,洗净晾干。
2.大蓝:购买或制作大蓝溶液。
步骤二:还原大蓝1.在小瓶中加入约10毫升的浓度为2%的氧化还原剂,如明矾溶液。
2.将少量大蓝溶液加入小瓶中,摇动均匀,待溶液变为淡黄色。
步骤三:染色1.将纯棉织物完全浸泡在还原后的大蓝溶液中,确保织物彻底湿透。
2.取出织物,轻轻拧干,不要使其过于湿润。
3.将湿润的织物悬挂在通风良好的地方,等待氧化。
步骤四:氧化1.将湿润的织物悬挂在通风良好的地方,等待氧化。
2.等待数小时,直至织物逐渐变蓝。
步骤五:固色1.取出已经氧化的织物,以冷水冲洗,以去除未结合的颜料。
2.将固色剂溶液(如明矾溶液)浸泡在蓝染织物中,以固定颜色。
3.用清水冲洗织物,直至水清澈。
步骤六:晾干将蓝染织物晾干,确保颜料完全固定在织物上。
通过以上步骤,就可以进行台盼蓝染色实验,获得漂亮的蓝色织物。
补充说明:1.在进行实验中,需要注意安全,避免溶液溅入眼睛或皮肤。
2.在进行染色过程时,要尽量保持环境洁净,以避免杂质进入织物。
3.实验中使用的材料可以根据需要进行调整和替换,以探索更多的蓝染效果。
4.实验所述的步骤是一种基本的蓝染方法,实际应用中可能包括更多的步骤和技巧。
总结:台盼蓝染色实验可以帮助我们理解蓝染工艺的原理和步骤,从而更好地应用蓝染技术。
通过实验,我们可以亲自体验到蓝染的魅力,并了解到大蓝的还原性能和氧化过程,以及固色剂在蓝染工艺中的作用。
蓝染作为一种古老的染色技术,在现代仍然具有广泛的应用和价值,通过实验的学习和实践,我们可以更好地传承和创新蓝染技术。
台盼蓝染色实验原理和步骤
台盼蓝染色实验原理和步骤一、实验原理:台盼蓝(TAE)是一种经典的缓冲液,在DNA电泳中具有良好的缓冲性能。
而台盼蓝染料则是能够与DNA结合形成复合物,在紫外线下发出蓝色荧光。
实验通过台盼蓝染色将DNA可视化,从而测量DNA的存在和浓度。
二、实验步骤:1.准备实验材料和设备:-台盼蓝染色缓冲液(TAE缓冲液)-加载缓冲剂-DNA样品(待测样品)-DNA分子量标准品-DNA电泳仪-薄胶片-吸取器-紫外线照射器2.准备电泳槽:在电泳槽中注入足够的TAE缓冲液,以覆盖电泳槽的整个底部,然后添加加载缓冲剂到电泳槽中。
3.准备DNA样品:将待测样品和DNA分子量标准品分别加入到不同的试管中。
通常,待测样品需要经过DNA提取和纯化等预处理步骤。
4.加载样品:取一定数量的待测样品和分子量标准品,分别加入到电泳槽中的凹槽中,在同一凹槽中加入适量的台盼蓝染色缓冲液。
5.进行电泳:将电泳槽盖上,并将其连接到电泳电源上。
设置电压和时间参数,开始电泳过程。
6.取出胶片:电泳结束后,将胶片从电泳槽中取出,将其放在薄胶片上。
然后在紫外线照射器下观察胶片上的DNA带。
7.获得结果:根据DNA带的迁移距离和颜色强度,可以判断DNA的存在和浓度。
通常,DNA带的迁移距离与分子量呈反比,而颜色强度则与DNA的浓度成正比。
需要注意的是,实验过程中需要严格控制实验的环境和操作,以避免DNA污染和损伤。
总结:台盼蓝染色实验是一种常用的染色实验,可以用于检测DNA的存在和浓度。
通过将DNA样品与台盼蓝染色缓冲液混合后进行电泳,然后观察电泳胶片上的DNA带,可以得出DNA的存在和浓度。
实验准备工作较为简单,但实验过程需要严格控制环境和操作,以确保实验结果的准确性。
台盼蓝(trypan blue)排斥实验
细胞
试剂、试剂盒
台盼蓝生理盐水
仪器、耗材
显微镜玻片盖玻片滴管
实验步骤
1.将待染色细胞稀释至所需浓度。(方法及浓度范围与细胞计数相同)
2.每0.1 ml细胞悬夜约加新鲜配置的染液一小滴,室温下染3~5 min。
3.染色过的细胞材料,取一滴细胞悬液置玻片上,加盖玻片后放在高倍镜下观察。
4.死亡的细胞着浅蓝色并膨大,无光泽;活细胞不着色并保持正常形态,有光泽。计数100~200个白细胞。
台盼蓝(trypan blue)排斥实验
标签:台盼Leabharlann 排斥台盼蓝是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。还常用于检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。
实验方法
台盼蓝排斥法
实验方法原理
台盼蓝染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色,但死亡细胞的细胞膜通透性增加,可使染料通过细胞膜进入细胞内,使死细胞着色呈蓝色。是最常用的检测细胞活率的方法。
5.统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活力。细胞活力(%)=未染色的细胞数/观察的细胞总数×100。
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注意事项
1.染色时间不能太长,否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色,使检测结果偏低。
2.另可结合细胞计数方法,同时进行细胞计数和活力检测。
台盼蓝染色实验原理和步骤
台盼蓝染色实验原理台盼蓝(Trypan Blue) 是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常用于检测细胞是否存活。
活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。
分子式:C34H24N6O14S4Na4,分子量: ,可溶于水(10mg/ml)。
实验原理:正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。
通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。
因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。
台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。
注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。
台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。
台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。
实验步骤:1、配制4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4℃保存。
使用时用PBS稀释至 %。
2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。
3、染色:细胞悬液与%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。
(终浓度%)4、计数:在3分钟内,分别计数活细胞和死细胞。
5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。
6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%注意:1.保存条件:室温保存。
2.有潜在致癌危险,实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。
台盼蓝染色液配制及染色方法
台盼蓝染色液配制及染色方法
一、配制
在0.81%氯化钠和0.06%磷酸氢二钾中配制0.4%台盼蓝
称取0.81g, 0.06g磷酸氢二钾和0.4g台盼蓝,加入60ml超纯水溶解,充分溶解后定容至100ml;室温保存。
二、染色
1、将细胞悬液以50 ul加入试管中。
2、加入50 ul 0.4%台盼兰染液染色2-3分钟。
死细胞能被台盼兰染上色,镜下可见深兰色的细胞,活细胞不被染色,镜下呈无色透明状。
台盼蓝染色法
台盼蓝染色法
材料:
1. 显微镜、玻片、盖玻片、滴管;
2. 试剂:0.4%台盼蓝染液;
3. 台盼蓝(Trypan blue):0.4g;
4. 生理盐水:100ml;
操作步骤:
1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液;
2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液来消化培养的贴壁细胞;
3. 再加入适量Hanks液制成细胞悬液;
4. 将待染色细胞稀释至所需浓度(方法及浓度范围与细胞计数相同);
5. 每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴,室温下染3—5min;
6. 染色过的细胞材料,取一滴细胞悬液置玻片上,加盖玻片后放高倍镜下观察;
7. 死亡的细胞着浅蓝色并膨大,无光泽。
活细胞不着色并保持正常形态,有光泽;
8. 计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目;
9. 统计未染色细胞。
可按公式计算出细胞活率。
细胞活率(%)=未染色的细胞数/观察的细胞总数×100。
注意事项:
1. 染色时间不能太长,否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色,使监测结果偏低;
2. 另可结合细胞计数方法,同时进行细胞计数和活力检测。
台盼蓝染色 配置方法
台盼蓝染色配置方法
台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、破裂,台盼蓝染料进入细胞,细胞变蓝,即为坏死。
如果细胞膜完整,细胞不为台盼蓝染色,则为正常细胞或凋亡细胞。
此方法对反映细胞膜的完整性,区别坏死细胞有一定的帮助。
用品:
1. 4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存。
使用时。
用PBS稀释至0.4%。
2. 吸管、血细胞计数板、显微镜
步骤:
1、制备单细胞悬液。
并作适当稀释(10 *6 细胞/ml)
2、染色:取9滴细胞悬液移入小试管中,加1滴0.4%台盼蓝溶液,混匀。
3、计数:在三分钟内,用计数板分别计数活细胞和死细胞
结果:
镜下观察,死细胞被染成淡蓝色,而活细胞拒染。
根据下式求细胞活力:
活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)*100
注意事项:台盼蓝染细胞时,时间不宜过长。
否则,部分活细胞也会着色,会干扰计数。
台盼蓝主要用来鉴定原代培养细胞时,细胞分离后的存活情况,用0.4%台盼蓝直接染色,在显微镜下观察即可,活细胞不被染色。
方便易用,因此在实验室中比较常用,尤其在心肌细胞原代培养中。
台盼兰染色法价格低廉,操作简单,又不用无菌操作,做这个实验只要是把显微镜调好了,细胞浓度调好了就不会有问题,是一个养细胞的入门实验,所以很适合初学者做。
我做这个实验主要是用来确定抑制细胞增殖的药物浓度,排除浓度过大引起的毒性反应。
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台盼蓝染色配置方法
台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、破裂,台盼蓝染料进入细胞,细胞变蓝,即为坏死。
如果细胞膜完整,细胞不为台盼蓝染色,则为正常细胞或凋亡细胞。
此方法对反映细胞膜的完整性,区别坏死细胞有一定的帮助。
用品:
1. 4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存。
使用时。
用PBS稀释至0.4%。
2. 吸管、血细胞计数板、显微镜
步骤:
1、制备单细胞悬液。
并作适当稀释(10 *6 细胞/ml)
2、染色:取9滴细胞悬液移入小试管中,加1滴0.4%台盼蓝溶液,混匀。
3、计数:在三分钟内,用计数板分别计数活细胞和死细胞
结果:
镜下观察,死细胞被染成淡蓝色,而活细胞拒染。
根据下式求细胞活力:
活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)*100
注意事项:台盼蓝染细胞时,时间不宜过长。
否则,部分活细胞也会着色,会干扰计数。
台盼蓝主要用来鉴定原代培养细胞时,细胞分离后的存活情况,用0.4%台盼蓝直接染色,在显微镜下观察即可,活细胞不被染色。
方便易用,因此在实验室中比较常用,尤其在心肌细胞原代培养中。
台盼兰染色法价格低廉,操作简单,又不用无菌操作,做这个实验只要是把显微镜调好了,细胞浓度调好了就不会有问题,是一个养细胞的入门实验,所以很适合初学者做。
我做这个实验主要是用来确定抑制细胞增殖的药物浓度,排除浓度过大引起的毒性反应。