《药物分析》杭太俊第8版 第6章 芳酸类非甾体抗炎药物的分析

第六章 芳酸类非甾体抗炎药物的分析
• 2）红外分光光度法 • 阿司匹林IR特征吸
收峰
COOH OCOCH3
峰位
3300 ～ 3200
1760,1690
1610,1570, 1480,1460
1310,1230, 1180, 775
归属 νO-H (羧基) νC-O(羧酸酯和羧基) νC=C(苯环)
第六章 芳酸类非甾体抗炎药物的分析
• 2）高效液相色谱法： • 方法：供试验品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰
的保留是将相同。 • 适用于：阿司匹林、吲哚美辛、对乙酰氨基酚、布洛芬、
萘普生等药物。
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药物名称 阿司匹林 双水杨酯
甲芬那酸
第三节 特殊杂质及检查方法
表6-3 典型非甾体抗炎药物的主要有关物质
第六章 芳酸类非甾体抗炎药物的分析
第三节 特殊杂质及检查方法 三、 二氟尼柳中有关物质的检查
(一) 合成工艺 多种苯或联苯类中间体及副产物
F
F
NH2 +
2,4-二氟苯胺,Ⅰ
偶联 Cu
F F
2,4-二氟联苯, Ⅱ
乙酰化 (CH3CO)2O,AlCl3
F
氧化
F
COCH3 H2O2
4-(2',4'-二氟苯基)苯乙酮, Ⅲ
遇醋酸铅生成硫化铅黑色沉淀，如美洛昔康。
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• 7、光谱法 • 1）紫外可见光光度法： • ①最大吸收波长法：如规定双氯芬酸钠水溶液在276nm有
最大吸收；吡罗昔康的水溶液在276nm波长处有最大吸收。
• ②最大与最小吸收波长法：如布洛芬0.4%的氢氧化钠溶液， 最大吸收：265nm和273nm的波长处；最小吸收： 245nm和 271nm的波长处。
性条件下配合物会分解。 • 适用于：煮沸水解的芳酸类药物，如阿司匹林、双水杨酸酯、
二弗尼柳等。 • 反应方程式如下：
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• 2）酚羟基反应： • 对乙酰氨基酚的水溶液加三氯化铁试液即显蓝紫色。 • 适用：烯醇式羟基即具有酚羟基的性质，如吡罗昔康、美
洛昔康等。
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ChP曾采用HPLC法检查: 单1杂质的限量为0.1% 杂质总量为0.5%
ChP2010规定 HPLC法检查: “有关物质” GC检查: 2,3-二甲基苯胺(0.01% )
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• （二） 2,3-二甲基苯胺的限量检查
• 气相色谱检查：
• ①条件：毛细管柱,以聚乙二醇（PEG-20M）固定相；
νC-O(羧酸酯和羧基)
δAr-H(邻位取代苯环)
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• 8、色谱法 • 1）薄层色谱法： • 如二弗尼柳胶囊的鉴定：硅胶GF254为固定相，正己烷-二
氧六环-冰醋酸（85:10:5）为展开剂，在紫外光（254nm） 灯下检视。供试品试液所显主斑点的位置和颜色与对照品 溶液的主斑点相同。
• 一、阿司匹林及双水杨酯中游离水杨酸与有关物质的检查。
• （一）阿司匹林及双水杨酯的合成
OH
OH
OCOCH3
CO2
OH
COOH
阿司匹林
COOH O
O OH 双水杨酸酯
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第三节 特殊杂质及检查方法
（二）阿司匹林中游离水杨酸与有关物质的检查
MeO Ⅱ
OH
COOH CH3 催化氢化
MeO Ⅲ
MeO
原料(I) : 2-萘甲醚 中间体(II): 6-甲氧基-2-乙酰萘(6-甲氧基-2-萘乙酮) 中间体(III): 2-羟基-2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酸 产品(IV): 萘普生
O CH3
羧化
CH3 COOH
Ⅳ
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1、游离水杨酸【酰化不完全 + 水解（精制、制剂、贮 藏）】——易氧化成有色醌类化合物，有毒 ① ChP before 2010 用水杨酸与 Fe3+ 生成紫堇色配离子的 原理, 用稀硫酸铁铵溶液显色法检查
供试品溶液制备过程中阿司匹林水解
② ChP2010（HPLC） 供试品采用1%冰醋酸甲醇溶液，防止阿司匹林水解。
• 3）吸收光谱特性：本类药物分子结构中具有苯环和特征 取代基，具有紫外和红外的特征吸收光谱，因此可对本类 药物进行鉴别。
• 4）基团或元素特征：如具有酚羟基或邻羟苯甲酸结构的 药物能与三氯化铁生成有色配位化合物；酮洛芬的二苯甲 酮可与苯肼缩合显色等。
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• 第二节 鉴别试验 • 1、与三氯化铁反应 • 1）水杨酸反应： • 水杨酸的水溶液加三氯化铁试液，生成紫堇色配位化合物。 • 反应条件：中性或弱酸性条件下进行（pH值为4-6），在强酸
• 5、水解反应 • 阿司匹林与碳酸钠试液加热水解，得水杨酸即醋酸钠，加
过量的稀硫酸酸化后，则生成白色水杨酸沉淀，并产生醋 酸的臭味。
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• 6、特征元素的反应 • 1）氯元素的鉴别：样品与碱炽灼会化后，加水煮沸后，
滤液显氯化物的鉴别反应，如双氯芬酸钠。 • 2）硫元素的鉴别：样品经高分分解后，产生硫化氢气体，
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第三节 特殊杂质及检查方法
（三）双水杨酯中游离水杨酸的检查
– 利用水杨酸与三价铁生成有色配离子的原理, 用硝酸铁 溶液显色, 在530nm的波长处测定吸光度, 限度为0.5%; 双水杨酯片同法检查, 限度为1.5%
OH
OH
CO2
COOH
苯酚
水杨酸
OH COOH
COOH O
O OH 双水杨酸酯
水解
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第三节 特殊杂质及检查方法 二、甲芬那酸中2,3-二甲基苯胺的检查
• （一）甲芬那酸的合成工艺：
• 原料2,3-二甲基苯胺可引起高铁血红蛋白血症，对中枢神 经系统及肝脏有损害。
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• （二） 2,3-二甲基苯胺的限量检查
第三节 特殊杂质及检查方法
(二) 6-甲氧基-2-萘乙酮及其它有关物质
1. 溶液制备
供试品溶液: 0.5mg/ml流动相溶液 对照品溶液: 6-甲氧基-2-萘乙酮(杂质I), 50μg/ml
对照溶液: 供试品溶液1ml + 对照品溶液2ml→200ml
2. 限度
杂质I: 不得大于杂质I峰面积(0.1%) 其他单个杂质: 不得大于杂质I峰面积的2倍(0.2%) 各杂质总量: 不得大于对照溶液中萘普生峰面积(0.5%)
•
对照品溶液恒温，150℃；供试品采用程序升温，
起始温度 150℃；进样口温度： 250℃；检测器温度：
260℃。
• ② 溶液制备与测定：
• 二氯甲烷-甲醇（3:1）作溶液，供试品（25mg/ml）,对照 品（ 2.5μg/ml）.
• 进样量：1 μl
• 定性：保留时间一致；
• 定量：供试品中2,3-二甲基苯胺峰面积不得大于对照液中 2,3-二甲基苯胺。
发热和各种慢性疼痛，如头痛、关节肌肉痛、牙痛等症状的 缓解。
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• 第一节 典型芳酸类非甾体抗炎药物的结构与性质
几种典型的芳酸类非甾体抗炎药物
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• 1、结构特点 • ①均有苯环、羧酸或其酯。其酸性特征可作为原料药含量
测定的基础，在中性乙醇或其他水溶性的有机溶剂中，用 氢氧化钠直接滴定。 • ②水杨酸类和苯甲酸类结构中的羧基直接与苯环相连。 • ③除了酸性基团外，各自具有本身的官能团。 • ④分子中苯环、羧酸和取代基的相互影响，使芳酸的酸性 强度各有不同
有关物质 结构式
代码/名称
药物 名称
有关物质 结构式
代码/名称
O OH OH
游离 水杨酸
O
萘普生 H3C
H2N
CH3 CH3
2,3-二甲基 苯胺
HO
对乙酰 氨基酚
Cl
I． 6-甲氧基2-萘乙酮
OMe NH2
氨基酚
H
N
CH3
O
对氯苯乙酰 胺
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第三节 特殊杂质及检查方法
色的偶氮染料。
•对乙酰氨基酚生成对氨基酚
•对氨基酚与亚硝酸盐进行 •重氮化反应
•重氮盐与碱性β-萘酚偶合生 •成红色偶氮化合物
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• 4、氧化反应 • 甲芬那酸溶于硫酸后，与重铬酸钾反应显深蓝色，随即变为
棕绿色。
甲芬那酸＋H2SO4
深蓝色
△ 黄色并产生绿色荧光
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第六章 芳酸类非甾体抗炎药物的分析
• 2、主要理化性质： • 1）酸性：具有游离羧基而显酸性，但其酸性强度受苯环
的取代基位置及苯环上其他取代基的影响而显示不同的酸
性。如阿司匹林的pKa = 3.49,苯甲酸的pKa = 4.26等。
• 2）水解性：具有酯键的药物，如阿司匹林、双水杨酯、 吲哚美辛、尼美舒利以及对乙酰氨基酚等，可发生水解反 应，可进行定量及定性分析。
• ③吸光度法：甲芬那酸（1mol/L的盐酸溶液-甲醇） （1:99）的20μg/ml的溶液：λmax,279=0.69-0.74; λmax,350=0.56-0.60;
• ④吸光度比值法：二氟尼柳盐酸（0.1mol/L）乙醇溶液 （样品浓度20 20μg/ml） λmax,251/ λmax,315 =4.2-4.6.
ODS（十八烷基硅烷键合硅胶）为填充剂作为固定相，以乙腈 -四氢呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70）为流动相，检测波长 303nm，按外标法以峰面积计算，游离水杨酸不得超过0.1%。