Tris-EDTA缓冲液(1XTE pH8.0)

Tris-HCl及其他几种缓冲液配方

Tris是什么？有什么作用？Tris-HCl，Tris-EDTA如何配制？Tris：三羟甲基氨基甲烷三羟甲基氨基甲烷（Tris(hydroxymethyl)aminomethane，一般简称为Tris）是一种有机化合物，其分子式为(HOCH2)3CNH2。

Tris被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备。

例如，在生物化学实验中常用的TAE和TBE缓冲液（用于核酸的溶解）都需要用到Tris。

由于它含有氨基因此可以与醛发生缩合反应Tris为弱碱，在室温（25℃下，它的pKa为8.1；根据缓冲理论，Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。

Tris碱的水溶液pH在10.5左右，一般加入盐酸以调节pH值至所需值，即可获得该pH值的缓冲液。

但同时应注意温度对于Tris的pKa的影响。

由于Tris缓冲液为弱碱性溶液，DNA在这样的溶液中会被去质子化，从而提高其溶解性。

人们常常在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”，TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。

如果将调节pH值的酸溶液换成乙酸，则获得“TAE缓冲液”（Tris/Acetate/EDTA），而换成硼酸则获得“TBE缓冲液”（Tris/Borate/EDTA）。

这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。

用途：有机合成中间体。

在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系，稳定电泳过程中的PH值。

在凝胶中也起到稳定PH的作用，只不过是Tris-HCl缓冲体系。

Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂，还有许多重要用途。

Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。

Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫（C. elegans核纤层蛋白lamin）的中间纤维的形成。

Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。

此外，Tris 还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。

Tris也被用作滴定标准物。

1 M Tris-HCl (pH7.4，7.6，8.0)组份浓度 1 M Tris-HCl配制量1L配制方法：1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。

分子生物学常用母液的配置方法

分子生物学常用母液的配置方法（1）0.5M EDTA，PH=8.0往175ml超纯水中加入46.525克Na2EDTA 2H2O,然后加入10克的NaOH,在磁力搅拌器上溶解,用酸度计测量PH值,根据PH值决定再次加入NaOH的量,直至调节PH值至8.0，然后定容至500ml，灭菌后贮存备用。

（2）1M Tris-Hcl, PH=8.0在160ml超纯水中加入24.2克的Tris碱，然后用浓盐酸调PH值至8.0（约需8.4ml的浓盐酸），最后用超纯水定容至200ml。

（用酸度计测PH值）。

灭菌后贮存备用。

（3）TE缓冲液（10mM Tris-Hcl, PH=8.0；1 mM EDTA，PH=8.0）配置100 ml溶液需加入：①1M Tris-Hcl, PH=8.0 1.0ml②0.5 M EDTA，PH=8.0 0.2 ml③超纯水98.8 ml灭菌后贮存备用。

(4) 5M Nacl称146克Nacl 溶于400 ml 超纯水中,然后用超纯水定容至500 ml。

(5) 3.0 NaAc,PH=5.2称24.6克乙酸钠,溶于70 ml超纯水中,然后用冰乙酸调PH值至5.2,最后定容至100 ml。

（6）5M KAc在50 ml 超纯水中溶49.1克的KAc，然后定溶至100 ml。

(7) 2％CTAB提缓冲液(用于DNA提取)①1M Tris-Hcl, PH=8.0 20 ml 100 mM②0.5 EDTA，PH=8.0 8 ml 20 mM③5M Nacl 56 ml 1400 mM加入CTAB 4克,水浴(65℃)或用磁力搅拌器加热溶解,冷却至室温后定容至200 ml。

灭菌后备用。

(8)氯仿/异戊醇(24:1)氯仿96 ml异戊醇4 ml(9)SDS法提取DNA缓冲液（现用现配）配40 ml （最后定容至40 ml）母液量终浓度①1M Tris-Hcl, PH=8.0 4ml 100 mM②0.5 EDTA，PH=8.0 4ml 50 mM③5M Nacl 1.2 ml 150 mM④10％SDS 8 ml 2％(V/W)⑤巯基乙醇30～800μl 0.07～2％（v/v）(10) 10％SDS 溶于80 ml 无菌超纯水中，然后定溶至100 ml。

溶液配制

实验室常用缓冲液配置方案1×TE Buffer组成浓度：10mM Tris-HCl 1mM EDTA PH=8.0配制量：500ml配制方法：量取下列溶液于500ml烧杯中1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml0.5M EDTA PH=8.0 1ml向烧杯中加入约400mldd H2O均匀混合；将溶液定容到500ml后，高温高压灭菌；室温保存.1)1 M Tris-HCl (pH 8.0)组份浓度：1 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 加入42ml浓盐酸调节所需要的pH值。

4. 将溶液定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

15）0.5 M EDTA(pH8.0)组份浓度：0.5 M EDTA配制量：1 L配制方法：称取186.1 g Na2EDTA·2H2O，置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌。

3. 用NaOH调节pH值至8.0（约20 g NaOH)。

注意：pH值至8.0时，EDTA才能完全溶解。

4. 加去离子水将溶液定容至1 L。

5. 适量分成小份后，高温高压灭菌。

6. 室温保存。

实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：1 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

4. 将溶液定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2)10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量：1 L配制方法：3. 将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。

tris-hcl及其他几种缓冲液配方

Tris是什么？有什么作用？Tris-HCl，Tris-EDTA如何配制？Tris：三羟甲基氨基甲烷三羟甲基氨基甲烷（Tris(hydroxymethyl)aminomethane，一般简称为Tris）是一种有机化合物，其分子式为(HOCH2)3CNH2。

Tris被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备。

例如，在生物化学实验中常用的TAE和TBE缓冲液（用于核酸的溶解）都需要用到Tris。

由于它含有氨基因此可以与醛发生缩合反应Tris为弱碱，在室温（25℃下，它的pKa为8.1；根据缓冲理论，Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。

Tris碱的水溶液pH在10.5左右，一般加入盐酸以调节pH值至所需值，即可获得该pH值的缓冲液。

但同时应注意温度对于Tris的pKa的影响。

由于Tris缓冲液为弱碱性溶液，DNA在这样的溶液中会被去质子化，从而提高其溶解性。

人们常常在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”，TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。

如果将调节pH值的酸溶液换成乙酸，则获得“TAE缓冲液”（Tris/Acetate/EDTA），而换成硼酸则获得“TBE缓冲液”（Tris/Borate/EDTA）。

这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。

用途：有机合成中间体。

在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系，稳定电泳过程中的PH值。

在凝胶中也起到稳定PH的作用，只不过是Tris-HCl缓冲体系。

Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂，还有许多重要用途。

Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。

Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫（C. elegans核纤层蛋白lamin）的中间纤维的形成。

Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。

此外，Tris 还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。

Tris也被用作滴定标准物。

1 M Tris-HCl (pH7.4，7.6，8.0)组份浓度 1 M Tris-HCl配制量1L配制方法：1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。

EDTA溶液(0.25molL,pH8.0)

北京雷根生物技术有限公司
EDTA 溶液(0.25mol/L,pH8.0)
简介：
EDTA 溶液(0.25mol/L,pH8.0)是用EDTA.2Na 配制，调pH 至8.0，只有其pH 接近8.0，才能完全溶解。

Leagene EDTA 溶液经高压灭菌处理，用于螯合金属离子等，是常用分子生物学试剂。

产品组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、按实验具体要求操作。

注意事项：
1、实验要求无菌时，应注意无菌操作。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期： 12个月有效。

相关：
编号名称 ND0080 Storage EDTA 溶液(0.25mol/L,pH8.0) 500ml RT 使用说明书 1份
编号名称 DH0006 苏木素伊红(HE)染色液 PE0080 Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH6.8) PE0103 Acr-Bis(30%,29:1) PS0013 RIPA 裂解液(强) R00195 Tris-EDTA 缓冲液(10×TE,pH8.0) R00300
X-gal(20mg/ml) TC1213 总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP 单试剂比色法)。

溶液配制

实验室常用缓冲液配置方案1×TE Buffer组成浓度：10mM Tris-HCl 1mM EDTA PH=8.0配制量：500ml配制方法：量取下列溶液于500ml烧杯中1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml0.5M EDTA PH=8.0 1ml向烧杯中加入约400mldd H2O均匀混合；将溶液定容到500ml 后，高温高压灭菌；室温保存.1)1 M Tris-HCl (pH 8.0)组份浓度：1 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 加入42ml浓盐酸调节所需要的pH值。

4. 将溶液定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

15）0.5 M EDTA(pH8.0)组份浓度：0.5 M EDTA配制量：1 L配制方法：称取186.1 g Na2EDTA·2H2O，置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌。

3. 用NaOH调节pH值至8.0（约20 g NaOH)。

注意：pH值至8.0时，EDTA才能完全溶解。

4. 加去离子水将溶液定容至1 L。

5. 适量分成小份后，高温高压灭菌。

6. 室温保存。

实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：1 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量121.1 g Tris 置于1 L 烧杯中。

2. 加入约800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH 值。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH 值，因为Tris 溶液的pH 值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH 值大约降低0.03个单位。

2)10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量：1 L配制方法：3. 将溶液定容至1 L 后，高温高压灭菌。

Tris是什么

Tris是什么？有什么作用？Tris-HCl，Tris-EDTA如何配制？Tris：三羟甲基氨基甲烷三羟甲基氨基甲烷（Tris(hydroxymethyl)aminomethane，一般简称为Tris）是一种有机化合物，其分子式为(HOCH2)3CNH2。

Tris被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备。

例如，在生物化学实验中常用的TAE和TBE缓冲液（用于核酸的溶解）都需要用到Tris。

由于它含有氨基因此可以与醛发生缩合反应Tris为弱碱，在室温（25℃下，它的pKa为8.1；根据缓冲理论，Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。

Tris碱的水溶液pH在10.5左右，一般加入盐酸以调节pH值至所需值，即可获得该pH值的缓冲液。

但同时应注意温度对于Tris的pKa的影响。

由于Tris缓冲液为弱碱性溶液，DNA在这样的溶液中会被去质子化，从而提高其溶解性。

人们常常在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”，TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。

如果将调节pH值的酸溶液换成乙酸，则获得“TAE缓冲液”（Tris/Acetate/EDTA），而换成硼酸则获得“TBE缓冲液”（Tris/Borate/EDTA）。

这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。

用途：有机合成中间体。

在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系，稳定电泳过程中的PH值。

在凝胶中也起到稳定PH的作用，只不过是Tris-HCl缓冲体系。

Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂，还有许多重要用途。

Tris被用于不同pH 条件下的蛋白质晶体生长。

Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫（C. elegans核纤层蛋白lamin）的中间纤维的形成。

Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。

此外，Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。

Tris也被用作滴定标准物。

1 M Tris-HCl (pH7.4，7.6，8.0)组份浓度 1 M Tris-HCl 配制量 1L 配制方法：1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。

Tris-EDTA-SDS

缓冲液缓冲溶液（英文：buffer solution）是一种能在加入少量酸或碱和水时大大减低pH变动的溶液。

pH缓冲系统对维持生物的正常pH值和正常生理环境起到重要作用。

多数细胞仅能在很窄的pH范围内进行活动，而且需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化。

在生物体中有三种主要的pH缓冲体系，它们是蛋白质缓冲系统、重碳酸盐缓冲系统以及磷酸盐缓冲系统。

每种缓冲体系所占的分量在各类细胞和器官中是不同的。

在生化研究工作中，常常需要使用缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度。

研究工作的溶液体系pH值的变化往往直接影响到研究工作的成效。

如果“提取酶”实验体系的pH值变动或大幅度变动，酶活性就会下降甚至完全丧失。

所以配制缓冲溶液是一个不可或缺的关键步骤。

常用作缓冲溶液的酸类由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。

生化实验室常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris（三羟甲基氨基甲烷）等系统，生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系，因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值，而是缓冲液中的某种离子。

如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。

硼酸盐：硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。

柠檬酸盐：柠檬酸盐离子容易与钙结合，所以存在有钙离子的情况下不能使用。

磷酸盐：在有些实验，它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物，重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。

而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。

三羟甲基氨基甲烷：它可以和重金属一起作用，但在有些系统中也起抑制作用。

其主要缺点时温度效应。

这点往往被忽视，在室温pH是7.8的Tris缓冲液，4℃时是8.4，37℃时是7.4，因此，4℃配制的缓冲液在37℃进行测量时，其氢离子浓度就增加了10倍。

在pH7.5以下，其缓冲能力极为不理想。

缓冲溶液组成缓冲体系由1、弱酸和它的盐（如HAc---NaAc）2、弱碱和它的盐（NH3.H2O---NH4Cl）3、多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐（如NaH2PO4---Na2HPO4）的水溶液组成。

蛋白实验技术——免疫组化实验步骤

蛋白实验技术——免疫组化实验步骤（一）、仪器设备1. 18cm不锈钢高压锅或电炉或用微波炉。

2. 水浴锅。

（二）、试剂1. PBS缓冲液（ph7.2―7.4）：NaC137mmol/L，KCl2.7mmol/L ，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L。

2．0.01mol/L柠檬酸钠缓冲液（CB，ph6.0，1000ml）：柠檬酸三钠3g，柠檬酸0.4g。

3．0.5mol/L EDTA缓冲液（ph8.0）：700ml水中溶解186.1g EDTA& 8226；2H2O，用10mmol/L NaOH调至ph8.0，加水至1000ml。

4. 1mol/L的TBS缓冲液（ph8.0）：在800ml水中溶解121gTris 碱，用1N的HCl调至ph8.0，加水1000ml。

5. 酶消化液：a. 0.1%胰蛋白酶：用0.1%CaCl 12(ph7.8)配制。

b.0.4%胃蛋白酶液：用0.1N的HCl配制。

6. 3%甲醇―H2O2溶液：用30%H2O2和80%甲醇溶液配制。

7.风裱剂：a. 甘油和0.5mmol/L碳酸盐缓冲液（ph9.0–9.5）等量混合 b 油和TBS（PBS）配制。

8．TBS/PBS PH9.0–9.5，适用于荧光纤维镜标本；ph7.0-7.4适合光学纤维标本。

（三）、操作流程1、脱蜡和水化：脱蜡前应将组织芯片在室温中放置60分钟或60℃恒温箱中烘烤20分钟。

a 组织芯片置于二甲苯中浸泡10分钟,更换二甲苯后在浸泡10分钟b 无水乙醇中浸泡五分钟c 95%乙醇中浸泡五分钟d 75%乙醇中浸泡五分钟2、抗原修复：用于福尔马林固定的石蜡包埋组织芯片：A 抗原热修复a 高压热修复：在沸水中加入EDTA(ph8.0)或0.01m枸橼酸钠缓冲溶液（ph6.0）.盖上不锈钢锅盖，但不能锁定。

将玻片置于金属染色加上，缓慢加压，是玻片在缓冲液中浸泡五分钟，然后将盖子锁定，小阀门将会升起来。

各种缓冲液的配制方法

各种缓冲液的配制方法
缓冲液是指在化学实验或生物学实验中，为了稳定反应介质，保持反应环境不变，在
浓度比较小的溶液中加入一定量的弱酸、弱碱、盐类或其他缓冲剂来维持溶液的酸碱度，
以达到保持反应的稳定性和准确性的目的。

因此，缓冲液在各类实验技术中都发挥着非常
重要的作用。

以下是各种缓冲液的配制方法。

一、PBS缓冲液（磷酸盐缓冲盐水）
1、配制PBS缓冲液，准备好以下试剂：
10×PBS缓冲液：NaCl 80 g，KCl 2 g，Na2HPO4 14.4 g，KH2PO4 2.4 g。

用蒸馏水调节至1 L。

2、按照以下比例制备：
0.5×PBS缓冲液：10×PBS 50 mL，蒸馏水450 mL，混合搅拌均匀即可。

二、TE缓冲液
Tris-HCl pH8.0 10 mM，EDTA pH8.0 1 mM。

Tris-HCl pH7.4，Tris-HCl pH8.0，Tris-Cl pH8.0，Tris-HCl pH8.3，Tris-HCl pH8.5，Tris-HCl pH8.8，Tris-HCl pH9.5
Tris-HCl pH8.5：Tris 7.4 g，NaCl 8.8 g，HCl 2 mL，蒸馏水至1 L。

MES 20 mM，NaOH 0.5 M，NaCl 100 mM。

七、HEPES缓冲液
HEPES 1 M，NaOH。

HEPES缓冲液：HEPES 1 M约5 mL，NaOH 2 M溶液若干，蒸馏水至100 mL。

EDTA溶液(0.25molL,pH8.0)

北京雷根生物技术有限公司
EDTA 溶液(0.25mol/L,pH8.0)
简介：
EDTA 溶液(0.25mol/L,pH8.0)是用EDTA.2Na 配制，调pH 至8.0，只有其pH 接近8.0，才能完全溶解。

Leagene EDTA 溶液经高压灭菌处理，用于螯合金属离子等，是常用分子生物学试剂。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、按实验具体要求操作。

注意事项：
1、实验要求无菌时，应注意无菌操作。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期： 12个月有效。

相关：
编号名称 ND0080 Storage EDTA 溶液(0.25mol/L,pH8.0) 500ml RT 使用说明书 1份
编号名称 DH0006 苏木素伊红(HE)染色液 PE0080 Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH6.8) PE0103 Acr-Bis(30%,29:1) PS0013 RIPA 裂解液(强) R00195 Tris-EDTA 缓冲液(10×TE,pH8.0) R00300
X-gal(20mg/ml) TC1213 总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP 单试剂比色法)。

溶液配制

0.5mol/L EDTA: 配制等摩尔的 Na2EDTA 和 NaOH 溶液（ 0.5mol/L ），混合后形成 EDTA 的三钠盐。或称取
186.1g 的 Na2EDTA· 2H2O 和 20g 的 NaOH ，并溶于水中，定容至 1L 。
一 .常用贮液与溶液
1mol/L 亚精胺（Spermidine ）: 溶解 2.55g 亚精胺于足量的水中，使终体积为 10ml 。分装成小份贮存于 -20℃。 1mol/L 精胺（ Spermine ）：溶解 3.48g 精胺于足量的水中，使终体积为 10ml 。分装成小份贮存于 -20 ℃。 10mol/L 乙酸胺（ ammonium acetate ）：将 77.1g 乙酸胺溶解于水中，加水定容至 1L 后，用 0.22um 孔径的滤膜过滤除菌。 10mg/ml 牛血清蛋白 (BSA ）：加 100mg 的牛血清蛋白（组分 V 或分子生物学试剂级，无 DNA 酶）于 9.5ml 水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到 10ml ，然后分装成小份贮存于 -20 ℃。 1mol/L 二硫苏糖醇（ DTT ）：在二硫苏糖醇 5g 的原装瓶中加 32.4ml 水，分成小份贮存于 -20℃。或转移 100mg 的二硫苏糖醇至微量离心管，加 0.65ml 的水配制成 1mol/L 二硫苏糖醇溶液。
4)3 M 醋酸钠 (pH5.2) 组份浓度： 3M 醋酸钠
配制量： 100ml 配制方法：
1.称量 40.8g NaAc ·3H 2O 置于 100-200ml 烧杯中，加入月 40ml 的去离子水搅拌溶解 2.加入冰醋酸调节 pH 值至 5.2
3.加去离子水将溶液定容至 100ml 4 高温高压灭菌后，室温保存。 5)PBS Buffer 组份浓度： 137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4

溶液配制

（11×TE Buffer组成浓度：10mM Tris-HCl 1mM EDTA PH=8.0配制量：500ml配制方法：量取下列溶液于500ml烧杯中1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml0.5M EDTA PH=8.0 1ml向烧杯中加入约400mldd H2O均匀混合；将溶液定容到500ml后，调节pH值=8.0，高温高压灭菌；室温保存.（2组份浓度：0.5 M EDTA配制量：1L配制方法：1. 称取186.1g Na2EDTA&#8226;2H2O，置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌。

3. 用NaOH调节pH值值8.0（约20g NaOH）。

注意：pH值至8.0时，EDTA才能完全溶解。

4. 加去离子水将溶液定容至1L。

5. 适量分成小份后，高温高压灭菌。

6. 室温保存。

（3配制1L溶液各成分的用量445 mmol/L Tris碱54g445 mmol/L 硼酸盐 27.5g0.5 mol/L EDTA（0.5M EDTA pH8.0) 20 ml水1L（4公式：5×（TBE）+水=0.5×（TBE）5×（TBE）50ml+水450ml=0.5×（TBE）（5）10mg/ml的溴化乙锭（EB）小心称取1g溴化乙锭，转移到广口瓶中，加100ml水，用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。

用铝箔包裹装液管，于4℃贮存。

溶解引物首先需要离心,然后慢慢打开管盖,溶解时请加需要量的水后盖上盖子, 上下充分震荡10min 1．Oligo DNA是以OD260单位来计算的，这是指在1ml体积1cm光程标准比色皿中，260nm 波长下吸光度为1A260的Oligo溶液定义为1 OD260单位，根据此定义，1 OD260单位相当于33μg的Oligo DNA，您可以根据此数据和您的Oligo DNA分子量，计算得到摩尔数以计算不同摩尔浓度的溶液。

Tris-EDTA(1XTE pH8.0)

北京雷根生物技术有限公司
Tris-EDTA缓冲液(1×TE,pH8.0)
产品简介：
Tris-EDTA缓冲液简称TE, 即Tris-EDTA buffer(10mM Tris，1mM EDTA，pH8.0)，常用分子生物学试剂，用于溶解DNA、保存DNA等。

其主要原理是溶液中的金属离子溶液破坏DNA，而EDTA可以螯合金属离子，以达到保护DNA的目的。

该试剂经高压灭菌处理。

产品组成：
操作步骤（仅供参考）：
1、依据具体实验要求。

注意事项：
1、如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。

2、注意无菌操作。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：12个月有效。

相关产品：
产品编号产品名称
CC0005磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁)
CC0023D-Hanks平衡盐溶液(1×,无酚红)
CC0065HEPES溶液(1mol/L,pH7.4)
CS0001ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)
R00017EDTA溶液(0.5mol/L,pH8.0)
R00067MES buffer(0.1mol/L,pH5.5)
R00195Tris-EDTA缓冲液(10×TE,pH8.0)。

te缓冲液

te缓冲液1. 简介TE缓冲液是一种常用于核酸研究中的缓冲液。

TE缓冲液的全称为Tris-EDTA 缓冲液，其中Tris是三羟甲基氨基甲烷（Tris(hydroxymethyl)aminomethane），EDTA是乙二胺四乙酸（Ethylenediaminetetraacetic Acid）的缩写。

TE缓冲液常被用于核酸的储存、稀释和DNA的电泳分析。

2. 组成TE缓冲液的组成为：•10mM Tris-Cl•1mM EDTA3. 功能TE缓冲液具备以下功能：•维持等电点：TE缓冲液的pH值约为8.0，可在理想pH范围内维持核酸的等电点，保持其稳定性。

•稀释和储存：由于TE缓冲液中的EDTA可以与金属离子结合，阻止金属离子的催化作用，因此经TE缓冲液稀释储存的核酸可以减少降解和酶催化反应的发生。

•DNA电泳：TE缓冲液可用于DNA电泳分析，使DNA保持在双链状态，减少DNA降解和断裂。

4. 制备方法制备TE缓冲液的步骤如下：1.加入800mL去离子水或蒸馏水到一个无菌的容器中。

2.加入6.06g Tris-Cl固体，搅拌至完全溶解。

3.加入0.372g EDTA固体，搅拌至完全溶解。

4.调节pH值至8.0，可以用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)进行调节。

5.加入去离子水或蒸馏水直至总体积为1L。

6.混匀，用0.2μm滤器过滤消除杂质，得到TE缓冲液。

5. 注意事项在制备和使用TE缓冲液时，需要注意以下事项：•使用无菌的实验室器具、试剂和培养基。

•严格遵循实验室的安全操作规程，避免对人身和环境造成伤害。

•储存TE缓冲液时，使用无菌密封容器，避免污染和杂质的进入。

•注意TE缓冲液的pH值，需要在8.0附近，可以使用pH计进行测量和调节。

•TE缓冲液供实验使用前，需要用0.2μm滤器过滤消除杂质。

6. 结论TE缓冲液是核酸研究中必备的一种缓冲液，具备维持核酸稳定性、稀释储存和DNA电泳的功能。

在制备和使用TE缓冲液时，需要注意无菌操作、安全操作和pH值的调节。

常用溶液的配制

常用溶液的配制本文为您带来分子生物学实验中常用溶液的配制方法（详细配方请参阅对应编号的具体配制方法）：1. 1 mol/LTris-HCl 溶液（pH 8.0）2. 50 mmol/LTris-HCl 溶液（pH 8.0）3. 0.5 mol/LEDTA 溶液（pH 8.0）4. TE 缓冲液（10 mmol/L Tris，1 mmol/L EDTA，pH 8.0）5. 20 mg/mL 蛋白酶 K6. 5 mol/LNaCl 溶液7. CTAB/NaCl溶液（0.7 mol/LNaCl，10％CTAB）8. 3 mol/L 乙酸钠溶液（pH 5.2）9. 苯酚/氯仿/异戊醇（PCI，25∶24∶1）10. 氯仿/异戊醇11. 0.1 mol/L CaCl2 溶液12. 0.5 mol/L CaCl2 溶液13. 氨苄青霉素（Amp）储存液（100 mg/mL）14. 羧苄青霉素（Car）储存液（100 mg/mL）15. IPTG 储存液（100 mmol/L）16. X-gal 贮备液17. 10% SDS 溶液18. 10% 过硫酸胺（APS）19. 50 × TAE电泳缓冲液20. SDS-PAGE 蛋白电泳试剂1). 30% 聚丙烯酰胺溶液2). 2 ×加样缓冲液3). 蛋白电泳缓冲液（4 ×）4). 4 ×分离胶缓冲液5). 4 ×浓缩胶缓冲液6). 染色液21. ELISA 分析试剂1). 包被缓冲液（0.1 mol/L Na2CO3，0.1 mol/L NaHCO3，pH 9.6）2). 磷酸盐缓冲液（10 × PBS）（1.37 mol/L NaCl，0.027 mol/L KCl，0.1 mol/L Na2HPO4，0.02 mol/L KH2PO4，pH 7.4）3). 洗涤液 PBST（PBS，0.1% Tween-20）4). 封闭液（PBST，5% BSA）5). 稀释液（PBST，1% BSA）6). 反应终止液22. Western blot 试剂1). 转印缓冲液（10 ×）（1.92 mol/L 甘氨酸，0.25 mol/L Tris，pH 8.3）2). 磷酸盐缓冲液（10 × PBS）（1.37 mol/L NaCl，0.027 mol/L KCl，0.1 mol/L Na2HPO4，0.02 mol/L KH2PO4，pH 7.4）具体配制方法如下：1. 1 mol/LTris-HCl 溶液（pH 8.0）：称取 12.191 g Tris，溶于 80 mL 双蒸水中，用浓盐酸调pH 8.0，定容至 100 mL，高压灭菌 15 min，室温保存。

缓冲液的配制方法

核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法之迟辟智美创作50×TAE Buffer (pH8.5)组份浓度 2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂，置于1 L烧杯中.2..3.加入57.1 ml的乙酸，充沛搅拌.4.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保管.10×TBE Buffer (pH8.3)组份浓度 890 mM Tris-硼酸，20 mM EDTA配制量 1 L配制方法 l.称量下列试剂，置于l L烧杯中.2..3.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保管.10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度 200 rnM MOPS，20 mM NaOAc，10 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称41.8 g MOPS，置于1 L烧杯中.2.加约700 ml DEPC处置水，搅拌溶解.3.使用2 N NaOH调节pH值至7.0.4.再向溶液中加入下列试剂.5.用6.用0.45 m滤膜过滤除去杂质.7.室温避光保管.注：溶液见光或高温灭菌后会变黄.变黄时也可使用，但变黑时不要使用.溴乙锭 (10 mg/ml)组份浓度 10 mg/ml溴乙锭配制量 100 ml配制方法 1.称量1 g溴乙锭，加入到100 ml容器中.2.加入去离子水100 ml，充沛搅拌数h完全溶解溴乙锭.3.将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保管.4.溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml.注意：溴乙锭是一种致癌物质，必需小心把持.Agarose凝胶配制方法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是0.5×TBE或1×TAE).2.根椐制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中.3.加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超越锥形瓶的50%容量).注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必需统一.4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜，并在膜上扎些小孔，然后在微波炉中加热熔化琼脂糖.加热过程中，当溶液沸腾后，请戴上防热手套.小心摇动锥形瓶.使琼脂糖充沛均匀熔化.此把持重复数次，直至琼脂糖完全熔化.必需注意，在微波炉中加热时间不宜过长，每次当溶液起泡沸腾时停止加热，否则会引起溶液过热暴沸，造成琼脂糖凝胶浓度禁绝，也会损坏微波炉.熔化琼脂糖时，必需保证琼脂糖充沛完全熔化，否则，会造成电泳图像模糊不清.5.使溶液冷却至60℃左右，如需要可在此时加入溴乙锭溶液(终浓度0.5 µg/ml).并充沛混匀.注：溴乙锭是一种致癌物质.使用含有溴乙锭的溶液时，请戴好手套.6.将琼脂糖溶液倒入制胶模中，然后在适当位置处插上梳子.凝胶厚度一般在3~5 min之间.7.在室温下使胶凝固(年夜约30 min~1 h)，然后放置于电泳槽中进行电泳.注：凝胶不立即使用时，请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保管，一般可保管2~5天.琼脂糖凝胶浓度与线形DNA的最佳分辨范围6×组份浓度配制量配制方法 1.称量下列试剂，置于500 ml烧杯中.2..3.加入180 ml的甘油(Glycerol)后，使用2 N NaOH调节pH值至7.0.4.用去离子水定容至500 ml后，室温保管.10 × Loadlng Buffer(RNA电泳用)组份浓度配制置配制方法 1.称量下列试剂，置于10 ml离心管中.2..3.加入5 ml的甘油(Glycerol)后，充沛混匀.10 ml后，室温保管.四、核酸、卵白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法20×SSC组份浓度 3.0 M NaCl，0.3 MNa3citrate·2H2O(柠檬酸钠)配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂，置于l L烧杯中.2..3滴加14 N HCl，调节pH值至7.0后，加去离子水将溶液定容至1 L.4.高温高压灭菌后，室温保管.20×SSPE Buffer组份浓度 3.0 M NaCl，0.2 M NaH2PO4，0.02 M EDTA配制方法 1.称量下列试剂，置于l L 烧杯中.2..3.加NaOH 调节pH 值至7.4(约6.5 ml 的10 N NaOH).4.加去离子水将溶液定容至l L.5.高温高压灭菌后，室温保管. 50 X Denhardt’S 溶液组份浓度 500 ml配制量配制方法 1.称量下列试500 ml 烧杯中. 剂，置于 2.加去离子水约400 ml ，充沛搅拌溶解3.加去离子水将溶液定容至500 ml.4.用0.45µm 滤膜过滤后，分装成每份25 ml. 5.-20℃保管. 0.5 M 磷酸盐Buffer组份浓度 0.5 M Na 2HPO 4. 配制量 l L配制方法 1.称量134 g Na 2HPO 4·7H 2O 置于l L 烧杯中. 2.加入约800 ml 的去离子水充沛搅拌溶解.3.加入85%的H 3PO 4(浓磷酸)调节溶液pH 值至7.2.4.加去离子水定容至1 L.5.高温高压灭菌后，室温保管. Salmon DNA (鲑鱼精DNA)组份浓度 10 mg/ml Salmon DNA 配制量约100 ml配制方法 1.称取鲑鱼精DNA 2 g 置于500 ml 烧杯中，加入约200 ml 的TE Buffer.2用磁力搅拌器室温搅拌2~4h ，溶解后加入4 ml 的5 M NaCl ，使其终浓度为0.1 M.3.用苯酚和苯酚/氯仿各抽提1次.4.回收水相溶液后，使用17号皮下注射针头快速吸打溶液约20次，以切断DNA.5.加入2倍体积的预冷乙醇进行乙醇沉淀.6.离心回收DNA 后，溶解于100 ml 的去离子水中.测定溶液的OD 260值.7.计算溶液的DNA 浓度后，稀释DNA 溶液至10 mg/ml. 8.煮沸10min 后，分装成小份(1 ml/份).-20℃保管. 9.使用前在沸水浴中加热5min 后，迅速冰浴冷却. DNA 变性缓冲液组份浓度 1.5 M NaCl ，0.5 M NaOH 配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂，置于l L 烧杯中.2..3.加去离子水将溶液定容至l L 后，室温保管. 预杂交液/杂交液(DNA 杂交用) 组份浓度配制置 100 ml 配制方法 1.称量下列试200 ml 烧杯中.剂，置于2.充沛混匀后，使用0.45µm 滤膜滤去杂质后使用.预杂交液/杂交液(RNA 杂交用) 组份浓度配制量 100 mL 配制方法 1.称量下列试200 ml 烧杯中. 剂，置于2.充沛混匀后，使用0.45µm 滤膜滤去杂质后使用.膜转移缓冲液(Western杂交用)组份浓度 39 mM Glycine，48 mM Tris，0.037%(W/V)SDS，20%(V/V)甲醇配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂，置于l L烧杯中.2..3.加去离子水将溶液定溶至800 ml后，加入200 ml的甲醇.4.室温保管.TBST Buffer(Western杂交膜清洗液)组份浓度 20 mM Tris-HCl，150 mM NaCl，0.05%(V/V)Tween 20配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂，置于l L烧杯中.2...5 ml Tween 20后充沛混匀.4.加去离子水将溶液定容至l L后，4℃保管.封闭缓冲液(Western杂交用)组份浓度 5%(W/V)脱脂奶粉/TBST Buffer配制量 100 ml配制方法 1.称5 g脱脂奶粉加入到100 mlTBST Buffer中，充沛搅拌溶解.2.4℃保管待用(本封闭液应该现配现用).五、实验室经常使用培养基的配制方法Ampicillin(氨卡青霉素)(100 mg/ml)组份浓度 100 mg/ml Ampicillin配制量 50 ml配制方法 1.称量5 g Ampicillin置于50 ml离心管中.2.加入40 ml灭菌水，充沛混合溶解后，定容至50 ml.3.用0.22 µm过滤膜过滤除菌.4.小份分装(1 ml/份)后，-20℃保管.IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)(24 mg/ml)组份浓度 24 mg/mL IPTG配制量 50 mL配制方法 1.称1.2 g IPTG置于50 ml离心管中.2.加入40 ml灭菌水，充沛混合溶解后，定容至50 ml.3.用0 22 µm过滤膜过滤除菌.4小份分装(1 ml，份)后，-20℃保管.X-Gal (20 mg/ml)组份浓度 20 mg/ml X-Gal配制量 50 ml配制方法 1.称量l g X-Gal置于50 ml离心管中.2.加入40 ml DMF(二甲基甲酰胺)，充沛混合溶解后，定容至50 ml.3.小份分装(1 ml/份)后，-20℃避光保管.LB培养基组份浓度 1%(W/V)Tryptone(胰卵白胨)，0.5%(W/V)Yeast Extract(酵母提取物)，1%(W/V)NaCl配制量 1 L配制方法 1.称取下列试剂，置于l L烧杯中.2.3.滴加5 N NaOH(约0.2 m1)，调节pH值至7.0.4.加去离子水将培养基定容至1 L.5高温高压灭菌后，4.C保管.LB/Amp培养基组份浓度配制量配制方法 1.称取下列试剂，置于l L烧杯中.2.3.滴加5 N NaOH(约0.2 mL).调节pH值至7.0.4.加去离子水将培养基定容至1 L.5.高温高压灭菌后，冷却至室温.6.加入1 ml Ampicillin(100 mg/ml)后均匀混合.7.4℃保管. TB 培养基组份浓度配制方法 1.配制磷酸盐(0.17 M缓；中液KH 2PO4，0.72 M K 2HPO 4)100 ml.溶解2.31 g KH 2PO 4和l2.54 g K 2HPO 4于90 ml 的去离子水中，搅拌溶解后，加去离子水定容至100 ml ，高温高压灭菌.2.称取下列试剂，置于l L 烧杯中.3.4.加去离子水将培养基定容至1 L 后，高温高压灭菌.5.待溶液冷却至60℃以下时，；加入100 ml 的上述灭菌磷酸盐缓冲液.6.4℃保管.TB/Amp 培养基组份浓度配制量配制方法 1.配制磷酸盐缓冲液(0.17 M KH 2PO 4，0.72 M K 2HPO 4)100 ml.溶解2.31 g KH 2PO 4,和12.54g K 2HPO 4于90 ml 的去离子水中，搅拌溶解后，加去离子水定容至100 ml ，高温高压灭菌.2.称取下列试剂，置于l L 烧杯中.。

DNA的提取与保存方法

1．-20度冻存1年是没有问题的，当然越低越好。

但是冻存后，用蛋白酶K法，红细胞不易裂解，必须采用特殊方法裂解。

2．建议裂解红细胞后再冻存于－80度。

因为冻融后红细胞会裂解，而且红细胞会增加蛋白污染，影响DNA抽提3．我们实验室加ACD抗凝血液，保存3年了，抽提DNA没问题（我们是先离心后分层保存，以便后续试验）！血DNA提取技术分离外周血白细胞提取方法：试验步骤：1、取人肘静脉血5ml，EDTA抗凝，2500rpm离心10min。

2、小心吸取上层血浆，分装到3个0.5ml离心管中。

3、在血细胞中加入3倍体积的溶血液，摇匀，冰浴15min。

4、2500rpm离心10min，弃上清。

5、加入10ml溶血液，摇匀，冰浴15min。

6、3000rpm离心10min，弃上清。

7、倒置离心管，去掉残液。

8、得白细胞，－80?C冻存。

试验要求：血至分离白细胞之间隔时间在室温下放置不超过2h，4℃放置不超过5h，以防白细胞自溶。

氯仿法抽提外周血白细胞基因组DNA：试验试剂：Ligsisbuffer：133mMNH4ClNHCl7.12g0.9mMNH4HCO3NH4HCO30.071g0.1mMEDTA0.5mMEDTA0.2ml；最后加灭菌去离子水至1000ml，高压灭菌。

ACD抗凝剂：柠檬酸1.68g柠檬酸钠4.62g葡萄糖5.15g；最后加灭菌去离子水至350ml，高压灭菌。

提取缓冲液（Extractionbuffer）：10mMTrisCl(PH=8.0)1MTris.Cl(PH=8.0)1ml0.1mMEDTA(PH=8.0)0.5mMEDTA(PH=8.0)20ml0 .5%SDS10%SDS0.5ml；最后加灭菌去离子水至100ml，高压灭菌试验步骤：1、在500μl抗凝血中加入ligsisbuffer1000μl，充分颠混至清亮。

以4000rpm，离心5min。

弃上清液。

2、沉淀中加入ligsisbuffer1500μl，充分匀浆。