MEIA法与ELISA法检测26例血清HBsAg和HBeAg的比较

・医学检验・２００８年１２月第５卷第３６期ＭＥＩＡ法与ＥＬＩＳＡ法检测２６例血清ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的比较李梦华（辽宁省大连市第六人民医院检验科。

辽宁大连１１６０００）【摘要】目的：比较微粒子酶免疫分析法（ＭＥＩＡ）与酶联免疫吸附试验（ＥｕＳＡ）法检测血清ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的差异。

方法：选择２６例经ＥＵＳＡ法检测已确定乙肝五项中ＨＢｓＡｇ阴性而ＨＢｅＡｇ和ＨＢｃＡｂ阳性（其中７例ＨＢｓＡｂ阳性）的患者血清，应用ＭＥＩＡ法再次检测乙肝五项。

结果：ＭＥＩＡ法检测结果显示．２１例患者血清ＨＢｓＡｇ呈现阳性（其中６例ＨＢｓＡｂ阳性），ｌ例患者血清ＨＢｓＡ只仍呈现阴性（其ＨＢ８Ａｂ阳性），４例患者血清ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅ鲰均呈现阴性。

结论：ＭＥＩＡ法可减少假阴性、假阳性的发生．优于ＥＵＳＡ法。

【关键词】酶联免疫吸附试验；微粒子酶免疫分析法；肝炎病毒乙型；假阴性；假阳性【中图分类号】Ｒ４４６．６２【文献标识码】Ｂ【文章编号１１６７３—７２１０【２００８）１２（ｃ）一０８０—０２ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＭＥＩＡｍｅｔｈｏｄｖｅｒｓ璐ＥＬＩＳＡｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｎｇｏｆＨＢｓＡｇａｎｄＨＢｅＡｇｉｎｔｈｅｓｅｍｍｓａｍｐｌｅｓｆｈｍ２６ｐａｔｉｅｎｔｓ￡，胁，ｌｇ＿＾∞（ＤｅｐａＪｔｍｅｎ￡ｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＩａｂｏ阳ｌｏｒｙ，ｔ１１ｅＳｉｘ￡ｌｌＰｅｏｐｌｅ，ｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＤａｌｉ粕，Ｄａｌｉ卸１１６０００，Ｃｂｉｎａ）【Ａｂｓｔｎ州Ｏｂｊ优ｔｉｖｅ：Ｔｏｃｏｍｐａｒｅｔｈｅｐｅ而兀ｒＩ舳ｃｅｏｆＭＥＩＡｍｅｔｈｏｄ锄ｄＥＬＩＳＡｍｅｔｈｏｄｂｙｄｅｔｅｃｔｉｎｇＨＢｓＡｇ柚ｄＨＢｅＡｇｉｎｓｅｍｍｓ删ｐｌｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：２６ｓｅｎｌｍｓ啪ｐｌｅ８ｗｈｉｃｈｈａｄｓｈｏｗｎＨＢｓＡｇｎｅｇａｔｉｖｅｗｈｉｌｅＨＢｅＡｇ锄ｄＨＢｃＡｂｐ０８ｉ—ｔｉｖｅ（７姗ｐｌｅｓｏｆｔｈｅｍｗｅｒｅＨＢｓＡｂｐｏｓｉｔｉＶｅ）ｃｏｌｌｆｉ彻ｅｄｂｙＥＬＩＳＡｍｅｔｈｏｄｗｅｒｅｒｅ—ｔｅｓｔｅｄｗｉｔｌｌＭＥＩＡｍｅｔｈｏｄ．Ｒ咖ｌｔｓ：２１ｓ舢ｐｌｅ８８ｈｏｗｅｄＨＢｓＡｇｐｏｓｉｔｉｖｅ（６ｓａｍｐｌｅｓｏｆｌｈｅｍｗｅｒｅＨＢｓＡｂｐｏｓｊｔｊＶｅ），１ｓ鲫ｐＪｅｓｔｊ】１ｓｈｏｗｅｄＨＢｓＡｇｎｅｇａｔｉＶｅ（ＨＢｓ仙ｗａｓｐ０８ｉｔｉｖｅ），帅ｄ４ｓ啪ｐｌｅｓ８ｈｏｗｗｅｄｂｏｔｈＨＢｓＡｇａｎｄＨＢｅＡｇｎｅｇａｔｉｖｅ．Ｃ仰ｃｌ吣ｉ佃：ＭＥＩＡ眦山０ｄｉ８ｍｏｒｅｐｒｅｃｉ眈ｌｈ明ＥＵＳＡｍｅｔｈｏｄｄｕｅｔｏｉｔｓｌｅｓｓｉｎｃｉｄｅｎｃｅｓｉｎ甜ｓｅｐｏｓｉｔｉＶｅ帅ｄ脚８ｅｎｅｇａｔｉＶｅ．【ＫｅｙｗｏＨｌｓ】ＥＵＳＡ；ＭＥＩＡ；ＨＢＶ；Ｆａｌｓｅｎｅｇａ“ｖｉｔｙ；Ｆａｌｓｅｐｏｓｉｔｉ“ｔｙ乙型病毒性肝炎（乙肝）是我国目前流行最广泛、危害最严重的病毒性肝炎『１１。

酶联免疫吸附试验（ＥＵＳＡ）是目前最常用的检测乙型肝炎病毒（ＨＢｖ）血清标志物的方法，简便易行。

随着检验技术的发展。

目前国际广泛采用的先进的定量检测乙肝五项的技术是微粒子酶免疫分析法（ＭＥＩＡ），美国雅培（Ａｂｂｏｔｔ）公司生产的ＡＸＳＹＭ・ＳＹＳＴＥＭ全自动免疫分析仪就是采用这种技术检测乙肝五项指标。

在同前实际工作中，采用常规ＥＬＩＳＡ法会见到某些少见的检测模式，存在假阴性和假阳性的可能性，导致错误的ｆ临床结果，现将工作中遇到的２６例ＥＵＳＡ法检测到的ＨＢｓＡｇ阴性，ＨＢｅＡｇ和ＨＢｃＡｂ阳性（其中７例ＨＢｓＡｂ阳性）结果，用ＭＥＬＡ法重新检测，结果报道如下：１材料与方法１．１标本来源２６份经ＥＵＳＡ法检测ＨＢｓＡｇ阴性、ＨＢｅＡｇ和ＨＢｃＡｂ阳性（其中７例ＨＢｓＡｂ阳性）血清标本。

－１．２仪器与试剂１．２．１仪器ＡＸＳＹＭ－ＳＹｓｒｒＥＭ全自动免疫分析仪。

由美国雅培ｆＡｂｂｏｎ）公司生产。

ＲＴ一２１００Ｃ酶标仪和ＲＴ一２６００ｌＣ全自动洗板机．由深圳雷杜生命科学股份有限公司生产。

１．２．２试剂ＭＥＩＡ法试剂均由美国雅培（Ａｂｂｏｔｔｌ公司配套提供。

ＥＵＳＡ法试剂为潍坊三维生物工程集团有限公司生产。

∞巾■薯药导曩ＣＨＩＮＡＭＥＤＩＣＡＬＨＥＲＡＬＤ１．３方法ＭＥＩＡ和ＥＵＳＡ法均严格按照仪器的操作规程进行实验，所测结果均由仪器自动完成。

２结果ＭＥＩＡ法检测结果显示，２１例患者血清ＨＢｓＡｇ呈现阳性（其中６例ＨＢｓＡｂ阳性），１例患者血清ＨＢｓＡｇ仍呈现阴性（其ＨＢｓＡｂ阳性），４例患者血清ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ均呈现阴性。

３讨论ＥＬＩＳＡ法由于使用方便．无放射性危害，有较高的敏感性和特异性，是我国临床上检测血清ＨＢＶ标志物最常用的方法田。

ＭＥＩＡ法以玻璃纤维为载体，采用直径５斗ｍ、表面多孔、具有良好亲水性且与水比重相接近的微粒子作为抗体或抗原的附着表面，极大地增加了反应面积，从而提高该方法的灵敏度，并且采用最新的荧光技术．极微的荧光就能被特别的感光结构感应到，使其有更高的灵敏度。

与ＥＬＩＳＡ法相比．ＭＥＩＡ法快速，准确度和灵敏度更高．重复性好，町提供定量检测，由于其高度的敏感性和特异性而成为国际上公认的检测血清ＨＢＶ标志物的标准检测方法咖。

ＥＬＩｓＡ法检测ＨＢｓＡｇ出现假阴性可能原因有：①体内只有少量ＨＢｓＡｇ，一般试剂和方法检测不出ＨＢｓＡｇ。

②由于Ｓ基因变异引起ＨＢｓＡｇ表达和分泌障碍，体内虽存在ＨＢＶ，但血清中测不出ＨＢ８Ａｇ。

③ｓ基因变异后表达ＨＢｓＡｇ万方数据２００８年１２月第５卷第３６期胶体金免疫层析法和ＥＬｌＳＡ法在ＨＢｓＡｇ检测中的方法学评价隋菊英（山东省烟台市心理康复医院，山东莱阳２６５２００）・医学检验・ｆ摘要１目的：对胶体金免疫层析法（ＧＩＣＡ）和ＥＵＳＡ两种方法检测ＨＢｓＡｇ进行方法学比较。

方法：用胶体金纸条和ＥＵＳＡ试剂同时检测ＨＢ８Ａｇ血清标本。

结果：与ＥＵＳＡ相比，胶体金免疫层析法检测ＨＢｓＡｇ的灵敏度为９６％，特异性为１００％。

胶体金免疫层析法与ＥＵＳＡ相比特异性基本一致，但胶体金免疫层析法灵敏度稍差。

结论：ＨＢｓＡｇ胶体金纸条与ＥＵＳＡ试剂相比有较高的特异性，但灵敏度有待于进一步提高。

『关键词１乙型肝炎表面抗原：胶体金免疫层析法；ＥＬＩＳＡ法ｆ中图分类号】Ｒ４４６【文献标识码】Ｂ【文章编号】１６７３－７２１０（２００８）１２（ｃ）一０８１—０２ＥＶａｌｕａｔｉｏｎｏｆｇｏｌｄｉｍｍｕｎｏｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｎｄＥＬＩＳＡａ辎ａｙｆｏｒＨＢｓＡｇｄｅｔｅｃｔｉｏｎＳ们血—∥，ｌｇ“柚ｔａｉＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＰｓｙｃｈｏｌｏ舀ｃａｌＲｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｏｎ，Ｌａｉｙ舳ｇ２６５２００，Ｃｈｉｎａ）【ＡｂＳｔ胎州ｏｂｊｅｃｔｉｗ：Ｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｇｏｌｄｉｍｍｕｎｏｃｈｒｏｍａｔｏｇ阻ｐｈｙ（ＧＩＣＡ）ｓｔｒｉｐ８锄ｄＥＵＳＡａ髓ａｙｆｏｒＨＢｓＡｇｄｅｔｅｃｔｉｏｎ．Ｍ【ｅｔｈｏｄＳ：ＧＩＣＡ８ｔｒｉｐｍｅｔｈｏｄ，鹪ｃｏｍｐａｒｅｄ而ｔｈＥＵＳＡ码ｓａｙ＇ｗ鹳ｕ８ｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔＨＢ８Ａｇｉｎ８ｅｒｕｍｓ唧ｐｌｅ．Ｒｅ娜ｌｔｓ：Ｃｏｍ・ｐａｒｅｄｗｉｔｈＥＵＳＡａｓｓａｙ，ｔｈｅ∞ｎｓｉｔｉｖｉｔｙｏｆＧＩＣＡｆｏｒＨＢ８Ａｇｄｅｔｅｃｔｉ∞ｗ∞９６％，ｔｈｅｓｐｅｃｉｆｉｃ时ｗ∞１００％．ＴｈｅａｂｏＶｅｒｅ。

ｓｕｌｔｓ８ｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｓｐｅｃｉｆｉｃ时ｂｅ卅ｅｅｎＧＩＣＡ柚ｄＥＵＳＡｗ鹪ａｌｍ０８ｔｃｏｉｎｃｉｄｅｎｃｅ，ｂｕｔｔｈｅｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｏｆＧＩＣＡｗ鹊ｓｌｉｇＩｌｔｌｙｌｏｗ屯ｒ．Ｃｏｎｄｌｌｓｉｏｎ：Ｉｎｓｐｉｔｅｏｆ蛐ｅｒｉｍｐｍｖｅｍｅｎｔｏｆｉｔ７８∞ｎ８ｉｔｉｖｉｔｙ，ＧＩＣＡｓｔｒｉｐｓｍｅｔｈｏｄｉ８ｌｉｋｅｌｙｔｏａｃｃｏ耐ｗｉｔｈＥＵＳＡ∞ｓａｙｖｅｒｙｗｅＵ．【Ｋｅｙｗｏｒ凼】Ｈｅｐ“ｔｉｓＢｓｕ出ｃｅ锄ｔｉｇｅｎ；ＧＩＣＡ；ＥＵＳＡ鹊昭ｙ乙型肝炎病毒ｆＨＢｖ）携带者及其慢性持续感染者是乙型肝炎传染的主要来源。

乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）是乙肝的感染指标之一，因此ＨＢｓＡｇ的检查往往是体检的项目之一，对乙肝的预防和治疗具有重要的意义。

目前实验室常用于检测ＨＢｓ觚的方法主要是ＥＬＩｓＡ法，ＥＵＳＡ法能给出半定量结果，但操作复杂费时。

新开发出来的胶体金免疫层析（ＧＩ—ＣＡｌ是２０世纪９０年代国外兴起的一种快速诊断技术，它具有快速检测ＨＢｓ鲰，无需洗涤、终止，操作快速简便等优点，为了更好地了解ＧＩＣＡ法检测ＨＢｓＡ只的效果，本文用ＧＩＣＡ法和ＥＵＳＡ法同时检测我院２００６年１月一２００７年１２月体检及门诊病人４５０例ＨＢｓＡｇ，以评价ＧＩＣＡ法和ＥＵＳＡ法诊断的价值．现报道如下：１材料与方法１．１材料１．１．１实验试剂检测ＨＢｓＡｇ的ＧＩＣＡ试条购于杭州艾康生物技术有限公司。

１．１．２对照试剂ＥＵＳＡ试剂盒由上海实业科华生物技术有限公司出品。

１．１．３质控血清ＨＢｓＡｇ定值质控样品购于全国临床检验中心，含量分别为１、２、５ｎｇ／ｍｌ。

１．１．４酶标仪酶标仪由美国伯乐公司出品。

ＣＯＤＡ型全自动酶免分析仪。

１．１．５病例来源来源于本院２００６年１月一２００７年１２月体检及门诊病人４５０例，其中，男性２１２例，女性２３８例，年龄１１～７４岁，平均３５岁。

抽取静脉血２甜，取２滴全血用于ＧＩＣＡ检测ＨＢｓ鲰，剩余的标本离心取血清用于ＥＵＳＡ检测ＨＢｓＡｇ。

１．２方法１．２．１ＥＬＩＳＡ方法采用双抗体夹心法。

每次检测在加样同时加入卫生部临检中心提供的２ｎ∥Ⅱｌｌ质控血清进行质控，再不能被现行试剂测出。

④ＨＢｓＡｇ和ＨＢｓＡｂ共存，ｓ基因变异改变了ＨＢｓＡｇ抗原结构，使其不能与野毒株ＨＢｓＡｂ反应，两者在同一个体中共存【“。

ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢｅＡｇ出现假阳性可能由于非特异性反应物质存在。

随着临床抗病毒药物治疗乙肝的增多．乙肝检测结果少见模式也增多，ＥＬＩＳＡ法检测出少见模式时难以排除假阴性和假阳性存在的口丁能性。

选用ＭＥｎ法可减少假阴性、假阳性的发生，优于ＥＬＩｓＡ法。

【参考文献】【ｌ】骆抗先．乙型肝炎基础和ｌｆ缶床【Ｍ】．北京：人民卫生出版社，２００１．７—９．【２】黄学忠，林佩佩，陈晓飞．乙型肝炎病毒核酸载量分析与血清标志物检测的应用评价阴．临床和实验医学杂志，２００６，５（４）：３１１．【３】彭仕芳，傅蕾，谭德明，等．ＭＥＩＡ法测定ＨＢＶ血清标志物的临床应用意义叨．中国感染控制杂志’２００ｒ７。

６（３）：１６ｌ—１６３．【４】金兆清，刘长林，刘静．乙型肝炎“二对半”特殊模式分析叨．中国社区医师，２００２，１８（∽：２２．（收稿日期：２００８．０８一１１）ＣＨＩＮＡＭＥＤＩＣＡＬＨＥＲＡＬＤ田■医商异鼻８１万方数据。