血片制作(改)

伊红在水溶液内遇到美兰或天青， 伊红在水溶液内遇到美兰或天青，即可互相化合而产生沈 淀从而失去染色力，因此，吉氏母液绝对不能进水。 淀从而失去染色力，因此，吉氏母液绝对不能进水。
血片的染色 （二）吉氏染液母液配置方法
取吉氏粉0.5克置于研钵中， 取吉氏粉 克置于研钵中， 克置于研钵中 加少量甘油充分研磨，再加再磨， 加少量甘油充分研磨，再加再磨， 毫升加完为止， 至25毫升加完为止，倒入 或 毫升加完为止 倒入60或 材料： 材料： 100毫升带有玻塞的有色玻瓶中。 毫升带有玻塞的有色玻瓶中。 毫升带有玻塞的有色玻瓶中 在研钵中加少量甲醇， 在研钵中加少量甲醇，洗去甘油 1、吉氏粉 克 、吉氏粉0.5克 浓液混入瓶内， 浓液混入瓶内，至25毫升甲醇 毫升甲醇 2、甘油 毫升 、甘油25毫升 洗净钵中甘油染液为止， 洗净钵中甘油染液为止，塞紧瓶 3、甲醇 毫升 、甲醇25毫升 塞，充分摇匀，置于55~60℃ 充分摇匀，置于 ℃ 水浴中或温箱内24小时或室温 水浴中或温箱内 小时或室温 内3~5天，多加摇动，即成原 天 多加摇动， 液。吉氏染液是目前较优良的血 膜染剂，即使在炎热天气中， 膜染剂，即使在炎热天气中，亦 可经久不变。 可经久不变。
涂片操作） 血膜的制作（涂片操作） 涂制厚、 通常是将厚、 涂制厚、薄血膜的位置 通常是将厚、薄血膜 涂在一张载片上。方法是将载片分为6等分 等分， 涂在一张载片上 。 方法是将载片分为 等分 ， 格备贴标签及编号用； 第1、2格备贴标签及编号用；厚血膜涂在第 、 格备贴标签及编号用 厚血膜涂在第3 格中央，薄血膜涂在第4格前缘至第 格中部。 格前缘至第6格中部 格中央，薄血膜涂在第 格前缘至第 格中部。 作为标本的血片每张玻片涂厚、薄血膜各1个 作为标本的血片每张玻片涂厚 、 薄血膜各 个 ； 疟疾调查时， 疟疾调查时，每张玻片 可涂制2~3人血膜。 人血膜。 可涂制 人血膜
血片的染色 （三）吉氏染液血片染色方法
先用甲醇或无水酒精固定薄血膜， 先用甲醇或无水酒精固定薄血膜，待干后进行 染色。 染色。亦可在固定薄血膜后用清水对厚血膜溶脱血红 蛋白，然后才进行染色。 蛋白，然后才进行染色。 成批血片染色： 成批血片染色：将已固定薄血膜的血片插入染 色缸，倒入2%吉氏染液稀释液（2毫升原液加中性 吉氏染液稀释液（ 毫升原液加中性 色缸，倒入 吉氏染液稀释液 蒸馏水98毫升稀释均匀即成），同时对厚薄血膜染 毫升稀释均匀即成）， 蒸馏水 毫升稀释均匀即成），同时对厚薄血膜染 分钟（ 色30分钟（如染液不合标准时，得酌情增减染色时 分钟 如染液不合标准时， ），然后用清水轻轻将染液冲去 然后用清水轻轻将染液冲去， 间），然后用清水轻轻将染液冲去，再用清水轻轻冲 洗一次，干净后将血片标本（血膜面朝下） 洗一次，干净后将血片标本（血膜面朝下）插于晾干 板上，待干镜检。 板上，待干镜检。
血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
注意：蛋白质是二性电解质，当其处于较等电点为酸的溶液时， 注意：蛋白质是二性电解质，当其处于较等电点为酸的溶液中时， 二性电解质 等电点为酸的溶液中时 便呈硷的作用，即与酸或阴离子结合， 便呈硷的作用，即与酸或阴离子结合，这就说明为何在染液偏 酸时，伊红的着色力强， 酸时，伊红的着色力强，使红细胞着色鲜艳而淋巴细胞和原虫 的胞浆着色不著；反之， 的胞浆着色不著；反之，蛋白质在偏硷的溶液中呈酸的作用而 中和硷基，也就说明为何染液偏硷时， 中和硷基，也就说明为何染液偏硷时，红细胞和嗜伊红白细胞 的颗粒等被染成紫兰色。 的颗粒等被染成紫兰色。
制作血膜的注意事项 制作血膜的注意事项 血膜
3. 血膜让其自然干燥，切忌用太阳晒或 血膜让其自然干燥， 火烤，干透后才能用甲醇固定薄血膜。 火烤，干透后才能用甲醇固定薄血膜。 夏天标本尽可能24~48小时内固定染色； 小时内固定染色； 夏天标本尽可能 小时内固定染色 冬天也不能超过72小时 放置时间越久， 小时。 冬天也不能超过 小时。放置时间越久， 厚血膜越不易脱血，染色效果也差。 厚血膜越不易脱血，染色效果也差。若 不能及时染色， 不能及时染色，薄血膜宜先用甲醇固定 分钟） （1~3分钟）然后用过滤清水对厚血膜 分钟 溶血，晾干固定后装入盒内盖严， 溶血，晾干固定后装入盒内盖严，待以 后染色。 后染色。
标本片
标签
血膜的制作
血膜制成后， 血膜编号 血膜制成后，立即用特种 蜡笔或水笔于玻片面上写上受检者的 号码，以防差错， 号码，以防差错，待薄血膜干后再用 铅笔于薄血膜中写上血片种类的代号 和受检者的个人编号， 和受检者的个人编号，依次顺序插入 标本盒内。 标本盒内。
制作血膜的注意事项 制作血膜的注意事项 血膜
血膜的制作（取血操作） 血膜的制作（取血操作）
采血部位一般人为耳垂，指头， 取血方法 采血部位一般人为耳垂，指头， 通常在耳垂取血（ 通常在耳垂取血（现场取血建议用大头针 采血，一人一针，避免血传疾病）。 ）。先用 采血，一人一针，避免血传疾病）。先用 75%酒精棉球消毒取血部位（冬季用手 酒精棉球消毒取血部位（ 酒精棉球消毒取血部位 捻动耳垂使其充血后再行消毒）， ），待酒精 捻动耳垂使其充血后再行消毒），待酒精 干后，用左手拇指和食指紧捏耳垂上方， 干后，用左手拇指和食指紧捏耳垂上方， 右手持消毒针迅速刺入耳垂下端1~2毫米， 毫米， 右手持消毒针迅速刺入耳垂下端 毫米 不宜过深或过浅。 不宜过深或过浅。然后用右手中指轻轻向 挤压出血。 挤压出血。
血片的染色 （三）吉氏染液血片染色方法
先用甲醇或无水酒精固定薄血膜， 先用甲醇或无水酒精固定薄血膜，待干 后进行染色。 后进行染色。亦可在固定薄血膜后用清水对厚 血膜溶脱血红蛋白，然后才进行染色。 血膜溶脱血红蛋白，然后才进行染色。 单张血片染色：薄血膜经固定干燥后， 单张血片染色：薄血膜经固定干燥后， 吉氏染液稀释液1~2毫升，滴入血片 毫升， 用2%吉氏染液稀释液 吉氏染液稀释液 毫升 标本上染色30分钟左右 或用中性蒸馏水1毫 分钟左右， 标本上染色 分钟左右，或用中性蒸馏水 毫 加吉氏母液1~2滴，混合均匀后滴入血 升，加吉氏母液 滴 片标本上，染色10~20分钟，然后用清水轻 分钟， 片标本上，染色 分钟 轻将片上的染液冲洗干净，晾干镜检。 轻将片上的染液冲洗干净，晾干镜检。
血片制作染色与疟原虫计数
血膜的制作 用于检查疟原虫的血涂片有两种： 用于检查疟原虫的血涂片有两种：一种是将血液涂 呈薄膜状，称薄血膜；一种是血液涂成圆盘，称 一种是血液涂成圆盘， 呈薄膜状，
厚血膜。薄血膜上的血细胞要求平辅在玻片上面。 薄血膜上的血细胞要求平辅在玻片上面。
标本片 发热病人血片
血膜的制作（取血时间） 血膜的制作（取血时间）
1. 玻片清洗时，避免玻片碰撞、
磨损。制作血膜的载玻片必须完 全清洁而毫无油渍或污垢。制片 时，手指只能持载片的边缘，不 能接触玻片表面，以免油污使薄 血膜产生空白区以及厚血膜脱落。 作为推片的玻片边缘一定要平滑， 才能使推出的血膜均匀一致。
制作血膜的注意事项 制作血膜的注意事项 血膜
2. 刚涂制的血膜要平放在标本盒内，厚血膜 刚涂制的血膜要平放在标本盒内， 未干前勿使标本盒倾斜，以免血膜倾向一侧， 未干前勿使标本盒倾斜，以免血膜倾向一侧， 造成血膜厚薄不均， 造成血膜厚薄不均，厚处不一溶血和着色而影 响检查结果；晾干血膜时应注意防尘、 响检查结果；晾干血膜时应注意防尘、防止苍 蟑螂等昆虫吮吸血膜， 蝇、蟑螂等昆虫吮吸血膜，干后应及时装入标 本盒并盖严， 本盒并盖严，新的木制标本盒需敞开放置一段 时间，让木醇挥发后才能使用， 时间，让木醇挥发后才能使用，以免厚血膜红 蛋白被其固定，不能溶血或染色效果不佳。 蛋白被其固定，不能溶血或染色效果不佳。
血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
染色原理： 染色原理：美兰与伊红都不能使原虫和白细胞 的核着色，必须由天青作为媒介（染媒） 的核着色，必须由天青作为媒介（染媒）才 能使其着色。天青虽然也是碱性染剂， 能使其着色。天青虽然也是碱性染剂，但又 具有染媒作用， 具有染媒作用，使原虫核和白细胞核等原来 只能染上极淡兰色的结构染上显著的酸性染 剂伊红，这样， 剂伊红，这样，就使白细胞粗大的核染成显 著的既兰又红的紫兰色， 著的既兰又红的紫兰色，而较小的原虫核和 淋巴细胞原浆中的颗粒染成紫红色。 淋巴细胞原浆中的颗粒染成紫红色。
血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
染色原理：伊红是酸性水溶性钠盐，美兰是碱性 染色原理：伊红是酸性水溶性钠盐，美兰是碱性 酸性水溶性钠盐 水溶性盐酸盐，当它们各自溶化水中时， 水溶性盐酸盐，当它们各自溶化水中时，就离 解为带阳电和阴电的离子。 解为带阳电和阴电的离子。伊红主要离解为酸 性的阳离子，在遇到碱性的蛋白质如血红蛋白、 性的阳离子，在遇到碱性的蛋白质如血红蛋白、 嗜伊红白血球颗粒等即可结合成不易溶于水的 沈淀物染成红色。 沈淀物染成红色。美兰主要离解为碱性的美兰 离子，美兰就与疟原虫、 离子，美兰就与疟原虫、淋巴和大单核细胞的 胞浆、 胞浆、嗜碱性白细胞的颗粒等酸性蛋白质结合 染成兰色。 染成兰色。
取血量及涂片法（涂片操作） 取血量及涂片法（涂片操作）
取洁净的载玻片2张 薄血膜 取洁净的载玻片 张， 1张平置在桌上 ， 以左手拇 张平置在桌上， 张平置在桌上 指，食指夹持载玻片两端 手指切勿接触玻片表面） （ 手指切勿接触玻片表面 ） ， 用另一张边缘平滑（ 用另一张边缘平滑 （ 最好为 磨口边缘） 的载玻片做推片， 磨口边缘 ） 的载玻片做推片 ， 用推片一端边缘的中点从取 血部分取约1微升的血量 相当于1/4火柴头大小）， 火柴头大小） （ 相当于 火柴头大小 使血滴与平置的载玻片接触， 使血滴与平置的载玻片接触 ， 度夹角， 并形成25~30度夹角 ， 待 度夹角 并形成 血液向两侧扩展约2厘米长 血液向两侧扩展约 厘米长 度时， 度时 ， 均匀而迅速地轻轻向 左推出（ 厘米长） 左推出（约2.5厘米长）。 厘米长
（涂片操作） 涂片操作）
用推片的一角，从取血部位刮取约4微升血 厚血膜 用推片的一角，从取血部位刮取约 微升血 相当于火柴头大小）， ），使血滴与平置的载玻片 量（相当于火柴头大小），使血滴与平置的载玻片 接触，再由里向外一个方向旋转， 接触，再由里向外一个方向旋转，转2~4圈，涂成 圈 直径0.8~1厘米大小圆形厚血膜，血膜厚薄均匀， 厘米大小圆形厚血膜， 直径 厘米大小圆形厚血膜 血膜厚薄均匀， 过厚易于脱落，过薄达不到检出率的要求。 过厚易于脱落，过薄达不到检出率的要求。