疟原虫血片制作方法课件

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制作血膜的注意事项
1. 玻片清洗时，避免玻片碰撞、 磨损。制作血膜的载玻片必须完 全清洁而毫无油渍或污垢。制片 时，手指只能持载片的边缘，不 能接触玻片表面，以免油污使薄 血膜产生空白区以及厚血膜脱落。 作为推片的玻片边缘一定要平滑， 才能使推出的血膜均匀一致。
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血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
染色原理：伊红是酸性水溶性钠盐，美兰是碱性 水溶性盐酸盐，当它们各自溶化水中时，就离 解为带阳电和阴电的离子。伊红主要离解为酸 性的阳离子，在遇到碱性的蛋白质如血红蛋白、 嗜伊红白血球颗粒等即可结合成不易溶于水的 沈淀物染成红色。美兰主要离解为碱性的美兰 离子，美兰就与疟原虫、淋巴和大单核细胞的 胞浆、嗜碱性白细胞的颗粒等酸性蛋白质结合 染成兰色。
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（涂片操作）
厚血膜 用推片的一角，从取血部位刮取约4微升血 量（相当于火柴头大小），使血滴与平置的载玻片 接触，再由里向外一个方向旋转，转2~4圈，涂成 直径0.8~1厘米大小圆形厚血膜，血膜厚薄均匀， 过厚易于脱落，过薄达不到检出率的要求。
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血膜的制作（涂片操作）
涂制厚、薄血膜的位置 通常是将厚、薄血膜 涂在一张载片上。方法是将载片分为6等分， 第1、2格备贴标签及编号用；厚血膜涂在第3 格中央，薄血膜涂在第4格前缘至第6格中部。 作为标本的血片每张玻片涂厚、薄血膜各1个； 门诊和发热病人血片每片1人，涂
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制作血膜的注意事项
2. 刚涂制的血膜要平放在标本盒内，厚血膜 未干前勿使标本盒倾斜，以免血膜倾向一侧， 造成血膜厚薄不均，厚处不一溶血和着色而影 响检查结果；晾干血膜时应注意防尘、防止苍 蝇、蟑螂等昆虫吮吸血膜，干后应及时装入标 本盒并盖严，新的木制标本盒需敞开放置一段 时间，让木醇挥发后才能使用，以免厚血膜红 蛋白被其固定，不能溶血或染色效果不佳。
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血膜的制作（取血时间）
取血时机 现症病人一般可随时取血，疟疾普 查时可不考虑取血时机。但在诊断或需要某期 疟原虫作标本时，则应掌握适宜的取血时机。
间日疟在寒热发作时，外周血液中主要可见环 状体期；发作后数小时，环状体发育到滋养体 期，疟色素形成，形态较易辩认，为诊断的有 利时机；36~48小时，可检出裂殖体；发作 一、二次后，配子体出现较多。
血片的染色 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 （一）染液的种类及染色原理
染色原理：美兰与伊红都不能使原虫和白细胞 的核着色，必须由天青作为媒介（染媒）才 能使其着色。天青虽然也是碱性染剂，但又 具有染媒作用，使原虫核和白细胞核等原来 只能染上极淡兰色的结构染上显著的酸性染 剂伊红，这样，就使白细胞粗大的核染成显 著的既兰又红的紫兰色，而较小或菲薄的原 虫核和淋巴细胞原浆中的颗粒染成紫红色。
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制作血膜的注意事项
3. 血膜让其自然干燥，切忌用太阳晒或 火烤，干透后才能用甲醇固定薄血膜。 夏天标本尽可能24~48小时内固定染色； 冬天也不能超过72小时。放置时间越久， 厚血膜越不易脱血，染色效果也差。若 不能及时染色，膜血膜宜先用甲醇固定 （1~3分钟）然后用过滤清水对厚血膜 溶血，晾干固定后装入盒内盖严，待以 后染色。
涂2个厚血膜1个薄血膜，以
标标签签
防血膜脱落而影响检查；
标本片
疟疾调查时，每张玻片
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可涂制2~3人血膜。
发热病人血片
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血膜的制作
血膜编号 血膜制成后，立即用特种 蜡笔或水笔于玻片面上写上受检者的 号码，以防差错，待薄血膜干后再用 铅笔于薄血膜中写上血片种类的代号 和受检者的个人编号，依次顺序插入 标本盒内。
血片的染色 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 （一）染液的种类及染色原理
染液种类：目前所用的血片染色液，虽然名称 很多，但都是从罗门诺夫斯基氏创造的染液 变化过来的。总的可分为水溶液和酒精溶液 两大类，前者包括罗氏、西氏（Simon)、 J.S.B氏染液等，后者包括利氏 (Leishman)、瑞氏和吉氏染液等。这些染 液中的主要染剂都包含美兰、伊红和由美兰 氧化所成的天青，所以称多色性染剂。
取血量及涂片法（涂片操作） 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
薄血膜 取洁净的载玻片2张， 1张平置在桌上，以左手拇 指，食指夹持载玻片两端 （手指切勿接触玻片表面）， 用另一张边缘平滑（最好为 磨口边缘）的载玻片做推片， 用推片一端边缘的中点从取 血部分取约1微升的血量 （相当于1/4火柴头大小）， 使血滴与平置的载玻片接触， 并形成25~30度夹角，待 血液向两侧扩展约2厘米长 度时，均匀而迅速地轻轻向 左推出（约2.5厘米长）。
恶性疟较理想的取血时间是在发作后至20小 时内取血，初发患者退热后常查不到原虫。
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血膜的制作（取血操作）
取血方法 采血部位一般人为耳垂，指头， 通常在耳垂取血（现场取血建议用大头针 采血，一人一针，避免血传疾病）。先用 75%酒精棉球消毒取血部位（冬季用手 捻动耳垂使其充血后再行消毒），待酒精 干后，用左手拇指和食指紧捏耳垂上方， 右手持消毒针迅速刺入耳垂下端1~2毫米， 不宜过深或过浅。然后用右手中指轻轻向 挤压出血。