细菌内毒素控制及检测(通则1143)培训试题及答案

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方法学验证(微生物内毒素)试卷

答卷人部门得分工号考试日期：年月日本试卷得分在60分（含）以上为合格，否则为不合格。

一．选择题（每题4分，共20分）1、细菌内毒素检查用水应符合灭菌注射用水标准，用于凝胶法时，其内毒素含量小于:。

( )A、0.010EU/mlB、0.005EU/mlC、0.015EU/mlD、0.020EU/ml2、耐热器皿常用去除可能存在的外源性内毒素。

( )A、干热灭菌法(160℃、30分钟以上)B、干热灭菌法(250℃、30分钟以上)C、干热灭菌法(170℃、30分钟以上)D、干热灭菌法(250℃、15分钟)3、细菌内毒素的成分是。

(B)A、H抗原B、脂多糖C、肽聚糖D、荚膜多糖4、供试品溶液本身为强酸、强碱，或本身具有偏酸偏碱的缓冲作用时，排出干扰的方法为:( )A、将供试品的pH值调节至6.0~8.0B、添加适量钙离子、镁离子C、将供试品适当加热D、选择适当的超滤设备进行滤除5、细菌内毒素检查法主要依靠细菌内毒素可以活化，来检测细菌内毒素。

( )A、凝固蛋白原B、凝固酶原C、B因子D、C因子二、多选题(每题4分，共20分)1、无菌药品附录中规定，必要时，物料的质量标准中应当包括:检查项目。

( )A、微生物限度B、细菌内毒素C、热原D、培养基的外观2、细菌内毒素的活性单位的表达方式包括:。

( )A、EUB、IUC、IED、L3、细菌内毒素检查时常见的干扰因素包括:。

( )A、含有螯合剂B、含有某些抗凝因子C、含有葡聚糖类物质D、含有干扰作用的小分子4、对于存在内毒素污染的物质或器具，则可以选择下述方法去除:。

( )A、加热法B、酸碱法C、蒸馏法D、吸附法5、热原污染的途径。

( )A、注射用水B、从原辅料中带入C、从容器、用具、管道和装置等带入D、制备过程中的污染三．判断题（每空5分,共20分）1. 平皿法操作时应先注入培养基，再加入1ml供试液。

（）2. 制备的菌液若在室温下放置，应在2小时内使用，若保存在2-8℃可在24小时内使用（）3. 培基适用性检查是通过检验用培养基与对照培养基的比较，以阳性菌的生长状态或特征来评价判断检验用培养基是否符合检验要求。

药典三部-细菌内毒素检查法

1143 细菌内毒素检查法本法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。

细菌内毒素检查包括两种方法，即凝胶法和光度测定法，后者包括浊度法和显色基质法。

供试品检测时，可使用其中任何一种方法进行试验。

当测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶限度试验结果为准。

本试验操作过程应防止内毒素的污染。

细菌内毒素的量用内毒素单位（EU）表示，1EU与1个内毒素国际单位（IU）相当。

细菌内毒素国家标准品系自大肠埃希菌提取精制而成，用于标定、复核、仲裁鲎试剂灵敏度、标定细菌内毒素工作标准品的效价，干扰试验及检查法中编号B和C溶液的制备、凝胶法中鲎试剂灵敏度复核试验、光度测定法中标准曲线可靠性试验。

细菌内毒素工作标准品系以细菌内毒素国家标准品为基准标定其效价，用于干扰试验及检查法中编号B和C溶液的制备、凝胶法中鲎试剂灵敏度复核试验、光度测定法中标准曲线可靠性试验。

细菌内毒素检查用水应符合灭菌注射用水标准，其内毒素含量小于0.015EU/ml（用于凝胶法）或0.005EU/ml（用于光度测定法），且对内毒素试验无干扰作用。

试验所用的器皿需经处理，以去除可能存在的外源性内毒素。

耐热器皿常用干热灭菌法（250℃、30分钟以上）去除，也可采用其他确证不干扰细菌内毒素检查的适宜方法。

若使用塑料器皿，如微孔板和与微量加样器配套的吸头等，应选用标明无内毒素并且对试验无干扰的器具。

供试品溶液的制备某些供试品需进行复溶、稀释或在水性溶液中浸提制成供试品溶液。

必要时，可调节被测溶液（或其稀释液）的pH值，一般供试品溶液和鲎试剂混合后溶液的pH值在6.0～8.0的范围内为宜，可使用适宜的酸、碱溶液或缓冲溶液调节pH值。

酸或碱溶液须用细菌内毒素检查用水在已去除内毒素的容器中配制。

缓冲液必须经过验证不含内毒素和干扰因子。

内毒素限值的确定药品、生物制品的细菌内毒素限值（L）一般按以下公式确定：L=K/M式中 L为供试品的细菌内毒素限值，一般以EU/ml、EU/mg或EU/U （活性单位）表示；K为人每千克体重每小时最大可接受的内毒素剂量，以EU/（kg·h）表示，注射剂K=5 EU/（kg·h），放射性药品注射剂K=2.5 EU/（kg·h），鞘内用注射剂K=0.2 EU/（kg·h）；M为人用每千克体重每小时的最大供试品剂量，以ml/（kg·h）、mg/（k g·h）或U/（kg·h）表示，人均体重按60kg计算，人体表面积按1.62㎡计算。

细菌内毒素检查法培训班考核试卷.doc

《细菌内毒素检查法》XX所1999年培训班考核试卷得分_______________________姓名________ 单位__________________ 答题时间____ 年—月—R一、填空题（20分）1,热原检查法最早于____ 年首次收载于美国药典—版。

中国药典____ 年版开始收载热原检查法。

2,细菌内毒素检查法1980年USP ___ 版收载细菌内毒素检查法。

3,我国药品细菌内毒索检测的法定方法最早始于1988年，出卫生部颁布试行，1991年转为正式部标准。

__ 年中国药典1990年版第二増补本收载，中国药典1995年版正式收载4,中国药典1998年增补本自___ 起实施。

5,我国蛍试剂质量控制的法定方法最早于—年曲一卫生部颁布试行, 经修订后于1991年正式实施。

6,细菌内毒索检查用水系指与灵敏度为___ 或更高灵敏度的蛍试剂____ 小时不产生凝集反应的灭菌注射用水。

7,卫生部在颁布该标准时，明确规定：“具冇___ 的賞试剂方可用于细菌内毒素检查法”。

8,中国药典1998年增补本《细菌内毒索检查法》收载的方法系利用与__________ 产生凝集反应的机理，以判断供试品中________ 是否符合规定的一种方法。

9,细菌内内毒素试验所用器川L,需经处理，除去叮能存在的外源性内毒索，常用的方法是—°C干烤至少1小时，也可用其他适宜的方法。

10,细菌内毒素试验中细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素工作标准品用_________ 溶解，在旋涡混合器上混合—分钟，然后制备成各种浓度的内毒素标准溶液，每稀释一步均应在旋涡混合器上混合—秒钟。

11,______________________________________ 每批新的賞试剂在用于试验前都要进行 ____________________________ 。

卷试剂灵敏度定义为在检查法规定的条件下能检测出内毒素标准溶液或供试品溶液中的____________ 内毒索浓度，用______ 单位表示。

药典三部(2015版)-通则-1143细菌内毒素检查法

1143 细菌内毒素检查法本法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。

细菌内毒素检查包括两种方法，即凝胶法和光度测定法，后者包括浊度法和显色基质法。

供试品检测时，可使用其中任何一种方法进行试验。

当测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶限度试验结果为准。

本试验操作过程应防止内毒素的污染。

细菌内毒素的量用内毒素单位（EU）表示，1EU与1个内毒素国际单位（IU）相当。

细菌内毒素检查用水应符合灭菌注射用水标准，其内毒素含量小于0.015EU/ml（用于凝胶法）或0.005EU/ml（用于光度测定法），且对内毒素试验无干扰作用。

试验所用的器皿需经处理，以去除可能存在的外源性内毒素。

耐热器皿常用干热灭菌法（250℃、30分钟以上）去除，也可采用其他确证不干扰细菌内毒素检查的适宜方法。

若使用塑料器皿，如微孔板和与微量加样器配套的吸头等，应选用标明无内毒素并且对试验无干扰的器具。

供试品溶液的制备某些供试品需进行复溶、稀释或在水性溶液中浸提制成供试品溶液。

酸或碱溶液须用细菌内毒素检查用水在已去除内毒素的容器中配制。

缓冲液必须经过验证不含内毒素和干扰因子。

内毒素限值的确定药品、生物制品的细菌内毒素限值（L）一般按以下公L=K/M式中L为供试品的细菌内毒素限值，一般以EU/ml、EU/mg或EU/U（活性单位）表示；K为人每千克体重每小时最大可接受的内毒素剂量，以EU/（kg·h）表示，注射剂K=5 EU/（kg·h），放射性药品注射剂K=2.5 EU/（kg·h），鞘内用注射剂K=0.2 EU/（kg·h）；M为人用每千克体重每小时的最大供试品剂量，以ml/（kg·h）、mg/（kg·h）或U/（kg·h）表示，人均体重按60kg计算，人体表面积按1.62㎡计算。

药典三部(版)-通则-1143细菌内毒素检查法

1143 细菌内毒素检查法本法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。

细菌内毒素检查包括两种方法，即凝胶法和光度测定法，后者包括浊度法和显色基质法。

供试品检测时，可使用其中任何一种方法进行试验。

当测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶限度试验结果为准。

本试验操作过程应防止内毒素的污染。

细菌内毒素的量用内毒素单位（EU）表示，1EU与1个内毒素国际单位（IU）相当。

细菌内毒素检查用水应符合灭菌注射用水标准，其内毒素含量小于0.015EU/ml（用于凝胶法）或0.005EU/ml（用于光度测定法），且对内毒素试验无干扰作用。

试验所用的器皿需经处理，以去除可能存在的外源性内毒素。

耐热器皿常用干热灭菌法（250℃、30分钟以上）去除，也可采用其他确证不干扰细菌内毒素检查的适宜方法。

若使用塑料器皿，如微孔板和与微量加样器配套的吸头等，应选用标明无内毒素并且对试验无干扰的器具。

供试品溶液的制备某些供试品需进行复溶、稀释或在水性溶液中浸提制成供试品溶液。

酸或碱溶液须用细菌内毒素检查用水在已去除内毒素的容器中配制。

缓冲液必须经过验证不含内毒素和干扰因子。

培训试卷（答案）

培训试卷（答案）第一篇：培训试卷(答案)反兴奋剂法规和专业知识培训测试答案一、名词解释1、兴奋剂兴奋剂是一个约定俗成的概念。

为了准确界定《反兴奋剂条例》的适用范围，《反兴奋剂条例》所称兴奋剂，是指兴奋剂目录所列的禁用物质等。

这里的“等”，不仅包括禁用物质，还包括禁用的方法和手段。

2、使用兴奋剂使用兴奋剂，是指运动员应用任何形式的药物、或者以非正常量、或者通过不正常途径摄入生理物质，企图以人为的和不正当的方式提高他们的竟赛能力。

3、蛋白同化制剂蛋白同化制剂又称同化激素、合成类固醇（合成代谢类药物）、甾体激素，主要指雄激素（睾丸素、睾丸酮）。

雄激素在生理和药理方面具有同化作用，即能明显地促进蛋白质合成，减少氨基酸分解，使肌肉增长，体重增加等。

临床应用较多的是人工合成的同化作用较好，而副作用较弱的睾丸素的衍生物，如：苯丙酸诺龙、康力龙、去氢甲基睾丸素等。

4、肽类激素肽类激素由氨基酸通过肽键连接而成，最小的肽类激素可由三个氨基酸组成，如促甲状腺激素释放激素，多数肽类激素由十几个，几十个乃至上百及几百个氨基酸组成。

肽类激素按分子量大小分为多肽激素和蛋白质激素，其中多肽激素药物在胃肠道中难以吸收，且会受酶的作用而失活，一般不做口服用药，如胰岛素、绒促性素、促肾上腺皮质激素等。

二、填空 1、218、盐、光学异构体、原料药、单方制剂；盐、酯、醚、光学异构体。

2、药监、卫生、商务、海关3、七，蛋白同化制剂、肽类激素、麻醉药品、刺激剂、药品类易制毒化学品、医疗用毒性药品、其它品种。

4、麻醉药品、精神药品、医疗用毒性药品和易制毒化学品5、蛋白同化制剂、肽类激素，生产、销售、进口、使用环节，批发企业，零售企业。

6、处方药7、《药品生产许可证》和药品批准文号。

8、合法的医疗机构、经省局批准具备资质的药品批发企业、其它同类生产企业。

9、书面合同，省药监局，全部出口，在境内销售。

药品生产企业，非药品生产企业。

10、专门的管理人员、专库或专柜、专门的管理制度、专册登记，胰岛素。

4.细菌内毒素检测的相关验证

间大于标准曲线最低点的反应时间*2 ；
*1适用于终点法； *2适用于动态法
10 湛江安度斯生物有限公司
产品验证（干扰试验）
产品验证（干扰试验）
目的：验证在某一浓度下的供试品对于鲎试剂与内毒素的反应没有干扰作用。
无论哪种检测方法，干扰试验通常分为两个阶段： 1. 干扰初筛试验初步筛选出供试品无干扰浓度范围；
4 湛江安度斯生物有限公司
实验室、人员、试剂、用具的验证
凝胶法
• 鲎试剂灵敏度复核试验 • 方法：根据鲎试剂灵敏度的标示值（λ），将细菌内毒素国家标准品或细菌
内毒素工作标准品…制成2λ、λ、0.5λ、0.25λ四个浓度的内毒素标准溶液…每一个内毒素浓度平行做4管；另外2管加入等体积细菌内毒素检查用水作为阴性对照。将试管中溶液轻轻混匀后，封闭管口，垂直放入37℃±1℃ 的恒温器中，保温60分钟±2分钟。 • 结果的获取：将试管从恒温器中轻轻取出，缓缓倒转180°，若管内形成凝胶，并且凝胶不变形、不从管壁滑脱者为阳性；若未形成凝胶或形成的凝胶不坚实、变形并从管壁滑脱者为阴性。保温和拿取试管过程应避免受到振动，造成假阴性结果。
5 湛江安度斯生物有限公司
凝胶法灵敏度复核试验
平行管
1 2 3 4
溶液C（内毒素标准品）
溶液D
2λ
λ
0.5λ
0.25λ
阴性对照
○
○
○
○
○
○
○
○
○
○
○
○
○
○
○
○
○
○
• 试验有效性：当最大浓度2λ管均为阳性，最低浓度0.25λ管均为阴性，阴性对照管为阴性，试验方为有效。
• 按公式λc=antilg（ΣX/n）计算反应终点浓度的几何平均值。 λc在0.5λ~2λ（包括0.5λ和2λ）时，方可用于细菌内毒素检查，并以标示灵敏度λ为该批鲎试剂的灵敏度。

微生物检测培训考核试题附答案

微生物检测培训考核试题附答案一、填空题（共35个空，共计70分）1、菌落总数：食品检样经过处理，在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后，所得每g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。

2、平板计数琼脂培养基的成分有胰蛋白胨、酵母浸膏、葡萄糖、琼脂、蒸馏水。

3、菌落总数小于100 CFU 时,按“四舍五入”原则修约，以整数报告。

4、大肠菌群：在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。

5、GB 《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》中第一法适用于大肠菌群含量较低的食品中大肠菌群的计数；第二法适用于大肠菌群含量较高的食品中大肠菌群的计数。

6、MPN法是统计学和微生物学结合的一种定量检测法。

待测样品经系列稀释并培养后,根据其未生长的最低稀释度与生长的最高稀释度，应用统计学概率论推算出待测样品中大肠菌群的最大可能数。

7、GB 29921-2013《食品安全国家标准食品中致病菌限量》n为同一批次产品应采集的样品件数；c为最大可允许超出m值的样品数；m为致病菌指标可接受水平的限量值；M为致病菌指标的最高安全限量值。

8、无菌生理盐水的制法：称取氯化钠溶于1000mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15min。

9、霉菌和酵母平板计数法的培养过程：琼脂凝固后，正置平板，置28±1℃培养箱中培养，观察并记录培养至第5天的结果。

10、菌落总数的培养过程：待琼脂凝固后，将平板翻转，36±1℃培养48±2h。

11、霉菌和酵母平板计数法：若空白对照平板上有菌落出现，则此次检测结果无效。

12、大肠菌群平板计数法：在固体培养基中发酵乳糖产酸，在指示剂的作用下形成可计数的红色或紫色，带有或不带有沉淀环的菌落。

二、简答题（共1题，共计30分）GB 2749-2015《食品安全国家标准蛋与蛋制品》中液蛋制品的菌落总数和大肠菌群的微生物限量分别是多少并简述菌落总数和大肠菌群（平板计数法）的检验程序。

度卫生和微生物学基础知识培训试题---答案

3.离开工作场地（包括就餐、上厕所）必须脱掉工作服装。
4.不携带个人物品进入生产区及实验室，不在生产区及实验室内吃东西。生产区内饮水间要干净、整齐，对生产不造成污染。
5.洁净室内随时注意保证手的清洁，注意消毒，手在消毒后不再接触与工作无关的物品，不裸手直接接触药品。
2、产品生产结束，每一天生产结束，必须按标准操作程序来清洁设备。设备清洁要做到哪些要求
①培养基稀释法 ② 离心沉淀集菌法 ③薄膜过滤法 ④ 中和法
2、写出换气次数（次/h）公式
风速×3600秒×风口面积×风口个数
房间体积
1、键设备及无菌药品的验证内容应包括哪些设备和系统
关键设备及无菌药品的验证内容应包括灭菌设备、药液滤过及灌封（分装）系统
4、对与药品直接接触的设备表面有哪些要求
与药品直接接触的设备表面应光洁、平整、易清洗或消毒、耐腐蚀，不与药品发生化学变化或吸附药品
二、选择
1、微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法，检查项目包括（ ③ ）检查
①细菌数和霉菌数 ②细菌数、霉菌数及酵母菌数 ③细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌
2、微生物限度检查应在环境洁净度（ ② ）级下的局部洁净度（ ③ ）级的单向流空气区域内进行
①100000 ②10000 ③100
18、与药品直接接触的压缩空气必须经（净化装置）进行处理，符合生产要求方可使用。
19、物料从一般生产区进入洁净区，必须经物料净化系统，（包括外包装清洁处理室和气闸）在外包装清洁处理室对其外包装进行（净化处理）后经气闸进入洁净区。
20、三十万级区域洁净工作服可与一般生产区工作服合用一台洗衣机，但必须（分开）洗涤，而且需在同空气洁净度级别的环境下进行整理。

丹曲林钠细菌内毒素测定方法学验证

丹曲林钠细菌内毒素测定方法学验证目的通过检验、控制丹曲林钠原料药的内毒素水平以期控制注射用丹曲林钠的内毒素限值，因此需要建立丹曲林钠原料药的细菌内毒素验证方法。

方法用DMF溶解丹曲林钠至0.12mg/mL，以灵敏度为0.06EU/mL的两个厂家的鲎试剂，按照内毒素检测方法进行了鲎试剂灵敏度复核实验、溶剂干扰试验、样品干扰试验等方法学验证实验。

结果两个厂家鲎试剂的入c均为0.06EU/mL，在0.5～2入之内；采用上述方法进行验证，溶剂及样品均无干扰。

结论丹曲林钠原料内毒素验证需要DMF溶解样品，按照最低稀释浓度要求配制的供试品对内毒素的检测也没有干扰，因此可以判定可用该方法对本品进行内毒素检查。

标签：丹曲林钠；细菌内毒素；方法学验证；DMF[文献标识码]A丹曲林钠的商品名为Dantrium，是美国保洁（P&G）公司研制的药物，于1979年被美国FDA批准上市。

丹曲林钠用于治疗恶性高热。

恶性高热（malignant hyperthermia，MH）是一种严重的骨骼肌肉代谢亢进综合征，是一种常染色体显性遗传性疾病。

MH的发生主要是基于骨骼肌细胞内迅速且不可控的ca2+浓度增加，进而产生致死性的代谢亢进危象，在没有特异性治疗药物的情况下，一般的临床降温措施难以控制体温的增高，最终可导致患者死亡。

据报道，在接受全身麻醉的患者中MH发生率在1：10000到1：250000，且各地发生率各有差异。

有丹麦研究称MH发病率在1：250000，纽约的一项研究称MH发病率在1：100000，同时，另一项法国的研究发现全身麻醉中MH发生率可达1：10000，而且他们发现利用基因检测的方法预估其发病率应该在1：2000到1：3000之间。

近来，有研究称携带MH相关治病基因的几率可高达1：400。

丹曲林钠是特异性RYRl受体拮抗剂，是目前公认的治疗MH发作的特效药，它能够关闭RYRl 受体的异常开放，迅速减少肌质网释放Ca2+，从而终止MH发作。

微生物实验室管理培训考核试题含答案

一填空题（每空分，共45分）1.药品微生物试验工作的人员在上岗前接受胜任工作所必需的设备操本技术等，经考核合格后方可上岗。

3.微生物实验室的管理者其专业技能和经验水平应与他们的职责范围4.微生物实验室使用的培养基可按处方配制，也可使用按处方生产的符合规定的脱水培养基，在制备培养基时，应选择质量符合要求的脱水培5.6.7.已验证的条件下贮藏。

8.0℃以下存放，因为冷冻可能破坏凝胶特性。

培养基保存应防止水分流失，9.质量下降或微生物污染。

10.11. 微生物检验的实验室应有符合无菌检查法和微生物限度检查要求域。

12. 微生物实验室应按相关国家标准制定完整的洁净室（区）和隔离13. 实验室在使用前和使用后应进行消毒，并定期监测消毒效果，要有足够洗手和手消毒设施, 所用消毒剂和清洁剂的微生物污染状况应进经无菌处理的消毒剂和清洁剂。

14.责进行维护和保管，保证其运行状态正常和受控，同时应有相应的备用设15.实验室应在决定是否检测或拒绝接受样品之前与相关人员沟通。

样品的包装和标签有可能被严重污染，因此搬运和储存样品时应小心以避免污染的告中应有说明。

行。

二、判断题（每题1分，共8分）1.平皿法操作时应先注入培养基，再加入1ml供试液。

（× ）2.以稀释液代替供试液进行阴性对照试验，阴性对照试验应无菌生长。

如果阴性对照有菌生长，应进行偏差调查（√ ）3.从菌种保藏中心获得的干燥菌种为0代，试验用菌株的传代次数不得超过5代（√）4.控制菌检查用培养基促生长能力检查、抑制能力检查接种不大于100cfu试验菌于被检培养基和对照培养基中。

（×）5.纯化水的微生物限度质量标准为每lml供试品中需氧菌总数不得过lOOcfu。

（√）6.用于环境监控的培养基须特别防护，最好要双层包装和终端灭菌，如果不能采用终端灭菌的培养基，那么在使用前应进行100%的预培养，以防止外来的污染物带到环境中及避免出现假阳性结果。

细菌内毒素检查法培训班考核试卷

细菌内毒素检查法培训班考核试卷XX1999得分 ___________________________________姓名_________ 单位__________________答题时间_____年____月____日一、填空题（20分）1，热原检查法最早于年首次收载于美国药典版。

中国药典年版开始收载热原检查法。

2，细菌内毒素检查法 1980年USP 版收载细菌内毒素检查法。

3，我国药品细菌内毒素检测的法定方法最早始于1988年，由卫生部颁布试行，1991年转为正式部标准。

年中国药典1990年版第二增补本收载，中国药典1995年版正式收载4，中国药典1998年增补本自起实施。

5，我国鲎试剂质量控制的法定方法最早于年由卫生部颁布试行，经修订后于1991年正式实施。

6，细菌内毒素检查用水系指与灵敏度为或更高灵敏度的鲎试剂_____小时不产生凝集反应的灭菌注射用水。

7，卫生部在颁布该标准时，明确规定：“具有的鲎试剂方可用于细菌内毒素检查法”。

8，中国药典1998年增补本《细菌内毒素检查法》收载的方法系利用与产生凝集反应的机理，以判断供试品中是否符合规定的一种方法。

9，细菌内内毒素试验所用器皿，需经处理，除去可能存在的外源性内毒素，常用的方法是 ?干烤至少1小时，也可用其他适宜的方法。

10，细菌内毒素试验中细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素工作标准品用溶解，在旋涡混合器上混合分钟，然后制备成各种浓度的内毒素标准溶液，每稀释一步均应在旋涡混合器上混合秒钟。

11，每批新的鲎试剂在用于试验前都要进行。

鲎试剂灵敏度定义为在检查法规定的条件下能检测出内毒素标准溶液或供试品溶液中的_________内毒素浓度，用_______单位表示。

112，鲎试剂灵敏度复核中反应终点浓度是系列浓度递减的内毒素溶液中最后一个呈_____性结果的浓度，若其对数值以X表示，则灵敏度复核结果计算公式为λc=_____________。

细菌内毒素控制及检测(通则1143)培训试题及答案

细菌内毒素控制及检测(通则1143)培训试题及答案细菌内毒素的控制和检测是非常重要的，以下是一些相关的培训试题和答案。

一、单选题（每题4分，共20分）1.细菌内毒素检查用水应符合灭菌注射用水标准。

用于凝胶法时，其内毒素含量小于多少？答案：C。

0.015EU/ml。

2.常用的去除可能存在的外源性内毒素的耐热器皿是什么？答案：B。

干热灭菌法（250℃、30分钟以上）。

3.细菌内毒素的成分是什么？答案：B。

脂多糖。

4.当供试品溶液本身为强酸、强碱，或本身具有偏酸偏碱的缓冲作用时，排出干扰的方法是什么？答案：A。

将供试品的pH值调节至6.0~8.0.5.细菌内毒素检查法主要依靠什么来检测细菌内毒素？答案：D。

C因子。

二、多选题（每题4分，共20分）1.无菌药品附录中规定，必要时，物料的质量标准中应当包括哪些检查项目？答案：ABCD。

微生物限度、细菌内毒素、热原、培养基的外观。

2.细菌内毒素的活性单位的表达方式包括哪些？答案：AB。

EU、IU。

3.细菌内毒素检查时常见的干扰因素包括哪些？答案：ABCD。

含有螯合剂、含有某些抗凝因子、含有葡聚糖类物质、含有干扰作用的小分子。

4.对于存在内毒素污染的物质或器具，可以选择哪些方法去除？答案：ABCD。

加热法、酸碱法、蒸馏法、吸附法。

5.热原污染的途径是什么？答案：ABCD。

注射用水、从原辅料中带入、从、用具、管道和装置等带入、制备过程中的污染。

三、判断题（每题4分，共20分）1.除菌过滤和湿热灭菌已经被证明不能有效地除去内毒素。

答案：√。

2.在使用凝胶法进行限度检测的情况下，当使用新批号的鲎试剂时，可不进行鲎试剂灵敏度复核试验。

答案：×。

1、细菌内毒素的成分是什么？细菌内毒素的成分是脂多糖。

2、当供试品溶液本身为强酸、强碱，或本身具有偏酸偏碱的缓冲作用时，排出干扰的方法是什么？将供试品的pH值调节至6.0~8.0.3、细菌内毒素检查法主要依靠细菌内毒素可以活化，来检测细菌内毒素的什么？细菌内毒素检查法主要依靠细菌内毒素可以活化凝固酶原，来检测细菌内毒素。

动态显色法定量检测磺达肝癸钠注射液中的细菌内毒素

·176·a. TIC（TIC）b. HPSEC-2a的+EMS质谱（+EMS of HPSEC-2c）c. HPSEC-2a的+EPI@512.0质谱（+EPI@1 053.2 of HPSEC-2c）d. HPSEC-2d+EMS质谱（+EMS of HPSEC-2d）　e. HPSEC-2d的+EPI@925.1质谱（+EPI@770.2 of HPSEC-2d）　弱保留值杂质HPSEC-2c、2b的典型质谱图Fig. 5　Typical mass spectra of impurity HPSEC- 2c，2dChineseJournal of Pharmaceutical Analysis（control chromatogram）　b. HPSEC-1的2D图谱（2D chromatogram of HPSEC-1）2D-HPLC法分析杂质HPSEC-1的典型色谱图Typical chromatograms of impurity HPSEC-1 analyzed by 2D-HPLC（control）　b. HPSEC-2的2D图谱（2D chromatogram of HPSEC-2）2D-HPLC法分析杂质HPSEC-2的典型色谱图Typical chromatograms of impurity HPSEC-2 analyzed by 2D-HPLCChineseJournal of Pharmaceutical Analysis·178·　盐酸头孢甲肟强制降解溶液（a）及原料（b）和制剂（c）的典型RP-HPLC图　Typical chromatograms of cefmenoxime hydrochloride degradation solution（a），raw material（b）and preparation（c）analyzed by RP-　结论本文综合运用 HPSEC法、2D-HPLC法、柱切-LC/MS n法等现代色谱分析技术，证明了基于TSK2000 SWxL型HPSEC系统的HPSEC法分析盐酸头孢甲肟原料及制剂的聚合物杂质的方法专属性RP-HPLC法分析盐酸头孢甲肟聚合物杂质灵敏度高、专属性强，适用于盐酸头孢甲肟原料及制剂的聚合物质控；盐酸头孢甲肟强制降解溶液可作为盐酸头孢甲肟聚合物分析的定位溶液，并以头孢甲肟脱四氮唑二聚体为指针性聚合物杂质进行聚合物质控。

羟丙甲纤维素细菌内毒素检测方法研究

羟丙甲纤维素细菌内毒素检测方法研究摘要建立羟丙甲纤维素细菌内毒素检测方法。

参考《中国药典》2020年版四部通则<1143>细菌内毒素检测方法中的凝胶法进行本次检测方法验证和结果判定[1]。

分别使用湛江安度斯生物有限公司和福州新北生化工业有限公司两个厂家的鲎试剂进行本次研究。

根据使用该辅料的混悬注射剂细菌内毒素限度和临床应用要求，确定羟丙甲纤维素的细菌内毒素限度为1.5EU·mg-1。

其最小有效稀释浓度为0.17mg·mL-1，可用灵敏度为0.25EU·mL-1的鲎试剂进行细菌内毒素检测。

关键词羟丙甲纤维素；细菌内毒素；鲎试剂羟丙甲纤维素 (hydroxypropyl methyl cellulose， HPMC) 是属于非离子型纤维素混合醚中的一个品种，是一种半合成的、不活跃的黏弹性聚合物[2]，作为助悬剂广泛应用于混悬型注射剂和眼用制剂。

《中国药典》2020年版四部中收录了羟丙甲纤维素，但是并没有对其细菌内毒素检测做出规定，目前国内尚无检测羟丙甲纤维素细菌内毒素的相关报道。

鉴于其作为注射剂的药用辅料，为严格控制制剂的产品质量，本文参考《中国药典》2020年版四部通则<1143>建立了羟丙甲纤维素的细菌内毒素检测方法，为该辅料和混悬型注射剂的质量控制提供了依据。

1材料1.1试剂和样品羟丙甲纤维素，批号201112,201113,201114，由辅料厂家提供；鲎试剂（①湛江安度斯生物有限公司，批号2007271，灵敏度0.25EU·mL-1；②福州新北生化工业有限公司，批号19110912，灵敏度0.25EU·mL-1）；细菌内毒素检查用水（BET），湛江安度斯生物有限公司，批号1911120；细菌内毒素工作标准品，湛江安度斯生物有限公司，批号1912102，规格10EU·支-1；pH试纸；稀盐酸；碳酸氢钠。

1.2 仪器 ET-96内毒素凝胶法测定仪，天津市天大天发科技有限公司；Vortex-Genie2旋涡混合器，美国Scientific Industries公司。

细菌内毒素试题及答案

细菌内毒素试题及答案一、选择题（每题2分，共10分）1. 细菌内毒素主要存在于以下哪种细菌中？A. 革兰氏阳性菌B. 革兰氏阴性菌C. 螺旋菌D. 真菌答案：B2. 细菌内毒素的主要成分是什么？A. 脂多糖B. 蛋白质C. 核酸D. 多糖答案：A3. 细菌内毒素引起的典型症状不包括以下哪一项？A. 发热B. 休克C. 腹泻D. 皮肤瘙痒答案：D4. 细菌内毒素的检测方法不包括以下哪一种？A. 凝胶法B. 酶联免疫吸附测定法C. 显微镜法D. 动态光散射法答案：C5. 以下哪种物质不是细菌内毒素的抑制剂？A. 多粘菌素B. 脂多糖结合蛋白C. 抗生素D. 内毒素清除剂答案：C二、填空题（每空1分，共10分）1. 细菌内毒素的化学结构主要由______、核心多糖和O-特异性多糖组成。

答案：脂质A2. 革兰氏阳性菌的细胞壁主要由______组成。

答案：肽聚糖3. 细菌内毒素的毒性作用主要是通过激活______系统实现的。

答案：免疫系统4. 细菌内毒素的检测方法之一是______，它通过观察内毒素与鲎血细胞凝固酶原的反应来检测内毒素。

答案：凝胶法5. 细菌内毒素的清除方法包括使用______、______和______等。

答案：多粘菌素、脂多糖结合蛋白、内毒素清除剂三、简答题（每题5分，共10分）1. 简述细菌内毒素的来源和特性。

答案：细菌内毒素主要来源于革兰氏阴性菌的细胞壁，其主要成分是脂多糖，包括脂质A、核心多糖和O-特异性多糖。

细菌内毒素在细菌死亡后释放，具有热稳定性和耐酸性，不易被常规消毒方法破坏。

2. 描述细菌内毒素对人体的潜在危害。

答案：细菌内毒素对人体的潜在危害包括引起发热、休克、多器官功能衰竭等严重症状。

在医疗领域，内毒素污染的医疗器械可能导致感染，甚至危及生命。

因此，对医疗器械进行严格的内毒素检测和清除是至关重要的。

四、论述题（20分）请论述细菌内毒素的检测方法及其优缺点。

答案：细菌内毒素的检测方法主要包括凝胶法、酶联免疫吸附测定法（ELISA）、动态光散射法和化学发光法等。

细菌内毒素工作标准品效价标定方法研究

细菌内毒素工作标准品效价标定方法研究摘要：根据《中国药典》2020年版通则1143细菌内毒素检查法，工作标准品应该用法定标准品进行标定。

探究了运用凝胶法对细菌内毒素工作标准品效价进行标定的检测方法，使用购于中国食品药品检定研究院，效价为9000EU/支细菌内毒素国家标准品（CSE）标定标示效价为10EU/支的细菌内毒素工作标准品（WSE）。

通过试验，检验结果均符合《中国药典》现行版的要求。

关键词：细菌内毒素国家标准品，细菌内毒素工作标准品，鲎试剂，凝胶法，效价引言：根据《中国药典》先行版收载的细菌内毒素检查法要求，根据实际使用要求，使用细菌内毒素国家标准品来标准定CSE的效价，可以用凝胶法或光度法进行标定，本企业实际日常检验中，使用多个灵敏度的鲎试剂则采用两个不同灵敏度的鲎试剂标定CSE的效价。

若标定的CSE效价Pt，结果0.5Pe≤Pt≤2Pe （细菌内毒素工作标准品标示效价（Pe））。

则按照标示效价使用。

正文：1.实验材料1.1仪器设备1.2试剂试药2.实验准备2.1玻璃器皿的洗涤将检验所用玻璃器皿放入洁洁灵水中充分浸泡，然后取出将洗液空干，用自来水将残留洗液彻底洗净，再用纯化水反复冲洗三遍以上，晾干后放入适宜的密闭金属容器中或用锡箔纸包好后再放入金属容器内，放置电热恒温干燥箱中。

2.2除去玻璃器皿表面可能存在的外源性内毒素玻璃器皿置烤箱后将烤箱调至250℃，待烤箱温度升至设定的温度后开始记时，需干烤至少2小时。

达到规定时间后，关断电源。

待烤箱温度自然降至室温，在不开启金属容器的情况下，可以保存24小时，否则需再次灭菌除去可能存在的外源性内毒素。

2.3细菌内毒素国家标准品溶液的制备取细菌内毒素国家标准品一支，轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，再用砂轮在瓶颈上部轻轻划痕,75％酒精棉球擦拭后启开，防止玻璃屑落入瓶内。

用移液器（100-1000μL）吸取BET水1ml放入细菌内毒素国家标准品瓶中,或按标准品使用说明书用移液器加入规定量的BET水溶解其内容物，用封口膜将瓶口封严，置旋涡混合器上混合15分钟，然后根据鲎试剂标示灵敏度（λ1为0.25EU/ml标示灵敏度、λ2为0.03U/ml标示灵敏度）），将细菌内毒素国家标准品稀释制备成所需浓度的细菌内毒素标准溶液即0.5EU/ml、0.25EU/ml、0.125EU/ml、0.0625EU/ml和0.0625EU/ml、0.03125EU/ml、0.15625EU/ml、0.078125EU/ml。

细菌内毒素检查案例分析

取细菌内毒素国家标准品1支按使用说明书配制成浓度为200euml20euml的标准内毒素溶液备用称取约75mg活性炭两份分别加入约5ml浓度为200euml和20euml的标准内毒素溶液配制成活性炭浓度为15的混合溶液旋涡混合9min然后1500转离心5min离心后取上清液用022m无热原滤膜过滤取续滤液按照通则1143检测应能使200euml20euml的标准内毒素溶液内毒素含量均下降2个数量级吸附率达到99
规格 0.1ml/支 \ 30ml/瓶 40孔
标示效价 0.03EU/ml 10000EU/支 \ \
数量 8支 1支 1瓶 1台
14
4.例子Ⅱ -凝胶限度法试验
• （3）反应溶液的制备
• 按照干扰试验方法制备各反应溶液，检测结果如下：
溶液C
溶液B
溶液D 溶液A 溶液A
E0.06 ++
SE0.06 ++
0.015g/ml；
8
3.例子Ⅰ-凝胶法干扰试验
②溶液C的制备 • 取细菌内毒素国家标准品1支，按照使用说明书，
加入1mlBET水，旋涡混合15分钟，得到细菌内毒素溶液10000EU/ml，稀释到2000EU/ml，分装 0.3ml/瓶。-20℃冷冻保存，备用。 • 把标准内毒素溶液稀释至0.625EU/ml、 0.0625EU/ml、0.03EU/ml、0.015EU/ml和 0.0075EU/ml。
旋涡混合9分钟
吸附内毒素
1500转离心5分钟
分离活性炭
0.22μm滤膜过滤
再分离活性炭
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3.例子Ⅰ-凝胶限度法试验
（1）供试品细菌内毒素限值：2.0EU/ml；细菌内毒素限值：0.2EU/ml；