食用菌母种的灭菌与培养

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食用菌实验

操作方法： ①将实验用的材料用品和仪器用具准备好、摆放整齐，并按照超净工作台的使用方法使其处于工作状态。 ②在超净工作台的无菌区，按照无菌操作规程，进行常规的手部消毒和器械的烧灼灭菌。随后用75%酒精棉球对子实体进行表面消毒。 ③可以直接将子实体沿菌柄迅速纵向撕开，用灼烧灭菌后的尖头镊子移取菌盖、菌柄交界处组织块（绿豆大小）。移至试管斜面培养基的适当位置，迅速塞上棉塞。 ④将分离的试管放在25℃恒温箱培养，培养期间每天都要检查菌种的萌发与生长情况，对污染的试管及时挑选、处理。经过7～10 d培养，菌丝体长满试管，即为纯菌种。
三、方法步骤 1．种菇选择选择生长健壮、无病虫害、菇形正、大小适中、颜色正常、尚未散发孢子、七八分成熟的子实体作为分离材料，最好在第一潮菇中采摘，保持菇体洁净备用。 2．母种分离方法（1）组织分离法。此法是生产中最常用的方法，它操作简便，菌丝萌发快，分离所得的菌种遗传性较稳定，在培养基条件适宜的情况下，能保持原有菇种的优良性状和特性。
5．培养
接种后，在恒温培养箱中闭光培养，及时淘汰杂菌污染的试管，一般10 d左右菌丝可长满管。
实验二
食用菌菌种的分离技术
一、目的要求了解食用菌菌种分离基本原理，通过操作熟悉掌握子实体组织分离、担孢子采集关键技术。二、实验材料 1．材料用品平菇、香菇等新鲜子实体、试管斜面培养基、三角瓶培养基、95%酒精、75%酒精棉球、记号笔等。 2．仪器用具超净工作台、酒精灯、尖头镊子、接种针、接种铲、刀片、金属丝、培养皿、废物罐等。
3. 母种培养基的灭菌按照手提式高压蒸汽灭菌锅的操作规程对培养基进行灭菌。一般121℃灭菌30min。灭菌结束后待温度、压力降到“0”，打开锅盖，让锅内多余蒸气逸出，利用锅体余热烘干棉塞后取出已灭菌物品；趁热将试管摆成斜面，培养基以试管长度的1/2到2/3为宜，斜面试管上应覆盖洁净的厚毛巾或几层纱布，防止试管内产生过多的冷凝水。斜面制成后，如不马上使用，可在5℃的冰箱中保存待用。

食用菌实验-母种原种扩大培养

实验五母种、原种接种扩大培养（板书用）一、实验目的熟悉母种、原种接种操作技能。

二、实验材料和用具接种箱或超净工作台，恒温培养箱，接种钩（针），酒精灯，镊子、、火柴，记号笔，记录本，75％酒精及棉球、95％酒精，母种试管斜面，灭菌好的原种培养基。

三、实验步骤与方法1.无菌测定灭菌后的培养基，随机抽出数支斜面试管培养基，置25—28℃的温箱中培养3天，培养基表面仍光滑，无杂菌出现，证明灭菌彻底，即可供接种使用。

2.接种操作过程无菌操作要点：①无菌箱在启用前先灭菌，将待接种的斜面试管、酒精灯、火柴、接种针等放入箱内，紫外线照射半小时以上。

超净工作台则要先灭菌20分钟。

②双手洗净。

打开工作灯，将双手伸入接种箱内，点燃酒精灯。

用75%酒精的棉球擦拭双手，擦拭方向由前向后。

③左手平托两支试管，拇指按住试管底部，外侧一支是供接种用的菌种试管，内侧一支是待转接母种的斜面试管，两支试管的斜面都应朝上。

右手持接种钩，将接种钩的顶端烧红，并将整条接种柄在火焰上过几次灭菌。

④将两支试管的管口部分靠近火焰，用右手同时夹住两个棉塞。

拔掉两支试管的棉塞，并立即以火焰灼烧管口，并适当转动。

操作过程在不离酒精灯火焰一寸远处进行。

⑤用冷却的接种钩，在长满菌丝的斜面挖取少许菌丝及培养基，然后轻轻抽出试管。

迅速伸进待接试管中，将种块置于培养基的中部，盖好塞子。

接种过程中，应注意保持试管与桌面平行，不要远离酒精的火焰，周而复始。

一支母种可扩接20—25支试管。

贴上标签（或用记号笔），注明菌种或菌株名称及日期。

⑥原种接种：3．菌种培养接好种的试管和原种，放在25℃条件下培养，每隔2-3天检查一次。

遇有杂菌的试管要及时选出，以免污染其他试管。

7～10天后菌丝就可长满试管。

原种30天左右长满。

作业：归纳原种和试管种的接种全过程。

实验五母种接种扩大培养一、实验目的通过对接种箱常规消毒、斜面试管培养基母种(即一级种)接种和培养，基本熟悉母种接种操作技能。

培养纯菌种可以用哪些方法？

培养纯菌种可以用哪些方法？培养纯菌种可以分为三个步骤，分别是培养母种，培养原种和培养栽培种。

你知道培养纯菌种可以用哪些方法吗？来学习一下吧！一、木棒培养母种这种方法适用于木耳、香菇和银耳等生于段木上的食用菌。

选出菇最多，生长最好的段木，并将其上出菇最多的一节锯下来，长约3厘米，去树皮。

将心木放入75%酒精中消毒2分钟，用蒸馏水冲洗干净，用消毒纱布擦干。

再用刀纵劈成3厘米长的木条，形状像火柴棒，棒中长满了菌丝。

用镊子夹取1条，斜插在试管中马铃薯洋菜培养基的斜面上。

将试管放在25℃的环境中培养，约30天，菌丝长满培养基，就可以得到我们需要的母种了。

这个方法有以下几个特点。

第一个，容易感染杂菌。

因此，段木用75%酒精消毒后，仍应在培养基中加些链霉素、青霉素或金霉素等，其用量是每毫升中加30单位（或1000毫升中加40微克），以抑制杂菌。

第二个，无性繁殖，菌丝为双核菌丝。

第三个，对银耳来说，木条中已有两种菌丝。

接种后，银耳菌丝与香灰菌丝同时生长，香灰菌丝由白色变成浅灰色，培养基由黄变黑，这表明香灰菌丝成熟，而不是杂菌。

二、木塞培养栽培种用打孔器，在桑、榆、槐、乌柏、重阳木、无患子、栗和悬铃木等硬木上打孔，取下圆柱形的木塞，直径约1厘米，长约1.5厘米。

将木塞浸入水中24小时，使其吃透水分，再取出沥水，按其干重的3份比例，加入锯末培养基2份，拌和均匀。

然后进行装瓶，在750毫升的广口瓶中，可装木塞200~300个，其间用锯末培养基填充。

在高压灭菌锅中加压灭菌2小时后，放凉，即可接入原种。

在25℃的室内培养30天，菌丝长满全瓶，即为栽培种。

木塞栽培种，适用于段木栽培香菇、木耳和银耳等。

如果有意识地选择直径10-20厘米的段木，按行距5厘米，株距10厘米的距离，梅花形打孔取木塞，培养成栽培种，则在接种时，将木塞从栽培种瓶中取出来，直接放回原来的孔中，木塞中长满了菌丝，即生入段木中。

菌种瓶中充满着锯末培养基，也是栽培种，可在段木上砍花接种。

食用菌制种技术 1

食用菌制种技术 1食用菌制种前言食用菌生产所用的菌种，是提供繁殖而分级制作的菌丝体培养物，相当于高等植物的种子。

在自然界中，食用菌繁衍后代依靠孢子，孢子在适宜的环境下，萌发成菌丝体。

菌丝体生长繁衍达到生理成熟后，在适宜的环境下，就可形成子实体。

在人工栽培食用菌时，孢子虽然是它的种子，但人们至今都不用孢子直接播种，而是用孢子或子实体组织萌发而成的纯菌丝体作为播种材料。

因此，通常所指的菌种，实际上是经过人工培养并进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体。

制种是食用菌生产最重要的环节。

常言道：“有收无收在于种，收多收少在于管”，可见菌种在生产中的重要性。

在食用菌生产过程中，菌种好坏，直接影响食用菌的产量和质量。

因此，培育优良菌种，是提高食用菌生产水平的重要环节。

人工培养的菌种，根据菌种培养的不同阶段，可分为母种、原种和栽培种三类。

一般把从自然界中，首次通过孢子分离或组织分离而得到的纯菌丝体称为母种，或称一级种。

它是菌种类型的原始种。

原始母种通过移接(转管)成数支试管(斜面)种，这些移接的试管种，亦可称为母种。

把母种移接到木屑、谷粒、棉籽壳、粪草等瓶(袋)培养基上培养而成的菌种称为原种，或称二级种。

它是母种和栽培种之间的过渡种。

把原种扩接到相同或类似的材料上，进行培养直接用于生产的菌种称栽培种，或称三级种。

制作菌种的具体操作工艺流程见图4—1。

原种和栽培种，均能直接用于生产。

栽培种不能再扩大繁殖栽培种(银耳菌种例外)，否则会导致生活能力下降。

分离母种培养基制备→高压灭菌→接种→筛选提纯→原始种→中试后确定母种↓↓—————转管扩接←保贮↓原种培养基制备→高压或常压灭菌→接种→培养→原种∣↓栽培种培养基制备→常压或高压灭菌→接种→培养→栽培种图4-1 制种工艺流程图食用菌的菌种生产，基本上是按菌种分离→母种扩大培养→原种培养→栽培种培养的程序进行。

菌种通过三级扩大，菌种数量大为增加，同时菌丝也从初生菌丝发育到次生菌丝，使菌丝更加粗状，分解基质的能力也增强。

食用菌母种制作-实验一讲解

实验一食用菌母种制作一、目的要求：1、了解母种培养基制作过程，理解灭菌原理；2、掌握母种培养基的制备方法；3、了解无菌操作基本原理，掌握母种的无菌接种培养方法。

4、了解和掌握食用菌组织分离法的方法步骤；5、熟练分离出栽培用菌种。

二、主要仪器设备及药品材料：灭菌锅、超净工作台、酒精灯、电炉、铝锅、漏斗、纱布、菜刀、砧板、烧杯、捆扎绳、硅胶试管塞、试管（18x180mm）、手术刀、镊子、75%酒精、马铃薯、葡萄糖、琼脂、平菇子实体。

三、实验步骤与方法:①培养基的制作1 PDA培养基配方马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000毫升.2. 母种培养基的配制(1)熬制。

马铃薯洗净，挖芽去皮。

称取200克，切成玉米大小颗粒或薄片。

量筒量取1000毫升水，铝锅中煮沸后记时30分钟。

四层纱布过滤于量杯中。

滤液倒入锅中文火加热，加入葡萄糖和琼脂，不断搅拌，直到琼脂溶化。

补足水量至1000毫升。

(2)分装试管。

将熬制的培养基用小漏斗趁热分装。

培养基高度为试管长度的1/5左右，注意避免培养基沾于试管口外。

分装完成后，盖紧硅胶塞。

（3）捆把。

7支试管为一捆，用牛皮纸包裹试管口，用捆扎绳扎紧。

贴上标签，准备灭菌。

（4）灭菌。

注意加足水量和排气，灭菌完成后降压不能太快。

（5）摆斜面，培养基长度约为试管长度的1/2。

斜面试管上覆盖洁净的厚毛巾或几层纱布，防止试管内产生过多的冷凝水。

①菌种分离与培养（1）种菇选择。

选取无杂菌感染，无病虫害，出菇均匀，适应性强的子实体，要求个体健壮，朵大肉厚，外形规整，出菇早，约七八成熟的新鲜子实体。

子实体采收后切去大部分菌柄，放入干净器皿内备用。

（2）母种分离（组织分离法）。

在分离前用75%的酒精棉球擦菇体进行表面消毒，在超净工作台内将子实体撕开，用消毒刀片在菌盖与菌柄交接处的组织上取一小块（绿豆大小）移至试管斜面培养基的适当位置，迅速塞上硅胶塞。

将分离的试管放在室内避光培养7-8天，检查菌丝生长情况。

食用菌的制种(母种的分离和培养)

食用菌的制种（母种的分离和培养）()---食用菌菌种质量的优劣，直接影响到栽培的成败和产量的高低，只有优良的菌种，才能获得优质高产的食用菌。

因此食用菌的制种，是生产中一项极其重要的工艺。

食用菌的菌种按培养阶段和来源的不同，可分母种、原种和栽培种三种。

从食用菌的孢子分离培养或从组织分离培养、基内菌丝分离培养所得到的第一代菌丝体，称为母种。

从母种扩大培养的菌丝体，称为原种。

从原种扩大培养直接用于生产上播种的菌丝体；称为栽培种。

一、母种的分离和培养（一）母种培养基的配制1.母种培养基的种类母种是菌种生产的关键，要求纯度高，不能混生杂菌，同时母种的菌丝体较为纤细，分解培养料的能力较弱。

因此，母种菌丝体需要培养在营养丰富，易被吸收，表面光滑易于鉴别有无杂菌感染的琼脂培养基上。

适合母种菌丝生长的琼脂培养基种类很多，常用的有下列几种：（1）马铃薯——葡萄糖——琼脂培养基马铃薯（去皮） 200克琼脂 20克葡萄糖（或蔗糖） 20克水 1000毫升（2）麦芽汁——葡萄糖——琼脂培养基干麦芽 250克琼脂 15～20克葡萄糖（或蔗糖） 10克水 1000毫升（3）胡萝卜——葡萄糖——琼脂培养基胡萝卜 100克琼脂 20克葡萄糖（或蔗糖） 20克水 1000毫升（4）蘑菇汁——葡萄糖一一琼脂培养基（适用于蘑菇）鲜蘑菇 250克琼脂20克葡萄糖（或蔗糖） 20克水 1000毫升（5）蛋白胨——葡萄糖——琼脂培养基蛋白胨 2克葡萄糖 20克磷酸氢二钾 2克维生素B1（硫胺素） 0.5毫克磷酸二氢钾 0.5克琼脂 18克硫酸镁 0.5克水l000毫升2.母种培养基的制法兹以最常用的马铃薯——葡萄糖——琼脂培养基的制法为例介绍如下：先将马铃薯去皮，洗涤，切成小块，加水1000毫升，煮沸15～20 分钟，取双层纱布过滤，取其滤液，加入琼脂和葡萄糖（或蔗糖），用文火加热使其溶化，最后补足水分，使其容量仍为1000毫升。

趁热分装于试管中，装量约为试管长度的1/5左右，装管时要注意不使培养基沾污试管壁和试管口。

蘑菇菌种培养

在自然界里，食用菌都不是单独存在的，而是和许多细菌、放射菌、霉菌等生活在一起的。

所谓菌种分离，就是把这些和食用菌一起生活的杂菌分离出来，通过培养，获得纯的优良菌种。

菌种分母种、原种、栽培种。

(一）母种的分离培养食用菌母种的分离，可分为孢子分离法、组织分离法以及基内菌丝分离等。

1.孢子分离法孢子分离法，是用食用菌的有性孢子或无性孢子萌发成菌丝，培养成菌种的方法。

这种菌种生活力较强，但孢子个体之间有差异，且自然分化现象较严重，变异大，需经出菇试验才能在生产上应用。

（l）单孢分离法：是每次或每支试管只取一个担孢子，让它萌发成菌丝体来获得纯菌种的方法。

蘑菇和草菇用单孢分离得到的菌丝，有结实能力，可采用此法分离生产纯菌种。

单孢分离生产上较少采用，而且技术复杂，一般采用多孢分离法。

（2）多孢分离法：就是把许多孢子接种在同一培养基上，让它们萌发、自由交配来获得食用菌纯菌种的一种方法。

具体操作方法，有以下几种：①种菇孢子弹射法：选择个体健壮、朵形圆正，无病虫害、出菇均匀、高产稳产，适应性强的八九分成熟的种菇，切去大部分，菌柄用无菌水冲洗数遍后再用已灭菌的纱布或脱脂棉、滤纸吸干表面水分。

在接种箱或无菌室内，把种菇的菌褶朝下用铁丝倒挂在玻璃漏斗下面，漏斗倒盖在培养皿上面；上端小孔用棉花塞住。

培养皿放在一个铺有纱布的搪瓷盘上，静置12～20小时，菌褶上的孢子就会散落在培养皿内。

形成一层粉末状孢子印（平菇极淡紫色，蘑菇、草菇为褐色，香菇、金针菇孢子印白色）。

用接种针沾取少量孢子在试管中的琼脂外面或培养皿上划线接种。

待孢子萌发，生成菌落时，选孢子萌发早、长势好的菌落进行试管培养。

还可用孢子采集器收集孢子。

方法是选好种菇后，按上述程序，轻轻掀开玻璃钟罩，将种菇柄朝下插在孢子采收器的钢丝架上，放在培养皿正中央。

随即盖好玻璃罩，用纱布将钟掌周围塞好。

并在纱布上倒少许升汞或无菌水。

移入 20℃左右恒温箱培养。

②褶上涂抹法：按无菌操作分离时；应选择成熟的种菇，用接种针直接插入褶片之间，轻轻抹取褶片表面子实体尚未弹射的孢子，再在培养基上划线接种。

食用菌菌种管理办法

食用菌菌种管理办法颁布单位：农业部中华人民共和国农业部令第62号《食用菌菌种管理办法》已于2006年3月16日经农业部第8次常务会议审议通过，现予发布，自2006年6月1日起施行。

1996年7月1日农业部发布的《全国食用菌菌种暂行管理办法》（农农发[1996]6号）同时废止。

部长杜青林二〇〇六年三月二十七日食用菌菌种管理办法第一章总则第一条为保护和合理利用食用菌种质资源，规范食用菌品种选育及食用菌菌种（以下简称菌种）的生产、经营、使用和管理，根据《中华人民共和国种子法》，制定本办法。

第二条在中华人民共和国境内从事食用菌品种选育和菌种生产、经营、使用、管理等活动，应当遵守本办法。

第三条本办法所称菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。

菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。

第四条农业部主管全国菌种工作。

县级以上地方人民政府农业（食用菌，下同）行政主管部门负责本行政区域内的菌种管理工作。

第五条县级以上地方人民政府农业行政主管部门应当加强食用菌种质资源保护和良种选育、生产、更新、推广工作，鼓励选育、生产、经营相结合。

第二章种质资源保护和品种选育第六条国家保护食用菌种质资源，任何单位和个人不得侵占和破坏。

第七条禁止采集国家重点保护的天然食用菌种质资源。

确因科研等特殊情况需要采集的，应当依法申请办理采集手续。

第八条任何单位和个人向境外提供食用菌种质资源（包括长有菌丝体的栽培基质及用于菌种分离的子实体），应当经所在地省级人民政府农业行政主管部门审核，报农业部批准。

第九条从境外引进菌种，应当依法检疫，并在引进后30日内，送适量菌种至中国农业微生物菌种保藏管理中心保存。

第十条国家鼓励和支持单位和个人从事食用菌品种选育和开发，鼓励科研单位与企业相结合选育新品种，引导企业投资选育新品种。

选育的新品种可以依法申请植物新品种权，国家保护品种权人的合法权益。

第十一条食用菌品种选育（引进）者可自愿向全国农业技术推广服务中心申请品种认定。

食用菌原种的灭菌、接种与培养

食用菌原种的灭菌、接种与培养
(1)灭菌
分装好的原种瓶，要当天灭菌，以免培养基发霉变质。

灭菌方法有二种，即高压蒸汽灭菌和常压蒸汽灭菌。

①高压蒸汽灭菌。

先将锅内加入足够的水，将菌种瓶整齐地排放在锅内，盖上锅盖，对角拧紧锅盖上的螺丝，勿使漏气。

用电炉或者煤火加热，当压力达到0.05兆帕时，打开放气阀（或开始就打开放气阀），排空锅内冷空气，放气10-15分钟左右，再关闭放气阀继续加热，当压力升到0.15兆帕时，调整火力使压力维持在0.14-0.15兆帕下灭菌。

麦粒和谷粒培养基灭菌120分钟；棉籽壳、玉米芯、木屑培养基灭菌90-100分钟。

灭菌完毕，关闭热源，待压力自然降到0时，打开放气阀将锅内空气排尽后，再打开锅盖取出菌种瓶。

②常压蒸汽灭菌。

锅内加足水，先用大火加热，使蒸汽上足后，用小火保持沸点温度。

在loo℃左右的沸点温度下维持12-16小时以上，停火焖1夜后出锅。

麦粒和谷粒培养基灭菌时间要相应延长。

为了确保灭菌效果，麦粒和谷粒培养基最好不要采用常压灭菌法。

(2)接种
①培养基冷却。

将灭过菌的培养基从锅内取出，置于干净的室内冷却，待灭过菌的培养基温度降至30℃以下时，搬入消毒好的接种箱（室）内消毒接种。

②接种场地的消毒。

在接种前先对接种场地和接种设施进行彻底的
1。

食用菌母种培养基的灭菌方法

食用菌母种培养基的灭菌方法一、食用菌母种培养基的灭菌方法在食用菌母种培养基制作中常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法，该法灭菌较为彻底，具体方法步骤及注意事项如下：1、选锅、加水选用手提式高压蒸汽灭菌锅，向灭菌锅内加水至水位标记高度。

注意：水不可过多也不可过少，过少易烧干，过多棉塞易受潮，引起杂菌污染。

2、装入培养基把培养基有序竖直排放入灭菌锅内，留开通气孔，并保证蒸汽流通。

试管口和棉塞不能直接接触锅壁，上面要盖2层报纸或1层防水油纸，防止锅盖下面的冷凝水打湿棉塞。

最后均匀拧紧锅盖上的螺丝，防止漏气。

3、加热灭菌将装入培养基的灭菌锅放置在2-3千瓦的电炉上进行加热，当压力升至0.05兆帕时，打开放气阀缓慢放气，让压力降至零，再放气10-15分钟，当有大量热蒸汽排出时，关闭放气阀升压灭菌。

当压力升至0.11-0.12兆帕时，开始计时，并调节火力大小，始终维持所需压力30分钟。

4、停止加热，缓慢减压在0.11-0.12兆帕压力下．灭菌30分钟后，停止加温，待压力自然下降到0时打开放气阀，缓慢排出残留蒸汽；然后打开锅盖，待热蒸汽冷却片刻后，取出灭菌物品。

灭菌完后，若连续使用，应注意补足水分后再用。

若暂时不用，应排出锅内剩余水分，清理干净，下次备用。

二、食用菌接种场所的消毒方法首先将接种箱、接种室或者接种帐的卫生打扫干净；然后放入所有用具及母种培养基，用甲醛和高锰酸钾熏蒸消毒。

药品用量为每立方米甲醛10毫升，高锰酸钾5克。

熏蒸后的接种箱、接种室或者接种帐还可用紫外线辅助杀菌，一般10立方米的空间，用30瓦的紫外线灯照射30分钟，待臭氧散去，即可开始接种。

若采用超净工作台接种，首先要将超净工作台用清洁的水和干净的抹布擦洗干净，然后再用75%的酒精擦拭，放入接种用具和母种培养基，开机吹无菌风30分钟。

三、食用菌菌种消毒后的培养通过加温、通风、洒水、遮光等方法，保持培养室（箱）温度20℃-24℃；空气相对湿度在60%左右；暗光；空气新鲜，促使菌丝健壮生长。

食用菌菌种脱毒技术汇总

食用菌菌种脱毒技术汇总关于食用菌菌种脱毒技术主要有以下四种方式：一、菌丝尖端脱毒法；二、U型管脱毒法；三、断桥脱毒法；四、原基组织脱毒法。

上述方法各有利弊，我们先了解一下各种方法的具体操作方式，再来为大家分析各种方法的优缺点。

一、菌丝尖端脱毒法使用规格为90毫米或110毫米的培养皿。

无此规格培养皿时，也可改用规格为25毫米×200毫米的大型试管，但操作不太方便。

先按常规制备母种培养基，装入三角瓶，棉塞封口，加皮纸包封；同时将培养皿洗净后用牛皮纸包好。

二者同时进行灭菌处理。

121℃下灭菌30分钟，待灭菌锅内压力为零时，取出灭菌物，放入事先消毒的接种箱。

打开牛皮纸包封，一手持培养皿，一手持三角瓶，利用手指调控使培养皿上盖开启约1～2厘米，倒入培养基液体约10～20毫升，盖严。

将培养皿平置，冷却后成一光滑平面，俗称平板。

平板冷却至30℃以下时，接入待脱毒菌种。

接种方法：挑取米粒大小的一块种源，接入平板边缘。

接种后置于规定温度下培养〔视品种调控温度）。

当菌丝萌发至最长为2厘米时，用尖刃接种工具切取菌丝尖端0.4毫米以下，接入新制平板上。

此为1次脱毒。

一般可连续脱毒3～4次。

脱毒次数越多，脱毒效果就越有保证。

二、无底试管脱毒法原材料准备1、无底试管：把待用的试管底部用玻璃刀划掉，使其成为两端都敞口的无底试管。

2、培养基配制：取木屑另加1%石灰、0.5%尿素以及适量水配成含水量55%的培养基。

3、其它：高压灭菌锅、棉塞、比上述无底试管略小的试管一根（如果无底试管直径为20mm，那这根试管直接则为18mm左右）。

操作步骤取上述培养基分成两小断装入无底试管中，具体方法：装料时先用直径小一点的试管插入无底试管内4cm处，然后装料约2厘米后压实；接着装另一端，用手把培养料握成团，然后把试管口对着培养料团插进去2cm左右，再把另一头直径小一点的试管取下来从这一头把培养料向中间推进去，距离另一端培养料约1cm处，最后两头用棉塞封口.注意：高压锅灭菌时试管要横放，不能竖放，其它操作按常规.接种时把母种接到任何一端就行了，等平菇菌丝长满了一端培养基后，其爬壁菌丝会隔空长到另一端培养基上，等到长满另一端后就可以取另一前端菌丝接种了。

925 食用菌怎么种植

食用菌怎么种植
种植食用菌的步骤包括：
1. 配料：根据不同菌类的生长习性，合理配置培养基。

2. 装袋：使用塑料袋进行装袋，有利于菌丝生长。

3. 灭菌：在培养室接种，将菌袋放入灭菌室内，进行高温灭菌。

4. 菌丝培养：保持室内通风，促进菌丝快速生长。

5. 水分管理：根据不同的菌类，选择喷水或浸水方式补充水分。

6. 通风管理：保证空气湿度较低的环境下进行通风。

7. 防止病虫害：勤检查菇场，出现中心霉变等问题及时处理。

8. 出菇管理：待菇蕾萌发，及时采收并做好通风等工作。

另外，有些特殊的种植方法如下：
1. 生料种法：食用菌种植的过程中可选用鲜料为原料，需控制其湿度
在65%左右，种植前需先搭建好菇棚。

2. 发酵种植：发酵是种植的重要环节，需将菌种和麦粒等搅拌均匀后
装入容器中，将其密闭发酵。

注意，不同食用菌的种植方法不同，需根据实际情况选择合适的种植
方法。

同时，也要注意遵循食用菌的生长习性，合理控制温度、湿度、光照等条件。

食用菌母种制作技术

食用菌母种制作技术在食用菌生产中，母种的培养是至关重要的一环。

母种质量的优劣，直接影响到食用菌产量的高低和栽培的成败。

下面小编给大家分享了食用菌母种制作技术，一起来了解一下吧!食用菌母种制作技术制作培养基先将新鲜无病害的马铃薯洗净，去皮后切成小薄片，称200克，加水1000毫升，煮沸20分钟后过滤，其滤汁为马铃薯煮汁。

然后在马铃薯煮汁中加琼脂20克和蔗糖20克煮溶，后补足水至1000毫升，调节pH值在5.5～6。

调好pH值后进行分装，一般将培养基装至试管的1/4处，而后加盖棉塞，再用牛皮纸将试管每10支捆成一捆。

分装时，注意培养基不可沾在近试管口的壁上，以免日后生霉菌。

分装后要立即进行高压灭菌，不可过夜。

高压灭菌将用牛皮纸捆好的试管(棉塞朝上)竖直放入高压锅内进行灭菌。

在0.11兆帕压力下维持30分钟，即可达到灭菌目的。

灭菌时，放汽要充分，否则影响灭菌效果。

开锅取出试管后趁热摆放，使培养基成斜面。

试管的斜面以距棉塞3厘米为宜，斜面摆成后，不宜再摆动。

一级菌种扩管扩管要在无菌条件下进行，先将扩管工具、培养基及菌种放到扩管箱内，然后按每立方米用高锰酸钾5克、40%的甲醛溶液10毫升的量进行熏蒸消毒30分钟。

扩管方法：先将扩管铲在酒精灯火焰上灼烧消毒，然后拔掉母种管上的棉塞，铲一块米粒大的母种，在酒精灯火焰无菌区内迅速送入菌种试管内。

扩管后的母种培育10~15天即可投入生产。

食用菌母种怎么制作母种制作：母种培养基配制：母种培养基的原料是马铃薯，葡萄糖，蛋白胨，水，琼脂粉，以配制一千毫升的母种培养基为例，将马铃薯去皮后称重200克，葡萄糖20克，琼脂粉20克，蛋白胨10克，用量杯量取1000毫升的水倒入锅中，用刀将马铃薯切成片加入锅中，用文火煮沸，煮至用筷子轻轻一插既可插入，这时可以用四层的纱布过滤煮好的马铃薯汁，然后倒在量桶里，看一下，如果不足一千毫升可加水补足一千毫升，在倒入锅中煮，最后加入称好的葡萄糖、琼脂粉、蛋白胨，为了防止锅底烧焦要边加热边搅拌，煮至完全溶化，母种培养基就配制好了。

食用菌母种接种的九大注意事项

食用菌母种接种的九大注意事项1、酒精灯火焰要高酒精灯火焰不够高时，火焰周围的无菌范围小，不利于无菌操作，也易造成接种钩灼烧灭菌不彻底，影响接种后的成品率。

影响酒精灯火焰大小的因素，一是酒精浓度，二是灯芯。

酒精浓度越高燃烧越好，最好使用95%的工业酒精。

灯芯材料太实，塞得有紧时，内吸的酒精少，火力也不旺。

所以，灯芯最好用棉花捻制，并拔出一定的长度；2、母种试管表面和管口要灭菌彻底作为接种物的母种试管表面并未处于无菌环境下保存。

因此，接种时要注意试管表面和管口的灭菌。

具体方法：拔下棉塞后，在酒精灯火焰上转动2-3圈，可有效地减少菌种造成的污染；3、拔塞、取种、接种及棉塞必须在火焰上方或附近操作母种试管和待接种的试管一旦打开棉塞，就不能离开火焰，因为只有在火焰周围很小范围内才能是绝对无菌的；4、接种钩接种钩要灼烧彻底，接种钩最好用较薄的材料制成，灼烧时烧至红色。

并注意接种钩灼烧的长度，灼烧长度以试管长度为度，在火焰上方反复灼烧3-4次即可；5、接种时掉到地上的棉塞不能使用接种时棉塞要夹于右手指间，不可放在操作台上。

一旦掉到台面上，塞之前要在火焰上过一遍再用。

掉到地上的棉塞严禁使用；6、接种钩火焰灭菌后要冷却不经过冷却的接种钩会烫死菌种。

冷却一般在无菌的待接种的试管上部空间进行，也可在斜面上端冷却；7、消毒酒精要清洁注意定期更换；8、操作要到位动作轻盈、敏捷、快速、准确，尽可能地减小声音；9、接种操作后的工作及时清理，打开门窗，排出接种时酒精燃烧放出的废气。

之后关好门窗，打开紫外线灯进行使用后的消毒，以便再次使用。

食用菌栽培学实验---食用菌原种和栽培种培养料的制作实验

食用菌原种和栽培种培养料的制作实验一、目的要求掌握常见食用菌原种和栽培种培养基的制作、接种和培养技术。

二、材料与用具(1)材料:优质小麦、棉籽壳、木屑、稻草、玉米面、葡萄糖或蔗糖、右膏粉、碳酸钙等。

(2)用具:电户、大铝锅、大盆、菌种瓶、12cm x 12cm x0.02cm高压聚丙烯塑料膜、线绳、接种箱、超净工作台、酒精灯等。

三、内容与方法(一)培养基的制作1.麦粒原种培养基制作谷粒(如麦粒，玉米粒)南种培养基制作难度较大，但优点很多。

谷粒营养丰富，大小适中，是绝大多数种类食用菌原种制作的最佳原料。

现以小麦原种培养基制作为例，介绍如下。

(1)麦粒培养基配方:常用麦粒培养基配方为小麦99%、石膏粉1%。

(2)制作方法①泡小麦:冬天浸泡24 ~ 48h,隔夜换水;夏天浸泡10~12h,隔友换水，可加人1%石灰浸泡。

泡好后，小麦粒饱胀，用清水漂洗干净，除去杂质。

②煮小麦:煮至充分吸水，无白心，切忌煮开花。

③木腐生菌类一般添加一定量木屑(10%左右)效果更好:木屑可用煮小麦的水拌料，料:水以1:0.5的比例拌和，或酌情处理;可添加木屑干重0. 5%的蔗糖、0. 5%的尿素、1% 的石灰。

④装瓶:将小麦粒捞出后，趁热滩平，使表面多余水分蒸发，然后加人石膏粉或其他辅料拌匀，再将料装至瓶肩处即可。

⑤封瓶口:用两层完整的塑料膜封瓶口并套好皮筋。

⑥灭菌:麦粒菌种一般采用高压灭菌方式。

高压灭黄于126℃左右维持2h即可。

其排冷气，开锅方法同斜面培养基制作。

2.其他原料制作原种和栽培种培养基(1)粪草培养基(适于制作双孢磨菇菌种)配方:粪草(粪:草=6:4, 堆积发酵15 -20d) 90g,，米桃或麸皮8g，碳酸钙1kg，糖1Kg，水适量。

制作方法:先将粪草堆积发酵，发酵时间18d左右，其间加人米糠等辅料，翻准2-3次，晒干，切碎，装瓶，灭菌。

灭菌方法同麦粒培养基。

(2)木屑-米糠培养基(适宜各种木腐生食用菌)配方:阔叶树木屑70%~ 80%，米糠或麸皮20%~28%，碳酸钙1%，蔗糖1%，石膏1%，水调至适量。

食用菌母种、原种、栽培种制作步骤

食用菌母种、原种、栽培种制作步骤食用菌菌种的质量对食用菌生产至关重要。

菌种的好坏，菌种的保存直接影响到食用菌的产品质量和产量、效益和成败，所以我们要制作优良的食用菌菌种，更要有优良的菌种保存方法，以保存菌种的生活力和优良性状，确保菌种纯种、无污染。

一、菌种制作食用菌菌种分三种即母种（一级种）、原种（二级种）、栽培种（三级种）1.制作母种（一级种）1.1菌种采集选择健壮无病虫害的食用菌子实体。

经表面消毒后，放在无菌的厚纸上，使子实体菌褶向下，在通风条件下经过12--24h，等子实体放出孢子后，将纸折叠起来风干，放入塑料袋中，里面放几粒干硅胶，封好口，放入2--4℃冰箱中，可保存起来长期备用。

1.2母种培养基制作配方：马铃薯200g、琼脂20g、葡萄糖20g、纯净水1000ml。

先把马铃薯切成大约1cm大的小方块，放入1000ml 纯净水中煮30min，过滤后加入琼脂、0.2-0.3%的磷酸二氢钾、再加入20g葡萄糖，溶解后分别装入试管，每个试管装量1/5-1/4，用棉塞封好试管口，外加塑料膜扎紧，放入压力灭菌锅1.3㎏/cm灭菌30min，待温度降至60℃将试管摆成30-35度倾斜面，冷却后观察几天，无受到杂菌污染即可接种，孢子液用灭菌的自来水将孢子稀释，在无菌操作环境下将孢子悬浮液移到试管琼脂斜面上，在25℃下培养，很容易萌发生长成菌丝，然后用石蜡封口置于4-5℃恒温箱中可保存6个月。

2.制作原种（二级种）将木屑78%、麦麸20%、糖1%、石膏1%加入水拌匀（100kg料加125kg水），培养基原料拌匀后拿试纸测ph 值，ph值在6-7为宜，然后装入大口的罐头瓶至瓶肩部，将培养料压平压紧，抹干净瓶的培养料，拿完好无破损的塑料薄膜扎紧瓶口，放入压力灭菌锅1.4-1.5㎏/cm灭菌1.5-2h，冷却至25℃即可进行无菌接种，用接种针从母种试管斜面上挑取少量菌丝体接入瓶中，接种后在25℃恒温箱中培养30d菌丝可长满，即可作为原种（二级种）。

食用菌栽培技术实验报告

食用菌栽培技术实验报告食用菌栽培技术实验报告一、实验目的1、了解食用菌的基础知识。

2、掌握食用菌培养基的配置原理。

3、通过平菇、香菇、金针菇的栽培实验，掌握食用菌代料栽培的一般方法和栽培管理技术。

4、学习和掌握食用菌的组织分离法二、实验内容1. 代料栽培培养基的制备2. 培养基的灭菌3. 接种三、实验原理（食用菌的组织分离法食用菌的母种一般是采用孢子分离法或组织分离法得到的纯培养物。

利用食用菌子实体内部组织进行分离，是获得母种最简便的方法。

四、实验材料1、原种制作实验材料（1）食用菌：香菇、平菇。

（2）培养基：PDA培养基斜面。

（3）仪器或其他用具：75%酒精棉球、接种针记号笔等。

2、食用菌的组织分离（1）试剂：棉籽壳、麸皮、蔗糖、CaCO3（2）仪器或其他用具：平菇菌种、香菇菌种、金针菇菌种、姬菇菌种、茶树菇菌种、台秤、盆子、聚丙烯塑料袋、颈圈、封口膜、橡皮筋、高压蒸气灭菌锅、pH试纸（pH 5.5—9.0）、记号笔、麻绳等棉籽壳3900g 麸皮1000 g蔗糖50 g CaCO350 g自来水5000 ml pH 7.4～7.61、原种制作实验材料（1）拌料按培养料配方准确称取所需棉籽壳和麸皮放入大盆中用手搅拌混合均匀，将所需的蔗糖和CaCO3溶于水中，然后泼洒在棉籽壳和麸皮上，边加水边搅拌，直至均匀。

搅拌好后，焖30分钟，使培养料吸水均匀。

（2）侧培养水分培养料搅拌好后，用于抓一把培养料握在手中，攥紧，手指缝中有水印但无水滴滴下，这时的含水量适合，为60%—62%，若含水量不足，可再加少量的水，充分搅拌均匀，在检测，直至含水量合适为止。

（3）装袋边加边将培养料压实，装至3/4左右，袋口套上颈圈，用木棒在培养料中打一洞，盖上封口膜，用橡皮筋扎紧。

（4）灭菌126 ℃高压蒸气灭菌90分钟。

（5）接种栽培袋冷却到25℃左右，在超净工作台上用镊子或接种枪夹取所需菌种（1个鸡蛋大小）放入培养料袋的洞中。