方法验证和杂质研究讲解
中国药典 方法验证
中国药典方法验证
中国药典是由中国药学会编写和发行的一本权威药学参考书，用于指导药品研发、生产和质量控制等工作。方法验证是药典中的一项重要内容，它是用来确保药品质量和安全性的方法。
方法验证是指通过实验和分析，验证一个测试方法的适用性、可靠性和准确性。药典中的方法验证主要包括以下几个方面：
1. 精确度验证：确定方法的准确性和重复性，包括同一实验室和不同实验室的重复性。
2. 线性范围验证：确保方法在一定浓度范围内的分析结果与样品浓度成正比关系。
3. 灵敏度验证：确定方法对待测物质的最低检测限和最低定量限。
4. 特异性验证：确定方法是否只对待测物质有反应，而不与其他物质产生干扰。
5. 稳定性验证：验证方法在不同条件下，如温度、湿度等变化时的稳定性。
6. 系统适用性验证：验证方法在不同样品基质和样品预处理方法下的适用性。
方法验证的目的是确保药品质量控制方法的准确性和可靠性，为药品研发和生产提供科学依据和技术支持。在药品注册和监管过程中，方法验证的数据和结果是评估药品质量的重要依据之一。
药品中元素杂质分析方法验证
只需4步，做好药品中元素杂质的分析方法验证
国际药品注册网
2018-12-28
对于法规指定的24种元素杂质，在风险评估(Risk Assessment) 过程中，除了可以通过文献查询、供应商调查等非实验手段来确认的低风险金属元素杂质之外，还可以通过一定数量的筛查试验，来评估其他相关元素杂质的潜在浓度水平。监管机构的行业指南指出，根据具体的试验目的（筛查试验/常规实验），所有的试验开展之前，都要先进行合理恰当的方法验证。
今天就药厂实验室典型的元素杂质分析方法验证流程，以及与常见的HPLC方法验证的区别，分为几部分为大家进行介绍。
第一步：确定要验证的元素
在所有验证工作开始之前，首先要明确需要测试的元素杂质。针对不同的给药途径，法规规定了对应的必须要评估的元素。其中1类，2A类的7种元素，是对所有产品都适用的。对于其他非强制/未主动添加的元素，药厂可以根据其潜在的风险来决定是否要包括在方法验证中。
对于这个问题，并没有统一的答案。筛查所有的24种元素，很可能会带来额外的工作量和成本，但在法规全面执行的初期也不
失为一种稳妥的办法。
第二步：前处理方法
明确了要分析的金属元素之后，就要确认方法验证中最重要的部分-样品前处理。好的方法验证，从前处理开始。
与指导原则不同,USP<233>对于适用的四种前处理方法做出了明确的规定。需要强调的是，绝大多数的验证数据偏差和后续方法开发的挑战，都来自前处理的环节。
虽然每种方法都有自己的特点和适合的样品类型（见下表），总体来说直接溶解法在操作的简易性与安全性，结果的稳定性上都
元素杂质方法验证
元素杂质方法验证
元素杂质是指不同于主要成分的微量元素或化合物。为了保证药品的质量和安全性，需要对药品中的元素杂质进行验证。以下是几种常用的元素杂质方法验证：
1. 原子荧光光谱法（AA）：该方法是根据不同元素的原子吸收特性，利用吸收光谱测定其中某些元素的含量。AA法具有灵敏度高、分辨率好、选择性强等优点，是常用的元素杂质分析方法之一。
2. 感应耦合等离子体质谱法（ICP-MS）：该方法可以同时测定元素杂质的多个元素，具有高精度和高分析速度等优点。
3. 原子荧光光度法（AED）：使用激发光源使样品中的元素发生激发态，然后测量其发射光谱，从而确定其中的元素种类和含量。该方法具有很高的检测灵敏度和多元素分析的能力。
4. 燃烧离子色谱法（CIC）：CIC法主要用于测定药品中的卤素含量，该方法具有独特的分离能力和极高的灵敏度。
5. 紫外-可见分光光度法（UV-Vis）：该方法主要用于有色元素的检测，如铁、铜、镍等金属离子。通过测量样品的吸收光谱，可以确定其中的元素含量。
研究药品杂质分析的方法验证
研究药品杂质分析的方法验证
【摘要】在临床上药品是对病患进行治疗的常用手段，根据病患不同的病情
情况采用适当的药物进行针对性的处理。药品的质量和治疗效果有着密切的联系，在药品生产的过程中药品中的杂质会对药品的质量产生影响，从而会对病患的治
疗效果产生不良影响。随着人们安全意识的提高以及对药品质量的重视，目前对
药品杂质的分析方法种类较多，不同的方法所达到的分析效果也有差异，本文对
此进行了相关的研究。
关键词：药品杂质；分析；方法验证
药品在临床的使用过程中能够对病患的病情起到良好的治疗效果，但是在长
期用药的过程中由于受到用药剂量以及药物质量的影响，容易出现不良反应[1]。
而药品中存在的杂质会对药品的质量产生不良影响，因此药品中杂质能否得到合
理和有效的控制会直接关系到对药品质量的控制。为了能够对药品的杂质得到准
确可靠的测试，需要采用科学准确的方法来进行可行性的验证，从而才能够提高
药品的检查效果和保证药品的质量。本文对目前常用的药品杂质分析方法进行研究，具体内容如下。
1药品杂质的分析方法
目前在药品生产的过程中主要采用的分析方法包括有机杂质分析方法和无机
杂质分析方法，两种方法都能够对药品中的杂质进行检验，而具体的操作过程如下。
首先是有机杂质的分析方法
在一般的情况下，在药品生产过程中对药品的检验主要是采用化学法、色谱
法以及光谱法来对其中的有机杂质进行检验，而在检验方法的选择方面需要考虑
的是药品的结构和产物之间的差异性，因此为了更好的对药品中的杂质进行控制，需要采用针对性的分析技术来对不同结构的杂质进行检测以及分离处理[2]。随着
检验分析方法的验证和确认培训课件
• 以标示量规定含量限度的，可参照化学药， 一般设定范围为 标示量的80％～120％。
检验分析方法的验证和确认
21
中药含量限度的确定
含量限度应根据中药制剂实测结果与原料药材的含量
情况确定。尽可能多的测定数据才有足够的代表性，至少
如果方法需要标准化如收载到药典中的 方法，则应考虑重现性。这些资料不是 申请上市文档的三部分。
的精密度称为重复性。 验浓度下，至少测定6次。
中间 精密度
在同一个实验室，不同 时间由不同分析人员, 用不同设备测定结果之 间的精密度，称为中间 精密度。
应根据方法使用的环境而定，确定随机 事件对分析方法精密度的影响。 变动因素为：不同日期 不同分析人员 不同设备
重现性
通过实验室之间的检测来评价；
在不同实验室由不同分 析人员测定结果之间的 精密度
回收试验： 加样回收试验：
检验分析方法的验证和确认
24
4）准确度 —原料药
➢ 用已知纯度的被分析物(如参比物质)进行测定 ➢ 用提出的分析方法的检测结果与第二种成熟的分析方法的
检测结果做比较，而后者的准确性是有规定的和(或)经确 定的。 ➢ 准确性可以在精密度、线性和专属性建立后，推论而得.
检验分析方法的验证和确认
hj 716-2014方法验证培训内容
HJ 716-2014方法验证培训内容
随着科学技术的不断发展，方法验证在各个领域中的重要性日益突出。为了保证测试结果的准确性和可靠性，各行业对方法验证的要求也越
来越高。HJ 716-2014是国内关于方法验证的标准，为了更好地培训
和指导相关人员，以下是针对HJ 716-2014方法验证培训内容的介绍。
一、方法验证的概念和意义
1.1 方法验证的定义
方法验证是指通过实验数据和统计分析方法，证明所选用的分析方法
适用于所要求的测定目的，并且以此为依据对测定过程和测定结果的
可靠性做出评价的过程。
1.2 方法验证的意义
方法验证是保证分析方法准确性和可靠性的重要手段，对于确保产品
质量、保障人民健康具有重要意义。通过方法验证可以确认分析方法
的适用性，评估分析方法的可靠性，提高测试结果的准确性和可靠性，为企业的产品质量控制提供重要依据。
二、HJ 716-2014方法验证培训内容
2.1 方法验证的基本要求
在培训课程中，首先需要介绍HJ 716-2014标准中对方法验证的基本要求，包括验证的范围和目的、验证的基本原则、验证方案的制定与执行、验证结果的评价和判定等内容。
2.2 方法验证的实施步骤
接下来，需要介绍方法验证的具体实施步骤，包括验证方案的制定、验证实验的执行、数据的统计分析与解释、结论的得出和报告的撰写等具体步骤。通过对每个步骤的详细介绍，可以帮助学员全面理解方法验证的全过程，并为实际操作提供指导。
2.3 方法验证的实际操作
除了理论知识的介绍，培训课程还应该包括方法验证的实际操作。通过实验室实际操作或者模拟操作，让学员亲自参与方法验证的每个环节，加深对方法验证理论知识的理解，提高操作技能。
方法验证和杂质研究
➢ 重复性——6份相同浓度供试液，1人在尽可能相同的条件下测定，测得6份供 试液含量结果的RSD ≤2.0%
➢ 中间精密度——6份相同浓度供试液，分别由2人用不同仪器测定，测得12个含 量结果RSD ≤2.0%
某些情况下，需要对分析方法再次进行全面或部分验证，以保证分析 方法可靠。验证内容由改变程度决定。
➢ 原料药合成工艺改变——可能引入新杂质，验证杂质检查法和含量测 定方法的专属性；
➢ 原料药来源变更——可能影响杂质及含量测定的专属性和准确度，需 对杂质检查法和含量测定进行再验证；
➢ 制剂处方组成改变、辅料变更——可能影响鉴别专属性及含量测定的 准确度，需验证鉴别和含量测定方法；
1. 方法验证的主要内容 2. 含量方法验证 3. 有关物质方法验证可接受标准 4. 溶出方法验证
3. 有关物质方法验证可接受标准
➢ 准确度——根据有关物质定量限和该杂限度，配制三个浓度的溶液各 三份。各浓度下的平均回收率在80%-120%之间（杂质浓度为定量限 时放宽至70%-130%），RSD ≤10%
➢ 系统适用性——对整个系统（分析设备、电子仪器与实验操作、测试样
品）进行评估的指标 ▪ 含量测定/杂质检查 ▪ 配制6份同浓度供试品/杂质溶液进行分析，结果可接受的标准如下表所示
药物杂质研究方法详解
药物杂质研究方法详解
药物中的杂质分析是一个非常重要的部分，小析姐就杂质来源分析的重要作用，同时重点探讨了杂质研究过程中分析技术的发展，尤其在结构鉴定中质谱技术的发展，与此同时，根据国外毒性杂质研究的指导原则，明确了杂质毒性研究的方法。
近年来，随着药物研究的不断深入以及杂质研究要求不断提高，杂质的分析技术以及研究方法正发生着重要的改变。在对杂质建立分析方法时，清晰的杂质研究过程是方法建立的基础，而且选择合适的分析技术也至关重要。
杂质的来源分析
药物中的杂质可能来源于药物生产以及销售等各个环节(图1)。根据ICH指导原则可将药物杂质分为有机杂质、无机杂质、残留溶剂以及其他杂质。本文主要针对有机杂质进行探讨。
对药物杂质研究时引入“质量源于设计( Quality byDesign，QbD)”的理念，可在药物生产之前根据具体工艺的合成机制、起始物料及各中间体的基本结构，初步勾画出产品的杂质谱。杂质来源分析是制定药物杂质控制策略的基础，尤其是在对毒性杂质来源分析时，应分析所有合成和生产工艺中的试剂、中间体、副产物，推测可能产生的潜在杂质以及分析实际存在的杂质。在原料药合成结束后，药物的活性化合物虽然经过毒性分析已不含有“警示结构”(alerting structure)，但是在生产过程中使用到含有警示结构的化合物则还需考虑其遗传毒性。
杂质的研究方法
在药物研发过程中，药物杂质的分析是关键。因此，在杂质研究中清晰的杂质结构研思路(如图2)以及合适的杂质分析技术可极大地缩短杂质研究时间，推动着药物研究的快速发展。1、杂质前处理技术杂质的前处理是伴随着药物活性成分前处理而存在的，然而药物中杂质的含量低且其结构与主成分差异较大，因此常规药物活性成分的前处理和检测方法(如初始流动相溶解后直接进行 HPLC-UV 分析)并不一定适用于药物杂质，应针对不同的样品选择不同的前处理技术。
有关物质方法验证
有关物质方法验证
有关物质方法验证（以hplc法为例）
（1）系统适用性试验
系统适应性试验主要就是实地考察主成分与杂质的拆分情况以及主峰参数信息，例如理论塔板数、拖尾因子、拆分度等，均应当合乎测量建议。
空白溶液、自身对照溶液、供试品溶液各进1针。系统精密度
自身对照溶液已连续进样6次，峰面积rsd不大于2%，留存时间rsd不大于1%。
（2）专属性
专属性系指在其它成分可能将并存的情况下，使用的方法能够精确测量出来被测杂质的特性。对于原料药，可以根据其制备工艺，使用各步反应的中间体（尤其就是后3步反应的中间体）、非对映异构体、特定杂质、粗品等做为测试Fanjeaux展开系统适用性研究，实地考察产品中各杂质峰及主成分峰相互间的拆分度与否符合要求，从而检验分析方法对工艺杂质的拆分能力。对于制剂，重点掌控水解杂质。
专属性试验（用二极管阵列检测器）1、原料药溶剂自身对照供试品起始原料合成中间体
特定杂质（可能会与初始原料和制备中间体重复）
混合样：将起始原料、合成中间体、特定杂质加到供试品溶液中。特定杂质的浓度一般同限度浓度，起始原料和合成中间体的浓度一般同自身对照的浓度（如果浓度过高，可能会有杂质峰干扰）。
以上样品各入一针，主要实地考察色谱条件能够无法有效率验出杂质，以及各个峰之间的拆分情况，特别就是主峰和特定杂质峰与相连杂质峰的拆分情况。
注：在现有标准的色谱条件下，如果有的起始原料和合成中间体的峰与主峰
的拆分度不符合要求或者留存时间过长，只要初始原料和制备中间体不是水解产物，可以用其它最合适的色谱条件单独掌控，如果粗品中未验出，以后可以无此掌控。
杂质检查方法的方法学验证各项指标分析
杂质检查方法的方法学验证各项指标分析
杂质检查方法的方法学验证各项指标分析
姓名：王芳
药物分析中药品检验基本程序包括：鉴别、检查、含量测定、写实验报告等步骤
检查项下包括反映药品安全性有效性的试验方法和限度、均一性、纯度等制备工艺要求等内容。药物的杂质是指药物中存在的无治疗作用或者影响药物的稳定性、疗效,甚至对人体的健康有害的物质。杂质的来源可由生产和贮藏过程中引入：①生产过程中主要是由于所用原料不纯或者原料反应过程中反应未完全，以及反应的中间产物、反应的副产物等造成药品原料中杂质的存在；或者是由原料生产过程中反应的溶媒、催化剂等溶剂的残留所造成的药物的杂质。②贮藏过程引入主要是受温度、湿度、日光、空气等外界条件的
影响或者受微生物的作用产生的杂质。在药物的研究、生产、贮存和临床应用等方面，必须保持药物的纯度，降低药物的杂质，这样才能保证药物的有效性和安全性。
原料药和制剂主要是对药物中的微量杂质进行纯度检查，以判断药物纯度是否符合杂质限量的规定要求，而生物制品的杂质检查除包括一般杂质检查，特殊杂质检查外还应对其进行安全性检查。杂质定量、定性检查方法主要是根据药物和特殊杂质在理化性质上的差异来进行的，可以采用容量分析法，光谱法分析法，色谱分析法等，各种检测方法所需的方法学验证的指标包括准确度，精密度，专属性，线性，范围，检测线、定量线，耐用性八项指标，但采用不同方法所需的指标不尽相同，杂质限量检查一般需要验证专属性，检测线，耐用性。而杂质定量分析方法除检测限外其它指标一般都需验证⑷。
不同实验应该根据不同实验目的对对各项指标进行验证，下面就杂质种类及近年来检测杂质最常用的检测方法进行分析：
方法学验证中各项指标的深度剖析-谢沐风讲解
22
质量标准中制订有关物质的原则 ● 采用杂质对照品法、用于降解产物的准确测定，如氢氯噻嗪、对乙酰氨
基酚等。 ● 采用强破坏试验破坏出杂质。如中国药典中的氧氟沙星所有品种，均在
HPLC法的色谱条件下拟定了：取供试品溶液，置紫外灯下（254nm） 照射4小时以上，使产生的紧邻主峰前的杂质峰与主峰的分离度应符合规 定。 ● 不采用任何方式。
柺 愊 曐 帩 帪 娫 柺 愊 %
1 4 0
1 3 0
1 2 0
1 1 0
1 0 0
9 0
8 0
7 0
6 0 0
2
4
6
8
1 0
1 2 m i n
1 4
1 6
1 8
2 0
2 2
2 4
1 6 0 1 5 0 1 4 0 1 3 0 1 2 0 1 1 0 1 0 0 9 0 8 0 7 0 6 0
时间(h) 0 0.5 1 1.5 2 3
15
四、检测限
● 信噪比的三倍 —— 纯属“纸上谈 兵”，实际测定中根本用不上。 ● 是相对值，不是绝对值。是相对于 供试品溶液浓度的多少分之一而言， 一般至少要在5000倍以上。
16
有关物质、含量与自身对照三者浓度的关系
浓 度 进样量 绝对值 相对于样品测定浓度的
ICH Q3及杂质研究讲解
化学药品新注册分类申报资料要求（试行）
3.2.S.3.2 杂质 以列表的方式列明产品中可能含有的杂质（包括有机杂质，无机杂质，残留溶剂和 催化剂），分析杂质的来源（合成原料带入的，生产过程中产生的副产物或者是降 解产生的），并提供控制限度。示例如下：
杂质名称 杂质结构 杂质来源 杂质控制限度 是否定入质量标准
对于降解产物可结合加速稳定性和强制降解试验来加以说明；对于最终质量标准中 是否进行控制以及控制的限度，应提供依据。 对于已知杂质需提供制备、结构确证等资料。 结合起始原料和本品的制备工艺，对可能存在的遗传毒性杂质进行的分析、研究和 控制。 10.4．（3.2.S.4）原料药的质量控制 应提供充分的试验资料与文献资料，证明仿制药的质量与已上市原研发厂产品的质 量是一致的，仿制品的货架期标准是合理可行的，且不低于现行的技术指导原则与 各国药典的要求。
4.杂质限度 根据模拟上市批次中发现的杂质制定定入标准的杂质范围，这些杂质称为特 定杂质 确定结构的特定杂质 重复出现的含量大于等于鉴定限度的未确定结构的特定杂质 已知或推测特殊毒性或基因毒性的杂质（限度低） 非特定杂质 限度低于鉴定限度高于报告限度的杂质
5.杂质界定 界定：确定单个或某些杂质在此数量水平生物安全性的评估过程。 界定阈值
2.有机杂质来源 分析杂质来源，评估化学反应、原材料是否引入及可能的降解产物 起始物 副产物 中间体 降解产物 试剂、配位体、催化剂 研制期间及模拟上市所有批次的分析结果，至上市 人工降解实验产生的潜在降解产物（界定） 降解产物 稳定性条件下降解的产物
方法验证PPT课件
06
方法验证的应用和展望
BIG DATA EMPOWERS TO CREATE A NEW
ERA
方法验证在实际工作中的应用举例
1 2 3
药品研发 在药品研发过程中，方法验证被广泛应用于药物 分析、质量控制等环节，确保实验结果的准确性 和可靠性。
环境监测 环境监测领域需要准确测量各种环境指标，方法 验证可以确保测量结果的准确性和可比性，为环 境保护提供科学依据。
线性范围
指分析方法在给定浓度范围内，测量结果与浓度之 间的线性关系。
检测限和定量限
指分析方法能够可靠检测和定量的最低分析物浓度。
03
方法验证的计划和设计
BIG DATA EMPOWERS TO CREATE A NEW
ERA
方法验证计划的制定
确定验证目标
01
明确方法验证的目的和需要解决的问题，例如评估方法的准确
步骤 明确验证目标； 选择合适的样本；
方法验证设计来自百度文库原则和步骤
01
设计实验方案；
02
进行实验操作；
收集和分析数 据；
03
04
得出结论并撰 写报告。
方法验证中样本的选择和处理
样本选择
根据方法验证的目标和实验设计，选择具有代表性的样本，包括正常样本、异常样本和临界样本等。
样本处理
对选定的样本进行必要的处理，如样本的采集、保存、运输、前处理等，以确保样本的质量和稳定性。同 时，应遵循相关的伦理和法规要求。
CDE培训杂质研究及案例分析课程
限度
总杂质2.0％
杂质ABCD均0.3％，其 它0.1％，总杂质1.5％。 对映体杂质E0.3％
未收载
同EP7.1
制剂
方法同上，总杂质3.0％
未收载
•
阿托伐他汀钙杂质研究
杂质谱分析 工艺杂质：杂质A（去氟阿托伐他汀） 杂质C（双氟阿托伐他汀）、杂质F、杂质G 工艺杂质及降解产物 杂质B（非对映异构体） 杂质E（对映异构体） 降解产物：杂质D（环氧化物） 杂质H（内酯化降解产物） EP中8个已知杂质结构
•
例：盐酸帕罗西汀
F
O O
O
N
, HCl , 1/2H2O
EP、USP收载，列出7个已知杂质A-G HPLC法：控制杂质A（去氟物）0.3％，其它单一杂 质0.1%，总杂质不得过0.5％ 手性HPLC控制杂质D（对映异构体）不得过0.2％
•
例：盐酸帕罗西汀
F N CH 3
★杂质谱未分析或分析不到位； ★杂质分析检查方法缺乏针对性； ★杂质限度的确定依据不足； ★忽视杂质研究与其它研究工作联系； ★……
•
质量研究主要问题分析
有关物质 抗氧剂 有机溶剂残留 含量测定 其它
源自过渡期集中审评品种（2000个）
•
二、杂质研究的基本要求及研 究思路
方法验证和杂质研究.
质控分析方法验证
1. 方法验证的主要内容
2. 含量方法验证可接受标准 3. 有关物质方法验证可接受标准 4. 溶出方法验证可接受标准
2
Venturepharm PDS
质控分析方法验证
1. 方法验证的主要内容
2. 含量方法验证 3. 有关物质方法验证 4. 溶出方法验证
2. 待测物全部从检测器中检出
11
Venturepharm PDS
1. 方法验证的主要内容
准确度——方法测定结果与真实值或参考值的接近程度，用回收率表示
配制三个浓度下各三个样品，共九个样品平行两次测定
回收率：辅料+对照品 加样回收率：样品+对照品（扣除本底值）
能否得到制剂 的全部组分？
Q：制剂中某已知杂质的回收率如何测定？(含已知量被测物的各组分混合物) 含量测定：配制80%、100%和120%三个浓度。回收率在98.0%-102.0%之
使用偏差d、标准偏差SD和相对标准偏差RSD表示
偏差
标准偏差 相对标准偏差
d=xi-x
n
测量值与平均值之差
SD
(x x)
i 1 i
2
n 1
SD 100% x
RSD
16
Venturepharm PDS
1. 方法验证的主要内容
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1. 方法验证的主要内容
➢ 专属性——方法不受杂质、降解物、辅料的影响，可正确鉴定被分析物
▪ 鉴别反应：仅被分析物呈正反应，阴性对照呈负反应，结构相似及组分中 的有关化合物也呈负反应。
▪ 杂质检查：加入的杂质可与共存物质分离并被检出 与原理不同的可信方法比较；强制降解
▪ 含量测定：比较加入杂质或辅料前后的测定结果 与可信方法比较测定结果（强制降解样品）
9
Venturepharm PDS
1. 方法验证的主要内容
➢ 范围——能达到一定准确度、精密度和线性的浓度区间，
为规定值 ▪ 半成品或成品含量测试：80%-100%或更宽 ▪ 含量均匀度：70%-130%，据剂型特点有差异 ▪ 溶出度：限度的±20%，或下限的-20%至上限的+20% ▪ 定量杂质：规定限度的±20%，或采用峰面积归一化法与
3
Venturepharm PDS
1. 方法验证的主要内容 ❖ 验证内容：
➢ 专属性 ➢ 线性
Fra Baidu bibliotek
中国药典2010年版二部附录ⅪⅩ A 药品质量标准分析方法验证指
导原则
➢ 范围
➢ 准确度
➢ 精密度（重复性、中间精密度和重现性）、
➢ 检测限和定量限
➢ 耐用性
➢ 系统适用性
4
Venturepharm PDS
中间精密度：同实验室的不同人员、时间和设备测定结果的精密度 含量测定RSD ≤2.0%，杂质定量RSD ≤20%
▪ 含量测定：在80%-120%浓度范围内配制样品。（考虑含量浓度、含 量均匀度浓度及溶出的浓度，实际操作采用20%-200%）
相关系数R≥0.998，Y轴截距在100%响应值的2%以内，RSD≤2.0% ▪ 杂质定量测定：在定量限至一定浓度范围内配制样品。（考虑实测
该杂质的值） 相关系数R≥0.990，Y轴截距在100%响应值的25%以内, RSD≤10%
15
Venturepharm PDS
1. 方法验证的主要内容
➢ 精密度——多次取样测定同一均质供试品所得结果间的接近程度
▪ 使用偏差d、标准偏差SD和相对标准偏差RSD表示
▪ 偏差 ▪ 标准偏差
d=xi-x 测量值与平均值之差
SD
n
(xi x)2
i 1
n 1
▪ 相对标准偏差
RSD SD 100% x
被测物进行测定（加样回收试验法） 3. 用本法所得结果与已建立准确度的另一方法测定的结果
进行比较
14
Venturepharm PDS
1. 方法验证的主要内容
➢ 准确度
▪ 杂质 ：
1. 往样品中加入已知量的杂质进行测定； 2. 若不可能得到某种杂质或降解产物，可把此方法的分析
结果与另一已验证的或药典的分析方法获得的结果进行 比较 。
8
Venturepharm PDS
1. 方法验证的主要内容 ➢ 范围——能达到一定准确度、精密度和线性的浓度区间，为规定值
▪ 涉及到定量测定的检测项目均需要对范围进行验证，如含量测 定、含量均匀度、溶出度或释放度、杂质定量试验等。
▪ 分析方法的范围应根据具体分析方法以及对线性、准确度、精 密度的结果和要求确定，无特殊要求时，通常采用以下标准：
化药质控分析方法验证和杂质研究
质控分析方法验证
1. 方法验证的主要内容 2. 含量方法验证可接受标准 3. 有关物质方法验证可接受标准 4. 溶出方法验证可接受标准
2
Venturepharm PDS
质控分析方法验证
1. 方法验证的主要内容 2. 含量方法验证 3. 有关物质方法验证 4. 溶出方法验证
▪ 含量测定：配制80%、100%和120%三个浓度。回收率在98.0%-102.0%之 间，RSD ≤2.0%
▪ 定量杂质：配制浓度根据有关物质定量限和该杂限度。回收率在80%120%之间（杂质浓度为定量限时放宽至70%-130%），RSD ≤10%
12
Venturepharm PDS
1. 方法验证的主要内容 ➢ 准确度
含量同测时，为杂质限度的-20%至含量上限的+20%
10
Venturepharm PDS
1. 方法验证的主要内容 ➢ 准确度——方法测定结果与真实值或参考值的接近程度，用回收率表示
▪ 准确度是定量测定的必要条件，涉及到定量测定的检测项目均需 要验证其准确度，如杂质定量测定、含量和溶出方法。
▪ 分析方法的准确度能够确保： 1. 样品中的待测物全部溶解 2. 待测物全部从检测器中检出
11
Venturepharm PDS
1. 方法验证的主要内容
➢ 准确度——方法测定结果与真实值或参考值的接近程度，用回收率表示
▪ 配制三个浓度下各三个样品，共九个样品平行两次测定
回收率：辅料+对照品 加样回收率：样品+对照品（扣除本底值）
能否得到制剂 的全部组分？
Q：制剂中某已知杂质的回收率如何测定？(含已知量被测物的各组分混合物)
➢ 线性——在设计的测定范围内，样品浓度与响应值呈线性关系
▪ 线性是定量测定的基础，设计定量测定的项目，如 杂质定量检查、含量和溶出方法均需要验证其线性
▪ 可用同一贮备液精密稀释后配制，或分别精密称样 配制。
7
Venturepharm PDS
1. 方法验证的主要内容
➢ 线性——在设计的测定范围内，样品浓度与响应值呈线性关系
▪ 原料药：
1. 可用已知纯度的对照品或符合要求的原料药进行测定； 2. 用本法所得结果与已建立准确度的另一方法测定的结果
进行比较
13
Venturepharm PDS
1. 方法验证的主要内容
➢ 准确度
▪ 制剂：
1. 用含已知量被测物的各组分混合物进行测定； 2. 如不能得到制剂的全部组分，可向制剂中加入已知量的
16
Venturepharm PDS
1. 方法验证的主要内容
➢ 精密度——多次取样测定同一均质供试品所得结果间的接近程度
▪ 使用SD和RSD表示时取样测定次数应至少6次。
重复性：同一分析人员在相同条件下测定结果的精密度； 可采用3样各测3次或1样测6次 含量测定RSD ≤2.0%，杂质定量RSD ≤15%
空白对照应无干扰，主成分与各杂质峰 （该杂质峰与其他峰）R≥2
5
Venturepharm PDS
1. 方法验证的主要内容
➢ 专属性试验中需要注意的问题
▪ 波长的选择； ▪ 每次试验时必须运行空白样品； ▪ 试剂、玻璃容器、流动相和过滤介质可能会影响方法的
专属性。
6
Venturepharm PDS
1. 方法验证的主要内容