杂质研究及案例分析--药品审评中心

TLC法实验结果
光照10天含量（UV法）下降10％，未检出杂质斑点 影响因素、加速和长期实验，样品均未检出杂质斑点

HPLC法实验结果
杂质达7％以上
方法的比较研究显示，TLC法不适于本品的有关物质检查

CP2010版，改用HPLC法

例：盐酸舍曲林
NH

有7个已知杂质A-G
, HCl
Cl
Cl
杂质A:非对映异构体 杂质B、C、D：工艺杂质 杂质E（扁桃酸）：拆分试剂 杂质F：降解产物 杂质G：对映异构体
二、杂质研究的基本要求及研 究思路
●相关技术指导原则 ●杂质谱分析 ●研究建立检查方法 ●进行充分的方法验证 ●确定合理的杂质限度 ●超过目标限度时的考虑 ●仿制药杂质研究的特点 ●杂质研究与其它研究工作的关系
相关技术指导原则
化学药物杂质研究的技术指导原则 化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则 已有国家标准化学药品研究技术指导原则 ANDAs：Impurities in Drug Substances，FDA ANDAs：Impurities in Drug Products，FDA Q2A Text on Validation of Analytical Procedures Q2B Validation of Analytical Procedures：Methodology Q3A (R) Impurities in New Drug Substances Q3B (R) Impurities in New Drug Products
药理活性或毒性杂质—安全性 普通杂质，控制纯度—有效性
存在的主要问题和差距
★杂质谱未分析或分析不到位； ★杂质分析检查方法缺乏针对性； ★杂质限度的确定依据不足； ★忽视杂质研究与其它研究工作联系； ★……
质量研究主要问题分析
有关物质 抗氧剂 有机溶剂残留 含量测定 其它
源自过渡期集中审评品种（2000个）


杂质对比研究结果分析
杂质谱与被仿品不一致，有超过鉴定限度的新杂质；且已 知杂质含量亦超过被仿品 ——改进工艺，降低杂质水平 工艺路线：起始原料，中间体质量控制；反应条件的控制； 精制方法等。

仿制药杂质研究的特点


杂质限度的确定
指导原则要求 被仿品质量标准（该质量标准是否完善） 被仿品实测结果（杂质种类、杂质含量） 试制样品研究结果（杂质种类、杂质含量） 相关文献资料

例：盐酸帕罗西汀
F
O O
O
N
, HCl , 1/2H2O

EP、USP收载，列出7个已知杂质A-G HPLC法：控制杂质A（去氟物）0.3％，其它单一杂 质0.1%，总杂质不得过0.5％ 手性HPLC控制杂质D（对映异构体）不得过0.2％
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
例：盐酸帕罗西汀
F N CH 3

杂质G：遗传毒性杂质，为工艺杂质 EP、USP均规定该杂质不得过1ppm 具体品种：根据采用的工艺进行分析，是否存在该杂质 如果存在，应研究建立适当的方法进行控制， 限度：不得过1ppm
杂质谱分析
★基于结构特征，分析可能的降解产物
例：罗库溴铵中杂质C
O O O N HO N
+
OH O OHN N
+
HO
杂质谱分析
★通过强降解实验，分析研究降解产物
考察样品在酸、碱、高温、光照、氧化等因素影响下的降解产 物。 必要时，可根据情况进行以上因素综合存在时的强制降解实验。
★与理论分析结果进行对比
超过目标限度时的考虑


采取措施降低杂质至目标限度以下（首选）
完善精制方法 优化合成工艺 控制原料及中间体的纯度 变更合成路线 完善包装及贮藏条件（针对降解产物） 完善制剂处方工艺（针对降解产物）




进行杂质安全性研究
采用含有杂质的原料药或制剂 采用分离的杂质单体
超过目标限度时的考虑
杂质研究与其它研究之间关系


与原料药制备工艺研究
制备工艺决定杂质水平（杂质种类、杂质含量） 杂质研究结果验证制备工艺的可行性 杂质结构结果为优化制备工艺提供重要信息 杂质检查方法的验证需制备工艺相关信息的支持
杂质研究与其它研究之间关系


与制剂处方工艺研究
处方工艺对杂质水平有重要影响
杂质谱分析
★研发过程中检测到的实际存在的杂质 对超过鉴定限度的杂质鉴定结构，分析研究其来源 工艺杂质？ 降解产物？ 其它来源？
杂质谱分析
★参考信息：
通过被仿药品质量标准（仿制药） 国家标准中的已知杂质 EP、BP、USP、JP等标准中的已知杂质
杂质谱分析
★参考信息：
通过被仿药品实际测定结果获取杂质信息（仿制药） 采用适当的检查方法（LC/MS等），对被仿药品进行实际测定， 对其杂质情况（杂质种类、杂质含量）进行研究分析 应关注被仿药品是否有良好的研究基础
在原料药符合要求的前提下，制剂的处方工艺实际 决定了产品的杂质水平是否可接受 上

杂质研究是评价处方工艺合理可行性的重要依据 杂质结构结果为优化制备工艺提供重要信息 若制剂中杂质水平超过预期目标，应改进完善处方工艺
杂质研究与其它研究之间关系


与稳定性研究
杂质研究（降解途径、降解产物）是稳定性研究的重要 内容 是贮藏条件选择的重要依据 稳定性研究中杂质考察结果是评价制剂处方工艺合理可行 性的重要依据 杂质限度需要结合稳定性考察结果确定（在符合安全性要 求的前提下）
研究建立检查方法
★基础和经验
明确杂质检查的目标（基于杂质分析） 了解常用方法（例如HPLC、TLC、GC等）的特点 了解杂质和药物的特性 充分的文献调研 既往杂质分析的研究经验 方法的优化和调整 多种方法的相互比较、相互补充
研究建立检查方法
例：氟哌利多注射液
F N O N N O
BP及USP均采用HPLC法检查有关物质 BP限度：单一杂质0.25％，总杂质0.5％ 原料药原国家标准，TLC法（除主斑点外不得有其它杂质斑点）
定量实验：关注和验证准确度、精密度、专属性、定量限、线性、范 围、耐用性 限度实验：至少应关注和验证专属性、检测限、耐用性

充分的方法验证


专属性研究
原料药合成中间体、粗品等的分离度考察 原料药及其制剂的强制破坏实验 制剂的辅料干扰实验 杂质加入实验 和药典方法或经论证的其它方法进行比较 峰纯度检查（二极管阵列检测、质谱检测）
阿托伐他汀钙杂质研究

本品常用制备工艺为先分别合成主环和侧链，然后缩合、脱保 护、成盐。在常规条件下前述8个杂质均可能出现可作为杂质 研究的重要参考依据 需要注意存在的杂质并不限于前述8个已知杂质
H3C O
+
CH3 OH N
CO2
-
N
Ca2
OH , 3H2O
2
F
阿托伐他汀钙杂质研究





杂质结构决策树
..\..\化学药品指导原则\化学药物杂质研究技术指导原则.pdf
仿制药杂质研究的特点


参考信息：被仿产品的相关信息（质量标准、实 测结果等） 目标：杂质水平不超过被仿产品 杂质对比研究：重要的研究手段
前提：被仿品的杂质已得到充分研究，安全性已得到
论证
仿制药杂质研究的特点

原料药杂质研究思路 以EP标准中的检验方法及限度为参考依据，进行必要的方法 验证 试制样品杂质检查结果符合EP标准要求，无超过鉴定限度的 其它杂质——达到研究目标 若杂质谱与EP标准一致，但杂质量超过限度要求——完善工 艺（精制：优化工艺参数；控制起始原料及中间体质量） 出现超过鉴定限度（0.1％）的新杂质——鉴定结构，分析原 因，修改完善工艺，降低杂质量至0.1％以下。
充分的方法验证

线性、定量限、检测限等
采用杂质进行相关试验

关注杂质紫外吸收特征，确定适宜的检测波长 关注杂质相应因子

例：盐酸左布比卡因注射液
CH3 N CHO 3 N CH3 H3C NH2 CH3

2,6-二甲基苯胺为毒性降解产物 BP（布比卡因注射液）：对照品比色法，400ppm 上市同品种：采用HPLC杂质对照品法 研制产品：方法学研究未针对该已知杂质进行验证
杂质研究及案例分析
主讲人：张玉琥 讲习组成员：于红 成海平 药品审评中心 2011.5
提纲
一、前言 二、杂质研究的基本要求及研究思路 三、案例分析 四、小结
一、前言
一、杂质研究在药品研发中的地位 二、存在的主要问题和差距
杂质研究的重要地位
杂质—任何影响药物纯度的物质 包括有机杂质、无机杂质、残留溶剂 本讲主要讨论有机杂质 杂质来源—工艺杂质、降解产物等
总杂质2.0％
杂质ABCD均0.3％，其 它0.1％，总杂质1.5％。 对映体杂质E0.3％
未收载
同EP7.1
制剂
方法同上，总杂质3.0％
未收载
阿托伐他汀钙杂质研究





杂质谱分析 工艺杂质：杂质A（去氟阿托伐他汀） 杂质C（双氟阿托伐他汀）、杂质F、杂质G 工艺杂质及降解产物 杂质B（非对映异构体） 杂质E（对映异构体） 降解产物：杂质D（环氧化物） 杂质H（内酯化降解产物） EP中8个已知杂质结构


例：盐酸舍曲林
采用一种方法不能有效控制所有杂质 针对不同杂质，采用不同方法进行控制 HPLC法：杂质E（拆分试剂）0.2％ GC法：杂质C和D总量0.8％ 杂质A、B、F均0.2％ 其它单一杂质0.1％，总杂质1.5% 手性HPLC，杂质G（对映异构体）1.5％



充分的方法验证


灵敏度（检测限）、专属性、定量限、线性、耐用性等
工艺杂质：工艺过程中引入的杂质，包括起始原料及可能 带入的杂质、中间体、副产物等
降解产物：药物降解产生，如水解、氧化、开环、聚合等 反应产物，与药物的结构特征密切相关
杂质研究的重要地位
★保证药品安全有效是研发及评价所要遵循的基 本原则 ★杂质研究是药学研究（CMC）的重要内容，同 时也直接涉及到药品的安全有效性
若新杂质不超过质控限度（0.15％），且经鉴定结构明确不是毒性 杂质， 可订入质量标准中进行控制
确定合理的杂质限度


核心是杂质的安全性
相关技术指导原则的要求（决策树） 论证杂质安全性的相关文献资料 杂质安全性研究资料 上市产品中杂质量不能超过进行安全性研究样品中杂质量 被仿药品的质量标准，杂质种类和水平（仿制药）
确定合理的杂质限度


原料药杂质限度
..\..\化学药品指导原则\化学药物杂质研究技术指导原则.pdf


三、案例分析

阿托伐她汀钙杂质研究 罗库溴铵杂质研究 盐酸艾司洛尔注射液杂质分析
阿托伐他汀钙杂质研究




基本情况 阿托伐他汀钙（Atorvastatin Calcium）是一种人工合成的 HMG-CoA还原酶抑制剂，是临床常用降血脂药 原研发企业为辉瑞公司（Pfizer） 目前国内有原研发企业产品及仿制药上市 原料药及其制剂质量标准收载于国家新药转正标准 USP33、EP7.1收载原料药


杂质对比研究结果分析
杂质谱与被仿品不一致，有超过鉴定限度的新杂质；但已 知杂质含量不超过被仿品 ——鉴定新杂质结构 ——分析其产生原因，改进工艺，降低杂质含量至鉴定限 度以下 ——若通过改进工艺，杂质含量不能降低至鉴定限度以下， 应根据杂质研究决策树，进行后续研究。


仿制药杂质研究的特点
阿托伐他汀钙杂质研究


杂质限度要求 最大日剂量：口服80mg/天
报告限度
鉴定限度
质控限度
原料药
制剂
0.05％
0.1％
0.1％
0.2％
0.15%
0.25%
阿托伐他汀钙杂质研究

杂质控制方法比较
国家标准 原料药 方法 HPLC等度
EP7.1 HPLC梯度 手性HPLC法
USP33 同EP7.1
限度
杂质谱分析
★可能的杂质
★原料药生产过程中可能引入的工艺杂质 ★原料药贮存过程中可能产生的降解产物 ★制剂生产、贮存过程中可能产生的降解产物
杂质谱分析
★依据合成工艺，分析可能产生的工艺杂质
起始原料及可能引入的杂质、中间体、副产物 例：盐酸曲美他嗪中哌嗪
OMe MeO MeO CHO
+
OMe N N MeO MeO N N


杂质对比研究结果分析
杂质谱与被仿品一致或杂质种类较被仿品少，无超过鉴定 限度的新杂质；各杂质含量不超过被仿品 ——试制品的杂质控制达到了研究目标 杂质谱与被仿品一致或杂质种类较被仿品少，无超过鉴定 限度的新杂质；但已知杂质含量超过了被仿品 ——改进工艺，降低杂质含量


仿制药杂质研究的特点