动物实验技术

方法步骤：
(1) 操作时1人先将大鼠捉持保定好。 (2) 另1人用左手抓住大鼠的1条后肢，右手拿 注射器，常规消毒注射部位的皮肤。 (3) 将注射器针头在动物后肢大腿内侧肌肉丰 富处呈90度角，迅速刺入后注入药液。 注射量：0.01m1／g 。
3、静脉注射给药
原理：将药液注入大鼠的尾静脉。 器材： 1ml注射器1支、生理盐水、烧杯、 金属笼或大鼠固定器、酒精、碘酒、棉球。
（二）注射给药
1、皮下注射给药： 原理：将药液注入皮下结缔组织，经 毛细血管、淋巴管吸收进入血液循环。 器材：1m1注射器1支、生理盐水、烧 杯、酒精、碘酒、棉球。
方法步骤：
(1)注射部位：选小鼠项背部的皮下。 (2)常规消毒注射部位的皮肤，用注射针头取 一锐角角度刺入皮下， (3)将针头轻轻向左右 摆动，易摆动则表示已 刺入皮下，再轻轻抽吸， 如无回血，可缓慢地将 药物注入皮下。 注射量：0.01ml—0.03ml／g体重。
第三节
豚鼠
一、豚鼠的抓取保定：
器材：大鼠饲养盒+带面罩 l套。
方法步骤：
1、先用左手轻轻扣、 按住豚鼠背部。
2、顺势抓紧其肩胛上方皮肤， 拇指和食指环箍其颈部。
3、用右手轻轻托住其臀部， 即可将豚鼠抓取保定。
二、豚鼠的给药方法：
(一)灌胃给药 原理：将药液直接注入豚鼠的胃内。
器材：大鼠灌胃针1支、注射器1支、 生理盐水、烧杯。
三、大鼠的麻醉
原理： 是使用非挥发性麻醉药对动物进行全 麻术的方法。 器材： 3％戊巴比妥钠、注射器。
方法步骤：
(1) 用左手将大鼠捉持保定，使鼠腹部朝 上，鼠头略低于尾部。 (2) 右手持注射器将针头在下腹部靠近腹 白线的两侧进行穿刺。
(3) 针头刺入皮下后进针3mm左右，接着使 注射针头与皮肤呈45度角刺入腹肌，穿过腹 肌进入腹膜腔，当针尖穿过腹肌进入腹膜腔 后抵抗感消失。
2、肌肉注射给药 原理：将药液注入动物的肌肉组织，经 毛细血管吸收进入血液循环。 器材：1m1注射器1支、生理盐水、烧杯、 酒精、碘酒、棉球。
方法步骤：
(1) 操作时1人先将豚鼠捉持保定好。 (2) 另1人用左手抓住豚鼠的1条后肢， 右手拿注射器，常规消毒注射部位。 (3) 将注射器针头在动物后肢大腿外侧 肌肉丰富处呈60度角，迅速刺入后 注入药液。 注射量：0.01ml／g 。
3、左手拇指、食指抓住两鼠耳之间的颈 部头皮，并轻轻向下压迫颈部两侧，致大 鼠静脉血回流障碍，眼球外突，眶后静脉 丛充血。 4、右手持毛细管由大鼠的内毗部插入结 膜，使毛细管与眶壁平行地向喉头方向推 进，深度约3—5mm 。 5、轻轻旋动毛细管，使其穿破静脉丛， 让血流顺毛细管流出。 采血量：0.4—0.6ml／次。
3 、翻转左手掌，以左手掌心和中指夹 小鼠背部的皮肤，使小鼠整个呈一条 直线。 4、用左手无名指 压住小鼠背部的 皮肤，小指压住 小鼠的尾巴根部。 5、松开捏住小鼠尾 巴的右手拇指和食指。
三、小鼠的给药方法： (一) 灌胃给药 原理： 将药液直接注入小鼠的胃内。 器材： 小鼠灌胃针1支、注射器1支、 小鼠饲养盒+面罩1套、生理盐水、 烧杯。
方法步骤：
1、将灌胃针连接在注射器上，吸入一定量
的药液。 2、左手捉持小鼠，使小鼠头部向上。 3、右手将灌胃针头尖端从小鼠口角处进针 放进小鼠口咽部，顺咽后壁轻轻往下推，灌 胃针会顺着食管滑入小鼠的胃内。灌胃针插 入约3cm. 4、用右手食指将针栓慢慢往下压，将注射 器中的药液灌入小鼠的胃中。
剂量：约0.5ml／10g体重。 注意：在灌胃过程中，避免误插入气管。
方法步骤：
1、将灌胃针连接在注射器上，吸入一定 量的生理盐水。 2、左手捉持保定豚鼠，右手将灌胃针头 尖端放进豚鼠口咽部，顺咽后壁轻轻 往下推，灌胃针会顺着食管滑入大鼠 的胃内。灌胃针插入约5cm。
3、用右手食指将针栓慢慢往下压，将 注射器中的生理盐水注入豚鼠的胃中。
剂量：1—5ml。 注意：在灌胃过程中，避免误插入气管。
2、肌肉注射给药 原理：将药液注入动物的肌肉组织，经 毛细血管吸收进入血液循环。
器材：1ml注射器1支、生理盐水、烧 杯、酒精、碘酒、棉球。
方法步骤：
(1)操作时1人先将小鼠捉持保定好。 (2)另1人用左手抓住小鼠的1条后肢，右手拿 注射器，常规消毒注射部位的皮肤。 (3)将注射器针头在动物后 肢大腿外侧肌肉丰富处呈 60度角迅速刺入后注入药液。 注射量：0.01m1／g体重。
（4）左前肢为10号、 左侧腹部20号、 左后肢30号， 头部40号、 背部50号、 尾根部60号， 右前肢70号、 右侧腹部 80号、 右后肢90号 第100号不作染色标记。
二、小鼠的抓取保定： 器材：小鼠饲养盒+面罩1套。
方法步骤： 1、用右手拇指和食指捏 住小鼠尾巴中部将小鼠提 起，放在饲养合的面罩上。 2、用左手拇指和食指迅速、 准确地捏住小鼠的两耳后、 颈背部的皮肤，将小鼠提起。
方法步骤： (1) 将大鼠放在金属笼或大鼠固定器中， 通过金属笼或鼠夹的孔拉出大鼠尾巴。 (2) 用左手捏住大鼠尾巴中部，用 75 ％酒 精棉球反复擦拭尾部。 (3) 注射时，以左手拇指和中指捏住鼠尾 两侧，用食指从下面托起尾巴。
(4) 右手持4号针头的注射器，使针头与静脉 平行(小于30度角)。 （ 5) 从大鼠尾巴下 1 ／ 4 或 1 ／ 3 处进针，仔 细观察，如果无阻力，无白色皮丘出 现，说明已刺入血管，即可注入药物。 注射量：0.005—0.01 ml／g体重。
2、双色涂染法： 在每组动物不超过100只的情况下 适用。 实验动物：大鼠、小鼠。 常用染色剂： (1)3-5％苦味酸溶液，可染成黄色。 ——作为“个”位数。 (2) 0.5%中性红或品红溶液，可染 成红色。——作为“十”位数。
方法步骤： (1) 用两种颜色同时进行染色标记。 (2) 用苦味酸(黄色)染色标记作为个 位数，个位数的染色标记方法同单 色涂染法。 (3) 用品红(红色)染色标记作为十位 数，
方法步骤：
(1) 注射部位：选大鼠的项背部的皮下。 (2) 常规消毒注射部位的皮肤，用注射针头取 一锐角角度刺入皮下。 (3) 将针头轻轻向左右摆动，易摆动则表示已 刺入皮下，再轻轻抽吸，如无回血，可缓慢 地将药物注入皮下。 注射量：0.01ml／g体重。
2、肌肉注射给药
原理：将药液注入动物的肌肉组织，经 毛细血管吸收进入血液循环。 器材：1m1注射器1支、生理盐水、烧杯、 酒精、碘酒、棉球。
(二)
注射给药
1、皮下注射给药 原理： 将药液注入皮下结缔组织，经毛细血 管、淋巴管吸收进入血液循环。 器材： 1m1注射器1支、生理盐水、烧杯、酒 精、碘酒、棉球。
方法步骤：
(1) 注射部位：选豚鼠的项背部的皮下。 (2) 常规消毒注射部位的皮肤，注射针头 取一锐角角度刺入皮下。 (3) 将针头轻轻向左右摆动，易摆动则 表示已刺入皮下，再轻轻抽吸，如 无回血，可缓慢地将药物注入皮下。 注射量：0.01ml／g 。
动物实验基本技术
第一节
小
鼠
一、实验动物标记编号的方法 (一)染色法： 1、单色涂染法： 在每组动物不超过l0只的情况下适用。 实验动物：大鼠、小鼠。 常用染色剂：3-5％苦味酸溶液， 可染成黄色。
方法步骤： (1)涂染顺序：从左到右、从上到下。 (2)左前肢为l号、左侧腹部2号、 左后肢3号。 (3)头部4号、背部5号、 尾根部6号。 (4)右前肢7号、 右侧腹部8号、 右后肢9号。 (5)不作染色标记为10号。
3、用右手食指将针栓慢慢往下压，将注 射器中的生理盐水灌入大鼠的胃中。 剂量：0.01—0.02ml／g体重。 注意：在灌胃过程中，避免误插入气管。
( 二)
注射给药
1、皮下注射给药
原理：将药液注入皮下结缔组织，经毛细 血管、淋巴管吸收进入血液循环。
器材：5ml注射器1支、生理盐水、烧杯、 酒精、碘酒、棉球。
4、腹腔注射给药 原理：将药液注入小鼠的腹腔。 器材：注射器1支、生理盐水、烧杯、 酒精、碘酒、棉球。
方法步骤： (1)用左手将小鼠捉持保定，使鼠腹部 朝上，鼠头略低于尾部。 (2)右手持注射器将针头在下腹部靠近 腹白线的两侧进行穿刺。
(3) 针头刺入皮下后进针3mm左右，接着使 注射针头与皮肤呈45度角刺入腹肌，穿过腹 肌进入腹膜腔，当针尖穿过腹肌进入腹膜腔 后抵抗感消失。 (4)固定针头，保持针尖不动， 回抽针栓，如无回血、肠液 和尿液后即可注射药液。 注射量： 0.01m1—0.02 m1／g体重。
(3) 注射时，以左手拇指和中指捏住鼠尾 两侧，用食指从下面托起尾巴，以无 名指夹住尾巴的末梢。 (4) 右手持4号针头的注射器，使针头与 静脉平行（小于30度角）。
(5) 从小鼠尾巴下1／4处进针，仔细观察， 如果无阻力，无白色皮丘出现，说明 已刺入血管，即可注入药物。 (6) 拔出针头后，用干棉球压住注射部位 约l、2min，防止出血。 注射量： 0.005m1—0.01 m1／g体重。
(4) 固定针头，保持针尖不动，回抽针栓， 如无回血、肠液和尿液后即可注射药液。
四、大鼠的采血
眼眶后静脉丛(窦)取血： 器材： 毛细管(玻璃或塑料均可)、 1％肝素溶液、干燥皿、 乙醚、试管、干棉球。
方法步骤：
1、先将毛细管浸泡在1％肝素溶液中数分 钟，然后取出干燥备用。
2、将大鼠进行麻醉， 使大鼠保持侧卧位。
第二节
大鼠
一、大鼠的抓取保定： 器材：大鼠饲养盒 + 面罩 1套。 方法步骤： 1、首先戴好防护手套。 2、用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部将 大鼠提起，放在大鼠饲养盒的面罩上。 3、左手顺势按、卡在大鼠躯干 背部，稍加压力向头颈部滑行。 4、以左手拇指和食指捏住大鼠两耳 后部的头颈皮肤，其余三指和手掌 握住大鼠背部皮肤，完成抓取保定。
三、小鼠的采血—— 摘除眼球采血法：
原理：将小鼠的眼球摘除后取血液 的方法。 器材：眼科弯镊、试管。