CAS号885060-08-2_ARRY-520 R enantiomer_使用说明_MedBio
4,4-双(仲丁基氨基)-二环己基甲烷 结构式
4,4-双(仲丁基氨基)-二环己基甲烷结构式前言在有机化学中,化合物的结构式是对其分子结构的简洁而准确的描述。
本文将围绕着4,4-双(仲丁基氨基)-二环己基甲烷这一具有特殊结构的有机化合物展开深入探讨,希望通过全面评估和分析,为大家呈现一篇有价值的文章。
1. 4,4-双(仲丁基氨基)-二环己基甲烷的结构式简介4,4-双(仲丁基氨基)-二环己基甲烷,又称为bis(2-methyl-2-propanyl) cyclohexylmethane,是一种有机化合物。
其结构式如下所示:[插入4,4-双(仲丁基氨基)-二环己基甲烷的结构式图片]从结构式中可以看出,4,4-双(仲丁基氨基)-二环己基甲烷分子中包含两个环己基甲烷基团和两个仲丁基氨基团,这种结构使得该化合物具有独特的性质和用途。
2. 4,4-双(仲丁基氨基)-二环己基甲烷的物理性质关于4,4-双(仲丁基氨基)-二环己基甲烷的物理性质,我们可以通过理论计算和实验数据来进行评估。
该化合物的分子量、沸点、密度、溶解性等性质都是我们需要深入了解的内容。
1) 分子量:根据结构式,可以推算出4,4-双(仲丁基氨基)-二环己基甲烷的分子量为多少?2) 沸点:该化合物的沸点是多少?这一性质对于它的应用有着怎样的影响?3) 密度:通过实验数据可以得知,4,4-双(仲丁基氨基)-二环己基甲烷的密度是多少?这对于其在工业生产中的使用有何意义?4) 溶解性:在不同溶剂中,该化合物的溶解性如何?这对于它在化工领域的应用有着怎样的影响?3. 4,4-双(仲丁基氨基)-二环己基甲烷的化学性质除了物理性质外,4,4-双(仲丁基氨基)-二环己基甲烷的化学性质也是我们需要重点了解的内容。
包括了它的稳定性、反应性、合成方法等方面。
1) 稳定性:该化合物在常温下的稳定性如何?对于它的贮存和运输有着怎样的要求?2) 反应性:在不同环境条件下,4,4-双(仲丁基氨基)-二环己基甲烷会发生怎样的化学反应?这些反应有着怎样的应用价值?3) 合成方法:目前已知的合成该化合物的方法有哪些?它的合成途径是否经济、高效?4. 对4,4-双(仲丁基氨基)-二环己基甲烷的深入理解和个人观点4,4-双(仲丁基氨基)-二环己基甲烷作为一种特殊结构的有机化合物,其在聚合物、医药、染料、香料等领域都有着广泛的应用。
Enterobacteriaceae
Enteropathogenic E. coli
1.
fever infant diarrhea vomiting nausea non-bloody stools Destruction of surface microvilli loose attachment mediated by bundle forming pili (Bfp); 2. Stimulation of intracellular calcium level; 3. rearrangement of intracellular actin,
Enteroinvasive E. coli (EIEC) Dysentery - resembles shigellosis - elder children and adult diarrhea
E.coli-c. Enteropathogenic (EPEC)
Malaise and low grade fever diarrhea, vomiting,
鞭毛抗原(H)
K或Vi抗原
菌体抗原(O)
Opportunistic diseases -Enterobacteriaceae
– – – – septicemia, pneumonia, meningitis urinary tract infections
Citrobacter Enterobacter Escherichia Hafnia Morganella Providencia Serratia
E.coli-Meningitis and Sepsis
Neonatal meningitis – is the leading cause of neonatal meningitis and septicemia with a high mortality rate. Usually caused by strains with the K1 capsular antigen.
利用凝胶扩散法测定刺萼龙葵种子中β-甘露聚糖酶的活性
利用凝胶扩散法测定刺萼龙葵种子中β-甘露聚糖酶的活性β-甘露聚糖酶是一种重要的水解酶,广泛存在于植物、微生物和动物组织中,是一种能够水解β-甘露聚糖的酶类。
β-甘露聚糖酶在许多生物学过程中起着重要作用,比如在植物的生长发育、细胞壁代谢、应激响应等方面都发挥着重要的作用。
研究β-甘露聚糖酶的活性对于理解植物生长发育和抗逆性有着重要的意义。
刺萼龙葵(Solanum aculeatissimum Jacq.)是茄科植物中的一种,广泛分布于南美洲和亚洲热带地区,又名刺浆果茄,具有较高的经济价值和药用价值。
刺萼龙葵的种子中富含β-甘露聚糖酶,因此利用凝胶扩散法测定刺萼龙葵种子中β-甘露聚糖酶的活性,可以为深入研究刺萼龙葵的生物学特性提供重要依据。
本文将介绍利用凝胶扩散法测定刺萼龙葵种子中β-甘露聚糖酶活性的方法和步骤,并对测定结果进行初步分析和讨论,旨在为该领域的研究工作提供理论和实验基础。
一、实验材料与方法1. 实验材料(1)刺萼龙葵种子:新鲜采集的刺萼龙葵种子;(2)β-甘露聚糖酶提取液:含有一定浓度的β-甘露聚糖酶的提取液;(3)琼脂:用于制备凝胶;(4)碘液:用于染色检测。
2. 实验方法(1)β-甘露聚糖酶提取将刺萼龙葵种子磨碎并加入适量的缓冲液进行提取,通过离心等操作获得β-甘露聚糖酶提取液。
(2)制备琼脂凝胶将琼脂按照说明书中的方法配制成适当浓度的琼脂溶液,并倒入培养皿中,待凝固后在表面钻孔。
(3)凝胶扩散反应在琼脂凝胶上均匀涂布一定浓度的β-甘露聚糖酶提取液,再在固定位置上钻孔注入碘液,观察并测定孔周围的清晰圈和直径。
二、实验结果与分析通过上述实验方法,我们成功利用凝胶扩散法测定了刺萼龙葵种子中β-甘露聚糖酶的活性。
观察结果显示,在琼脂凝胶表面形成了一定大小的清晰圈,且直径随着β-甘露聚糖酶提取液中酶活性的增加而增大。
这表明刺萼龙葵种子中存在一定浓度的β-甘露聚糖酶,并且具有一定的活性。
从实验结果可以初步推断,刺萼龙葵种子中β-甘露聚糖酶的活性较高,这与刺萼龙葵种子中富含β-甘露聚糖酶的特点相吻合。
氟雷拉纳结构式
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亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚结构式__解释说明
亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚结构式解释说明1. 引言1.1 概述亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚(Methyl-Bis(phenylthiobenzotriazolyl)-4-methylpiperidinol)是一种重要的有机化合物,具有广泛的应用领域和潜在的研究价值。
该化合物以其独特的结构和性质而备受关注。
本文将详细介绍亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚的定义、结构式解释及其特点,探讨其在药物研究与开发、化学工业中的用途以及环境监测和分析方法方面的应用。
此外,我们还将讨论制备亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚的方法和工艺参数对产率与纯度的影响,并探索可能存在的改进和优化方向。
最后,本文将总结亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚的重要性和应用价值,并对未来发展趋势进行展望。
1.2 文章结构本文共包括引言、亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚的定义与特点、亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚的应用领域、制备亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚的方法与工艺参数控制以及结论与展望等五个部分。
下面将对每个部分的内容进行详细阐述。
1.3 目的本文旨在全面介绍亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚这一化合物的相关知识,包括其定义、结构式解释和特点,并深入探讨其在药物研究与开发、化学工业以及环境监测和分析方法方面的应用。
此外,我们还将探讨制备该化合物的方法和工艺参数对产率与纯度的影响,并提出可能存在的改进和优化方向。
最后,本文将总结该化合物的重要性和应用价值,并对未来发展趋势进行展望。
通过本文的研究,希望能够加深对亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚这一化合物的认识,并促进相关领域研究和产业应用的进一步发展。
2. 亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚的定义与特点2.1 定义:亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚是一种有机化合物,化学式为C21H23N5O。
它由一个亚甲基(CH2)连接两个苯并三唑环,并且具有四个甲基和一个丁基取代在苯并三唑环上。
光谱纯溶剂
光
1.06048.0500 1.13720.0009 1.04200.0009 1.00930.1000 1.02950.0500 1.03424.0009 1.03562.0009
Dichloromethane Dichloromethane-D2 min. 99.8% for NMR Dichloromethane-D2 min. 99.95% for NMR Diethyl ether Dimethyl sulfoxide Dimethyl sulfoxide-D6 min. 99.8% for NMR Dimethyl sulfoxide-D6 min. 99.95% for NMR Dimethyl sulfoxide-D6 with TMS (0,1 1.03587.0100 vol.%) 1.11656.0009 min. 99,9% for NMR min. 99.5% for NMR Dimethylformamide-D7 1.00980.0500 Ethanol 1.00980.2500 1.03450.0001 Ethanol-D6 min. 99% for NMR 1.00863.0500 Ethyl acetate 1.13365.0010 Formic acid-D2 min. 99.5% for NMR 1.04718.2500 Isooctane 1.06002.0500 Methanol 1.06002.2500 1.06028.0009 Methanol-D4 min. 99,8 % for NMR 1.06025.0009 Methanol-D4 min. 99.95% for NMR 1.02937.0500 N,N-Dimethylformamide 1.02937.2500 1.04366.0500 n-Heptane 1.04366.2500 1.04372.0500 n-Hexane 1.04372.2500 1.02914.0002 Nitromethane-D3 min. 99% for NMR 1.07179.1000 n-Pentane 1.07161.0100 Paraffin liquid 1.04907.0100 Potassium bromide for IR 1.07475.0009 Pyridine-D5 min 99.8% for NMR 1.01984.1000 tert-Butyl methyl ether 1.00965.0500 Tetrachloroethylene 1.08110.0500 Tetrahydrofuran 1.13364.0009 Tetrahydrofuran-D8 min 99.5% for NMR 1.08183.0010 Tetramethylsilane for NMR 1.08331.1000 Toluene 1.13368.0010 Toluene-D8 min. 99.5% for NMR 1.08262.0025 Trifluoroacetic acid 1.08262.0100 Trifluoroacetic acid 1.13363.0010 Trifluoroacetic acid-D1 min. 99.5% for NMR
辣椒英文文献已读
2001年,C. Djian-Caporalino · L.Pijarowski · A. Fazari M. Samson · L.Gaveau · C.O’Byrne · V. Lefebvre C. Caranta · A. Palloix · P. Abad发表文章High-resolution genetic mapping of the pepper (Capsicum annuumL.)resistance loci Me3 and Me4 conferring heat-stable resistance to root-knot nematodes (Meloidogyne spp.)采用从C. annuum F1代得到的双单倍体(DH)群体构建了两张种内图谱,主要采用AFLP 和RAPD标记。
图谱长度1,582 cM ,共227 标记,18个连锁群,覆盖了67%的辣椒基因。
本研究采用的材料是C. annuum parents ‘Yolo Wonder’(‘YW’) and‘PM687’。
抗性品系PM687来源于印度,从PI322719群体中获得,YW是一个感病品种,Me3和Me4都是抗根结线虫基因。
PM687和YW杂交F1代有103个单双倍体(DH),163株F2代个体,‘Perennial’, another inbred line of C. annuum (see Table 1)used to generate the DH200 pepper map,另外一个亲本。
采用RAPD和AFLP标记,分析产生了与Me3连锁的8个相斥性标记和4个相引性标记。
在基因两边最近的距离是0.5,1.0,1.5和3cm,Me4与Me3相距100cm,Me3最近的基因名为Q04-0.3,距RAPD标记10.1cm,名为CT135d的距RFLP标记2.7cm.。
阿司咪唑
合成方法
合成方法
化合物(I)和碘甲烷在乙醇中回流8h,环合得到化合物(Ⅱ)。再水解脱去酯基,得到化合物(Ⅲ)。用对甲氧 基苯乙基溴进行N-烷基化,得化合物(Ⅳ)。再用对氟苄基溴烷基化,得阿司咪唑。
1. 1-[(4-氟苯基)甲基]-苯并咪唑-2-(3H)-酮的制备
在反应瓶中加入2-羟基苯并咪唑5.0g(37.3mmol)和NaH 1.6g(53mmol)(NaH含量大约为80%,浸入矿物油中) 的DMF 100ml的悬浮液.加毕.在60ºC.(最好有N2保护)搅拌反应1h.再加入4-氟苄基氯(FBC)5.4g(37mmol),加热 ( 6 0 ºC ) 搅 拌 反 应 5 . 5 h . 冷 却 至 室 温 后 加 入 冰 水 7 0 0 m l , 用 二 氯 甲 烷 ( 5 0 0 m l × 2 ) 提 取 . 有 机 层 用 食 盐 水 洗 . 无 水 N a 2 S O 4 干燥.过滤.滤液减压浓缩.剩余物用石油醚析晶.得1-[(4-氟苯基)甲基]-苯并咪唑-2-(3H)-酮固体8.0g,为无色 结 晶 m p 1 7 8 ~ 1 7 9 ºC , 收 率 8 8 % .
治疗措施
阿司咪唑中毒的治疗要点为: 1.大量摄入者予洗胃,后灌服活性炭和导泻。 2.对心肌抑制和Q-T间期延长者予5%碳酸氢钠250ml静注可能有效。 3.对症、支持治疗。
专家点评
专家点评
阿司咪阿司咪唑自1983年上市以来,在许多国家得到了广泛应用。国外研究显示阿司咪唑治疗荨麻疹的总有 效率为74%。国内的一项多中心双盲安慰剂对照试验表明阿司咪唑对急性荨麻疹的总有效率为82.9%,对慢性荨麻 疹的总有效率为86.0%,均显著高于安慰剂,主要不良反应为嗜睡、倦怠、口干等,连续用药3个月的患者中,半 数有食欲及体重增加。阿司咪唑的心脏毒性虽然发生率较低,但由于后果严重,已限制了它的应用。阿司咪唑为 强效和长效的H1受体拮抗剂,无中枢镇静和抗毒蕈碱样作用。代谢产物去甲阿司咪唑仍有抗胆胺作用。长期服用 可增进食欲和增加体重,服用过量可引起心脏Q-T间期延长和室性心律失常。适用于各种原因引起过敏性疾病。
戈那瑞林
化合物简介
基本信息
物化性质
基本信息
中文名称:戈那瑞林 中文别名:黄体激素释放激素 英文名称:gonadorelin 英文别名:Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2;(pyroglutamic acid)-His-Trp-SerTyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2;Gonadorelin;GONADERELIN;luteinizing hormone-releasing hormone isoform I; CAS号:-09-2 分子式:C55H75N17O13 分子量:1182. 结构式: 精确质量:1181. PSA:472.
适应症
1.用于诊断下丘脑-垂体-生殖腺功能障碍。 2.治疗闭经与促性腺激素分泌不足和多滤泡性卵巢引起的不孕症。 3.戈那瑞林或其同类物布舍瑞林、戈舍瑞林、亮丙瑞林、那法瑞林和曲普瑞林还可用于避孕、隐睾症、恶性 肿瘤(尤其前列腺癌)、延迟的和提前的青春期。 4.还可用于子宫内膜异位。 5.用于促排卵以治疗下丘脑性闭经所致不孕、原发性卵巢功能不足,特别是对氯米芬无效的患者。 6.还用于小儿隐睾症及雄激素过多、垂体肿瘤等。 。
氨基酸比值取本品约2mg,置10ml量瓶中,加6mol/L盐酸溶液使溶解并稀释至刻度,摇匀,量取1ml置2ml硬 质安瓶中,在-5℃减压封口,置110℃加热24小时,冷却,启封,将内容物移至蒸馏瓶中,在减压下蒸干,残留物 加0.02mol/L盐酸溶液1ml溶解,摇匀,作为供试品溶液;另取与供试品溶液浓度相应的各个氨基酸对照品混合溶 液,作为对照品溶液。精密量取上述两种溶液各20μl,分别注入氨基酸分析仪,记录色谱图,按外标法以峰面 积计算,即得。以L一组氨酸、L一谷氨酸、L一亮氨酸、L一脯氨酸、甘氨酸和L一精氨酸摩尔数之和的七分之一 值为1,供试品溶液中各个氨基酸相应的摩尔比应符合以下规定:L一丝氨酸为0.7—1.05,L一谷氨酸为0.9—l.
白术等中草药对仔猪腹泻病防控和促生长效果研究
专题论述20231254白术等中草药对仔猪腹泻病防控和促生长效果研究马大才(广西鹿寨县寨沙镇农业农村服务中心,广西柳州 545604)摘要:仔猪腹泻是指仔猪因消化系统疾病引起的腹泻现象,在生猪养殖阶段是尤为突出的一类疾病,如果不能合理控制,会使大量仔猪出现死亡情况。
导致仔猪出现腹泻的原因非常多,养殖户需对其不断探索和分析,依照实际情况选用相匹配的方法予以解决。
主要介绍了仔猪腹泻发病原因,探讨白术等中草药对仔猪腹泻病防控的优势及其具体应用,为相关人士提供参考。
关键词:仔猪腹泻病;白术;中草药Prevention and Control of Diarrhea Disease in Piglets with Chinese Herbs such as Atractylodes macrocephalaResearch on growth promoting effectsMa Da-cai(Agricultural and Rural Service Center, Zhaisha Town, Luzhai County,Liuzhou,Guangxi 545604)Abstract: Piglet diarrhea refers to the phenomenon of diarrhea caused by digestive system diseases in piglets, which is particularly prominent in the pig breeding stage. If not properly controlled, it can lead to a large number of piglets dying. There are many causes of diarrhea in piglets, and farmers need to continuously explore and analyze them, and choose matching methods to solve them according to the actual situation. This article mainly introduces the causes of piglet diarrhea, explores the advantages and specific applications of Chinese herbal medicines such as Atractylodes macrocephala in the prevention and control of piglet diarrhea, and provides reference for relevant personnel.Key words: Piglet diarrhea disease;Atractylodes macrocephala;Chinese herbal medicine 中图分类号:S858.28 文献标志码:B 文章编号:1003-8655(2023)01-0094-03近年来,随着养殖业逐渐增多,规模越来越大,仔猪腹泻病发病率也呈上升趋势。
沙奎那韦
谢谢观看
联合治疗可以使AIDS合并症或垂危状态的危险性减少53%,死亡率减少72%。这与治疗18个月后AIDS合并症或 死亡率由29.4%降至16.0%是相符的;同样,单纯死亡率由8.6%降至4.1%。在3个治疗组中,平均疗程为11~13个 月,平均随访时间是17个月。
该研究中,所有治疗组CD4细胞基线计数平均为156~176/立方毫米。16周后(DAVG16),沙奎那韦联合ddc 治疗组CD4细胞增加26/立方毫米,血浆病毒载量减少0.6log10RNA拷贝/毫升。16周时,CD4细胞平均值增加47/ 立方毫米。12周时,血浆病毒载量平均值降低0.7log10RNA拷贝/毫升。
与核苷类似物(齐多夫定等)不同,沙奎那韦直接作用于病毒靶酶,不需经代谢激活,对静止细胞也有潜在 作用。在10-10摩尔/升浓度下,沙奎那韦对淋巴母细胞株和单核细胞株以及被实验室病毒株或临床分离的HIV-1 感染的淋巴细胞和单核细胞的起始培养有作用。
实验室细胞培养结果显示,沙奎那韦在与其他逆转录酶抑制剂(包括AZT(齐多夫定)、ddc(扎西他滨)、 ddI(去羟肌苷)进行两联或三联治疗HIV-1感染时,有附加的协同抗病毒作用,但毒性并不增加 。
机体对静注沙奎那韦6、36、72毫克后清除率很高,为1.14升/小时/千克(CV12%),略高于肝血流,并为常 数。体内存留时间平均为7小时。
适应症
沙奎那韦可与其他抗逆转录病毒药物联合使用治疗成人HIV-1感染 。
用法与用量
1
标准剂量
2
剂量调整
3
不良反应
4
禁忌
5
药物相互作用
成人及16岁以上儿童:推荐方案是与核苷类似物联合用药,餐后2小时内服用沙奎那韦600毫克,每天3次。 联合使用的抗逆转录病毒药物的剂量参考处方手册。与其他蛋白酶抑制剂合用时,沙奎那韦应减量(见【药物相 互作用】)。与其他蛋白酶抑制剂一样,强烈推荐按医嘱服药。
CAS号203849-91-6_MMAD_参考用途MedBio
SAR407899 hydrochloride
SAR407899 hydrochloride
923262-96-8
5mg
≥98%
品牌
货号
中文名称
英文名称
CAS
包装
纯度
MedBio
MED11452
ARRY-520 R enantiomer
ARRY-520 R enantiomer
885060-08-2
体内研究
得到的抗体-药物偶联物(ADC)在啮齿动物中显示出完全的肿瘤消退。它们在大鼠中也具有改善的毒理学特征[1]。
3、同类产品列表:
品牌
货号
中文名称
英文名称
CAS
包装
纯度
MedBio
MED11525
TAI-1
TAI-1
1334921-03-7
5mg
≥98%
品牌
货号
中文名称
英文名称
CAS
包装
纯度
MedBio
None
25mg
≥98%
品牌
货号
中文名称
英文名称
CAS
包装
纯度
MedBio
MED11573
CFSE
CFSE
92557-80-7
50mg
≥98%
品牌
货号
中文名称
英文名称
CAS
包装
纯度
MedBio
MED11446
Epothilone B (EPO906, Patupilone)
Epothilone B (EPO906, Patupilone)
10mg
≥98%
品牌
广藿香DXS_基因克隆及表达分析
㊀山东农业科学㊀2024ꎬ56(4):28~35ShandongAgriculturalSciences㊀DOI:10.14083/j.issn.1001-4942.2024.04.004收稿日期:2023-11-08基金项目:广东省中医药局科研项目(20241177)ꎻ广东省重点领域研发计划项目(2020B020221002)作者简介:曾晴(2000 )ꎬ女ꎬ湖南益阳人ꎬ硕士研究生ꎬ研究方向为中药资源开发与品质评价ꎮE-mail:2719041453@qq.com通信作者:张宏意(1977 )ꎬ女ꎬ浙江舟山人ꎬ博士ꎬ副教授ꎬ主要从事药用植物资源与育种研究ꎮE-mail:drizzlezhy@163.com广藿香DXS基因克隆及表达分析曾晴ꎬ严雅玲ꎬ严寒静ꎬ何梦玲ꎬ张宏意(广东药科大学中药学院ꎬ广东广州㊀510006)㊀㊀摘要:1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶(DXS)是调控萜类合成途径中MEP途径的第一个关键酶ꎬ为探究广藿香DXS基因参与其主要萜类成分广藿香醇合成调控的分子机制ꎬ本研究依据本课题组前期获得的转录组DXS基因序列ꎬ以广藿香cDNA为模板ꎬ克隆得到PcDXS基因ꎬ对其进行生物信息学分析ꎬ构建pET-28a-PcDXS原核表达载体诱导蛋白表达ꎬ并采用荧光实时定量PCR法检测广藿香根㊁茎㊁叶㊁芽中DXS基因表达情况ꎮ结果表明ꎬ从广藿香叶中克隆到开放阅读框全长为2151bp和1908bp的PcDXS1㊁PcDXS2基因序列ꎬ分别编码716㊁635个氨基酸ꎮ预测PcDXS1蛋白分子量78.33kDaꎬ为稳定非跨膜非分泌蛋白ꎬ主要定位于叶绿体ꎻPcDXS2蛋白分子量67.92kDaꎬ为不稳定非跨膜非分泌蛋白ꎬ主要定位于叶绿体ꎮPcDXS1㊁PcDXS2均含有DXP_synthase_N㊁Transket_pyr和Transketolase_C结构域模块ꎬ属于DXS超家族ꎮPcDXS1㊁PcDXS2分别与半枝莲㊁糙苏的DXS基因序列具有较高同源性ꎮ使用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导的PcDXS1㊁PcDXS2融合蛋白主要在沉淀中表达ꎮPcDXS1㊁PcDXS2基因表达量均在根中最低ꎬPcDXS1基因在叶中显著高表达ꎬPcDXS2基因在叶㊁芽㊁茎中高表达ꎮ本研究结果可为后续深入研究DXS基因在广藿香萜类化合物合成途径中的生物学功能及广藿香萜类代谢途径的基因调控奠定基础ꎮ关键词:广藿香ꎻ1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶(DXS)ꎻ基因克隆ꎻ生物信息学分析ꎻ表达分析中图分类号:S567.2:Q781㊀㊀文献标识号:A㊀㊀文章编号:1001-4942(2024)04-0028-08CloningandExpressionAnalysisofDXSGenefromPogostemoncablin(Blanco)Benth.ZengQingꎬYanYalingꎬYanHanjingꎬHeMenglingꎬZhangHongyi(SchoolofTraditionalChineseMedicineꎬGuangdongPharmaceuticalUniversityꎬGuangzhou510006ꎬChina)Abstract㊀1 ̄Deoxy ̄D ̄xylulose ̄5 ̄phosphatesynthase(DXS)isthefirstkeyenzymetoregulatetheMEPpathwayintheterpenesynthesispathway.InordertoillustratethemolecularmechanismofDXSgenepartici ̄patinginsynthesisandregulationofthemainterpenoidcomponentꎬpatchoulialcoholꎬinpatchouli(Pogoste ̄moncablin)ꎬtheresearchwasconductedbasedonthetranscriptomeDXSgenesequenceobtainedpreviouslybyourresearchgroup.PcDXSgenewasclonedbyusingpatchoulicDNAastemplateꎬandthenanalyzedbybioinformaticsmethod.TheprokaryoticexpressionvectorpET ̄28a ̄PcDXSwasconstructedtoinduceproteinexpressionꎬandreal ̄timefluorescencequantitativePCRwasusedtodetecttheexpressionofDXSgeneinrootsꎬstemsꎬleavesandbudsofpatchouli.TheresultsshowedthatPcDXS1andPcDXS2genesequenceswithopenreadingframelengthof2151bpand1908bpwereclonedfromleavesofpatchouliꎬencoding716and635aminoacidsꎬrespectively.PcDXS1proteinwaspredictedtohave78.33kDaofmolecularweightꎬandwasastableꎬnon ̄transmembraneandnon ̄secretedproteinprimarilylocalizedinchloroplasts.PcDXS2proteinhad67.92kDaofmolecularweightꎬwhichwasanunstableꎬnon ̄transmembraneandnon ̄secretedproteinmainlylocalizedinchloroplasts.PcDXS1andPcDXS2containedDXP̠synthase̠NꎬTransket̠pyrandTransketolase̠CdomainmodulesrespectivelyꎬbelongingtoDXSsuperfamily.PcDXS1andPcDXS2hadhighhomologyingenesequencewithDXSgenesofScutellariabarbataandPhlomisumbrosa.PcDXS1andPcDXS2fusionproteinsinducedbyisopropyl ̄β ̄D ̄thiogalactoside(IPTG)weremainlyexpressedinprecipitation.Theexpressionlev ̄elsofPcDXS1andPcDXS2geneswerethelowestinroots.PcDXS1genewassignificantlyhigherexpressedinleavesꎬwhilePcDXS2genewasrelativelyhigherinleavesꎬbudsandstemscomparedtoroots.TheresultscouldlayfoundationsforfurtherstudiesonbiologicalfunctionsofDXSgeneinterpenoidcompoundsynthesispathwayandgeneregulationmechanismofterpenoidmetabolismpathwayinpatchouli.Keywords㊀Pogostemoncablinꎻ1 ̄Deoxy ̄D ̄xylose ̄5 ̄phosphatesynthase(DXS)ꎻGenecloningꎻBioin ̄formaticsanalysisꎻExpressionanalysis㊀㊀广藿香[Pogostemoncablin(Blanco)Benth.]是唇形科刺蕊草属草本植物ꎬ原产于东南亚ꎬ引种至我国成为岭南道地药材ꎬ是一种具有重要药用价值和广泛工业生产应用价值的经济作物ꎬ具有芳香化浊㊁和中解暑的功效[1]ꎬ是藿香正气丸㊁二妙丸㊁午时茶颗粒等中成药的主要原料ꎮ已检测到广藿香地上部分含有174种化学成分ꎬ其中萜类最多ꎬ达66种ꎬ另有黄酮㊁类固醇㊁吡喃酮㊁多糖等多种生物活性成分[2]ꎬ因而具有抗菌㊁抗炎㊁抗诱变㊁抗细胞凋亡㊁抗HepG19癌细胞增殖等多种药理活性[3-4]ꎮ广藿香提取物广藿香油全球年产可达2000吨[5]ꎬ常被用于各类芳香疗法以舒缓压力㊁减轻疲劳㊁改善失眠㊁缓解焦虑等ꎬ还因气味宜人被广泛应用于香水㊁肥皂㊁化妆品等化工领域[6]ꎻ另外ꎬ在畜禽领域ꎬ广藿香提取物作为饲料添加剂也展现出巨大潜力[7]ꎮ广藿香醇是广藿香挥发油的首要成分ꎬ其生物合成途径有两条ꎬ分别是定位于细胞质的甲羟戊酸(mevalonateꎬMVA)途径和定位于叶绿体的甲基赤藓糖-4-磷酸(methylerythritol ̄4 ̄phosphateꎬMEP)途径[8-9]ꎮMVA途径主要负责倍半萜㊁三萜和橄榄苦苷甾体的合成ꎬ而广藿香醇为三环倍半萜类化合物ꎬ因此在关于广藿香醇的分子调控和生物合成中ꎬ针对MVA途径关键基因的作用已经进行了较多研究[10]ꎮMEP途径除合成单萜㊁二萜㊁四萜还合成植物激素㊁光合色素[11-12]ꎮMVA和MEP途径均可产生戊烯基焦磷酸(IPP)及其异构体二甲基烯丙基焦磷酸(DMAPP)ꎬ这两种物质是合成萜类化合物的共同前体物质ꎮ1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶(DXS)是MEP途径的第一个酶ꎬ催化丙酮酸和3-磷酸甘油醛生成1-脱氧木酮糖-5-磷酸(DXP)[12]ꎮDXS家族可分为3个不同的亚家族 DXS1㊁DXS2和DXS3ꎬ这3种类型的DXS蛋白在保守基序组成㊁二级结构和三级结构方面具有高度相似性[13]ꎮDXS不仅在植物萜类生物合成过程中发挥着重要调控作用ꎬ还在许多生理过程中起着重要作用ꎬ如光合作用㊁植物激素调节㊁逆境抗性和病原体防御等ꎮ过表达马尾松PmDXS可以显著提高其类胡萝卜素㊁叶绿素a㊁叶绿素b含量和DXS活性[14]ꎬ瞬时转化过表达天竺葵的GrDXS基因能增加次生代谢物天竺葵精油中单萜和倍半萜化合物含量[15]ꎬ提示DXS基因在萜类生物合成途径中具有重要调控作用ꎮ迄今ꎬDXS基因已经在银杏[16]㊁乌头[17]㊁穿心莲[18]㊁桔梗[19]㊁荆芥[20]等多种植物中完成克隆和初步研究ꎬ而从广藿香中探究DXS基因的内容鲜见报道ꎮ本研究基于课题组前期获得的转录组数据克隆了广藿香DXS基因ꎬ并对其进行生物信息学分析及在广藿香不同部位的表达分析ꎬ以期为今后深入研究该基因在萜类化合物代谢中的功能奠定基础ꎮ1㊀材料与方法1.1㊀试验材料本研究所用植物材料经广东药科大学中药学院严寒静教授鉴定为唇形科刺蕊草属植物广藿香[Pogostemoncablin(Blanco)Benth.]ꎬ培育于广东药科大学中药学院ꎮ采集生长6个月的广藿香叶片液氮速冻ꎬ于-80ħ超低温冰箱保存ꎬ用于RNA提取与基因克隆ꎮ选取生长6个月状态良好的广藿香根㊁茎(第2㊁3对叶之间)㊁叶(第2对叶)㊁芽ꎬ经液氮速冻后置于-80ħ冰箱ꎬ用于RNA提取及组织特异性表达qRT-PCR分析ꎮDH5α感受态细胞㊁BL21(DE3)表达菌株㊁pET28a原核表达载体均购自北京庄盟国际生物92㊀第4期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀曾晴ꎬ等:广藿香DXS基因克隆及表达分析基因科技有限公司ꎮ1.2㊀试验方法1.2.1㊀RNA提取与cDNA链合成㊀将广藿香叶片样品经液氮研磨后ꎬ采用天根植物总RNA提取试剂盒提取总RNAꎬ使用超微量紫外分光光度计UV2450测定其浓度和纯度ꎬ用1%琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性ꎮ使用TaKaRa的PrimeScriptRTreagentKitwithgDNAEraser反转录试剂盒合成cDNA第一链ꎮ1.2.2㊀基因克隆㊀根据课题组前期获得的转录组数据得到广藿香PcDXS基因的CDS序列ꎬ设计特异性引物(表1)ꎬ以反转录得到的cDNA为模板进行PCR扩增ꎮPCR反应体系:cDNA1μLꎬ上游引物PcDXS-F1μLꎬ下游引物PcDXS-R1μLꎬPrimeSTAR MaxDNAPolymerase25μL㊁ddH2O补足至50μLꎮPCR反应程序:98ħ10sꎬ55ħ5sꎬ72ħ12sꎬ35个循环ꎻ72ħ2minꎮPCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳鉴定后切胶回收ꎬ并检测浓度及纯度ꎬ使用庄盟ZTOPO-Blunt/TA快速克隆试剂盒进行TA克隆ꎻ转化大肠杆菌DH5α感受态细胞ꎬ经菌液PCR鉴定ꎬ挑取阳性克隆ꎬ送广州擎科生物科技股份有限公司测序ꎮ表1㊀引物序列引物名称用途引物序列(5ᶄ-3ᶄ)PcDXS1-F基因克隆ATGGCTTCTGTTTCTTGCCAGAACCPcDXS1-RTCAGAGCATCAATTGAAGAGCGTCGPcDXS2-FATGAAAAACCTCACTGCTAAGGPcDXS2-RTTAGGACATTATCTCTAGGGCCpET-28a-PcDXS1-F构建原核表达载体GACAGCAAATGGGTCGCGGAATGGCTTCT ̄GTTTCTTGCCAGAACCpET-28a-PcDXS1-RCGACGGAGCTCGAATTCGGAGAGCAT ̄CAATTGAAGAGCGTCGCGpET-28a-PcDXS2-FGACAGCAAATGGGTCGCGGAATGAAAAAC ̄CTCACTGCTAAGGAACTGAAACApET-28a-PcDXS2-RCGACGGAGCTCGAATTCGGAGGACAT ̄TATCTCTAGGGCCTCCCTAG18S-FqRT-PCRTCAACCATAAACGATGCCGACC18S-RTTTCAGCCTTGCGACCATACTCCq-PcDXS1-FCGAGACATTTCCCTCCTTGCq-PcDXS1-RGACCACCACAACTTCTTCATCGq-PcDXS2-FGTGATTATGATTGCTTCGGTGCTq-PcDXS2-RATGGCTTCGTATGCTTGACCTG1.2.3㊀生物信息学分析㊀依照对应的生物信息学在线工具(表2)对广藿香的PcDXS1㊁PcDXS2进行序列分析ꎮ从NCBI上进行Blast比对ꎬ获得PcDXS同源序列ꎬ利用MEGA.11邻接法构建进化树ꎬBootstrap值设置为1000次重复ꎮ表2㊀在线工具、用途及网址在线工具用途网址ExPASyProtParam蛋白质理化性质分析https://web.expasy.org/protparam/ExPASyProtScale疏水性分析https://web.expasy.org/protscale/Plant-mPLoc亚细胞定位预测http://www.csbio.sjtu.edu.cn/bioinf/plant ̄multi/DeepTMHMM跨膜结构预测https://dtu.biolib.com/DeepTM ̄HMMSignalP-6.0信号肽预测https://services.healthtech.dtu.dk/services/SignalP ̄6.0/NCBICDSearch保守结构域分析https://www.ncbi.nlm.nih.gov/Structure/cdd/wrpsb.cgiSOPMA二级结构预测https://npsa ̄prabi.ibcp.fr/cgi ̄bin/npsa_automat.pl?page=npsa%20_sopma.htmlSWISS-MODEL三级结构预测https://swissmodel.expasy.org/1.2.4㊀原核表达㊀设计PcDXS基因与包含pET-28a载体酶切位点的同源臂引物(表1)ꎬ构建pET-28a-PcDXS原核表达载体ꎮPcDXS基因引入pET-28a载体同源臂反应体系为:TA-PcDXS重组质粒1μLꎬ上游引物pET-28a-PcDXS-F1μLꎬ下游引物pET-28a-PcDXS-R1μLꎬPrimeSTAR MaxDNAPolymerase25μLꎬddH2O补足至50μLꎮPCR反应程序:98ħ10sꎬ55ħ5sꎬ72ħ12sꎬ35个循环ꎻ72ħ2minꎮ采用全式金BamHⅠ酶将pET-28a载体进行单酶切线性化ꎮPCR产物及酶切产物经1%琼脂糖凝胶电泳鉴定后切胶回收ꎬ将产物根据庄盟SE无缝克隆和组装试剂盒连接转化DH5α感受态细胞ꎬ菌液经PCR鉴定ꎬ挑取阳性克隆ꎬ送广州擎科生物科技股份有限公司测序ꎮ将pET-28a-PcDXS质粒转化蛋白表达菌株BL21(DE3)ꎬ经PCR鉴定ꎬ挑取阳性菌液摇菌后ꎬ在5mL菌液中添加异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)至浓度分别为0.25㊁0.5㊁0.75㊁1.0mmol L-1ꎬ160r min-1摇床㊁16ħ培养12hꎬ使用细胞破碎仪(AMP25%ꎬ开5sꎬ关5s)破碎2minꎬ离心收集上清液和沉淀ꎬ进行SDS-PAGE凝胶电泳检测PcDXS蛋白表达情况ꎮ1.2.5㊀荧光定量PCR表达分析㊀以转录合成的cDNA为模板ꎬ18S为内参基因ꎮ根据PcDXS基因的测序结果ꎬ使用Premier5.0设计qRT-PCR引物(表1)ꎮ实时荧光定量PCR采用20μL反应体系:2ˑTBGreenPremixExTaqⅡ10μLꎬcD ̄NA1.5μLꎬ上㊁下游引物各0.4μLꎬddH2O7.7μLꎮ扩增程序:95ħꎬ30sꎻ95ħ5sꎬ60ħ30sꎬ03山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第56卷㊀40个循环ꎮ每个部位进行3次生物学重复ꎬ每个样品3个技术重复ꎮ采用2-әәCt法计算PcDXS基因在广藿香不同组织部位根㊁茎㊁叶㊁芽中的相对表达量ꎮ采用GraphPadPrism9.5软件进行单向方差多重比较分析数据ꎬ利用MicrosoftExcel作图并用字母标记法标记差异显著性ꎮ2㊀结果与分析2.1㊀PcDXS1㊁PcDXS2基因克隆提取广藿香总RNAꎬ琼脂糖凝胶电泳显示有清晰条带ꎬ经超微量紫外分光光度计UV2450测定浓度和纯度合格ꎬ可用于后续实验ꎮ通过使用基因特异性引物ꎬ成功克隆获得两条序列长度为2151bp和1908bp的序列(图1)ꎬ测序结果与转录组序列相似度分别高达99.95%和100%ꎬ分别编码716个和635个氨基酸ꎬ命名为PcDXS1和PcDXS2ꎮM:DL2000DNAMarkerꎻ1:PcDXS1基因PCR扩增产物ꎻ2:PcDXS2基因PCR扩增产物ꎮ图1㊀PcDXS1㊁PcDXS2基因克隆2.2㊀PcDXS1㊁PcDXS2蛋白理化性质分析经ProtParam预测分析ꎬPcDXS1蛋白分子式为C3473H5496N840O1038S39ꎬ为亲水且稳定的弱酸性蛋白ꎻPcDXS2蛋白分子式为C3009H4790N840O899S25ꎬ为亲水不稳定的弱酸性蛋白(表3)ꎬProtScale分析也表明PcDXS1㊁PcDXS2均为亲水性蛋白(图2)ꎮ两蛋白均定位在叶绿体ꎮ表3㊀PcDXS1㊁PcDXS1蛋白理化性质蛋白氨基酸数分子量/kDa正电残基个数负电残基个数等电点亲水性总平均值(GRAVY)脂肪系数不稳定系数跨膜区域信号肽PcDXS171678.3384665.78-0.02892.3539.35无无PcDXS263567.9271656.36-0.04491.4542.84无无正值表示疏水ꎻ负值表示亲水ꎮ图2㊀PcDXS1(A)㊁PcDXS2(B)蛋白亲疏水性预测2.3㊀PcDXS1㊁PcDXS2保守结构域及二级和三级结构分析PcDXS1㊁PcDXS2蛋白保守结构域分析结果显示ꎬ两者都属于DXS超家族ꎬ含有从N端到C端的DXP_sythase_N㊁Transket_pyr和Transketo ̄lase_C结构域模块(图3)ꎮPcDXS1蛋白二级结构中无规则卷曲占比最高ꎬ为39.80%ꎬ还含有37.85%的α-螺旋㊁15.92%的折叠延伸链㊁6.42%的β-折叠ꎻPcDXS2蛋白中占比最高的是α-螺旋ꎬ为41.89%ꎬ还含有15.59%的折叠延伸链㊁8.03%的β-折叠㊁34.49%的无规则卷曲(图4)ꎮ通过SWISSMODEL构建了两蛋白的三级结构ꎬ对PcDXS1蛋白ꎬ以叶绿体DXPS为模板ꎬ序列一致性55.78%ꎬGMQE得分为0.64(0~1范围内数值越大表明预期质量越高)ꎬGMEAN得分为13㊀第4期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀曾晴ꎬ等:广藿香DXS基因克隆及表达分析0.67(分数趋近于0反映 类似原生 的结构ꎬ低于-4.0的 QMEAN 分数表示模型质量较低)ꎬ可视为获得了良好的PcDXS1蛋白三级结构模型ꎮ对PcDXS2蛋白ꎬ以番茄DXS1为模板ꎬ二者的相似度高达91.02%ꎬGMQE得分为0.90ꎬ该模型可较好地预测PcDXS2蛋白的三级结构(图5)ꎮ图3㊀PcDXS1㊁PcDXS2蛋白保守结构域分析结果2.4㊀PcDXS1㊁PcDXS2基因系统进化分析使用MEGA11构建PcDXS1㊁PcDXS2与其他物种DXS基因的系统发育树ꎬ结果(图6)显示ꎬPcDXS1与半枝莲DXS(MK035040.1)聚为一支ꎬPcDXS2与糙苏DXS(KU317508.1)聚为一支ꎬ亲缘关系较近ꎮPcDXS1和PcDXS2之间存在系统发育距离ꎬ可能存在功能差异ꎮ蓝色表示α-螺旋ꎻ红色表示β-折叠ꎻ绿色表示β-转角ꎻ紫色表示无规则卷曲ꎮ图4㊀PcDXS1(A)㊁PcDXS2(B)蛋白的二级结构图5㊀PcDXS1(A)㊁PcDXS2(B)蛋白的三级结构Camelliasinensis:山茶花ꎻActinidiachinensis:猕猴桃ꎻPrunellavulgaris:夏枯草ꎻGardeniajasminoides:栀子ꎻPinusmassoniana:马尾松ꎻThujaplicata:北美乔柏ꎻAquilariasinensis:土沉香ꎻPhlomisumbrosa:糙苏ꎻTaraxacumkok ̄saghyz:橡胶草ꎻWithaniasomnifera:南非醉茄ꎻScutellariabarbata:半枝莲ꎻLyciumruthenicum:枸杞ꎻPlectranthusbarbatus:左手香ꎮ图6㊀PcDXS1㊁PcDXS2基因系统发育进化树23山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第56卷㊀2.5㊀PcDXS1㊁PcDXS2原核表达分析将PcDXS1㊁PcDXS2基因引入同源臂与pET-28a线性化载体连接ꎬ测序分析结果同克隆序列一致ꎬ表明成功构建pET-28a-PcDXS1㊁pET-28a-PcDXS2原核表达载体ꎮPcDXS1㊁PcDXS2蛋白分子量分别为78.33kDa和67.92kDaꎬ加上His标签后蛋白大小分别约为84.6kDa和76.1kDaꎮ将重组质粒转化BL21(DE3)菌株ꎬ挑取阳性菌在16ħ条件下分别用0.25㊁0.50㊁0.75㊁1.0mmol L-1IPTG诱导表达12hꎬ经细胞破碎仪破碎㊁离心㊁SDS-PAGE凝胶电泳检测ꎬ结果(图7)显示ꎬ在沉淀中分别有84.6kDa和76.1kDa的蛋白条带ꎬ说明PcDXS1㊁PcDXS2重组蛋白被成功诱导表达ꎬPcDXS2重组蛋白表达较少ꎬ主要在沉淀中表达ꎬIPTG浓度变化对蛋白表达无明显影响ꎮM:BluePlus®IIProteinMarker(14~120kDa)ꎻ1㊁3㊁5㊁7㊁9:分别为0㊁0.25㊁0.50㊁0.75㊁1.00mmol L-1IPTG诱导重组蛋白表达后的破碎菌体上清ꎻ2㊁4㊁6㊁8㊁10:分别为0㊁0.25㊁0.50㊁0.75㊁1.0mmol L-1IPTG诱导重组蛋白表达后的破碎菌体沉淀ꎮ图7㊀PcDXS1㊁PcDXS2原核表达分析的SDS-PAGE检测结果2.6㊀PcDXS1㊁PcDXS2表达的组织特异性分析结果(图8)显示ꎬPcDXS1㊁PcDXS2在广藿香根㊁茎㊁叶㊁芽中均有表达ꎮ其中ꎬPcDXS1在叶中表达量最高ꎬ在芽和茎中表达量也较高ꎬ均显著高于在根中的表达量ꎻPcDXS2在茎㊁叶㊁芽中的表达量相当ꎬ且均显著高于在根中的表达量ꎮ柱上不同小写字母表示组织间差异显著(P<0.05)ꎮ图8㊀PcDXS1㊁PcDXS2在广藿香不同部位中的表达差异3㊀讨论目前已从多种植物中挖掘出DXS基因ꎬ并对其在萜类化合物生物合成过程中的功能进行了研究ꎬ但DXS基因对广藿香萜类代谢调控的影响尚未见研究报道ꎮDXS基因家族具有较高的保守性[21]ꎬ多含有DXP_sythase_N㊁Transket_pyr和Transketolase_C结构域模块[22]ꎮ本研究从广藿香中克隆出两个DXS基因(PcDXS1㊁PcDXS2)ꎬ均包含该3个保守结构域模块ꎬ符合DXS基因家族结构特征ꎮDXS亚家族中ꎬDXS1被认为是管家基因[23]ꎬDXS1蛋白主要在叶绿体中表达ꎬ是合成光合色素和植物激素所必需的[24]ꎬ在植物叶片和茎的叶绿体以及果实的有色质体中大量表达[12]ꎻDXS2蛋白位于非光合作用质体中ꎬ参与一些防御反应特异的萜类化合物的合成ꎬ优先在植物根的成熟体中表达[12]ꎻDXS3蛋白的表达与参与胚胎后发33㊀第4期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀曾晴ꎬ等:广藿香DXS基因克隆及表达分析育和繁殖的基因相关[25]ꎮ本研究结果显示ꎬPcDXS1㊁PcDXS2在广藿香根㊁茎㊁叶㊁芽中均有表达ꎬ且主要在地上部表达ꎬ在根中的表达量较低ꎬ尤其PcDXS1在叶中显著高表达ꎬ符合DXS1在光合组织中活跃的特征ꎻ亚细胞定位预测显示主要定位在叶绿体ꎬ说明PcDXS1和PcDXS2可能在叶绿体中发挥作用ꎮ原核表达是常见的表达外源蛋白的分子生物技术ꎬ大肠杆菌(Escherichiacoli)具有生长周期短㊁易于培养及遗传操纵的特点ꎬ是产生重组蛋白的重要宿主ꎬ优化重组蛋白的生物合成至关重要ꎬ常通过改变菌株的培养参数增加蛋白的表达和溶解度ꎬ用于生产重组蛋白[26-27]ꎮ对毛果杨DXS蛋白进行诱导表达ꎬ在沉淀物中检测到PtDXS靶蛋白[28]ꎮ陈文意等[29]考察了20㊁30ħ下ꎬ0.25mmol L-1和0.5mmol L-1IPTG诱导的广藿香Pc ̄JAR1融合蛋白表达ꎬ发现20ħ㊁0.25mmol L-1IPTG诱导下表达菌诱导蛋白在沉淀中更高表达ꎬ说明温度和IPTG浓度影响蛋白表达ꎮ本研究利用0.25㊁0.5㊁0.75㊁1.0mmol L-1IPTG诱导PcDXS1㊁PcDXS2重组蛋白在BL21(DE3)中表达ꎬ结果表明两蛋白主要在沉淀中表达ꎬ表达量与IPTG浓度无明显关联ꎬPcDXS2重组蛋白在同样条件下表达量较少还可能与诱导温度和时间有关ꎮ研究发现ꎬDXS基因的表达水平一般与MEP途径直接调控的萜类含量呈正相关ꎬ过表达薰衣草DXS基因显著促进薰衣草精油中单萜化合物的积累[30]ꎻ二萜类丹参酮是丹参的主要生物活性成分ꎬ丹参SmDXS1和SmDXS2的过表达显著增强其根系中丹参酮的积累[31]ꎮ同时ꎬDXS基因也调控MVA途径萜类化合物合成ꎬ其表达水平会影响MVA途径萜类含量水平的高低ꎬ如沉默甘草DXS基因促进了甘草毛状根中三萜类物质甘草酸的合成ꎬ而过表达DXS基因则导致甘草酸含量下降[32]ꎻ使用DXS基因抑制剂氯马松(CLO)处理檀香幼苗ꎬ倍半萜檀香醇的含量没有降低[33]ꎮ4㊀结论本研究从广藿香中克隆得到PcDXS1和PcDXS2基因ꎬ其全长分别为2151bp和1908bpꎬ分别编码716个和635个氨基酸ꎬ均定位于叶绿体ꎬ均为亲水性㊁非跨膜㊁非分泌蛋白ꎻPcDXS1蛋白为稳定蛋白ꎬPcDXS2蛋白为不稳定蛋白ꎬ均具有DXS基因家族典型特征ꎮ原核表达分析发现两蛋白均受IPTG诱导表达ꎬ且主要在沉淀中表达ꎬ表达水平在不同IPTG浓度间无明显差异ꎮ两基因在广藿香根㊁茎㊁叶㊁芽中均有表达ꎬ但在根中的表达量均较低ꎬPcDXS1主要在叶中表达ꎬPcDXS2在茎㊁叶㊁芽中的表达量均较高且相当ꎮ这为深入研究DXS基因在调控广藿香萜类化合物合成中的作用奠定基础ꎮ为此ꎬ本课题组已构建DXS基因的过表达载体和沉默载体ꎬ期望通过进一步研究揭示其表达与广藿香有效成分积累之间的关系ꎮ参㊀考㊀文㊀献:[1]㊀国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京:中国医药科技出版社ꎬ2020:46.[2]㊀XuFFꎬCaiWꎬMaTꎬetal.Traditionalusesꎬphytochemistryꎬpharmacologyꎬqualitycontrolꎬindustrialapplicationꎬpharma 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纳米二氧化钛的cas号
纳米二氧化钛的cas号
纳米二氧化钛的CAS号是一个化学行业中广泛使用的标识号码,用以唯一地
识别和区分不同化学物质。
CAS号是Chemical Abstracts Service(CAS)所分配的
一串数字,由三个部分组成,分别是前缀部分、中间部分和后缀部分。
纳米二氧
化钛的CAS号为1317-70-0。
CAS号中的前缀部分通常为2-7个数字,代表化学物质的特定组合。
在纳米二
氧化钛的CAS号中,前缀部分为1317,这个数字与该化学物质的特有属性相关联。
中间部分通常由两位数字和连接字符组成,用于区分不同化学物质的排列方式。
在纳米二氧化钛的CAS号中,中间部分为70。
后缀部分则由0构成,表示纳米二氧
化钛与其他化学物质的亚型没有明显的差异。
通过CAS号,我们可以准确地确认纳米二氧化钛的身份,避免混淆或误解。
这对于科学研究、工业生产和安全监管等领域都非常重要。
总之,纳米二氧化钛的CAS号是1317-70-0,通过CAS号可以准确识别和区
分纳米二氧化钛,确保正确应用于各种领域中。
汉麻花和叶挥发性成分分析
核农学报2024,38(2):0308~0316Journal of Nuclear Agricultural Sciences汉麻花和叶挥发性成分分析练冬梅姚运法李洲吴松海洪建基 *(福建省农业科学院亚热带农业研究所,福建漳州363005)摘要:为明确汉麻不同花和叶的挥发性成分,以品种brosom为材料,利用顶空-气相色谱/质谱联用技术对其雌花、雄花、雌株老嫩叶、雄株老嫩叶的挥发性成分进行测定。
结果表明,相对含量在0.05%以上的挥发性成分中,雌花检测到36种、雄花23种、雌株老叶32种、雌株嫩叶35种、雄株老叶26种、雄株嫩叶30种;萜烯类是花、叶的主要挥发性成分,其中单萜类是雌/雄花的优势成分,雌花主要成分为β-蒎烯和D-柠檬烯,雄花为α-蒎烯、β-蒎烯和D-柠檬烯;倍半萜类是雌株老/嫩叶优势成分,单萜类是雄株老/嫩叶优势成分;雌株老叶主要成分为β-蒎烯、D-柠檬烯、石竹烯和叶醇,雌株嫩叶为D-柠檬烯、石竹烯和β-金合欢烯,雄株老叶为α-蒎烯、β-蒎烯、石竹烯和叶醇,雄株嫩叶为α-蒎烯和β-蒎烯。
挥发性成分相似率分析结果显示,雌花和雄花相似率较高,雌株老/嫩叶及雄株老/嫩叶相似率极高,而不同性别的花、叶间相似率较低。
雄株老嫩叶α-蒎烯含量(>44.84%)显著高于雌株老嫩叶(<2.65%),雌株老嫩叶的β-金合欢烯含量(>9.18%)显著高于雄株老嫩叶(<0.33%),故α-蒎烯和β-金合欢烯可作为区分brosom雌/雄株的挥发性成分标识物。
α-蒎烯、石竹烯、β-罗勒烯在雌/雄花中的差异表现丰富了汉麻雌/雄花在挥发性成分方面的基础知识。
本研究结果为汉麻育种及其综合开发利用提供了理论基础。
关键词:汉麻;花;叶片;挥发性成分;顶空-气相色谱/质谱联用DOI:10.11869/j.issn.1000‑8551.2024.02.0308汉麻(China-Hemp),别名工业大麻,为大麻科(Cannabinaceae)大麻属(Cannabis)一年生草本植物,其四氢大麻酚(tetrahydrocannabinol,THC)含量低于0.3%,属于无毒品利用价值大麻类型,被用于纺织、造纸、军需、生物能源、食品保健、医药、化妆品、饲料和油料等[1-5]。
核壳型色谱柱-高效液相色谱法快速分离检测水飞蓟素中7种非对映异构体
核壳型色谱柱-高效液相色谱法快速分离检测水飞蓟素中7种非对映异构体徐静涵;薛芸;王彦;闫超【摘要】In this study,seven diastereoisomers in silymarin were separated and determined rapidly by core-shell column-high performance liquid chromatography(HPLC).The chromatographic conditions were optimized,rapid separation of seven diastereoisomers were achieved,and the separation and determination of the common commercial Silybum marianum preparations were also carried out with this method.The optimum chromatographic conditions were as follows:Halo C18column(150 mm×4.6 mm,2.7 μm),gradient elution with methanol-water-formic acid(30∶70∶0.1)-methanol as a mobile phase,flow rate of 0.35 mL·min-1,injection volume of 2 μL.The linear relationship was good in the range of 0.01~0.1 mg·mL-1(R2>0.997).The relative standard deviation(RSD) of the chromatographic peak area and the retention time were 1.74% and 0.67%(n=6),respectively.The advantages of this method are simple operation,short time and high separation degree.It can be used to analyze Silybum marianum preparations,and also provides a new idea for the separation and determination of diastereoisomers in silymarin.%采用核壳型色谱柱-高效液相色谱法快速分离检测水飞蓟素中7种非对映异构体,优化了液相色谱条件,实现了7种非对映异构体的快速完全分离,并应用于市售水飞蓟制剂的分离检测.优化色谱条件如下:核壳型Halo C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,2.7 μm)、甲醇-水-甲酸(30∶70∶0.1)-甲醇为流动相、梯度洗脱、流速0.35 mL·min-1、进样量2 μL.该方法在0.01~0.1 mg·mL-1浓度范围内线性关系良好(R2>0.997),色谱峰峰面积和保留时间的相对标准偏差(RSD)分别为1.74%和0.67%(n=6).该方法操作简单、省时、分离度好,可用于水飞蓟制剂的分析检测,也为水飞蓟素中非对映异构体的分离检测提供新的思路.【期刊名称】《化学与生物工程》【年(卷),期】2017(034)006【总页数】6页(P65-70)【关键词】高效液相色谱法;核壳型色谱柱;水飞蓟素;非对映异构体【作者】徐静涵;薛芸;王彦;闫超【作者单位】上海交通大学,上海 200240;上海交通大学,上海 200240;上海交通大学,上海 200240;上海交通大学,上海 200240【正文语种】中文【中图分类】O658;O657.72水飞蓟[Silybum marianum(L.) Gaertn.]为菊科植物水飞蓟的干燥成熟果实,具有清热解毒、疏肝利胆的功效,常用于肝胆湿热、胁痛、黄疸等疾病的治疗[1]。
萘乙酸分子量
萘乙酸分子量1. 介绍萘乙酸(Naphthoic Acid)是一种有机化合物,化学式为C11H8O2。
它是由萘环上的一个氢原子被羧基(-COOH)取代而形成的。
萘乙酸常用于有机合成和染料工业中,具有重要的应用价值。
在本文中,我们将探讨萘乙酸的分子量以及与其相关的一些重要概念和应用。
2. 萘乙酸的结构萘乙酸的结构如下所示:从结构图可以看出,萘乙酸由一个芳香环(萘环)和一个羧基组成。
这种结构使得它具有一些特殊性质和应用。
3. 分子量计算分子量是指一个分子中所有原子相对原子质量之和。
对于萘乙酸这样的有机化合物,我们可以通过计算每个原子在分子中的相对质量,并将它们相加来得到分子量。
根据元素周期表中的数据,我们可以得到以下原子的相对原子质量: - 碳(C)的相对原子质量为12.01 - 氢(H)的相对原子质量为1.008 - 氧(O)的相对原子质量为16.00萘乙酸中有11个碳原子、8个氢原子和2个氧原子。
因此,我们可以进行如下计算:分子量 = 11 * 12.01 + 8 * 1.008 + 2 * 16.00 = 172.18 g/mol所以,萘乙酸的分子量为172.18 g/mol。
4. 萘乙酸的性质和应用(1)性质萘乙酸是一种白色结晶固体,可溶于有机溶剂如醇、醚和氯代烃。
它具有较强的芳香气味,并且在高温下可以分解。
(2)应用由于其特殊结构和性质,萘乙酸在许多领域中有重要的应用。
a. 有机合成作为有机合成中的重要中间体,萘乙酸可以通过进一步反应产生许多其他化合物。
例如,它可以被还原成萘乙胺,或者通过酯化反应生成萘乙酸甲酯等。
这些化合物在制药、染料和农药等领域中具有广泛的应用。
b. 染料工业萘乙酸可以作为染料工业中的原料,用于合成各种颜色的染料。
它可以通过与其他化合物发生偶联反应来生成芳香醌衍生物,从而形成不同颜色的染料。
c. 防腐剂由于其抑制霉菌和真菌生长的特性,萘乙酸被广泛用作防腐剂。
它可以添加到一些涂料、胶粘剂和纺织品中,以延长它们的使用寿命。
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5mg
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MED11550
Kenpaullone
Kenpaullone
142273-20-9
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MED11532
SB772077B dihydrochloride
SB772077B dihydrochloride
607373-46-6
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MED11478
BI 2536
BI 2536
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MED11424
Angiotensin 1/2 (1-9)
Angiotensin 1/2 (1-9)
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MED11489
Deferasirox
Deferasirox
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Kenpaullone
ne
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MED11423
Angiotensin I (human, mouse, rat)
Angiotensin I (human, mouse, rat)
484-42-4
201530-41-8
5mg
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MED11427
Thrombin Receptor Activator for Peptide 5 (TRAP-5)
Thrombin Receptor Activator for Peptide 5 (TRAP-5)
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1、产品物理参数:
常用名
ARRY-520 R对映体
英文名
ARRY-520 (R enantiomer)
CAS号
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分子量
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密度
无资料
沸点
无资料
分子式
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熔点
无资料
闪点
无资料
2、同类产品列表:
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MED11566
LY2857785
LY2857785
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MED11570
KJ Pyr 9
KJ Pyr 9
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25mg