胎盘免疫调节活性因子(SPIF-Ⅰ)的分离纯化
TGF-β1、s_Flt-1在胎盘植入中的表达及预测效能
*基金项目：2021-2023福建省卫生健康科技计划中青年骨干项目（2020GGB006）①福建医科大学省立临床医学院 福建 福州 350500②连江县医院TGF-β1、sFlt-1在胎盘植入中的表达及预测效能*李蕊① 沈芬芳① 林靓① 王军军① 杨茵① 倪惠钦② 【摘要】 目的：探究转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）、可溶性血管内皮生长因子受体-1（soluble vascular endothelial growth factor receptor-1，sFlt-1）在胎盘植入中的表达及预测效能。
方法：回顾性选取2015年6月—2021年6月福建医科大学省立临床医学院收治的42例胎盘植入患者作为观察组，另选取同时期本院健康体检的60例健康产妇作为对照组。
检测两组TGF-β1、sFlt-1水平。
比较两组TGF-β1、sFlt-1水平。
比较观察组不同植入深度患者TGF-β1、sFlt-1水平。
分析TGF-β1、sFlt-1对胎盘植入的预测效能。
结果：观察组TGF-β1、sFlt-1水平均明显高于对照组，差异有统计学意义（P <0.05）。
随着植入深度的增加，患者TGF-β1、sFlt-1水平逐渐升高。
TGF-β1、sFlt-1诊断胎盘植入的AUC、特异度与敏感度均明显低于联合检测。
结论：在胎盘植入诊断中，TGF-β1、sFlt-1联合检测的敏感度、特异度较高。
随着胎盘植入深度增加，TGF-β1、sFlt-1水平增高。
TGF-β1、sFlt-1可为胎盘植入诊断及病情程度判断提供科学依据。
【关键词】 胎盘植入 转化生长因子-β1 可溶性血管内皮生长因子受体-1 表达 预测效能 doi：10.14033/ki.cfmr.2023.25.018 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2023）25-0071-04 Expression of TGF-β1, sFlt-1 in Placental Implantation and Its Predictive Efficacy/LI Rui, SHEN Fenfang, LIN Liang, WANG Junjun, YANG Yin, NI Huiqin. //Chinese and Foreign Medical Research, 2023, 21(25): 71-74 [Abstract] Objective: To explore the expression of transforming growth factor-β1 (TGF-β1), soluble vascular endothelial growth factor receptor-1 (sFlt-1) in placental implantation and its predictive efficacy. Method: Forty-two patients with placenta implantation admitted to the Shengli Clinical Medical College of Fujian Medical University from June 2015 to June 2021 were selected retrospectively as the observation group, and 60 healthy lying-in woman who underwent physical examination in our hospital at the same period were selected as the control group. The levels of TGF-β1 and sFlt-1 were detected in the two groups. The levels of TGF-β1 and sFlt-1 were compared between the two groups. The levels of TGF-β1 and sFlt-1 in patients with different implantation types were compared in the observation group. The predictive efficacy of TGF-β1 and sFlt-1 on placental implantation was analyzed. Result: The levels of TGF-β1 and sFlt-1 in the observation group were significantly higher than those in the control group, the differences were statistically significant (P <0.05). With the increasing implantation depth, the levels of TGF-β1 and sFlt-1 in patients were continuously increased. The specificity and sensitivity, AUC of TGF-β1 and sFlt-1 in the diagnosis of placenta implantation were significantly lower than that of combined detection. Conclusion: In the diagnosis of placental implantation, the sensitivity and specificity of TGF-β1 and sFlt-1 combined detection are higher. The levels of TGF-β1 and sFlt-1 increased with the increase of placental implantation depth. TGF-β1 and sFlt-1 can provide a scientific basis for the diagnosis of placenta implantation and the severity of the disease. [Key words] Placental implantation Transforming growth factor-β1 Soluble vascular endothelial growth factor receptor-1 Expression Predictive efficacy First-author's address: Shengli Clinical Medical College of Fujian Medical University, Fuzhou 350500, China 近年来，随着剖宫产术等的不断增加，胎盘植入的发生率呈现出明显的上升趋势，成为产妇产后出血等不良母婴结局的重要危险因素之一。
羊胎盘免疫调节因子主要药效学初步研究
羊胎盘免疫调节因子主要药效学初步研究羊胎盘免疫调节因子主要药效学初步研究引言羊胎盘是一种基于中医药理论的传统中药材，被广泛应用于临床医学。
羊胎盘含有丰富的活性成分，其中的免疫调节因子在药效学研究中引起了越来越多的关注。
本研究旨在初步探索羊胎盘免疫调节因子的主要药效学特点，以期为其临床应用提供理论依据。
方法本次研究选取20只健康雄性1岁羊，采集其胎盘样本，并通过高压减震制备羊胎盘提取物。
采用动物模型，随机将实验组和对照组的小鼠分别注射不同剂量的羊胎盘提取物，观察动物的生理和病理变化。
对照组注射生理盐水。
结果实验结果显示，羊胎盘提取物能显著促进机体的免疫功能，在实验组的小鼠中观察到显著增强的免疫反应。
实验组的小鼠在注射羊胎盘提取物后表现出更强的抗原提取能力，并且细胞毒性反应更为活跃。
同时，实验组小鼠的脾脏指数、脾脏细胞数量和活力也明显高于对照组。
讨论通过初步实验结果分析，我们推测羊胎盘提取物中的免疫调节因子能够增强机体的免疫反应，提高抗原提取能力，增强细胞毒性反应。
这可能是由于羊胎盘提取物中免疫调节因子的活性成分具有激活和增强机体免疫功能的作用。
然而，这只是初步研究结果，尚需进一步验证。
在应用羊胎盘提取物时，需注意其适用范围和剂量。
过量使用羊胎盘提取物可能引起机体免疫过度反应，导致免疫系统异常活跃。
此外，羊胎盘提取物作为一种新型免疫调节药物，尚需进行长期使用的安全性和有效性研究。
结论羊胎盘提取物中的免疫调节因子具有一定的药效学特点，能够增强机体的免疫反应和细胞毒性反应。
然而，由于缺乏相关的临床试验和大规模的人体实验，仍需进行更深入的研究和验证。
未来的研究应重点关注羊胎盘提取物的免疫调节机制，明确剂量和临床适用范围，为其临床应用提供更加可靠的理论依据研究结果显示，羊胎盘提取物中的免疫调节因子能够显著促进小鼠的免疫功能。
实验组小鼠在注射羊胎盘提取物后表现出更强的抗原提取能力和活跃的细胞毒性反应，且脾脏指数、细胞数量和活力也明显高于对照组。
梅花鹿胎盘免疫调节因子制备工艺
Preparation of Immunoregulatory Factors from Sika Deer Placenta
SUN Ci1，BIAN Yuan-yuan1,2，LÜ Yong-tong1，HU Feng-qing1,*
(1. Laboratory of Biomaterials and Biopharmaceuticals, School of Life Sciences, Liaoning University, Shenyang 2. School of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214000, China)
滤方法制备鹿胎免疫调节因子(cervine placental immune regulator factor，CPIRF)，以优化其制备工艺。
1 材料与方法
胎盘(牛胎、猪胎、羊胎、鹿胎)替代。 鹿胎是指母鹿腹中的带胎衣、胎水的胎鹿, 或体表
无毛、空腹、体内各器官已经发育完整，但是由于机械
1.1 材料 新鲜梅花鹿胎盘 铁岭天宏药业有限公司提供。
1.7 CPIRF核酸质量浓度测定 采用钒钼酸铵显色法测定CPIRF核酸质量浓度[23]。
2 结果与分析
2.1 胎盘提取液单因素试验 2.1.1 超声功率对胎盘提取液多肽质量浓度的影响
30
呓㚢ᦤপ⎆㚑 䋼䞣⌧ᑺ/(mg/mL)
25
20
15
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图 1 超声功率对胎盘提取液多肽质量浓度的影响 Fig.1 Effect of ultrasonic power on peptide content in sika deer
酶解羊胎盘抗氧化肽的分离及在护肤品中的应用
酶解羊胎盘抗氧化肽的分离及在护肤品中的应用李明;姜惠敏;曹光群;杨成【摘要】为开发酶解法制备的羊胎盘抗氧化肽在化妆品中的应用,采用木瓜蛋白酶酶解羊胎盘下脚料,通过DA201-C型大孔吸附树脂、超滤膜和Sephadex G-10葡聚糖凝胶色谱分离纯化,并对各组分进行抗氧化活性的测定,筛选得到具有较高DPPH自由基清除率的羊胎盘抗氧化肽S12.配制不同S12质量分数的护肤乳液和润肤晚霜,采用MC750型皮肤测试仪评价样品的保湿和弹性功效.结果表明,15名志愿者持续使用添加质量分数4%S12的护肤乳液和润肤晚霜2分别升高了38%和45%.研究表明,添加了羊胎盘抗氧化肽的护肤品具有良好的保湿和提高皮肤弹性的功效.%In order to develop application of antioxidative peptides from sheep placenta byproduct by enzymolysis in cosmetics,papain was employed for the enzymolysis and DPPH radical scavenging activity of the hydrolysate was used for efficacy evaluation. The hydrolysate by papain was purified sequentially by DA201-C macroporous resin,ultrafiltration and Sephadex G-10 gel filtration. Fractions obtained from purification operations were evaluated. The sheep placenta peptide S12 displays the highest DPPH radical scavenging activity and was selected for further study. The formulas of skin care lotion and cream containing different content of S12 (0-5%)were designed,and the moisturizing and elastic effect of all skin care product samples were evaluated by MC750 skin test instrument. Results show that after continuous using the skin care lotion and cream containing 4% content of S12 for 60 d,the skin cuticula hydration of 15 volunteers increases by 27 and 31 respectively;thetransepidermal water loss reduces by 12. 0 and 13. 2g/(m2 ·h)respectively;and the skin elasticity R2 incre ases by 38% and 45% respectively. It is concluded that the skin care lotion and cream containing sheep placenta peptide can improve skin moisturizing and increase skin elasticity.【期刊名称】《日用化学工业》【年(卷),期】2017(047)008【总页数】7页(P446-451,462)【关键词】化妆品添加剂;羊胎盘;酶解;抗氧化肽;功效评价【作者】李明;姜惠敏;曹光群;杨成【作者单位】江南大学食品胶体与生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122;江南大学化学与材料工程学院,江苏无锡214122;江南大学化学与材料工程学院,江苏无锡214122;江南大学食品胶体与生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122;江南大学化学与材料工程学院,江苏无锡214122;江南大学食品胶体与生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122;江南大学化学与材料工程学院,江苏无锡214122【正文语种】中文【中图分类】TQ658人体内氧化代谢产生的自由基可引发机体衰老等多种疾病[1，2]。
羊胎盘中SOD提取条件及小分子肽的分离纯化研究
羊胎盘中ＳＯＤ提取条件及小分子肽的分离纯化研究ＴｈｅｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｍｅｔｈｏｄｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅａｎｄｉｓｏｌａｔｉｏｎｓｍａｌｌｍｏｌｅｃｕｌｅｐｅｐｔｉｄｅｓｏｆＣａｐｒｉｎｅｅｐｌａｃｅｅｍｒｐａａｍｌｌ研究生：林媛导师：关一夫论文课题起止时间：至Ｑ！Ｑ生２旦二至Ｑ！兰生垒月论文完成时间：２Ｑ！兰生垒旦中国医科大学（辽宁）２０１３年５月中国医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。
据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。
申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。
论文作者签名：彝Ｊ啦日期：迎垃．厶：臣中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。
本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。
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学校可以公布学位论文的全部或部分内容（保密内容除外），以采用影印、缩印或其他手段保存论文。
论文作者签名：指导教师签名：目录一、摘要中文论著摘要………………………………………………………………一１英文论著摘要………………………………………………………………．．３二、英文缩略语…………………………………………………………………一６三、论文前言……………………………………………………………………………………………………７日Ｕ百………………………………………………………………………………………………………７第一章胎盘中ＳＯＤ提取条件的优化实验材料与方法……………………………………………………………．．１０实验结果……………………………………………………………………．．１２第二章胎盘中小分子肽的研究实验材料与方法……………………………………………………………．．１７实验结果……………………………………………………………………．．１９第三章总结讨论……………………………………………………………………………………………………２３结论……………………………………………………………………………………………………２４四、本研究创新性自我评价……………………………………………………．．２５五、参考文献……………………………………………………………………．．２６六、附录综ｊ苤…………………………………………………………………………………………………．２８在学期间科研成绩…………………………………………………………．．４６致谢………………………………………………………………………………４７个人简介……………………………………………………………………．．４８·中文论著摘要·羊胎盘中ＳＯＤ提取条件及小分子肽的分离纯化研究目的胎盘（Ｐｌａｃｅｎｔａ）又名“紫河车”为常用中药，民间常将其煮烂食之。
胎盘免疫调节因子的生物功能及临床应用进展
［ 收稿 日期］ｏ２ ４ ｏ ［ ２ｏ－ － ￣修回 日期］ｏ２ ５１ ｏ３ ２ｏ－ ． ｏ ５ ［ 基童项 目】 国家 自然科 学费空 （ ３ ｌ０厦重庆 市 ２０ 年重 点技 术创 新（ ７赞助项 目 帅 ２） ０１ １） ４
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ｔ ｌ ｃｖｌ ｄｃｎ ａ 印 ｃ ｈ ｂ ａｆｉｅ ａ ｌｉ ｌ ｅ ｃ ｉ ｔａ ｎ ｉｃ ∞ ｏ ｔ Ｉ ． ｆｈ ＰＦ ｅ
Ｐ ｃｎ 瑚Ｔ 嘲 Ｉ ａ （ ｎ）ｉ ｌ ｅｔ ＿ ａ ａ＿ Ｉ Ｉ ｌ ￣ Ｆｒ ｓ ｇｆ
ｉｅ ￣ｏ ｎｍ ｓａ ｈｒ 埘 ｃｎｅｔ ｔ ｎｔ 卿 ｎ ｒ ｆｕ ｙｒ ｅｒ ｅｓ ｔｅ ｅ ｃ ｏｃｎｒｅ ａ ｄ。 ｈ ｅ
胎盘 免 疫 调 节 因子 的 生物 功 能 及 临床 应 用进 展
苏 晔 综述 ， 魏 泓 审校
（ 第三军医大学实验动物中心， 重庆 ４０３ ） ０ ０８
［ 要】 胎盘免疫调节因子是从人胎盘中提取的活性因子， 摘 具有多种生物学功能， 近年来引起国内外的广泛关注。本
文详细介绍 了它的生物学功能和临床应用。
的胎盘 中提取 的活性成 分 。 目前 研究 表 明它 的活性
０ ，Ｄ Ｄ Ｏ ＞２０ 说 明 ＰＦ的 主要组分为核苷酸 和 ．， Ｉ
肽 类物 质 。ＰＦ性 质 较 稳定 ， Ｉ ０—４ 下 活性 可 保 持 ℃ １ ，０℃加 热 ３ ａｎ活性不 会 明显 丧失 ； ｐ３ 年 ６ ０ｒ ｉ 在 Ｈ ｐ Ｏ范 围 内活性 良好 。而 在 国外 ， 它 的研 究更 多 Ｈｌ 对
羊异常凝血酶原的分离纯化及结构的研究
羊异常凝血酶原的分离纯化及结构的研究
曹纯章;赵虹;申信生;卜丽莎;王维忠
【期刊名称】《吉林大学学报（医学版）》
【年(卷),期】1999(025)002
【摘要】目的:建立灵敏特异的肝癌临床检测方法.方法:以服用6 d华法令的羊的血浆为原料,经过钡盐吸附、DEAE-Sephacel离子交换层析、抗凝血酶原抗体-Sepharose 4B亲和层析和Sephacryl S-200凝胶过滤等提取纯化步骤.结果:得到高纯度的异常凝血酶原,经SDS-PAGE测定分子量为72 000,等电点为pI 6.5,并对其进行了氨基酸组成分析.结论:高纯度的抗原为进一步制备单抗,建立临床检测方法奠定了基础.
【总页数】3页(P118-120)
【作者】曹纯章;赵虹;申信生;卜丽莎;王维忠
【作者单位】白求恩医科大学第三临床学院，长春 130031;白求恩医科大学第三临床学院，长春 130031;吉林化学工业公司职工医院;白求恩医科大学第三临床学院，长春 130031;白求恩医科大学第三临床学院，长春 130031
【正文语种】中文
【中图分类】R446.69
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牛羊胎盘免疫调节因子的提取及对PANC-Ⅰ增殖和迁移影响的比较
王 晶 林 志颖 林 立梅
同等 贡献作者
通 讯作 者 ， ｌ ｉ ｘ ｕ ｅ ｌ ｉ ｎ ｇ ＠ｈ ｏ ｔ ｍａ ｉ ｌ ． ｃ ｏ ｎ ｒ
李夏 伟
侯 东霞
李雪 玲”
内蒙古大学 教育部哺乳动物生殖生物学及 生物技术重点实验室 ， 呼和浩特 ０ １ ０ ０ ２ １
摘ｌ ａ ｃ ｅ ｎ ｔ ａ ｉ ｍｍｕ ｎ ｏ ｒ ｅ ｇ ｕ ｌ ａ ｔ ｉ ｎ ｇ ｆ ａ ｃ ｔ ｏ ｒ ， Ｐ Ｆ ） 是 从胎 盘提 取 的小分 子 多肽 ， 对病 毒性
胎 盘 免疫调 节 因子对 胰腺 癌细 胞 的影 响不 同 ， 可 能因 为其存 在 的活性 成 分有 区别 。本研 究为胰 腺癌 的治 疗 提供 了新 的思路 。
关键 词
胎 盘免 疫调节 因子 ， 胰 腺癌细 胞（ Ｐ ＡＮＣ ． Ｉ １ ， 细胞增 殖
疾病 、 免疫 缺 陷疾 病 及 恶性 肿 瘤 等具 有 潜 在 的临 床应 用 价值 。为 检测 牛 （ Ｂ ｏ ｓ ｔ ａ ｕ ｒ ｕ ｓ ） ￣ ［ Ｊ 绵 羊（ Ｏ ｖ ｉ ｓ ａ ｒ ｉ ｅ ｓ ） 胎 盘 免 疫 调节 因对 人 Ｈ ｏ ｍ ｏ ｓ ａ ｐ ｉ ｅ ￣） 胰 腺 癌细 胞 （ ｐ ａ ｎ ｃ ｒ ｅ ａ ｔ ｉ ｃ ｃ ａ ｎ ｃ ｅ ｒ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ． Ｉ， Ｐ ＡＮＣ — Ｉ ） 增殖 与 迁移 的 影响 ， 本 研 究对 从屠 宰场 获得 的 牛和绵 羊胎 盘进 行 分离 ， 利 用双 酶水 解法 制备 Ｐ Ｆ ， 将质 量浓度 为 １ ０ ０ ￣ ２ ０ ０ ０ ｎ ｇ ／ ｍＬ 的牛、 羊Ｐ Ｆ作 用 于体 外 培 养 的 Ｐ Ａ ＮＣ ．Ｉ 细胞 ， 以３ 一 （ ４ ， ５ 一 二 甲基 噻唑． ２ 一 基） ５ 一 （ ３ ． 羧 甲酯 基） ． ２ 一 （ ４ ． 磺 苯基） 一
从胎盘组织中提取甾体激素的方法
从胎盘组织中提取甾体激素的方法
1.液液萃取法：首先将胎盘组织与有机溶剂（如乙酸乙酯）
混合，并通过摇动或搅拌使其充分接触。
然后将混合物离心，
将有机相（含有胎盘中的甾体激素）转移到另一个离心管中。
最后，通过蒸发有机相溶剂，得到甾体激素的纯化产物。
2.固相萃取法：将胎盘组织样品经过初步处理后，可以将其
通过固相萃取柱进行进一步净化。
这个方法适用于分离和浓缩
甾体激素。
胎盘样品首先与溶剂一起通过固相萃取柱，柱上的
固相材料将吸附激素，然后用适当的洗脱溶液洗脱激素，最后
将激素溶液蒸发浓缩得到纯化产物。
3.液相色谱法：这是一种常用于分离和纯化甾体激素的方法。
通过将胎盘组织提取物通过液相色谱系统进行分离。
在液相色
谱中，样品与流动相相互作用，根据其在固定相上的亲疏水性
质的不同，激素被分离并收集。
最后，通过蒸发溶剂得到纯化
的甾体激素。
4.固相微萃取法：这是一种较新的提取方法，能够高效地富
集目标化合物。
首先，将胎盘组织样品与固相微粒混合，固相
微粒上通常涂有吸附剂，能够选择性地吸附目标甾体激素。
然后，将混合物放入固相微萃取仪器中，通过旋转、摇动等操作，使激素与微粒上的吸附剂充分接触，并进行吸附。
最后，用洗
脱剂将吸附的激素从固相微粒上洗脱，得到纯化的甾体激素样品。
以上是从胎盘组织中提取甾体激素的几种常用方法，不同的
方法适用于不同的实验目的和样品特点。
在实际操作时，需要
根据实验条件和要求选择适合的提取方法，并加以改进和优化，以提高提取效率和纯度。
牛胎盘中免疫调节因子的提取过程研究
牛胎盘中免疫调节因子的提取过程研究
牟德华;商宪库;庞书亮;任红;侯占群;郝彦伟;芳闪闪
【期刊名称】《河北工业科技》
【年(卷),期】2006(023)005
【摘要】采用盐析、膜技术及冷冻干燥等手段从牛胎盘中分离提纯了免疫调节因子,并通过大鼠实验验证了提取物的生物活性,效果显著.最佳工艺条件:盐析温度为0 ℃,pH值为5,转速为6 000 r/min,冷冻干燥时间为24 h.在此条件下免疫调节因子提取率为0.673%.
【总页数】3页(P269-270,316)
【作者】牟德华;商宪库;庞书亮;任红;侯占群;郝彦伟;芳闪闪
【作者单位】河北科技大学生物工程与科学学院,河北石家庄,050018;河北科技大学生物工程与科学学院,河北石家庄,050018;河北沧县防疫站,河北沧县,061000;广西大学轻工与食品工程学院,广西南宁,530004;河北科技大学生物工程与科学学院,河北石家庄,050018;河北科技大学生物工程与科学学院,河北石家庄,050018;河北科技大学生物工程与科学学院,河北石家庄,050018
【正文语种】中文
【中图分类】Q132.7
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乳源免疫调节肽分离、纯化与鉴定及其功能的初步研究
乳源免疫调节肽分离、纯化与鉴定及其功能的初步研究1．乳源免疫调节肽的制备、纯化及鉴定目的探讨酪蛋白酶解产生免疫调节肽的最适条件，建立酶解产物的分离及其鉴定免疫调节肽的方法。
方法将酪蛋白酶解，其酶解产物经超滤膜过滤，用十二烷基磺酸钠——聚丙烯酰铵凝胶电泳（SDS-PAGE）方法分析其酶解情况。
用反相高效液相色谱层析（RP-HPLC），C<sub>18</sub>柱，以免疫调节肽为标准已知样，利用保留时间外标法与内标法，与已知对照物进行定性，鉴定酪蛋白酶解产物中的免疫调节肽。
酶解上清液经Sephadex G-15凝胶层析分离，得到不同级分，然后用RP-HPLC鉴定各级分中的免疫调节肽。
结果酪蛋白在胰蛋白酶与糜蛋白酶组合下水解90分钟，能产生PGPIPN量最多，大约5％。
酶解产物经Sephadex G-15凝胶层析后，酶解产物中小分子物质被分开，经RP-HPLC检测，Sephadex G-15的第5级分含有免疫调节肽。
结论酪蛋白经过胰蛋白酶和糜蛋白酶酶解后可以生成免疫调节肽，并可以通过Sephadex G-15粗分免疫调节肽。
2．乳源免疫调节肽对大鼠生长和机体免疫的影响目的探讨乳源免疫调节肽对大鼠机体免疫功能，增重和采食量的影响。
方法 42只40日龄的SD大鼠（雌雄各一半）随机分为两个试验组和一个对照组，每组14只雌雄各一半，分开饲养。
预饲一周后，实验组分别被灌喂2.5×10<sup>-3</sup>g·L<sup>-1</sup>免疫调节肽（试验组Ⅰ）、2.5×10<sup>-2</sup>g·L<sup>-1</sup>免疫调节肽（试验组Ⅱ）：对照组灌喂生理盐水，并记录大鼠日采食量和体重。
饲养一个月后分别检测对照组和试验组的淋巴细胞转化、红细胞免疫、巨噬细胞吞噬、日采食量和体重等的差别。
胎盘免疫调节因子的制备
胎盘免疫调节因子的制备许代娣;李琪;何树生【期刊名称】《广西医学》【年(卷),期】2001(023)004【摘要】目的:利用胎盘资源,摸索一种简单易行、既方便、安全、提纯率又高的胎盘免疫调节因子(Placenta Factor PF,亦称胎盘肽、或胎盘调节因子)的制备方法.方法:利用对胎盘组织的冻融,匀浆,离心,透析的原理提取PF.结果:PF含18种氨基酸,并且含有牛黄酸和羟脯氨酸,氨基酸总含量146.00～154.7mg/100ml.PF含量:1.512mg/ml(常量组);3.12mg/ml(倍量组).结论:两种提取方法(F1法与F2法)的氨基酸含量和PF的含量比较无明显差别(P＞0.05).均能达到较理想的效果.通过对其生物活性的检测、动物实验以及临床观察,可认为它是一种分子量小,生物体活性强、无毒、无抗原的免疫调节剂.【总页数】2页(P798-799)【作者】许代娣;李琪;何树生【作者单位】广西医科大学第一附属医院,;广西医科大学第一附属医院,;广西医科大学第一附属医院,【正文语种】中文【中图分类】R392【相关文献】1.梅花鹿胎盘免疫调节因子制备工艺 [J], 孙辞;边媛媛;吕永通;胡风庆2.羊胎盘免疫调节因子对60Co-γ射线辐射损伤小鼠免疫功能影响的研究 [J], 方廖琼;何成明;牛荣;钟英英;魏泓3.胎盘免疫调节因子对细胞因子诱导的杀伤细胞超微结构及免疫表型的调节作用[J], 张学荣;蒙怡;舒雨雁;韦敏;石庆秋;徐阳曦4.胎盘免疫调节因子对子宫内膜异位症大鼠免疫功能的影响 [J], 张学荣;刘海涛;韦敏;石庆秋;班建东;苏建家;舒雨雁5.牦牛胎盘免疫调节因子对小鼠免疫器官指数及组织结构的影响 [J], 宁鹏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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再经 Ｈ Ｌ 柱纯化， ＰＣ 紫外全波长检测显示（ ） 图４ 其 纯度达９． 纯度以液相色谱图谱中洗脱峰的峰 ８８ ％（ 面积与所有峰总面积百分比 计算） 目的成分峰收 ， 将 集， 浓缩冻干即为羊胎盘活性因子江 （Ｐ － ＳＩ Ｉ 。 Ｆ ）
超纯水稀释羊胎盘提取液冻干粉， ０ ｍ 以２ ｍ／Ｌ ｇ 浓度依次经Ｓ ｈ ｅＧ ０ ｅ ａ ｘ 凝胶柱、 ｐ ｄ Ｇ ５ ｐｄ ５ Ｓ ｈ ｅ ２凝 ｅ ａ ｘ 胶柱层析， ｅ ａ ｘ ０ Ｓ ｈ ｅ Ｇ１ 凝胶柱脱盐并用反相 ｐｄ ＨＬ（ 谱检测的 Ｐ 色 Ｃ 各项参数参照文献［） １ 检侧分析 ９ １
采 Ｔ 法， 参照文 １ １ 制备 脾淋 用Ｍ Ｉ ， 献［１ ０ 常规 小鼠 ，
巴细胞， 并用含 １％小牛血清的 １４ 培养液调细胞 ０ ６０ 浓度至０５ １ １ １ 个／ Ｌ依次向９ 孔细胞 ．ｘ 护一 ｘ ０ ６ Ｍ， ６
培养板中 加人淋巴 细胞 １ 匹 ， Ｗ ｍ 的 ０ ０ ２ ０ Ｌ 刀豆蛋 白（ｏ ） Ｃｎ 和不同 Ａ 浓度的ＳＩ Ｉ ０ 每组设五 Ｐ － Ｉ， Ｆ 各５ ｉ Ｌ
种 非常理想的免疫调节剂和营养美容保健品 １ ０ 〔３ － ３
近年来有关胎盘提取液的研究主要集中在功能和应 用方面， 对从中分离纯化出单一活性组分的研究报
为Ｓｍ 公司产品； ｉａ ｇ 胸腺肤注射液（ｈ ｏ ｐｄ Ｔｙ ｐ ｔｕ ｍ ｅｉｍ，
Ｔ） Ｐ为西安迪赛生物药业有限责任公司， 其余试剂 为国产分析纯。 ＢＭ６２２ 型研磨混炼机， Ｆ－ ２ Ｂ 济南倍力粉技术工 程有限公司；Ｒ２ 型高速冷冻离心机，ｉ ｈＫＫ Ｃ２Ｇ Ｈａ ｉ ｉ ｔ ｏ ｃ Ｃ． ； ｏＬ ． ｔ Ｌ ｄ Ｗ型中 空纤维超滤器， 北京市旭成超滤设
万方数据
Ｖ ｌ１ ｏ ． ８
吴开平等： 羊胎盘免疫调节活性因子（Ｐ － ＳＩ Ｉ 的分离纯化和鉴定研究 Ｆ ）
下的超滤液。将超滤液在无菌环境中过滤除菌 ２ 次 后冻干 ４℃保存。 ，３ Ｐ － ． Ｉ Ｉ Ｓ Ｆ 的分离纯化
Ｓ ｈ ｅＧ１凝胶柱（．ｃ ｘ ｅ） ｅ ａ ｘ ０ ｐｄ １ ｍ ０ 脱盐， ５ ３ ｍ 浓缩后
个复孔， 阴性对照组与阳性对照组分别以 １４ 培养 ６０
一声 ！
０１一
６ ９ １ ０ ０ ０ ０ ０ ０ ２ １ ５ １ ２ ８ １
液和胸腺肤注射液代替 ＳＩ Ｉ ℃ ５ Ｏ 培养 Ｐ － ７ ％ Ｚ Ｆ ， ３ Ｃ
箱温育４ ｈ 每孔加人３汕 Ａ 溶液， ４ 后， ０ Ｍ 继续温育
ｔ ｎ ） （ ｍｉ
道甚少〔， 。 ４ １ 本文从以 －１ ８３ 羊胎盘为材料制备的羊胎
盘提取液 中分离出羊胎盘免疫调节活性因子江 （Ｐ － ＳＩ Ｉ 并进行鉴定， Ｆ ） 为以后开发羊源性生物制品
提供材料。
１ 材料与方法
，１ 材料与仪器 ．
备厂；ｇ ｎ１ ０ Ａｉ ｔ 型高效液相色谱（ｇ ｐｆ ａ ｅ ｌ １ ｅ ０ ｈｈ ｏ ｎ ｉ ｅｒ ｃ ｒｍ ｌｕ ｃｏａｇｐ ， ） 美国惠普公司； ５ ｉｉ ｈｍｔｒｈ ＨＬ 仪， ｑｄ ｏａ ｙ ＰＣ ｒ ８３ ４ 型紫外分光光度计，ｇ ｎ公司；Ｐ ０ 型质 Ａｉ ｔ Ａ１０ ｌ ｅ ２ ０ 谱仪，
天然产物研究与开发 Ｎｔ Ｒ Ｄｕ ６１： ６ ９， ２ ａＰ ｄ ｅ２０， ７ － ８８ ｏ ｓ ０ ８ ９ ７ ３ ｒ ｅ
文章编号： ０－ ８（ ０） － ９－ １ １ ８ ２ ６０ ０ ６ ４ ０ ６ ０ ０ ３７ ０
羊胎盘免疫调节活性因子（ＰＦ Ｉ） ＳＩ－ 的分离纯化和鉴定研究
吴开平， ９ 魏 ４
各脱盐洗脱峰， ＳＩ 工 将含 Ｐ － 的洗脱峰收集冻干， Ｆ 最 后经反相 Ｈ Ｌ 纯化， ＰＣ 收集目 标成分峰， 冻干备用。 １４ 质谱分析与紫外吸收光谱检测 ． 将 ＳＩ 工 以超纯水稀释后进行紫外光扫描并 Ｐ－ Ｆ 用 Ａ Ｉ ０ 型质谱仪测定其分子量。 Ｐ ００ ２
，５ 淋巴细胞增殖实验 ．
“ 比
０ ２
２． ． １１
羊胎盘提取液Ｓ ｈ ｅ Ｇ５ 凝 ｅ ａ ｘ ０ 胶层析 ｐｄ
４ ６ １ １ １ １ １ ８ ０ ２ ４ ６ ８
ｔ ｉ） （ ｎ ｍ
ｘ ｃ ） １ ｍ 层析， ７４ ０ ０ 州 ．浓度为００ ｍｌ 的Ｔｓ ． ｏ Ｌ ｒ－ １ ／ ｉ Ｈｌ Ｃ缓冲液以０５ ／ ｉ流速洗脱。结果出现一 ． ｍｎ ｍ Ｌ 个 Ｍ峰（ １。各洗脱峰经反相 Ｈ Ｌ 检测分析发 图 ） ＰＣ 现洗脱峰 Ｂ含组分较少， 只有两个主要成分峰（ 图 ３， ） 便于进一步分离。
理化性质、 生物活性初步研究。结果得到紫外特征吸收峰为２３ 、 ７ ｒ 分子质量为 ３ ． 的羊胎盘免疫调节活性 ａ ｎ ０８ ３
因 － ｈ ｐ ｅａｉｎ ｏｇｔ ａｉｙ ｒ ， Ｉ 工 。 子 Ｉ ｅｐｃ ｔ ｎ ｕ ｒｌｎ ｃ ｉｆｔ－ ＳＦ ） 体外生物 （ ｅ ｌ ｎｌ ｎｅａ ｇ ｔ ａｏ 工 Ｐ － Ｓ ａ ｕ ｉ ｔ ｃ ｖ 学活性 证明， Ｉ Ｉ 试验 ＳＦ Ｐ 能显著影响
Ｗ Ｋｉｉ ， Ｈｎ＊ Ｕ －ｎ Ｗ Ｉ ｇ ａｐｇ Ｅ ｏ
胎盘具有补气养血益精等功效， 作为民间中药 已有多年历史。现代生物学及医学研究表明， 提取 胎盘中的多种生物活性物质制成的胎盘提取液是一
供， ２ 置于一 ０℃冰箱保存； ｐ ｄ Ｇ ０Ｓ ｈ ｅ。 Ｓ ｈ ｅ ５， ｐ ｄ ｅ ａ ｘ ｅ ａ ｘ
淋巴细胞增殖实验数据以 ｘ土。 表示， 并用 １．统计软件包对数据进行 ｔ １ ０ 检验。
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ＳＩ Ｉ Ｐ － Ｆ 的分离纯化
美国ｗｔ ａ。公司； ０ ｅ ５ 型酶标仪，ｉＲｄ ５ Ｂ －ａ公司。 ｏ １ 羊胎盘提取液的制备 ． ２ 将冷冻羊胎盘绞碎， 超微粉碎制成浆液， 加人灭
羊胎盘原材料由 本校动物中心羊场养殖基地提
收稿日 ２０－ － 期： ５ ０ ０ ０ １２ 接受日 ２０－ － 期： ５ ２ ７ ０ １０ 基金项目： 国家自 然科学资金（ ０ １ ）重庆市２０ 年重点技术 ３７ ２ ； ０００ ０１ 创新项目（ ７ １） ４
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圈１ ｐ ｄ Ｇ ０ ｅ ａ ｘ 凝胶柱层析 Ｓ ｈ ｅ ５
Ｆ ． ｅａｘ 脚ｆ ｔ ｏ ｈｐ ｎ ＳｈｅＧ ０ ｉａｎ ｅ ｐ ｅ ￣ ｉ １ ｐｄ ５ ｇ ｌ ｉ ｆ ｌ ｔ ｔ ｏ ｓｅ ａ ｒ ｃ
（ 第三军医大学基础部实验动物学教研室， ４０３） 重庆 ００８
摘 要： 探 为 讨研究羊胎盘的活性组分， 将羊胎盘绞碎通过匀浆、 冻融、 超虑等步骤制备羊胎盘提取液， 经 Ｓ ｈ ｅＧ ０ ｅ ａｘ 凝 过 Ｓ ｈ ｅＧ ０ 胶 脱 反 效液相 谱纯化出 ｅ ａｘ 和Ｓ ｈ ｅＧ ５ 胶 滤、ｐ ｄ － 凝 柱 盐， 相高 ｐｄ ５ ｐｄ ２ ｅ ａｘ １ 色 单一组 进行 分并
小鼠脾淋巴细胞增殖分裂， 具有明显的剂量一 效应依赖关系。ＳＩ 工 Ｐ － 是羊胎盘提取液中一种具有免疫调节的小 Ｆ 分子活性多肤． 关键词： 羊胎盘； 凝胶层析； 分离纯化； 生物活性
中图分类号 ：２４２ ８８ ． 文献标识码 ： Ａ
Ｓｕｙ Ｐ ｒｉ ｔｎ ｄ ａａｔ ｉ ｔｎ Ｓｅｐ ｃｎａ ｔｄ ｏ ｕｉｃ ｉ ａ Ｃ ｒｃ ｒ ａｏ ｏ ｈｅ Ｐａｅｔ ｎ ｆａｏ ｎ ｈ ｅ ｚ ｉ ｆ ｌ ｌ
ｉ ｕｅ ， ｓｅ ｃｅ． ａＳＩ Ｉ ａ ｌ ｉｐｐｄ ｗｈ ｕ ｒ ｌｉ ａｉ ｙ ｈ ｐ ｅｔｅｒｔ ｎｃ ｄ ｄ ｐｎ ｙｓ ｈ Ｐ －． ｓａ ｃ ｎ ｔｅ ｉｍ ｎ ｇｔｇ ｖ ｏｓ ｅ ｐ ｃ ａ ｃ ｌ ｏ ｔ Ｔ ｔ Ｆ ｍ ｈ ｅｉ ｉ ｍ ｏ ａｎ ｃ ｉ ｆ ｌ ｎ ｘ ． ａ ｔ ｅ ｔｔ ｅ ａ ｔ ａ Ｋｙ ｒ ： ｐ ｅ ａ脚 ｆｒｉ ； ｔｎ ｐｒｃｉ ； ｇ ａｉ ｙ ｅ ｗ ｄ ｓ ｅ ｐｃ ｔ ｉ ａ ｎｉｌｉ ａ ｕｆａｏ ｂｌｙ ｖ ｏ ｓ ｈ ｌ ｎ ； ｌ ｔ ｓａ ｎ ｉ ｔｎ ｉｏ ｃ ｉ ｅ ａ ｔ ｏ ｏ ｏ ｄ ｉ ｏ ｔｔ
４ ， 人１ Ｋ Ｄ Ｓ， 打 溶解 ｈ 加 ０ Ｌ Ｏ吹 匀均 沉淀， 标仪 ０ Ｍ 酶
５０ 测 Ｏ ５ｎ Ｄ值。
统计学处理
圈２ 洗脱峰 ＢＳ ｈｄ Ｇ２ 凝胶柱层析 ｅ ａ ｘ ５ ｐ ｅ
ｌ ｔｎ ｅ ｔ ａ Ｆ ． Ｓｐａｅቤተ መጻሕፍቲ ባይዱＧ２ 脚 ｆｒｉ ｏｐ ｋ ｉ ２ ｅｈｄｘ ５ ｉａｏ ｆ Ｂ ｇ
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