康宁木霉T_2菌株防治根结线虫的应用方法研究

康宁木霉T 2菌株防治根结线虫的应用方法研究

王智学，于淼，方新，冯健，吴红艳，李新

（辽宁省微生物科学研究院，辽宁沈阳122000）

摘要［目的］为解除土壤抑菌作用，提高康宁木霉T 2菌株防治根结线虫效果。［方法］室内试验分别测定T 2菌株对根结线虫卵的寄生

能力，T 2菌种发酵液的杀根结线虫幼虫活性，T 2菌株分解秸秆及其在土壤中的定殖能力；并通过盆栽试验测定不同土壤处理对番茄根

结线虫病害的防治效果。［

结果］T 2菌株对根结线虫卵的寄生能力强，其代谢物有一定的杀根结线虫幼虫活性；T 2菌株能快速降解秸秆，土壤碳氮源对秸秆降解有很大的影响；在添加秸秆粉和乳酸后，T 2菌株在土壤中的定殖能力较强。盆栽试验结果表明，在有秸秆粉

及乳酸存在的条件下，T 2菌株防治番茄根结线虫病害效果达76．4%。［结论］康宁木霉T 2菌株与草粉和乳酸联合使用防治根结线虫效

果显著，

具有一定的田间应用前景。关键词康宁木霉；T 2菌株；秸秆；降解；根结线虫中图分类号S48文献标识码A 文章编号0517－6611（2011）03－01412－03Study on the Application Method of Controlling Root-knot Nematode with Strain T 2of Trichoderma koningii WANG Zhi-xue et al （Liaoning Institute of Microorganism Science ，Chaoyang ，Liaoning 122000）

Abstract ［Objective ］In order to relieve the soil bactriostasis and improve the control effect of Trichoderma koningii strain T 2on root-knot nematode．［Method ］Inhibiting effect of strain T 2to the hatching of the nematode larva ，the lethal effect of strain T 2fermentation liquor to the larva of nematode ，the ability of straw degradation and colonization in soil of strain T 2were determined by indoor tests．The effect of different soil treatments on controlling the tomato disease caused root-knot nematode were tested by the pot culture experiments．［Result ］Strain T 2got

good parasitic ability to the root-knot nematode egg．Strain T 2fermentation liquor had a certain lethal effect to the larva of nematode．Straw can

be quickly degraded by strain T 2，and the degradation ability were influenced obviously by the carbon and nitrogen source in the soil ；the colo-nization ability of strain T 2was high with straw powder and lactic acid in the soil．The result of pot culture experiments showed that the control

efficiency of strain T 2with the straw powder and lactic acid on the tomato disease caused root-knot nematode in the soil reached 76．4%．［Conclusion ］The research result showed that the application prospect of Trichoderma koningii strain T 2with the straw powder and lactic acid in

the soil was broad．

Key words Trichoderma koningii ；Strain T 2；Powder of straw ；Degradation ；Root-knot nematode

作者简介

王智学（1965－），男，辽宁朝阳人，副研究员，从事植物病害

生物防治研究

。收稿日期2010-10-11根结线虫每年给农业生产造成损失超过1000亿美元，防治根结线虫的主要方法是溴化钾熏蒸和有机磷农药灌根，生物防治根结线虫是一条有效途径。国内外相关研究很多，也筛选到了很多对根结线虫有寄生、捕食、毒杀等作用的菌种，

如淡紫拟青霉、木霉、厚垣轮枝孢等，其室内防治效果显著，一般为50% 80%，但大面积田间防治效果不明显，很少超过60%，其主要限制因素是土壤的抑菌作用以及引入菌的养分需求受限。木霉T 2菌株单独使用时防治效果有限，笔者尝试在土壤中加入秸秆粉和乳酸，

以期能为T 2菌株生长提供养分，

并减轻土壤宿生菌对T 2菌株的抑制作用，从而提高该菌株对根结线虫的防治效果。1材料与方法1．1

供试材料

根结线虫（Meloidogyne sp．）卵和幼虫：从

自培养的发病番茄根部挑出根结线虫卵块，用1%NaClO 3消毒1min 后，配制散卵粒，恒温培养（25ħ）孵化幼虫；木霉T 2菌株：自分离，经鉴定为康宁木霉（Trichoderma koningii ）；淡紫拟青霉（Paecilomyces lilacinus ）BY06-5F-7：引自中国科学院微生物研究所；番茄苗：品种为L-402，由辽宁园艺种苗有限公司和辽宁省农业科学院园艺研究所提供。1．2试验方法

1．2．1

T 2菌株抑制根结线虫卵孵化试验。采用水琼脂平

板法。在培养皿（Φ=6cm ）中加5．0ml 水琼脂，凝固后，在培养皿中央点接木霉T 2或淡紫拟青霉菌饼1个（Φ=0．5cm ），以不接菌种为对照，28ħ培养48h 后，在菌落边缘接

0．1ml 散卵粒（大约100粒），28ħ培养7d ，检测培养皿中幼虫数，计算孵化率，抑制孵化率和校正抑制孵化率。

孵化率（%）=幼虫数/接入散卵粒数ˑ100抑制孵化率（%）=100－孵化率（%）

校正抑制孵化率（%）=（对照孵化率－处理孵化率）/（1－对照孵化率）ˑ1001．2．2

T 2菌种发酵液杀根结线虫幼虫活性测定。试验设3

个处理，

CK ：无菌水5ml 加0．1ml 根结线虫幼虫悬浮液；T 2：T 2发酵液5ml 加0．1ml 根结线虫幼虫悬浮液；R +T 2：T 2发酵液5ml 加0．01ml 乳酸，加0．1ml 根结线虫幼虫悬浮液28ħ培养24h ，镜检死虫数。死亡率和校正死亡率计算方法参

见

《中国线虫学研究》［1］

。1．2．3

T 2菌株分解秸秆能力测试。在摇瓶中加入1．0g 秸

秆叶片，

接菌量为1．0ml （大约2．0ˑ105

cfu /ml ）；碳源分2种：0．0%，

0．1%；氮源分10个浓度：0．01%、0．02%、0．03%、0．04%、0．05%、0．06%、0．07%、0．08%、0．09%、0．10%；28ħ静止培养10d ，过滤，滤渣在80ħ恒温干燥至恒重，称重，计算失重率。

失重率（%）=（1－残余量/1．0）ˑ1001．2．4

木霉T 2菌株定殖能力测试。对照：在培养皿（Φ=6

cm ）中加自然土10g 、自来水3．0ml 、0．1ml 菌悬液；处理：在培养皿（Φ=6cm ）中加秸秆粉1．0g （100ħ干热处理）平铺，上面加100ħ干热处理自然土10g ，加自来水3．0ml 、

0．1ml 菌悬液（土壤中活均数为1．11ˑ105

cfu /g 风干土），在28ħ

下培养，分别在5、

10、15、20、30、50d 后测土壤（风干后）中的活菌数，计算定殖率。

定殖率（%）=

N d 后检测到活菌数

1．11ˑ105

ˑ100

责任编辑高晓余责任校对卢瑶

安徽农业科学，Journal of Anhui Agri．Sci．2011，39（3）：1412－1414