丙型肝炎病毒非结构基因NS5b研究进展
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现 ， 个 序列 的变 异并 不 是 随 机 和均 衡 的 ， Ｔ 整 ５ｕ Ｒ就
性 的证 实 ， 了解 病 毒 的复 制 及 开 发 抑 制 该 酶 活 性 对
相 当保 守 ， 而包 膜 蛋 白基 因 Ｅ 和 Ｅ ｌ ２变 异最 大 ， 有 含 高变 区 ； 因 ｃ和 Ｎ ２～Ｎ ５的变异 程 度 介 于两 者 之 基 Ｓ Ｓ
基 因 的变 异 与 病 情 及 干 扰 素 疗 效 有 一 定 的关 系 ， 变 异 较 大者 常 出 现 明显 的临 床 表 现 ， 干 扰 素 治 疗 可 且
能 趋 于失 败 ｌｌ 。 ８
３Ｎ ５ ． ｓ ｂ与基 因分 型
性的发挥有 重要的作用 ， 突变将使 Ｒ Ｐ￣ 其 Ｄ ｄ 活性 消
功 能 区 基 序 （ Ｌ） 与 Ｎ ５ ｕ工 ， Ｓｂ蛋 白的 溶 解 性 显 著 相 关 ， 发 现 ＭＳ 可提 高 Ｎ ５ 还 Ｓｂ的 Ｒ Ｐ活性 ， ２ ＤＲ Ｍｎ 可
部 分恢 复其 活性 ， Ｚ ２ 抑 制 其 活性 。 而 ｎ 则
２Ｎ Ｓ ． Ｓ ｂ的 变异 及 与 干扰 素治 疗
近年 ，ｏ ｅ 等 －也 证 实 ， 于 缺 失 突 变 而 缺 Ｔｍ ｉ ６ Ｊ 由
Ｃ端 疏水 区 的 Ｎ ５ Ｓ ｂ蛋 白 的 溶 解 性 明 显 增 加 。进 一 步 研 究发 现 ， 缺 失 区含 有 一 个 由 ４ ａ组 成 的 疏 水 该 ａ
作一 综 述 。
１Ｎ Ｓ ． Ｓ ｂ的位 置 及功 能
失 ， Ｒ Ａ结 合 活性 仍 然 存 在 。表 明 结合 位 点 与 酶 但 Ｎ
维普资讯
国外医学・ 流行病学传染痘学分避
生墨 旦箜 鲞蔓
丙 型肝炎病毒非结构基 因 Ｎ ５ Ｓ ｂ研 究 进 展
徐 州 医 学 院 附 属 医 院 传 染 科 （ ２Ｏ ２ 秦 兆 习综 述 ２ １ｏ ） 北 京 大 学人 民 医院肝 病研 究所 （０ ０ ４ 魏 来 审校 １０ ４ ）
间呈 相对 保 守 。 Ｎ ５ Ｓ ｂ基 因 区 核 苷 酸 同源 性 在 同一 亚 型 的不 同株 间 为 ９ ．％ ～９ ％ ， 同 型 间 为 ８ ％ ２５ ９ 不 ０ ８ ％ ， 属 相对 保 守 【 ４ 即 引。还 有 研 究 表 明 ， Ｓ ｂ区 Ｎ５
的抗病毒药 物具有重 要 的价 值 ， 以有关 Ｒ Ｒ 所 Ｄ Ｐ表 达 、 化 活 性测 定 、 异 性 抑制 位 点 等 的研 究 成 为 近 催 特
摘 要： 丙型 肝炎病毒非结 构基 因 ５ （ ｓｂ 区是 Ｒ Ａ依 赖 的 Ｒ Ａ聚合 酶编 码 区 ， Ｈ Ｖ的 复制及 致病 关 系 ｂＮ ５） Ｎ Ｎ 与 Ｃ
密 切。同时 ， 它也是设 计抗 病毒药物 的重要靶分 子区 ， 特别是 Ｈ Ｖ聚合酶 抑制剂拉 米夫定成功 的用于临床 ， Ｂ 使有关
（ｏｙｂｋ） 方 式 合 成 二 聚 体 发 夹 样 Ｒ Ａ 分 子 ， ｃｐ—ａｅ 的 ＿ Ｎ
Ｎ５ Ｓ ｂ蛋 白在 原 核 细 胞 内 的 高 效 表 达 以 及 Ｐ） Ｐ活 ｄＲ
病毒复制可发生随机突变 ， 使复制 中的错误掺 人无 法 校 正 ， 终 导 致 Ｈ Ｖ 的 高 度 变 异 。 比较 研 究 发 最 Ｃ
Ｎ５ Ｓ ｂ区 位 于 ７ ９ ９７ ｎ ， ６ ２ ３４ ｔ编码 ２ ２ ～３ １ａ ， ４ １ ０ ｌａ
表达 Ｎ５ ｓｂ蛋 白的 相对 分 子量 为 ６ ５～７ｋ ａ ０Ｄ 。序列 分 析表 明 ， Ｓｂ蛋 白 含 有 Ｒ Ａ 病 毒 复 制 酶 所 共 有 的 Ｎ５ ＿ Ｎ Ｇ Ｄ基 序 （ ｌ ＡｐＡｐ ， 聚合 酶 识 别 Ｒ Ａ模 而 具 有 Ｒ Ｐ活 性 。 Ｂｈｅｓ等 － 首 先 利 用 ＤＲ ｅｒｎ １ Ｊ
来研 究 热点 － Ｊ ２ 。
Ｉ ｉ等 【利 用杆 状 病 毒 载体 表 达 的 ６ｋ ａＮ ５ ｓｉ ３ ｈ ｊ ５Ｄ Ｓ ｂ 蛋 白具 有 Ｒ Ｒ Ｄ Ｐ活 性 ， 想 的 反 应 条 件 为 ３ ￣ ｐ 理 ２Ｃ， Ｈ
８０ Ｍ 浓 度 为 １ｍ ｏ／ 。 Ａａ残 基 对 Ｒ Ｒ ．， ｇ ０ ｍ ｌＬ Ｉ Ｄ Ｐ的 活
Ｒ Ａ依 赖的 Ｒ Ａ聚合酶表 达 、 化活性 测定和特异性 抑制位点 等研 究成 为热 点。本文 就丙 型肝炎 病毒 Ｎ Ｓ Ｎ Ｎ 催 Ｓｂ区有 关 的研究进展 作 了综述 。 关键词 ： 型肝炎病毒 ； 丙 非结 构基 因 ５ ； ＿ ｂ Ｒ Ａ依赖 的 Ｒ Ａ聚合酶 Ｎ ＿ Ｎ
丙 型肝 炎 病 毒 Ｎ ５ （ Ｃ Ｓｂ 是 Ｒ Ａ依 赖 Ｓｂ区 Ｈ ＶＮ ５ ） ＿ Ｎ 的 Ｒ Ａ聚合 酶 （ Ｄ Ｐ 编 码 区 ， 与 Ｈ Ｖ的 复 制 及 Ｎ Ｒ Ｒ） 它 Ｃ 致病 关 系 密 切 ， 是 设 计 抗 病 毒 药 物 的重 要 靶 分 子 也 区。 因此 ， Ｈ Ｖ Ｎ ５ 对 Ｃ Ｓｂ的 深 入 研 究 具 有 重 要 的 理
昆虫表 达 系 统 获 得 了 Ｎ ５ Ｓ ｂ蛋 白 ， 体 外 试 验 中 显 在 示 ， Ｓ ｂ蛋 白具 有 Ｒ Ｐ 活 性 ， 通 过 “ 制 返 回 ” Ｎ５ ＤＲ 可 复
Ｈ Ｖ复 制 不 需 要 逆 转 录 过 程 ， 直 接 在 Ｒ Ｒ Ｃ 可 ＤＰ
指 导 下进 行 。 由于 Ｒ Ｒ Ｄ Ｐ缺 乏 ５一 正 功 能 ， 此 ３校 因
论 意义 。本 文 就 近 年 来 有 关 Ｈ Ｖ Ｎ ５ Ｃ Ｓ ｂ的 研 究 进 展
能 －。Ｆｒ ｒ等 【 为提 高 Ｎ ５ ４ ｅｒ ｉ Ｊ ａ Ｊ Ｓｂ蛋 白的 溶 解 性 ， 构 在
建 Ｎ５ Ｓ ｂ表 达 载 体 时 切 除 了其 Ｃ端 的 ２ ａ ， 果 在 １ａ 结 Ｅ．ｏ ｃｌ ｉ中表 达 了 高 度 可 溶 性 蛋 白 ， 免 了对 酶 活性 避 有 影 响 的变 性 一 复性 过 程 。
性 的证 实 ， 了解 病 毒 的复 制 及 开 发 抑 制 该 酶 活 性 对
相 当保 守 ， 而包 膜 蛋 白基 因 Ｅ 和 Ｅ ｌ ２变 异最 大 ， 有 含 高变 区 ； 因 ｃ和 Ｎ ２～Ｎ ５的变异 程 度 介 于两 者 之 基 Ｓ Ｓ
基 因 的变 异 与 病 情 及 干 扰 素 疗 效 有 一 定 的关 系 ， 变 异 较 大者 常 出 现 明显 的临 床 表 现 ， 干 扰 素 治 疗 可 且
能 趋 于失 败 ｌｌ 。 ８
３Ｎ ５ ． ｓ ｂ与基 因分 型
性的发挥有 重要的作用 ， 突变将使 Ｒ Ｐ￣ 其 Ｄ ｄ 活性 消
功 能 区 基 序 （ Ｌ） 与 Ｎ ５ ｕ工 ， Ｓｂ蛋 白的 溶 解 性 显 著 相 关 ， 发 现 ＭＳ 可提 高 Ｎ ５ 还 Ｓｂ的 Ｒ Ｐ活性 ， ２ ＤＲ Ｍｎ 可
部 分恢 复其 活性 ， Ｚ ２ 抑 制 其 活性 。 而 ｎ 则
２Ｎ Ｓ ． Ｓ ｂ的 变异 及 与 干扰 素治 疗
近年 ，ｏ ｅ 等 －也 证 实 ， 于 缺 失 突 变 而 缺 Ｔｍ ｉ ６ Ｊ 由
Ｃ端 疏水 区 的 Ｎ ５ Ｓ ｂ蛋 白 的 溶 解 性 明 显 增 加 。进 一 步 研 究发 现 ， 缺 失 区含 有 一 个 由 ４ ａ组 成 的 疏 水 该 ａ
作一 综 述 。
１Ｎ Ｓ ． Ｓ ｂ的位 置 及功 能
失 ， Ｒ Ａ结 合 活性 仍 然 存 在 。表 明 结合 位 点 与 酶 但 Ｎ
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国外医学・ 流行病学传染痘学分避
生墨 旦箜 鲞蔓
丙 型肝炎病毒非结构基 因 Ｎ ５ Ｓ ｂ研 究 进 展
徐 州 医 学 院 附 属 医 院 传 染 科 （ ２Ｏ ２ 秦 兆 习综 述 ２ １ｏ ） 北 京 大 学人 民 医院肝 病研 究所 （０ ０ ４ 魏 来 审校 １０ ４ ）
间呈 相对 保 守 。 Ｎ ５ Ｓ ｂ基 因 区 核 苷 酸 同源 性 在 同一 亚 型 的不 同株 间 为 ９ ．％ ～９ ％ ， 同 型 间 为 ８ ％ ２５ ９ 不 ０ ８ ％ ， 属 相对 保 守 【 ４ 即 引。还 有 研 究 表 明 ， Ｓ ｂ区 Ｎ５
的抗病毒药 物具有重 要 的价 值 ， 以有关 Ｒ Ｒ 所 Ｄ Ｐ表 达 、 化 活 性测 定 、 异 性 抑制 位 点 等 的研 究 成 为 近 催 特
摘 要： 丙型 肝炎病毒非结 构基 因 ５ （ ｓｂ 区是 Ｒ Ａ依 赖 的 Ｒ Ａ聚合 酶编 码 区 ， Ｈ Ｖ的 复制及 致病 关 系 ｂＮ ５） Ｎ Ｎ 与 Ｃ
密 切。同时 ， 它也是设 计抗 病毒药物 的重要靶分 子区 ， 特别是 Ｈ Ｖ聚合酶 抑制剂拉 米夫定成功 的用于临床 ， Ｂ 使有关
（ｏｙｂｋ） 方 式 合 成 二 聚 体 发 夹 样 Ｒ Ａ 分 子 ， ｃｐ—ａｅ 的 ＿ Ｎ
Ｎ５ Ｓ ｂ蛋 白在 原 核 细 胞 内 的 高 效 表 达 以 及 Ｐ） Ｐ活 ｄＲ
病毒复制可发生随机突变 ， 使复制 中的错误掺 人无 法 校 正 ， 终 导 致 Ｈ Ｖ 的 高 度 变 异 。 比较 研 究 发 最 Ｃ
Ｎ５ Ｓ ｂ区 位 于 ７ ９ ９７ ｎ ， ６ ２ ３４ ｔ编码 ２ ２ ～３ １ａ ， ４ １ ０ ｌａ
表达 Ｎ５ ｓｂ蛋 白的 相对 分 子量 为 ６ ５～７ｋ ａ ０Ｄ 。序列 分 析表 明 ， Ｓｂ蛋 白 含 有 Ｒ Ａ 病 毒 复 制 酶 所 共 有 的 Ｎ５ ＿ Ｎ Ｇ Ｄ基 序 （ ｌ ＡｐＡｐ ， 聚合 酶 识 别 Ｒ Ａ模 而 具 有 Ｒ Ｐ活 性 。 Ｂｈｅｓ等 － 首 先 利 用 ＤＲ ｅｒｎ １ Ｊ
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Ｉ ｉ等 【利 用杆 状 病 毒 载体 表 达 的 ６ｋ ａＮ ５ ｓｉ ３ ｈ ｊ ５Ｄ Ｓ ｂ 蛋 白具 有 Ｒ Ｒ Ｄ Ｐ活 性 ， 想 的 反 应 条 件 为 ３ ￣ ｐ 理 ２Ｃ， Ｈ
８０ Ｍ 浓 度 为 １ｍ ｏ／ 。 Ａａ残 基 对 Ｒ Ｒ ．， ｇ ０ ｍ ｌＬ Ｉ Ｄ Ｐ的 活
Ｒ Ａ依 赖的 Ｒ Ａ聚合酶表 达 、 化活性 测定和特异性 抑制位点 等研 究成 为热 点。本文 就丙 型肝炎 病毒 Ｎ Ｓ Ｎ Ｎ 催 Ｓｂ区有 关 的研究进展 作 了综述 。 关键词 ： 型肝炎病毒 ； 丙 非结 构基 因 ５ ； ＿ ｂ Ｒ Ａ依赖 的 Ｒ Ａ聚合酶 Ｎ ＿ Ｎ
丙 型肝 炎 病 毒 Ｎ ５ （ Ｃ Ｓｂ 是 Ｒ Ａ依 赖 Ｓｂ区 Ｈ ＶＮ ５ ） ＿ Ｎ 的 Ｒ Ａ聚合 酶 （ Ｄ Ｐ 编 码 区 ， 与 Ｈ Ｖ的 复 制 及 Ｎ Ｒ Ｒ） 它 Ｃ 致病 关 系 密 切 ， 是 设 计 抗 病 毒 药 物 的重 要 靶 分 子 也 区。 因此 ， Ｈ Ｖ Ｎ ５ 对 Ｃ Ｓｂ的 深 入 研 究 具 有 重 要 的 理
昆虫表 达 系 统 获 得 了 Ｎ ５ Ｓ ｂ蛋 白 ， 体 外 试 验 中 显 在 示 ， Ｓ ｂ蛋 白具 有 Ｒ Ｐ 活 性 ， 通 过 “ 制 返 回 ” Ｎ５ ＤＲ 可 复
Ｈ Ｖ复 制 不 需 要 逆 转 录 过 程 ， 直 接 在 Ｒ Ｒ Ｃ 可 ＤＰ
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论 意义 。本 文 就 近 年 来 有 关 Ｈ Ｖ Ｎ ５ Ｃ Ｓ ｂ的 研 究 进 展
能 －。Ｆｒ ｒ等 【 为提 高 Ｎ ５ ４ ｅｒ ｉ Ｊ ａ Ｊ Ｓｂ蛋 白的 溶 解 性 ， 构 在
建 Ｎ５ Ｓ ｂ表 达 载 体 时 切 除 了其 Ｃ端 的 ２ ａ ， 果 在 １ａ 结 Ｅ．ｏ ｃｌ ｉ中表 达 了 高 度 可 溶 性 蛋 白 ， 免 了对 酶 活性 避 有 影 响 的变 性 一 复性 过 程 。