TGF -β Smads 信号转导通路
恶性肿瘤骨转移分子机制的研究进展
・４２２・ Ｃｈｉｎ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｔｈｅｒ，Ａｕｇ．２００９，Ｖ０１．１６，Ｎｏ．４
ＤＯＩ：１０．３８７２／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７－３８５Ｘ．２００９．０４．０２２
・综述・
恶性肿瘤骨转移分子机制的研究进展
Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ
Ｒ７３０．２；Ｒ７３８．１
［中图分类号］
［文献标志码］
Ａ
［文章编号］
１００７－３８５Ｘ（２００９）０４－０４２２－０５
恶性肿瘤骨转移发生率较高，由此引起的并发症 较多，治疗困难，是临床上的一个突出问题。癌和肉瘤 都可以转移到骨骼，其中由癌引起的骨转移更常见，约 占８０％一９０％。引起骨转移的常见肿瘤有乳腺癌 （６５％～７５％）、前列腺癌（６５％～７５％）、甲状腺癌 （６０％）、膀胱癌（４０％）、肺癌（３０％一４０％）、肾癌 （２０％～２５％）和恶性黑素瘤（１４％一４５％）等…。临 床上，晚期骨转移常导致局部剧烈疼痛、病理性骨折、 威胁生命的高钙血症、脊髓压迫引起的神经症状，严重 影响患者的生存质量，同时也是导致死亡的重要因素。 肿瘤的转移是多个因素共同作用的结果，这些环节包 括肿瘤细胞间失去黏附能力、肿瘤细胞对基底组织的 侵袭和进入特定组织的归巢能力；肿瘤细胞还通过对 骨微环境的影响而产生成骨性和破骨性骨损伤。因此 对转移性骨肿瘤发生机制的认识就显得十分重要，有 可能为癌症骨转移的预防和治疗提供新的思路。 １肿瘤骨转移和骨微环境 肿瘤骨转移可以分为两种典型类型：溶骨型和成 骨型。绝大多数转移性骨肿瘤是两种类型的混合。乳 腺癌骨转移患者中８０％以上以溶骨病损为主旧Ｊ。在 溶骨性改变的同时存在继发性新生骨形成，为以后的 成骨提供了必要的空间、营养物质和钙离子。前列腺 癌骨转移病损绝大部分为成骨型，但在成骨性病灶中 骨吸收反应同样存在，只是由于骨塑形过程中成骨性 病变占主导地位，而最终导致骨硬化。无论那种骨性 改变引起严重并发症均增加了疾病的病死率，降低了
尖锐湿疣皮损中Smad7、Smurf1和Smurf2的表达及意义
５７２
１必皮肤科杂奎２塑墨生塑鲞笙！塑』Ｃｌｉｎ Ｄｅｎｎａｔ虫Ｓ＿ｅｐｔｅｍｂｅｒ ２塑８：ｙ竺！：坦，Ｎｏ．９
立即置于１０％甲醛磷酸缓冲液（ｐＢｓ）中固定，按组织病理技术 常规行脱水、透明并行石蜡包埋。 １．２．２免疫组化染色４ Ｉｘｍ厚石蜡切片按常规脱蜡至水，经柠 檬酸钠抗原修复液微波热修复７～１０ ｍｉｎ后，以新鲜配置的３％ 过氧化氢溶液与尤水甲醇的混合液３７ ｃｃ孵育１０ ｒａｉｎ以阻断内 源性过氧化物酶的活性，加用０．３％Ｔｒｉｔｏｎ ｘ一１００孵育２０ ｍｉｎ以 增加膜通透性．再加用正常山羊血清３７℃孵育２０ ｍｉｎ。根据 ＥｌｉＶｉｓｉｏｎｏ“ｐｌｕｓ免疫组化试剂盒常规进行免疫组化染色。抗 Ｓｍａｄ ７、抗Ｓｍｕｆｆ １和抗Ｓｍｕｆｆ２抗体的Ｔ作浓度均为ｌ：５０。另 用ＰＢＳ代替一抗作阴性对照。 １．２．３图像分析将免疫组化染色结果行显微照相后．应用图 像分析软件对照片中表皮的免疫组化染色情况进行分析，以测 定阳性表达区域的灰度值表示免疫组化染色强度。该软件设 定．平均灰度值越高，表明切片上阳性反应的着色越淡；而平均 灰度值越低，则表明切片ｆ：阳性反应着色越深。该图像分析系 统具有定位准确、敏感度高、客观性和实用性强的特点。 １．３统计学方法
Ｓｍｕｆｆｌ在尖锐湿疣表皮中的表达显著高于正常对照皮肤的表皮（Ｅｌｉ＼’ｉｓｉｏｎ“ｐｌｕ、法ｘ１００） 图２ Ｓｍｕｒｆｌ在正常对照皮肤（Ａ）和尖锐湿疣皮损中（Ｂ）的表达
川芎嗪抑制肝纤维化作用机制的研究进展
原激活蛋白激酶（ＭＡＰＫ）；③ＥＣＭ、整合素及ＥＣＭ／整 合素／ＦＡＫ通路等。同一种细胞因子可以激活多条信
号通路；同一条传导通路也可以被多种细胞因子激 活。川芎嗪对以上３条信号通路都有比较明显的抑 制作用。 ２．１对主要信号通路的影响
用，结果表明川芎嗪可诱导大鼠活化ＨＳＣｓ凋亡；经川
芎嗪处理的ＨＳＣｓ，其金属蛋白酶组织抑制剂（ｔｉｓｓｕｅ
ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｍａｔｒｉｘ
ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ，ＴＩＭＰｓ）ｍＲＮＡ
表达减少；同时ｃａｓｐａｓｅ一３活性明显增高，提示川芎
嗪可能通过ｃａｓｐａｓｅ一３和ＴＩＭＰｓ发挥作用。
抑制ＨＳＣｓ的增殖和活化，是治疗和改善肝纤维化的
关键途径。 ＨＳＣｓ的增殖和活化受到多种细胞因子及细胞内 多种信号转导通路网络的调控。目前研究较多的信
从而阻断ＮＦ—ＫＢ信号通路，阻断下游的结缔组织生
长因子（ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅ
ｔｉｓｓｕｅ ｇｒｏｗｔｈ
ｆａｃｔｏｒ，ＣＥＣＴ）的表达，
最终达到减少ＥＣＭ合成的目的¨０｜。 对整合素／ＦＡＫ信号通路的影响 （ｆｏｃａｌ
川芎嗪除了对以上３条信号通路具有良好的改 善作用；还对其他的信号通路及其细胞因子均有不同
程度的抑制ＨＳＣｓ活化的作用。 ２．２对瘦素的影响 瘦素（１ｅｐｔｉｎ）是一种新发现的细胞因子，最新的
原基因表达。在ＴＧＦ—ｐ的信号传导中，Ｓｍａｄ４起着
关键性的作用口Ｊ，Ｓｍａｄ４属于受体依赖性Ｓｍａｄ，与受
体的复合物结合并发生磷酸化，向细胞核内转移，发
细胞内ｃａ２＋作为一种重要的第二信使，在细胞的
肝星状细胞活化相关信号通路的研究进展
•综述. doi:10.3969/j.issn.1005-0264.2019.04.036肝星状细胞活化相关信号通路的研究进展*马会会夏超明A苏州大学医学部病原生物学系（江苏苏州,215123）关键词肝星状细胞;活化;信号通路;肝纤维化肝纤维化是以细胞外基质（ECM）网络聚集为特征的一种动态过程，可因为各种不同的病因而导致慢性肝损伤,包括病毒感染，酒精性肝病以及非酒精性脂肪性肝炎B o肝纤维化实质是肝脏对各种损伤所产生的一种修复反应，其特征是ECM合成大于降解,在肝脏内过度沉积。
肝星状细胞（HSCs）是肝纤维化的细胞学基础,是肝纤维化的主要效应细胞,其活化是肝纤维化形成的开端⑵。
HSCs活化受多种细胞信号分子和胞内信号通路的调控，研究作用于这些信号转导过程或阻断这些信号转导级联反应的作用靶点,将成为防治肝纤维化的重要策略。
1HSCs的起源与活化1.1HSCs的功能19世纪70年代,HSCs首次被von Kupffer 发现并命名为贮存维生素A的细胞。
随着医学的不断发展，又被命名为贮脂细胞和肝窦周细胞。
直到20世纪80年代作为产生ECM的主要细胞被发现并命名。
以往的研究认为HSCs起源于神经外胚层,但近年来的研究发现HSCs起源于中胚层，且表达多能间充质祖细胞分化而来的神经细胞和其他间充质细胞⑶，认为HSCs起源于中胚层多能间充质祖细胞。
HSCs属于肝脏间质细胞，在正常情况下处于静止状态，位于窦间隙Disse 腔内，紧贴着肝窦内皮细胞和肝细胞，其数量占肝脏细胞总数的5%~8%,约占肝间质细胞的1/3叫1.2HSCs的活化HSCs活化是以一系列形态和功能改变为特征的复杂过程。
在各种肝损伤因素刺激下，处于静止状态的HSCs发生表型改变，维生素A丢失，转变为具有发达高尔基体和粗面内质网，并具有增殖性、收缩性和成纤维性的肌成纤维样细胞（MFBs）表型，即活化的HSCs o MFBs在损伤部位增殖、迁移和收缩，表达各种信号转导蛋白，大量合成以I型和DI型胶原为主的ECM并沉积在肝脏，最终导致肝纤维化的形成⑸o 众多研究证实,MFBs是导致肝纤维化发生、发展的主要细胞。
角质细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立-毛春明
皮肤是人体最大的器官, 它将人体内部与外界 隔开, 阻挡异物和细菌侵入, 防止体液丢失, 保持人 体内部环境稳定, 不受外界干扰, 是机体保护内部组 织免受外来伤害的第一道屏障。同时, 它还兼具调
节体温、感受外界刺激以及排泄等功能, 是机体重要 的器官之一。
在皮肤组织中特别是表皮层中的主要细胞成分 是角质细胞。由于所担负的功能不同, 角质细胞衍
角质素 5 是皮肤表皮层的角质细胞表达的一种 角质素, 它的缺失会导致皮肤基底细胞与旧基底膜 分离, 形成大疱[4] 。有研究证明, 角质素 5 具有在角 质细胞中特异表达的性质[ 5] , 是角质细胞的分子标 记物[ 6] , 在其他类型的组织和细胞中不表达。本研 究选用角质素 5( K5 ) 基因启动 子[ 7] , 用它指导 Cre 重组酶基因在角质细胞中表达, 并通过显微注射的 方法获得皮肤角质细胞特异性表达 Cre 重组酶的转 基因小鼠, 为应用 CrePloxP 系统研究目的基 因在皮 肤的发生、发育等生理和病理过程的功能创造条件。
PCR 产物的回收、DNA 的连接、转化、感受态大 肠杆菌的制备、质粒 DNA 的提取、DNA 片段的回收 等操作均按参考文献[ 10] 进行。
1. 3 受精卵的显微注射
回收并纯化注射片段, 按常规进行显微注射和 受精卵移植[ 11] 。实验 用昆明白小鼠由军事医学科 学院实验动物中心提供。
1. 4 转基因小鼠的基因型鉴定
( Genetic Laboratory of Devel opment and Diseases, Institute of Biotechnology , Academy of Military Medical Sci ences , Beijing 100071, China)
骨形态发生蛋白及信号分子与中枢神经系统早期发育
3 B P 及受体在中 M 4 枢神经系统中的表达
BMP4在组织、 器官发育过程中广泛表达， 通过调节细胞增 殖、 分化和凋亡等， 对胚胎发育、 组织器官的形成起着重要作用。 在鼠的研究中发现 ， BMP4是中胚层形成的必须蛋白， 它最早表 达于孕6. 5天， 与原肠胚形成时间相近。 后来又发现孕7. 5天时， BMP4在尿囊、 羊膜及胚线中有广泛表达， 而且这一阶段BMP4 的表达被局限于外胚层组织中。 而在孕8. 5一. 5天神经管区， 9 主 要是后部中胚层及中脑形成区可观察到BMP4表达水平非常高，
〔 关键词〕 骨形态发生蛋白: 信号转导: 中枢神经系统
骨形态发生蛋白(b n mo印1 o e 1ogenetic proteills， BMPs)属 于转化生长因子p 超家族成员， 近年来研究发现其在除骨之Байду номын сангаас的
其他组织内也发挥作用， 通过广泛多样的基因活性 ， 控制着胚胎 发育、 器官形成等生命活动I 。 J I 本文主要对 BMPS信号通路及相 关分子在中枢神经系统早期发育中的作用作一综述。
导致发育及生命的终止l o l e 原位杂交实验检测到，发育中的神经系统同样广泛表达 BMP 受体， BMPRIA 受体几乎表达于神经板的所有细胞， 包括
前后神经板以及神经板的背侧和腹侧区域。 基因突变实验发现， 当BMPRIA 或BMPRI 任一基因发生突变时 ， B Samd l 的磷酸化 水平未发生明显改变， 而当两个基因同时发生突变时， 在背侧神 经管处几乎检测不到磷酸化的Sallld l ， 提示两种工 型受体对背侧 神经管的发育起着重要作用1’ 1] o
* (国家自然科学基金资助项 目: 30572213 )
4 B P4信号在中枢神经系统发育中的作用 M
表皮干细胞用于瘢痕治疗的研究进展
在毛囊增殖周期ｔｌ，．处于真皮中的ＢＭＰ２、ＢＭＰ４也随之 发生周期性改变．在毛囊的退行期ＢＭＰ２、ＢＭＰ４呈高表达。 在毛囊周期的恒定增殖期却处于低表达水平．这正好与Ｗｎｔ／ ［８－－ｃａｔｉｎｅｎ在毛囊周期中相同时期的表达相反。ＢＭＰ在毛囊干 细胞周围的稳定表达可维持毛囊干细胞的静息状态，阻Ｉ卜了毛 囊下细胞的激活，却可以促进毛囊角质细胞的进一步分化而促 使毛囊分化成熟１５７Ｉ。Ｓｍａｄ４丰要通过激活细胞凋亡通路来维持 ＴＧＦ信号诱导毛囊进入退行期，ＢＭＰ和Ｗｎｔ，Ｂ－ｃａｔｉｎｅｎ两条信 号通路相互制衡以调节毛囊干细胞毛囊周期和表皮再牛。 １．４ Ｎｏｔｃｈ信号通路
·３５２·
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｉｓｓｕｅ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ａｎｄ Ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｖｅ Ｓｕｒｇｅｒｙ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ ２００９，Ｖ０１．５ Ｎｏ．６
【英文课件-病理生理学】_信号转导异常与疾病Signal Transduction
Cytokine Receptors
Each cytokine/hematopoietic receptor is a composite of structurally distinct protein domains. Members of this receptor family contain one, two, or even three polypeptides. The transmembrane domain consists of a single alpha helix of about 20 amino acids. Ligand binding occurs at a domain near the transmembrane domain
Adenylate cyclase mediated pathway Phospholipase mediated pathway Small G-protein-mediated pathway
Ligands Receptors G-proteins Enzymes Second messengers Kinases Enzymes or functional proteins Biological effects
Gq/11
3rd messenger
Non-G-protein-mediated pathway
Receptor tyrosine kinase mediated pathway Receptor serine/threonine kinase mediated pathway Intracellular (nuclear) receptor mediated pathway
中药防治糖尿病肾病作用机制的研究进展
８．张新雪，李杨，赵宗江，等．海昆肾喜对糖尿病肾病大鼠肾脏 保护作用及其对肾组织ＣＴＧＦ蛋白表达的影响．中华中医药 杂志，２００８，２３（６）：４９０—４９３． ９．吴泽成，刘慎微，董骏武，等．１２一脂氧合酶抑制剂黄芩索对２ 型糖尿病大鼠肾脏细胞外基质的影响及机制．中国中西医结 合肾病杂志，２００９，１０（２）：１１６～１１９． １０．刘慰华，黄河清，邓艳辉，等．黄连素对糖尿病肾损伤大鼠。肾 功能、氧化应激、肾脏醛糖还原酶的影响．中国药理学通报，
・６５５・
１．张浩军，李平，赵静波，等．糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾组织 ＴＧＦ－ｐｌ及ＭＭＰ一９表达的影响．中国中西医结合肾病杂 志，２００９，１０（４）：２９０—２９４． ２．倪海祥，杨雪辉，朱峰，等．人参皂苷对糖尿病大鼠肾组织基 质金属蛋白酶２表达的影响．中国中西医结合肾病杂志， ２００９，１０（３）：２１１—２１３． ３．ＪｉＬ，ＹｉｎＸＸ，ＷｕＺＭ，ｅｔ ａ１．Ｇｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａ
节ＴＧＦ一８惭ａｄｓ信号传导系统：王月华等【ｌｌ Ｊ研究表明，益气养
阴消瘸通络中药（由黄芪、地龙、丹参、大黄等组成）能够减轻ＤＮ 大鼠病理损害，这一作用的实现可能是部分通过ｑＶ，Ｆ一口／Ｓｍａｄｓ 信号传导途径实现的，即降低受体激活型Ｓｍａｄ表达，上调抑制 型Ｓｍａｄ７表达。 ５抗炎 ５．１下调肾组织单核细胞趋化蛋白一１（ＭＣＰ一１）的表达 研究表明，Ｅ（１Ｍ的聚集与。肾组织内单核细胞的广泛浸润有 关，而ＭＣＰ一１是单核巨噬细胞特异性的趋化因子，它可以趋 化和激活单核细胞至炎症部位，启动炎症反应，因而通过干预 ＭＣＰ一１，能够起到治疗或延缓ＤＮ的作用【１２ Ｊ。赵宗江等【１２ Ｊ研 究表明，糖肾平胶囊可能通过下调ＤＮ大鼠肾组织ＭＣＰ一１蛋 白及ｍＲＮＡ表达而发挥治疗和预防ＤＮ的作用。 ５．２抑制核转录因子～出（ＮＦ一出）或黏附分子表达 近年来，ＤＭ。肾脏病变被视为是一种由代谢紊乱引起的炎症性 疾病。ＮＦ一出是炎症的中心调控因子，其激活后进入细胞核 内调节多种生长因子、趋化因子、黏附分子、细胞因子等的表 达【１３｜。因此，抑制ＮＦ一出或黏附分子表达，可起到保护ＤＭ 或ＤＮ肾脏的作用。杨莉等【１３Ｊ研究表明，０５７２２９２）；山西省自然基金资助项目（Ｎｏ．２００６０１１ｌｏｏ） 医药大学２００８级博士生，现工作于湖北中医药大学 （北京 ｌｏ００２９） 医学院（太原０３００２４） 医药大学（北京１０００２９）
肾小管上皮细胞表型转化与糖尿病肾病
国隧囱坌塑垡遨苤查２堂生！旦箜堑鲞筮！塑丛婴』丛曼！丛丛堂！趔！堂：巡堑！№：璺肾小管上皮细胞表型转化与糖尿病肾病李能娟李红【摘要】肾小管病变及肾问质纤维化在糖尿病肾病中的重要作用逐渐被认识，其中肾小管上皮细胞向间充质细胞转化（ＥＭＴ）可能是其发挥作用的关键环节，与肾间质纤维化的程度相平行。
在糖尿病肾病中引发ＥＭＴ的因素主要有高血糖、晚期糖基化终末产物、蛋白尿、血管紧张素Ⅱ、结缔组织生长因子等。
【关键词】糖尿病。
肾病；上皮细胞向间充质细胞转化；肾间质纤维化Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ－ｔｏ－ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎａｎｄｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙⅡⅣｅ略扣ｎ，１１舶愕．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥｎ—ｄｏｃｎ加ｌｏｇｙ，ＴｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅＣｏｌｌｅｇｅ，ＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１０００３，Ｃｈ／ｎａ【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｒｅ耐ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌｆｉｂｒｏｓｉｓｐｌａｙｓｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ，ａｎｄｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ－ｔｏ－ｍｅ￥一ｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ（ＥＭＴ）ｍａｙｂｅｔｈｅｋｅｙｓｔｅｐ．Ｈｙｐｅｒｇｌｙｃｅｍｉａ，ａｄｖａｎｃｅｄｇｌｙｃａｆｉｏｎｅｎｄｐｒｏｄｕｃｔｓ（ＡＧＥｓ），ａｎ·ｇｉｏｔｅｎｓｉｎ１Ｉ，ａｌｂｕｍｉｎｕｒｉａ，ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅｔｉｓｓｕｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒａｎｄｏｎ，ｍａｙｔｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆＥＭＴｉｎｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ．【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ；Ｅｐｉｔｈｅｆｉａｌ－ｔｏ－ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ；Ｒｅｎａｌｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌｆｉｂｒｏｓｉｓ（ＩｎｔｅｒｎＪＥｎｄｏｃｎｎｏＺＭｅｔａｂ，２００６，２６：２７７—２７９）糖尿病肾病（ＤＮ）是糖尿病最为常见的慢性微血管并发症之一。
四肽AcSDKP在抗器官纤维化中的研究进展
Ｉ识别形成复合物。期间Ｔ１３ ＲＩＩ发生
Ｒ
自体磷酸化，继而磷酸化Ｔ１８
Ｉ的ＧＳ结构域，从而激活
ＴＢＲ Ｉ的丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶活性。活化的ＴＢ Ｒ Ｉ再进
一步特异性地识别并结合下游的Ｓｍａｄ２或Ｓｍａｄ３，磷酸化其 ＳＳＸＳ结构区，使Ｍｉｌｌ区和ＭＨ２区间的抑制作用解除。磷酸化 的Ｓｍａｄ２或Ｓｍａｄ３与ＴＢ
ｈｙｐｅｒｐｉｇｍｅｎｔａｆｉｏｎ ｆｏｒ ｍｅｌａｓｍａ：Ａ ｓｈｏｒｔ Ｔｈｅｒ２００８，３０：１－３．
察【Ｊ】．中国美容整形外科杂志，２００８，１９（２）：１０６－１１０． 【１７】朱铁军。赵广，张书元，等．色素性皮肤病【Ｍ】．北京：北京医科大 学、中国协和医科大学联合出版社。１９９６：９０．９２． 【１８】丁徐安，袁定芬．光学治疗黄褐斑的研究进展【Ｊ】．临床应用激光，
【１５】周继刚，汪植，潘智明，等．祛斑胶囊治疗黄褐斑的ｌ临床研究们． 中国中医基础医学杂志，２００６，１２（１）：７２． 【１６】吴溯帆，石杭燕，陈永，等．Ｅｌ服氨甲环酸治疗黄褐斑的临床观 ［收稿日期］２００９－０３．１０［修回日期］２００９－０５．１６ 编辑／李阳利
四肽ＡｃＳＤＫＰ在抗器官纤维化中的研究进展
Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ａｎｆｉｆｉｂｒｏｆｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｅｔｒａｐｅｐｔｉｄｅ ＡｃＳＤＫＰ
邓智明综述，杨松林审校
（上海市第六人民医院整形外科上海２００２３３）
器官纤维化的主要特征是细胞外基质的过度沉积和结 构异常，控制细胞外基质的过度沉积理应是抗器官纤维化的 主要途径。而细胞外基质的主要成分是胶原蛋白，所以，胶原 蛋白代谢的控制，遂成为控制细胞外，如转化生长因子 一Ｂ（ＴＧＦ—Ｂ）、结缔组织生长因子（ＣＴＧＦ）、血小板源性生长因 子（ＰＤＧＦ）、Ｙ一干扰素（ＩＮＦ—Ｙ）、肿瘤坏死因子一０（ＴＮＦ—Ｑ） 等参与器官纤维化过程，这些细胞因子的调节作用，相互交 联成网络，共同调控细胞胶原的合成与分泌，调节细胞外基 质的生成与降解。然而目前的研究成果还远远不能完全解释 纤维化的调控机制。Ｆｒｉｎｄｅｌ等于１９７７年首次从胎牛骨髓中 提取的一种四肽卜乙酰基一丝氨酰一天冬氨酰一赖氨酰一 脯氨酸＠ｃＳＤｌ（Ｐ），最初发现其对造血功能具有调节作用，进 一步的研究发现，ＡｃＳＤＫ在调节胶原的合成与代谢方面也发 挥着重要作用，也被认为是一种多功能生理调节因子，对抗 器官纤维化有着潜在的临床应用价值。本文就ＡｃＳＤＫＰ抗器 官纤维化的机制作一简要综述。
大黄对微生物的作用
大黄对微生物的作用【摘要】目的：探讨大黄对细菌的抑制作用。
包括:实验内容简介，实验结果以及机制等。
大黄的化学成分：包括蒽醌类,双蒽醌类,苯丁酮类,苷类,鞣质以及多糖类,有机酸和挥发油等。
其中蒽醌类衍生物是最重要的化学成分,占大黄成分3%~5%。
蒽醌类衍生物以结合状态为主,游离状态仅占小部分,二者之比为2~10:1。
游离型蒽醌类衍生物有大磺酸,大黄素,大黄酚,芦荟大黄素,大黄素甲醚等,该类化合物一般不具致泻作用。
结合型蒽醌类衍生物大黄素甲醚葡萄糖苷,大黄素葡萄糖苷,大黄酚葡萄糖苷等单糖苷有一定致泻作用。
双蒽酮类中的番泻苷有较强的致泻作用。
1.大黄对肠原性感染致早期肺损伤治及防止细菌移位(1)实验内容简介：130只SD大鼠随机分为感染组(48只),治疗组(48只)和对照组(36只),各组又分为6小组。
通过采用大鼠盲肠结扎并穿孔造成腹腔感染，对治疗组的小鼠每日在麻醉下经胃管灌注大黄一次。
分别在术后0,24,48,72,96和120h处死一小组大鼠。
(2)实验结果及机制:a.肺毛细血管通透性,肺湿/干质量比值及BALF的中性粒细胞百分率,肺组织的TNF-a 均较未经治疗的感染组增加减少,减慢。
机制:大黄可保护细胞膜,稳定肺毛细血管内皮细胞和肺泡上皮细胞,降低肺毛细血管通透性,减轻肺水肿;抑制炎性介质产生,组织中性粒细胞被激活,从而阻断炎性介质-中性粒细胞间的恶性循环。
b.肺组织的内毒素减少。
机制:大黄能活血化瘀,改善微循环,清除肠道内细菌及其毒素;同时增加肠蠕动,下泻通便,促进新陈代谢。
大黄保护胃肠黏膜屏障和防治细菌移位的作用机制可能与下列因素有关:1.内毒素引起的平均动脉压下降导致肠黏膜低灌流，引起肠黏膜损伤，充血，水肿及肠壁血管通透性增强，导致肠黏道细菌移位。
大黄可促进肠蠕动，清除肠黏道内细菌和内毒素，减轻内毒素对机体的损害，并维持平均动脉压，减轻肠壁血管通透性，改善肠道的病理损伤。
2.抑制细菌繁殖，保持肠道菌群的微生态平衡，改善肠道黏膜的血液灌流，降低血管通透性，缓解其缺血，缺氧状态。
SMAD3蛋白在肝纤维化中的作用研究进展
ｐｒｏｔｅｉｎ
ａｎｄ
１０
Ｃｈｅｎ
ＭＴ，Ｂｉｌｌａｕｄ ＪＮ，Ｓａｌｌｂｅｒｇ Ｍ。ｅｔ ａ１．Ａ ｆｕｎｃｔｉｏｎ
Ｂ ｖｉｒｕｓ ｐｒｅｃｏｒｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｓ ａｎｔｉｇｅｎ．Ｐｒｏｃ
ｔｈｉｂｉｔ
ＵＶ－ＤＤＢｌ
ｂｉｎｄｉｎｇ
ｈｅｐａｔｉｔｉｓ
ｔＯ
ｒｅｇｕｌａｔｅ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ
ｉｎ Ｂ ｖｉｒｕｓ
ｃｏｒｅ
ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ：ＷＪＧ，２００７，１３（１）：８２—９０． （收稿日期：２００９－０９－０４） （本文编辑：赖荣陶）
Ｃｈａｎ
ＨＬ，Ｈｕｓｓａｉｎ Ｍ，Ｌｏｋ ＡＳ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ａｒｅ
ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ
ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ
ｐｒｅｃｏｒｅ ｒｅｇｉｏｎｓ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｄｕｒｉｎｇ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ
ｔｈｅ
ｅ
ｐｒｏｍｏｔｅｒ
ａｎｄ
Ｂ
ａｎｔｉｇｅｎ
ＳＭＡＤ３蛋白在肝纤维化中的作用研究进展
邢欣悦
陈鹏
郑素军段钟平
肝纤维化是多种原因引起慢性肝损伤的共同病理改变，是 诸多慢性肝病向肝硬化发展的必经病理阶段。肝纤维化的机 制为细胞外基质（ＥＣＭ）的合成与降解失调，病理特征为胶原纤 维生成及大量ＥＣＭ在ｄｉｓｓｅ间隙沉积［１］。ＥＣＭ的合成和降解 过程很大程度上由转化生长因子ｐ（ＴＧＦ．ｐ）控制，它可与肝星 状细胞（ＨＳＣ）表面的受体结合，通过激活Ｓｍａｄ通路，促进胶 原等ＥＣＭ的合成和分泌［２】。近年研究表明，Ｓｍａｄ３蛋白与肝 纤维化关系最为密切而且重要。
ＴＧＦ－Ｉ］Ｉ增加，ＨＳＣ亦可自分泌、旁分泌ＴＧＦ－ｐＩ，并产生自我 增殖的循环过程，而炎症或损伤过程中释放的纤溶酶或其他蛋 白酶可进一步增强ＴＧＦ－１３１的活性‘“。ＴＧＦ－１３在胞内近膜区 有一个高度保守的丝氨酸ＴＧＦ－１３受体（ＴＧＦ－ｐｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＴｐＲ）・ 分为Ｉ，Ⅱ型和Ⅲ型。Ｉ和Ⅱ型受体是ＴＧＦ－ｐ信号通路必需 的。ＴｆｌＲ Ｉ胞内近膜区有一个高度保守的丝氨酸（Ｓｅｒ）一甘氨酸
肝纤维化发生过程中的信号传导通路
肝纤维化发生过程中的信号传导通路166ChineseHepatology.Apr.2008,V ol13.No.2肝纤维化发生过程中的信号传导通路吴文娟杨妙芳朱人敏肝纤维化(HF)发生过程中,各种原因导致的肝实质细胞损伤是肝星状细胞(HSCs)激活的始动因素,再经一系列细胞因子的调控活化,如转化生长因子8(TGF-~),血小板衍化生长因子(PDGF),内皮素(ET),成纤维细胞生长因子(FGF),结缔组织生长因子(cTGF),瘦素(1eptin)等.这些细胞因子均通过相应的信号传导通路作用于靶细胞,产生生物应答.一,Smads信号通路Smads蛋白是TGF-~31由膜受体到核内目标共同信号转导途径的中心环节,是TGF-~31受体后信息分子,参与调控细胞的增殖,转化,合成,分泌与凋亡.Smads至少有8个成员,即Smadl～8,根据其功能分为3类:(1)膜受体激活Smad(R-Smad),有Smad1,2,3,5,8;(2)通用型Smad(cc~Smad),只有Smad4,可与其他Smad结合形成稳定的异源多聚体,转位入胞核调节靶基因转录;(3)抑制性Smad(FSmad),有Smad6,7,可与R-Smad竞争性结合受体,阻止R-Smads磷酸化或抑制Smad多聚体形成阻断TGF-~3信号.只有R-Smad能被TGF-~31I型受体直接磷酸化激活.Smad2,3转导TGF-~3信号,Smadl,5,8转导BMP信号,Smad6抑制BMP信号转导,Smad7则对TGF-~3与BMP信号转导有抑制作用.哺乳动物TGF-~3共有3种:TGF-~31,2,3,肝脏含量最高且具有生物活性的是TGF-~31.与TGF-~31有高亲和力的受体有I,II,Ⅲ型3种受体,其中I,II型均为受体丝氨酸/苏氨酸(Ser/ Thr)激酶,二者形成异源二聚体,直接参与TGF-~31的信号传导,Ⅲ型只对I,Ⅱ型受体与TGF-~3的结合起调节作用.I,II型受体参与信号传导的过程是配体与II型受体(T~RII)胞外端结合,并激活T8RII磷酸化激酶,TpRI识别此复合物并与之结合,又被T8RII磷酸化激酶磷酸化激活,并将信号向细胞内转导.Smad2,Smad3与活化的T8RI短暂结合直接磷酸化,并与Smad4聚集成复合物进入胞核,再与核内特定的DNA序列(称Smad结合元件,SBEs)结合,调控靶基因表达,产生生物活性.Smads与肝纤维化形成密切相关,Schnabl等[1向敲除Smad3基因的鼠胃内注射四氯化碳,72h后发现a1胶原,a2胶原蛋白分别增加42,64,进一步研究发现野生鼠HSC产生al胶原mRNA水平较Smad3基因敲除鼠HSC增加73, a—SMA表达无变化,且发现Smad3基因敲除鼠HSC内不能形成TGF-~3诱导的Smad与DNA形成的复合物,活化的HSC要产生最大效应的胶原合成必须有Smad3参与,HSC活化与Smad3无关,但增殖与Smad3有关.Smads在肝损伤的不同时期有不同效应,急性肝损伤TGF_8/TGF_pR诱导Smad2磷酸化和PAI转录增加,随后Smad7亦被磷酸化,负性调节作者单位:210002南京军区南京总医院消化内科综述?Smad2的活性,使HSC内TGF-~3/Smad信号传导通路正负调节成平衡状态在慢性肝损伤过程中,HSC被活化,Smad2持续磷酸化,而Smad7不再被磷酸化,结果Smad2持续活化且不被Smad7抑制,Smad2信号下传致胶原蛋白基因大量转录,这一机制可能参与慢性肝损伤过程中HF的形成.应用Smad2,3,4反义寡聚核苷酸或cDNA可有效抑制TG的生物学功能.将Smad7RNA注射入非洲蟾蛛胚胎,其活动素与TGF-~3的效应均阻断.研究证实,Smad7的过度表达可有效抑制TGF-~3诱导HSC激活和HF的进展[3].Weng等研究发现,干扰素Y可激活STAT1磷酸化,增加Smad7的表达,降低Smad2/Smad3表达从而抑制TGF-~3信号通路引起HF. Gnainsky等b]研究发现溴氯哌喹酮可通过抑制TGF-~3介导的Smad3磷酸化抑制HF的发生,发展.二,丝裂原激活蛋白激酶通路丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)均属Ser/Thr蛋白激酶家族,目前已发现真核细胞内MAPK成员有二十余种,其中主要成员有3个:细胞外信号调节激酶(ERK),c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p38.MAPK可易位至胞核并激活转录因子的蛋白激酶,成为多种信号途径的汇聚点,MAPK信号通路的激活有促HF作用.(一)Ras/ERK通路Ras是相对分子质量为21000的小G蛋白,具有内源性GTP酶活性,可催化GTP分解为GDP,并将胞外信号传递至胞内.Raf是一种MAPK激酶,有3种同工酶:A-Raf,Raf和Rail,其作用是磷酸化激活下游底物MAPK激酶(MAPKK).MAPKK具有磷酸化酪氨酸/苏氨酸残基的双特异功能,MEK能磷酸化并激活下游底物(ERK1/ ERK2).当细胞外信号分子,如生长因子(GF),激素和胁迫条件如紫外线照射,高渗等,通过一系列上游信号传递激活Ras 后,经Ras-Raf—MEK-ERK通路活化ERK,活化的ERK从细胞质进入细胞核.在胞核内,ERK与主要的核靶转录因子ELK一1 结合,调节细胞生长和分化.ERK是HSC增殖的正性调节蛋白之一.PDGF是目前已知最强的促HSC增殖因子.各种肝损伤可致PDGF受体上调和PDGF分泌增加,活化的PDGF受体进一步引起信号分子Ras聚集.Ras与PDGF-R的胞内磷酸化区域结合使Ras磷酸化激活,Ras激活可引发ERK磷酸化级联反应.活化的ERK移入胞核,调节ELK一1,SAP等转录因子及c--los基因转录,并介导细胞周期蛋白(Cyclin)DE表达,促使HSC从G1期进入S期并增殖.用化学抑制剂PD98059抑制ERK的活性能阻止AP_1和STAT1DNA的结合,还可彻底阻止PDGF诱导的有丝分裂,并在一定程度上减少由PDGF诱导产生的趋化性.这些现象表明ERK在HSC 细胞增殖和迁移中起重要作用.Smart等[6最近研究表明, ERK1/2通过激活JunD增加活化HSC中TIMP1的表达,从而抑制胶原降解,促进HF发生.肝脏2008年4月第13卷第2期(二)p38通路p38蛋白激酶是酪氨酸磷酸化蛋白激酶,也是控制炎症反应最主要的MAPK家族成员之一.p38通路的关键酶包括MAPKK类MKK3,MKK6和MAPKKK类的TAK,ASK,NLK.在各种细胞外刺激包括应激(紫外线,热休克,渗透压休克,内毒素),细胞因子如白细胞介素一1(I1),肿瘤坏死因子(TNF)和G蛋白偶联受体等的激活下,相继磷酸化激活TAK/ASK/NLK,MKK3/MKK6,p38三肽基区的Thr,Tyr被双磷酸化而被激活.激活的p38可磷酸化转录因子ATF-2,Elk一1,导致转录活性升高,p38尚可磷酸化活化MAPK激活蛋白激酶2～3(MAPKAPK2,3),进而磷酸化低分子热休克蛋白(sHSP).p38主要在细胞凋亡和细胞因子表达中起重要作用.研究表明p38特异性抑制剂SB203580在其他类型的细胞中可增强cyclin-D1的转录和蛋白表达,在HSC 中SB203580可通过抑制cyclinD1对细胞生长周期产生抑制作用,促进HSC增殖,提示p38的激活可抑制HSC增殖.p38MAPK信号通路还可通过TGF-~I诱导激活促进I型胶原基因表达.实验证明DLPC(一种大豆提取物)可通过抑制肝脏HSC上的TGF[3/p38MAPK通路减少TGF-~诱导的I型胶原mRNA表达,可能和降低氧张力,阻断H0依赖的p38MAPK通路有关.(三)c-Jun氨基末端激酶(JNK)/应激激活蛋白激活酶(SAPK)通路JNK/SAPK信号通路的激活途径与p38信号通路的激活途径相似,多因应激如细胞因子,紫外线照射,射线和活性氧等激活MAPKKK,并相继激活MAPKK和JNK.不同的是JNK受上游信号激酶MKK4和MKK7的调节将信号传递给下游AP-1组件e-Jun和激活转录因子-2(ATF-2)等转录因子,调节细胞凋亡和细胞因子表达.JNK也是HSC细胞增殖的一个正性调节蛋白.在静息的HSC或培养激活的HSC中,阻断JNK的活性可阻止HSC增殖并抑制a(2)一I胶原表达.最近Matsuzaki等[9研究发现炎症介质IL-1激活JNK激酶,进一步磷酸化Smad3,促进ECM沉积,并增加纤溶酶原活化抑制剂1 (PAI-1)的表达,抑制胶原降解,促进HF发生.三,PI_3K通路PI3K/AKT是胰岛素信号转导通路中的一条.磷酸化的胰岛素受体(IRS)作为一种船坞蛋白,能被胞浆内含有SHz结构域的蛋白识别结合,并将信息下传.该类蛋白有多种,磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)最重要.PDK是一个异源二聚体蛋白,有脂质和蛋白激酶活性,此激酶家族有多种类型,与PDGF信号转导相关的为PI3KA型.PI3K下游的信号分子为3一磷酸肌醇依赖的蛋白激酶(PDK)以及Akt,又称蛋白激酶B(PKB),被PI3K激活后继续激活其下游的信号分子P70S6K,参与细胞分化和代谢.PI-3K途径是另一条由PDGF激活的信号通路,PDK有促HF作用.研究报道PDGF通过黏着斑激酶(FAK)一PI3K —AKT—P70s6K诱导HSC增殖.FAK是黏着斑复合物的一种,可通过整合素作用于ECM蛋白.PDGF诱导HSC增殖是依靠细胞黏附和偶联于PDGF-!~R从而作用于FAK,而PDGF~-R又通过激活小G蛋白Ras作用于FAK.FAK的激活引起PDK激活,并诱导HSC增殖[8].用PDK的特殊抑制剂LY294002和渥曼青霉素可阻止PDGF诱导的有丝分裂和167趋化,这种抑制作用并不影响PDGF受体自磷酸化.FAK在PI3K和Akt的上游,也是PDGF诱导HSC增殖所必须.研究报道,用FAK的显性负相形式(Ad—FAKcD)阻断FAK活性将抑制PDGF诱导的PDK激活和HSC增殖,并可用于PDGF诱导HSC增殖的治疗[8].PDGF使p70S6K激活是通过Akt/ PDK1信号传导的丝氨酸和苏氨酸残基引起一系列复杂的磷酸化作用而被激活,这些位点的磷酸化作用可被渥曼青霉素, LY294002和雷帕霉素等抑制.雷帕霉素抑制p70S6K的激活是通过阻断哺乳动物靶基因雷帕霉素/FK506结合雷帕霉素相关蛋白(mTOR/FRAP)起作用.mTOR/FRAP是p70s6K上游的活化剂.雷帕霉素的抑制作用不能影响(a)I型胶原的mRNA表达,但可减少I型胶原蛋白的分泌.这种抑制作用既能阻断胰岛素样生长因子-1(IGF-1)诱导的DNA合成,也可阻断PDGF诱导的HSC增殖.p70s6K活性在HSC中被LY294002或雷帕霉素阻断时,细胞周期蛋白D1和D3磷酸化作用也被阻断,细胞周期蛋白D1和D3在其他类型细胞的增殖中起重要作用[9].虽然更远的下游信号通路未完全阐明,但FAK—PDK—Akt—p70s6K级联反应在调节HSC增殖中起重要作用.四,NF-KB信号通路NF-~B是由同二聚体或异二聚体的Rel蛋白家族(p65,p50,p52,c-Rel和RelB)组成的转录因子.典型的NF-~B是由P50和P652亚基组成的异二聚体.未活化的NF-~B存在于胞质中,与B抑制蛋白(I~Bs)结合形成三聚体,覆盖P50的核定位信号,当细胞受刺激(TNF,IL-1等)时,激活的APK或PKC使IBs磷酸化降解并从NF-~B复合物中解离,导致NF-~B活化并移位人核与DNA结合并启动靶基因转录.HF时NF_B促进各种细胞因子释放和炎症反应并激活HSC,控制肝细胞凋亡是肝纤维化的重要核转录因子.实验发现,静息状态下和新鲜分离的HSC核内缺乏NF-~B,而激活的HSC中出现了NF-~B的核转位活性,同时细胞间黏附分子(ICAM一1),IL-6等基因表达表明NF-~B可参与HSC激活的调节.激活的HSC如何调节NF-~B活性达到高水平的作用机制目前仍不清楚,研究表明可能与IrB-a(NF-~B抑制剂)在胞浆和胞核表达的持久下降有关.激活的HSC表达一种高度磷酸化的IB和IrB-a竞争与NF_B的结合位点,使IrB-a的抑制作用减弱,从而使NF-~B维持在转录激活状态.当启动阶段的HSC受到细胞因子,有丝分裂原和CD40配体刺激后, NF-KB活性迅速升高,促使HSC中的NF-~B反应元件,如ICAM-1,环氧化酶2(COX2),II一6及IL-8等基因转录表达增强,其表达产物可触发或加剧肝脏炎症反应,并通过单核细胞趋化蛋白一1(MCP-1),自由基,TGF-[3等炎症介质进一步激活NF-B,促进HSC增生并维持其活化,使ECM生成不断增多, 最终形成HF.NF-~B还可促使库普弗细胞分泌大量炎症介质,参与肝脏炎症反应.近年众多研究发现NF-~B有抗凋亡作用.活化的NF-~B可通过抑制下游的c-Jun氨基端激酶(JNK)和~Junl/AP-1的激活而阻断TNF诱导的肝细胞凋亡.除抑制肝细胞凋亡外,Oakley等[10]研究发现IKBs可通过c-Jun氨基端激酶(JNK)途径抑制HSC的凋亡.最近,Dam—bach等"研究发现,NF-~B1(p50)可抑制HSC表达TNF-!~,168NF_B1(p50)对TNF_a等产生的炎症损伤有抑制作用,对肝有保护作用.Lv等2]研究发现镇静剂酞胺哌啶酮通过对IBs降解的抑制作用,减少了NF—B诱导的黏附分子表达和HSC的激活.这些都为HF的治疗提供了有效策略.五,PPAR途径过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)属I型核激素受体超家族成员,是调节脂肪细胞分化和能量代谢的关键转录因子, 分为PPARa,13,7.现在研究较多的是PPAR7.PPAR7的配体主要是天然配体和合成配体.天然配体主要包括花生四烯酸及其代谢产物,多不饱和脂肪酸氧化代谢产物和氧化型低密度脂蛋白等.合成配体主要包括治疗糖尿病的噻唑烷二酮类药物(TZDs)和一些非甾体类抗炎药如消炎痛,布洛芬等.其中TZDs上市的药物有3种:曲格列酮,吡格列酮和罗格列酮.PPAR7受体首先与配体结合被激活,然后与9一cis视黄酸x受体结合形成杂二聚体,再通过与特异性过氧化物增生反应元件(PPRE)作用,改变靶基因转录,调节脂肪代谢,细胞生长分化等.近年研究表明过氧化物酶体增殖物激活受体7(PPART)对HSC的激活起重要调节作用.人类和大鼠培养的有活性的HSCs中PPART的激活显着减少.15/XPGJ2和BRL49653(罗格列酮)研究显示在激活的HSCs中抑制DNA的合成,a—SMA和PDGF诱导HSCs迁移的表达被15/XPGJ2和TZD抑制.在HSCs中,胶原合成被15/XPGJ2抑制.研究证实HSC损伤时,PPAR7表达降低,引起一些关键基因活化,诱导HSC结构基因表达,引起表型改变,向活化型转化,从而使肝脏向纤维化发展.总之,PPAR7在HF的发展中起重要作用,同时PPART配体作为一种治疗策略将用于抑制HSCs的激活和HF的发生,发展.六,JAK/STAT通路JAK/STAT通路的激活是细胞因子与其受体结合后引起受体分子的二聚化,与受体偶联的Jak激酶相互接近并通过相互的Tyr磷酸化作用活化.活化的lak激酶催化受体本身的Tyr残基磷酸化并形成相应的STAT分子与受体复合物结合的"停泊位点",STAT通过其SH:结构域与受体上的磷酸Tyr 残基结合,并在Jak激酶作用下实现其c端Tyr残基磷酸化. 两个磷酸化的STAT分子利用SH:结构域的Arg与磷酸Tyr 之间的作用形成同/异二聚体并离开受体进入细胞核,与目的基因的启动子区域结合,再经某种修饰(如Ser的磷酸化)激活相应基因的转录和表达.细胞因子PDGF也能激活JAK(Janus激酶)/STAT(信号转导子和转录激活子)信号通路向细胞内传递信号,激活靶基因转录促使细胞生长和分裂.STAT在该信号通路中兼有信号转导分子和转录因子作用,是一条刺激靶基因转录的直接信息通路,可将PDGF信号从受体和JAK直接传递到胞核内.7 干扰素(IFN-7)对TGF-t~的拮抗也是通过JAKI—MAPK通路对sTA T的磷酸化实现的,激活的STA T-1进人细胞核内与Smad结合,抑制Smad3活性.Jeong等【1研究发现,激活STAT1可减弱HSC活化引起的HF,并抑制TGFI3一Smad通路,刺激自然杀伤细胞杀死活化的HSC,为临床治疗HF提供新的治疗策略.七,展望ChineseHepatology.Apr.2008,V ol13.No.2目前已明确HSC的激活是HF的始动环节,各种损伤导致的HF是一个多种细胞因子,多条信号传导通路参与的复杂病理过程.一种细胞因子可激活多条信号转导途径,而一条信号转导通路又可被多种细胞因子激活,不同途径之间存在多种交互联系,形成错综复杂的信号调节网络.因此,研究HF的发病机制,尤其是HF发生,发展过程抑制HSC的活化,增殖的PPAR途径和JAK/STA T通路,是研究HF治疗的主要方向.参考文献1SchnablB,KweonYO,FrederickJP,etaIITheroleofSmad3in mediatingmousehepaticstellatecellactivation.Hepatology,2001. 34:89—100.2TahashiY,MatsuzakiK,DateM.eta1.DifferentialregulationofTGF_ignalinhepaticstellatecellsbetweenacuteandchronicrat liverinjury.Hepatology,2002,35:49—61.3DooleyS.HamzaviJ.BreitkopfK,eta1.Gastroenterology,2(X)3,125 :178-191.4WengH,MertensPR,Gr~snerAM.eta1.IFN—gammaabrogates profibrogenicTGF_betasignalinginliverbytargetingexpressionofin—hibitoryandreceptorSmads.JHepatol,2007.46:295—303.5GnainskyY,KushnirskyZ,BiluG,eta1.Geneexpressionduring chemicallyinducedliverfibrosis:effectofhalofuginoneonTGF_ betasignaling.CellTissueRes.2007,328:153—166.6SmartDE,GreenK,OakleyF,eta1.JunDisaprofibrogenictran—scriptionfactorregulatedbyJHaN—Terminalkinase-independent phosphorylation.Hepatology,2006.44:1432—1440.7MatsuzakiK.MurataM,Y oshidaK,eta1.Chronicinflammation associatedwithhepatitisCvirusinfectionperturbshepatictrans—forminggrowthfactorbetasignaling,promotingcirrhosisandhep—atocellularcarcinoma.Hepatology,2007,46:48—57.8ReifS,LangA,IindquistJN.eta1.Theroleoffocaladhesionki—nase-phosphatidylinositol3-kinase-aktsignalinginhepaticstellate cellproliferationandtypeIcollagenexpression.JBiolChem,2003.278:8083—8090.9GabeleE.ReifS,TsukadaS,eta1.Theroleofp70S6Kinhepatic stellatecellcollagengeneexpressionandcellproliferation.JBiol Chem,2005.280:13374—13782.10JeongWl,ParkO,RadaevaS.eta1.STA TIinhibitsliverfibrosisinmicebyinhibitingstellatecellproliferationandstimulatingNK cellcytotoxicity.Hepatology,2006.44:1441—1451.11OakleyF,MesoM.1redaleJP,eta1.Inhibitionofinhibitorof kappaBkinasesstimulateshepaticstellatecellapoptosisandaccel—cratedrecoveryfromratliverfibrosis.Gastroenterology,2005, 128:108—12'1.12DambachDM,DurhamSK,IaskinJD,etaIIDistinctrolesofNF- kappaBpS0intheregulationofacetaminophen-inducedinflamma—torymediatorproductionandhepatotoxicity.ToxicolApplPhar—macol,2006,211:157—165.13IvP,LuoHS,ZhouXP,eta1.Reversaleffectofthalidomideon establishedhepaticcirrhosisinratsviainhibitionofnuclearfactor- kappaB/inhibitorofnuclearfactor-kappaBpathway.Arch-Med—Res,2007.38:15-27.(收稿日期:2007-09—11)(本文墒辑{赖荣陶)。
SMAD3基因在畜牧生产中的应用研究进展
中国畜牧兽医 2019.46(1):185 193China Animal Husbandry & Veterinary MedicineSMAD3基因在畜牧生产中的应用研究进展谭 斌⑺，杨胜林2**，杨汝才⑺，王旭平1.2,周美迪1,2,周 璇3,杨世皓1.2收稿日期:2018-07-10基金项目：贵州省科技厅成果应用与产业化计划（黔科合成果[2017]4110、黔科合成果[2018]4301）；贵州省科技厅科技支撑计划（黔科合NY[2015]3006-2、黔科合支撑[2017]2539）;贵州省普通本科高等学校科技成果转化与产业化（黔教合KY 字[2017]056）作者简介：谭 斌（1993-）,男•贵州普定人，硕士生，研究方向：特种经济动物饲养,E-mail ：364100279@qq. com*通信作者：杨胜林（1963-）,贵州岑巩人，博士，教授，研究方向：动物遗传育种与繁殖、特种经济动物饲养,E-mail ：shenglinyan g @ 126. com（1.贵州大学动物科学学院，贵阳550025 ；2.高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室，贵阳550025）摘 要：SMAD3基因是SMADS 基因家族成员之一，其编码的SMAD3蛋白是转化生长因子-p （TGF-|3）超家族特异的细胞内信号转导分子，SMAD3基因通过TGF-R 超家族参与疾病、免疫调节、生长发育、创伤愈合、软骨与骨骼 的发育及维持等重要的生理过程，同时还参与调节生殖细胞的增殖、分化、成熟、黏附、闭锁、凋亡和窗体激素的产生等，因此，了解SMAD3基因的结构与功能对动物生长发育、繁殖等研究具有重要意义。
文章简述了 SMAD3基 因结构、功能、作用机理，分析了其在畜牧生产方面相关的应用研究进展发现，目前SMAD3基因在畜牧生产上的应用研究主要集中在参与调控脊椎动物（猪、牛、羊、鸡等）生长、发育、细胞免疫与凋亡、激素分泌及繁殖功能方面；SMAD3基因在调控动物机体疾病发生、生长发育、脂肪沉积及繁殖性能方面仍是国内外研究的热点，而该基因对畜禽疾病发生、生长和繁殖性能的精确分子调控机制仍有待进一步研究。
脊髓损伤相关信号通路在脊髓损伤修复过程中的研究进展
在SCI修复过程中的研究成果和进展作一综述。
［关键词］脊髓损伤；信号通路;治疗；研究进展
［中图分类号］R651.2
［文献标识码］A
［文章编号］1673-7210(2021)06(a)-0052-05
Research progress of spinal cord injury related signaling pathways in the repair of spinal cord injury
52 CHINA MEDICAL HERALD Vol. 18 No. 16 June 2021
严重会导致截瘫叭SCI是一个多种途径、因素参与的 复杂病理生理过程，不仅是原发性一次损伤及剪切、 穿透或压缩对脆弱神经组织产生的破坏，随之而来的 水肿、脂质氧化、炎症、细胞毒性和微胶质活化等还可 诱发二次损伤，导致少突胶质细胞死亡和产生轴突脱 髓鞘罠SCI发生初期，大量炎症反应产生，最具特征 性的改变是白细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞反 应，这些反应会诱发神经胶质瘢痕形成及髓鞘源性抑 制因子(myelin-associated inhibitory factors,MAIFs)产 生。神经胶质瘢痕虽然有利于控制炎症和减少进一步 损伤，但会导致轴突生长锥塌陷，从而阻碍神经元重 建与修复。MAIFs在中枢神经系统损伤部位周围胶质 瘢痕中高度表达,抑制受损部位少突胶质细胞向神经
基于转录组分析对中国对虾Myostatin基因调控的肌肉生长相关基因的筛选
中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)作为无脊椎 动物甲壳类的典型代表，具有较高的经济价值，但其 海捕量极低，基本依靠养殖供给市场，而养殖产量远 远满足不了市场消费的需求，加之群体的生长性状选 育进展缓慢且规格整齐度较差，利用分子手段来提高 产量已迫在眉睫。我们前期对中国对虾的初步研究表 明，Mstn可能与脊椎动物类似，负向调控中国对虾
1.2.4 转录组测序分析 通过qRT-PCR分析对照
组和实验组相对表达量，确保实验组中FcMstn基因 表达被有效抑制后，取出液氮中保存的样品，使用
RNA提取试剂盒(TaKaRa)进行总RNA的提取，用 1.5%的琼脂糖电泳检查RNA完整性，NanoDrop2000 超微量分光光度计检测RNA浓度，所有指标经检测 合格后，根据qRT-PCR的检测结果选取抑制效果最 好的3个样品，交送至数据(raw reads),对原始数据进行接头及低质 量reads去除处理，获得高质量的clean数据，使用 短reads组装软件Trinity对高质量clean数据进行de novo 组装(Liang et al, 2013)得到 unigeneo
Mstn对肌肉生长发育的作用为促进动物生产、增加
市场利润提供了新途径，随着对Mstn研究的不断深 入，其肌肉调控机制和相关基因功能也越来越完善。 Mstn作为胞外信号分子，可与成肌细胞膜上的受体 结合引起受体自身的磷酸化，启动细胞内一系列信号 传导过程，作用于生肌分化抗原(MyoD)靶基因的调 控区，进而调控肌肉的形成和分化(Morikawa et al,
骨代谢信号通路的研究进展
科技风2021年6月「0电子信息DO/10.19392/ki.1671-7341.202117034骨代谢信号通路的研究进展彭小婷宋肖赵文豪方欢欢王鑫高雪刘雨欣李微*湖北文理学院医学院湖北襄阳441053摘要：当今社会，科学技术不断进步，人民的生活也逐步提高，人口老龄化现象越发明显，所以老年人常见病的发病率也呈现逐年升高的趋势，特别是病情发展比较隐匿的代谢性骨病严重影响了中老年人的生活质量。
本文作者查阅了近年国內外有关骨代谢的文献，发现多种信号通路都参与骨代谢，但目前并没有学者对骨代谢的信号通路做系统总结，故本文就目前研究涉及的信号通路进行总结，为骨代谢机制的进一步研究提供理论依据。
关键词：骨代谢;信号通路;研究进展中图分类号:R681文献标识码:A骨代谢是一个动态过程，骨代谢平衡是保证骨骼健康的关键因素。
参与骨代谢过程的细胞中，成骨细胞主要参与骨形成过程，而破骨细胞则决定了骨吸收过程，二者相互商量协调，共同发挥作用,维持骨细胞代谢的动态平衡，以保证骨骼的健康。
在骨病的研究领域,与骨代谢相关的信号通路研究比较广泛，相关报道也颇多，但缺乏系统的总结，本文经查 阅近年相关文献，对影响骨代谢信号通路进行归纳，以期为骨代谢进一步研究提供便利。
1BMP通路骨形态发生蛋白（BMP s）作为骨骼生长和发育过程中非常关键的一个蛋白家族。
在骨代谢过程中，主要通过两种途径介导调节过程:经典的和非经典的通路。
经典通路指的是BMP/Smad信号通路,BMP首先和它的*型受体相结合，然后与I型受体结合并使之磷酸化，激活的磷酸化受体又激活下游的R-Smads，然后激活态的R-Smads与Co-Smads相结合，进而移动到细胞核内，启动了Runx-2等靶基因的转录,最终达到促进成骨细胞增殖和分化的效应。
非经典通路指的是MAPK通路,BMP通过BMP-R1A激活TAK信号通路,然后开始逐步参与到转录和表达P16INK4a等靶基因的过程，进而影响成骨细胞的分化⑴#另外,BMP2是BMPs家族中重要的亚型，不仅参与刺激间充质干细胞向成骨细胞分化，还参与从成骨细胞到骨细胞的分化。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
TGF -β1 是肾纤维化的关
键因素,其通过自分泌与旁分泌途径,诱导肾小球及
肾小管细胞肥大,促进ECM 积聚[1 ] 。
Smad 蛋白是近
年来发现的唯一的TGF -β受体胞内激酶底物,介导
TGF -β1 的胞内传导过程[2 ] 。
TGF - β1/ Smads 信号
转导通路在肾纤维化的发生发展中起重要作用[3 ] 。
因此,抑制TGF - β的产生和/ 或活性,拮抗或阻断
TGF -β1/ Smads 信号途径可以减轻实验性肾纤维化
的进展。
Smads 家族蛋白是新近发现的参与TGF -β
超家族在细胞内信号传导的一族蛋白质。
迄今为止,
在哺乳动物中已经分离鉴定的Smad 蛋白有9 种[4 ] ,
用Smad1 ～9 表示, 按功能可分成3 类: 受体活化
Smad (R - Smads) 、共配偶体Smad (Co - Smad) 和抑制
性Smad ( I - Smads) 。
R - Smads 是专门传导TGF -β
家族中某条信号通路的Smad ,包括Smad1～3 ,Smad5
及Smad8 、9 。
其中Smad1 、5 、8 、9 参与BMP 信号传
导,Smad2 、3 参与TGF - β信号传导, Smad2/ 3 增加
整合素连接激酶的表达,可增加纤维连接蛋白的表
达,促进ECM 沉积,增加基质金属蛋白酶MMP - 2
及MMP - 9 的表达,分解基质的主要成分Ⅳ型胶原蛋
白,破坏基底膜的完整性,从而促进EMT、稳定间充
质的表型。
Co - Smad 包括Smad4 ,它是TGF - β家
族各类信号传导过程中共同需要的介质。
I - Smads
包括Smad6 、Smad7 ,它们也可与Ⅰ型受体结合,结合
反应的稳定性比受体激活型Smad 更强,因而限制受
体激活型Smad 被磷酸化,抑制信号传导过程[5 ] 。
研
究表明Smad7 具有负性调节作用,可以抑制TGF -β诱导的细胞凋亡和胶原合成分泌增加等作用。
Smad7
作为一种内源性TGF -β拮抗剂,抑制TGF -β/ Smads。