金黄色葡萄球菌的鉴别培养基是BP培养基
三种金黄色葡萄球菌选择性分离培养基的检测效果比较
三种金黄色葡萄球菌选择性分离培养基的检测效果比较【目的】比较三种金黄色葡萄球菌选择性分离培养基的检测效果。
【方法】分别使用Baird-Parker培养基（BP）、兔血浆纤维蛋白原培养基（RPF）和科玛嘉葡萄球菌显色培养基（CHROMagarTMStaph aureus）对标准菌株、食品分离株以及食品样品进行对比检测。
【结果】三种选择性培养基对金黄色葡萄球菌的回收率均达到95%以上；RPF和CHROMagarTMStaph aureus培养基的检测效率明显高于BP培养基；且两种培养基敏感性、特异性均优于传统的BP培养基。
【结论】应用RPF和CHROMagarTMStaph aureus培养基检测食品中金黄色葡萄球菌，较传统的BP培养基具有更好的检测效果，建议将RPF和CHROMagarTMStaph aureus培养基作为可靠的分离检测培养基应用于食品中金黄色葡萄球菌的分离检测。
标签：金黄色葡萄球菌；Baird-Parker培养基；兔血浆纤维蛋白原培养基（RPF）；科玛嘉葡萄球菌显色培养基；检测效果引用格式：顾其芳，张红芝，朱颖莹，等.三种金黄色葡萄球菌选择性分离培养基的检测效果比较[J].上海预防医学，2018，30（1）：69-73.Detection effects compared between three types of selective media for Staphylococcus aureus GU Qi-fang，ZHANG Hong-zhi，ZHU Ying-ying，LU Jun-yan，YU Ying，LIU Cheng，LIU Yue，CHEN Min（Shanghai Municipal Center for Disease Control and Prevention，Shanghai 200336，China）Abstract：[Objective] To compare the detection effects between three kinds of selective media for Staphylococcus aureus. [Methods] Baird-Parker （BP）agar，Rabbit Plasma Fibrinogen （RPF）agar and CHROMagarTMStaph aureus were selected to test the standard strains，food-isolated strains as well as food samples. [Results] More than 95% recovery efficiency could be reached by utilization of all the three types of media. However，the detection effects of RPF and CHROMagarTMStaph aureus were significantly higher than that of BP agar.Moreover，their sensitivity and specificity were also superior to that of conditional BP agar. [Conclusion] Better detection effect is obtained from RPF and CHROMagarTMStaph aureus when compared to that from BP agar，suggesting that RPF and CHROMagarTMStaph aureus agar are more reliable for the detection of Staphylococcus aureus in food.Keywords：Staphylococcus aureus；Baird-Parker agar；Rabbit Plasma Fibrinogen agar（RPF）；CHROMagarTMStaph aureus；detection effect金黃色葡萄球菌是引起人类食源性疾病的重要病原菌之一，对其的微生物检测方法目前仍以常规分离培养为主。
金黄色葡萄球菌检测培养基
金黄色葡萄球菌检测培养基Jvo SiegristAnalytiX第10卷第2篇金黄色葡萄球菌通常是我们皮肤菌群的一部分，但也是导致多种疾病的原因。
当前的研究报告表明，近年来，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的案例显著增加。
葡萄球菌可能是空气传播的，存在于动物和人类中，或污水、水、牛奶或食物中以及在环境表面或食物设备中。
它仍然是医院感染的五个最常见原因之一，通常会导致术后伤口感染。
因此，它在医院中引起了人们的极大关注，尤其是对于MRSA，耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌。
金黄色葡萄球菌是一种侵入性病原体，可以在人体的几乎任何组织或器官中引起疾病，主要是在受感染的个体中。
以前，葡萄球菌感染使用青霉素治疗，但是多年来，这种病原体通过构建青霉素酶而产生了对青霉素的抗性。
甲氧西林是下一代药物的选项，因为它不被青霉素酶裂解。
甲氧西林在治疗大多数葡萄球菌感染方面非常有效，但有些菌株通过产生青霉素结合蛋白而对甲氧西林产生了抗药性，无法再被这种抗生素杀死。
这些耐药细菌称为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）1。
因伤口，留置导管或烧伤导致皮肤破裂的患者极有可能发生MRSA感染2。
与MRSA感染者接触后，通过保持个人卫生可以在很大程度上控制MRSA感染的传播1。
如今，有许多创新的解决方案可以检测MRSA。
默克为微生物学家提供了选择性显色HiCrome MeReSa琼脂的大力支持，可用于从临床分离株和其他样品中检测MRSA。
培养基中掺入的专有显色混合物被金黄色葡萄球菌特异性切割，从而在该培养基上产生蓝绿色菌落，并且可以与其他物种明显区别开来。
通过添加甲氧西林使该培养基对MRSA具有选择性。
经常与葡萄球菌食物中毒相关的食物包括肉和蛋制品、牛奶和奶制品，以及可能包含这些食品成分的各种其他产品。
在食品工业中，保持在略高温度下的加工过程必须防止葡萄球菌性食物中毒，这是引起胃肠炎的主要原因之一。
食物中毒是由于食物中存在金黄色葡萄球菌产生的葡萄球菌肠毒素。
致病菌在培养基上的颜色变化照片
李斯特氏菌在PALCAM琼脂上典型特征
李斯特氏菌在 35 ℃ 培养 24-48 小时后，灰绿色菌落。其外围有一黑色 环。
单增李斯特氏菌 37 ℃培养 24-28 小时， 平板上出现蓝色菌落，菌落周围有 一不透明环。绵羊李斯特氏菌 37 ℃培养 48 小时 ，平板上出现蓝色菌落，菌 落周围有一不透明环。西尔李斯特氏菌 37 ℃培养 24-48 小时， 平板上出现 蓝色菌落，菌落周围没有不透明环。在食品检测中绵羊李斯特氏菌非常少见。
沙门氏菌在SS琼脂上典型特征
沙门氏菌在 37 ℃ 培养 18-24 小时后，无色透明菌落有黑色中心；志贺 氏菌呈无色透明菌落。
沙门氏菌在XLD琼脂上典型特征
沙门氏菌在 35 ℃ 培养 24-48 小时后，无色半透明有黑色中心或几乎全 为黑色。志贺氏菌为无色透明菌落。大肠杆菌为黄色菌落，其外围有黄 色环。
酵母菌在马铃薯葡萄糖琼脂上在 28 ℃ 培养 48 小时后，乳白色菌落， 有突起。
大肠杆菌在月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)上典型特征 大肠杆菌分解乳糖产生气体 ,有小倒管内收集有气泡。.
李斯特氏菌在牛津琼脂(OXA agar)上典型特征
李斯特氏菌在 35 ℃ 培养 24-48 小时后，灰绿色菌落。其外围有一黑色 环。
大肠菌群在去氧胆酸盐琼脂(DC)上典型特征 典型菌落为红色 , 菌落周围有红色的胆盐沉淀环。菌落直径为 2-3mm 或更大。
大肠菌群在结晶紫中性红琼脂(淀环。菌落直径为 0.5mm 或更大。
大肠杆菌O157菌在海博O157菌显色培养基上典型特征 典型 O157:H7 菌显紫色 ， 大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色。
糙 , 质地较干燥。
金黄色葡萄球菌在海博金黄色葡萄球菌显色培养基上典型特征
金黄色葡萄球菌培养基的筛选及发酵条件的优化研究
金黄色葡萄球菌检验原理
金黄色葡萄球菌检验原理
金黄色葡萄球菌检验的原理是通过培养和鉴定来确定细菌是否为金黄色葡萄球菌。
具体步骤如下：
1. 培养：将样本在含有富含营养物质的培养基上进行培养。
金黄色葡萄球菌在常见的琼脂培养基上能够快速生长并形成典型的黄色菌落。
2. 鉴定：通过一系列的生化反应和特征性实验来确认细菌的身份。
金黄色葡萄球菌一般具有以下特征：
- 革兰氏染色：呈阳性，即菌体呈紫色。
- 非运动性：无鞭毛或鞭毛不活跃。
- 产生黄色色素：金黄色葡萄球菌能够产生一种特殊的黄色色素，使得菌落呈现金黄色。
3. 确认：通过进一步的检测，如凝胶酶试验和DNA鉴定等，来进一步确认菌株是否为金黄色葡萄球菌。
金黄色葡萄球菌是一种常见的致病菌，可以引起多种感染，如皮肤感染、呼吸道感染和食物中毒等。
通过对其进行准确快速的检验可以帮助医生进行针对性治疗和控制传播。
金黄色葡萄球菌的分离和初步鉴别
品种名称：金黄色葡萄球菌显色培养基品种编号：CRM012英译名称：Chromogenic Staph. aureus Agar金黄色葡萄球菌显色培养基用途：用于金黄色葡萄球菌的分离和初步鉴别。
金黄色葡萄球菌显色培养基使用原理：蛋白胨、大豆胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;显色剂与金黄色葡萄球菌具有的酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，在无色透明平板上，金黄色葡萄球菌产生粉红-紫红的边缘整齐菌落;抑菌剂可抑制杂菌的生长。
操作步骤：1、称取67.4g培养基干粉，加入1L蒸馏水或去离子水(可按比例扩大增或缩小)，搅拌加热煮沸至完全溶解(避免过度加热)，无需高压灭菌，冷至50℃左右倾注平板备用;2、待检样品按照相应的标准(GB、SN、FDA等)进行取样及前增菌，挑取一环增菌液划线接种于制备好的该培养基平板上，于36±1℃培养18～24 h，观察结果，挑取典型可疑菌落进行鉴定试验。
结果判断：菌属菌落特征金黄色葡萄球菌粉红-紫红色菌落其它菌蓝绿色或无色或受抑制金黄色葡萄球菌显色培养基质量控制：外观：流动性良好的淡黄色粉末，制备好的平板呈浅黄色透明固体培养基。
生物学：下列菌株接种后于36±1℃培养24h生长情况如下表：质控菌菌落特征金黄色葡萄球菌ATCC25923 生长良好，粉红-紫红色单核增生李斯特菌ATCC19115 蓝绿色表皮葡萄球菌(CMCC(B)26069 受抑制粪肠球菌ATCC29212 受抑制普通变形杆菌CMCC(B)49027 受抑制规格：67.4克 /瓶，可配置1L的培养基。
贮存：脱水培养基：2～8℃，在标签上注明的保质期内使用。
制备好平板：2～8℃，最多保存一周。
bp培养基鉴别金色葡萄球菌的原理
bp培养基鉴别金色葡萄球菌的原理以bp培养基鉴别金色葡萄球菌的原理为标题金色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是一种常见的致病菌，可以引起多种感染，包括皮肤感染、呼吸道感染和血液感染等。
因此，准确鉴定金色葡萄球菌对于临床医学和公共卫生具有重要意义。
BP培养基（Baird-Parker agar）是一种常用的选择性培养基，用于鉴别金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）和其他葡萄球菌属菌株。
下面将介绍BP培养基鉴别金色葡萄球菌的原理。
BP培养基的组成中含有选择性物质和指示剂，能够抑制大多数细菌的生长，同时使金色葡萄球菌菌落呈现特殊的形态和颜色。
BP培养基中的选择性物质是亚硒酸钠（sodium selenite）和苯甲酸（phenylalanine），它们能够抑制大多数菌落的生长，但对金色葡萄球菌菌落的生长没有明显抑制作用。
BP培养基中的指示剂是酚红（phenol red），它能够在菌落中显示出特殊的颜色变化。
在BP培养基上，金色葡萄球菌形成的菌落呈现为典型的黑色或暗褐色，而其他葡萄球菌属菌株通常形成的菌落颜色较浅，无明显的黑色或暗褐色。
这是因为金色葡萄球菌能够产生酚酞酶（phenol-soluble modulins，PSMs），该酶能够将BP培养基中的苯甲酸氧化为苯酚，进而与酚红反应产生黑色或暗褐色的化合物。
而其他葡萄球菌属菌株没有或只产生少量酚酞酶，所以无法将苯甲酸氧化为苯酚，菌落颜色较浅。
BP培养基还能够利用金色葡萄球菌的凝集素（clumping factor）来鉴别。
金色葡萄球菌的凝集素能够与培养基中的凝集素抑制剂反应，使得金色葡萄球菌菌落周围形成边缘模糊的透明带，而其他葡萄球菌属菌株则不会产生这种现象。
通过上述原理，BP培养基能够有效鉴别金色葡萄球菌和其他葡萄球菌属菌株。
在实验室中，可以将待检菌种接种于BP培养基上进行培养，经过一定时间后观察菌落的颜色和形态，以及边缘透明带的形成情况，就可以初步判断菌株是否为金色葡萄球菌。
金黄色葡萄球菌的检验
金黄色葡萄球菌的检验(定性检测)一．金黄色葡萄球菌的生物学特性金黄色葡萄球菌革兰氏阳性球菌，直径为0.8-1.0微米，镜检时呈单个、成对、四联或不规则的簇群；无芽孢，无鞭毛、无荚膜、不运动；兼性厌氧菌，在好氧条件下生长最好；大多数菌株产生类胡萝卜素，使细胞团呈现出深橙色到浅黄色，色素的产生取决于生长的条件，故称金黄色葡萄球菌，营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37℃，最适生长pH 7.4。
普通平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm。
血平板菌落周围形成透明的溶血环。
主要存在于主要为淀粉类(如剩饭、米面、粥等)、牛乳及乳制品，以及鱼、肉、蛋类等。
二、培养基7.5%的氯化钠（三角瓶135mL）；BP平板培养基；血平板培养基；BHI肉浸液肉汤培养基（试管5个）。
三、金黄色葡萄球菌的定性检测主要包含四个步骤：样品处理；增殖培养；平板分离培养；鉴定（染色镜检和血浆凝固酶实验）。
1.样品的处理和增殖培养：样品为冷冻鱼丸，每组称量15g，放于研钵中，用研磨棒捣碎，放于135mL 7.5%的氯化钠肉汤中进行增菌培养，36℃±1℃培养18h～24h后，可观察到金黄色葡萄球菌在7.5%氯化钠肉汤中呈混浊生长。
2.血平板划线培养：将样品增菌培养物，用接种环取一环划线接种于血平板上，36℃±1℃培养18h～24h。
（每组2个血平板接种增殖样品，1个平板划线接种金黄色葡萄球菌，每组共3个血平板）。
金黄色葡萄球菌在血平板上的菌落特征：菌落较大，圆形，光滑突起，湿润，金黄色（有时为白色），菌落周围为完全透明溶血圈。
3.BP平板划线培养：将样品增菌培养物，用接种环取一环划线接种于BP平板上，36℃±1℃培养18h～24h。
（每组2个BP平板接种增殖样品，1个平板划线接种金黄色葡萄球菌，每组共3个BP平板）。
金黄色葡萄球菌在BP平板上的菌落特征：菌落直径2-3mm，颜色从灰色到黑色，边缘为淡色，周围有一浑浊带，其外层有一透明圈，用接种针触碰有奶油树脂的硬度。
金黄色葡萄球菌的测定方法验证报告
方法验证报告公共场所卫生检验方法第4部分：公共用品用具微生物金黄色葡萄球菌GB/T 18204.4-2013(5)1.目的验证平皿鉴定法测定公共用品用具微生物中的金黄色葡萄球菌，来判断在本实验室此方法的适用性。
2.培养基和试剂2.1培养基和试剂2.1.1胰酪胨大豆肉汤成分：胰酪胨(或胰蛋白胨) 17g植物蛋白胨(或大豆蛋白胨) 3g氯化钠100g磷酸氢二钾 2.5 g葡萄糖 2.5 g蒸馏水1000mL制法：将上述成分混合后，加热溶解，调pH为7.2~7.3，分装，121 C、20 min 高压灭菌。
2.1.2氯化钠肉汤(75 g/L)成分：蛋白胨10g牛肉膏10g氯化钠75 g蒸馏水 1 000 mL制法：将上述成分加热溶解，调pH为7.4，分装，121 ℃、20 min高压灭菌。
2.1.3 Baird Parker平板成分：胰蛋白胨10g牛肉膏5g酵母浸膏1g丙酮酸钠10g甘氨酸12g氯化锂(LiCl. 6H2O) 5g琼脂20g蒸馏水950 mL增菌剂的配制：卵黄盐水(30%,体积分数)50mL与除菌过滤的亚碲酸钾溶液(质量浓度=1%)10mL混合，保存于冰箱内。
制法：将各成分加到蒸馏水中，加热煮沸完全溶解，冷至25℃校正pH至7.0±0.2。
分每瓶95 mL，121℃高压灭菌15min，临用时加热熔化琼脂，每95mL 加入预热至50C的卵黄亚碲酸钾增菌5mL，摇匀后倾注平板。
培养基应是致密不透明的。
使用前在冰箱储存，不得超过48 h。
2.1.4血琼脂培养基成分：营养琼脂100 mL脱纤维羊血(或兔血) 10 mL制法：将营养琼脂加热溶化,待冷至50 C左右以无菌方法加人脱纤维羊血，摇匀，制成平板，置冰箱内备用。
2.1.5革兰氏染色液2.1.5.1结晶紫染色液成分：结晶紫1g乙醇(95% ,体积分数) 20 mL草酸铵水溶液(质量浓度=1%) 80 mL制法：将结晶紫溶于乙醇中,然后与草酸铵溶液混合。
金黄色葡萄球菌在BP琼脂上典型特征
可编辑ppt
11
单增李斯特氏菌在海博李斯特氏菌显色培养基上典型特征
单增李斯特氏菌 37 ℃培养 24-28 小时， 平板上出现蓝色菌落，菌落周围有 一不透明环。绵羊李斯特氏菌 37 ℃培养 48 小时 ，平板上出现蓝色菌落，菌 落周围有一不透明环。西尔李斯特氏菌 37 ℃培养 24-48 小时， 平板上出现 蓝色菌落，菌落周围没有不透明环。在食品检测中绵羊李斯特氏菌非常少见。
可编辑ppt
7
沙门氏菌在亚硫酸铋琼脂(BS琼脂)上典型特征
沙门氏菌在 37 ℃ 培养 24-48 小时后，棕褐色或灰色至黑色，有时有金属光泽， 周围培养基呈棕色或黑色，有些菌株呈灰绿色 , 周围培养基不变或微变暗。
可编辑ppt
8
沙门氏菌在SS琼脂上典型特征
沙门氏菌在 37 ℃ 培养 18-24 小时后，无色透明菌落有黑色中心；志贺 氏菌呈无色透明菌落。
金黄色葡萄球菌在BP琼脂上典型特征
金黄色葡萄球菌呈圆形 , 表面光滑、凸起、湿润 , 直径 2 ～ 3mm 。灰黑色至黑 色 , 有光泽 , 常有浅色 ( 非白色 ) 的边缘 , 周围绕以不透明圈 ( 沉淀 ), 其外常有 一清晰带 ( 卵磷脂环 ) 。当用接种针触及菌落时具有黄油样粘稠感。有时可见到 不分解脂肪的菌株 , 除没有不透明圈和清晰带外 , 其他外观基本相同。从长期贮 存的冷冻或脱水食品中分离的菌落 , 其黑色常较典型菌落浅些 , 且外观可能较粗
可编辑ppt
20
李斯特氏菌在牛津琼脂(OXA agar)上典型特征
李斯特氏菌在 35 ℃ 培养 24-48 小时后，灰绿色菌落。其外围有一黑色 环。
可编辑ppt
21
李斯特氏菌在PALCAM琼脂上典型特征
金黄葡萄球菌鉴定步骤
金黄葡萄球菌鉴定步骤金黄葡萄球菌鉴定步骤导语：金黄葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是一种常见的致病菌，对人类健康造成威胁。
了解金黄葡萄球菌的鉴定步骤对于预防和控制感染具有重要意义。
本文将从简单到深入，介绍金黄葡萄球菌鉴定的全过程。
一、目的金黄葡萄球菌鉴定的目的是确认样本中是否存在金黄葡萄球菌，并进一步了解其特点和性质，以便进行预防和治疗。
二、前期准备1. 确保实验室安全：佩戴实验室必备的防护用品，如手套、口罩和实验室服。
2. 培养基准备：准备适用于金黄葡萄球菌生长的培养基，如牛肉膏蔗糖培养基（Baird Parker Agar）或含有亚硒酸钠的万氏精液胆盐柳糖培养基（Mannitol Salt Agar）。
3. 无菌操作：使用无菌技术，以避免外来细菌的污染。
三、鉴定步骤1. 样本处理：将待检样本在无菌条件下接种于培养基上，可以是涂布法、点状法或环法。
a. 涂布法：将待检样本取适量涂布在培养基表面。
b. 点状法：用匀浆针将待检样本点状刺入培养基内。
c. 环法：用无菌棉签从待检样本中取样后沿培养基表面画环。
2. 培养条件：将培养基培养于37℃恒温培养箱中，培养时间一般为24小时。
3. 金黄葡萄球菌特征：a. 形态特征：金黄葡萄球菌在培养基上生长为黄色或类似葡萄球菌的菌落，呈珠状集聚。
b. 生理特性：金黄葡萄球菌产生酶溶血性作用，可溶解红细胞，形成溶血环。
c. 生化特性：金黄葡萄球菌可产生凝固酶，将凝血蛋白溶解成凝胶。
4. 疑似金黄葡萄球菌鉴定：a. 形态观察：观察菌落形态，如颜色、形状和大小等。
b. 酶溶血性试验：将待检菌落在凝集红细胞上涂布，观察是否形成溶血环。
溶血环直径大于3毫米时，判定为金黄葡萄球菌的溶血作用阳性。
c. 产凝固酶试验：将待检菌悬液与凝血蛋白混合，观察是否形成凝胶。
若凝胶形成，即判定为金黄葡萄球菌的凝固酶阳性。
5. 进一步确认：a. 分子鉴定：可采用PCR等分子生物学方法，通过特定基因的检测来确认金黄葡萄球菌。
菌落在培养基上的典型特征
大肠菌群在去氧胆酸盐琼脂(DC)上典型特征
典型菌落为红色 , 菌落周围有红色的胆盐沉淀环。菌落直径为 2-3mm 或更大。
大肠菌群在结晶紫中性红琼脂(VRBA)上典型特征 典型菌落为紫红色 , 菌落周围有红色的胆盐沉淀环。菌落直径为 0.
大肠杆菌O157菌在海博O157菌显色培养基上典型特征 典型 O157:H7 菌显紫色 ， 大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色。
金黄色葡萄球菌在海博金黄色葡萄球菌显色培养基上典型特征 典型的金黄色葡萄球菌为灰黑色菌落，其外围有一不透明圈。 本培养基用于直接鉴定金黄色葡萄球菌，如果在 18-24 小时没 有出现典型菌落，需再培养 18-24 小时。有时金黄色葡萄球菌 不显灰黑色 ，但其外围有一不透明圈。
大肠杆菌在海博大肠杆菌/大肠菌群显色培养基上典型特征 大肠杆菌典型菌落为蓝色至紫色，大肠菌群为粉红色菌落，其它细菌
金黄色葡萄球菌在BP琼脂上典型特征 金黄色葡萄球菌呈圆形 , 表面光滑、凸起、湿润 , 直径 2 ～ 3mm 。灰黑色至黑色 , 有光泽 , 常有浅色 ( 非白色 ) 的边缘 , 周围绕以不透明圈 ( 沉淀 ), 其外常有一清晰带 ( 卵磷脂环 ) 。当用接种针触及菌落时具有黄油样粘稠感。 有时可见到不分解脂肪的菌株 , 除没有不透明圈和清晰带外 , 其他外观基本相同。从长期贮存的冷冻或脱水食品中分离的菌 落 , 其黑色常较典型菌落浅些 , 且外观可能较粗糙 , 质地 较干燥。
沙门氏菌在胆硫乳琼脂(DHL琼脂)上典型特征
沙门氏菌在 37 ℃ 培养 22-24 小时后，无色半透 明有黑色中心或几乎全为黑色。有些菌株无色半透 明。
沙门氏菌在亚硫酸铋琼脂(BS琼脂)上典型特征
沙门氏菌在 37 ℃ 培养 24-48 小时后，棕褐色或灰色至黑色， 有时有金属光泽，周围培养基呈棕色或黑色，有些菌株呈灰绿 色 , 周围培养基不变或微变暗。
金黄色葡萄球菌检验技术介绍及分析
金黄色葡萄球菌检验技术介绍及分析金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是一种常见的革兰氏阳性球菌，广泛存在于自然界中，同时也是人体皮肤和黏膜的正常微生物。
金黄色葡萄球菌也是人体病原微生物中的一种，并且可以引起一系列的感染疾病，包括皮肤感染、肺炎、败血症等严重疾病。
及时、准确地检测金黄色葡萄球菌对于预防和控制与该菌相关的疾病具有重要意义。
金黄色葡萄球菌的检验技术主要包括细菌培养、生化鉴定、药敏试验等，下面将对这些技术进行介绍。
一、细菌培养1. 培养基金黄色葡萄球菌主要可在营养琼脂、大豆肉汤琼脂、牛肉心脏培养基等细菌培养基上生长。
营养琼脂是最常用的培养基，可用于对金黄色葡萄球菌的初步筛查。
2. 培养条件金黄色葡萄球菌在37°C下培养24-48小时，产生充分的菌落。
3. 形态特征金黄色葡萄球菌在琼脂培养基上可形成金黄色的圆形菌落，直径一般在1-2mm左右。
二、生化鉴定1. 皮肤试验皮肤试验是金黄色葡萄球菌的特异性鉴定方法之一，又称为凝集素试验。
通过皮肤试验，可以判断金黄色葡萄球菌是否具有产生凝集素的能力。
2. 协和试验协和试验又称凝集酶试验，是用于检测金黄色葡萄球菌产生凝集酶的一种生化试验。
该试验通过将金黄色葡萄球菌的培养液加入到含有凝集酶专一底物的试管中，观察底物被溶解的情况，用于判断金黄色葡萄球菌是否产生凝集酶。
3. 床旋试验床旋试验又称为巯基甲酸盐试验，是一种利用巯基甲酸盐来检测金黄色葡萄球菌的特异性试验。
通过观察琼脂培养基上金黄色葡萄球菌菌落周围出现的红色环的形成情况，判断金黄色葡萄球菌是否产生巯基甲酸盐酶。
4. 溶血酶试验溶血酶试验是一种通过检测金黄色葡萄球菌产生的溶血酶来鉴定其特性的生化试验。
溶血酶试验主要有两种方法：血凝素试验和牛血红蛋白试验。
这两种方法都是通过观察金黄色葡萄球菌对红细胞造成的溶血现象来判断其产生的溶血酶。
三、药敏试验药敏试验是检测金黄色葡萄球菌对抗生素的敏感性的一种方法。
金黄色葡萄球菌检验技术介绍及分析
金黄色葡萄球菌检验技术介绍及分析金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是一种常见的致病菌，广泛存在于环境中和人体的皮肤黏膜上。
它是一种革兰氏阳性球菌，通过空气、飞沫、直接接触等途径传播。
金黄色葡萄球菌引起的感染包括皮肤感染、呼吸道感染、骨髓炎、心内膜炎等，严重时还可以导致败血症和中毒性休克。
为了诊断金黄色葡萄球菌感染，需要进行相关的检验技术。
以下是金黄色葡萄球菌检验的常用技术介绍及分析：1. 细菌培养：将样品（如血液、脓液、分泌物等）接种到适当的培养基上，利用培养器将细菌培养在适当的温度和湿度下。
金黄色葡萄球菌能够在常规寒温培养基上生长，并产生特征性的金黄色色素。
2. 葡萄糖发酵试验：用含葡萄糖的培养基培养金黄色葡萄球菌，通过观察培养基的酸碱指示剂变化，如果培养基变为黄色，则说明金黄色葡萄球菌能够发酵葡萄糖产生酸。
3. 凝固酶试验：用凝固酶试剂与金黄色葡萄球菌接触，在一定时间内观察是否发生凝固反应。
凝固酶是金黄色葡萄球菌特有的酶，可以将凝血蛋白原转化为凝血蛋白，从而导致液体凝固。
4. 硝酸盐还原试验：将含有硝酸盐的培养基与金黄色葡萄球菌接触，观察是否产生还原反应。
正常情况下，金黄色葡萄球菌可以将硝酸盐还原为亚硝酸盐和硝酸，导致培养基变为红色。
5. 蛋白酶试验：用含有牛血清蛋白的培养基培养金黄色葡萄球菌，观察是否溶解蛋白质。
金黄色葡萄球菌能够产生多种蛋白酶，可以分解牛血清蛋白，形成溶解区。
通过以上的检验技术，可以初步判断金黄色葡萄球菌的存在和性质。
这些检验方法并不是专门针对金黄色葡萄球菌的，也不能确定金黄色葡萄球菌的毒力和抗药性等重要特征。
要做进一步的分析和确认，需要使用专门的分子生物学方法，如聚合酶链反应（PCR）和基因测序等。
实验三 食品中金黄色葡萄球菌的检验
2、直接计数方法
2.1 梯度稀释转种BP平板
吸取上述1：10混悬液，进行10倍第次稀释， 根据样品污染情况，选择不同浓度的稀释液1mL， 分别加入三块BP平板，每个平板接种量分别为 0.3mL、0.3mL、0.4mL，然后用灭菌涂布器涂布 整个平板，如水分多不易吸收，可将平板放在 36℃±1℃1h，等水分蒸发后反转平皿置 36℃±1℃培养。
数第 三 法 金 黄 色 葡 萄 球 菌
计
MPN
三法特点及适用性：
第一法适用于食品中金黄色葡萄球菌的定 性检验
第二法适用于金黄色葡萄球菌含量较高的 食品中金黄色葡萄球菌的计数 第三法适用于金黄色葡萄球菌含量较低而
杂菌含量较高的食品中金黄色葡萄球菌的 计数。
实验安排
1、实验时间： 2、分组：每3人一组 3、评分标准：见附表1
1、增菌培养法
1.1检样处理：无菌操作取样25g（mL）加入225mL灭 菌生理盐水，固体样品研磨或均质制成混悬液。
1.2增菌及分离培养：吸取5mL上述混悬液，接种于 7.5%氯化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤50mL培养基内， 36℃±1℃培养24h，转种血平板和BP平板， 36℃±1℃培养24h，挑取血平板上金黄色（有时 为白色）菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶 实验。
金黄色葡萄球菌的鉴别培养基是BP培养基
⾦黄⾊葡萄球菌的鉴别培养基是BP培养基
⾦黄⾊葡萄球菌的鉴别培养基是BP培养基(蛋⽩胨10g 磷酸⼆氢钾1。
5g磷酸氢⼆钠9g 氯化钠5g 蒸馏⽔1000ml 制法:按成分制好后转⼊⼤烧瓶.121摄⽒度⾼压灭菌15min⽤时⽆菌分装225ml)，在这种培养基上显⽰出独特的光圈
⼤肠杆菌的培养基中加⼊依红和镁蓝，如果菌落变为⾦属⾊泽的紫⾊，即含有⼤肠杆菌。
⾦黄⾊葡萄球菌鉴别培养基中应加⼊⾼浓度⾷盐⽔，如果长出菌落来就是⾦黄⾊葡萄球菌
根据链球菌所致疾病不同，可采取脓汁、咽拭、⾎液等标本送检。
直接涂⽚镜检
取脓汁涂⽚，⾰兰⽒染⾊，镜检，发现⾰兰⽒阳性呈链状排列的球菌，就可以初步诊断。
分离培养
脓汁或棉拭直接划线接种在⾎琼脂平板上，孵育后观察有⽆链球菌菌落。
根据溶⾎性不同，可区分为甲型、⼄型或丙型链球菌。
有β溶⾎的菌落，应与葡萄球菌区别；α溶⾎的菌落，要和肺炎球菌鉴别。
疑有败⾎症的⾎标本，应先在葡萄糖⾁汤中增菌后再在⾎平板上分离鉴定。
⼼内膜炎病例，培养草绿⾊链球菌宜孵育3个星期以上。
⾎清学试验
抗链球菌溶⾎素O试验（Anti-streptolysin O test,ASO test）简称抗O试验。
常⽤于风湿热的辅助诊断。
患者⾎清中的抗O⼤多在250单位左右，活动者⼀般超过400单位。
Dick试验猩红热病⼈早期阳性，病后转阴。
金黄色葡萄球菌增菌培养基增菌效果的比较与分析
金黄色葡萄球菌增菌培养基增菌效果的比较与分析U的通过选择好的培养基，以提高金黃色葡萄球菌（以下简称金葡萄）的检岀率。
方法用一定数量的大肠埃希氏菌与不同数量的金葡菌混合培养，观察不同增菌液的增菌效果。
结果从SCDLP增菌液中［1］中，金葡菌划分离到Baird-parker（以下简称B-P）平板、高盐甘露醇平板、普通琼脂平板上不生长,5个血平板上仅有1个生长;从7.5%氯化钠增菌液［2］中,金葡菌划线分离道上述平板均生长。
结论自配的7.5%氯化钠增菌效果较好。
［Abstract ］ Objective To choose a better commercial enrichment medium that can improve the detecting rate of Staphylococcus anurans・Methods E coil and Staphylococcus anurans were cultured together with different culturing media. Then the enriching erect of each enrichment medium was determined・Results In SCDLP enriching medium, Staphylococcus anurans rules and separates B-P plat, the salt man nit plat, Ordinary agar plats, it doesn' t grow. But only one Staphylococcus anurans grow in 5 blood plats. In 7.5% Sodium chloride enrichment medium, Staphylococcus anurans rules and separates above-mentioned plat grow. Conclusion The effect of the 7.5% Sodium chloride enrichment medium is good・【Key words ］Staphylococcus anurans Enriching effectSoya casein digest lecithin polysorbate broth 7.5% sodium chloride enrichment medium金黄色葡萄球菌是污染食品和引起食物中毒的主要病原菌，也是引起化脓性炎性反应、败血症及脓毒血症的病原菌，同时也是检测医院消毒效果和医源性感染的一个重要指标。
金黄色葡萄球菌检验
金黄色葡萄球菌检验1. 概述金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是一种常见的细菌，广泛存在于自然环境和人体皮肤表面。
虽然大多数的金黄色葡萄球菌对人体无害，但一些菌株具有致病性，可以引起多种感染，包括皮肤感染、肺炎、血流感染等。
因此，对金黄色葡萄球菌的检验具有重要意义，能及早发现和控制感染的传播。
本文将介绍金黄色葡萄球菌检验的一些常用方法和技术。
2. 菌种的采集和处理2.1 采集样本金黄色葡萄球菌通常从病人的感染部位或者其他潜在的感染源采集样本。
常见的样本类型包括：皮肤切口分泌物、鼻拭子、血液、尿液等。
2.2 样本处理在进行金黄色葡萄球菌的检验之前，需要对采集的样本进行适当的处理。
处理方法取决于样本的类型和检验的目的。
常见的处理步骤包括：•鼻拭子：将鼻拭子放置在含有缓冲液的管中，将管子旋紧，并轻轻摇动一段时间，使细菌尽可能地释放到缓冲液中。
•血液：采集静脉血样本，将血液转移到无菌包装的管中，并立即将管子送到实验室进行处理。
•皮肤分泌物：使用无菌棉签或拭子采集患者分泌物，放入管中并送到实验室。
3. 常用的金黄色葡萄球菌检验方法3.1 培养方法金黄色葡萄球菌通常通过培养方法来进行检验。
常用的培养基包括牛肉肝脏套，Columbia血琼脂和Mannitol盐琼脂。
在封闭器具中加热灭菌后，将菌种均匀涂布于培养基上，并在适宜的温度（通常为37摄氏度）下孵育24-48小时，观察是否有金黄色小圆菌落的形成。
3.2 利用PCR技术检测PCR（聚合酶链式反应）是一种敏感且快速的方法，可以检测金黄色葡萄球菌的DNA。
通过PCR技术，可以快速鉴定金黄色葡萄球菌的存在和菌株的特性。
这种方法特别适用于高致病性金黄色葡萄球菌的检测。
3.3 人类源金黄色葡萄球菌的毒力基因检测金黄色葡萄球菌通常通过其特有的毒力基因来引起感染。
通过PCR技术，可以检测和鉴定菌株中的毒力基因。
常见的毒力基因包括PVL、TSST-1、ETA等。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
金黄色葡萄球菌的鉴别培养基是BP培养基(蛋白胨10g 磷酸二氢钾1。
5g磷酸氢二钠9g 氯化钠5g 蒸馏水1000ml 制法:按成分制好后转入大烧瓶.121摄氏度高压灭菌15min用时无菌分装225ml)，在这种培养基上显示出独特的光圈
大肠杆菌的培养基中加入依红和镁蓝，如果菌落变为金属色泽的紫色，即含有大肠杆菌。
金黄色葡萄球菌鉴别培养基中应加入高浓度食盐水，如果长出菌落来就是金黄色葡萄球菌
根据链球菌所致疾病不同，可采取脓汁、咽拭、血液等标本送检。
直接涂片镜检
取脓汁涂片，革兰氏染色，镜检，发现革兰氏阳性呈链状排列的球菌，就可以初步诊断。
分离培养
脓汁或棉拭直接划线接种在血琼脂平板上，孵育后观察有无链球菌菌落。
根据溶血性不同，可区分为甲型、乙型或丙型链球菌。
有β溶血的菌落，应与葡萄球菌区别；α溶血的菌落，要和肺炎球菌鉴别。
疑有败血症的血标本，应先在葡萄糖肉汤中增菌后再在血平板上分离鉴定。
心内膜炎病例，培养草绿色链球菌宜孵育3个星期以上。
血清学试验
抗链球菌溶血素O试验（Anti-streptolysin O test,ASO test）简称抗O试验。
常用于风湿热的辅助诊断。
患者血清中的抗O大多在250单位左右，活动者一般超过400单位。
Dick试验猩红热病人早期阳性，病后转阴。