丹参对非酒精性脂肪性肝炎大鼠脂质代谢及脂肪细胞因子影响-谭朝晖

40第18卷 第9期 2016 年 9 月辽宁中医药大学学报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 18 No. 9 Sep .，2016非酒精性脂肪性肝炎（Non-alcoholic steato-hepatitis，NASH）是一种遗传-环境-代谢应激相关性肝病，随着人们生活方式和饮食结构的改变，NASH 发病率逐年上升，在某些地区已超出病毒性肝炎居第一大肝病行列。

目前研究表明脂肪组织分泌的细胞因子如脂联素、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor，TNF-α）、瘦素、抵抗素等多种脂肪细胞因子的表达和功能异常，与NASH 的发病密切相关[1]。

丹参具有活血化瘀的作用，临床广泛应用于治疗NASH，但目前关于丹参对NASH 的防治大多停留在对临床疗效的研究。

本研究旨在通过观察丹参对NASH 大鼠脂质代谢及脂肪细胞因子影响，探讨丹参防治NASH 的可能作用机制，为治疗NASH 筛选有效药物提供实验依据。

1 材料与方法1.1 实验动物SD 雄性大鼠45只购自中山大学动物实验中心，体重190~220 g。

大鼠于清洁级动物室饲养，保丹参对非酒精性脂肪性肝炎大鼠脂质代谢及脂肪细胞因子影响谭朝晖，邹立华，刘荣火，谢丽华，胡红松（深圳市龙岗区人民医院，广东 深圳 518172）摘 要：目的：观察丹参注射液对非酒精性脂肪性肝炎大鼠脂质代谢、肝组织病理变化及脂肪细胞因子的影响，探讨其防治非酒精性脂肪性肝炎（Non-alcoholic steato-hepatitis，NASH）的可能作用机制。

方法：采用高脂饮食16周建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型，并用丹参注射液5 mL/（kg·d）进行干预治疗，观察各组大鼠肝湿质量、肝指数，血清及肝组织匀浆TG、TC 含量，HE 染色光镜观察肝组织脂肪变和炎症程度，ELISA 法检测血清脂联素、TNF-α水平。

结果：模型组大鼠肝湿质量、肝指数，血清及肝组织匀浆TG、TC 含量升高，血清TNF-α水平升高，脂联素水平下降，肝组织炎症积分升高（P <0.01）；丹参治疗后肝组织炎症程度较模型组明显减轻，血清及肝组织匀浆TG、TC 含量较模型组明显降低，血清脂联素水平较模型组增高，TNF-α水平较模型组显著下降（P <0.01）。

结论：丹参注射液能通过上调脂联素水平、下调TNF-α水平，降低肝脏脂质蓄积，从而抑制肝细胞炎症，防止NASH 的进展。

关键词：丹参注射液；非酒精性脂肪性肝炎；脂联素；肿瘤坏死因子-α中图分类号：R575.5 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2016) 09- 0040- 03收稿日期：2015-12-14基金项目：深圳市龙岗区科技局科研基金资助项目（YS2013020）作者简介：谭朝晖（1975-），女，湖南益阳人，副主任医师，硕士，研究方向：中西医结合消化临床工作。

Influences of Salvia on Lipid Metabolism and Adipocytokinesin Rats with Non-alcoholic Steato-hepatitisTAN Zhaohui，ZOU Lihua，LIU Ronghuo，XIE Lihua，HU Hongsong （Longgang Disetrict People's Hospital，Shenzhen 518172，Guangdong，China）Abstract：Objective ：To study the effect of salvia injection on lipid metabolism，hepatic tissuepathological change，and adipocytokines in rats with non-alcoholic steato-hepatitis（NASH），and to discuss the mechanism. Methods ：Non-alcoholic steato-hepatitis SD rats model were established by administering a high-fat diet for 16 weeks and were treated with salvia injection at dosages of 5 mL/ kg body weight/d. Pathological changes of liver tissues were observed with HE. Liver index and rats' wet liver weight were measured. The serum levels of total cholesterol（TC），triglycerides（TG），adiponectin（APN），tumor necrosis factor alpha（TNF-α）were measured，and the liver homogenate levels of TC，TG were measured. Results ：At the end of 16th week，liver index and rats' wet liver weight，the serum levels of TC，TG，TNF-α，as well as the liver homogenate levels of TC，TG increased（P <0.01），and the level of Adiponectin decreased significantly in model group compared with those in normal group（P <0.01）．Liver index and rats' wet liver weight，the serum levels of TC，TG，TNF-α，as well as the liver homogenate levels of TC，TG were significantly lower（P <0.01）in salvia injection group compared with model group. While the level of APN increased significantly in salvia injection group compared with model group. There were severe steatosis inflammatory cell infiltration and necrotic foci in model group rats. While the degree of fatty degeneration and inflammation were relieved dramatically in salvia injection group. Conclusions ：Salvia injection has the effects of regulating the levels of adipocytokines，and relieving steatosis of hepatocytes，so as to be used in treatment on NASH.Keywords：salvia injection；non-alcoholic steato-hepatitis；adiponectin；tumor necrosis factor alpha （TNF-α）DOI：10.13194/j.issn.1673-842x.2016.09.01118卷辽宁中医药大学学报持通风，普通饲料喂养，自由饮水。

1.2造模方法45只大鼠随机分为4组：正常组、模型组、丹参治疗组和西药对照组，正常组大鼠正常饮食，模型组、丹参治疗组、西药对照组大鼠参照钟岚等提出的非酒精性脂肪性肝炎模型建立，采用高脂饲料造模[2]：标准饲料的基础上再加13%猪油和2%胆固醇，自由摄食及饮水，每日更换饲料和水1次，饲养16周。

1.3给药方法丹参治疗组大鼠每日予丹参注射液（四川升和药业有限公司，批号04302）5 mL/ kg腹腔注射，西药对照组大鼠每日予还原型谷光甘肽钠溶液（山东绿叶制药有限公司，批号12234）10 mL/kg腹腔注射（丹参注射液及谷胱甘肽钠溶液治疗量均相当于成人用量的20倍），正常组和模型组大鼠每日腹腔注射等量生理盐水，连续16周。

1.4检测项目及检测方法1.4.1 大鼠肝湿质量及肝指数摘取的全肝脏称重为肝湿质量，并计算肝指数，肝指数（%）= 肝湿质量/大鼠体质量×100%。

1.4.2 病理学检查造模后第16周末，各组大鼠禁食12 h，饮水不限，予2%戊巴比妥钠麻醉后沿腹中线开腹，腹主动脉取血，快速取出肝脏，予4%多聚甲醛固定肝组织，常规石蜡包埋、切片、HE染色，光镜下评估各组大鼠肝组织炎症活动情况，炎症活动度积分评估标准参照王泰龄等提出的慢性肝炎炎症活动积分方案[3]。

1.4.3 血清胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）含量检测及肝匀浆TC、TG含量检测采用全自动生化仪检测血清TC、TG。

取部分肝组织制成10%肝组织匀浆，分别采用高铁硫酸比色法测定TC含量，乙酰丙酮比色法测定 TG含量。

1.4.4 血清脂联素、TNF-α水平检测均采用酶联免疫法（ELISA），严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.5统计学处理采用SPSS 14.0 软件进行统计学处理。

计量资料以均数±标准差（x—±s）表示，组间比较用方差分析，相关性分析采用Spearman进行分析，以P<0.05为差异有显著性。

2 结果2.1各组大鼠一般情况模型组大鼠较正常组大鼠进食增加，较少活动，皮毛凌乱，性情温驯，丹参治疗组及西药对照组大鼠介于正常组及模型组大鼠之间。

2.2肝脏大体标本观察肉眼观察正常组大鼠肝脏中等硬度，颜色呈暗红色，切面光洁稍有颗粒感，包膜光滑，边缘锐利；模型组大鼠肝脏弥漫性肿大，颜色呈奶油黄色或色泽稍苍白，包膜紧张，边缘圆顿，切面有油腻感而无颗粒感。

丹参治疗组及西药对照组大鼠颜色、质地介于两者之间。

2.3HE染色肝脏组织病理观察正常组大鼠肝小叶内无脂肪变性及炎症坏死，肝小叶结构清晰，肝细胞索排列整齐，肝窦清晰，肝细胞核结构清晰，无明显病变；模型组大鼠可见弥漫性肝细胞脂肪变、气球样变，多数肝细胞内可见大量大小不等的脂滴空泡，肝细胞索排列紊乱，小叶内见大量炎细胞浸润以及少量点状肝细胞坏死，部分坏死灶融合成片，未见明显纤维化。