山药多糖提取工艺优化及结构分析

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山药多糖的结构鉴定

山药多糖的结构鉴定

山药多糖的结构鉴定摘要:本实验对新鲜山药分离纯化得到的多糖进行结构表征。

通过对山药多糖的结构分析,为进一步利用山药开发医药、保健食品提供基础。

通过标准曲线分析得到山药多糖的糖醛酸含量为12.0%,乙酰基含量为18.5%。

傅立叶红外光谱结果分析表明多糖中含有糖醛酸,与化学法分析结果一致。

气相色谱-质谱联用分析结果显示山药多糖是由两种单糖组成的杂多糖,分别为葡萄糖和半乳糖,且摩尔比为1.52:1。

将样品甲基化后进行GC-MS分析得到3种类型的残基组成,分别为1,3-葡萄糖残基、-1-半乳糖残基、-1,6-半乳糖残基。

关键词:山药多糖;结构;仪器分析STRUCTURAL CHARACTERIZATION OF POL YSACCHARIDE FROM CHINESE YAMAbstract: The structure characterization of polysaccharide from Chinese Yam was analyzed in this study, which can support further development as healthcare food and pharmaceuticals in the future. The main contents and results are as follows: The chemical analysis results showed that the pure polysaccharide contained 12.0% uronic acid and 18.5% acetyl. Fourier infrared transformation analysis showed that the purified polysaccharide had the characteristic absorptive peaks, and that it contained uronic acid. Based on methylation and GC-MS analysis, the purified polysaccharide was composed of glucose and galactose with a molar ratio of 1.52:1, mainly including 1,3-linked-glc, 1-linked-gal and 1,6-linked-gal.Keywords: Yam polysaccharide; structure; instrumental analysis1.引言1.1 研究背景及意义山药是薯蓣属植物的地下块茎。

山药多糖的提取工艺及其生物活性研究现状

山药多糖的提取工艺及其生物活性研究现状
化 研究 。研 究 得 到 对 山药 多 糖 得 率 有 显 著 影 响 的 因 素
究 , 行 山 药 的 精 深 加 工 , 发 以 山药 多 糖 为 主 的 多 功 进 开
能生 物 制 品, 提高 人们 的健 康水 平有 十分重 要 取 时 间 和 提 取 次 数 。 以 山 药 多 糖 的 提 取 率 为 考 察
进 行 了 研 究 。得 到 了 山药 多 糖 提 取 的最 佳 条 件 为 : 处 预 理 时 间 4 h, 取 时 间 为 2 h, 度 为 6 提 温 0℃ , 液 质 量 比 料
了研究 。得到怀 山药 与怀地 黄多糖 同步 提取 的最佳 条
指 标 的 最 优提 取 工 艺 为 : 料液 比 1: 提 取 次 数 为 2次 , 8, 每次的提取时 间为 3 用 于醇沉 的乙醇 浓 度为 6 %。 h, 0 李 兰 等 通 过 单 因素 试 验 和 L 3 正 交 试 验 , 究 了 9( 4) 研 料 液 比 、 取 温 度 、 取 时 间 和 提 取 次 数 对 怀 山药 多 糖 提 提
山药 多 糖 的 提 取 方 法
1 1浸 提 法 提 取 山药 多糖 .
张 季 冬【 采 用 下 面 浸 提 步 骤 。 山 药 - 脱 脂 一 乙醇 3 +
回 流_ 热 水 浸 提_ 冷 却 一 离 心 分 离 一 减 压 浓 缩 - 醇 沉 + + +
提 取 率 和 含 量 的影 响 , 到 怀 山药 多 糖 最佳 的 提 取 条 件 得
用 光 度 分 析 法 、 因 素 分 析 法 及 正 交 设 计 法 , 提 取 的 单 对
对 醇 沉 浓 度 、 沉 时 问 和 醇 沉 次 数 进 行 考 察 。得 到 了水 醇
提 正 交 试 验 的 优 化 结 果 , 液 比 为 1: 0, 度 为 料 1 温

怀山药中多糖的提取与纯化

怀山药中多糖的提取与纯化

4.1提取条件对多糖率的影响
超声波功率对多糖含量的影响
由图1可知,使用超声波进行辅助提取与未使用相比,多糖含量有显著的提高;随着超声波功率的增加,多糖含量呈上升趋势。

超声波功率在150~200 W范围内,多糖含量较为稳定,当超声波功率达到250 W(超声波仪器最大允许工作功率)时,多糖含量有显著提高
由图2可知,在3O~5O℃的温度范围内,随着水提温度的升高,山药多糖含量逐渐增大。

在50~70℃温度范围内,随着水提温度的升高,山药多糖含量下降,这是因为山药中含有大量的淀粉,即其储能物质,而非通常所称的活性多糖。

温度过高,一方面使得淀粉在溶液中溶解度增加,另一方面使得淀粉糊化,影响后续的操作,给之后的分离等工艺带来困难。

由图3可知,在2O~60 min内,随着提取时间的延长,山药中多糖含量随之升高,60 min 末接近最大值,可见反应时间越长,提取越充分。

在8O~140 min,山药多糖含量趋于平缓。

因此,考虑实验指标的可观察性,选择水提时间30,60,90 min作为正交实验的三个水平。

由图4可知,开始时随着料液比的增加,山药多糖含量增长缓慢,料液比为1:1O时含量达到最高。

当料液比大于16,含量开始降低。

因此,选择1:10,1:12,1:16作为正交试验的三个水平。

均匀设计法优化山药多糖提取工艺的研究

均匀设计法优化山药多糖提取工艺的研究
《 江苏调味 副食品》 O 0年 第 2 21 7卷
文章编号 :06—88 (0 0 0 —0 1 0 10 4 12 1 } 1 00— 3
第1 ( 期 总第 1 1 ) 2期
均设法化药糖取艺研 匀计优山多提工的究
李 兰, 蒋爱凤
新 乡 4 30 ) 50 3 ( 南科技 学院生物 工程 系 , 南 河 河
0 前 言
目前 , 山药 多糖 的营养 价 值 和保 健 功 能 引起 了人们越来 越 多 的关 注 , 已逐 渐 成 为 国际 市 场 并

是 由于一部 分多 糖存 在 于 细胞 壁 中 , 取过 程 中 提
不 易溶 出 , 以耗 时 长 、 所 得率 低 ¨ 。本 研究 在 传
统 水提 方法 的基 础上 施 加 超声 波 处 理 , 通过 超 声
L n JA GA 一 g I a ,IN i }n l
( i nier gD pr n, ea ntueo cec n ehooy Xn i g H nn 4 30 ) Bo gnei eat tH nnIstt f ineadT c nl , ix , ea ,50 3 e n me i S g n a
关键词 : 药; 山 哆糖 ; 取 工 艺 ; 匀设 计 法 提 均
中图 分 类号 :S 5 . T 2 52 文献 标 识 码 : B
S ud n t x r c i n o i e e y m l s c ha i e ptmi e t n f r d sg t y o he e t a to fCh n s a poy a c rd s o i z d wih u io m e i n
i x rc i ae wa b an d r e ta t n r t so t ie . d o

山药多糖提取制备工艺

山药多糖提取制备工艺

03
山药多糖的提取工艺
原料预处理
清洗
去除山药表面的泥沙和其他杂质。
切片
将山药切成小块或片状,便于后续的提取操作。
干燥
将切好的山药块或片进行干燥处理,以便保存和 使用。
提取方法选择
热水提取法
利用热水将山药中的多糖成分提取出来,适用于初步 提取。
酶解提取法
利用酶分解山药中的纤维素等成分,提高多糖的提取 率。
选择适宜的原料粒度
根据具体的提取方法和设备,选择适宜的原料粒度以获得 最佳的提取效率和过滤效果。
06
结论与展望
研究结论
01
成功建立了山药多糖提取制备工艺,实现了山药多 糖的高效提取。
02
通过优化工艺参数,提高了山药多糖的得率和纯度 。
03
验证了所建立工艺的稳定性和可重复性,为后续研 究提供了有力支持。
02
山药多糖的生物活性与作用
免疫调节作用
增强免疫力
山药多糖能够增强机体的免疫功 能,提高抵抗力。
调节免疫系统
对免疫系统具有调节作用,促进 或抑制细胞因子的产生,从而影 响机体的免疫应答。
抗肿瘤作用
抑制肿瘤生长
通过抑制肿瘤细胞的生长和扩散,对多种癌症具有预防和治 疗作用。
增强化疗效果
与化疗药物联合使用,能够增强化疗药物的疗效,减轻化疗 副作用。
结构鉴定
采用红外光谱、核磁共振等方法对山药多糖的结 构进行鉴定。
ABCD
纯度分析
通过凝胶电泳、高效液相色谱等方法对山药多糖 的纯度进行分析。
安全性评估
对提取得到的山药多糖进行急性毒性试验、长期 毒性试验等安全性评估,确保其安全无毒。
05
工艺参数对山药多糖提取制备 的影响

山药多糖提取实验方案(最新)

山药多糖提取实验方案(最新)

山药多糖提取实验方案仪器与试剂:冰箱;PH计;恒温水浴锅;离心机;鼓风干燥箱;无水乙醇(分析纯);液氮;纯水。

实验步骤:取样称重(约2g)→磨浆→加水到一定料液比(b)→调节pH(d)→恒温(a)水浴→提取2h→离心(3000r/min,15min)取上清液A→沉淀再次提取→离心得上清液B→AB混合减压浓缩(60℃)→加一定量乙醇(c)4℃静置约10h→离心(3000r/min,30min)→干燥(40℃)→粗多糖。

正交法探究最佳提取条件(正交试验设计的基本特点是:用部分试验来代替全面试验,通过对部分试验结果的分析,了解全面试验的情况。

)分别按以下数据对各项影响因素设置梯度进行正交试验。

a. 提取温度:60℃;70℃;80℃;90℃;100℃b. 料液比:1:8;1:10;1:12;1:15;1:20c. 乙醇:浓缩液(体积):1:1;1:2;1:3;1:4;1:5d. pH:7.0;7.5;8.0;8.5;9.0四因素五水平正交试验,选用L25(56)正交表因素a.提取温度 b.料液比c. 乙醇:浓缩液(体积)d.pH蕲山药多糖提取率(%)1 60℃1:81:17.02 60℃1:101:27.53 60℃1:121:38.04 60℃1:151:48.55 60℃1:201:59.06 70℃1:81:28.07 70℃1:101:38.58 70℃1:121:49.09 70℃1:151:57.010 70℃1:201:17.511 80℃1:81:39.012 80℃1:101:47.013 80℃1:121:57.514 80℃1:151:18.015 80℃1:201:28.516 90℃1:81:47.517 90℃1:101:58.018 90℃1:121:18.519 90℃1:151:29.020 90℃1:201:37.021 100℃1:81:58.522 100℃1:101:19.023 100℃1:121:27.024 100℃1:151:37.525 100℃1:201:48.0标准曲线的制备1、对照品溶液的制备。

山药多糖提取工艺响应面法优化

山药多糖提取工艺响应面法优化

l材料与方法
1.1 1.1.1
主要原料、试剂及仪器 实验原料
山药饮片,产地河南,安徽德昌药业饮片有限公司生产。
1.1.2
实验试剂 实验仪器
无水乙醇、无水乙醚、丙酮、甲醇、正丁醇、硫酸、苯酚、三氯甲烷、葡萄糖,均为AR。
1.1.3
722E型可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司),DK-S24型电热恒温水浴锅(上海精宏实验设备有限 公司),BSl24S型电子天平(北京塞多利斯仪器系统有限公司),RE52CS旋转蒸发仪(上海亚龙生化仪器厂), 800B离心机(上海安亭科学仪器厂),DHG9123A型电热恒温鼓风干燥箱(上海精密实验设备有限公司)。
M,MITAINE-OFFER A C.MIYAMOTO T,et a1.A new phenanthrene glycoside and other constitu
from dioscorea
opposite[J].Chem
Pharm Bull,2004,52(10):1235—1237.
[23 [3]
ZHU Ai—shi,CHENG Zhong
(School of
Biological and Chemical Engineering,Zhejiang University of Science and Technology,
Hangzhou 310023,China)
Abstract:The optimization experiment of active polysaccharide extraction of Chinese yam was carried out,in which yam polysaccharide yield was taken factor experiments,a three—factor(extraction ratio)一three-level experiment design has been

怀山药活性多糖提取条件优化

怀山药活性多糖提取条件优化
e ta to o iin wa ee m ie a c o dngy t e n e ta tngo n s a p ls c a i . xr ci n c ndto s d tr n d, nd a c r i l o beus d i x rc i fChie ey m oy a eh rde Thesngef c i l a -
第3 6卷
第 2期
河 南 科 技 学 院 学 报 (自然科 学版 )
J u n lo n n Isi t fS in ea d T c n lg o ra fHe a n t ueo ce c n e h oo y t
20 0 8年 6月
Jn 2 0 u .0 8
Vo . 6 No 2 13 .
著 的 因素 为 : 水 比 , 取 次 数 。 怀 山 药活 性 多糖 最 佳 的 提 取 条 件 为 : 提 时 间在 3 , 提 料 液 比 为 1 1 , 料 提 浸 h浸 :0 浸提 次 数 为 3次 。 利 用 最佳 的提 取 条 件做 重 复 实验 , 使 多糖 平 均 得 率 达 到 1 . 8 . 可 7 1% 关键词 : 山药 ; 怀 活性 多糖 ; 因 素 实验 ; 交 实验 单 正
tr e t c in t mp r t r ,e t c in d g e s a d e t c in t n t ey ed a d c n e to c ie p l s c h rd , n h e , x r t e ea u e x r t e re n x r t i o il n o t n fa t o y a c a i e a d t e a o a o a o me h v
怀 山药 活 性 多糖 提 取 条 件 优 化

山药多糖的提取分离和结构测定

山药多糖的提取分离和结构测定
山药多糖的提取分离和结构测定
乔善义&! ,王立岩! ,赵毅民& ,张永祥& ,姚新生!
& 军事医学科学院毒物药物研究所, 北京 ! 沈阳药科大学天然药化教研室, 沈阳 &&""&1 &"",%";
【摘
要】 目的: 提取分离并测定山药多糖的结构。方法: 依次用水提取, 乙醇和十六烷基三甲基溴胺盐
沉淀法得到粗多糖; 用葡聚糖凝胶柱层析和高效液相层析纯化多糖并测定分子量; 甲基化分析和薄层层析分析 多糖酸水解产物, 结合 @A 和&# B’CA 确定单糖组成、 连接方式和端基碳构型。结果: 从山药中得到两个均一多 糖 D& 和 D! 。结论: 它们均为 [ (&"-) D& 和 D! 的分子量分别为 1# """ 和 + -"" E70, $ !$F09 $] ? 型葡聚糖。 ! 【关键词】 山药; 多糖; 结构鉴定 【中图分类号】 G%#*, A!,- ) ! 【文献标识码】 3 【文章编号】 &1+!$#1%& (!""#) "#$"&%%$"#
糖的作用特点和结构, 探讨多糖的构效关系, 我们 对山药多糖进行了研究。从山药中分离得到两个 中性多糖 D& 和 D! , 并应用化学和光谱方法, 对其结 构进行了鉴定。 ! &J& 材料和方法 药 材
燥得到中性多糖部分, 记为 D\O; B.3K 沉淀 用 离心除去不溶物, 适当浓缩后用 6(0 Z Q ’7B0 溶解, 沉淀经冷冻干燥得到酸性多糖部 *%[ 乙醇沉淀, 位, 记为 OO.。 D\O 和 OO. 经紫外检测 !," ?6 无 吸收, 说 明 基 本 无 蛋 白 类 成 分。 D\O 经 D/LH7M/N (洗 脱 剂 为 水, 流 速 为 !" 60 Z %" F$&"" 凝 胶 层 析 , 苯酚$硫酸法检测, 合并主要吸收峰馏分, 冷 68?) 冻干燥得纯化多糖 D& 和 D! 。凝胶层析图见图 &。 &J纯度检查和分子量测定 采用 SOQB 法检查所得多糖的纯度和测定分 子量。柱为 OH/?(6/?/N 的 K8(>/L D5B$D#""" (#"" X , 流动相为 "J! 6(0 Z Q ’7B0, 流速为 & 60 Z +J, 66) 根据峰形判断样品纯度。由标准 E/NP:7? (分 68?, 子 量 分 别 为 %+ !"", -# """, !& -"", &+ %"", % """ 的分子量对数与保留时间求得标准曲线, 求出 E70) 回归方程为 0Y + ] +J-" ^ "J#" ( 。 * & ] ^ "J**%" )

山药多糖的一种简易分离与提纯方法

山药多糖的一种简易分离与提纯方法
唐 微 , 朱 明磊 , 孙设 宗
4 20 ) 4 0 0
( 郧阳医学 院生化 教研室 , 湖北 十堰
山药 多糖 具 有 抗 氧化 、 衰老 ¨ 等 多种 功 效 。 抗 圳 勾 我们 利 用 山药 多 糖 溶于 热水 而 不溶 于 乙醇 等有 机 溶 剂 的特 点 , 索 了一 种 简 便 、 效 的 山 药 多 糖 分 探 高
离 、 纯 方法 。 提 1 山药 多糖 的 结构 特 点
42 去蛋 白 .
将 提取 的粗 山药 多糖 按 1 1 比例 加入 蒸 馏 : 0的 水, 混匀 , 蛋 白酶去 除蛋 白 ; 次用 木 瓜 蛋 白酶 , 加 依 胰 蛋 白酶 进行 水 解 , 用 1h 再 加 入 氯 仿 ; 戊 醇 ( 作 ; 异 5
传 统 的 山药 多糖 提取 方 法较 为 复 杂 、 时 , 消 费 且 耗试 剂 较 多 J 。该 法 不 需 特 殊 试 剂 和 设 备 。简 便
白酶 , 氯仿 , 醇 , 2 2等 。 异 H0
4 提 取 步骤 4 1 山药 多糖 的粗 提 .
易行 。且提取效率 和纯度均较高 , 用于实验研究 可
3 仪 器 及试 剂
山药 多 糖 。此 种 方 法 的 提 取 率 为 6 , 度 约 为 % 纯 9 % , 满 足实 验研 究 的要 求 。 2 可
5 此 法优 点
主要 仪器 : 电炉 , 钢精 锅 , 箱 , 布 , 心机 等 。 烘 纱 离
主要 试 剂 :5 , 无 水 乙 醇 , 瓜 蛋 白酶 , 蛋 9% 、 木 胰
: 1 , 以看 到凝 胶 状 沉 淀 , 去 沉 淀 即得 无 蛋 白 )可 除 山药 多糖 。
4 3 脱 色 .

山药多糖的分离纯化及其结构鉴定

山药多糖的分离纯化及其结构鉴定

以及GC- MS分析测定该中性糖为葡萄糖和甘露糖组成, 其摩尔比为0.56∶0.44。红外光谱和NMR谱分析
显示该中性糖有α- 异构体吡喃己糖环, 它们归属为α- D- 葡萄糖和α- D- 甘露糖。
关键词: 山药; 多糖; 纯化; 结构
中图分类号: TS201
文献标识码: A
文章编号: 1005- 9989(2007)05- 0109- 04
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
分离纯化获得山药水溶性多糖的理化性质测定 显示: 硫酸- 苯酚反应和硫酸- 蒽酮反应呈阳性, 考 马斯亮蓝反应呈阴性, 这与山药水溶性多糖的紫外 扫描图所反应的在260nm和280nm处未见核酸和蛋白 质的特征峰的结果一致(见图3)。菲林试剂反应呈阴 性, 碘- 碘化钾反应呈阴性, 说明山药水溶性多糖中 不含淀粉。分离纯化获得山药水溶性多糖的比旋光 度[α]D为+162.5°。分离纯化获得样品的理化性质测定 结果显示, 样品纯度高, 属于水溶性中性多糖。
树莓多糖的提取率在3.44%到5.70%之间波动。
4 结论
本试验采用热水浸提法提取树莓多糖的最佳工 艺为温度100℃、提取时间60min、物液比为1∶10, 分 析表明温度因素是影响多糖提取率的主要因素, 此
条件下树莓多糖的提取率在3.44% ̄5.70%波动。
参考文献: [1] 田庚元.天 然 多 糖 的 研 究 与 应 用[J].中 草 药,2000,(10):40-
由图1可以看出, 在不添加离子强度的洗脱条件 下山药水溶性多糖在DEAE- Cellulose52上只有一个 峰, 而且收集该峰的糖液浓缩, 经Sephadex G- 100 (见图2)追踪检测, 仍然为一个峰, 这说明山药水溶 性多糖在经过DEAE- Cellulose 52柱即可完全分离。

山药多糖大生产工艺

山药多糖大生产工艺

山药多糖大生产工艺一.概述山药多糖,外文名称Polysacchrides from Dioscorea opposita或Chinese yam polysaccharides, 是天然植物山药块基中的水溶性多糖,主要D-葡萄糖、D-甘露糖、D-半乳糖、岩藻糖等单糖组成,平均相对分子质量81000(另有报道为42200),主要由带有分支点的1-4糖甙键连接的葡萄糖骨架构成,同时也含有1-3键型的岩藻糖。

山药多糖为白色粉末状,无甜味,易溶子热水,难溶于高浓度的乙醇、乙醚、丙酮和氯仿等有机溶剂,可水解降级;与硫酸-苯酚试剂作用显棕红色反应,与硫酸-蒽酮试剂反应呈深绿色。

山药多糖有很强的生理活性功能,具有免疫调节作用,抗衰老、抗突变、抗肿瘤和抗氧化作用,在免疫调节方面,山药多糖可不同程度提高T淋巴细胞增殖能力、NK细胞活性、血清溶血素活性、血清IgG含量,也能增加巨噬细胞的吞噬能力,既有非特异性免疫功能,又可提髙特异性细胞免疫和体液免疫功能。

原料山药块茎是一种药膳两用的植物块茎, 主产于我国河南、河北、山东、山西、陕西等地,为山药多糖的可持续性生产提供了丰富绿色资源。

以植物山药为原料,采用水浸醇沉的物理方法提取山药多糖,再用层析法等方法纯化,工艺过程无有害物质生成; 原料清洁,生产中所使用的乙醇等有机溶剂均回收利用,可实现清洁生产。

层析法是当今最为有效的分离、分析方法之一,它具有分离效能高、常温操作、设备简单等特点, 特别适合于天然生物成分的提取与纯化。

经浸提制取山药多糖后的山药滤渣,仍含有丰富的营养和生物活性物质,综合利用价值高,经济效益好。

山药多糖能提高人体免疫力,促进血液中白细胞的吞噬功能,有抗衰老、抗病毒、抗肿瘤、抗突变、抗氧化作用,还有降低血糖、血脂和胆固醇等作用; 山药多糖药用价值高,无毒副作用,对人体有很好的医疗和保健功效,是一种有益于人类的环境友好产品。

二.生产工艺山药中提取多糖工艺是以水为溶剂,加热浸取,浸取液的去杂、分离山药多糖。

正交实验法优选山药多糖的提取工艺

正交实验法优选山药多糖的提取工艺

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参考文献(5条) 1.姜芳婷;李明静;史会齐 山药及其同属植物参薯中多糖含量的测定[期刊论文]-化学研究 2004(03) 2.杨武德;李白玲;冯靖 山药及不同炮制品多糖含量分析[期刊论文]-贵阳中医学院学报 2004(03) 3.赵国华;陈宗道;李志孝 山药多糖对荷瘤小鼠免疫功能的影响[期刊论文]-营养学报 2003(1) 4.赵国华;王赟;李志孝 山药多糖的免疫调节作用[期刊论文]-营养学报 2002(2) 5.胡国强;杨保华;张忠泉 山药多糖对大鼠血糖及胰岛释放的影响[期刊论文]-山东中医杂志 2004(04)
<:!D(!结果表明该工艺稳定可行 % 论 " 讨
虽然加水量对山药多糖的得率在统计学意义上 没有影响 ! 采用 D 倍量水更能节约能源 ! 但山药药用 部位属根茎 ! 其质地较为坚硬 ! 热回流过程中会被吸 去一部分水量 !加水量太少会使提取液过于黏稠 ! 容 易有胶状物悬浮 !所以最终确定为 @ 倍量水提 % 本实 验优选出的工艺操作简单 !经济可行 ! 为山药多糖水 提醇沉工艺的选择提供了一定的参考 %

浅谈山药多糖的提取、分离、功能性及其功能食品工艺2500字

浅谈山药多糖的提取、分离、功能性及其功能食品工艺2500字

浅谈山药多糖的提取、分离、功能性及其功能食品工艺2500字论文题目: 浅谈山药多糖的提取、分离、功能性及其功能食品工艺摘要:不断完善山药多糖的提取和分离技术, 探究山药多糖的功能性, 并优化山药多糖的功能性食品工艺, 有利于促进山药多糖的功能性发挥, 提升人们的免疫力.本文在对山药多糖的提取和分离技术进行综合阐述的基础上, 着重对山药多糖的功能性进行了探索, 并分析了山药多糖的功能性食品工艺, 以期为相关人士提供借鉴和参考.关键词:山药多糖; 固液比; 功能性食品;随着社会经济的不断发展和社会生产力水平的进一步提升, 对多糖的研究成为生物学家和化学家研究的热点问题.实践研究表明, 山药具有较高的药用价值, 能够辅助糖尿病和肾脾病的治疗.山药多糖具备一定的药理活性, 能够有效提升人体的免疫力.因此, 不断完善山药多糖的提取和分离技术, 探究山药多糖的功能性, 并优化山药多糖的功能性食品工艺, 具有十分重要的现实意义.1 山药多糖的提取和分离(1) 选择新鲜的山药, 清洗干净, 去皮切块, 使用豆浆机将其打成糊状, 为了防止山药的黏液发生褐变, 在使用豆浆机将其打碎的过程中应加入浓度为0.15 mol/L的Na HSO3, 使用离心机将山药的黏液进行分离后, 提取清澈的上清液, 然后将定量的水加入山药的沉淀物里, 使用离心机再次离心, 去除沉淀的物质, 获得洗液.分别将上清液和洗液中加入适量的碘化钾, 观察其是否会出现变色, 若无变色现象发生, 则表明山药的上清液和洗液中不含淀粉.将上清液和洗液充分混合, 在温度为45℃的真空环境下浓缩, 滤除水分, 将所得的山药黏液质原液在0~4℃的条件下保存备用[1]. (2) 固液比、提取时间、提取温度和提取次数是影响山药多糖提取效率的关键, 目前, 一般通过单因素实验的方式为山药多糖的提取提供合理的参考依据.实验结果表明, 提取温度实验的提取次数应设置为1次, 提取时间为60 min, 固液比为1:5.固液比实验的提取次数应设置为1次, 提取时间为60 min, 提取温度应设置为45℃.提取时间实验的提取次数应设置为1次, 提取应设置为45℃, 固液比为1:4. (3) 采用40℃的温水对山药粉进行抽提和过滤, 在温度为42℃的条件下真空浓缩至一定体积, 按照1:4的比例将浓缩液用乙醇过滤, 于次日进行干燥反复溶, 将a-淀粉酶加入副溶液中, 并使用离心机在55℃的条件下离心30 min, 将蛋白质用10%的三氯乙酸滤除, 流水透析48 h, 然后依照1:4的比例, 将透析液加入乙醇沉淀, 再次离心, 将沉淀物在真空环境下干燥, 获得山药多糖, 即完成山药多糖的提取和分离过程[2].2 山药多糖的功能性研究2.1 山药多糖对淀粉酶的抑制效果在淀粉溶液中加入a-淀粉酶会产生特异性反应, 淀粉溶液会呈现深蓝色, 在使用a-淀粉对山药多糖进行降解后, 逐渐变为红棕色.其中, a-淀粉酶活性是溶液颜色速度变化的关键.吸取山淀粉溶液20.0 m L置于试管中, 并在试管中加入5 m L的磷酸缓冲液, 将试管置于70℃的热水中预热5 min, 将1 m L山药多糖溶液和待测a-淀粉酶溶液加入试管中, 充分摇匀, 待其反应5min后, 立即将其加入盛有5 m L碘液和0.5 m L盐酸溶液的试管中, 摇匀, 测试山药多糖对淀粉酶的抑制效果.实验结果表明, 山药多糖对淀粉酶具有一定的抑制效果, 能够起到降血糖的作用.2.2 山药多糖对O2自由基的清除效果将4.5 m L的盐酸缓冲液与3 m L的蒸馏水充分混合, 在25℃的温水中预热20 min, 将2 m L的山药多糖溶液加入试管中, 再加入0.5 m L的邻苯三酚, 充分摇匀后倒入比色皿, 每隔30 s对比色皿进行扫描, 测试山药多糖对O2自由基的清除效果.实验结果表明, 山药粗多糖对O2自由基具有一定的清除效果, 而其他多糖则不具备清除O2自由基的功能.3 山药多糖的功能性食品工艺(1) 选择新鲜的山药, 清洗干净, 去皮切块, 将其放入护色液中灭酶.由于山药中多酚氧化酶的含量丰富且活性较高, 因此, 在制作山药功能饮料的过程中, 应加强对山药的灭酶处理, 防止褐变对产品质量产生的不良影响.本次山药功能饮料的制作选择1.5%的柠檬酸、0.3%的异vc酸钠, 11.5%的氯化钠制作成混合液, 并将山药浸泡其中.然后, 将经过灭酶处理的山药使用捣碎机打碎, 形成糊状.为了防止山药出现变色情况, 应在打浆前在山药中加入适量的异vc酸钠.将山药浆液置于离心机中, 以4 000 r/min的速率离心15 min, 获取上清液和沉淀物质. (2) 依据1:1的比例在沉淀物中加入水, 加入a-淀粉酶分解成沉淀物质形成葡萄糖和低聚糖, 在95℃的条件下, 在沉淀物中加入10 U/g淀粉酶, 离心30 min, 获得酶解液后再次离心, 将上清液和离心后所得液体进行充分混合, 获得山药汁.在山药汁中加入0.1%的复合乳化剂和8%的白砂糖, 加热形成固体山药浓缩物质, 加入15%的麦芽糊精充分混匀, 并将其置于20℃下杀菌处理, 然后对其进行喷雾干燥, 形成山药功能饮料.4 结论通过以上研究发现, 在提取和分离山药多糖的过程中, 能够有效提升提取的效率和效果.在此基础上, 探讨山药多糖的功能性, 有利于促进山药多糖药用价值的有效利用.此外, 基于山药多糖的功能性研发视食品, 能够充分挖掘山药多糖的经济价值.因此, 在提取和分离山药多糖的过程中, 可以应用上述方法.参考文献[1]蔡锋隆, 洪中山.山药多糖提取及体外抗氧化活性研究[J].农业技术与装备, 2017 (7) :15-18, 21.[2]徐斗霞, 李国霜.紫山药多糖超声提取工艺研究[J].安徽农业科学, 2017 (4) :83-85.点击查看更多:功能性食品论文罗小芬.浅谈山药多糖的提取、分离、功能性及其功能食品工艺[J].食品安全导刊,2017(30):127.。

怀山药多糖的结构鉴定及活性评价

怀山药多糖的结构鉴定及活性评价

怀山药多糖的结构鉴定及活性评价怀山药多糖的结构鉴定及活性评价摘要:怀山药(Dioscorea opposita Thunb)是一种中药材,具有广泛的药用价值。

其中的多糖是其主要有效成分之一,具有多种生物活性。

本研究旨在对怀山药多糖进行结构鉴定,并评价其活性。

一、引言怀山药是一种广泛分布于中国南方和东南亚地区的薯蓣科植物。

其根茎含有丰富的多糖,是一种重要的中药材。

怀山药多糖具有多种生物活性,包括抗炎、抗氧化、免疫调节等。

因此,对怀山药多糖进行结构鉴定和活性评价具有重要的科学价值和应用前景。

二、材料与方法1. 实验材料:采集新鲜怀山药根茎,制备怀山药多糖提取物。

2. 结构鉴定:采用红外光谱(IR)、核磁共振(NMR)等技术对怀山药多糖的化学结构进行鉴定。

3. 活性评价:通过体外活性实验评价怀山药多糖的抗氧化、抗炎、免疫调节等活性。

三、结果与讨论1. 结构鉴定结果:通过红外光谱和核磁共振等技术,得到怀山药多糖的化学结构。

结果表明怀山药多糖是一种具有复杂多糖链结构的高分子物质,包含苷链和葡萄糖等单糖成分。

2. 活性评价结果:体外活性实验结果表明,怀山药多糖具有较强的抗氧化活性,可清除自由基,减轻细胞氧化损伤。

此外,怀山药多糖还具有一定的抗炎作用,可抑制炎症反应,减轻炎症病变。

同时,怀山药多糖对免疫系统具有一定的调节作用,可增强机体免疫功能,提高机体抵抗力。

四、结论本研究对怀山药多糖进行了结构鉴定和活性评价。

结果表明怀山药多糖具有复杂多糖链结构,并具有较强的抗氧化、抗炎和免疫调节活性。

这些发现为怀山药多糖的进一步研究与开发提供了重要的参考依据。

进一步研究怀山药多糖的机理和药效,有助于挖掘怀山药多糖的临床应用价值,并为新药研究和开发提供理论依据。

综上所述,本研究通过对怀山药多糖的结构鉴定和活性评价,发现其具有复杂多糖链结构并表现出抗氧化、抗炎和免疫调节等活性。

这些结果为怀山药多糖的进一步研究和开发提供了重要的参考依据。

山药多糖的提取分离工艺优化

山药多糖的提取分离工艺优化

山药多糖的提取分离工艺优化作者:张海明戴铭成张芳来源:《中国食品》2024年第08期山藥有“药食同源第一药”之称,其中含有大量的山药多糖,而山药多糖具备抗氧化、抗疲劳、降血糖等诸多功效。

本文对山药多糖的提取工艺优化展开了研究。

一、材料与设备实验所需的试剂与材料、仪器与设备,详见表1、表2。

二、实验与方法1.山药多糖的提取。

山药多糖的提取流程如图1所示。

2.山药多糖水浸提的单因素试验。

(1)浸出温度对山药粉水提多糖得率的影响。

设定浸出时长为3h,料水比为1:20,浸出温度为45℃、55℃、65℃、75℃、85℃、95℃,分别进行制取,以分析浸出温度对多糖得率的影响。

(2)浸出时长对山药粉水提多糖得率的影响。

设定浸出温度为90℃,料水比为1:20,浸出时长为1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h、3.5h,分别进行制取,以分析浸出时长对多糖得率的影响。

(3)料水比对山药粉水提多糖得率的影响。

设定浸出温度为90℃,浸出时长为3h,料水比为1:10、1:15、1:20、1:25、1:30、1:35,分别进行制取,以分析料水比对多糖得率的影响。

(4)山药多糖水浸提条件的正交试验设计。

根据单因素检验的分析结果得出结论,并制作L9(34)正交表,选取浸出温度(A)、浸出时长(B)和料水比(C)分别作为考虑的变量,将所有考虑变量设置为3个水平,浸提2次,结果如表3所示。

三、结果与讨论1.浸出温度对山药粉水提多糖得率的影响。

如图2所示,随着浸出温度的不断升高,多糖得率也在随之提高,其原因可能是,当浸出温度极低时,只有少量局部多糖能发生水解,溶解不充分,使得多糖得率偏低;随着浸出温度持续升高,多糖的溶解速率明显加快,导致多糖得率不断提高。

综合分析可知,提取山药多糖的最佳浸出温度为95℃。

2.浸出时长对山药粉水提多糖得率的影响。

如图3所示,随着浸出时间不断延长,多糖得率也相应进一步升高,当浸出时间为3h时多糖得率达到最高,此后随着浸出时间的再次延长,多糖得率开始呈现出下滑态势。

山药多糖提取制备工艺研究分析

山药多糖提取制备工艺研究分析

金华职业技术学院金件切!业扌丄术学航JINHUACOLLEGE OF PROFESSION AND TECHNOLOGY毕业教学环节成果(2011 届)题目山药多糖提取制备工艺地研究________________学院__________ 制药与材料工程学院_________专业_____________ 生物制药技术____________班级学号______________ 201031100380131 _________姓名指导教师2011年5月28日金华职业技术学院毕业教学成果目录摘要-2 -b5E2RGbCAP弓丨言-3 -plEanqFDPw1仪器与试药-4 -DXDiTa9E3d1.1 仪器-4 -RTCrpUDGiT1.2试剂-4 -5PCzVD7HxA2.2样品溶液地制备-5 -jLBHrnAILg2.3标准曲线地制备-5 -XHAQX74J0X2.4山药多糖提取工艺过程-6 -LDAYtRyKfE2.5山药水溶性多糖提取工艺地确定-7 -Zzz6ZB2Ltk3结果与讨论-8 -dvzfvkwMI13.1山药多糖提取工艺条件地确定-8 -rqyn14ZNXI3.1.1料液比对山药多糖提取得率地影响-8 -EmxvxOtOco3.1.2提取温度对山药多糖提取得率地影响-8 -SixE2yXPq53.1.3提取时间对山药多糖提取得率地影响-9 -6ewMyirQFL3.1.4提取次数对山药多糖提取得率地影响-10 -kavU42VRUs3.2山药多糖提取工艺地优化-11-y6v3ALoS893.2.1正交设计地因素和水平-11-M2ub6vSTnP3.2.2试验设计及考察指标-11 -OYujCfmUCw3.3醇沉工艺地优化-13 -eUts8ZQVRd3.4最优工艺实验验证-14 -sQsAEJkW5T4 分析与结论-14 -GMsIasNXk A谢辞-16 -TIrRGchYzg参考文献-17 -7EqZcWLZNX山药多糖提取制备工艺地研究金华职业技术学院生物制药技术摘要:目地:对山药多糖水提醇沉工艺进行研究,得出山药多糖地最佳提取工艺•方法:以山药总多糖为指标,采用分光光度法,单因素考察及正交设计试验法,对料液比、提取温度、提取时间、提取次数进行考察;并对醇沉浓度、醇沉时间和醇沉次数进行考察.结果:水提正交试验结果表明,料液比1:15,温度100°C,时间4h,提取2 次为最佳工艺条件.醇沉正交试验表明,醇沉后溶液浓度为80%,时间为12h,醇沉1 次.结论:该实验为山药多糖提取工艺地确定提供依据.lzq7IGf02E关键词:山药多糖、水提醇沉、正交设计试验法引言山药既是一种珍贵地药用植物,又是一种常见地食物.山药为薯蓣科植物薯蓣(Dioscorea oppositaThunb.)地干燥根茎⑴.山药性平,乃补益药中平稳之品.它平和地药性补而不腻, 补而不滞,常在临床上收到意想不到地功效.山药是我国传统名方六味地黄汤地主药之一,李时珍在《本草纲目》中将其功用概括为益肾气,健脾胃,止泻痢,化痰涎,润皮毛”五个主要方面⑵.现代医学研究表明,山药具有多种生物活性,其中多糖被认为是主要功效成分.本研究旨在明确其化学成分以及含量,对山药多糖进行提取,以山药总多糖为指标,确定其制备工艺和质量控制方法,可进一步揭示山药地实用价值、利用潜力和经济价值,米用正交试验优化提取工艺,为山药地深入研究打下基础.zvpgeqJIhk 山药多糖是极性大分子化合物,易溶于水,不溶于乙醇,常用水作为提取溶剂.多糖水溶液浓缩后,加入95%乙醇,醇沉地醇浓度根据多糖地结构和性质而不同,一般在70%—85%地范围内,静置24h后,分取沉淀,然后进行去小分子杂质、去蛋白质、-3- / 19去色素等处理,水层再进行醇沉,沉淀分别用95%乙醇、无水乙醇、丙酮洗涤,60C 减压干燥.NrpoJac3v1植物多糖地提取一般根据多糖地特性,即多糖是极性大分子化合物,易溶于水或酸、碱、盐溶液,而不溶于醇、醚、丙酮等有机溶剂,其特点是从不同地材料中进行提取,即相似相溶原理.一般工艺是:原料f水提f离心f醇沉f干燥f粗多糖.这是目前提取多糖最为常用地方法,本文采用水提醇沉地方法进行提取.1nowfTG4KI1仪器与试药 1.1仪器旋转蒸发器(RE-52AA上海亚荣生化仪器厂);循环水式多用真空泵(SHB III上海亚荣生化仪器厂);紫外可见分光光度计(UV-722N尤尼柯上海仪器有限公司);恒温水浴锅(北京永光明医疗仪器);定量移液器(上海求精玻璃仪器厂);万分之一电子天平(日本岛津);电热恒温干燥箱(202-OAB天津力泰斯仪器有限公司);离心沉淀器(800型上海手术机械厂).fjnFLDa5Zo1.2试剂葡萄糖(产地:石家庄和平,批号110401 )、无水乙醇、95%药用乙醇、浓硫酸、苯酚均为分析纯,山药(产地:河南省新乡市,安徽德昌药业饮片有限公司)tfnNhnE6e52方法与结果2.1对照品溶液地制备精密称取干燥置恒重地葡萄糖适量,置于250mL容量瓶中,用水稀释至刻度,摇-4- / 19匀,配制成浓度为0.354mg/mL地葡萄糖标准溶液,备用.HbmVN777sL2.2样品溶液地制备精密吸取山药饮片10.00g,加入95%乙醇100C回流提取2次(每次1h, 100mL), 过滤,滤渣分别以1:15地料液质量体积比(mg:mL), 100C提取4h,过滤.重复提取3 次,合并滤液,放至室温离心,除去淀粉沉淀.离心液浓缩至原体积地1/3,加无水乙醇至醇浓度为80%,静置过夜,离心.沉淀烘干后定容于100mL容量瓶,备用.V7l4jRB8Hs 2.3标准曲线地制备总糖含量测定方法以苯酚-硫酸法测定,通过精密吸取葡萄糖标准溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL置于50mL容量瓶中,加入6%苯酚溶液溶液1.0mL,摇匀,加浓硫酸 5.0mL,摇匀,放置10min,加水至刻度,摇匀.另取蒸馏水同上操作制得空白溶液,通过波普扫描确定在490nm处测有最大吸收(见图1),测定490nm处吸光度值,以吸光度值为纵坐标,浓度C为横坐标绘制标准曲线见图 2.经回归统计,得标准曲线方程A=32.218X+0.0077, r =0.9949,浓度在0.00708〜0.02124mg/mL范围内与吸光值线性关系良好.83ICPA59W9图1紫外扫描图谱表1标准曲线标准溶液0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0体积mL溶液浓度mg/mL 0.0354 0.07080.11620.1422 0.1775 0.2124吸光度A 0.109 0.256 0.378 0.473 0.559 0.702y = 32, 218x+0, 0077RP = CL 99490.005 0.01 0.015 0.02 0.025浓度m 呂mL图2标准曲线2.4山药多糖提取工艺过程将山药饮片切碎,加无水乙醇浸泡 72h (重复1次),过滤,将滤渣挥干乙醇,再 用无水乙醇重复浸泡一次,取滤渣,加水 20倍量加热、冷却、离心、沉淀(重复提取 3 次,每次4h ).合并3次离心液进行减压浓缩,提取浓缩液静置过夜,离心除去淀粉沉 淀,取上清液浓缩,浓缩液加无水乙醇至乙醇含量达80%,静置过夜后离心,透析,透析液加95%乙醇至乙醇含量达80%,最后沉淀,沉淀物干燥得山药粗多糖(白色) .工艺流程图见图3:mZkklkzaaPO8 6 4 2 0亠 • ■ ■o o o O <挫未密亠吸光度A 一线性(吸光度加干燥山药粗多糖图3山药多糖提取工艺流程图2.5山药水溶性多糖提取工艺地确定选取与山药多糖提取工艺密切相关地4个因素(料液比、提取温度、提取时间和提取次数)做单因素考察,确定山药水溶性多糖地提取工艺.在单因素考察结果地基础上进行L9(34)正交试验,优化提取工艺.选取醇沉时间、醇沉次数和醇沉浓度3个因素做单因素考察,确定醇沉工艺,进行L9( 33)正交试验,对醇沉工艺进行优化.AVktR43bpw3结果与讨论3.1山药多糖提取工艺条件地确定3.1.1料液比对山药多糖提取得率地影响取等量山药饮片8份,提取温度设定1OO C ,经过4小时提取3次后,对不同地料液比进 行提取比较,根据提取效果来确定最佳地料液比[4-5].结果见图4. ORjBnOwcEd表2料液比对山药多糖提取得率地影响料液比 (g/mL )1:51:101:151:201:251:301:351:40提取率(%)1.2234 1.5368 1.7645 1.5836 1.3820 1.1122 0.7872 0.6327图4料液比对山药多糖提取得率地影响试验结果表明,随着加水量增加,可溶性多糖含量先升高后逐渐降低,在 15倍时达到最大值,故加水量选为1 : 15. 2MiJTy0dTT 3.1.2提取温度对山药多糖提取得率地影响取等量山药饮片8份,每份料液比为1 : 15,经过4小时提取3次后,对不同地温度 进行提取比较,根据提取效果来确定最佳地提取温度.结果见图5. gIiSpiue7A15 0LL芒嚴蝦102030料液比Cg/mL)4050表3提取温度对山药多糖提取得率地影响温度 30 405060708090100「C)提取率 0.0256 0.0176 0.0368 0.0652 0.1855 0.1936 0.3219 0.8798(%)图5提取温度对山药多糖提取得率地影响该试验表明温度因素对山药水溶性多糖地提取有显著影响.随着提取温度地升高,可溶性多糖含量逐渐升高,100C 时达到最大值,故选提取温度为100C ,Eh0U1Yfmh 3.1.3提取时间对山药多糖提取得率地影响取等量山药饮片5份,每份料液比为1 : 15,分别回流3次,对不同地时间进行提取比 较,根据提取效果来确定最佳地提取时间.结果见图6lAg9qLsgBX表4提取时间对山药多糖提取得率地影响时间(小时) 1 2 3 4 5 提取率(%)0.51310.62460.71390.84530.743718 6 4 2 o o o Os1201 2 3 4 5 6时间(小时)图6提取时间对山药多糖提取得率地影响该试验结果表明,山药可溶性多糖含量随着提取时间先升高后降低,在 4h 达到最大值,故选取提取时间为4h.3.1.4提取次数对山药多糖提取得率地影响取等量山药饮片4份,每份料液比为1: 15,温度设定100C ,经过4小时提取,对不同地 次数进行提取比较,根据提取效果来确定最佳地提取次数•结果见图7WwghWvVhPE表5提取次数对山药多糖提取得率地影响提取次数1234(次) 提取率(%)1.2161.25761.25821.2578图7提取次数对山药多糖提取得率地影响1 8 0. 6 42 0 0.OI0. (芒M匿蝦提取次数结果可见,随着提取次数增加,山药多糖含量逐渐增加•但2次与3次、4次含量差别不是很大,故从高效提取角度考虑,选取2次为最佳提取次数.asfpsfpi4k3.2山药多糖提取工艺地优化3.2.1正交设计地因素和水平为了提高山药多糖地得率,采用L9(34)正交表,选用料液比、提取温度、提取时间、提取次数作为考察因素,每个因素拟订3个水平冋.见表6. ooeyYZTjjl表6因素水平表3.2.2试验设计及考察指标取山药饮片9份,每份10g,95%乙醇100C回流提取2次(每次1h,100mL),药渣按正交设计方案提取,提取液静置,待至室温离心除去淀粉沉淀,离心液浓缩至原体积地1/3,浓缩液加加无水乙醇至醇浓度为80%.计算多糖得率•结果见表7. BkeGuInkxI表7直观分析表实验号因素丫(%)A/料液比B/提取温度C/提取时间D/提取次数实验1 1 1 1 1 0.5560实验2 1 2 2 2 0.7542实验3 1 3 3 3 0.6818实验4 2 1 2 3 0.6668实验5 2 2 3 1 0.6901实验6 2 3 1 2 0.7445实验7 3 1 3 2 0.7242实验8 3 2 1 3 0.5940实验9 3 3 2 1 0.6523均值1 0.664 0.649 0.631 0.633均值2 0.700 0.679 0.691 0.741均值3 0.657 0.693 0.699 0.648极差0.043 0.044 0.068 0.108表8方差分析表F0.1-1 (2,2) =9, a =0.1因素偏差平方和自由度F比F临界值显著性料液比0.003 2 0.343 3.110提取温度0.003 2 0.343 3.110提取时间0.008 2 0.914 3.110提取次数0.021 2 2.400 3.110误差0.04 8注:a=0.1*表示有显著性差异. 根据方差分析可知,提取温度、时间、次数对山药水溶性多糖地提取影响较大•水提部分四个影响因素地主次顺序为提取次数〉提取时间〉提取温度〉料液比,最佳提取工艺为A2B3C3D2,即采用15倍量水于沸水浴中提取2次,每次提取4小时.PgdOOsRlMo3.3醇沉工艺地优化正交设计地因素与水平:根据影响醇沉工艺地因素,选择醇沉时间、醇沉次数、醇沉浓度3个主要因素作为考察因素,每个因素选择3个水平,进行实验,见表9.3cdXwckm15表9醇沉工艺因素水平表L9(33)表10醇沉工艺考察实验设计实验号A/醇沉时间因素B/醇沉次数C/醇沉浓度%Y(%)1 1 1 1 0.72422 1 2 2 0.89023 1 3 3 0.66824 2 1 2 0.80185 2 2 3 0.76536 2 3 1 0.64747 3 1 3 0.94888 3 2 1 0.72409 3 3 2 0.7921 均值1 0.761 0.825 0.699均值2 0.738 0.793 0.828均值3 0.822 0.703 0.794极差0.084 0.122 0.129根据极差分析可知,以多糖得率为指标,醇沉时间、醇沉次数以及醇沉浓度对多糖得率影响不大.醇沉部分三个影响因素地主次顺序为醇沉浓度〉醇沉次数〉醇沉时间,最佳提取工艺为A3B1C2.故为节省资源和操作简便,确定醇沉工艺为:醇沉后,溶液浓度为80%,醇沉 1 次,时间为12h. h8c52WOngM3.4最优工艺实验验证在得出最优工艺条件下,进行平行实验,以保证实验地准确性.条件:同一批号取两个以上相同地样品,以完全一致地条件(包括温度、湿度、仪器、试剂,以及试验人)进行试验,看其结果地一致性.v4bdyGious最优工艺地平行实验:取同一批次地山药饮片3份.1号实验,把山药切碎,加无水乙醇浸泡72h (重复1次),过滤,将滤渣挥干乙醇,再用无水乙醇重复浸泡一次,取滤渣,加水15倍量加热(100C)、冷却、离心、沉淀(重复提取2次,每次4h). 合并3次离心液进行减压浓缩,提取浓缩液静置过夜,离心除去淀粉沉淀,取上清液浓缩,浓缩液加无水乙醇至乙醇含量达80%,静置过夜后离心,透析,透析液加95%乙醇至乙醇含量达80%,最后沉淀,沉淀物干燥得山药粗多糖(白色).剩余2、3号实验同上步骤,取得结果见表11. J0bm4qMpJ9综述所上:经平行实验测定,在最优工艺条件下,多糖得率为0.9565%.表11最优工艺地平行实验次数B/提取温度~C/提取时间~D/提取Y 平均值~ A/料液比水平「C)(小时)次数(%)(%1 1:15 100 42 0.95432 1:15 100 4 2 0.9616 0.95653 1:15 1004 2 0.95354分析与结论由图4可知,随着料液比地增加,山药中多糖地含量先升高后下降,在1:15时达到最大值.由图5可知,山药多糖地含量随着提取温度地升高而逐渐升高,且在100C时达到最大值.由图6可知,随着提取时间地增加,山药多糖地含量先升高后降低,在4小时达到含量最大值.由图7可知,山药多糖地含量随着提取次数逐渐高,但2次与3次、4次得率差异不大,本着节约能源,提高效益地原则,故提取次数选择2次.XVauA9grYP根据单因素考察及L9(34)正交设计结果表明,以水溶性多糖得率为指标,提取温度、提取时间和提取次数对多糖得率有一定地影响•影响因素地顺序为提取次数>提取时间〉提取温度〉料液比,综合多糖得率,确定最佳提取工艺为:100C加15倍量水提取2次,每次4h.提取液加入无水乙醇至溶液醇浓度为80% ,醇沉时间12h ,醇沉次数为1 次.bR9C6TJscw谢辞我地论文能够如期完成是在导师悉心地指导下完成地,导师渊博地专业知识,严谨地教学态度,精益求精地工作作风,朴实无华、平易近人地人格魅力对我影响深远•不仅使我树立了远大地学术目标,掌握了基本地研究方法,还使我明白了许多待人接物与为人处世地道理•本论文从选题到完成,每一步都是在导师地指导下完成地,倾注了导师大量地心血.对此,我谨表示最诚挚地感谢!并衷心地祝愿他身体健康,工作顺利!pN9LBDdtrd 另外,我还要感谢杭州萧山平民大药房给了我实习地机会,让我更好地锻炼自己,充实自己地知识•感谢单位带队老师对我地指导与关照,感谢其他同事地照顾与帮助,是他们让我更有自信地去实践,更相信自己.DJ8T7nHuGT 本论文地顺利完成,离不开各位老师、同学和朋友地关心和帮助.此外,我要感谢大学所有老师对我三年来地教育和培养.在三年地大学生活中,我不仅学习了大量地理论知识,开阔了视野,学到了很多在实际生活中有用地东西.QF81D7bvUA最后感谢各位评审老师对我论文地指导!参考文献[1]国家药典委员会•中华人民共和国药典2005版(一部)[S].北京:化学工业出版社,2000 : 21. 4B7a9QFw9h[2]李时珍.本草纲目(下册)[M].北京:人民卫生院出版社,1982,1 : 676-679[3]徐琴,徐增莱,沈振国.山药多糖提取工艺地研究[J].食品工艺科技(工艺技术),2006, 27 (12): 117-121. ix6iFA8xoX[4]乔善义,王立岩,赵毅民.山药多糖地提取分离和结构鉴定[J].中国天然药物,2003, 1 (3): 155-156. wt6qbkCyDE⑸孟庆华,刘钟栋,陈肇琰.山药多糖地提取[J].食品工艺科技(工艺技术),2005,2 : 126-128. Kp5zH46zRk[6]孙锋,谷文英,丁霄霖.山药多糖地提取工艺[J].食品与生物技术学报,2006, 25 (3): 79-83. YI4HdOAA61[7]李凤,程道梅,金红,等.铁棍山药水溶性粗多糖地提取工艺研究[J].安徽农业科学,2008,36(11): 4556-4557. ch4Pjx4Bli[8]程林,陈斌,蔡宝昌.正交实验法优选山药多糖地提取工艺[J].中国药物与临床,2005,5(9): 650-651 . qd3YfhxCzo[9]丁玲,王东,刘宁.山药多糖提取工艺地研究[J].辽宁中医药大学学报,2009,11(10): 158-159. E836L11DO5[10]王刚,杜士明,肖淼生.山药多糖地提取分离及山药总多糖地含量测定[J].中国医院药学杂志,2007,7(10):1414-1416.S42ehLvE3M[11]李兰,蒋爱凤,李坤.怀山药活性多糖提取条件优化[J].河南科技学院学报(自然科学版).2008,36(2): 63-66501nNvZFis版权申明本文部分内容,包括文字、图片、以及设计等在网上搜集整理.版权-17 - / 19为个人所有This article in eludes some parts, in cludi ng text, pictures, and desig n. 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酶法提取山药中多糖的工艺研究

酶法提取山药中多糖的工艺研究
cy of
tlle scientific
and
accura.
muhicriteria optimization of the extraction technology about Chinese traditional compound drugs.
[Key words]AHP;Chinese
traditional drugs;optimization of the extraction
万方数据
第33卷第4期 2008年2月
中国中药杂志
China Journal of Chinese
V01.33,Issue

Materia Medica
Febru佳条件,并研究酶超声提取联合提取的效果,以得出优化的最佳提取工艺。结果:
d一淀粉酶作用的最佳条件为:55
酶8 mg,无水CaCl2
0.03 图5
超声时I司对多糖得率的影响
g,50℃水浴振荡,每30
min
超声波有促进有效成分溶出的作用,同时又可 能破坏目标成分,所以并不是超声时间越长越好,最 佳超声时间要根据超声的强度及所提成分结构等的 不同,通过实验来确定。本实验中以5 min最好,提 取率为6.792
而仅一淀粉酶能且只能水解a一1,4糖苷键,仅一淀粉酶 的加入有可能会将这部分多糖破坏掉,但不会影响 苯酚一硫酸法的测定结果。(仅一淀粉酶的水解产物是 麦芽糖、麦芽三糖和糊精,仍然可在硫酸作用下水 解、脱水生成糖醛类化合物,与酚类、芳胺类等合成 有色化合物)。究竟总糖得率为什么会下降,又为 什么会出现反复,还不清楚。 2.1.2反应温度的影响称取10 g怀山药粉末, 加a-淀粉酶8 mg,无水CaCl2 定总糖提取率,结果如图2。

山药多糖的提取方案

山药多糖的提取方案

山药多糖的提取(理论提取率5.16%)
饮片预处理:①粉碎山药于恒温50℃烘干4h
②粉碎至粉末干燥待用
粗提:
粉碎的山药加入乙醇(80%以上)90℃热水浴回
①除去杂质;②使山药不易糊化流间歇搅拌(2h)
离心得提取液残渣再用乙醇合
提取一次(2h)
并提取液离心收集沉淀沉淀物依次用乙醇、丙
(上清液回收乙醇)酮、甲醇抽洗
挥发溶剂,干燥保存残渣物在物水比1:20,60℃恒温水浴2h,提取一次离心分离得沉淀上清液浓缩后加乙醇醇析沉淀用蒸馏水复溶加乙醇再次醇析沉淀依次用40ml无水乙醇、无水乙醚、丙酮洗涤(除杂,干燥,得山药粗多糖)
精提:
采用Sevage法除蛋白:用少量双蒸水溶解粗多糖,混匀后按4:1 加入氯仿正丁醇(5:1)混合液,振摇20min,可见凝胶状蛋白质洗出,离心出去。

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第二章材料与方法
2.1仪器和设备
Bs—160A自动部分收集器
卜海沪西分析仪器厂
TH一型梯度混合器
卜海精科实业有限公司
BTi00~100M型恒流泵
保定兰格叵流泵有限公司
分光光度计HP一6010
美国惠普公司
离心机20PR一52D
日本日立公司
真空泵sHB.1ll
郑州长城科工贸有限公司
旋转蒸发器R系列
卜海申生科技有限公司
浙江人学顺’f‘学位论文
标准蛋白溶液:准确称取标准蛋白质,配制成浓度为1m咖L的溶液。
待测蛋白溶液:配制成浓度约为lm∥mL的溶液。 操作方法
标准曲线的绘制:安下表分别向每支试管加入各种试剂,摇匀。用石英比色杯
在280nm波长处分别测定各管溶液的A:80。以A280值为纵坐标、蛋白质浓度为
白以施ms D已cm已polysaccharide Key words: DioscD地口6口搬纪s D已cm已polysaccharide pufification
separation stmcture analysis optiInization

浙江人学颂士学位论文
分子量测定常用的方法有层析柱法和高效液相色谱法。赵国华等人以 Dextran系列标准品的分子量与对应的洗脱体积作标准曲线,再根据多糖的洗脱 体积求得分子量:乔善义等人采用HPLc法检查所得多糖的纯度和测定分子量, 由标准Dextran(分子量分别为52700,43000,21400,17500,5000)的分子量 对数与保留时间求得标准曲线,求m回归方程,再根据保留时间求出样品的分 子量㈣。
and non—electriferOus polysaccharide were separatedf0Hn the 扫俄8觏s Decmg,which canbeused forstnlcturean出ysis. Gaschromatogramanalysis showed that the electriferouspolysaccharide was made up of,non—electriferous polysacchar主de was made up of,HPLC analysis testified the moIecular weight of eIectriferous polysaccharide
荔潇H譬雩耋.莲:
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分霪 离的囊 USB功叁 能设鋈 备。墓 图2.蓥 8是复h合u 设备 b的和 逻辑几 结构图个 。 与之不可
2.3.4数据流模 型简介
有了上一节对us B主机和设备的认识,这一节我们介绍UsB系统的数据流。 在这里我们不关注 信号具体的物理形式和传输方式等细节,相关的内容将在后面 几节介绍。
沉淀时酒精浓度70%,离心转速190 ×g,所提取的粗多糖含纯多 糖为20%。分离纯化从山药入手,脱除蛋白质与酒精沉淀后,采用 离子交换树脂DEAE一52和Sephadex
甘露糖、半乳糖组成,其组成比例为8:16:25:10,酸性多糖主要 由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖组成,其组成比例为7: 3:11:19:18。高效液相色谱分析可知中性多糖和酸性多糖的分子。 量分别为15598D和21500D;红外分析可知中性多糖和酸性多糖分 别含有吡哺糖和Q.糖苷键构型。
This research wo血would establish a strong basement for the
applications of Diojco坩口扫以加mJ DPcmP polysaccharide in drug indust彤
and also point out the efficient way to industrialized ex廿act of Di。占∞他。
性蛋白酶42℃作用211r,离心取卜清浓缩到200m1,1900×g离心20血n后取卜
清加入酒精浓度到70%,1900×g离心lOIIlin取沉淀溶于水后再透析2—3d, 将透析后糖液浓缩到10ml。将此样液首先卜-DEAE一52层析柱,分离m中性多 糖和酸陛多糖后再卜-sephadexG一100柱层析,由此可得到纯净的山药多糖。 2.33多糖含量测定
本研究将采用单因素设计、正交试验和中心组合试验,结合数理统计方法 进行工艺优化,并采用多元线性回归分析建立数学模型,最终获得最佳多糖提 取工艺,为工业化放大提供基础。同时进行山药酸性多糖和中性多糖分离纯化, 在此基础上测定多糖的分子量、组分和摩尔比,并用现代仪器分析表征多糖的 部分结构。
浙江人学硕十学位论文
and non—electriferous polysacch砸de are 15988 and 21500D,inf}ared
spectnlm showed that elec讲ferous polysaccha矗de is Ⅱ ’epirrIers
91ycosidic bond,non—electriferous polysacch撕de is pyraJlose
卜.海凌峰化学试剂有限公司
杭州常青化工有限公司
16
浙江人学硕十学位论文
第二章材料与方法
2.1仪器和设囊
薹¥一;?!蚕誊钳”骓配野掣
琶h兰“篱戥潍明瞪
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2.3实验方案和技术路线
2.31多糖提取工艺步骤
山药洗净去皮———,匀浆
,卜海试剂总厂 杭州高晶精细化工有限公司 卜海伯奥生物科技有限公司 中国医药(集团)卜海化学试剂公司 汕头市光华化学厂 中国医药(集团)卜海化学试剂公司 中国医药(集团)}__.海化学试剂公司 }二海恒信化学试剂有限公司 北京化学试剂公司(比利时进口分装)
纯白。气相色谱分析表明:山药中性多主要由鼠李木糖、 两种不同质的,中和酸性多糖颜色均为 G—loo进行分离,结果得到
Di()sc()蹭c! polysacchande
step
su pp ue ri mf ai tc aa n t t io , n conditions between脚terial
professional
浙江大学坝i‘学位论文
statistical software.Theoptimal extracting procedurewas pH9.13,山e ratio
andwater 1: 5.5 ,under this oftph oieysaccharide,theproteinshould bere]morVed士’rom the
2.34蛋白质含量的测定 由于蛋白质分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此蛋白质
具有吸收紫外线的性质,在280nm有最大吸收峰。在此波长范围内,蛋白质溶 液的光吸收值(A280)与其浓度成正比关系,可用作定量测定。但是不同的蛋白 质和核酸的紫外吸收是不同的,即使经过校正,测定结果也还存在。一定的误差。 但可以作为初步定量的依据。 试剂
取样液O.6m1,加入1.2m1苯酚溶液,摇匀再加入6m1浓硫酸剧烈振荡,放 置30rnin后测其吸光度,在根据吸光度从曲线卜读出相应的糖含量。标准曲线
见图2—1。
《型采冬一 };O !●:;-l 0
nv
100
120
1,iO
鞯沐I皇(p g加1)
图2一l苯酚硫酸法测糖含量标准曲线 标准曲线方程为:A490一O.0062c+O,0215 R2=O.99 测糖含量时将所测到的吸光度代入标准曲线即可求出所测溶液的糖含量。
then.polysacctharhide eppuolryistacychianricdenl wad spereciispi2ta0t% ed a. gaiFnowrith ethanolat the concentration of 70%.F01lowing,ion—exchangecolumn DEAE一52 and Sephadex G一1 OO colunmchromatographywere used as the1ast ofisolation.Atlast two main po】ysacchande electrifemus
中国医药(集团)卜海化学试剂公司
pH值,温度、时间
-加适量的水制成山药溶液——————+
蒸发浓缩——+乙醇沉淀多糖——+离心分离多糖 -冷冻干燥——.
得粗多糖
2.32分离纯化步骤 称取2009洗净去皮的新鲜山药,匀浆,在料水比l:5,浸提温度85℃,
调节pH值到8.O条件下浸提111r后,1900×g离心10111in取卜-清,加入3.0%中
浙江大学 硕士学位论文 山药多糖提取工艺优化及结构分析 姓名:吴丹 申请学位级别:硕士 专业:遗传学 指导教师:李永泉
20040601
摘要
山药(D幻5co陀口凸d加尬J DPcmP),又名白苕、土薯、大薯、薯 药,营养丰富,具有很高的药疗价值。《本草纲目》记载:山药性温、 味甘平、无毒,健脾胃、益肺肾、涩精止泻;山药还具有抗衰老、 抗氧化、提高应激力、增强免疫力、降血脂、抗肿瘤、抗突变等功 效,山药中起到药疗作用的主要成分是山药多糖。本文主要研究山 药多糖的提取工艺、分离纯化及多糖的结构分析。提取工艺主要考 虑浸提水溶液温度、pH值、料水比和浸提时间对多糖得率的影响, 研究最佳的粗多糖浸提工艺参数;首先进行单因素试验,在此基础 上采用正交实验进行分析,进而采用中心组合设计进行中试,最后 经统计软件matlab编程进行多元线性回归分析得到山药粗多糖较优 化提取工艺为:pH值为9.13,料水比为l:5.5,浸提温度85℃左右,
HP6890气相色谱仪
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