17_烯丙氨基格尔德霉素对人乳腺癌细胞基质金属蛋白酶表达调控作用的研究
17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对鼻咽癌细胞VEGF和Survivin表达的影响
17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对鼻咽癌细胞VEGF和Survivin表达的影响刘涛【摘要】目的探讨17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)对人鼻咽癌细胞(HNE1)的影响.方法采用流式细胞技术检测不同浓度(17-AAG)、不同时间处理后HNE1细胞凋亡情况,组织免疫细胞技术检测药物处理后对VEGF、Survivin蛋白表达的影响.结果 17-AAG可以诱导人鼻咽癌细胞的凋亡,且这种作用具有时间和计量依赖性,且可抑制细胞中VEGF、Survivin蛋白的表达.结论热休克蛋白抑制剂17-AAG 具有诱导鼻咽癌细胞凋亡的作用,对鼻咽癌的临床治疗具有一定的指导意义.【期刊名称】《延安大学学报（医学科学版）》【年(卷),期】2011(009)001【总页数】3页(P1-2,18)【关键词】17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG);鼻咽癌细胞;VEGF;Survivin【作者】刘涛【作者单位】延安大学附属医院耳鼻咽喉科,陕西,延安,716000【正文语种】中文【中图分类】R739.6热休克蛋白（Heat shock protein，HSP）是在热诱导下合成的具有高度保守性质的一组蛋白质，其中HSP90β是热休克蛋白家族中的重要成员，具有重要的生理功能［1］。
研究表明HSP90β作为抗原肽的载体参与了MHCI类抗原的递呈，在肿瘤免疫中具有重要作用［2］，且与肿瘤的分化程度有关，已成为抗肿瘤治疗研究的靶点。
我们前期的研究发现鼻咽癌组织中HSP90β阳性率高于鼻咽部正常组织，而且其表达强度与肿瘤分化程度相关，分化程度越低，HSP90β表达越强；HSP90β阴性表达者其5年生存率明显高于阳性者。
目前对于热休克蛋白抑制剂在抗肿瘤研究方面已有不少的报道［3－4］，17－丙烯胺基－17－去甲氧基格尔德霉素（17－allylamino－17－demethoxygeldanamyein，17－AAG）是目前进入临床前研究的热休克蛋白抑制剂，具有较好的应用前景，本研究探讨其对人鼻咽癌细胞株影响，以探讨17－AAG在鼻咽癌治疗中的应用。
17-丙烯胺-17去甲氧格尔德霉素对大鼠嗜铬细胞瘤细胞凋亡及血管内皮生长因子表达的影响
17-丙烯胺-17去甲氧格尔德霉素对大鼠嗜铬细胞瘤细胞凋亡及血管内皮生长因子表达的影响马贵;祝宇;吴瑜璇;沈周俊;盛佳燕;徐云泽【期刊名称】《上海交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2011(031)012【摘要】Objective To investigate the effects of 17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin (17-AAG), heat shock protein 90 ( HSP90) inhibitor, on the growth and expression of vascular endothelial growth factor ( VECF) in pheochromocytoma cell line PC 12 in rats. Methods PC 12 cells in experiment group were divided into experiment group 1 and experiment group 2. PC12 cells in experiment 1 were treated with different concentrations (0.005 u,mol/L, 0.025 μmol/L, 0.05 μnol/L, 0.1 μmol/L, 0.25 μmol/L, 0.5 μmol/L, 1.0 μmol/L and 2.0 μmol/L) of 17-AAG culture fluid respectively, and those in experiment group 2 were treated with 150 μg/L VEGF culture fluid ( VEG F group), 0. 1 μmol/L 17-AAG culture fluid (17-AAG group) and 0. I μmol/LH-AAG + 150 μg/L VEGF culture fluid (17-AAG + VEGF group) respectively. Besides, DMSO group (negative control group) and blank control group were also established. Cell survival rate was measured by MTT assay, cell morphology was observed by Wrighls-Giemsa staining, cell apoptosis was detected by flow cytometry, and expression of VEGF-165 protein in cells was determined by Western blotting. Results 17-AAG significantly inhibited the growth of PC 12 cells intime- and dose-dependent manners ( P < 0. 05), with 50% inhibitory concentration (IC50) of 0. 1 μmol/L. The apoptosis rates of PCI 2 cells after treatment with 0. 1 μmol/L 17-AAG for 6 h, 12 h, 24 h and 48 h were significantly higher than that in blank control group (P < 0. 01). The expression of VEGF-165 protein gradually decreased with treatment ofPC12 cells with 0. 1 μmol/L 17-AAG for 6 h, 12 h, 24 h and 48 h, and the expression of VEGF-165 protein at each time point was significantly different from that in negative control group (P<0. 05). Conclusion 17-AAG, HSP90 inhibitor, can inhibit the proliferation of PC12 cells, induce cell apoptosis and .inhibit the expression of VEGF protein.%目的探讨热休克蛋白90(HSP90)抑制剂17-丙烯胺-17去甲氧格尔德霉素(17-AAG)对大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞生长及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法将实验组PC12细胞分成两组:实验一组分别加入不同终浓度(0.005、0.025、0.05、0.1、0.25、0.5、1.0、2.0 μmol/L)17-AAG培养液；实验二组分别加入150 μg/L VEGF(VEGF组)、0.1μmol/L17-AAG(17-AAG组)、0.1μmol/L17-AAG+ 150μg/L VEGF(17-AAG+ VEGF组)培养液.另设DMSO组(阴性对照组)和空白对照组.采用MTT法检测细胞存活率；Wrights-Giemsa染色观察细胞形态变化；流式细胞术检测细胞凋亡率；Western blotting检测细胞中VEGF-165蛋白的表达.结果17-AAG呈时间、剂量依赖性抑制PC12细胞增殖(P＜0.05)；24h半致抑制浓度(IC50)为0.1μmol/L.0.1μmol/L 17-AAG作用于PC12细胞6、12、24、48 h的细胞凋亡率均明显高于空白对照组(P＜0.01).0.1 μmol/L 17-AAG作用于PC12细胞6、12、24、48 h,VEGF-165蛋白表达逐渐降低；各时点VEGF-165蛋白表达量与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 HSP90抑制剂17-AAG 能抑制PC12细胞增殖,诱导细胞凋亡,抑制VEGF蛋白表达.【总页数】5页(P1687-1691)【作者】马贵;祝宇;吴瑜璇;沈周俊;盛佳燕;徐云泽【作者单位】上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科,上海200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科,上海200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科,上海200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科,上海200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科,上海200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科,上海200025【正文语种】中文【中图分类】R736.6【相关文献】1.17-丙烯胺-17-去甲氧格尔德霉素对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响 [J], 陈美霓;郭巍;赵菊梅;魏晓丽2.17-二甲基胺乙基-17-去甲氧基格尔德霉素对人胃癌裸鼠移植瘤血管内皮生长因子表达的抑制作用 [J], 肖隆斌;吴文辉;刘其龙3.17-丙烯胺-17-去甲氧格尔德霉素对大鼠嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤的抑制作用 [J], 朱奇;祝宇;徐云泽;陈东宁;徐烈雨;张翀宇;赵菊平;吴瑜璇;沈周俊4.17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对鼻咽癌细胞VEGF和Survivin表达的影响 [J], 刘涛5.17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素诱导鼻咽癌细胞凋亡的实验研究 [J], 赵菊梅;刘涛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
格尔德霉素对胶质瘤细胞MT1-MMP及u—PA基因表达的影响
ｓ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｍ Ｔ１ 一 ＭＭＰ ａ ｎ ｄ ｕ — Ｐ Ａ ｍＲＮ『 Ａ ｉ ｎ ＧＤＭ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｄ ｅ ｃ ｒ ｅ ａ ｓ ｅ ｄ ｓ ｉ ｇ ｎ ｉ ｆ ｉ ｃ ａ ｎ ｔ ｌ ｙ ｃ ｏ ｍｐ ａ ｒ ｅ ｄ ｗｉ ｔ ｈ ｔ ｈ ｅ ｎ ｏ ｒ ｍａ ｌ ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ａ ｎ ｄ ＨＧＦ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ（ Ｐ＜ Ｏ ． ０ ５ ） ． Ｔｈ ｅ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｐ Ａ ｍＲＮＡ ｉ ｎ ＨＧＦ＋ ＧＤＭ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｄ ｅ ｃ ｒ ｅ ａ ｓ ｅ ｄ ｓ ｉ ｇ ｎ ｉ ｆ ｉ ｃ ａ ｎ ｔ ｌ ｙ ｃ ｏ ｍｐ ａ ｒ ｅ ｄ ｗｉ ｔ ｈ ｔ ｈ ｅ
中国实验诊断学
２ ０ １ ３年 １ Ｏ月 第 １ ７卷第 １ Ｏ期 －－－
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１ ７ ４７
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文章编号 ： １ ０ ０ ７ —４ ２ ８ ７ （ ２ ０ １ ３ ） １ ０—１ ７ ４ ７ —０ ３
格 尔 德 霉 素 对 胶 质 瘤 细胞 ＭＴ１ 一 ＭＭＰ 及 ｕ — Ｐ Ａ 基 因表 达 的影 响
王春 辉 ， 李 蕴 潜 ， 韩 雪梅ｎ
（ １ ．吉 林 省 人 民 医 院 神 经 外 科 ， 吉林 长春 １ ３ ０ ０ ２ １ ； ２ ． 吉林大学第一 医院 神经外科 ； ３ ． 吉 林 大 学 中 日联 谊 医 院 神 经 内科 ）
摘要 ： 目的 研究格尔德霉 素（ ＧＤ Ｍ） 作用下 ， 膜 型基 质金 属 蛋 白酶一１（ ＭＴ１ 一 Ｍ ＭＰ ） 和 尿 激 酶 型 纤 溶 酶 原 激 活 物
ｎ ｏｒ ｍａ ｌ ｃ ｏｎｔ ｒ ｏｌ ａ ｎｄ Ｈ Ｇ Ｆ ｇｒ ｏｕ ｐ（ Ｐ＜ ０．０ ５） ． Ｃｏｎ ｃ ｌ ｕ ｓ ｉ ｏ ｎ ＧＤ Ｍ ｃ ａ ｎ ｉ ｎ ｈｉ ｂｉ ｔ ｔ ｈｅ ｅ ｘｐｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｏｆ Ｍ Ｔ１ 一 Ｍ Ｍ Ｐ ａ ｎ ｄ ｕ — ＰＡ ｍ Ｒ Ｎ Ａ ｉ ｎ ｇｌ ｉ ｏｍ ａ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ． Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄｓ ： Ｇｌ ｉ ｏｍ ａ； Ｇｅ ｌ ｄ ａｎ ａ ｍ ｙｃ ｉ ｎ； Ｈｅ ｐ ａ ｔ ｏｃ ｙ ｔ ｅ ｇ ｒ ｏ ｗｔ ｈ ｆ ａ ｃ ｔ ｏｒ ；Ｍ ｅ ｍｂ ｒ ａ ｎ ｅ ｔ ｙｐ ｅ １ ｍ ａ ｔ ｒ ｉ ｘ ｍｅ ｔ ａ １ ｌ ｏｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎａ ｓ ｅ； Ｕｒ ｏｋ ｉ — ｎａ ｓ ｍｔ ｙ ｐｅ ｐｌ ａ ｓ ｍｉ ｎｏ ｇｅ ｎ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ａ ｔ ｏｒ
格尔德霉素抗病毒作用的相关基因研究
格尔德霉素抗病毒作用的相关基因研究李怡璇;刘民;李欣;汤华【期刊名称】《病毒学报》【年(卷),期】2008(24)3【摘要】格尔德霉素(Geldanamycin,GA)作为一种苯醌安莎霉素类抗生素,能与热休克蛋白90特异性结合,具有广谱的抗病毒作用。
为了从转录水平上研究GA抗病毒的分子机制,本研究以单纯疱疹病毒I型(Herpes simplex virus type1,HSV-1)为对象,在确定药物有效抗病毒作用的基础上,采用基因芯片技术分析了在HeLa细胞中病毒感染和药物处理对细胞表达谱的影响,并筛选出GA抗病毒作用的可能相关基因。
同时用半定量RT-PCR方法对GA诱导上调、HSV-1诱导下调的基因(ACTG1、RAN、SOD1)以及GA诱导下调、HSV-1诱导上调的基因(HYAL1)进行了验证。
研究GA抗病毒作用对细胞表达谱的影响,有利于深入理解药物的抗病毒机制。
【总页数】5页(P208-212)【关键词】格尔德霉素;单纯疱疹病毒Ⅰ型;基因芯片;HeLa细胞【作者】李怡璇;刘民;李欣;汤华【作者单位】天津医科大学基础医学院【正文语种】中文【中图分类】R978.7【相关文献】1.4,5-双氢-7-去氨甲酰基-7-羟基-19-S-甲基格尔德霉素及其与格尔德霉素生物合成PKS后修饰的关系 [J], 牛沂菲;李书芬;王以光;武临专;赫卫清;李京艳;刘昕;倪四阳;林灵;王红远;孙桂芝2.格尔德霉素对胶质瘤细胞增殖及相关基因表达的影响 [J], 王春辉;李蕴潜;罗毅男;韩雪梅;熊文激;徐松柏;于音3.格尔德霉素对脑缺血／再灌注神经损伤保护作用的机制研究 [J], 温相如;陈玲;江志国;徐洲;宋远见;刘红芝;张荣丽4.17-丙烯氨基-17-去甲氧基格尔德霉素治疗肿瘤增敏作用及其纳米颗粒的研究进展 [J], 王叶;薛莲;于冬因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
乳腺癌中基质金属蛋白酶和性激素受体的表达及其与淋巴结转移的相关性
目前研究表明，基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）及性激素受体与乳腺癌发病及转移关系密切，乳腺癌患者MMPs表达普遍升高[1-2]。
此外，乳腺癌具有激素依赖性，性激素与乳腺癌发病的关系目前已较为公认，但其与乳腺癌转移的关系尚不清楚。
MMPs共有23种，目前已证实MMP-2与乳腺癌发病具有密切关系[2]。
近年来研究表明，MMP-1、3、7、11在乳腺癌干细胞中表达明显增高[3]。
本研究通过检测上述4种MMPs及性激素受体在乳腺癌组织与癌旁组织的表达，比较4种MMPs及性激素受体在无淋巴结转移与有淋巴结转移乳腺组织的表达差异，探讨4种MMPs及性激素受体与乳腺癌诊断及淋巴结转移的相关性。
1资料与方法1.1研究对象随机收集和选取本院乳腺外科2010年1月至2012年6月乳腺癌手术石蜡标本以及相关临床病理资料共50例，病理类型以乳腺浸润性导管癌为主，并且根据有无淋巴结转移情况分为有转移和无转移两组。
患者均为女性，年龄35～71岁，中位年龄48.9岁。
术前未进行放、化疗。
复查所有病例全部切片。
另取50例乳腺癌周围正常乳腺组织作为对照。
1.2研究试剂兔抗人多克隆抗体MMP-1、3、7、11，雌激素受体（estrogenreceptor，ER）、孕激素受体（progesterone receptor，PR）、雄激素受体（anti-androgen receptor，AR）抗体，SABC两步法免疫组化试剂盒（武汉博士德生物科技有限公司）等。
1.3免疫组化染色采用免疫组化法对全部病例及周围正常乳腺组织进行免疫组化染色，实验严格按照试剂说明书操作。
将4mm 厚的切片常规脱蜡至水，加入3%过氧化氢，进行热修复后，滴加山羊血清进行封闭10min，分别滴加一抗，如MMP-1、3、7、11，ER、PR、AR抗体（一抗稀释度均为1∶100），4℃过夜。
阴性对照加磷酸盐缓冲液（PBS）。
17-烯丙氨基格尔德霉素对人绒癌JAR细胞迁移和黏附的影响
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１７一烯 丙 氨基 格 尔 德 霉 素对 人 绒 癌 ＪＡＲ细胞
迁 移 和黏 附 的影 响 ：ｌ＝
崔丽军 ，梁秀军 ，许倩 ，李玉红 ，谢朝辉 ， 刘镭 ，何平 萍 ，肖铄 洋
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｅｎｇｄｅ ０６７０００ ，Ｈｅｂｅｉ， Ｃｈｉｎａ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：１２ Ｙｕ—ｈｏｎｇ．Ｅ —ｍａｉｌ：１７９８７９３５２１＠ ｑｑ．ｃｏｍ ；ＸＩＥ Ｚｈａｏ—ｈｕｉ，Ｅ —ｍａｉｌ：ｘｚｈｌ２１９＠ １６３．ｃｏｒ ｎ
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ １７一ＡＡＧ ｏｎ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｏｆ ＪＡＲ ｃｅｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ
ＪＡＲ 细 胞 的 迁 移 和 黏 附 。
【关键词】 绒毛膜癌；１７一ＡＡＧ；迁移 ；黏 附
Ｅｆｅｃｔｓ ｏｆ １７一ＡＡＧ ｏｎ Ｍ ｉｇｒａｔｉｏｎ ａｎｄ Ａｄｈｅｓｉｏｎ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｃｈｏｒｉｏｃａｒｃｉｎｏｍ ａ ＪＡＲ ＣｅＨｓ． ＣＵ／Ｌｉ一 ｎ ，ＬＩＡＮＧ
Ｘｉｕ－ｊｕｎ，ＸＵ Ｑｉａｎ，ＬＩ Ｙｕ—ｈｏｎｇ，ＸＩＥ Ｚｈａｏ—ｈｕｉ，ＬＩＵ Ｌｅｉ，ＨＥ Ｐ ｎｇ—ｐｉｎｇ，ＸＩＡＯ Ｓｈｕｏ—ｙａｎ ｇ ． Ｃｈｅｎｇｄｅ Ｍｅｄｉｃａｌ
ＪＡＲ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｃｕｈｕｒｅｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｗｉｔｈ １７ 一ＡＡＧ ａｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｏｓｅｓ．Ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ １７ 一ＡＡＧ ｗａｓ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ＭＴＴ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＩＣ５０． Ｃｅｌｌｓ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｓｃｒａｔｃｈｅｓ ａｂｉｌｉｔｉｅｓ ｗｅｒｅ ａｓｓｅｓｓｅｄ ｂｙ ｃｅｌｌ ｓｃｒａｔｃｈｅｓ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ ｃｈａｍｂｅｒ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ｔｅｓｔ．Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｅ —ｃａｄｈｅｒｉｎ，Ｎ —ｅａｄｈｅｒｉｎ ａｎｄ Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ ｗａｓ ａｓｓｅｓｓｅｄ ｂｙ ｗｅｓｔｅｒ ｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ＭＴＴ ａｓｓａｙ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ １７一ＡＡＧ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒ— ａｔｉｏｎ ｏｆ ＪＡＲ ｃｅｉｌｓ ｉｎ ｄｏｓｅ—ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｍａｎｎｅｒ（Ｐ ＜０．０５）．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｓｃｒａｔｃｈｅｓ ｍｅｔｈｏｄ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃｏｖｅｒａｇｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒ ｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ （Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ ｍｅｔｈｏｄ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｃｅｌｌ ｐｅｎｅｔｒａｔｉｎｇ ｃｅｌｌｓ ｗａｓ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ｄｏｓｅ— ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｍａｎｎｅｒ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇ ｒｏｕｐ
格尔德霉素体外抑制人肝癌细胞株HepG2增殖并促进凋亡
17-烯丙氨基格尔德霉素对人乳腺癌细胞基质金属蛋白酶表达调控作用的研究
【 关键词】 乳腺肿瘤；１ ７ 一 烯丙氨基格尔 德霉素；基质金属蛋白酶２ ；基质金属蛋白酶９ 【 中图分类号】Ｒ ７ ３ ７ ． ９ 【 文献标识码】Ａ ｄ ｏ ｉ ：１ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ７ — ９ ５ ７ ２ ． ２ ０ １ ３ ． Ｏ １ ． ０ ８ ７
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２ ７１ ・
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论著 ・
１ ７一烯 丙 氨 基 格 尔 德 霉 素 对 人 乳 腺 癌 细 胞 基 质 金 属 蛋 白 酶 表 达 调 控 作 用 的研 究
许 倩 ，肖丽君 ，赵 恩宏 ，魏宪嘉 ，张海燕，赵 爽，郑 鑫
【 摘要】 目的 癌 Ｍ Ｃ Ｆ一 ７细胞基质金属蛋 白酶 （ Ｍ Ｍ Ｐ ）
（ ２ ）Ｒ Ｔ—Ｐ Ｃ Ｒ法检 测不 同浓度 １ ７一 Ａ Ａ Ｇ对 ＭＣ Ｆ一 ７细胞 ＭＭＰ一 ２ 、ＭＭ Ｐ一 ９ ｍＲ Ｎ Ａ表达 的影响，结果显示 ，对照组及 １ ． Ｏ ０ ｍ ｇ ／ Ｌ组 、２ ． ０ ０ ｍ ｇ ／ Ｌ组 、３ ． ０ ０ ｍｓ ／ Ｌ组、５ ． ０ ０ ｍ ｇ ／ Ｌ组 ＭＭＰ一２ ／ ３一ａ １ ｃ ｔ ｉ ｎ和 Ｍ ＭＰ一９ ／ １ ３ 一ａ ｃ ｔ ｉ ｎ比较 ，差异均有 统 计 学意义 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） ；其 中各组 间两两 比较 ，差异均有统计 学意义 （ Ｐ＜０ ． ０ ５ ） 。（ ３ ）Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ Ｂ ｌ ｏ ｔ ｔ ｉ ｎ ｇ法检测不 同浓度 ｌ ７一Ａ Ａ Ｇ对 Ｍｃ Ｆ一 ７细胞 Ｍ ＭＰ一２ 、ＭＭ Ｐ一９表 达 的影响 ，结 果显 示，对照组 及 １ ． ０ ０ ｍ ｓ ／ Ｌ组、２ ． ０ ０ ｍ ｓ ／ Ｌ组 、３ ． ０ ０ ｍ ｇ ／ Ｌ组、５ ． Ｏ ０ ｍ ｓ ／ Ｌ组 ＭＭＰ一２ ／ ３一ａ １ ｃ ｔ ｉ ｎ和 ＭＭＰ一９ ／ ３一ａ １ ｃ ｔ ｉ ｎ比较 ，差异均有统计 学意义 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） ；其 中各组间两 两比较 ，差异均有统计 学意义 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） 。结论 １ ７一 Ａ Ａ Ｇ对人 乳腺 癌 ＭＣ Ｆ一 ７细胞 的增殖具有 明显的抑制作 用，并 能抑制 ＭＭＰ一 ２和 ＭＭＰ一 ９的表 达 ，具有剂量依赖 性。
格尔德霉素对胶质瘤细胞MT1-MMP及u-PA基因表达的影响
格尔德霉素对胶质瘤细胞MT1-MMP及u-PA基因表达的影响王春辉;李蕴潜;韩雪梅【摘要】目的研究格尔德霉素(GDM)作用下,膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)和尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)基因在胶质瘤细胞中的表达水平.方法培养胶质瘤细胞株U251-MG和U87-MG,反转录PCR方法检测MT1-MMP和u-PA mRNA表达.结果与正常对照组(NC)相比,HGF组u-PA mRNA表达显著增加(P＜0.05)；GDM组MT1-MMP和u-PA mRNA表达水平较对照组和HGF组均显著降低(P＜0.05)；HGF+GDM组u-PA mRNA表达水平较对照组和HGF组显著降低(P＜0.05).结论 GDM能够抑制胶质瘤细胞中MT1-MMP和u-PAmRNA的表达.【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2013(017)010【总页数】3页(P1747-1749)【关键词】胶质瘤;格尔德霉素;肝细胞生长因子;膜型基质金属蛋白酶-1;尿激酶型纤溶酶原激活物【作者】王春辉;李蕴潜;韩雪梅【作者单位】吉林省人民医院神经外科,吉林长春130021;吉林大学第一医院神经外科;吉林大学中日联谊医院神经内科【正文语种】中文【中图分类】R739.41胶质瘤侵袭性生长的发生机制一直是研究的热点，然而，迄今尚未取得突破性进展。
肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF）是一种多功能的细胞因子，主要通过 HGF／c－Met通路促进肿瘤细胞的增殖、凋亡和侵袭［1，2］。
格尔德霉素（geldanamycin，GDM）对HGF具有明显的抑制作用，能够阻断HGF／c－Met通路。
本研究拟探讨GDM作用下，HGF／c－Met通路下游基因胶质瘤细胞膜型基质金属蛋白酶－1（Membrane type 1 matrix metalloproteinase，MT1－MMP）和尿激酶型纤溶酶原激活物（Urokinase－type plasminogen activator，u－PA）表达情况，旨在为深入认识其侵袭性生长的分子机制奠定基础。
格尔德霉素及其衍生物抗肿瘤作用的最新研究进展
Ａｂｓ ｒ ｔ Ｔｈ ｅ ｈａ ｓ ｏ ｐ９ ｓ ａ ｃ ｎｃ ｒｔ ｒ ｐｅ ｔｃ ｔ ｒ ｅ ｓｉ ｒ ｕ ｅ Ｈｏ ｔ ｔ ａｃ ： ｅ ｍ ｃ ｎｉｍ ｆＨｓ ０ ａ ａ ｅ ｈｅ ａ ｕ ｉ ａ ｇ ｔｗａ ｎｔｏｄ ｃ ｄ． ｗ ｈｅ ＧＭ ｎ ｂ ｔｔ ｅ ｉｈｉ ｉ ｈ Ｈｓ ０ ｗａ ｅ ｅ ｄ ｐ９ ｓｒ ｖｉｗｅ ．Ｔｈ ｕ ｒｎｔｓａｕｓｏ ｏ ｌｒ ｓ ａ ｃ ｒ ｇ ｅ ｓ ｏ ｎ ｉｔ ｍｏ ｃｉ ｉｉ ｓｏｆＧＭ ｎ ｔ ｅ ｖ ｔｏ ｅ ｃ ｒｅ ｔｔ ｆｎ ｖｅ ｅ ｅ ｒ ｈ ｐ ｏ ｒ ｓ ｆａ ｔ— ｕ ｒａ ｔｖ ｔｅ ａ ｄ ｉｓｄ ｒ ａ ｉｎ ｉ
作者简介：练富林，在读研究生 ，微生物与生化药学专业。ｆｌ ｌ ｎ ａ ｏ ． ｕｉ ｉ ＠ｙｈ ｏｃ ｎａ ａ
， Ｉ ｃ 通讯作者：林东海，研 究员，从事结构生物学及代谢组学研究。ｄ ｌ ＠ｍ ｉ ｈ ｎ ． ． ｈ ｎ ａ ．ｃｃ ｃ ｎ ｉ ｌ ｓ ａａ
研 究表 明 ，ＧＭ是 ￣Ｈｓ ９ 为 靶 向分 子 而起 抗 肿 ｐ０
Ｇ Ｍ １－ ＡＡＧ ７
ＯＣＯＮＨ２
Ｘ＝ＯＭｅ Ｘ＝ＮＨＣＨ２ ＣＨ＝ＣＨ２
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瘤 作 用 的 。Ｈｓ ９ 是 细 胞 内表 达 最 丰 富 、 功 能 最 为 ｐ０
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水溶性17-烯丙氨基-17-脱甲氧基格尔德霉素注射用药物组合物[发明专利]
![水溶性17-烯丙氨基-17-脱甲氧基格尔德霉素注射用药物组合物[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/3ba795055ef7ba0d4b733b1b.png)
专利名称：水溶性17－烯丙氨基－17－脱甲氧基格尔德霉素注射用药物组合物
专利类型：发明专利
发明人：孔健,黄颖,周向阳
申请号：CN200510069429.7
申请日：20050510
公开号：CN1861075A
公开日：
20061115
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种广谱抗癌抗生素——17－烯丙氨基－17－脱甲氧基格尔德霉素(17－AAG)的注射用药物组合物及其应用。
该药物组合物包含治疗有效量的17－AAG、以及聚乙二醇类共溶剂。
加入聚乙二醇可显著提高17－AAG在水中的溶解度，方便临床应用。
经毒理学、药代动力学、药效学研究证明，该组合物稳定性好，毒性小、耐受性好，对多种恶性肿瘤具有广谱抑制效果，适用于多种癌症的临床治疗。
申请人：深圳生尔易美生物技术有限公司
地址：518000 广东省深圳市南山区高新技术产业园南区R2-A五层
国籍：CN
代理机构：北京律诚同业知识产权代理有限公司
代理人：黄韧敏
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格尔德霉素衍生物的设计、合成及抗肿瘤活性研究
格尔德霉素衍生物的设计、合成及抗肿瘤活性研究格尔德霉素(Geldanamycin, GA)最初在1970年从吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)发酵液中分离得到,属于苯醌安莎霉素。
GA具有抗菌、抗原虫、抗炎、抗肿瘤和抗病毒等生物活性。
其抗肿瘤作用是近年来关注的热点之一。
最初发现GA是蛋白酪氨酸激酶的非特异性抑制剂,后来发现热休克蛋白90(heat shock protein90, Hsp90)是其抗肿瘤作用靶点。
GA通过竞争性结合Hsp90N末端ATP/ADP结构域,特异性地抑制Hsp90所必需的ATP酶活性、改变Hsp90构象,从而抑制Hsp90分子伴侣功能。
Hsp90失活后,依赖Hsp90的众多蛋白,包括信号转导系统许多重要成员被泛素化和降解,产生抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡等效应。
尽管GA有广谱抗肿瘤作用,但由于其水溶性较差,体内分布特异性低,尤其是肝毒性较强,严重影响了其新药开发。
为了增加药效、提高成药性和降低毒性,药物化学家们长期对GA进行了结构优化,获得了数百个衍生物,其中17-AAG (Tanespimycin)、17-DMAG (Alvespimycin)、7-AG (IPI-493)和IPI-504(Retaspimycin-HCl)已进入临床试验。
17-AAG对多种肿瘤有强的抑制活性,但是由于其昂贵的生产成本、专利期限和肝毒性等问题,施贵宝公司于2011年终止了17-AAG的III期临床试验；17-DMAG由其毒副作用,Kosan Biosciences公司于2008年暂停其I期临床试验；17-AG水溶性和生物利用度都很差,其I期临床试验也被迫暂停；只有IPI-504还在进行治疗KRAS突变的非小细胞肺癌的临床试验。
因此,针对现有GA衍生物的毒性和成药性,设计合成GA衍生物,对开发以Hsp90为靶点的新颖抗肿瘤药物有重要意义。
本论文分四章,第一章为前言进展,主要介绍Hsp90在肿瘤形成方面的最新研究进展,重点关注了该蛋白的抑制剂GA及其衍生物,主要包括三方面内容：1)Hsp90及其生物化学性质；2)Hsp90及其在肿瘤发生过程中的作用；3)GA衍生物化合物库的构建。
17-烯丙氨基格尔德霉素体内外抗肿瘤作用研究
17-烯丙氨基格尔德霉素体内外抗肿瘤作用研究王永; 厉保秋; 赵华; 高继友; 董欣【期刊名称】《《食品与药品》》【年(卷),期】2010(012)006【摘要】目的研究17-烯丙氨基格尔德霉素的体内外抗肿瘤作用。
方法 MTT法评价17-烯丙氨基格尔德霉素对人肿瘤细胞株的体外抑制作用;荷瘤小鼠静脉注射20,40,80 mg/kg剂量的17-烯丙氨基格尔德霉素,观察小鼠对异种移植实体瘤、腹水瘤及P388白血病的抗肿瘤作用。
结果 17-烯丙氨基格尔德霉素对人小细胞肺癌细胞、BEL-7402肝癌细胞、MCF7乳腺癌细胞均有明显抑制作用,可明显抑制皮下移植的S180肉瘤、Lewis肺癌、B16黑色素瘤的生长,并明显延长EAC腹水瘤、H22肝癌腹水瘤、P388白血病小鼠的生存时间。
结论 17-烯丙氨基格尔德霉素具有显著的体内外抗肿瘤作用。
【总页数】4页(P389-392)【作者】王永; 厉保秋; 赵华; 高继友; 董欣【作者单位】上海市计划生育科学研究所上海 200032; 山东弘立医学动物实验研究有限公司山东济南 250101; 山东大学药学院新药药理研究所山东济南250012【正文语种】中文【中图分类】R979.1【相关文献】1.17-烯丙氨基格尔德霉素体内外抗肿瘤作用研究 [J], 王永;厉保秋;赵华;高继友;董欣2.17-烯丙胺-17-脱甲氧格尔德霉素对胆囊癌细胞的体外化疗增敏作用 [J], 张涛;锁涛;王志军;胡美玉;童赛雄3.17-烯丙氨基格尔德霉素对人绒癌JAR细胞迁移和黏附的影响 [J], 崔丽军;梁秀军;许倩;李玉红;谢朝辉;刘镭;何平萍;肖铄洋4.17-烯丙氨基-17-去甲氧基格尔德霉素在CD2F1小鼠中的血浆药代动力学及组织分布 [J],5.17-烯丙氨基格尔德霉素对人乳腺癌细胞基质金属蛋白酶表达调控作用的研究[J], 许倩; 肖丽君; 赵恩宏; 魏宪嘉; 张海燕; 赵爽; 郑鑫因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对乳腺癌细胞的杀伤作用
17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对乳腺癌细胞的杀伤作用陈道桢;刘璐;姜新宇;孙晋;黄鹰【期刊名称】《医学研究生学报》【年(卷),期】2006(19)12【摘要】目的:对一种热休克蛋白90抑制剂即17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)对人乳腺癌细胞生长的影响及相关机制进行初步探讨.方法:MTT法检测药物对人乳腺癌细胞SKBr3的生长抑制作用;流式细胞术分析细胞凋亡及细胞周期变化;免疫组化法检测药物处理前后SKBr3细胞中HER2的表达变化情况.结果:17-AAG对人乳腺癌细胞株SKBr3生长有抑制作用,随着用药浓度的增加,抑制作用明显增强,呈明显的剂量依赖性,其IC50浓度为3.09μg/ml.SKBr3细胞经17-AAG处理48h后,流式细胞仪分析可见在0、0.625、1.250、2.500、5.000和10.000μg/ml浓度下,SKBr3细胞的凋亡率分别为(1.03±0.08)%、(3.68±0.67)%、(7.06±1.12)%、(11.23±1.36)%、(20.32±1.98)%和(31.65±2.96)%;G0/G1期细胞分别为58.61%、54.34%、49.55%、43.73%、35.52%和27.46%;S期细胞分别为:29.57%、25.21%、19.65%、22.98%、19.71%和15.46%;G2/M期细胞分别为11.82%、20.45%、30.18%、33.29%、44.77%和57.08%;同时17-AAG处理后的SKBr3细胞人类表皮生长因子受体2(HER2)表达明显减少.结论:17-AAG能够抑制人乳腺癌细胞SKBr3的生长并促进其凋亡,提示17-AAG是一种很有前景的抗肿瘤药物.【总页数】5页(P1059-1062,后插1)【作者】陈道桢;刘璐;姜新宇;孙晋;黄鹰【作者单位】东南大学临床医学院核医学技术研究所,江苏,南京,210009;东南大学临床医学院核医学技术研究所,江苏,南京,210009;东南大学临床医学院核医学技术研究所,江苏,南京,210009;东南大学临床医学院核医学技术研究所,江苏,南京,210009;东南大学临床医学院核医学技术研究所,江苏,南京,210009【正文语种】中文【中图分类】R9【相关文献】1.131Ⅰ-17-丙烯胺基-17-脱甲基格尔德霉素毒副作用的初步观察 [J], 高文;刘璐;周云2.131I-17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对人乳腺癌细胞生长的抑制作用 [J], 陈道桢;刘璐;杨敏;俞惠新;姜新宇;罗世能;黄鹰;林秀峰3.131I标记热休克蛋白90抑制剂17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素的方法学研究 [J], 姜新宇;刘璐;陈道桢;黄鹰4.17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对鼻咽癌细胞VEGF和Survivin表达的影响 [J], 刘涛5.17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素诱导鼻咽癌细胞凋亡的实验研究 [J], 赵菊梅;刘涛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
131I-17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对人乳腺癌细胞生长的抑制作用
131I-17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对人乳腺癌细胞生长的抑制作用陈道桢;刘璐;杨敏;俞惠新;姜新宇;罗世能;黄鹰;林秀峰【期刊名称】《中华核医学与分子影像杂志》【年(卷),期】2007(027)005【摘要】目的探讨131I-17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)对人乳腺癌细胞生长的影响及其相关机制.方法采用过氧化氢标记法制备131I-17-AAG.细胞杀伤实验分为5组:二甲基亚砜(DMSO)对照(A)组,Na131I 370 kBq(B)组,17-AAG 2.5 mg/L(C)组,131I-17-AAG 370 kBq(D)组,131I-17-AAG 370 kBq+17-AAG 2.5 mg/L(E)组.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各种药物对人乳腺癌细胞MCF-7的生长抑制作用,流式细胞术分析细胞凋亡及细胞周期变化,RT-PCR检测药物处理前后MCF-7细胞中Akt2基因的mRNA表达情况.结果 131I-17-AAG的标记率为83%,放化纯为96.6%,比活度为1.48×105 MBq/μmol.各组药物对细胞的杀伤呈时间效应,随着时间的延长,细胞的抑制率都呈明显上升趋势,尤以E组趋势明显.A～E组药物作用48 h后,通过亚G1峰检测MCF-7细胞凋亡率分别为(1.54±0.13)%,(5.72±1.05)%,(12.97±1.44)%,(20.65±1.36)%,(35.39±4.15)%,各组细胞凋亡率差异有统计学意义(P均＜0.05).C组,D组及E组Akt2基因的mRNA表达均比A组降低,其中E组降低尤为明显.结论 131I-17AAG能够抑制MCF-7细胞的生长并促进其凋亡,且能有效抑制Akt2基因的mRNA表达,和17-AAG联合应用能够增强肿瘤细胞对放疗的敏感性.【总页数】5页(P260-264)【作者】陈道桢;刘璐;杨敏;俞惠新;姜新宇;罗世能;黄鹰;林秀峰【作者单位】南京医科大学附属无锡妇幼保健院中心实验室;210009,南京,东南大学临床医学院核医学技术研究所;江苏省原子医学研究所;江苏省原子医学研究所;210009,南京,东南大学临床医学院核医学技术研究所;江苏省原子医学研究所;210009,南京,东南大学临床医学院核医学技术研究所;江苏省原子医学研究所【正文语种】中文【中图分类】R73【相关文献】1.17-二甲基胺乙基-17-去甲氧基格尔德霉素对人胃癌裸鼠移植瘤血管内皮生长因子表达的抑制作用 [J], 肖隆斌;吴文辉;刘其龙2.131I标记热休克蛋白90抑制剂17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素的方法学研究 [J], 姜新宇;刘璐;陈道桢;黄鹰3.17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对鼻咽癌细胞VEGF和Survivin表达的影响 [J], 刘涛4.17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对乳腺癌细胞的杀伤作用 [J], 陈道桢;刘璐;姜新宇;孙晋;黄鹰5.17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素诱导鼻咽癌细胞凋亡的实验研究 [J], 赵菊梅;刘涛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
格尔德霉素在体内外增强人乳腺癌对阿霉素的敏感度
格尔德霉素在体内外增强人乳腺癌对阿霉素的敏感度张伟;顾敏【期刊名称】《肿瘤防治研究》【年(卷),期】2010(37)10【摘要】目的探讨新型抗肿瘤药物格尔德霉素(GA)联合阿霉素(ADM)治疗乳腺癌的机制。
方法通过Western blot确定GA处理后AKT及HSP70表达变化,然后体外分别以GA/阿霉素(ADM)以及联合处理人乳腺癌MCF-7细胞,MTT法检测增殖变化,流式细胞仪检测细胞凋亡,在裸鼠模型体内检测GA联合ADM治疗后肿瘤大小变化并采用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡变化。
结果 GA处理MCF-7细胞后AKT明显下降,HSP70无明显改变,GA联合ADM后,MCF-7细胞的增殖受到明显抑制,生存率为(51.90±6.80)%(P<0.01),凋亡明显增加,凋亡率为(42.97±4.10)%(P<0.05)。
在裸鼠模型内肿瘤生长受到明显抑制,实验终点抑瘤率为(68.00±9.40)%(P<0.05),联合治疗明显增加瘤内肿瘤细胞的凋亡,凋亡率为(14.70±3.30)%(P<0.01)。
结论 GA联合ADM能够显著增加ADM的治疗疗效,有望成为治疗乳腺癌的新型化疗联合方案。
【总页数】4页(P1109-1112)【关键词】乳腺癌;格尔德霉素;阿霉素;化疗敏感度【作者】张伟;顾敏【作者单位】重庆医科大学附属第一医院普外科【正文语种】中文【中图分类】R737.9【相关文献】1.17-烯丙氨基格尔德霉素体内外抗肿瘤作用研究 [J], 王永;厉保秋;赵华;高继友;董欣2.17-烯丙胺-17-脱甲氧格尔德霉素对胆囊癌细胞的体外化疗增敏作用 [J], 张涛;锁涛;王志军;胡美玉;童赛雄3.17-丙烯胺-17-去甲氧格尔德霉素对HeLa细胞辐射增敏作用机制研究 [J], 吴晓芬;张保国;洪承皎;郭文秀;潘艳玲4.肉桂酰胺格尔德霉素增强肿瘤细胞对力达霉素敏感度的研究 [J], 李良;韩菲菲;甄永苏5.17-丙烯氨基-17-去甲氧基格尔德霉素治疗肿瘤增敏作用及其纳米颗粒的研究进展 [J], 王叶;薛莲;于冬因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
17-AAG对不同肿瘤细胞系增殖影响作用
17-AAG对不同肿瘤细胞系增殖影响作用赵恩宏;王书华;马朝朋;何京川;刘宇帆;张平;许倩;肖丽君【期刊名称】《河北医学》【年(卷),期】2013(019)012【摘要】目的:观察17-烯丙胺-17-脱甲氧格尔德霉素(17-allylamino-17-desmethoxy-geldanamycin,17-AAG)对胃癌MKN-45细胞株、乳腺癌MCF-7细胞株、肝癌HepG-2细胞株和肺癌A549细胞株增殖能力的影响.方法:体外培养四种肿瘤细胞株,分别给予10.0、5.00、2.50、1.25、0.62、0.31、0.160μg/mL 的不同剂量的17-AAG进行作用,并分别在24h、48h之后用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞增殖能力的变化.结果:10.0、5.00、2.50、1.25、0.62、0.31、0.160 μg/mL作用24h、48h后发现17-AAG在体外细胞试验中浓度1-10 μg/mL时对人癌细胞有显著的抑制作用,且有明显的时间,剂量依赖性.结论:17-AAG能够抑制多种肿瘤细胞增殖的能力.【总页数】4页(P1761-1764)【作者】赵恩宏;王书华;马朝朋;何京川;刘宇帆;张平;许倩;肖丽君【作者单位】承德医学院附属医院肿瘤外一科,河北承德 067000;承德医学院,河北承德067000;承德医学院,河北承德067000;承德医学院,河北承德067000;承德医学院,河北承德067000;承德医学院,河北承德067000;承德医学院基础部,河北承德067000;承德医学院基础部,河北承德067000【正文语种】中文【相关文献】1.榄香烯对肝癌腹水瘤细胞系Hca-F25／CL-16A3的抗肿瘤作用机理研究——Ⅰ．对小鼠NK细胞毒性、巨噬细胞活性及脾细胞增殖的影响 [J], 左云飞;张耀铮;魏巍;张胜亮;张红;张立秋2.一叶秋碱对不同细胞增殖的影响及其体内抗肿瘤作用 [J], 董宁征;杨吉成;刘卫军;顾振纶3.中药"龙泉复方"的不同配伍对肿瘤细胞系HepG-2和EC-1增殖的影响 [J], 李劲;邓志芳;高雯琪;胡文娟;刘莹;姚品芳;李广灿;陈焕朝;梅之南4.一叶秋碱对不同细胞增殖影响及鼠体内抗肿瘤作用 [J], 董宁征;刘卫军5.金花茶种子对体外培养不同肿瘤细胞增殖作用的影响 [J], 时贞颂;于大永;彭倩;尚志春;史丽颖;冯宝民;王永奇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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·论著·17－烯丙氨基格尔德霉素对人乳腺癌细胞基质金属蛋白酶表达调控作用的研究许倩，肖丽君，赵恩宏，魏宪嘉，张海燕，赵爽，郑鑫基金项目：河北省科技厅科学技术项目（072761450）；河北省教育厅自然科学项目（2007326）；河北省人口和计划生育委员会科技项目（2011－A15）；承德医学院自然科学项目（201204）作者单位：067000河北省承德市，承德医学院基础医学研究所（许倩），免疫学教研室（肖丽君，魏宪嘉，张海燕，赵爽）；承德医学院附属医院肿瘤外科（赵恩宏，郑鑫）通讯作者：肖丽君，067000河北省承德市，承德医学院免疫学教研室；E －mail ：lljxiao@【摘要】目的观察17－烯丙氨基格尔德霉素(17－AAG )对人乳腺癌MCF －7细胞基质金属蛋白酶(MMP )－2、MMP －9mRNA 及其表达的调控作用。
方法体外培养人乳腺癌MCF －7细胞，分别给予不同剂量及不同作用时间的17－AAG 进行作用，四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT 法)检测细胞增殖能力;反转录聚合酶链反应(RT －PCR )法和蛋白印迹(Western Blotting )法检测MCF －7细胞的MMP －2、MMP －9mRNA 和蛋白表达水平。
结果(1)10.000、5.000、2.500、1.250、0.625、0.310、0.165mg /L 17－AAG 及空白对照组培养24h 和48h 时A 值比较，差异均有统计学意义(P ＜0.05)。
体外作用24h 后IC 50均值为34.61，体外作用48h 的IC 50均值为6.22。
(2)RT －PCR 法检测不同浓度17－AAG 对MCF －7细胞MMP －2、MMP －9mRNA 表达的影响，结果显示，对照组及1.00mg /L 组、2.00mg /L 组、3.00mg /L 组、5.00mg /L 组MMP －2/β－actin 和MMP －9/β－actin 比较，差异均有统计学意义(P ＜0.05);其中各组间两两比较，差异均有统计学意义(P ＜0.05)。
(3)Western Blotting 法检测不同浓度17－AAG 对MCF －7细胞MMP －2、MMP －9表达的影响，结果显示，对照组及1.00mg /L 组、2.00mg /L 组、3.00mg /L 组、5.00mg /L 组MMP －2/β－actin 和MMP －9/β－actin 比较，差异均有统计学意义(P ＜0.05);其中各组间两两比较，差异均有统计学意义(P ＜0.05)。
结论17－AAG 对人乳腺癌MCF －7细胞的增殖具有明显的抑制作用，并能抑制MMP －2和MMP －9的表达，具有剂量依赖性。
【关键词】乳腺肿瘤;17－烯丙氨基格尔德霉素;基质金属蛋白酶2;基质金属蛋白酶9【中图分类号】R 737.9【文献标识码】Adoi ：10.3969/j.issn.1007－9572.2013.01.087Effects of 17－AAG on the Expression of MMP in Human Breast Neoplasm MCF －7Cells XU Qian ，XIAO Li －jun ，ZHAO En －hong ，et al .Basic Medical Institute ，Chengde Medical College ，Chengde 067000，China【Abstract 】Objective To investigate the effects of 17－AAG on the genes and proteins expression of MMP －2and MMP －9in human breast neoplasm MCF －7cells.Methods MCF －7cells were cultivated in DMEM medium ，and MTT meth-od was used to evaluate the inhibitory effects of 17－AAG on the proliferation of MCF －7cells at different time and different dose.The genes and proteins expression of MMP －2and MMP －9were detected by RT －PCR and Western Blotting analy-sis.Results （1）The A value of the control group and groups treated by 17－AAG of 10.000，5.000，2.500，1.250，0.625，0.310and 0.165mg /L for 24h and 48h all showed statistically significant differences （P ＜0.05）.The levels of IC 50treated by different concentration of 17－AAG for 24h are 34.61，the 48h's are 6.22．（2）RT －PCR method was used to de-tect the influence of 17－AAG with different concentration on the expression of MMP －2and MMP －9mRNA in MCF －7cells ，and the results showed that MMP －2/β－actin and MMP －9/β－actin all showed statistically significant differences among con-trol group ，1.00mg /L group ，2.00mg /L group ，3.00mg /L group and 5.00mg /L group （P ＜0.05），and there were also statistically significant differences pairwise （P ＜0.05）.（3）Western Blotting method was used to detect the influence of 17－AAG with different concentration on the expression of MMP －2and MMP －9protein in MCF －7cells ，and the results showed that MMP －2/β－actin and MMP －9/β－actin all showed statistically significant differences among control group ，1.00mg /L group ，2.00mg /L group ，3.00mg /L group and 5.00mg /L group （P ＜0.05），and there were also statistically significant differences pairwise （P ＜0.05）.Conclusion 17－AAG can inhibit the cell proliferation and down regulate the genes and pro-teins expression of MMP －2and MMP －9of human breast neoplasm MCF －7cells in a dose －dependent manner.【Key words 】Breast neoplasms ；17－allylamino －17－demethoxy geldanamycin ；Matrix metalloproteinase 2；Matrix metalloproteinase 9乳腺癌从早期即表现为全身性疾病，可发生血行播散，近年有关乳腺癌侵袭、转移的靶向治疗成为重要课题。
热休克蛋白90（heat shock protein90，HSP90）是一种重要的分子伴侣，可与乳腺癌细胞中的一些信号分子和激酶结合形成复合物，从而参与调控乳腺癌的侵袭转移能力［1］。
乳腺癌细胞对药物破坏HSP90功能显示高度的敏感性，HSP90成为乳腺癌细胞内药物作用的理想靶点。
17－烯丙氨基格尔德霉素（17－allyl-amino－17－demethoxy geldanamycin，17－AAG）作为一种新的HSP90抑制剂，因其独特的作用靶点和高效的抗肿瘤活性及对机体的低毒性近年来备受关注。
17－AAG抗乳腺癌作用显著，目前已在进行Ⅱ期临床实验［2］。
17－AAG有抗乳腺癌侵袭作用，但缺乏深入研究。
本研究以高转移乳腺癌细胞系MCF－7为研究对象，观察了17－AAG对MCF－7细胞基质金属蛋白酶（MMP）－2、MMP－9mRNA和蛋白表达的影响，试图探寻17－AAG对乳腺癌侵袭、转移的干预作用，并明确17－AAG对MMP－2、MMP－9表达调控的抑制作用是其抗侵袭、转移的重要机制之一。
为17－AAG在乳腺癌治疗中的开发和应用提供实验和理论依据，为相关抗肿瘤药物的开发提供新思路。
1材料与方法1.1材料1.1.1细胞来源人乳腺癌MCF－7细胞系由承德医学院附属医院中心实验室惠赠。
1.1.2试剂17－AAG（深圳生尔易美有限公司）；胎牛血清（杭州四季青生物制剂公司）；DMEM培养基、3－（4，5－二甲基噻唑－2）－2，5－二苯基四氮唑溴盐（MTT）、琼脂糖（美国Gibco公司）；Trizol总RNA提取试剂（美国In-vitrogen公司）；反转录聚合酶链反应（RT－PCR）试剂盒（大连宝生物公司）；引物及内参（上海生工）；MMP－2、MMP－9、β－actin单克隆抗体（美国Santa Cruz公司）；辣根酶标记羊抗兔和羊抗鼠IgG（美国KPL公司）；ECL超敏发光液（北京普利莱公司）；DNA Marker（大连宝生物公司）。
1.1.3仪器090－135.001倒置显微镜（德国Leica公司）；Sorvall/Biofuge fresco高速冷冻离心机（德国Heraeus公司）；150培养箱（德国Heraeus公司）；MK3酶标仪（芬兰雷勃公司）；Icycler PCR仪（美国Bio－Rad公司）；96、6孔细胞培养板（美国Corning公司）。