脐血单个核细胞体外诱导分化为肝样细胞的可行性

脐带间充质干细胞体外诱导分化为肝细胞样细胞的研究

养的Ｕ．Ｃ在向肝细胞诱导分化培养体系的培养下，ＣＭＳｓ细胞形态由长梭形逐渐转化成为多角形或类圆形，且表并达ＡＰＡＢｍＮＦ、ＬＲＡ和蛋白，导后的Ｕ — Ｓｓ以时间依赖方式产生ＡＢ诱导后的细胞不表达ＨＡＤ。结论诱ＣＭＣＬ，Ｌ－Ｒ
山东医药２０年第４０８８卷第３化为肝细胞样细胞的研究
任红英。钦军，赵刘拥军，士红，妍涵，忠朝卢李韩
（中国医学科学院血液学研究所，天津３０２）０００
［摘要】目的探讨人脐带问充质于细胞（ｃＭＳｓ体外诱导分化为肝细胞的可行性和方法，察分化后的ｕ — Ｃ）观
ｏｓｒｄａｄｔｐｅｉｓｐｔａｋｒ，ｐａｆｏｍｔｎＡＰａｄａｕｉ（Ｌ）ｍＮｎｒｅｓｅｄｔｔｙｂｅｖｎｅｅｒｓｎｈａｉｍｒｅａｈｔｅ（Ｆ）ｎｂｍｎＡＢＲＡａｄｐｏｉｅｃｄｂｅｈｘ，ｏｏｅｃｓｆｓｌｅｐｉｌｔｎｗｅｅ
Ｒ－ＣｎｙｉａｄｉＴＰＲａａｓｌｓｎｍｍｕｏｕｒｓｅｅｔｉｉｇＦｅｌｖｌｆａｂｍｉｅｓｐｍａａｔｆｃｌｒｅｅｍｅｕｅｙｅｚｍｅｎｆｏｅｃｎｅｓｎｎ．ｎｅｓｏｌｕｎｉｔｕｅｔｎｕｔｅｗｒａｒｄｂｎｙｌａｅｎｈｏｕｓ
ＤｉｅｅｔｔｎｏｕｎｕｉａｏｄｄｒｅｓｎｈｍａｔｍｅｌｆｒｎｉｉｆｈｍａｍｂｌＩｒｅｉｄｍｅｅｃｙｌｅｃｌａｏｉｃｃｖｓｓｉｔｅａｏｙｅｌｅｃｌｎｖｔｎｏｈｐｔｃｔ — ｋｅｌＩｉｏｌｓｒ

PHA—M体外诱导脐血单个核细胞分化为内皮细胞的实验研究

１２方法．
１２１人ＵＭＮ的分离和培养．．ＢＣ
用无菌血袋采集足月妊
在电镜下观察内皮细胞特异性的Ｗｅｅ—ａｄ（Ｐ小体。ｉｌｌｅＷ— ）ｂＰａ结果：ＰＡ的诱导下，ＵＭＮ可分化为典型的梭形内皮在ＨＢＣ细胞。ＦＭ检测诱导分化效率达６％以上；电镜观察发现，Ｃ０在胞质中含有内皮细胞特异性的Ｗ— Ｐ小体。结论：ＵＭＮＢＣ在ＰＡ的诱导下，定向分化为内皮细胞，为用脐血治疗缺Ｈ可
血性疾病的可能性提供了实验依据。
娠、常分娩的新鲜脐血８Ｌ含抗凝剂ＣＤＡ２Ｌ，正０ｍ（Ｐ — ８ｍ）按等比例加入到用３／０ｇＬ明胶沉淀的红细胞中，温静３ｉ。室０ｍｎ收集上层富含有核细胞的血浆，入ＦｃｌＨｐｑｅ分离液进加ｉｌｙａｕｏ— 行密度梯度离心（０／ｎ３ｉ）吸取梯度界面上的２００ｒｍｉ，０ｍｎ。ＵＭＣ以ＰＳ洗３次，置于塑料平皿内。加含１０ｍＬＬ胎ＢＮＢ０／
ＰＨＡ．体外诱导脐血单个核细胞分化为内皮细胞的实验研究Ｍ
徐建萍，卓光生（福建医科大学：医学技术与工程学院检验系， ‘ 附属第一医院血液科，福建福州３００）５０４

脐血单个核细胞体外分离和定向分化为神经干细胞的实验研究

１０）ａｌｓｂｅｔｉｕａｉｎｏｅｙｈｐｅ（ｅｓｔ．７／１ｄｎｉｙｇａｉｎｎｈｎａｈｒｎｕｔａｅＯｏｔｉＳ０ｍ１ｓｍｐｅｙｃｎｒｆｇｔｖｒｌｍｐｏｒｐｄｎｉｙ１０７ｍ）ｅｓｔｒｄｅｔａｄｔｅｄｅｅｔｃｌｖｔｄｔｂａｎＭＣｓｏｉ
（ｐｔｎｆｕｏｏｙ，ｐｉｇＨｏｐｉｌＴ＾ＤｅａｒｍｅｔＮｅｒｌｇＤａｎｓｔ，ｏａ
ＭｉｉａｙＭｅｃｌＵｎｖｒｉｙ，ｈｎｑｎ００２Ｃｈｎ）ｌｔｒｄｉａｉｅｓｔＣｏｇｉｇ４０４。ｉａ
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１４６２
重庆医学２００７年７月第３６卷第１期３
・
论
著・
脐血单个核细胞体外分离和定向分化为神经干细胞的实验研究
向静，昌铭，景周△ 王王
（第三军医大学大坪医院野战外科研究所神经内科，庆４０４）重００２
ｃｏｅ．ｏｏｅｖｈｅｓｐｅｂｉｒｓｏｐｎＯｅｍｉｈｅｐｈｎｏｙｅｆｔｅｌｌｌｎｉｓＴｂｓｒｅｔｈａｙｍｃｏｃｅａｄｔｘａｎｅｔｅｔｐｓｏｈｅｃｌｂｙｆｏｗｙｔｍｅｒｔｅｎｉｓｃｏｔｙ，ｈｎｄｕｅｉｈＮＧＦｃｄｗｔａｎｄＲＡｎｖｔｏ．ｉｉｒＴｈｅｅｒｅｔａｃｉｔｓｌｍｅａｅｃａｎｒａｔｏｎ（ｎｒｖｅｓｒｎｓｒｐａｅｐｏｙｒｓｈｉｅｃｉＲＴ— ＰＣＲ）ｏｒｎｓｉｎｕａｈｉ１ａｉｎｒｒｏｒｅＯｆｅｔｎａｄｍｓｓ一ｎｔｇｅｗｅｅｐｅｆｍｄｔｃｆｒｓｌｎｄｍｕａｈｉａｔｇｅｘｐｅｓｏｎｉＳＣｓＲｅｕｌｓＡｆｅｄｈｅｅｕｌｉｔｏｎ，ｏｔｃｌｓｂｃｍｅｒｍｂｃ，ｎｆｏｎｉｍｎｅｔｎａｓｓ一１ｎｉｎｅｒｓｉｎＭ．ｓｔｔｒａｒｎｔｃｔｖａｉｍｓｅｌｅａｈｏｉａｄｄｉ— ｆｒｎｔａｅｎｔｅｏｎｌｋｅｃｌｆｅｎｄｕｔｏｎ，ｘｐｅｓｎｇＣＤ２ｅｅｉｔｄｉｏｎｕｒ —ｉｅｌｓａｔｒｉｃｉｅｒｓｉ９ｂｕｔｎｏＣＤ３４．ＣＤｎｄＣＤｂ．ＲＴ＿ｌ１ａａ１１ＰＣＲｍｏｎｔａｅｍａ１ｄｅｓｒｔｄｓｌ

脐血单个核细胞成功培养的相关影响因素

是神经等多种细胞的丰富来源。本实验拟通过分别按１ × １０。，５ｘｌ０。，１ × １０的密度置于Ｔ一７５
体外实验条件下获取脐血单个核细胞，探讨脐培养瓶，以未加细胞因子作为对照组，在无血
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侯
萍，等．脐血单个核细胞成功培养的相关影响因素
￣．ｚｇＩｌＳｃＳｋｆＮ１．ｃｏｍ６７３ｋ－ｆ２８３２３２８５５０Ｃ８３Ｎ＠２ｓ１．ｉｎ１ａ５３ｃ９ｏ／ｒＲｎ
课题背景：课题为沈阳市科学技
术计划项目
（１０６３２３９．３．００）
侯萍，宋志国，赵冬阳，刘英杰，李剑平．脐血单个核细胞成功培养的相关影响因素【Ｊ】．中国组织工程研究与临床康复，２００７。１１（３７）：７３７７．７３８０【ｗｗｗ．ｚｇｌｃｋｆ．ｃｏｍｌｚｇｌｃｋｆｌｅｊｏｕｒｎａｌｌｕｐｉｆｌｅｓ／０７－３７／３７ｋ－７３７７（ｐｓ）．ｐｄｆ］
淋巴细胞分离液（１．０７７ｇ／ｃｍ。，天津津脉有限
公司）；无血清ＤＭＥＭ／Ｆ１２培养液（Ｈｙｃｌｏｎｅ）。２结果设计、实施、评估者：实验设计为第五作者，干预实施、结果评估为全部作者，均经过系２．１脐血细胞的生长及形态特征脐血单个统培训，实验过程中未使用盲法评估。

人脐血间充质干细胞诱导分化成心肌细胞的研究

ＹＡＮＧｈｉｘａｇ，ＵＡＮＧｉｇｌｇ，ＡＮＧＺｏｙｎ，ｔａＳｕ— ｉｎＨＪｎ —ｉＷｎｕ — ａｅ１
（户ｒ已￡，ＣｒｚｇＢＰｇＳ￡Ｈ０户ｆＺＢＤＰｎｆ０ｄｏ０，ｉ＾ｄ５口，ｇ１Ｏ３，，）ＯＯ８Ｃｚｎ
ＡｂｔａｔＯｂｅｔｅＴｏｅｐｏｅｔｅｐｓｉｉｔｎｅｔｗａｆｉｄｃｎｓｎｈｍａｔｍｅｌｓｒｃ：ｊｃｉｖｘｌｒｈｏｓｂｌｙａｄｂｓｙｏｎｕｉｇｍｅｅｃｙｌｅｃｌｉｓｓ
脐血间充质干细胞能够被诱导分化成心肌样细胞，成为干细胞移植的细胞来源。可
关键词：质干细胞；血；钙蛋白Ｉ转录因子；球蛋白重链间胎肌；肌
ＨｕａＳｒｍｍｎＭＣｓｆ０ＵＣＢａｉｆｒｎｉｔｎ０ｃｒｉｍｙｃｔｓｆｆｏｃｎｄｆｅｅｔａｅｉｔａｄ００ｙｅ咒ｒ
ａｅｌｎｔｏｄｗｅｅｉｏｌｔｄ，ｎｄＭＳＣｓｗｅｅｆｒｈｅｅａａｅｎｄｐｒｌｆｒｔｄｔｈｒｒｃｌｓｉｈｅｂ１ｏｒｓａｅａｒｕｔｒｓｐｒｔｄａｏｉｅａｅｏｔｅ３ｄ
ｓｅｔｖ１．ｓｌｓＴｈＳｎｕｅｙ５ａａｙｉｉｅｓｏｄｆｒｂａｔ１ｅｍｏｐｏｏｙａｄｐｃｉｅｙＲｅｕｔｅＭＣｓｉｄｃｄｂ一ｚｃｔｄｎｈｗｅｉｏｌｓ一ｉｒｈ１ｇｎｂｋ

人脐血间充质干细胞体外向神经元样细胞分化的实验研究

ｍｅｉｍ．Ａｆｅｒａｅｔ０ｆｌＬｒｔｏｃａｉｎ１／／ａｉｉｒｂａｔｇｏｈｆｃｏ，ｄｕｔｒｔｅｔｄｗｉｈ３ｌ／ｅｉｉｃｄａｄＬＬｂｓｃｆｏｌｓｒｗｔａｔｒｍｏｎ０ｇｂ
ｓｅｃｌｓｉｕｃｄｉｏｎｅｒｔｍｅｌｎｄｅｎｔｕｏｎ—ｉｅｌ．ＭｅｈｏｓＭｏｎｕｌａｅｌｒｒｐｒｄｆｏｈｐｒｎｉｅｌｋｅｃｉｓｔｄｎｏｃｅｒｃｉｓｗｅｅｐｅａｅｒｍｅａｉｚｄｈｕｎｍｂｌｃｌｏｄｂｌｏｄｓｍｐｅｅｒｆｇａｉｏｅｍａｕｉｉａｃｒｏａｌｓｂｙｃｎｔｉｕｔｏｎｖｒＬｙｍｐｈｒｐａｄｃｌｕｒｄｎＭｅｅＣｕｌｏｐｅｎｕｔｅｉｓｎｔ
［ｓｒｃＡｂｔａｔ］ＯｂｅｔｖｎｅｔｇｔｈｅｓｂｌｙｏｕｎｕｉｃｌｃｒｌｏｓｎｈｍａｊｃｉｅＴｏｉｖｓｉａｅｔｅｆａｉｉｔｆｈｍａｍｂｌａｏｄｂｏｄｍｅｅｃｙｌｉｉ
离心方法分离人脐带血单个核细胞，ＭｅｅＣｈ培养液体外扩增生长传代培养，用ｓｎｕ于倒置显微镜下观察其生长特性。取第３代的脐血间充质干细胞，１ｇＩ成纤维细胞生长因子和３ｍｏ／反式维甲酸诱导培养的细胞向神经细胞分用０／０ｂｌＩ全ｃ

胚胎干细胞体外定向诱导分化的研究进展

胚胎干细胞体外定向诱导分化的研究进展（姓名：李翔单位：宁夏师范学院化学与化学工程学院11级科学教育班）摘要：胚胎干细胞是从早期胚胎内细胞团分离培养出来的具有发育全能性或多能性的干细胞,具有多向分化潜能和自我更新的特性。

胚胎干细胞可以定向诱导分化生产组织和细胞,可为细胞移植提供无免疫原性的材料,为难以治愈的疾病的细胞移植治疗提供可能。

本文介绍了胚胎干细胞的诱导分化方法和应用。

关键词：胚胎干细胞;定向诱导分化;分化潜能;自我更新胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)是从早期胚胎(桑椹胚、囊胚)或原始生殖细胞(primordial germ cell,PGCS)分离出来的能在体外永久培养的、具有多方向分化潜能和种系嵌合能力的细胞系。

ES细胞具有多向分化潜能,可分化形成外胚层、中胚层和内胚层细胞的谱系干细胞,再成长为不同的神经、造血、肌肉,骨骼等各种细胞基于其特性,目前普遍认为,ES细胞对体外研究动物和人胚胎的发生发育,基因表达调控,药物的筛选和致畸实验及作为组织细胞移植治疗,克隆治疗和基因治疗的细胞源及产生克隆和转基因动物等领域将产生重要的影响。

1998年,T homson和Gearhart2个研究组分别从人ICM和PGCS建立了人类ES细胞系,在国际上引起了轰动。

Science杂志将人类ES细胞研究成果评为1999年世界十大科技进展之首,美国《时代》周刊将其列为20世纪末世界十大科技成就之首,并认为ES细胞和人类基因组将同时成为新世纪最具发展和应用前景的领域,由此掀起了ES细胞研究的高潮。

1体外诱导ES细胞的原理在体胚胎分化过程中，组织发生和身体构造的形成具有时空顺序性和相互诱导性。

在个体发育过程中，细胞分化是程序控制的有序有规律过程，程序的运行结果表现为不同发育阶段、不同组织部位的细胞表现出不同的形态、不同的生长方式和不同的生理功能。

从分子水平上来看，这一结果取决于细胞在基因表达上的时空差异。

体外诱导人脐带血间充质干细胞为软骨细胞的初步研究

ａｈｒｎｌ．ｗｈｃｘｉｉｄｅｈｒａｆｍｂａｔｌｅｏｓｎｈｍａ — ｌｅｐｅｏｙｅ１ａｓａｅＧｄｅｅｔｌｅｃｓｉｅｈｂｔｉｅｉｌ — ｉｒｍｅｅｃｙｌｉｈｎｔｐ．６ｄｙｆｒＩＦＩｈｅｔｂｓｋｋｔ
ｍｅｉｍｒａｍｅｔｄｕｔｅｔｎ，ＭＳｎｌｙｒｃｌｒｘｉｉｄａｃｏｄｏｙｉｐｅｏｙｅＣｓｉｍｏｏａｅｕｔｅｅｈｂｔｈｎｒｃｔｈｎｔｐ．ｎｕｓｅｃ
ＣｏｃｕｉｎＭＳｓｃｎｂｎｌｓｏＣａｅ
（．ＧｉｅｇＨｏｉｌｆＮａｄａｓｉ，Ｆｓａ１ｕｃｎｓｔｈｐａｏＴｉｔｃｚＤｉｒｔｏｎ，Ｇｕｎｄｎ２２０ｈｎｈａｇｏｇ５８０，Ｃｉａ；２ｅａｔｎＨｉｏｏｙａｄＥｍｂｙｌｙ，Ｙｕｉｎｄｃｌｏｌｅｏ．ＤｐｒｍｅｔｆｏｓｌｎｒｏｇｔｇｏｏｊｇＭｅｉｌｇｒａａＣｅｆＮａｉｎｌｉ，Ｂｉ，Ｇａｇｉ３００ｈｎｔａｉｅｏｔｓａｓｅｕｎｘ３０，Ｃｉａ）５
ｔｒｄｅｔｏｕｉｎｗｅｅｃｌｒｙｇａｉｎｌｔｒｕｔｅ—ｅｐｎｅｅａｓｈｅｌａｔｃｅｄｇｅｏｉｅ，ｔｅＳｓｗｅｅｉｄｃｄｓｏｕｘａｄｄｂｃｕｅｔｅｃｌｔａｈｄａｒｗｎｄｓｓｈｎＭＣｒｕｅｓｎｈｎ

大鼠脐血来源血管内皮细胞的制备和鉴定

昆明医学院学报
２０，（：２ — ５０８５）１２
ＣＮ３一ｌ４／Ｒ５０９
Ｊｕｎ１０ｎ－ｇＭｅｉａｉｅｓｔ０ｒａｆＫｕｍｎｄｃｌＵｎＶｒｉｙ
大鼠脐血来源血管内皮细胞的制备和鉴定
王福科 ” ，刘流 ” ，赵德萍，苏伟婷３Ｊ，李宗芳 ” ，袁瑞红 ’ （）昆明医学院第一附属医院整形外科；２）实验中心，云南昆明６０３；３）中国科学院昆明动物１５０２
０ｏＤｃａｕｆｃｒｅ，ｕｈａｆｓｍｅｓｅｉｌｓＩａｅｍａｋｒｓｃｓＣＤ３ＣＤ３ａｄｖＦ０ｄｅｅｔｃｌｔｒ３ｗｅｋｓａｄ６ｗｅｋｓ４．１３ｎＷｎａｈｒｎｅ１ａｆｅｎｅ．ｓｅ
ＣｅＵｓ仃０ｌＵｍｂｌｃｌｍＲａｔｉｉａｒ０ｄＣ０ｄＢｌ０
ＷＡＮＧｕ— Ｆｋｅ”，ＬＵｕ”，ＺＨＡ０ — ｎ，ＳＷｅ—ｔｎＩＬｉＤｅｐｉｇ２］Ｕｉｉｇ３ＬＩＺｎ —ｆｎ１０ｇａｇ”，ＹＵＡＮｉｈ０Ｒｕ — ｎｇ）
ｃｌｉＭｅｈｄｅｌｉｖｔｓｎｍ．ｔＯｓ
】ｎｎｃｅｒｃＵｅ．ｉｏａｅ０ｕｉｃｌ０ｄｂｏｄ．ｎｒｕｔｒｄｉｎｉ Ⅵ０ｏｕｌａｅｓｗＩｓｌｔｄｆｍｍｈ１ａｒｌｏａｄｗｅｅｃＩｅｎ０ｄ — ｅｒｉｃｕｃ
ｔｎｄｍｅｉｍ（ｕｐｅｅｔｉＯＢ，％ｐｎｃｉ，％ｐｙｍｃ，ＶＧｇＬ，ＩＦｌｇＬ，ｉｅｄｕ０ｓｐＩｍｎｅｗｔｌ％ＦＳｌｅｉｌｌｈｔｙｉｄｈｉｎ０ｎＥＦ２０／Ｇ —２／

脐血单个核细胞体外定向分化为神经干细胞及其致瘤性的实验研究

ｄｎｉｙｇａｉｎｎｈｎａｈｒｎｌｕｔｖｔｄｔｂａｎＭＳｌｎｅ．ｓｒｅｈｈｐｙｍｉｒｓｏｅａｄｅａｎｄｔｅｅｓｔｒｄｅｔａｄｔｅｄｅｅｔｙｃｌａｅｏｏｔｉＣｓｃｏｉｓＯｂｅｖｄｔｅｓａｅｂｃｏｃｐｎｘｍｉｅｈｉｐｅｏｙｅｆｔｅｃｌｙｆｃｔｍｅｒ．ｈｎｉｄｃｄｗｔｈｎｔｐｓｏｈｅｌｂｌｗｙｏｔｔｅｎｕｅｉｈＮＧＦａｄＲＡｎｖｔｏＲｅｅｅｔａｓｒｐａｅｐｌｍｅａｅｃａｎｓｏｙｎｉｉ．ｖｒｒｎｃｔｓｏｙｒｓｈｉｒｓｉ
接种后１２周，在裸鼠皮下不能形成肿瘤，与对照组相比，胞形态学未出现恶性变化。细结论：脐血中存在ＭＳｓ分离后Ｃ，
可以体外扩增，诱导后分化为神经元样细胞，表达ＮＣｓ面标志。裸鼠体内不具有成瘤性。并Ｓ表在脐血能够成为ＮＣＳｓ的新来源。
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・
论著・
２００７年９月第４卷第２６期
脐血单个核细胞体外定化为神经干细胞向分及其致瘤性的研究实验
向静，昌铭，景周王王
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
（三军医大学大坪医院野战外科研究所神经内科，第重庆
血ＭＳｓＣ形态的变化，过流式细胞仪检测干细胞表面抗原的表达。使用ＮＦ和Ｒ通ＧＡ联合诱导后，Ｒ — Ｃ用ＴＰＲ方法鉴定诱导前后神经干细胞（Ｓｓ志物巢蛋白（ｓｎ及Ｍｕａｈ一ＮＣ）标Ｎｅｔ）ｉｓｓｉ１蛋白ｍＲＡ的表达；Ｎ收集培养后７ｄ的ＭＳｓ接Ｃ，

造血生长因子对脐血单个核细胞的体外增殖效应

造血生长因子对脐血单个核细胞的体外增殖效应张伶;黄宗干;涂植光;冯文莉【期刊名称】《第四军医大学学报》【年(卷),期】2003(024)012【摘要】目的: 探讨不同造血生长因子组合对人脐血造血细胞的体外增殖效应.方法:采用免疫荧光染色和祖细胞集落测定,观察人脐血单个核细胞(MNC)经多种造血生长因子的不同组合作用2 wk后其有核细胞、CD34+细胞和祖细胞数量的变化,并用脾结节形成实验和骨髓祖细胞培养等观察其在小鼠体内的短期造血能力.结果: 脐血MNC分别与A(SCF /IL-3/IL-6/G-CSF/GM-CSF),B(SCF/IL-3/IL-6/FL/EPO),C ( SCF/IL-3/IL-6/EPO ),3种造血生长因子组合悬浮培养2 wk,有核细胞、CD34+细胞和祖细胞数量增加.有核细胞总数在B组因子作用下增加最显著[(26±5)倍], 而CD34+细胞数量在A组因子作用下增加最明显[(8±2)倍].3种因子组合对不同种类祖细胞的增殖效应不同,其中A组因子主要刺激早期混合系祖细胞CFU-Mix扩增[(11±2)倍],B组因子主要刺激粒单系祖细胞CFU-GM扩增[( 22±3)倍],C组因子主要刺激早期红系祖细胞BFU-E扩增[(13±4)倍].此外,给受照小鼠输注A组因子作用后的人脐血细胞,13 d在小鼠脾脏形成脾结节(CFU-S),30 d从小鼠骨髓检出造血祖细胞(CFU-GM 和CFU-E),造血细胞数量与从输注新鲜脐血细胞的小鼠体内检出的结果无显著性差异(P>0.05).结论: 造血细胞生长因子对人脐血单个核细胞具有体外扩增效应,不同的造血因子组合对不同种类祖细胞的增殖效应不同.【总页数】3页(P1075-1077)【作者】张伶;黄宗干;涂植光;冯文莉【作者单位】重庆医科大学检验系,重庆,400016;重庆医科大学临床学院血液科,重庆,400016;重庆医科大学检验系,重庆,400016;重庆医科大学检验系,重庆,400016【正文语种】中文【中图分类】R551;R331.1【相关文献】1.不同抗凝剂对人脐血单个核细胞的分离及体外造血细胞扩增效应的影响 [J], 袁惠中;刘玉兰;张燕;张彩;张建华2.脐血单个核细胞体外诱导树突状细胞联合CTLs抗肿瘤效应的研究 [J], 王熙才;伍治平;蒋永新;苏晓三;金丛国;周永春3.增殖细胞核抗原反义寡脱氧核苷酸调节脐血CD34^+造血前体细胞体外扩增和分化的时间效应 [J], 李回军;吴映娥;林莎丽;曾宇然;刘元生4.梁金菇多糖对人脐血单个核细胞增殖活性的增强效应及作用机制的实验研究 [J], 吕海容;李兴玉5.IL-3体外促进脐血造血细胞增殖分化的效应 [J], 王红卫;缪竞诚;张澜生;杨吉成;盛伟华;李丽娥因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

脐血干细胞向肝细胞分化诱导的研究进展

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世界感染杂志
２００７年第７卷第５期
ＷｏｌｕｎｌｆｎｅｔｎＶｌｍｅ，ｕｅ，ｃ０７ｒＪｒａｏＩｆｃｉｏｕＮｍｂｒＯｔ０ｄｏｏ７５（０７５０６．４５２３２２０）０．３７０
Ｋｅｙｗｏｒｄ：ｕｍｂｉｉｌｏｒｏｌｄｂｌｏｄ；ｏｎｕｅｅｌ；ｈｐａｏｃｔｓｄｉｆｒｎｔａｉｎｃａｃｍｎｏｃｌａｃｌｓｅｔｙｅ；ｆｅｅｉｔｏｒ
干细胞是指能自我复制更新并产生细胞特殊种类的未成熟细胞。在特定条件下，可分化成不同的
１脐血干细胞的特性脐血又称胎盘血或脐带血，是胎儿出生时脐带
功能细胞，形成多种组织和器官。干细胞技术已经
成为生命科学领域研究的热点。国每年因肝硬化、我肝癌导致肝功能衰竭死亡的人数超过５万，对于这Ｏ些肝病病人，肝移植和人工生物肝等治疗手段和措施已经在临床中取得了可喜效果，但作为其核心部分的肝细胞来源仍是一个尚未解决的问题。寻找一
术专家论坛术
脐血干细胞向肝细胞分化诱导的研究进展
程军，严家春，马勇
摘要：干细胞技术已经成为生命科学领域的热点。脐血干细胞具有来源丰富、采集方便且无涉及伦理
学等优势，其研究逐渐引起研究者的广泛兴趣。在特定条件下，脐血干细胞可分化为肝细胞，为治疗肝

脐血单个核细胞体外诱导树突状细胞联合CTLs抗肿瘤效应的研究

ＷＡ —ｃｉＷＵＺｉｉｇＪＡＮｏｇ—ｘｎＳｉｏ—Ｓｎ，ＪＮＣｎＮＧＸｉａ，ｈ —ｐｎ，ＩＧＹｎｉ，ＨＵＸａａＩＧｏｇ—ｇｏ，ＺＵＹｎｕＨＯｏｇ—ｃｕｎｈｅ
（ｈｒｆｌｔｏｉｌｆＫｎｉｇＭｅｉｌｏｅｅｕｏｅｅｒｎｔｕｍｒｏｉｌＴｅｄＡｉｅＨｓｔｕｍｎｄａｌｇ，ＴｍｒｓａｃＩｓｔｔｏＴｏｓｔ３ｉｆａｄｐａｏｃＣｌＲｈｉｅｆｕＨｐａｆＹｎａｒｖｃ，ＣｎｅｏＴｏｏ— ｍｏｕｎｎＰｏｉｅｅｔｍｒｉｌｍｕ—Ｔｅｐ，Ｋｎｉｇ６０，Ｃｉ）ｎｒｕｆＢｈｒｙｕｍｎ５１８ｈｎａ１ａ
ＩｄｃｍｅｔｏｎｄｉｉｌｓＤｅｉｅｒｍｒｏｄｎｕｅｎｆＤｅｒｔｃＣｅｌｒｖｄｆｏＣｏｄＢｌｏＭｏｏｕｌａｌｓａｄＣＴＬｓＡｎｉｍｏｍｍｕｉｙｉｔｏｎｎｃｅｒＣｅｌｎｔｔｕｒＩｎｔｎＶｉｒ
ｌｒｓｅｃｓｓＴｅｅｅｔｏｓｐｌｄｗｔｔｍｒｎｉｎｎｃｔｏｃｐｏｙｅｆｏｅｃｎｅａｓｙ．ｈｆｃｆＣｕｅｉｕｏａａｔｅｓｏｙｔｉＴｌｍｈｃｔＣＬ）ｉｕｅｕａｆｓＤｓｈｌｇｏｘｙｓ（Ｔｓｎｃ．ｄ
瘤细胞、结论
经细胞因子组合可以从脐血中诱导出ＤｓＣ，并可诱导肿瘤特异性细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ｙ — ｃｔｏ

脐血CD34 +细胞体外诱导肝样细胞的研究

ｇａｉｎｅｔｉｇｔｎａｄｔｅＣＤ３ｃｌｒｐｒｔｄｆｏＭＮＣｓＴｈｕｎｕｉｉａｏｄｂｏｄｄｒｅｒｄｅｔｃｎｒｆａｉｎｕｏｈ４ｅｌｗｅｅｓｅａｅｒｍｓ．ｅｈｍａｍｂｌｃｃｒｌｏ — ｅｉｄＣＤ３ｃｌｌｖ４ｅｌｓ
用密度梯度离心法分离脐血单个核细胞（ｎｎｃｅｒｅｌＭＮＣ）从ＭＮＣ中获得富集Ｃ４细胞。选用人白血病抑制ｍ００ｕｌｌａｃ，，Ｄ３因子、制瘤素Ｍ、ＦＦａＧ、ｂＧ、ＦＦ肝细胞生长因子、ＧＦ及干细胞生长因子７种细胞因子，Ｅ浓度分别为ｌ、００ｌ、０２０ｌ、ｌ、０２、Ｏ和５ｇｍＬ，０ｎ／设计了４种细胞因子组合，９分别采用这些细胞因子组合体外培养脐血Ｃ４细胞，Ｄ３培养周期为２。以新８ｄ鲜脐血Ｃ４细胞作为对照。每７天检测诱导后细胞中细胞角蛋白ｌｃｔｋｒｔｌ，Ｋ．９、Ｋ．８谷氨酰胺合成酶Ｄ３９（ｙ０ｅａｎ９ｃ１）Ｃ１、ｉ（ｌａｎｙｔｅｓ，）人血清白蛋白（ｌｍｉ，ＬｇｕｍｉｅｓｎｈｔｅＧＳ、ｔａａｂｎＡＢ）以及甲胎蛋白（－ｔｐ０ｅ，Ｐ）ｍＲＡ转录情况，ｕａｆ０ｒｔｉＡＦ的ｅｎＮ．并应用免疫荧光法、过碘酸．夫（ｅｉｄｃａｉ－ｃｉ，Ａ染色与吲哚菁绿（ｎｏｙｎｎｒｅ，Ｃ染色法检测细胞分泌雪ｐｒｉｃｓｈｆＰＳ）ｏｄｉｃａｉｅｇｅｎＩＧ）ｄＡＬ、Ｂ合成糖原以及解毒能力，以此判断是否存在脐血Ｃ４细胞体外向肝样细胞的转分化。结果Ｄ３在经细胞因子诱导后的Ｃ４细胞中均可检测到人肝细胞所能表达的Ｃ－９、Ｋ．８ＧＤ３ＫｌＣ１和Ｓ的ｍＲＮＡ条带，能检测出肝细胞特征性的未ＡＬＢ与ＡＰ的ｍＲＦＮＡ条带；新鲜脐血Ｃ４细胞中以上５种蛋白的ｍＲ而Ｄ３ＮＡ均未能检出。免疫荧光染色观察示诱导前后的细胞中均未能检测到ＡＢ的表达，Ｌ且均不能有效吞噬ＩＧ染料。ＰＣＡＳ反应检测结果显示，经细胞因子诱导后的细胞紫红色糖原沉积区域较新鲜脐血Ｃ４细胞增大，Ｄ３出现紫红色区域的细胞增多。结论因子组合诱导后，虽有肝细胞相关蛋白ｍＲＮＡ表达，但未能转分化为肝样细胞。

人脐带血间充质干细胞诱导肝样细胞研究进展

此类干细胞只具有向一种或密切相关的几种类型细胞分化的能力。间充质干细胞作为一种多能干细胞，有横向分化能力，具
（ｓｎｈｍａｓｅｃｌ，Ｃ）间充质干细胞是来源于中胚ｍｅｅｃｙｌｔｍｅｓＭＳｓ。ｌ层的具有高度自我更新能力和多向分化潜能的成体干细胞（ｄｌｓｅｅ１，泛存在于全身结缔组织和器官间质中。早ａｕｔｔｍｃｌ）广在２Ｏ年前，ａＯｇｗａ等［人就发现人脐带血中存在原始造血干｜］细胞。２０００年，ｒｅＩ将采自脐血的单个核细胞于体外培养Ｅｉｓ］ｃｓ
时，得了间充质细胞，充质细胞形态呈成纤维细胞样，且获间并
在一定的实验条件下可分化为肝细胞［］成骨细胞、骨细１、软
胞、肪细胞、经细胞、骼肌细胞［等，组织工程、因工脂神骨３在］基
ｏｔｏｒｈｉｓＭ］ｏｈａｅＤｔｂｓｙｔＲｖ２０：５ｓｅａｔｒｉ［．ＣｃｒｎａａａｅＳｓｅ，０６２．ｔ［３ＡＩｗａＡ，Ｍｏｉｔ，ＨｏｇａｄＹＴ，ｅａ．Ｃｍｐｒｏｆ５ＩｙＪｏｒｒｙＭＪａｏｌｎｔ１ｏａｉｎｏｓ
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《脐血单个核细胞》课件

特性
脐血单个核细胞具有自我更新、多向分化、免疫调节和分泌细胞因子等功能，是脐血干细胞的重要组分。
生物学功能
自我更新与分化
脐血单个核细胞能够自我更新并分化成多种细胞类型，如造血细
胞、神经细胞和心肌节功能，能够调节机体的免疫反应，促进免疫细胞的发育和分化。
个性化
脐血单个核细胞治疗应针对患者的具体情况制定个性化的治疗方案，以满足患者的特定需求。个性化治疗将有助于提高治疗效果，减少副作用。
细胞治疗的伦理与法律问题
伦理问题
脐血单个核细胞治疗涉及伦理问题，如胚胎干细胞的来源、患者知情同意等。需要遵循伦理原则，尊重患者的自主权和尊严。
法律问题
脐血单个核细胞治疗涉及法律问题，如知识产权保护、技术转让等。需要制定相关法律法规，保护创新成果和技术转让的合法性。
基因编辑技术的应用有助于解决一些遗传性疾病和免疫缺陷疾病，为未来的细胞治疗和再生医学研究奠定基础。
细胞分化与诱导分化
脐血单个核细胞具有多向分化的潜能，可在特定条件下诱导分化为不同类型的细胞，如造血细胞、神经细胞和心肌细胞等。
细胞分化与诱导分化的研究有助于深入了解细胞的发育和分化机制，为再生医学和组织工程提供新的思路和方法。
流式细胞术
利用抗体标记和荧光检测技术，对脐血中的单个核细胞进行分离。
培养条件
01
温度
37℃恒温培养。
02
湿度
95%相对湿度。
03
CO2浓度
5% CO2。
04
培养基
脐血单个核细胞专用培养基，包含必要的生长因子和营养物
质。
细胞鉴定
形态学鉴定
功能鉴定
通过显微镜观察细胞的形态，判断是否为单个核细胞。

体外诱导人脐血CD34 细胞向肝细胞的分化(一)

体外诱导人脐血CD34+细胞向肝细胞的分化(一)作者：张芳婷，叶静，万汇涓，龙霞，聂李平，于洁，房家智【关键词】肝细胞摘要：目的探讨在体外培养条件下人脐血CD34+细胞向肝细胞的分化。

方法用磁性细胞分选试剂盒(MACS)分离出CD34+细胞后在含50mL/LFBS，1×ITS，4.7mg/L亚油酸，10-4mol/L2磷酸抗坏血酸的低糖型DMEM中培养，并以FGF4(100μg/L)、HGF(20μg/L)进行诱导。

分别于生长因子刺激前和刺激8、16d时留取细胞。

通过RTPCR对ALB、AFP、GATA4等mRNA的表达水平进行检测；用免疫细胞化学染色检测ALB 蛋白的表达，并收集培养液测定ALB的质量浓度。

结果流式细胞仪检测结果显示CD34+细胞的平均分离纯度>90%，达到分离要求。

RTPCR 检测到诱导后的CD34+细胞表达ALB、AFP、GATA4mRNA。

免疫细胞化学染色可见诱导16d的CD34+细胞出现ALB阳性表达细胞，ELISA检测表明诱导组8、16d培养液中的ALB质量浓度明显增高，与诱导前和未诱导组相比均有显著差异(P0.01)。

结论在体外培养条件下，脐血CD34+造血干细胞可分化为表达白蛋白的类肝细胞。

关键词：脐血CD34+细胞；肝细胞；分化ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatethedifferentiationofCD34+cellsderivedfro mhumanumbilicalcordbloodintohepatocytecellsinaninvitrosystemsupplem entedwithgrowthfactors(GF).MethodsCD34+cellswereisolatedbymagneticc ellsorting(MACS).ThepurityofacquiredcellswasdeterminedbyFACSanalysis.PurifiedCD34+cellswereculturedinDMEMsupplementedwith50mL/LFBS,1×IT S,10-4mol/Lascorbicacid2phosphate,4.7mg/Llinoleicacid,andacombination ofFGF4(100μg/L)andHGF(20μg/L).Culturedcellswerecollectedafter8dand16 dtodeterminetheextentofthecellconversionbymicroscopicobservationonth emorphology,RTPCRonthetranscriptionofALB,AFPandGATA4mRNA,immuno cytochemistryontheexpressionofALBandELISAonthequantificationoftheALB productinthemedium.ResultsCD34+cellsaccountedformorethan90%afterM ACS.ALB,AFPandGATA4mRNAandalbuminproteinpositivecellswerefoundinc ulturedcellsafter16d.TheALBproductinculturemediumwassignificantlyincre asedafterculturingwithGFincomparisonwithcontrolgroups(P0.01).Conclusio nAconversionofCD34+cellsderivedfromhumanumbilicalcordbloodintohepa tocyelikecellshadbeenobservedinthisexperimentalculturesystem. KEYWORDS:cordbloodCD34+cell;hepatocytes;differentiation骨髓、脐血中的干细胞能够分化为类肝细胞已经被众多实验研究所证实。

不同种培养基对体外诱导免疫细胞的生物活性及细胞毒作用

不同种培养基对体外诱导免疫细胞的生物活性及细胞毒作用王志爽;李新灵;邵晓枫;任峰【摘要】目的:探讨3种培养基对细胞因子诱导免疫细胞在增殖、免疫表型、杀伤、因子分泌等多方面生物学活性的影响.方法:正常人外周血单个核细胞分别用MD-CM-STM-N、AIM-V与RPMI 1640培养基经过CD3McAb、IL-2、IFN-γ诱导并培养.用台盼蓝活细胞计数计算细胞增殖情况,MTT法测定多种癌细胞杀伤,ELISA 双抗夹心法测分泌IFN-γ的表达水平,流式细胞仪检测免疫表型.结果:与RPMI 1640组相比,MD-CM-STM-N和AIM-V组细胞快速增殖期延长至第13天.其中MD-CM-STM-N组最终扩增量最高,杀伤活性亦有明显提高(P＜0.05),CD8+、CD3+、CD56+的表达率也明显增加(P＜0.05)；细胞因子IFN-γ的分泌时间延长.结论:无血清培养基MD-CM-STM-N、AIM-V诱导免疫细胞的增殖能力、免疫表型表达率、细胞毒性、分泌细胞因子水平均高于RPMI 1640培养基,在增殖能力方面MD-CM-STM-N更具优势,为细胞因子诱导免疫细胞治疗提供了实验和理论依据.%Objective: To investigate the effects of three culture mediums on biological activity such as proliferation, phenotypes, killing effect and cytokine secretion. Methods: Peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were cultured with C3McAb, IL-2 and IFN-γ in s erum-free medium MD-CM-STM-N or AIMV or standard serum-containing RPMI 1640 medium separately. Proliferation, phenotypes and cytokine secretion of cells cultured in the three different medium were compared. The cellular proliferative capacity was evaluated by Trypan Blue living cell count, andso did efficiency in killing different tumor cells by MTT, the expression level of the secretory IFN-γ by ELISA, and phenotypes by flow cytometer (FCM).Results: Compared to cells cultured in standard serum-containing RPMI 1640 medium, the proliferation peaks of cells cultured in serum-free medium MD-CM-STM-N and AIMV were prolonged to the 13th day, and in the serum-free medium MD-CM-STM-N group ability of proliferation and the killing activity were significantly increased (P<0.05). More percentage of cells cultured in serum-free medium expressed CD8+, CD3+ and CD56+(P<0.05) , cells cultured in serum-free medium secreted more IFN- 7. Conclusion: The proliferative capacity, expression rate of phenotypes, cytotoxicity and cytokine secretion level of immune cells in the serum-free medium MD-CM-STM-N and AIMV are higher than those of them in standard serum-containing RPMI 1640 medium, and MD-CM-STM-N has the advantage of proliferative capacity which provides the experimental and theoretical basis for cytokine-induced immune cells therapy.【期刊名称】《天津医科大学学报》【年(卷),期】2013(019)002【总页数】4页(P110-113)【关键词】细胞因子诱导杀伤细胞;无血清培养基;生物活性;人B淋巴瘤细胞;人红白血病细胞【作者】王志爽;李新灵;邵晓枫;任峰【作者单位】天津斯坦姆再生医学技术研究开发中心,天津300384【正文语种】中文【中图分类】Q813关于肿瘤的治疗传统方法如外科手术、放疗、化疗常常无法完全清除转移的恶性肿瘤细胞。

脐带血单个核细胞迁移体外实验研究的开题报告

脐带血单个核细胞迁移体外实验研究的开题报告一、研究背景脐带血（UCB）是一个重要的来源，包含了丰富的造血干细胞和免疫细胞，被应用于实现造血和免疫重建。

UCB对于临床的应用有很大的潜力，而单个核细胞（SNCs）作为UCB中的一种细胞类型，在此方面有着潜在的功效。

SNCs在UCB中占比较低，但具有独特的功能，能够迁移至其他组织，并发挥生物学效应。

虽然对SNCs进行了广泛的研究，但其迁移机制仍不完全清楚。

因此，进一步研究SNCs在细胞水平上的迁移机制具有很大的意义。

二、研究问题UCB中的SNCs可以迁移至其他组织发挥生物学效应，但其迁移机制仍未被完全阐明。

因此，本研究旨在探究SNCs在体外的迁移机制。

三、研究内容和方法本研究将采用体外细胞迁移试验，建立SNCs迁移的体外模型，评估SNCs迁移的能力和机制。

具体步骤如下：1. 提取UCB，并通过梯度离心法分离SNCs。

2. 构建细胞迁移实验体系，将SNCs放置在Boyden室中。

3. 向Boyden室中加入不同的化学物质，例如CXCL12、CCR7等，以评估这些物质是否能促进或抑制细胞迁移。

4. 使用荧光染色和显微镜观察和记录细胞迁移的情况。

5. 分析和比较不同组的数据，探索SNCs的迁移机制。

四、预期成果通过体外实验，本研究将探索UCB中SNCs的迁移机制，为进一步研究其在体内的作用奠定基础。

预计可以得到以下成果：1. 得到SNCs在体外迁移的能力和方式。

2. 确定影响SNCs迁移的因素和机制。

3. 为UCB的临床应用提供理论基础。

五、研究意义UCB作为一种重要的来源，SNCs具有在体外和体内迁移的功能，具有良好的生物学效应。

本研究将探索SNCs迁移的机制和影响因素，为其在临床应用中的发挥作用提供理论基础。

此外，研究结果还可以为相关研究提供参考，促进干细胞和免疫细胞的研究和应用。