续骨活血汤类方对家兔骨折愈合TGF-β1因子表达的影响

河南中医学院２０１3届硕士研究生学位论文

续骨活血汤类方对家兔骨折愈合TGF-β1

因子表达的影响

研究生姓名：耿端

导师：孙永强教授

指导组成员：魏景梅教授

王上增副教授

艾进伟副教授

和艳红副教授

学科、专业：中医骨伤科学

所属院、部：第二临床医学院

中国·郑州

２０１3年４月30日

硕士学位论文原创性声明

本人所呈交的硕士学位论文，是在导师刘新灿教授的指导下，独立进行科学研究工作所取得的成果。除文中已特别加以注明引用的内容外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。

特此声明。

论文作者（签名）：

年月日

硕士学位论文使用授权声明

本人已完全了解河南中医学院有关保留、使用硕士学位论文的相关规定，同意学校保留或向国家有关部门、机构送交本学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权河南中医学院可以将本论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编本论文（注：保密论文在解密后适用本授权声明）。

特此声明。

论文作者（签名）：导师（签名）：

年月日年月日

目录

摘要 (1)

Abstract (3)

前言 (5)

对象与方法 (8)

1 实验材料 (8)

1.1实验动物 (8)

1.2主要药物 (8)

1.3主要仪器 (8)

2实验方法 (8)

2.1 动物分组及模型建立方法： (8)

2.2造模方法： (9)

2.3血清TGF-Β1因子检测 (9)

3统计学处理 (9)

结果 (10)

讨论 (11)

1 骨折愈合的生理机制 (11)

2 TGF-β1促进骨折愈合的分子学作用机制 (12)

3 导师的学术思想及续骨活血汤类方方义分析 (12)

4 本实验的研究目的与展望 (13)

结论 (14)

致谢 (15)

参考文献 (16)

附录1 文献综述 (18)

1转化生长因子TGF-Β的研究进展 (18)

2影响骨折愈合的因素 (19)

3骨折的分类与治疗标准 (19)

4中医药对骨折治疗的研究 (21)

附录2在校期间论文论著和科研情况 (27)

摘要

摘要

目的：本研究通过分组建立家兔骨折模型，实验组使用续骨活血汤类方进行干预，在两组样本骨折愈合过程中测量其血清生长转化因子TGF-β1的变化，探讨中药在骨折治疗中的疗效和机制，观察续骨活血汤对家兔早期骨折愈合中TGF-β1因子浓度影响，以明确续骨活血汤的治疗作用，在分子生物学上对续骨活血汤促进骨折愈合提供明确的实验证据。

方法：成年家兔36只随机分成两组: 对照组(A)、实验组(B)，A组和B组按单侧桡骨中上1／3标准骨折方法造模,不作任何外固定,分笼饲养.从手术后第2天开始下胃管灌胃给药,B组每天以续骨活血汤水煎液5ml灌胃1次, A组同时给予等量生理盐水.于术前、术后7天、14天、21天、28天每组随机抽出6只抽取血液，使用标准规格酶标仪测量血清TGF -β<1>因子浓度。根据所得数值采用IBM SPSS19.0软件进行统计学检验。

结果：实验组术后不同时间点的血清转化生长因子β1含量较对照组血清转化生长因子β1含量变化更加明显，实验组术后第1周时血清转化生长因子β1含量开始升高，2周以后升高趋势明显。术后第3周时为达到峰值，第4周时没有升高但仍维持较高水平。对照组术后1周血清转化生长因子β1 含量略有升高，术后第 3 周时达到峰值，术后第4周血清转化生长因子β1含量明显下降，实验组术后1周后各个时间点血清转化生长因子β1含量要高于对照组，4周时明显高于对照组。运用统计方法得出术后1周、2周、3周、4周实验组与对照组比较血清转化生长因子β1含量差异有显著性意义(P< 0.05 ）。

结论：续骨活血汤方药对家兔骨折早期的血清TGF-β1的变化有明显的干预效果，能有效提高骨折家兔血清TGF-β1因子的含量，活血续骨汤方中血竭活血散瘀、定痛、止血生肌、敛疮，配没药，增强其活血破瘀之力;配乳香，生肌活血，又敛疮、伸筋;骨碎补降火滋阴、补肾健骨;当归补血活血通络;熟地滋阴养血、补精益髓，赤芍、红花通经活血、止痛祛瘀;黄芪、人参补益气血，甘草调和诸药。诸药合用，活络舒筋，补益肝肾，养血宜气，接骨生新。本实验得到结果：实验组术后第1周时血清转化生长因子β1含量开始升高，2周以后升高趋势明显。术后第3周时为达到峰值，第4周时没有升高但仍维持较高水平。对照组术后1周血清转化生长因子β1含量略有升高，术后第3 周时达到峰值，术后第4周血清转化生长因子β1含量明显下降，实验组术后1周后各个时间点血清转化生长因子β1含量要高于对照组，4周时明显高于对照组运用统计方法得出术后1周、2周、3周、4周实验组与对照组比较血清转化生长因子β1含量差异有显著性意义(P< 0.05）。证实了续骨活血汤药物对促进骨折愈合的良好效

续骨活血汤类方对家兔骨折愈合TGF-β1 因子表达的影响

果，明确续骨活血汤的治疗作用，在分子生物学上对续骨活血汤促进骨折愈合提供明确的实验证据。基于以往对TGF-β1能有效刺激骨骼生长愈合的研究事实，续骨活血汤对家兔骨折愈合中TGF-β1因子浓度影响的研究更能确定该汤剂对于骨折愈合中相应的作用。

关键词：骨折愈合续骨活血汤转化生长因子β1

Abstract

Xu gu huo xue tang fracture effect expression of transforming

growth factor-β1 healing in rabbits

Geng duan（Internal Medicine of Traditional Chinese Medicine）

Directed by sun yong qiang

Abstract

Objective: the purpose of this study to establish rabbit fracture model group, experimental group using Xu gu huo xue tang class party intervention, measuring changes in the serum levels of transforming growth factor beta 1, TGF- in two groups of sample fracture healing process, to explore traditional Chinese medicine curative effect and mechanism in treatment of fractures, observation of Xu gu huo xue tang early fracture healing in rabbits effect of the concentration of TGF- β1 factors, with a definite therapeutic effect Xu gu huo xue tang, in molecular biology of Xu gu huo xue tang promote healing provides clear experimental evidence of fracture.

Methods: 36 adult rabbits were randomly divided into two groups: control group ( A ), experimental group ( B ), A group and B group according to unilateral radius 1 / 3 standard fracture modeling approach, without any external fixation, in separate cages. Starting from the second day after operation of gastric gavage administration every day, B group with continued bone Huoxue soup Decoction of 5ml gavage for 1 times, while group A was treated with normal saline. , in Preoperative , after 7 days, 14 days, 21 days, 28 days out of 8 randomly selected blood, standard measurement of serum TGF - β<1> factor concentrations using standard enzyme. According to the numerical value using IBM SPSS19.0 software for statistical test.

Results:in the experimental group at different time points after operation serum transforming growth factor beta 1 compared with control group, the serum levels of transforming growth factor beta 1 was more obvious changes, the experimental group first weeks after operation, serum transforming growth factor beta 1 was increased, increased obviously after 2 weeks. At third weeks after operation to reach the peak, at fourth weeks did not rise but still maintained at a high level. The control group was 1 Zhou Xueqing transforming growth factor beta 1 content increase slightly, after third Zhou Shida to the peak, fourth weeks of serum transforming growth factor beta 1 content decreased significantly after the operation, the experimental group 1 weeks after the operation, each time point of serum transforming growth factor beta 1 was higher than that in control group, 3 weeks control group two times. The experimental group and the control group after second days, 1 weeks of serum transforming growth factor