EHEC O157：H7紧密黏附素C300与LTB融合基因克隆与序列分析

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设计引物采用ＰＲ技术从ＥＣＯ１７ＨＣＨＥ５：７基因组中扩增Ｉｔｉ３０的编码基因，ｎｉｎＣ０ｍ从肠产毒性大肠埃希从ＥＥ１７ＨＨＣＯ５：７基因组中扩增出了９０ｂ０ｐ的目的片段，从肠产毒
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
菌基因组中扩增ＬＢ的编码基因，Ｔ分别构建克隆载体ｐＣ８Ｃ０Ｕ１．３０和ｐＣ８ＬＢ采用酶切位点相连技术，Ｕ１－Ｔ，构建
ＣｏｆｓｏｎｓｉｎｕｉｎＧｅｅｎＥＨＥＣ１７：ＩＯ５Ｉ７
ＪＡＮＧＬ，ＩＩｉＪＡＮＧｎＳＯＬｎ —ｈｎＹａ —Ｕ，ＩＭｉｇｃｅｇ
（ｄａｓｅｔｏｌｅｆＢｉｕｎｖｒｔ，ｉｎ１２１，ｈｎ）ＭｅｉｌｎｃＣｌｇｅａＵｉｓｙＪｉ３０３ＣｉａｃＩｐｅｏｈｅｉｌ
关键词：出血大肠埃希菌Ｏ５：７紧密黏附素Ｃ０不耐热肠毒素Ｂ亚单位（Ｔ）肠１７Ｈ；３０；ＬＢ
中图分类号：３８２Ｒ７．文献标志码：Ａ
ＣｌｎｎｅｕｎｃａｙｉｆＩｔｍｉ０ＬＴＢｏｅａｄＳｑｅｅＡｎｌｓｓｏｎｉｎＣ３０－
ＩｔｎＣ３０ＬＢｗａｏｓｒｃｅａｄｓｑｅｃｎｒｖｄｔｅｐｒｅｔｒｓｌ．ｎｌｓｏＴｅｇｎｓｏＴｎｉ０．Ｔｓｃｎｔｔｄ，ｎｅｕｎｉｇｐｏｅｈｅｆｃｅｕｔＣｏｃｕｉｎｍｉｕｓｈｅｅｆＬＢａｄＩｔｎＣ０ｅｅｃｏｅｏｒｃｌｎｈＵＣ１．３０，ＵＣ１．ＴｎＵＣ９ＩｔｎＣ０ＬＢｃｏｅｎｎｉ３０ｗｒｌｎｄｃｒｅｔａｄｔｅｐｍｉｙ８Ｃ０ｐ８ＬＢａｄｐ１一ｉ３０・Ｔｌｎｎｍｉｖｃｏｓｗｒｏｓｒｃｅｕｃｓｆｌ．ｈｕｉｎｇｎｆｎｉｎＣ０一ＴａｉｅｆｕｄｔｎｆｒｅｅｏｉｇｅｔｒｅｅｃｎｔｔｄｓｃｅｓｌＴｅｆｓｅｅｏｔｕｕｙｏＩｍｉ３０ＬＢｈｓａｄｔｎａｉｖｌｐｎｌｈｏｏｏｄ
第１卷第３期１
２１００年６月
北华大学学报（自然科学版）
ＪＵＮＬＯＥＨＵＮＶＲＩＹ（ａｕａＳｉｃ）ＯＲＡＦＢＩＡＵＩＥＳＴＮｔｒｌｃｎｅｅ
Ｖｏ．１Ｎｏ３１１．
Ｊｎ２１ｕ．００
（ＨＣ）１７ＨｎｅｈａｌｉｎｅｏｏｉＢ（Ｔ．ｔｏＴｅｐｉｒｆｔｎＣ０ｎＴＥＥＯ５：７ａｄｔｅｔａｌｅｔｒｔｎｈｂｅｘＬＢ）ＭｅｈｄｈｒｓｏＩｉ３０ａｄＬＢｍｅｒｎｍｉ
文章编号：０９４２（０００－２５０１０－８２２１）３０２－４
ＥＣ０１７：７紧密黏附素Ｃ０ＨＥＨ５３０与ＬＢ融合基因克隆与序列分析Ｔ
蒋丽，炎硕，明成姜李
１２１）３０３（北华大学医学检验学院，吉林吉林
ＡｂｔａｔＯｂｅｔｅＴｏｓｕｔｔｌｅｖｃｒｏｅＩｔｉ３０ＬＢｆｍｔｅＨｍｒａｅＥｃｌｓｃ：ｊｃｉｏｃｎｔｃｈｃｏｅｔｆｔｎｉｎＣ０一Ｔｒｈｅｏｒｇ．ｏｉｒｖｒｅｎｏｈｍｏｈ
摘要：目的
方法
构建肠出血性大肠埃希菌（ＨＣ０５：７紧密黏附素Ｃ端免疫保护片段与肠黏膜佐剂大肠埃希ＥＥ）１７Ｈ一
菌不耐热肠毒素Ｂ亚单位（Ｔ的融合基因克隆载体，ＬＢ）为进一步研究ＥＥ１７：７重组疫苗奠定了基础．ＨＣＯ５Ｈ
ｐＣ９Ｃ０一ＴＵ１．３０ＬＢ克隆载体，并测序．结果
素大肠埃希菌基因组扩增出了２５ｂ７ｐ的目的片段，分别插入载体ｐＣ８和ｐＣ９经酶切及测序鉴定与目的序Ｕ１Ｕ１，列一致．结论克隆出ＥＥ１７ＨＨＣＯ５：７的紧密黏附素ｃ端免疫保护片段与不耐热肠毒素Ｂ亚单位基因，成功一并构建融合基因克隆载体，测序正确．
ｗｅｅｄｓｇｅｎｈｒｅｉｎｄａｄｔｅＰＣＲｅｈｑｕｓｕｅｏａｔｃｎｉｅｗａｓｄｔｍｐｌｙｔｅｔｒｅｅｓｆｏｔｅｇｎｍｅｆＥＨＥＣ５Ｈ７ｉｈａｇｔｇｎｅｒｍｈｅｏｓｏｆＯ１７：ａｄＥＨＥＣｒｓｅｔｅｙＴｈｌＨｅｔｒＵＣ１ＩｉｎＣ３０，ＵＣ１ＬｎＵＣ１Ｉｔｍｉ０ＬＴＢｗｅｅｎｅｐｃｉｌ．ｅｃｏｅｖｃｏｓｐｖ８一ｎｔｍｉ０ｐ８－ＴＢａｄｐ９－ｎｉｎＣ３０一ｒ
ｃｎｔｃｅｒｕｔｅｅｕｎｉｇａｄｉｅｔｃｔｎＲｓｌＴｅｏｊｃｉａｍｎｓｆ７ｐＬＢａｄ９０ｏｓｕｔｆｒｒｑｅｃｎｎｎｆａｉ．ｅｕｔｒｄｏｆｈｓｄｉｉｏｓｈｂｅｔｅｆｇｅｔｏ５ｂ（Ｔ）ｎ０ｖｒ２ｂ（ｎｉｎＣ０）ｏＨＥ１７ＨｎＨＣｗｒａｌｅｙＰＲ．ｈｅｏｂｎｎｐａｍｉｐＣ９ｐＩｔ３０ｆｍＥＣＯ５：７ａｄＥＥｅｅｍｐｉｄｂＣＴｅｒｃｍｉａｔｌｓｄＵ１－ｍｉｒｉｆ