第19章 支原体

防治原则
要预防艾滋病等继发性免疫缺陷病。 治疗用大环内酯类抗生素。
思考题
名词解释： 支原体 问答题： 1、请比较支原体和细菌L型的主要区别？ 2、常见的支原体主要有哪几类？ 分别引起什么疾病？
微生物学检查法
1．标本的采集
（1）非淋菌性尿道炎患者——中段尿。 （2）慢性前列腺炎患者——前列腺液。 （3）原因不明的不育症患者——精液。 （4）阴道炎、宫颈炎患者——炎性分泌 物、羊水、血液。 标本→离心→取沉淀物→送检。
检验方法
1.标本直接检查
（1）核酸检测——PCR法。快速简便、稳定可靠、敏感性高。 （2）ELISA——特异性强、较敏感，有早期诊断意义。 （3）免疫斑点试验（IDT）：利用免疫斑点试验检测抗原提取物和 Uu培养物。敏感、特异性强、快速，不需特殊仪器，易于推广。
微生物学检查法
标本的采集
通常采集病人咽拭子、鼻拭子、痰、支气管分泌 物、含嗽液。其中以拭子为最佳。 • 注意事项： （1）因支原体对热、干燥敏感。取材后应立即 接种； （2）如不能立即接种可置于蔗糖磷酸盐缓冲液， 4℃保存72h，-70℃可长期保存。
检验方法
1.标本直接检查 （１）直接镜检
Gram染色G-不易着染。
免疫性 病后免疫力短暂，可反复感染。
以体液免疫为主，细胞免疫也起作用。 1.早期感染 刺激 单核-巨噬细胞 产生
可扩张血管 ；增强吞噬细胞的功能 诱导IL-6的产生 诱导肝细胞产生急性期蛋白 激活补体 促进单核MΦ的吞噬作用 急性期炎症 因子IL-1和 TNFa
2.产生的抗体IgG1和IgG2有调理作用
第一节 概述
1.概念 支原体是一群无细胞些壁能独立生存的，介 于病毒与细菌之间的原核生物界微生物。 2.特点 (1)体积很小（200nm）能通过滤菌器。 (2)有细胞结构，但无细胞壁，也无胞壁粘肽或其 先质。 (3)可在无生命的培养基上生长（如营养丰富的琼 脂培养基），形成微小菌落。 (4)呈二分裂繁殖。
内外两层——蛋白质。
①细胞由三 成结构组成
中层——脂质，其中胆固醇 占36%。 核糖体——Pr合成的重要场所。 ②细胞浆 双链环形 DNA。 ③近细胞丝状体尖端有一球状的特殊结构， 使支原体粘附于宿主上皮细胞表面。
4.大小： 0.2～0.3m, 为原核细胞界微 生物中最小者。 可通过除菌滤器。
培养特点
标本→涂片→
电镜观察无细胞壁易与细菌区别。
（２）核酸检测 ：用PCR法快速、敏感、特异操作中应特别
小心、防止污染。
2.分离培养：慢阳性率不高对临床快速诊断意义不大，但对流
行病学调查有一定意义。
3.血清学检查——抗体检测。 （１）ELISA——特异、敏感、快速目前常用而可靠方 法可检测IgM和IgG。 （２）生长抑制试验（ＧＩＴ） （３）代谢抑制试验（ＭＩＴ）
微来自百度文库物学检查法
• 1．标本的采集——取材对象为AIDS患 者和HIV感染者。 • （1）咽部粘液 • （2）AIDS患者组织块作免疫组化或电 镜技术检测。
• 37℃ 每天观察颜色有无变化→如由红变黄透 明、无沉淀→视培养可疑阳性→再用滤过，滤 液转种传代，当培养基颜色再次由红变黄则认 为“初代培养阳性”。 • （2）生化反应 • ①葡萄糖发酵试验 • ②精氨酸水解试验 • ③脲素酶试验 • （3）代谢抑制试验（MIT） • （4）PCR
４.分子生物学检测：快速，敏感性高，特异性强 核酸探针、ＰＣＲ
防治原则
预 治 防 疗
死疫苗和减毒活疫苗的效果尚不肯定。
红霉素、链霉素、螺旋霉素等。
二、
溶脲脲原体
（Ureaplasma urealyticum，Uu）
• 是可引起泌尿生殖道感染的病原体
生物学性状
• 1．形态结构：基本同肺炎支原体。 • 2．培养特点 • （1）营养要求较高 • （2）固体培养基 95%N2、5%CO2 形成15～50μm颗粒状“荷包蛋”样小 菌落（放大200×才能见到） • 3．生化反应 • 不分解葡萄糖和精氨酸 脲酶 +。 • 4.抗原结构（1）脂多糖Ag。 • （2）蛋白质抗原。 • （3）脲酶Ag——种特异性Ag。 • 5．抵抗力：基本同肺炎支原体。
致病性与免疫性
致病物质
1.黏附因子P1蛋白的定植作用:可吸附于宿主呼吸道黏膜细胞、 红细胞等表面的受体神径氨酸酶上,避免微纤毛运动将其排除。 2.毒性代谢产物损害宿主黏膜上皮细胞，出现肿胀，坏死和脱 落，微纤毛运动减弱。 3.荚膜具有抗吞噬作用，也有毒性。 4.糖脂抗原：与宿主细胞有共同抗原决定簇，故可引起变态反 应，导致免疫损伤。
1.可在人工培养基上繁殖，但营养要求颇高。 2.偏硷环境（pH7.6～8.0）生长适宜，中性生长较差， 酸性被抑制或死亡。但溶脲脲原体除外（pH6.0～6.5最 适宜）。 3.有氧无氧均能生长。 4.固体培养基：经2～3d见小的集落犹如“油煎蛋 样”——集落中央长入培养基中（向内凹陷）边缘扁平 贴附在培养基上。 5.繁殖速度缓慢（3～4h一代） 繁殖方式多样化。 (1)二分裂 (2)颗粒型 (3)丝状体 (4)出芽
第19章
支原体
李影林 2011年4月
主讲人： 《中 华 医 学 检 验 全 书》 主 编 北华大学临床微生物学 教 授 海 南 医 学 院 外聘教授
目的要求
• 掌握：支原体的概念和生物学性状， 支原体与L型的主要区别。 • 熟悉：肺炎支原体、溶脲脲原体所致 疾病。 • 了解：冷凝集试验的原理和应用。
支原体与细菌L型的区别
支原体 1、在遗传上与细菌无关 2、在任何情况下，不能 变成细菌 3、生长缓慢，菌落较小， 直径 0.1-0.3 4、液体培养时混浊度极低 5、除无胆淄原体外，生长 时需要胆固醇。 细菌 L 型 在遗传上与原菌有关 在无诱导因素作用下， 易回复为原菌 菌落稍大，直径 0.5-1.0 液体培养时混浊度低，可 粘附与管壁或沉于管底。 不一定需要胆固醇。
生化反应
多数分解葡萄糖产酸不产气，一般不分解蛋白质。通常 根据能否利用葡萄糖、水解精氨酸和尿素与其他致病性 支原体区别。
抗原构造：颇为复杂。
其主要Ag性来自细胞膜。胞膜外层蛋白质是主要型特异 性Ag。其抗原性常用生长抑制试验（GIT）和代谢抑 制试验（MIT）鉴定。
GIT：将吸有型特异性抗血清 的滤纸片贴在接种过支原体的 平板上，孵育后，如有抑制生 长现象出现，则说明该支原体 与血清同型。 生长抑制试验 （GIT） MIT：是将支原体接种在含有抗 血清的葡萄糖（酚红）培养基中， 若抗体与支原体型一致，则抑制 该支原体不能分解葡萄糖产酸， 酚红不变色。 用GIT和MIT可将支原体分成若 干血清型。 代谢抑制试验（MIT）
致病性和免疫性
• Uu多寄生在男性尿道、包皮和女性阴道。 1.上行引起男性前列腺炎或附睾丸。 2.女性阴道炎、宫颈炎并导致流产。 3.早产儿及低体重新生儿呼吸道和中枢N系统感 染。 4.淋病患者损伤泌尿生殖道粘膜，有利于Uu的 粘附，故淋病治愈后，有些人仍有症状遗留。
溶脲脲原体引起不孕症的原因
１.吸附精子表面，阻碍精子运动； ２.产生神经氨酸酶样物质，干扰卵 子与精子结合； ３.溶脲脲原体与精子有共同抗原， 溶脲脲原体感染刺激机体产生的抗 体对精子产生损伤。
主要致病支原体
肺炎支原体
溶脲脲原体
肺炎
泌尿生殖系感染、 不育症
人型支原体
生殖器支原体
第二节 主要致病支原体
一、肺炎支原体（Mycoplasma pneumonia） 形态与结构
1.G-，不易着染，Giemsa染色呈 淡紫色/浅蓝色。 2.无固定形状，而呈多形性（球、 杆、丝、颗粒、星、螺分枝），其 典型形态似酒瓶状。 3.结构：无细胞壁，仅有细胞膜。 电镜观察：
分
类
• 目前已知150余种。其中寄生性支原体有90余种，而人体支原体至少有15 种。 • 为软皮体纲（Mollicutes），支原体目（Mycoplamatales）， 支原体科（Mycoplasmaceae）。 无胆甾原体属（Acholeplasma） 厌氧原体属（Anaeroplasma） 无固醇原体属（Asterolplasma） 支原体属（Mycoplasma）：64个种 螺原体属（Spiroplasma） 脲原体属（Ureaplasma）：二个种 其中对人致病主要有5种，包括： 肺炎支原体（M.pneumoniae） 人型支原体（M.hominis） 生殖器支原体（M.genitalium） 穿通支原体（M.penetraus） 溶脲脲原体（U.urealyticum）
致病性与免疫性
• 1．致病因素 • （1）MPe的尖形结构具有粘附和穿入或动物 的红细胞、淋巴细胞和单核细胞，在细胞中大 量复制，导制细胞受损和死亡。 • （2）MPe对HIV感染者T细胞的作用，可促进 HIV的复制和病程发展。 • （3）MPe对诱导肿瘤坏死因子TNF-α（由巨 噬细胞产生）的表达可能也是造成损伤细胞的 主要因素。 • 2．所致疾病：多数人认为Mpe感染是艾滋病 的辅助致病因素。
所致疾病
支原体肺炎
①肺炎，症状轻重不一，婴幼儿较重。成人 通常较细菌性肺炎轻，有时无明显症状。 ②支气管炎：陈发性咳嗽，胸部不适。 ③咽炎。 ④鼓膜炎——鼓膜出现疱疹、常为出血性的。 ⑤神经系统及其它系统损伤，少数患者出现 脑膜脑炎。
•以隐性感染为主，可伴有 呼吸道外症状，X线肺部 呈羽毛状浸润 传播： 飞沫
激活补体。
3.呼吸道黏膜分泌的SIgA有阻止肺炎支原体的吸附作用。
4.肺炎支原体与人类心、肺、脑和肾有共同抗原，可引起Ⅱ 型变态反应（如溶血性贫血、血小板减少性紫癜、心肌炎、肾炎、脑膜炎和
格林巴利综合征）。
5.IgG与相应抗原组成免疫复合物引起Ⅲ型超敏反应，如心 肌炎和肾炎等。 6.肺炎支原体作为超级抗原可激活CD4+T细胞
2.分离培养
• 标本 接种于 pH6.0含酚红和尿素的液体培养基 37℃ 观察颜 色变化 .
3.抗体检测——意义不大。
防治原则
注意性卫生，感染者用强力霉 素，红霉素，氯霉素等
三、穿透支原体
（M.Pentrans，MPe）
• • • • • • • • • • 人们越来越证实MPe是加速AIDS进程的辅助致病因素。 1．形态结构杆状或长烧瓶状结构与肺炎支原体相似 2．培养特点 （1）营养要求高，培养基中需加血清。 （2）生长缓慢。 （3）在改良SP-4培养基上菌落呈“荷包蛋”样。 （4）液体培养基：无明显的混浊或沉淀，呈透明状。 3．生化反应：发酵葡萄糖，水解精氨酸，但不分解尿素。 4．Ag构造与其他支原体不同。 5．抵抗力：红霉素、四环素、林可霉素敏感，但对青霉 素不敏感。
若相应，则支原 体生长、代谢受抑 制，酚红不变色
抵抗力（无细胞壁）
有些和一般细菌的繁殖体相似，但多数比较娇嫩。 1.对热、干燥，一般重金属盐类和一般化学消毒剂 敏感 2.对表面活性 敏感 3.对青霉素、链霉素头孢菌素结晶紫，醋酸铊则有一定的抵抗 力。 4.对作用于胆固醇的药物（二性霉素B等）和干扰 蛋白质合成的药物（强力霉素、氯霉素、红霉素、 链霉素等）敏感。
（４）补体结合试验（CF）——常用 （５）间接血凝试验 （６）冷凝集试验——是检测患者血清中 冷凝集素的一种非特异性试验。但仅 33%～76%患者出现阳性。（效价≥1： 64），效价越高或4×以上升高，近期感 染的可能性大。
• 用病人血清与人O型红细胞或自身红细胞 • 混合4℃过夜，观察红细胞的凝集现象，37℃ 时凝集又分开，即冷凝集试验