选修第三章总结

若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物 。 进行 (2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进 行转化实验。之后将这些受体细胞接种到含四环素的培养基中， 能生长百度文库受体细胞所含有的连接产物是 ，若接 种到含青霉素的培养基中，能生长的受体细胞所含有的连接产 物是 。 (3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是___ ，其合成的产物是 。 (4)在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在 。 酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶为
将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶 切所产生的黏性末端相同，用DNA连接酶处理后，不同的片 段随机结合，可形成3种不同的连接物，这些连接物可采用电 泳、层析或超速离心等手段分离纯化，将这3种连接物导入受 体菌后，可根据不同的连接物所携带抗性基因的差异选择不同 的选择培养基进行筛选。由图示和题目中提供的信息可知，同 时应用EcoRI和BamHI进行酶切可有效防止酶切后产生黏性末 端发生任意连接。
生 物
选修部分
遗传与基因工程
第三章
本 章 综 合 小 结
课标渗透
本章的细胞质遗传、基因工程、基因诊断与治疗、人类基 因组计划等与生产、生活实践与遗传变异等联系都非常密切， 都是很好的命题切入点。 细胞质遗传和细胞核遗传有关的实验设计，以及运用基因 工程培育转基因植物、转基因动物有关的实验设计，要高度重 视，加强有关的实验设计能力的培养。
例 右图为某种质粒表达载体简图， 小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、 BamHI的酶切位点，ampR为青霉素抗性 基因，tctR为四环素抗性基因，P为启动 子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有 包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。 (1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶 切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片 段之间连接形成的产物有 、 、 三种。
(1)目的基因—载体连接物 基因—目的基因连接物 分离纯化 (2)载体—载体连接物 体—载体连接物
载体—载体连接物
目的
目的基因—载体连接物、载
(3)与RNA聚合酶识别的结合位点 (4)EcoRI和BamHI
mRNA