丙氨酸氨基转移酶IFCC法检测试剂中加入 5’
健康人群丙氨酸氨基转移酶及天门冬氨酸氨基转移酶参考区间初步调查
健康人群丙氨酸氨基转移酶及天门冬氨酸氨基转移酶参考区间初步调查杨宏云;李海霞;王学晶;徐国宾【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2010(025)010【摘要】目的建立含5′-磷酸吡哆醛(PLP)的试剂测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT) 和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)催化活性浓度的参考区间,并与不含PLP试剂方法的参考区间作比较.方法采用国际临床化学联合会(IFCC)推荐方法测定3 249名健康人血清ALT和AST,试剂采用罗氏公司试剂,分别用罗氏公司cfas定标液中加PLP 及不加PLP的标准液进行定标.结果加入PLP的试剂测定健康人血清ALT、AST 的结果与不加PLP试剂的测定结果有明显差异(P<0.000 1).健康人群血清ALT、AST测定值男、女性之间有明显差异(P<0.000 1).如以含PLP试剂检测值的95%分位作为参考值上限时,ALT为男性55 IU/L、女性36 IU/L;AST为男性42 IU/L、女性33 IU/L.如以不含PLP试剂检测值的95%分位作为参考值上限时,ALT为男性50 IU/L、女性32 IU/L;AST为男性35 IU/L、女性28 IU/L.二者均有随年龄升高的趋势.结论含PLP的ALT和AST试剂测定健康人ALT和AST活性升高.PLP能有效地激活ALT和AST活性,用含PLP的试剂测定ALT、AST活性可准确反映患者血液中ALT、AST的实际含量.推荐临床用含PLP的试剂作为测定ALT、AST的常规方法.【总页数】4页(P761-764)【作者】杨宏云;李海霞;王学晶;徐国宾【作者单位】北京大学第一医院检验科,北京,100034;北京大学第一医院检验科,北京,100034;北京大学第一医院检验科,北京,100034;北京大学第一医院检验科,北京,100034【正文语种】中文【中图分类】Q555【相关文献】1.乌鲁木齐市汉族健康人群丙氨酸氨基转移酶及天门冬氨酸氨基转移酶参考区间的初步调查 [J], 刘萍丽;张峰波;朱有森2.西双版纳州健康人群血清丙氨酸氨基转移酶参考区间调查 [J], 王坤英;刘平华;杨玲;丁进芳;韩平治3.昆明地区健康成人血清丙氨酸氨基转移酶及天门冬氨酸氨基转移酶参考区间调查[J], 尹利民;贾蔚;饶迪;胡大春4.入伍新兵体检人群丙氨酸氨基转移酶参考区间的建立 [J], 秦晓燕;王朝鑫5.表观健康人群血清胱抑素C参考区间的初步调查 [J], 万晓华;刘向祎;文江平;郭拥军;杨本善因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
血清丙氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定
血清丙氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定1.实验原理国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。
ALTL-丙氨酸+ -酮戊二酸丙酮酸+ L-谷氨酸LDH（乳酸脱氢酶）丙酮酸+ NADH + H+L-乳酸+ NAD+ + H2O加入磷酸吡哆醛（P-5-P）是为了稳定ALT活性，避免样品中因内源性磷酸吡哆醛不足造成测定结果假性偏低。
(如心肌梗死、肝病和特别监护病人的结果)[1]2. 标本：2.1 病人准备：12小时禁食。
2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆。
3. 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<10%；15～25℃保存：<17%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定4周。
4. 标本运输：常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。
6. 实验材料6.1 试剂申能ALT测定试剂盒（货号：141 27017170 1 试剂 1 6×64ml 试剂2 6×16ml）6.1.1 试剂组成试剂1（R1）：Tris缓冲液pH 7.5 100mmol/LL-丙氨酸500mmol/LLDH（乳酸脱氢酶）≥1200U/L试剂2（R2）：a-酮戊二酸15mmol/LNADH 0.18mmol/L磷酸吡哆醛试剂：Good’s 缓冲液pH9.6 0.7mmol/L磷酸吡哆醛0.09mmol/L6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。
不可入口！避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂。
6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
血清丙氨酸氨基转移酶测定
血清丙氨酸氨基转移酶测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 实验原理本试剂以国际临床化学会(IFCC)推荐方法为基础，所采用的反应原理与反应式如下。
⑴样本中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）催化丙氨酸的氨基转换至α-氧代戊二酸，生成丙酮酸和L谷氨酸。
⑵丙酮酸被试剂中的乳酸脱氢酶（LDH）还原为L-乳酸的同时还原型辅酶I（NADH+ H+）被氧化为辅酶I（NAD+），而使波长340nm处的吸光度值下降。
通过对波长340nm处吸光度值的下降速率进行监测，即可测得样本中丙氨酸氨基转移酶（ALT）的活性。
(3)样本中内源性丙酮酸的干扰，可由试剂中的乳酸脱氢酶（LDH）在测定的延迟时间内快速、完全地消除，不会对测定产生干扰。
ALTL-丙氨酸 + -酮戊二酸丙酮酸 + L-谷LDH（乳酸脱氢酶）氨酸丙酮酸+ NADH + H+L-乳酸 + NAD+ + H2O3 标本3.1病人准备：12小时禁食。
3.2 类型：血清。
3.3. 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<10%；15～25℃保存：<17%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定4周。
3.4 标本运输：常温条件下保存运输。
3.5 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。
4 实验材料4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司ALT试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成试剂1 L丙氨酸 600mmol/L 乳酸脱氢酶＞1820U/L（R1）：NADH 0.26mmol/LTris缓冲液 80mmol/L试剂2（R2）：Tris缓冲液80mmol/L α氧代戊二酸36mmol/LEDTA 5.0mmol/4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月。
4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
血清丙氨酸氨基转移酶测定
血清丙氨酸氨基转移酶测定1.实验原理国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。
ALTL-丙氨酸+ -酮戊二酸丙酮LDH（乳酸脱氢酶）酸+ L-谷氨酸丙酮酸+ NADH + H+L-乳酸+ NAD++ H2O 上述偶联反应中，NADH的氧化速率与`样品中ALT的活力成正比,在340nm处NADH呈现特性吸收峰，而NAD+则没有。
因此，可在340nm监测吸光度的下降速率（-△A/min）,计算出ALT的活性单位。
2. 标本：2.1 病人准备：12小时禁食。
2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆。
3. 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<10%；15～25℃保存：<17%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定4周。
4. 标本运输：常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。
6. 实验材料6.1 试剂欧泰克ALT测定试剂盒6.1.1 试剂组成Tris缓冲液pH 7.4 80mmol/LL-丙氨酸800mmol/LLDH（乳酸脱氢酶）≥1200U/La-酮戊二酸18mmol/LNADH 0.18mmol/L6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。
不可入口！避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂。
6.2 校准品：使用罗氏公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
7. 仪器：日立7060生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验日立7060生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验日立7060生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
丙氨酸氨基转移酶(ALT GPT)测定试剂盒(丙氨酸底物-丙酮酸氧化酶法)产品技术要求瑞尔达
丙氨酸氨基转移酶(ALT/GPT)测定试剂盒（丙氨酸底物-丙酮酸氧化酶法）
适用范围：该试剂用于体外定量测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的活性。
1.1 包装规格：
试剂1（R1）：50ml×2 试剂2（R2）：2.5ml×2 (500测试)；
试剂1（R1）：50ml×1 试剂2（R2）：2.5ml×1 (250测试)。
1．试剂空白：用蒸馏水调零，试剂空白吸光度值≤0.15。
2．线性区间：
a)测量范围[10,200]U/L,相关系数r≥0.990；
b)[10,30）U/L,测量浓度值绝对线性偏差不超过±5U/L；[30,200]U/L,测量浓度值相对线性偏差不超过12%。
3．准确度：型式检验：回收率90%～110%
4．分析灵敏度：丙氨酸氨基转移酶47U／L时，10-13min 之间,每分钟吸光度（△A/min）≥0.03。
5. 精密度：
a)重复性：ＣＶ≤10%。
b)批间差：连续三批试剂盒测定同份血清样本，其测定值的批间差≤12%。
丙氨酸氨基转移酶测定标准操作规程
丙氨酸氨基转移酶测定标准操作规程.检验原理：（酶偶联速率法）L-丙氨酸和α-酮戊二酸在丙氨酸氨基转移酶的作用下生成丙酮酸和L-谷氨酸。
丙酮酸在乳酸脱氢酶（LDH）作用下生成L-乳酸，同时还原型辅酶I（NADH）被氧化为氧化型辅酶I（NAD、在340nm处测得吸光度呈下降趋势与ALT活性成正比。
根据NADH吸光度下降程度计算丙氨酸氨基转移酶的活力单位。
试剂内不含磷酸弼哆醛。
1.-丙氨酸+Q-酮戊二酸一生→丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H，侬->L一乳酸+MUT3.2225828°C48-20°C保存7天，样本不可反复冻融！4.检验方法；仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：6 .检验结果的解释：6.1 样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W∕V）的氯化钠溶液稀释样本。
6 .2.单位换算：ukat∕L=U∕L×16.67×10^37 .检验方法的局限性7.1 结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7. 2若试剂浑浊，或以水空白在34Onnl处吸光度小于LOOO时不能使用。
8.试剂性能指标8.1 试剂外观：无色或淡黄色透明液体，无悬浮物及沉淀。
8. 2装量：不低于标识值。
8. 3试剂空白吸光度：在34Onnl处，光径ICnI时，空白吸光度A21.0008 .4试剂空白吸光度变化率：在34Onm处，光径ICm时，Z∖A∕minW0.0049 .5线性区间：试剂的线性区间为[10-500]U∕L,在此线性区间内：a)线性相关系数r应不小于0.9900；b)[10-50]U/L区间内，线性绝对偏差不超过±5U/L；(50-500)U/L 区间内,线性相对偏差不超过±10%。
8. 6准确度：相对偏差应不大于±15机8. 7分析灵敏度：在34Onrn处，光径ICnl时，测量已知浓度的样品后换算成W/L的丙氨酸氨基转移酶时，吸光度变化AAU∕L∕min22XIO-48. 8批内精密度：CV≤5%8. 9批间精密度:R≤10%8. 10稳定性：(2-8)C下，原包装存放的试剂有效期为12个月.取到期后一个月的试剂进行测试，应满足1-8的要求。
ifcc参考方法
ifcc参考方法
IFCC参考方法是一种常用的血清学检测方法，用于测定人体血液中的生化指标。
IFCC是国际临床化学和实验室医学联合会的缩写，该方法是由该组织制定的。
IFCC参考方法的优点是准确性高、重复性好、稳定性强，因此被广泛应用于临床医学、生物化学、药学等领域。
IFCC参考方法的原理是利用酶促反应测定血液中的生化指标。
酶促反应是指酶催化下的化学反应，通过测定反应产物的浓度来确定血液中生化指标的含量。
IFCC参考方法中常用的酶包括乳酸脱氢酶、肌酸激酶、丙氨酸氨基转移酶等。
这些酶在特定条件下能够催化血液中的生化反应，从而产生反应产物，通过测定反应产物的浓度来确定血液中生化指标的含量。
IFCC参考方法的应用范围非常广泛，包括血糖、肝功能、肾功能、心肌酶谱等多个方面。
其中，血糖是IFCC参考方法中最常用的指标之一。
血糖是人体内的一种重要能量来源，IFCC参考方法可以准确测定血糖的含量，从而帮助医生诊断糖尿病、低血糖等疾病。
除了血糖外，IFCC参考方法还可以测定肝功能指标，如谷丙转氨酶、谷草转氨酶等。
这些指标可以反映肝脏的健康状况，帮助医生诊断肝炎、肝硬化等疾病。
IFCC参考方法还可以测定肾功能指标，如肌酐、尿素氮等。
这些指标可以反映肾脏的健康状况，帮助医生诊断肾炎、肾衰竭等疾病。
IFCC参考方法是一种准确、可靠的血清学检测方法，被广泛应用于临床医学、生物化学、药学等领域。
通过IFCC参考方法可以测定血液中的生化指标，帮助医生诊断疾病、制定治疗方案，对于提高人们的健康水平具有重要意义。
丙氨酸氨基转移酶测定方法操作规程
丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定方法操作规程【产品名称】通用名称：丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定试剂盒（IFCC法）【预期用途】该试剂盒采用IFCC法，用于体外定量测定人血清或肝素血浆中丙氨酸氨基转移酶的活力。
【检验原理】在ALT催化下，从丙氨酸转移到2个氨基到α-酮戊二酸上，生成产物谷氨酸和丙酮酸。
后者通过乳酸脱氢酶催化下转变成乳酸，在340nm波长条件下检测到NADH吸光度下降速率，与ALT的活力成比例。
L-ALT丙酮酸+ L-谷氨酸+LDH L-乳酸+NAD++H2O【主要组成成份】R1：Tris缓冲液150mmol/LL-丙氨酸750 mmol/L乳酸脱氢酶（LDH） 1200U/LNADH 0.4mmol/LR2：α-酮戊二酸90mmol/LNADH 0.9mmol/L*不同批号试剂盒各组分请勿混用。
【储存条件与有效期】未开启的试剂盒在2℃~8℃保存有效期为一年。
试剂开瓶后应避光保存，在2℃~8℃可稳定28天。
试剂不可冰冻。
【适用仪器】迈瑞BS系列全自动生化分析仪、日立7180型全自动生化分析仪、日立7060型全自动生化分析仪、日立7600P自动生化分析仪、奥林巴斯AU400型全自动生化分析仪、奥林巴斯AU2700型全自动生化分析仪、贝克曼库尔特AU680型全自动生化分析仪。
若需自动生化分析仪应用参数，请随时和公司联系。
建议用户在不同仪器上使用本产品时，根据实验室情况进行验证。
【样本要求】新鲜血清或肝素血浆样本，采集后及时测定，应避免污染。
【检验方法】试剂准备R1：即用液体试剂R2：即用液体试剂测定条件波长340nm温度37℃分析类型动力学法反应方向下降反应操作步骤* ΔA/min=ΔA/min样本管—ΔA/min空白管* 试剂和样本量可根据不同生化分析仪要求按比例适当增减。
校准校准品类型S1：生理盐水S2：迈瑞配套校准品推荐进行2点线性校准校准周期和要求（包括但不限于以下情况）更换试剂批号时仪器关键零部件更换时室内质控失效时质控每批样品检测时，建议使用迈瑞公司提供的配套质控品进行内部质量控制。
入伍新兵体检人群丙氨酸氨基转移酶参考区间的建立
入伍新兵体检人群丙氨酸氨基转移酶参考区间的建立秦晓燕;王朝鑫【期刊名称】《实用医药杂志》【年(卷),期】2018(035)001【总页数】2页(P57-58)【关键词】参考区间;丙氨酸氨基转移酶;行业标准【作者】秦晓燕;王朝鑫【作者单位】467000 河南平顶山,解放军152医院;467000 河南平顶山,解放军152医院【正文语种】中文【中图分类】R446.1丙氨酸氨基转移酶（almanine aminotransferase，ALT）是检测肝细胞损伤的传统指标［1］。
国际临床化学联合会（IFCC）建议各实验室应建立自己的参考区间范围［2］。
我国颁布的参考区间行业标准（WS/T404.1-2012）中ALT项目参考区间为男性9～50 U/L，女 7～40 U/L［3］。
笔者所在科室从体检健康人群中选取男女各20例验证，40个数据中有1例在参考范围之外，验证通过。
行业标准未对年龄进行分组，该科室每年有大量新兵入伍体检，年龄集中在18～25岁男性，针对这一特定人群，尝试建立更适合的参考区间，并验证行业标准在笔者所在医院新兵体检人群中的适用性。
1 资料与方法1.1 一般资料样本来自新兵入伍健康体检者，所有人员经过B超、心电图、透视、内科外科等检查排除消化系统疾病、急慢性感染、肾病、代谢和营养疾病、风湿性疾病、血液系统疾病等，乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）阴性、乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）阴性、丙型肝炎病毒抗体（抗HCV）阴性。
该次体检年龄最小18岁，最大25岁，主要以20～21岁为主。
1.2方法1.2.1 仪器与试剂采用罗氏Modular PPI全自动生化分析系统，试剂（不含磷酸吡哆醛P-5-P）和校准品均为罗氏公司产品，室内质控品采用罗氏正常值和病理值两个浓度值进行不精密度监测，参加室间质评监测不准确度，成绩合格。
实验室固定操作人员，严格按照要求进行操作。
1.2.2 标本采集取血时间为早上 7：30至9：30，空腹，坐姿肘静脉采血。
迈瑞生化项目SOP文件
丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定方法操作规程【产品名称】通用名称：丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定试剂盒（IFCC法）【预期用途】该试剂盒采用IFCC法，用于体外定量测定人血清或肝素血浆中丙氨酸氨基转移酶的活力。
【检验原理】在ALT催化下，从丙氨酸转移到2个氨基到α-酮戊二酸上，生成产物谷氨酸和丙酮酸。
后者通过乳酸脱氢酶催化下转变成乳酸，在340nm波长条件下检测到NADH吸光度下降速率，与ALT的活力成比例。
L-丙氨酸+α-酮戊二酸丙酮酸+ L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H+L-乳酸+NAD++H2O【主要组成成份】R1：Tris缓冲液150mmol/LL-丙氨酸750 mmol/L乳酸脱氢酶（LDH） 1200U/LNADH 0.4mmol/LR2：α-酮戊二酸90mmol/LNADH 0.9mmol/L*不同批号试剂盒各组分请勿混用。
【储存条件与有效期】未开启的试剂盒在2℃~8℃保存有效期为一年。
试剂开瓶后应避光保存，在2℃~8℃可稳定28天。
试剂不可冰冻。
【适用仪器】迈瑞BS系列全自动生化分析仪、日立7180型全自动生化分析仪、日立7060型全自动生化分析仪、日立7600P自动生化分析仪、奥林巴斯AU400型全自动生化分析仪、奥林巴斯AU2700型全自动生化分析仪、贝克曼库尔特AU680型全自动生化分析仪。
若需自动生化分析仪应用参数，请随时和公司联系。
建议用户在不同仪器上使用本产品时，根据实验室情况进行验证。
【样本要求】新鲜血清或肝素血浆样本，采集后及时测定，应避免污染。
【检验方法】试剂准备R1：即用液体试剂R2：即用液体试剂测定条件波长340nm温度37℃分析类型动力学法反应方向下降反应操作步骤* ΔA/min=ΔA/min样本管—ΔA/min空白管* 试剂和样本量可根据不同生化分析仪要求按比例适当增减。
校准校准品类型S1：生理盐水S2：迈瑞配套校准品推荐进行2点线性校准校准周期和要求（包括但不限于以下情况）更换试剂批号时仪器关键零部件更换时室内质控失效时质控每批样品检测时，建议使用迈瑞公司提供的配套质控品进行内部质量控制。
丙氨酸氨基转移酶检测试剂条干化学法说明书
丙氨酸氨基转移酶检测试剂条（干化学法）说明书【产品名称】通用名称：丙氨酸氨基转移酶检测试剂条（干化学法）英文名称：ALT Test Strip（Dry Chemistry Method）【包装规格】50人份/筒【预期用途】ALT是一种与氨基酸代谢有关的酶，广泛存在于正常人体组织、器官内，其主要来源是肝脏，并且主要和肝脏疾病密切相关。
ALT的升高往往指示心肌梗塞、肝病、肌营养失调和其它内脏损伤。
血液中ALT的升高对于肝病是一种非常灵敏的指标，并且与其它的疾病相关。
自从1955年以来有许多方法用于检测ALT，最主要的为：紫外法和比色法。
丙氨酸氨基转移酶检测试剂条（干化学法）是一种无需分光光度计和比色仪的快速检测试剂条，使用非常简单，而准确度达到临床可接受的准确性要求。
用于定性检测人全血/血浆/血清中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）、或称为谷丙转氨酶（SGPT或者GPT）。
【检验原理】丙氨酸氨基转移酶检测试剂条（干化学法）包含固定在塑料片上用于分离全血的膜和一个特别的ALT多层复合反应膜。
当检测含有ALT的全血品时，血浆就会被从全血中分离出来并渗透到反应膜上；对于血浆和血清样本则也可以直接加样到反应孔上。
依据样本中的不同ALT浓度，反应孔就会很快变成浅蓝至深蓝色。
本试剂条被设计成通过将试剂条上最终颜色与比色卡对比，能半定量地检测出所测样品中转氨酶之含量，从而确定结果阴阳性。
【主要组成成份】蛋白质稳定剂、过氧化物酶、缓冲溶解、指示剂、表面活性剂、ALT氧化酶、其它活性物质。
【储存条件及有效期】l应置于2-8℃、避光干燥处密闭冷藏保存；l不得冷冻或置于25℃以上保存；l有效期：18个月；l过期的试剂条不可再使用。
【样本要求】本试剂条最适宜的检测样本为采自指尖或耳垂等末梢的新鲜全血作为检测样本。
采用静脉血时，应用新鲜的全血，可使用枸橼酸盐、肝素和乙二胺四乙酸盐等抗凝剂。
不得使用含氟防腐剂。
室温保存的样本应在8小时内进行检测；于2-8℃保存之样品，应在48小时内进行检测。
血清丙氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定
血清丙氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定1.实验原理国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。
ALTL-丙氨酸+ -酮戊二酸丙酮酸+ L-LDH（乳酸脱氢酶）谷氨酸丙酮酸+ NADH + H+L-乳酸+ NAD+ + H2O 加入磷酸吡哆醛（P-5-P）是为了稳定ALT活性，避免样品中因内源性磷酸吡哆醛不足造成测定结果假性偏低。
(如心肌梗死、肝病和特别监护病人的结果)[1]2. 标本：2.1 病人准备：12小时禁食。
2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆。
3. 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<10%；15～25℃保存：<17%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定4周。
4. 标本运输：常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。
6. 实验材料6.1 试剂奥林巴斯ALT测定试剂盒试剂1 + 试剂26.1.1 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.3变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.4 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。
不可入口！避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂。
6.2 校准品：使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
7. 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
丙氨酸氨基转移酶试剂盒(丙氨酸底物法)
丙氨酸氨基转移酶试剂盒（丙氨酸底物法）标准化操作规程1 目的规范实验室操作，保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。
2 授权操作人经培训且考核通过的实验室检验人员。
3 适用范围：本试剂适用于体外定量检测人血清或血浆中丙氨酸氨基转移酶（ALT）的活力。
4 检验方法本试剂反应原理采用国际临床化学联合会（IFCC）推荐的方法。
5 检验原理在丙氨酸氨基转移酶的作用下，L-丙氨酸与α-酮戊二酸反应，生成丙酮酸和L-谷氨酸。
丙酮酸被试剂中的乳酸脱氢酶（LDH）还原为L-乳酸，同时NADH 被氧化为NAD＋，使340nm处的光吸收值下降，通过监测340nm处光吸收值下降的速率，可以测定丙氨酸氨基转移酶活力。
样品中内源性丙酮酸的干扰可由试剂中LDH在反应延迟时间内消除，不会干扰测定。
ALTL-丙氨酸+α-酮戊二酸丙酮酸+L-谷氨酸LDH丙酮酸+NADH L-乳酸+NAD+6 检验标本要求6.1 样本为血清。
6.2 不得使用溶血或被污染的样本。
6.3 样本在2℃~8℃条件下可保存7天、室温条件下可保存1天。
7 试剂及配套品7.1试剂来源长春迪瑞医疗科技股份有限公司丙氨酸氨基转移酶试剂盒7.2试剂组成7.3试剂的稳定性与贮存：7.3.1 试剂在2℃~8℃条件下，干燥、避光、密封贮存，有效期为18个月。
7.3.2 试剂开封后在2℃~8℃条件下可稳定30天，试剂不可冷冻。
7.3.3 反应液在2℃~8℃可稳定30天。
7.4试剂的变质指示：若试剂混浊，或在340 nm处试剂空白吸光度值低于1.000A 时，不能使用。
8 实验仪器及性能指标8.1实验仪器迪瑞CS系列全自动生化分析仪8.2试剂性能指标8.2.1 空白吸光度：A≥1.000。
8.2.2 空白吸光度变化率：︱△A︱/min≤0.002/min。
8.2.3 分析灵敏度：测试1U/L被测物时，吸光度变化率（△A/min）＜-0.0001。
8.2.4 线性范围：4U/L～1000U/L；线性相关系数r≥0.9900；[4，200]U/L范围内，线性绝对偏差应不超过±40U/L；（200，1000]范围内，线性相对偏差不超过±15％。
第24章 连续监测法测定酶活性浓度
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第二十四章 连续监测法测定酶活性浓度
（三）方法学评价
CNP的pKa为5.5，与NAG的最适pH一直，且有足够大的摩尔 消光系数，可以直接速率法分析，无需样品空白，但底物溶解 性差，稳定性不够，非酶水解较明显。
pH 7.0时CNP离子化率97%，pH 5.0时只有25%左右，因此吸 光度约为PNP法的1/4，而且离子化程度受pH影响较大，建议 在临床使用中，实际测定摩尔吸光系数，计算分析仪的K值， 提高检测结果的准确性。
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第二十四章 连续监测法测定酶活性浓度
（二）常用方法
GPDA催化底物甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺水解，生成甘氨 酰脯氨酸和黄色的对硝基苯胺，后者在405nm波长下吸光度 的升高，吸光度升高速率与GPDA活性成正比。
甘氨酰脯氨酰对硝基苯 胺 GPDA 甘氨酰脯氨酸 对硝基苯胺
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第二十四章 连续监测法测定酶活性浓度
一 碱性磷酸酶測定 二 γ-谷氨酰基转移酶测定 三 淀粉酶测定 四 α-岩藻糖苷酶测定 五 N-乙酰氨基葡萄糖苷酶测定 六 甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定
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第二十四章 连续监测法测定酶活性浓度
一、碱性磷酸酶測定 （alkaline phosphatase，ALP）
第二十四章 连续监测法测定酶活性浓度
（三）方法学评价
连续监测法具有简便快速，重复性好，线性范围宽，敏感 性高，结果准确等优点。底物稳定易溶，检测试剂为液体双 试剂，没有非酶水解现象，使用非常方便。
以人工合成的麦芽寡糖苷为底物的测定方法，例如对硝基 酚麦芽庚苷法，目前最为常用。
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第二十四章 连续监测法测定酶活性浓度
丙氨酸氨基转移 酶
丙氨酸氨基转移酶丙氨酸氨基转移酶（Alanine Aminotransferase，简称ALT）是一种重要的酶类蛋白质，广泛存在于人体的肝脏、肌肉和其他组织中。
它在体内具有重要的生物学功能，参与氨基酸代谢和葡萄糖代谢，对维持人体内氨基酸平衡和能量供应起着关键的调节作用。
丙氨酸氨基转移酶在氨基酸代谢中发挥着重要的作用。
氨基酸是构成蛋白质的基本单位，也是构成人体组织和器官的重要成分。
丙氨酸氨基转移酶能够催化丙氨酸和α-酮戊二酸之间的转化反应，将丙氨酸转化为丙酮酸，同时将α-酮戊二酸转化为谷氨酸。
这个反应不仅促进了氨基酸的代谢，还能够生成谷氨酸，进一步参与尿素循环和葡萄糖生成的过程。
丙氨酸氨基转移酶在葡萄糖代谢中也起着重要的调节作用。
葡萄糖是人体能量供应的主要来源，而丙氨酸氨基转移酶能够催化丙氨酸和α-酮戊二酸之间的转化反应，进一步将丙氨酸转化为谷氨酸，同时将α-酮戊二酸转化为丙酮酸。
谷氨酸可以通过肝脏进一步转化为葡萄糖，提供给身体各个组织和器官使用。
这一反应对于维持血糖水平的平衡至关重要，保证了人体正常的能量供应。
丙氨酸氨基转移酶在临床医学中也具有重要的临床应用价值。
由于丙氨酸氨基转移酶主要存在于肝脏细胞中，因此丙氨酸氨基转移酶的活性可以反映肝脏功能的变化。
当肝脏受到损伤或疾病侵袭时，丙氨酸氨基转移酶会释放到血液中，导致血清ALT水平升高。
因此，通过检测血清ALT水平，可以对肝脏的疾病进行早期诊断和监测，如肝炎、肝硬化、脂肪肝等。
丙氨酸氨基转移酶作为一种重要的酶类蛋白质，在人体内发挥着重要的生物学功能。
它参与氨基酸代谢和葡萄糖代谢，对维持人体内氨基酸平衡和能量供应起着关键的调节作用。
丙氨酸氨基转移酶的活性变化可以反映肝脏功能的变化，临床上可以用于肝脏疾病的早期诊断、监测和评估。
因此，深入研究丙氨酸氨基转移酶的结构和功能，对于揭示其作用机制、开发相关的生物医学应用具有重要意义，对于促进人类健康和疾病治疗具有重要的临床价值。
检验科生化丙氨酸氨基转移酶ALT测定的标准操作规程
丙氨酸氨基转移酶测定的标准操作规程【目的】体外检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT ）的含量。
【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字:室负责人、科主任。
【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、原理谷丙转氨酶催化L-丙氨酸的氨基转移，生成丙酮酸。
丙酮酸与NADH在LDH的催化下反应生成乳酸和NAD+。
NADH在340nm处有特异吸收峰，其被氧化的速率与血清中ALT的活性成正比，在340nm处测定NADH下降速率，即可测出ALT活性。
ALTL-丙氨酸+ a-酮戊二酸丙酮酸+ L-谷氨酸LDHNADH + 丙酮酸+ H+L-乳酸+ NAD+一、试剂1.试剂本科使用上海科华生物工程股份有限公司ALT试剂盒，为液体双试剂，各组分如下:2.校准血清使用上海科华生物工程股份有限公司提供的多项校准血清或采用因数法。
按照说明书提供的样本和试剂比例计算理论因数。
校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标。
全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。
三、操作样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。
本法为IFCC法。
参数见后附，附录A。
试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。
5’-磷酸吡哆醛对血清丙氨酸氨基转移酶活性测定的影响 朱柏林
5’-磷酸吡哆醛对血清丙氨酸氨基转移酶活性测定的影响朱柏林发表时间：2012-08-14T10:09:01.530Z 来源：《中外健康文摘》2012年第19期供稿作者：朱柏林[导读] 因而各医疗单位应制定严格的用血计划，严格掌握输血适应症，尽量减少不必要的输血。
朱柏林 (江西抚州市中医院检验科江西抚州 344000)【中图分类号】R446.11+2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）19-0083-02【摘要】目的研究丙氨酸氨基转移酶（Alanine Aminotraasferase,ALT）检测试剂中 5’- 磷酸吡哆醛（Pyrldoxal - 5’-phosphate,PLP ）的添加对血清ALT活性测定的影响。
方法以山东潍坊康华生物技术有限公司生产的丙氨酸氨基转移酶试剂（按照IFCC推荐方法配制，不含PLP）和在该品牌试剂中加入5’-磷酸吡哆醛溶液 ,分别用这两种试剂测定相同的新鲜临床标本280例 ,并对检测结果进行统计学比较。
结果使用含PLP的IFCC配方试剂较不含 PLP试剂的检测结果明显增高。
结论康华公司生产的丙氨酸氨基转移酶试剂添加PLP比较不添加PLP ALT活性增加近5%-40%，且两种试剂的ALT检测结果不能通过简单系数实现转换。
【关键词】丙氨酸氨基转移酶 5’-磷酸吡哆醛 IFCC推荐方法Effection of Pyridoxal- 5 ’- phosphate on Determination of Alanine Aminotransferase activities【Abstract】Objective To study the effection of Pyridoxal-5 -phosphate(PLP) on detection of Alanine Aminotransferase(ALT) activites. Methods According to IFCC recommendatory methods,reagents were both prepared,ALT were detevted and compared a series.Results The level of ALT is obviously higher in group with PLP reagent than the other group(reagent without PLP).Conclusion For PLP are different in different popwlation,the regent of IFCC recommendatory methods increase 5%-40% than the import regent, so reagents ALT results of two methods can not be converted by using simple coefficient.【Key words】Alanine Aminotransferase Pyridoxal- 5’-phosphate IFCC recommendatory methods丙氨酸氨基转移酶（ALT ）是评价肝功能最常用的指标之一，其结果的准确性对疾病的诊断和疗效判断极其重要。
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【摘要】目的评价在试剂中加有5’-磷酸吡哆醛的丙氨酸氨基转移酶(alt)试剂。
方法利用日立u-3310紫外分光光度计、温度控制仪和磁力搅拌仪，于37℃，340nm波长，速率法，使用加5’-磷酸吡哆醛和未加5’-磷酸吡哆醛alt试剂，测试临床标本，观察两种alt试剂的检测结果相关性。
结果加5’-磷酸吡哆醛和未加5’-磷酸吡哆醛的alt试剂测试临床标本结果比较，回归方程为y=0.8629x-2.4019,r2=0.9602。
结论加5’-磷酸吡哆醛alt试剂与未加5’-磷酸吡哆醛alt试剂有较好的相关性，且加有5’-磷酸吡哆醛alt试剂测试结果比未加5’-磷酸吡哆醛alt试剂测试结果约高14%。
【关键词】丙氨酸氨基转移酶;5’-磷酸吡哆醛;相关性
吡哆醇、吡哆醛和吡哆胺是维生素b6的三种形式，它们在体内可以互相转化。
维生素 b6在体内经磷酸化作用转变为相应的磷酸酯，即维生素b6的辅酶形式：磷酸吡哆醛、磷酸吡哆胺，它们之间也可以相互转变，均为活性型。
作为转氨基的辅酶，磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺在氨基酸代谢中非常重要，是氨基酸代谢中的转氨酶及脱羧酶的辅酶，通过两者互变起着传递氨基的作用。
血清中的alt必须在酶和辅酶同时存在时才表现出最大活力，磷酸吡哆醛为其辅酶，在反应中起到传递氨基作用，测定alt时，加入磷酸吡哆醛可提高酶的活性。
本文将讨论在测定血清中丙氨酸氨基转移酶时，在检测试剂中加入5’-磷酸吡哆醛和不加5’-磷酸吡哆醛时两种检测结果的关系。
1 材料与方法
1.1 仪器日立u-3310紫外分光光度计，日立温度控制仪，日立磁力搅拌仪。
日立7180全自动生化分析仪。
1.2 试剂按照ifcc配置的丙氨酸氨基转移酶基础试剂，然后再配置下述两种不同配方试剂。
配方一(后面标示为alt1)：取适量基础试剂，按照ifcc推荐方法要求，在反应液中加入5’-磷酸吡哆醛溶液。
配方二(后面标示为alt2)：取与配方一相等量的基础试剂，用亚沸水代替5’-磷酸吡哆醛溶液，即在反应液中加入等量的亚沸水。
1.3 检测样品临床新鲜冰冻血清80例，其中健康人群50例，来自本院健康查体人员;肝病20例、肾病10例(含透析病人3例)均为本院住院患者。
1.4 测定原理 l-丙氨酸+2-酮戊二酸、丙氨酸氨基转移酶、丙酮酸+l-谷氨酸、丙酮酸+nadh+h+、乳酸脱氢酶、乳酸+nad+。
1.5 方法
1.5.1 常规开机，做好仪器日常维护及实验前质控工作。
1.5.2 主要分析参数设置测定方法：速率法;反应温度：37℃;光径：10mm;反应时间：10min;孵育时间：5min;延迟时间：1.5min;测定间隔：3min;检测波长：340nm;理论因素：-1905;读数(测定点)：≥6;反应液/样品/起始液：2ml/0.2ml/0.2ml。